一种青蒿素衍生物的皮内给药微针制剂的制备方法
【专利摘要】本发明公开一种青蒿素衍生物的皮内给药微针制剂的制备方法。所述制备方法是将青蒿素衍生物的乙醇或丙酮溶液分散于透明质酸钠水溶液中，使其形成均匀稳定的乳液，其中所述青蒿素衍生物的乙醇或丙酮溶液占所述透明质酸钠水溶液的体积比为10％-50％；将所述乳液加入到微针模具中并进行干燥，之后加入背衬溶液，背衬溶液干燥后即制成皮内给药微针，所述皮内给药微针可以形成微针阵列。所述制备方法使青蒿素衍生物能够制成皮内给药微针制剂，该制剂可减少青蒿素衍生物的给药次数，实现微创给药。
【专利说明】一种青蒿素衍生物的皮内给药微针制剂的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及体表给药制剂及其制备方法。更具体地，一种青蒿素衍生物的皮内给 药微针制剂的制备方法。
【背景技术】
[0002] 青蒿素是青蒿属植物中含有的一种天然成份，属于含有过氧基团的倍半萜内酯类 药物。具有高效、速效、低毒的抗疟、抗孕、抗纤维化、抗血吸虫的药理作用。易溶于丙酮、醋 酸乙酯、氯仿、苯和醋酸，溶于乙醇、甲醇和石油醚，难溶于油和水。由于青蒿素的药理价值， 现已经开发了多种半合成的青蒿素衍生物，如蒿甲醚、蒿乙醚、青蒿琥酯、双氢青蒿素等。青 蒿素衍生物不但具有良好的抗疟活性，同时具有抵抗癌症、红斑狼疮、白血病、感冒、涤虫 病、弓形虫病、黑热病等方面药理作用。由于青蒿素衍生物水溶性差，所以目前青蒿素衍生 物药物只有口服片剂和注射油剂两种剂型。青蒿素衍生物半衰期短，单次给药剂量高，需要 频繁给药，药物血药浓度的稳定性差，口服片剂和注射油剂不能改善上述用药缺陷。因此开 发可以减少给药次数，实现无痛给药，并且给药时血药浓度稳定的剂型具有广阔的应用前 旦 -5^ 〇
[0003] 皮内微针制剂及可溶解微针制剂，是指由水溶性材料或生物可溶性物质为基质制 作而成，仅在微针的针体内含有药物的微针贴片。当微针刺入皮肤后，针体会迅速或者缓慢 溶解，同时将针体中的药物释放入皮肤实现经皮给药。由于微针制剂能够延长药物的半衰 期，减少给药次数，实现微创给药，因而微针作为高效的经皮给药制药技术正受到广泛的研 究。现在常用的水溶性高分子材料主要有：羧甲纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、蚕丝蛋白、硫酸软 骨素、透明质酸钠以及多糖等材料。由于水溶性高分子材料易溶于水，难溶于有机溶剂，因 此以水溶性高分子材料为基质的微针制剂的研究，仅局限于水溶性的药物。青蒿素衍生物 难溶于水但易溶于有机溶剂，难与水溶性高分子材料混溶，因此目前还没有将青蒿素衍生 物制成微针制剂的报道。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于制备一种青蒿素衍生物的皮内给药微针制剂，通过皮肤给药， 降低给药过程中青蒿素衍生物血药浓度的波动，减少给药次数，实现微创给药。
[0005] 具体的技术方案如下：
[0006] 1)青蒿素衍生物溶于乙醇或丙酮中，制成青蒿素衍生物乙醇溶液或青蒿素衍生物 丙酮溶液；
[0007] 2)制备透明质酸钠水溶液；
[0008] 3)将所述青蒿素衍生物溶液与所述透明质酸钠水溶液混合，形成乳液，其中所 述青蒿素衍生物乙醇溶液或青蒿素衍生物丙酮溶液占透明质酸钠水溶液体积百分比为 10-50% ；
[0009] 4)将所述乳液加入到微针模具中；用施加压力或抽真空的方法使所述乳液加入 到微针模具微孔中；
[0010] 5)干燥；
[0011] 6)加入背衬溶液；
[0012] 7)干燥。
[0013] 优选地，所述青蒿素衍生物包括蒿甲醚、蒿乙醚、青蒿琥酯或双氢青蒿素。
[0014] 优选地，青蒿素衍生物乙醇溶液的浓度小于40mg/ml，青蒿素衍生物丙酮溶液小于 60mg/ml〇
[0015] 优选地，所述透明质酸钠的分子量为3000-100000Da，更优选地，所述透明质酸钠 的分子量为5000-20000Da。
[0016] 优选地，所述透明质酸钠水溶液的浓度为5-40wt%。
[0017] 优选地，用施加压力或抽真空的方法使所述乳液加入模具微孔中，从而避免所述 微针内气泡的产生，制得的高品质的微针。其中若采用施加压力的方法，所施加的压力为 0. 2-0. 6MPa ;若采用抽真空的方法，真空度要达到0. 05-0. IMPa。
[0018] 优选地，所述皮内给药微针制剂的微针长度为0. 5-1. Omm ;所述微针形成微针阵 列，位于所述背衬之上，所述微针密度为36-169针/平方厘米。
[0019] 所述背衬溶液为选自聚乙烯吡咯烷酮溶液、透明质酸钠水溶液、 Gantrez? AN-139溶液、硫酸软骨素溶液和羧甲基纤维素钠溶液的一种或多种,优选透明 质酸钠水溶液。
[0020] 优选地，聚乙烯吡咯烷酮溶液的浓度为2〇-5〇wt% ;优选地，透明质酸钠水溶液浓 度为20-50被％;优选地，〇311的2?八1丨39溶液浓度为10-30被％;优选地，硫酸软骨素 溶液浓度为2〇-5〇wt% ;优选地，羧甲基纤维素钠溶液浓度为5-lOwt%。
[0021] 优选地，所述背衬的厚度为0. 2-lmm。
[0022] 所述微针的干燥在湿度为20-40%、温度为15_25°C的条件下进行，所述干燥主要 目的是让微针内的水分、乙醇或丙酮挥发，乳液在微针模具内固化成型，所述微针干燥时间 为20-40分钟。
[0023] 所述背衬溶液的干燥在湿度为20-40%、温度为15_25°C的条件下进行，所述背衬 溶液的干燥主要目的是让所述背衬溶液内的水分挥发，所述背衬溶液在模具内固化成型， 所述背衬溶液的干燥时间为2-5小时。
[0024] 本制备方法除了用于青蒿素衍生物的制备外，还可用于制备其它不溶于水但溶于 极性有机溶剂的药物的给药微针制剂，如依托孕烯、甘草次酸。
[0025] 本发明的有益效果如下：
[0026] 本发明使不溶于水，但是溶解于极性有机溶剂的如青蒿素衍生物能够制成皮内可 溶解的给药微针制剂，施用时相对青蒿素衍生物的其他剂型的血药浓度平稳，减少给药次 数，实现微创给药。所述微针制剂的制备方法工艺简单，条件温和，不需大型仪器，易于推 广。
[0027] 除特殊说明外，溶液的浓度为质量百分比浓度。
【专利附图】
【附图说明】
[0028] 下面结合附图对本发明的【具体实施方式】作进一步详细的说明。
[0029] 图la :示出载药微针的皮内制剂贴片的主视图。
[0030] 图Ib :示出载药微针皮内制剂的侧视图的放大图。
[0031] 图2 :示出加入微量钙黄绿素的蒿甲醚皮内微针制剂施用于猪耳皮肤时，钙黄绿 素从微针内向猪耳皮肤释放。
[0032] 图3a示出蒿甲醚肌肉注射剂连续三天给药的药时曲线，其中ARM为蒿甲醚用实心 正方形表不。
[0033] 图3b示出皮内给药微针制剂连续三天给药的药时曲线，其中ARM为蒿甲醚用实心 正方形表不。
【具体实施方式】
[0034] 为了更清楚地说明本发明，下面结合优选实施例和附图对本发明做进一步的说 明。附图中相似的部件以相同的附图标记进行表示。本领域技术人员应当理解，下面所具 体描述的内容是说明性的而非限制性的，不应以此限制本发明的保护范围。
[0035] 实施例1 :皮内给药微针制剂的制备：
[0036] 1)将蒿甲醚溶于乙醇溶液中，配置浓度为20mg/ml的蒿甲醚乙醇溶液；
[0037] 2)配置分子量为3000Da、浓度为40%的透明质酸钠水溶液；
[0038] 3)将I. Oml的蒿甲醚乙醇溶液分散于I. Oml透明质酸钠水溶液中，形成均匀的乳 液；
[0039] 4)将60 ill乳液加入到微针模具中，施加压力至0. 2-0. 6MPa，将微针模具在湿度 为20-40%、温度为15-25°C的条件下干燥30分钟；其中每平方厘米内给药微针制剂含有 169个微针，微针长度为0. 65mm ;
[0040] 5)向微针模具加入背衬溶液，所述背衬溶液为浓度为50%的透明质酸钠水溶液， 在湿度为20-40%、温度为15-25°C的条件下干燥5小时，从而制得皮内给药微针制剂1。
[0041] 实施例2 :皮内给药微针制剂的制备：
[0042] 1)将蒿甲醚溶于乙醇溶液中，配置浓度为20mg/ml的蒿甲醚乙醇溶液；
[0043] 2)配置分子量lOOOOODa、浓度为5%的透明质酸钠水溶液；
[0044] 3)将0. 2ml的蒿甲醚乙醇溶液分散于I. 8ml透明质酸钠水溶液中，形成均匀的乳 液；
[0045] 4)将600 ill乳液加入到微针模具中，抽真空真至真空度为0. 05-0. IMPa，将微针 模具在湿度为20-40%、温度为15-25°C的条件下干燥30分钟；其中每平方厘米内给药微针 制剂含有169个微针，微针长度为0. 65mm ;
[0046] 5)向微针模具加入背衬溶液，所述背衬溶液为浓度为50%的透明质酸钠水溶液， 在湿度为20-40%、温度为15-25°C的条件下干燥5小时，从而制得皮内给药微针制剂2。
[0047] 实施例3 :皮内给药微针制剂的制备：
[0048] 1)将蒿甲醚溶于乙醇溶液中，配置浓度为20mg/ml的蒿甲醚乙醇溶液；
[0049] 2)配置分子量5000Da、浓度为20%的透明质酸钠水溶液；
[0050] 3)将Iml的蒿甲醚乙醇溶液分散于Iml透明质酸钠水溶液中，形成均匀的乳液；
[0051] 4)将60 ill乳液加入到微针模具中，施加压力压至0. 2-0. 6MPa，将微针模具在湿 度为20-40%、温度为15-25°C的条件下干燥30分钟；其中每平方厘米内给药微针制剂含有 169个微针，微针长度为0. 65mm ;
[0052] 5)向微针模具加入背衬溶液，所述背衬溶液为浓度为50%的透明质酸钠水溶液， 在湿度为20-40%、温度为15-25°C的条件下干燥5小时，从而制得皮内给药微针制剂3。
[0053] 实施例4 :皮内给药微针制剂的制备：
[0054] 1)配置浓度为20mg/ml的双氢青蒿素丙酮溶液；
[0055] 2)配置分子量5000Da、浓度为20%的透明质酸钠水溶液；
[0056] 3)将Iml的双氢青蒿素丙酮溶液分散于Iml透明质酸钠水溶液中，形成均匀的乳 液；
[0057] 4)将60 ill乳液加入到微针模具中，施加压力压至0? 2-0. 6MPa，将微针模具在湿 度为20-40%、温度为15-25°C的条件下干燥30分钟；其中每平方厘米内给药微针制剂含有 169个微针，微针长度为0. 65mm ;
[0058] 5)向微针模具加入背衬溶液，所述背衬溶液为浓度为50%的透明质酸钠水溶液， 在湿度为20-40%、温度为15-25°C的条件下干燥5小时，从而制得皮内给药微针制剂4。
[0059] 实施例5 :皮内给药微针制剂的制备：
[0060] 1)将钙黄绿素和蒿甲醚溶于乙醇中，制成其中钙黄绿素-蒿甲醚乙醇溶液，其中 钙黄绿素的浓度为0. 5mg/ml，蒿甲醚的浓度为20mg/ml ;
[0061] 2)将分子量5000Da的透明质酸钠溶于水中，浓度为20% ;
[0062] 3)将LOml的钙黄绿素-蒿甲醚乙醇溶液分散于LOml透明质酸钠水溶液中，形 成均匀的乳液；
[0063] 4)将60 ill乳液加入到微针模具中，抽真空真至真空度为0. 05-0. IMPa，将微针模 具在15-25°C，干燥30分钟；其中每平方厘米内给药微针制剂含有169个微针，微针长度为 0. 65mm ；
[0064] 5)向微针模具加入背衬溶液，干燥5h，从而制得皮内给药微针制剂5。
[0065] 实施例6 :微针内钙黄绿素在皮肤内的吸收
[0066] 1)将皮内给药微针制剂5施用于猪耳朵皮肤之上，作用时间1小时，移除该皮内给 药微针制剂的背衬；
[0067] 2)用激光共聚焦显微镜从皮肤表面向深处扫描直至检测不到荧光物质，结果见图 2〇
[0068] 观察结果显示，能够在深度为200-260 iim的猪耳皮肤内观察到钙黄绿素，证明皮 内给药微针制剂内的药物可释放到皮肤内。此外，200-260 ii m的作用深度，未触及神经末梢 和血管，因此属于微创无痛的给药方式。
[0069] 实施例7 :蒿甲醚血药浓度-时间曲线
[0070] 1)将上述皮内给药微针制剂3施用于15只大鼠上，大鼠分成三组，施用剂量为 3mg/kg,连续三天给药,三组大鼠属于微针给药组；
[0071] 2)同时对5只大鼠施用相同剂量的蒿甲醚注射液，连续三天给药，该组为注射给 药组；
[0072] 3)微针给药组于给药前后 0? 25、0. 5、1、2、4、6、8、12、24、24. 25、24. 50、25、26、28、 30、32、36、48、48. 25、48. 5、49、50、52、54、56、60、72、84、96、108h 割尾采血，第一组在第一天 内时间点采血，第二组在第二天时间点内采血，第三组在第三天以后的时间点采血，置于预 先加好肝素的离心管中，3000rpm离心lOmin，取上层血浆，-80°C冰冻保存；注射组于给药 前后 0? 25、0. 5、1、2、4、6、8、12、24、24. 25、24. 50、25、26、28、30、32、36、48、48. 25、48.5、49、 50、52、54、56、60、72、80h 采血。
[0073] 4)通过液质联用方法检测血液中的蒿甲醚的血液浓度。
[0074] 血药浓度的测定方法：
[0075] 色谱条件：
[0076] Hypersil (100x2. 1mm，3 ii m)，流动相甲醇（A)-IOmM 醋酸铵（B)，梯度洗脱 Omin, 80% A-20% B ；Imin, 80% A-20% B ；1. 5min,95% A-5% B ；2. 0min,95% A-5% B ；2. 5min, 80% A-20% B ;5min, 80% A-20% B ;进样量 L ;流速 0? 4mL ? min-1。
[0077] 质谱条件离子源电喷雾离子源；离子极性：正离子模式；扫描方式：t_MS2 ;检测 离子对质荷比（母离子一子离子）：ARM为316. 2115 - 163. 1115,青蒿素（内标）ART为 300. 1803 - 209. 1531 ;碰撞能量NCE分别为30eV和IOeV ;离子源温度263 °C，喷雾电压 3. OkV，鞘气 50psi ;辅助气 13psi ;
[0078] 药代动力学的处理方法：
[0079] 利用origins软件拟合两种给药方式的药代动力学曲线，并用梯形积分法计算药 时曲线下方面积得到AUC。
[0080] 统计方法：
[0081] 数据采用平均值土标准差表示，以SPSS17. 0统计分析软件进行统计处理，不同给 药方式采用单因素方差分析，P〈〇. 05为差异有统计学意义。
[0082] 试验结果见图3a、3b及表1
[0083] 表1蒿甲醚经微针或注射给药后测得的药代动力学参数
[0084]
【权利要求】
1. 一种青蒿素衍生物的皮内给药微针制剂的制备方法，其特征在于， 包括如下步骤： 1) 青蒿素衍生物溶于乙醇或丙酮中，制成青蒿素衍生物乙醇溶液或青蒿素衍生物的丙 酮溶液； 2) 制备透明质酸钠水溶液； 3) 将所述青蒿素衍生物乙醇溶液或青蒿素衍生物的丙酮溶液与所述透明质酸钠水溶 液混合形成乳液，其中所述青蒿素衍生物乙醇溶液或青蒿素衍生物丙酮溶液占透明质酸钠 水溶液体积百分比为10-50% ; 4) 将所述乳液加入到微针模具中； 5) 干燥； 6) 加入背衬溶液； 7) 干燥。
2. 根据权利要求1所述的青蒿素衍生物的皮内给药微针制剂的制备方法，其特征在 于：所述青蒿素乙醇溶液的浓度小于40mg/ml。
3. 根据权利要求1所述的青蒿素衍生物的皮内给药微针制剂的制备方法，其特征在 于：所述青蒿素丙酮溶液的浓度小于60mg/ml。
4. 根据权利要求1所述的青蒿素衍生物的皮内给药微针制剂的制备方法，其特征在 于：透明质酸钠水溶液的浓度为5-40wt%。
5. 根据权利要求1所述的青蒿素衍生物的皮内给药微针制剂的制备方法，其特征在 于：所述透明质酸钠的分子量为3000-100000Da。
6. 根据权利要求1所述的青蒿素衍生物的皮内给药微针制剂的制备方法，其特征在 于：所述透明质酸钠的分子量为5000-20000Da。
7. 根据权利要求1所述的青蒿素衍生物的皮内给药微针制剂的制备方法，其特征在 于：所述青蒿素衍生物包括蒿甲醚、蒿乙醚、青蒿琥酯或双氢青蒿素。
8. 根据权利要求1所述的青蒿素衍生物的皮内给药微针制剂的制备方法，其特征在 于：所述背衬溶液选自2〇-5〇Wt%的聚乙烯吡咯烷酮溶液、2〇-5〇 Wt%的透明质酸钠水溶 液、10-30wt %的Gantrez? AN-139溶液、20-50wt %的硫酸软骨素溶液和5-10wt %的羧甲 基纤维素钠溶液的一种或多种。
9. 根据权利要求1所述的青蒿素衍生物的皮内给药微针制剂的制备方法，其特征在 于：所述背衬溶液为20-50wt%的透明质酸钠水溶液。
10. 根据权利要求1所述的青蒿素衍生物的皮内给药微针制剂的制备方法，其特征在 于：利用施加压力或抽真空的方法使步骤3)乳液加入到微针模具微孔中；其中所述施加压 力为0· 2-0. 6MPa ;所述抽真空达到的真空度为0· 05-0. IMPa。
【文档编号】A61K31/366GK104382884SQ201410588983
【公开日】2015年3月4日 申请日期:2014年10月28日 优先权日:2014年10月28日
【发明者】高云华, 李春, 徐百 申请人:中国科学院理化技术研究所