龙血竭酚类提取物在制备治疗非酒精性脂肪肝的药物中的用途的制作方法

本发明属于药物技术领域，涉及一种龙血竭酚类提取物的医药用途，具体涉及龙血竭酚类提取物在制备保护非酒精性脂肪肝制剂中的新用途。

背景技术：

龙血竭为百合科龙血树属植物剑叶龙血树(Dracaena cochinchinensis(Lour.)S.C.Chen)的含树脂木材经提取加工制成。其性甘、咸、平，归心、肝经。具有活血散瘀、定痛止血、敛疮生肌的功效，用于跌打损伤、瘀血作痛、妇女气血凝滞、外伤出血、脓疮久不收口{国家药品标准[WS₃-082(Z-016)-99(Z)]}。现代药理研究表明，龙血竭有活血、抗炎镇痛、抗肿瘤、抗氧化、止血、抗菌等药理作用。

技术内容

本发明目的在于提供一种龙血竭酚类提取物的新用途，特别是涉及龙血竭酚类提取物在制备保护非酒精性脂肪肝制剂中的新用途。

本发明的目的是通过以下方式实现的：

龙血竭酚类提取物是一种已知的具有药物活性的物质，本发明使用的龙血竭酚类提取物制备方法可与“一种龙血竭总黄酮制备工艺及其新用途(专利号ZL 02129688.X)”的实施例制备方法一致。本发明也可以使用市售龙血竭酚类提取物，其中，龙血竭酚类提取物中含总酚以7,4’-二羟基黄酮(C₁₅H₁₀O₄)计，应为60％～85％；含7,4’-二羟基黄酮(C₁₅H₁₀O₄)应不低于0.60％；含龙血素B(C₁₈H₂₀O₅)应不低于0.50％。

本发明通过龙血竭酚类提取物对非酒精性脂肪肝小鼠肝脏指数、血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平，和病理形态学检测发现，龙血竭酚类提取物能显著降低非酒精性脂肪肝小鼠肝脏指数，血清中AST、ALT水平，说明龙血竭酚类提取物对非酒精性脂肪肝具有优异的改善效果。

因此，龙血竭酚类提取物或其可药用盐作为活性组分用于制备预防和/或治疗非酒精性脂 肪肝药物和保健食品。

龙血竭酚类提取物或其可药用盐与其他任何中药或化学药组成复方用于制备预防和/或治疗非酒精性脂肪肝药物和保健食品。

所述的药物或保健食品中龙血竭酚类提取物人日用剂量为1.6～2.0g，最优人日用剂量为1.8g。

所述的药物或保健食品采用的剂型为药学上认可的任何一种剂型，优选药物的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、口服液、悬浮剂。

与现有技术比较本发明的有益效果：本发明应用龙血竭酚类提取物预防和治疗非酒精性脂肪肝效果显著，副作用小，安全性高，为临床治疗非酒精性脂肪肝提供了一种新的选择。

附图说明

图1为龙血竭酚类提取物对非酒精性脂肪肝小鼠肝脏指数的影响。

图2为龙血竭酚类提取物对非酒精性脂肪肝小鼠血浆AST和ALT水平的影响。

图3为龙血竭酚类提取物对非酒精性脂肪肝小鼠的肝脏病理形态的影响。(200×)

具体实施方式

以下通过具体药效实验进一步说明本发明：

实验例1：龙血竭酚类提取物对非酒精性脂肪肝小鼠的保护作用

实验材料：

1、药物：

(1)受试样品名称：龙血竭酚类提取物，按照专利号ZL02129688.X中的实施例制备方法制备得到。

(2)阳性对照药：非诺贝特，法国利博福尼制药公司生产。(批号：2EZPA17200)。2、动物：SPF级昆明种小鼠模型，6-8周龄，体重18-22g，雄性；由北京大学医学部动物中心提供。

3、试剂与仪器：天冬氨酸转氨酶(AST)、谷氨酸转氨酶(ALT)试剂盒试剂盒购自美国西格玛公司。酶标仪，购自美国Molecular Devices公司。

实验方法：

将72只小鼠随机分为两组，对照组小鼠(12只)喂饲普通饲料，其余小鼠喂饲高脂饲料(60％普通饲料粉、15％猪油、10％蛋黄粉、10％奶粉、3％蔗糖、2％胆固醇、鱼肝油1mL/kg)，自由摄食、饮水。连续喂养5周后，与对照组比较，造模小鼠体脂指数、肝脏指数明显升高， 肝组织病理切片观察可见肝细胞脂肪变性。将造模小鼠60只随机分为5组，每组12只，分别为模型组、非诺贝特阳性对照组(取非诺贝特400mg，加40mL蒸馏水，溶解摇匀，质量浓度为10mg/mL)、龙血竭酚类提取物低剂量、中剂量、高剂量给药组。对照组和模型组ig生理盐水，阳性对照组ig非诺贝特0.1g/(kg·d)，龙血竭酚类提取物低剂量、中剂量、高剂量给药组分别ig相应提取物0.1g/(kg·d)、0.2g/(kg·d)0.3g/(kg·d)，给药体积0.01mL/g，连续给药4周。每天记录小鼠体质量和进食量。

所有小鼠在末次给药后，禁食不禁水12h，水合氯醛麻醉，眼球取血，3500r/min离心10min，血清于-20℃低温保存，用于检测各项生化指标。小鼠脱颈处死，剖腹，取肝脏，分别称质量，剪下一片较大肝叶置4％福尔马林固定，HE染色，切片，显微镜观察(×200)病理变化。计算肝脏指数。

肝脏指数＝肝脏湿质量/体质量

采用SPSS14.0软件对数据进行统计学描述和分析，结果以x±s表示，采用单因素方差分析(One-wayANOVA)进行多组间均数比较。

实验结果：

1、对非酒精性脂肪肝小鼠肝脏指数的影响

与对照组比较，模型组小鼠肝脏指数明显升高(P＜0.001)；与模型组比较，阳性组无显著差异；龙血竭酚类提取物给药组小鼠肝脏指数显著降低(P＜0.01、0.001、0.001)。结果见图1。

2、对非酒精性脂肪肝小鼠血清AST、ALT水平的影响

与对照组比较，模型组小鼠血清AST、ALT水平和肝脏指数明显升高(P＜0.05、0.01)；与模型组比较，阳性组小鼠AST、ALT明显降低(P＜0.05、0.001)；龙血竭酚类提取物给药组小鼠AST、ALT水平显著降低(P＜0.001)，结果见图2。

3、对非酒精性脂肪肝小鼠肝脏病理的影响

光镜观察结果显示(见图3)，模型组多数肝小叶结构轮廓消失,肝细胞形态不规则,多数肿胀,内含大空泡状脂滴把核挤到一侧,甚者相间气球样变,肝窦不清晰,部分肝细胞出现点状或片状坏死,可见炎症细胞浸润。龙血竭酚类提取物肝细胞大小均匀,形态正常,少数肝细胞肿胀或含脂滴,肝窦清晰，肝脏脂质侵润被显著改善。说明龙血竭酚类提取物对非酒精性脂肪肝具有优异的改善效果。

实验结论：

通过龙血竭酚类提取物对非酒精性脂肪肝小鼠肝脏指数、血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT) 天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平，和病理形态学检测发现，龙血竭酚类提取物和非诺贝特均能降低非酒精性脂肪肝小鼠肝脏指数、血清中AST和ALT，其中降低AST的效果龙血竭酚类提取物优于阿托伐他汀。龙血竭酚类提取物对非酒精性脂肪肝具有一定保护作用。

实施例1片剂

取龙血竭酚类提取物，加入淀粉等片剂常规辅料，研磨混合过筛，干法制粒，整粒，压制成片剂。

实施例2胶囊剂

取龙血竭酚类提取物，加入淀粉、乳糖等胶囊剂常规辅料，混匀，过筛，灌装制备成胶囊剂。

实施例3颗粒剂

取龙血竭酚类提取物，加入淀粉、糖粉、硬脂酸镁等颗粒剂常规辅料，混匀，过筛，干法制粒、，整粒制备成颗粒剂。

实施例4注射剂

取龙血竭酚类提取物，加入甘露醇、注射用水等制备注射剂的常规辅料，按照常规注射剂的生产方法制备得到注射液。