促进伤口愈合的药物、化妆用组合物和食品添加剂的制作方法

本申请大体上涉及医药、化妆和食品领域。具体地，本申请涉及异硫氰酸酯类化合物在制备促进包括溃疡性伤口在内的伤口愈合的药物、化妆用组合物或食品添加剂中的用途。
背景技术：
：番木瓜(CaricaPapayaL.)是一种热带常绿果树。番木瓜籽中所含的主要化学成分为异硫氰酸苄酯。已报道了番木瓜籽提取物中异硫氰酸苄酯的抗肿瘤用途。异硫氰酸苄酯(Benzyl-isothiocyanate，BITC)结构如式a所示：莱菔子是一味中草药，其拉丁文名:SemenRaphani，是十字花科植物萝卜的成熟种子。莱菔子常用于缓解食积气滞、脘腹胀满、嗳气、下痢后重、咳嗽痰多、喘促胸满等症状。现代生药学研究结果发现，其主要有效成分为莱菔素(Sulforaphene，简写为SFE,分子式:C6H9NOS2)，是一类异硫氰酸酯类化合物，结构如式b所示：皮肤组织的伤口愈合是极为复杂的修复过程。在正常情况下，伤口愈合的过程可以分成三个阶段：初始炎症阶段，其后紧接着是组织重塑和增殖，继而是成熟阶段。在成熟阶段中发生再上皮化、皮肤血管生成和伤口闭合。再上皮化涉及上皮组织，主要是角质形成细胞的迁移和增殖。不愈伤口最常见于外伤伤口，手术创伤伤口，患有糖尿 病、静脉停滞疾病的患者以及卧床患者中。因此，促进伤口愈合的药物、化妆用组合物和食品添加剂具有极大的应用价值及经济效益。技术实现要素：本申请一方面涉及式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐在制备促进伤口愈合的药物、化妆用组合物或食品添加剂中的用途：本申请的另一方面涉及促进个体的伤口愈合的方法，其包括对所述个体给予式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐：本申请的另一方面涉及用于促进个体的伤口愈合的式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐：本申请的另一方面涉及用于促进个体的伤口愈合的药物组合物、化妆用组合物或食品添加剂，其包含式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐和药物可接受的载体、赋形剂或稀释剂或化妆用的可接受的载体或介质或可接受的用于食品的助剂或载体：附图说明图1示出了化合物莱菔素(15mM)治疗动物伤口愈合实验的效果图。图2示出了化合物莱菔素治疗皮肤伤口后的皮肤组织HE切片实验效果图。其中:(a)对照组(未给药)；(b)代表化合物莱菔素(15mM)给药8天后。具体实施方式在以下的说明中，包括某些具体的细节以对各个公开的实施方案提供全面的理解。然而，相关领域的技术人员会认识到，不采用一个或多个这些具体的细节，而采用其它方法、部件、材料等的情况下可实现实施方案。除非本申请中另外要求，在整个说明书和其后的权利要求书中，词语“包括”和“包含”应解释为开放式的、含括式的意义，即“包括但不限于”。在整个本说明书中提到的“一实施方案”或“实施方案”或“在另一实施方案中”或“在某些实施方案中”意指在至少一实施方案中包括与该实施方案所述的相关的具体参考要素、结构或特征。因此，在整个说明书中不同位置出现的短语“在一实施方案中”或“在实施方案中”或“在另一实施方案中”或“在某些实施方案中”不必全部指同一实施方案。此外，具体要素、结构或特征可以任何适当的方式在一个或多个实施方案中结合。本申请一方面涉及式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐在制备促进伤口愈合的药物、化妆用组合物或食品添加剂中的用途：在某些实施方案中，所述药物和化妆用组合物用于局部施用，包括但不限于以软膏剂、乳膏剂、硬膏剂、糊剂、凝胶剂、洗剂、搽剂、乳剂、溶液剂、混悬剂、散剂、颗粒剂、贴剂、涂剂、敷料、海绵剂、喷雾剂和/或气雾剂形式用于局部施用。在某些实施方案中，所述药物和食品添加剂用于口服施用，包括但不限于以片剂、胶囊剂、乳剂、溶液剂、混悬剂、散剂或颗粒剂形 式口服施用。在某些实施方案中，所述药物用于全身给药，优选为血管内注射给药，包括血管内滴注给药、血管内输注给药和血管内团注给药，更优选以针剂形式用于血管内注射给药。在某些实施方案中，所述伤口包括但不限于皮肤损伤、黏膜损伤和组织损伤。在某些实施方案中，所述伤口包括但不限于外伤伤口、手术创口、晒伤、灼伤、溃疡性伤口、褥疮和糖尿病溃疡伤口。在某些实施方案中，所述溃疡性伤口包括但不限于胃溃疡和口腔溃疡。在某些实施方案中，当所述药物或化妆用组合物用于局部施用时，所述式a和式b所示的化合物或其药物可接受的盐的含量各自独立地为0.1重量％～10.0重量％，优选为0.1重量％～5.0重量％，更优选为0.5重量％-3.0重量％。在某些实施方案中，当所述药物或食品添加剂用于口服给予时，所述式a和式b所示的化合物或其药物可接受的盐的含量各自独立地为0.01重量％-20重量％，优选为0.1重量％-10重量％，更优选为0.1重量％-5.0重量％。在某些实施方案中，当所述药物用于血管内注射给药时，所述式a和式b所示化合物或其药物可接受的盐的含量各自独立地为0.01重量％～20.0重量％，优选为0.1重量％-5.0重量％。在某些实施方案中，所述药物、化妆用组合物或食品添加剂以每天一次、每天两次、每天三次、每天四次或每天五次的频率进行施用。本申请的另一方面涉及促进个体的伤口愈合的方法，其包括对所述个体给予式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐：在某些实施方案中，将所述式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以药物、化妆用组合物或食品添加剂的形式给予所述个体。在某些实施方案中，当所述式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以药物或化妆用组合物的形式局部施用时，所述药物或化妆用组合物包括但不限于软膏剂、乳膏剂、硬膏剂、糊剂、凝胶剂、洗剂、搽剂、乳剂、溶液剂、混悬剂、散剂、颗粒剂、贴剂、涂剂、敷料、海绵剂、喷雾剂和/或气雾剂等形式。在某些实施方案中，当所述式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以药物或食品添加剂的形式口服施用，所述药物或食品添加剂包括但不限于片剂、胶囊剂、乳剂、溶液剂、混悬剂、散剂或颗粒剂等形式。在某些实施方案中，当所述式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以药物形式全身给药时，优选为血管内注射给药，包括血管内滴注给药、血管内输注给药和血管内团注给药，更优选以针剂形式用于血管内注射给药。在某些实施方案中，所述伤口包括但不限于皮肤损伤、黏膜损伤和组织损伤。在某些实施方案中，所述伤口包括但不限于外伤伤口、手术创口、晒伤、灼伤、溃疡性伤口、褥疮和糖尿病溃疡伤口。在某些实施方案中，所述溃疡性伤口包括但不限于胃溃疡和口腔溃疡。在某些实施方案中，当所述式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以所述药物或化妆用组合物形式局部施用时，其含量各自独立地为0.1重量％～10.0重量％，优选为0.1重量％～5.0重量％，更优选为0.5重量％-3.0重量％。在某些实施方案中，当所述式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以所述药物或食品添加剂形式口服施用时，其含量各自独立地为0.01重量％-20重量％，优选为0.1重量％-10重量％，更优选为0.1重量％-5.0重量％。在某些实施方案中，当所述式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以针剂形式用于血管内注射给药时，其含量各自独立地为0.01重量％～20.0重量％，优选为0.1重量％-5.0重量％。在某些实施方案中，所述式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以药物、化妆用组合物或食品添加剂的形式以每天一次、每天两次、每天三次、每天四次或每天五次的频率进行施用。本申请的式a或式b所示化合物的治疗有效量取决于给药途径和待施用的个体的身体特征。可以调整剂量以达到所期望的效果，但是这将取决于下列因素：体重、饮食、同时的药物治疗以及其它医学领域的技术人员公认的其它因素。更具体地，治疗有效量指有效阻止、减轻或改善疾病症状，或延长接受治疗个体寿命的化合物的量。本领域技术人员的实际能力可很好地确定治疗有效量，特别是按照本发明所提供的详细公开。正如本领域技术人员所显而易见的，本申请中待施用的剂量和具体的施用方式将取决于个体的年龄、体重以及所使用的具体化合物而变化。本领域技术人员使用常规的药理学方法可达到确定有效量水平的目的，即，达到确定预期效果所必需的剂量水平的目的。通常，以较低剂量水平开始进行化合物的人体临床应用，随着剂量水平的增加直至达到所期望的效果。或者，采用已确立的药理学方法，能够使用可接受的体外研究来建立本方法鉴定的式a或式b所示化合物的有效量和给药途径。例如，当式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以药物或化妆用组合物形式局部施用时，其剂量为每次施用0.2g-10g药物或化妆用组合物，施用频率为每日一次至每日五次；优选地，其剂量为每次施用2g-5g药物或化妆用组合物，施用频率为每日二次至每日三次。例如，当式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以药物(例如，针剂)形式进行血管内注射给药时，其剂量为每次给予0.1ml-5ml药物，给药频率为每日一次至每日五次；优选地，其剂量为每次施用0.5ml-2ml药物，给药频率为每日二次至每日三次。例如，当式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以药物或食品添加剂形式口服施用时，其剂量为每天给予5mg-500mg药物或食品添加剂，优选为每天给予10mg-100mg药物或食品添加剂，分一日一次至一日五次给予，优选地分一日二次至一日三次给予。本申请的另一方面涉及用于促进个体的伤口愈合的式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐：在某些实施方案中，所述式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以药物、化妆用组合物或食品添加剂的形式给予所述个体。在某些实施方案中，当所述式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以药物或化妆用组合物的形式局部施用时，所述药物或化妆用组合物包括但不限于软膏剂、乳膏剂、硬膏剂、糊剂、凝胶剂、洗剂、搽剂、乳剂、溶液剂、混悬剂、散剂、颗粒剂、贴剂、涂剂、敷料、海绵剂、喷雾剂和/或气雾剂等形式。在某些实施方案中，当所述式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以药物或食品添加剂的形式口服施用，所述药物或食品添加剂包括但不限于片剂、胶囊剂、乳剂、溶液剂、混悬剂、散剂或颗粒剂等形式。在某些实施方案中，当所述式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以药物形式全身给药时，优选为血管内注射给药，包括血管内滴注给药、血管内输注给药和血管内团注给药，更优选以针剂形式用于血管内注射给药。在某些实施方案中，所述伤口包括但不限于皮肤损伤、黏膜损伤和组织损伤。在某些实施方案中，所述伤口包括但不限于外伤伤口、手术创口、晒伤、灼伤、溃疡性伤口、褥疮和糖尿病溃疡伤口。在某些实施方案中，所述溃疡性伤口包括但不限于胃溃疡和口腔溃疡。在某些实施方案中，当所述式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以所述药物或化妆用组合物形式局部施用时，其含量各自独立地为0.1重量％～10.0重量％，优选为0.1重量％～5.0重量％，更优选为0.5重量％-3.0重量％。在某些实施方案中，当所述式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以所述药物或食品添加剂形式口服施用时，其含量各自独立地为0.01重量％-20重量％，优选为0.1重量％-10重量％，更优选为0.1重量％-5.0重量％。在某些实施方案中，当所述式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以针剂形式用于血管内注射给药时，其含量各自独立地为0.01重量％～20.0重量％，优选为0.1重量％-5.0重量％。在某些实施方案中，所述式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以药物、化妆用组合物或食品添加剂的形式以每天一次、每天两次、每天三次、每天四次或每天五次的频率进行施用。在某些实施方案中，当式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以药物或化妆用组合物形式局部施用时，其剂量为每次施用0.2g-10g药物或化妆用组合物，施用频率为每日一次至每日五次；优选地，其剂量为每次施用2g-5g药物或化妆用组合物，施用频率为每日二次至每日三次。在某些实施方案中，当式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以药物或食品添加剂形式口服施用时，其剂量为每天给予5mg-500mg药物或食品添加剂，优选为每天给予10mg-100mg药物或食品添加剂，分一日一次至一日五次给予，优选地分一日二次至一日三次给予。在某些实施方案中，当式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐以药物(例如，针剂)形式进行血管内注射给药时，其剂量为每次给予0.1ml-5ml药物，给药频率为每日一次至每日五次；优选地，其剂量为每次施用0.5ml-2ml药物，给药频率为每日二次至每日三次。本申请的另一方面涉及用于促进个体的伤口愈合的药物组合物、化妆用组合物或食品添加剂，其包含式a或式b所示的化合物或其药物可接受的盐和药物可接受的载体、赋形剂或稀释剂或化妆用的可接受的载体或介质或可接受的用于食品的助剂或载体：在某些实施方案中，所述药物组合物和化妆用组合物用于局部施用，包括但不限于以软膏剂、乳膏剂、硬膏剂、糊剂、凝胶剂、洗剂、搽剂、乳剂、溶液剂、混悬剂、散剂、颗粒剂、贴剂、涂剂、敷料、海绵剂、喷雾剂和/或气雾剂形式用于局部施用。在某些实施方案中，所述药物组合物和食品添加剂用于口服施用，包括但不限于以片剂、胶囊剂、乳剂、溶液剂、混悬剂、散剂或颗粒剂形式口服施用。在某些实施方案中，所述药物组合物用于全身给药，优选为血管内注射给药，包括血管内滴注给药、血管内输注给药和血管内团注给药，更优选以针剂形式用于血管内注射给药。在某些实施方案中，所述伤口包括但不限于皮肤损伤、黏膜损伤和组织损伤。在某些实施方案中，所述伤口包括但不限于外伤伤口、手术创口、晒伤、灼伤、溃疡性伤口、褥疮和糖尿病溃疡伤口。在某些实施方案中，所述溃疡性伤口包括但不限于胃溃疡和口腔溃疡。在某些实施方案中，当所述药物组合物或化妆用组合物用于局部施用时，所述式a和式b所示的化合物或其药物可接受的盐的含量各自独立地为0.1重量％～10.0重量％，优选为0.1重量％～5.0重量％，更优选为0.5重量％-3.0重量％。在某些实施方案中，当所述药物或食品添加剂用于口服施用时，所述式a和式b所示的化合物或其药物可接受的盐的含量各自独立地为0.01重量％-20重量％，优选为0.1重量％-10重量％，更优选为0.1重量％-5.0重量％。在某些实施方案中，当所述药物组合物以针剂形式用于血管内注射给药时，所述式a和式b所示化合物或其药物可接受的盐的含量各自独立地为0.01重量％～20.0重量％，优选为0.1重量％-5.0重量％。在某些实施方案中，所述药物组合物、化妆用组合物或食品添加剂以每天一次、每天两次、每天三次、每天四次或每天五次的频率进 行施用。在上述所有实施方案中，所述药物可接受的盐选自碱金属盐或碱土金属盐；氢卤酸盐；无机酸盐；有机酸盐；以及氨基酸盐。能够用于本申请的碱金属盐或碱土金属盐的实例包括但不限于钠盐、钾盐和钙盐。能够用于本申请的氢卤酸盐的实例包括但不限于氢氟酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐和氢碘酸盐。能够用于本申请的无机酸盐的实例包括但不限于硝酸盐、高氯酸盐、硫酸盐和磷酸盐。能够用于本申请的有机酸盐的实例包括但不限于甲磺酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、草酸盐和马来酸盐。能够用于本申请的氨基酸盐的实例包括但不限于谷氨酸盐和天冬氨酸盐。在某些实施方案中，本申请的药物或药物组合物包括药物可接受的表面活性剂、载体、稀释剂、赋形剂、光滑剂、助悬剂、润滑剂、成膜物质、包衣助剂或其组合，以及式a或式b所示化合物或其药物可接受的盐。在药物或药物组合物中可以提供防腐剂、稳定剂、染料、矫味剂、着色剂、抗氧化剂、甜味剂、芳香剂、香料等。在化妆用组合物或食品添加剂中可以包括化妆领域或食品领域中可接受的常用的介质、载体或助剂，包括但不限于溶剂、防腐剂、稳定剂、抗氧化剂和表面活性剂等。本申请的药物和药物组合物可按已知的方法进行生产，例如，通过常规的混合、溶解、粒化、制造锭剂、研磨、乳化、包囊、截留或压片等操作方法进行生产。本申请的化妆用组合物和食品添加剂也可按化妆领域或食品领域中已知的方法进行生产。本申请中式a和式b所示的化合物副作用极小，生物安全度和生物利用度好，因此非常适合于临床应用。下文中，本公开将参照附图通过如下实施例进行详细解释以便更好地理解本公开的各个方面及其优点。然而，应当理解，以下的实施 例是非限制性的而且仅用于说明本发明的某些实施方案。实施例实施例1：动物伤口愈合实验选择5～6周龄、体重相近的SPF级别的雄性豚鼠12只,分为两组，每组6只。在动物房内适应性饲养一周后开始实验。在距离脊椎1cm的背部两侧选择面积为3×3cm2的两个对称区域进行脱毛，并用手术刮刀刮净。将动物麻醉后，将动物转入已经紫外灭菌好的超净工作台内，先在去毛区用偏温无菌水擦洗干净，再用碘伏擦拭，最后用75％的酒精消毒。用消毒过的环形皮肤打孔器制造圆形全层皮肤切除创伤模型,手术后消毒包扎。每只动物的背部包含一个对照区、一个给药区。将手术过的动物每笼单只饲养，禁食禁水过夜，于第二天才给予标准饲料和饮水。给药组用15mM的异硫氰酸苄酯或莱菔素配制的乙醇溶液滴入伤口区，对照区用灭菌过的乙醇溶液滴入,每只25μl/次/天。皮肤切除创伤模型制作后，隔天观察伤口的形态变化，同时于2、4、6、8、10、11、12天观察测量动物的伤口面积。本实验采用数码相机联合计算机软件分析法测量伤口面积。按照以下公式计算伤口愈合率:(初始面积-残留面积)/初始面积×100％。每个伤口重复测量三次，其平均值作为最终的伤口面积,并计算伤口愈合率,见表1、表2。表1异硫氰酸苄酯(BITC)促进皮肤伤口愈合的效果实验。测试天数2d4d6d8d10d11d对照组愈合率(％)059122335给药组愈合率(％)82138536987表2.莱菔素(SFE)促进皮肤伤口愈合的效果实验。测试天数2d4d6d8d10d11d对照组愈合率(％)059122335给药组愈合率(％)153750617793从结果可见，异硫氰酸苄酯及莱菔素给药组的伤口愈合率要明显高于对照组，这表明异硫氰酸苄酯及莱菔素两者对于伤口均具有非常良好的愈合效果。实施例2：伤口皮肤组织HE切片实验在实施例1中,第8天时将动物皮肤伤口的皮肤组织切下,放入4％多聚甲醛中固定约24h,随后置于二甲苯中，透明20分钟，并重复1次。随后将皮肤组织置于液体石蜡中，在60℃烘箱中透蜡1小时，重复3次。使用石蜡包埋机包埋皮肤组织,并使用石蜡切片机进行石蜡切片，切片厚度为5μm,随后将切片放入苏木精染液中，染色4分钟并封装。最后利用显微镜观察切片并拍照,结果见图2。从图2中可以看出，莱菔素(SFE)给药组中胶原纤维(图中黑色丝带状)的含量明显增加，胶原纤维排列规则,皮肤组织形态趋向恢复正常。与之对比，对照组中的胶原纤维含量较低,皮肤组织形态不正常。以上结果表明,莱菔素对皮肤伤口的愈合有明显的促进作用。实施例3：局部给药的液体凝胶敷料的安全性实验兔的皮肤对刺激性反应非常敏感，类似于人的皮肤反应，可用作评价药物局部给药时的安全性及刺激性的实验模型。本实验旨在观察用本发明化合物配制的液体凝胶敷料局部给药时对新西兰兔完好皮肤的毒副作用以及刺激性反应。具体的实验步骤如下：(1)称取0.5克异硫氰酸苄酯、0.5克莱菔素、4克透明质酸钠和0.5克卡波姆(粘度:940)。将异硫氰酸苄酯或莱菔素和透明质酸钠及卡波姆边快速搅拌边加到90ml蒸馏水中，搅拌直至透明质酸钠及卡波姆全部溶解。另补足10ml蒸馏水至100ml,再搅匀成凝胶状，灌装、辐照灭菌。分别获得异硫氰酸苄酯液体凝胶敷料和莱菔素液体凝胶敷料；(2)健康新西兰兔12只(SPF级别)，体重(2.5±0.2)kg。实验温度为18℃～20℃。分为两组，每组6只，每只动物分笼饲养；(3)于给药前24h将新西兰兔脊柱两侧脱毛，去毛面积为体表面积的10％(约120cm2)，去毛后24h检查去毛皮肤是否因去毛而受伤， 受伤的皮肤不宜作完好皮肤的刺激性实验；(4)每只兔脊柱左侧去毛区为空白对照区，右侧为给药区。每日每只兔涂抹异硫氰酸苄酯液体凝胶敷料或莱菔素液体凝胶敷料1次，连续涂抹2周，停药后再观察1周。除观察并记录每日的红斑及水肿情况外，还观察涂抹部位是否有色素沉着、出血点、皮肤粗糙等情况；(5)经记录观察，异硫氰酸苄酯液体凝胶敷料和莱菔素液体凝胶敷料局部给药时对新西兰兔均无明显的毒性作用，对完好皮肤无任何刺激性反应，证明本申请所涉及的异硫氰酸苄酯和莱菔素的安全程度均较高。从前述中可以理解，尽管为了示例性说明的目的描述了本发明的具体实施方案，但是在不偏离本发明的精神和范围的条件下，本领域所述技术人员可以作出各种变形或改进。这些变形或修改都应落入本申请所附权利要求的范围。当前第1页1 2 3