本发明涉及一种坦度螺酮肠溶微丸及其制备方法和用途，属药物领域。
背景技术：
坦度螺酮是由日本住友制药株式会社研制成功的一种新型抗焦虑药，并于1996年在日本获准首先上市，2004年开始进入中国市场，在国内抗焦虑治疗领域的应用日益广泛。
坦度螺酮能够选择性作用于脑内5-HT1A受体，作用部位集中在情感中枢的海马、杏仁核等大脑边缘系统并投射至5-HT能神经的中缝核，通过激活突触前5-HT1A受体，抑制神经元放电，减少5-HT的合成，同时对突触后的5-HT1A受体具有部分激动作用，从而达到综合调节突触的5-HT功能，发挥抗焦虑作用。长期使用同时还可以发挥抗抑郁作用。与传统镇静催眠药相比，其抗焦虑作用特异，副作用较少，镇静催眠作用弱，无肌肉松弛作用，无依懒性和停药戒断症状，长期应用后在体内无蓄积。经过长期临床应用验证，坦度螺酮对多种状况下的焦虑都有良好效果，在以患有焦虑为特点的身心共病治疗领域应用前景广阔。
坦度螺酮属于作用于中枢神经系统类药物，口服制剂需要先经过胃肠道吸收进入体循环，然后通过血脑屏障分布到大脑内作用靶点才能发挥抗焦虑或抗抑郁作用。血脑屏障为大脑的一层防御性屏障，对物质的透过具有严格的限制作用，药物活性成分要通过这层屏障进入脑内，除了本身的透过性外，还受到血药浓度的制约。有临床研究数据显示，健康成人一次口服坦度螺酮20mg后，血浆中最高浓度仅为2.9～3.2ng/ml。根据坦度螺酮的用药指导原则，通常成人应用枸橼酸坦度螺酮片的剂量为口服每次10mg，每日3次，且每日剂量限制在不得超过60mg。目前市场上销售的薄膜衣片和普通胶囊两种口服制剂均是崩解时间长、崩解后溶出缓慢的传统制剂，影响了药物的吸收，这样很难提高口服后的血药浓度。如果单纯以增加服药剂量来克服血药浓度低的问题，又会带来不良反应增加的风险。
根据药物代谢动力学常识，弱酸性药物在酸性环境中游离态增多，具有较好的细胞膜透过性，因此弱酸性药物在胃酸环境中比较容易吸收。枸橼酸坦度螺酮显弱酸性，在胃部比较容易吸收，因此现有的坦度螺酮上市制剂均为胃溶型制剂，例如：枸橼酸坦度螺酮胃溶型普通胶囊、坦度螺酮缓释片 (CN200610021419.0)、坦度螺酮缓释颗粒(JP2002020291)、坦度螺酮渗透泵型控释片(US5185158、US5330762、US5858407)等缓控释口服制剂。上述胃溶型制剂忽略了一个很重要的问题：坦度螺酮是一种具有刺激性的化合物，在胃内融化后局部药量很大，会对胃黏膜产生刺激；另有文献报道的为了达到长时间释药效果(通常每日只需服药一次或两次)，它们的含药量比普通口服制剂要高1.5～3倍，如果在胃内发生突释也会造成局部药量过大，从而对胃黏膜产生刺激。
从现有坦度螺酮制剂临床使用时所报道的不良反应证据来看，发生率较高(发生率≥1％)的为消化系统方面的不良反应，包括：恶心、呕吐、食欲不振、口渴、腹部不适感、胃痛、胃胀、腹胀、腹泻等，这对于由消化系统疾病引起焦虑的患者、胃黏膜损伤或易出血的患者、需长期服药的老年患者尤为不利。这些患者不仅对刺激性物质耐受性低，极易诱发消化系统不良反应，导致服药顺应性低，而且由于消化道功能失调，药物吸收差，药物生物利用度不高，会严重影响治疗效果。
以上公开的技术均有在胃部大量释放药物，并伴有或可能伴有局部药量过大的特点，未能解决服药后对消化道刺激的问题。迄今为止，能够改善由消化系统疾病引起焦虑的患者、胃黏膜损伤或易出血的患者、需长期服药的老年患者的服药顺应性问题与治疗效果，并能够高效吸收利用的坦度螺酮肠溶制剂仍未见报道。
因此，针对坦度螺酮及其传统制剂的现有问题和特殊患者的需求，亟待开发一种适合消化系统疾病引起焦虑的患者、胃黏膜损伤或易出血的患者、需长期服药的老年患者服用并且可以被充分吸收的坦度螺酮肠溶制剂。
技术实现要素：
本发明的技术方案是提供了一种坦度螺酮肠溶微丸及其制备方法和用途。
本法明提供了一种坦度螺酮肠溶微丸，它是由坦度螺酮或其可药用盐为活性成分制备的丸芯、隔离层、肠溶层和完成层组成；其中，丸芯、隔离层、肠溶层、完成层的重量百分比为：
丸芯25～95％、隔离层0～15％、肠溶层5～40％、完成层0～20％。
优选地，所述的丸芯、隔离层、肠溶层、完成层的重量百分比为：
丸芯50～80％、隔离层4～10％、肠溶层10～27％、完成层6～13％。
其中，所述的丸芯中原辅料占肠溶微丸的重量百分比为：
所述的隔离层中辅料占肠溶微丸的重量百分比为：
羟丙甲基纤维素 0～12％
滑石粉 0～8％；
所述的肠溶层中辅料占肠溶微丸的重量百分比为：
所述的完成层中辅料占肠溶微丸的重量百分比为：
优选地，所述的丸芯中原辅料占肠溶微丸的重量百分比为：
所述的隔离层中辅料占肠溶微丸的重量百分比为：
羟丙甲基纤维素 3～7％
滑石粉 1～4％；
所述的肠溶层中辅料占肠溶微丸的重量百分比为：
所述的完成层中辅料占肠溶微丸的重量百分比为：
进一步优选地，所述的丸芯中原辅料占肠溶微丸的重量百分比为：
其中，所述的填充剂选自淀粉、蔗糖、乳糖、微晶纤维素、甘露醇、山梨醇、硫酸钙、磷酸氢钙或碳酸钙其中的一种或多种；
所述的崩解剂选自低取代羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钙、交联羧甲基纤维素钠、羧甲基淀粉钠或交联聚维酮其中的一种或多种；
所述的球化促进剂选自海藻酸钠、聚乙烯醇、羟丙基纤维素、羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、聚维酮、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000或微粉硅胶其中的一种或多种；
所述的肠溶高分子材料为丙烯酸树脂、羟丙甲基纤维素钛酸酯、羟丙甲基纤维素醋酸琥珀酸酯(HPMCAS)、醋酸纤维素钛酸酯、醋酸纤维素苯三酸酯或聚乙烯醇钛酸酯；
所述的增塑剂选自柠檬酸三乙酯、柠檬酸三丁酯、甘油、甘油三乙酸酯、葵二酸二丁酯、丙二醇、蓖麻油、精制椰子油、玉米油、聚乙二醇其中的一种或多种。
其中，所述的肠溶微丸是由下述重量百分比的原辅料制备而成：
坦度螺酮或其可药用盐10份、微晶纤维素70份、淀粉50份、羧甲基淀粉钠30份、羧甲基纤维素钠40份、微粉硅胶10份、羟丙甲基纤维素30份、滑石粉24份、羟丙甲基纤维素醋酸琥珀酸酯20份、葵二酸二丁酯10份、二氧化钛4份、川蜡2份；或
坦度螺酮或其可药用盐10份、乳糖60份、甘露醇30份、交联羧甲基纤维素钠40份、聚维酮30份、微粉硅胶10份、羟丙甲基纤维素38份、滑石粉28份、醋酸纤维素苯三酸酯26份、聚乙二醇12份、二氧化钛4份、巴西棕榈蜡2份；或
坦度螺酮或其可药用盐10份、蔗糖45份、山梨醇35份、交联聚维酮25份、聚乙二醇400030份、微粉硅胶5份、羟丙甲基纤维素45份、滑石粉36份、聚乙烯醇钛酸酯40份、甘油20份、二氧化钛7份、巴西棕榈蜡2份。
其中，所述的肠溶微丸的粒径为0.1～2.0mm。
优选地，肠溶微丸的粒径为0.3～1.5mm。
进一步优选地，肠溶微丸的粒径为0.5～0.8mm。
本发明还提供了制备坦度螺酮肠溶微丸的方法，它包括下述步骤：
a.制备丸芯：将坦度螺酮或其可药用盐、填充剂和崩解剂一起混匀，再加入球化促进剂制软材，将软材用0.5mm孔径的筛板挤成直径相同、光滑致密的条状物，置滚圆机内进行滚圆，直至颗粒滚成球形微丸，取出，放置40℃下进行恒温干燥，过32目筛，即得；
b.包隔离层：将羟丙甲基纤维素用70℃热水分散溶解后，加入滑石粉，制成固含量约为15wt％的隔离层溶液；将丸芯置于包衣锅中，调节进风温度使片床温度为35℃，雾化压力为0.4MPa，转速为12rpm，对丸芯进行隔离层包衣；
c.包肠溶层：将肠溶衣材料加入水中并加入增塑剂、滑石粉、二氧化钛制备成固含量约为20wt％的水分散体；调节进风温度使片床温度为30℃，雾化压力为0.2MPa，转速为12rpm，对丸芯进行肠溶层包衣；
d.包完成层：将羟丙甲基纤维素用70℃热水分散溶解后，加入滑石粉和二氧化钛，制成固含量约为20wt％的修饰层溶液；将丸芯置于包衣锅中，调节进风温度使片床温度为35℃，雾化压力为0.5MPa，转速为14rpm，对丸芯进行修饰层包衣，打光上蜡，即得。
本发明提供了坦度螺酮肠溶微丸在制备肠道给药抗焦虑的药物中的用途。
本发明还提供了一种坦度螺酮肠溶制剂，该制剂包含有坦度螺酮肠溶微丸。
其中，所述的制剂为片剂、胶囊剂或颗粒剂。
本发明制得的坦度螺酮肠溶微丸质量稳定，在胃部不崩解，在肠道内分布面积大，崩解溶出性好，生物利用度高，对消化道黏膜刺激性小，副作用少，患者服药顺应性高。可用于治疗患有如下疾病的患者：各种神经症所致的焦虑状态，原发性高血压、消化性溃疡等躯体疾病伴发的焦虑状态，轻、中度抑郁症；尤其适合消化系统疾病引起焦虑的患者、胃黏膜损伤或易出血的患者、需长期服药的老年患者服用。
附图说明
图1不同粒径肠溶微丸的体外释放曲线
以下通过具体实施方式对本发明作进一步的详细描述，但并不限制本发明，本领域技术人员根据本发明作出的各种改变和替换，只要不脱离本发明 的精神，均应属于本发明所附权利要求的范围。
具体实施方式
实施例1坦度螺酮肠溶胶囊的制备
共制备1000粒胶囊
制备工艺：
(1)丸芯制备：将坦度螺酮或其可药用盐、填充剂和崩解剂一起混匀，再加入球化促进剂制软材，将软材用0.5mm孔径的筛板挤成直径相同、光滑致密的条状物，置滚圆机内进行滚圆，直至颗粒滚成球形微丸，取出，放置40℃下进行恒温干燥，过32目筛，即得；
(2)包隔离层：将羟丙甲基纤维素用70℃热水分散溶解后，加入滑石粉，制成固含量约为15wt％的隔离层溶液；将丸芯置于包衣锅中，调节进风温度使片床温度为35℃，雾化压力为0.4MPa，转速为12rpm，对丸芯进行隔离层包衣；
(3)包肠溶层：将肠溶衣材料加入水中并加入增塑剂、滑石粉、二氧化钛制 备成固含量约为20wt％的水分散体；调节进风温度使片床温度为30℃，雾化压力为0.2MPa，转速为12rpm，对丸芯进行肠溶层包衣；
(4)包修饰层：将羟丙甲基纤维素用70℃热水分散溶解后，加入滑石粉和二氧化钛，制成固含量约为20wt％的修饰层溶液；将丸芯置于包衣锅中，调节进风温度使片床温度为35℃，雾化压力为0.5MPa，转速为14rpm，对丸芯进行修饰层包衣，打光上蜡；
(5)充填：取上述制得的微丸，填入空胶囊中，即得。
实施例2坦度螺酮肠溶胶囊的制备
共制备1000粒胶囊
制备工艺：同实施例1。
实施例3坦度螺酮肠溶胶囊的制备
共制备1000粒胶囊
制备工艺：同实施例1。
实施例4坦度螺酮肠溶胶囊的制备
共制备1000粒胶囊
制备工艺：同实施例1。
实施例5坦度螺酮肠溶胶囊的制备
共制备1000粒胶囊
制备工艺：同实施例1。
实施例6坦度螺酮肠溶胶囊的制备
共制备1000粒胶囊
制备工艺：同实施例1。
实施例7坦度螺酮肠溶胶囊的制备
共制备1000粒胶囊
制备工艺：同实施例1。
实施例8坦度螺酮肠溶胶囊的制备
共制备1000粒胶囊
制备工艺：同实施例1。
实施例9坦度螺酮肠溶胶囊的制备
共制备1000粒胶囊
制备工艺：同实施例1。
实施例10坦度螺酮肠溶胶囊的制备
共制备1000粒胶囊
制备工艺：同实施例1。
以下通过具体实验证明本发明的有益效果。
实验例1本发明坦度螺酮肠溶胶囊释放效果测定：
参照实施例4制备8种不同粒径的肠溶微丸，并充填空心胶囊，制成枸橼酸坦度螺酮主药含量为10mg/粒的胶囊。
每个处方各制备1000粒胶囊。
制备工艺：
(1)丸芯制备：将枸橼酸坦度螺酮、填充剂和崩解剂一起混匀，再加入球化促进剂制软材，将软材用相应孔径的筛板挤成直径相同、光滑致密的条状物，置滚圆机内进行滚圆，直至颗粒滚成球形微丸，取出，放置40℃下进行恒温干燥，过筛，即得；
(2)包隔离层：将羟丙甲基纤维素用70℃热水分散溶解后，加入滑石粉，制成固含量约为15wt％的隔离层溶液；将丸芯置于包衣锅中，调节进风温度使片床温度为35℃，雾化压力为0.4MPa，转速为12rpm，对丸芯进行隔离层 包衣；
(3)包肠溶层：将肠溶衣材料加入水中并加入增塑剂、滑石粉、二氧化钛制备成固含量约为20wt％的水分散体；调节进风温度使片床温度为30℃，雾化压力为0.2MPa，转速为12rpm，对丸芯进行肠溶层包衣；
(4)包修饰层：将羟丙甲基纤维素用70℃热水分散溶解后，加入滑石粉和二氧化钛，制成固含量约为20wt％的修饰层溶液；将丸芯置于包衣锅中，调节进风温度使片床温度为35℃，雾化压力为0.5MPa，转速为14rpm，对丸芯进行修饰层包衣，打光上蜡；
(5)充填：取上述制得的微丸，填入空胶囊中，即得。
体外释放测定：
选用中国药典2010年版附录XD中释放度测定法第一法，以900ml磷酸盐缓冲溶液(pH 6.8)为释放介质，转速为100转/分，在预定时间点(5，10，15，20，25，30，35，40，45min)取样，测定坦度螺酮浓度。以时间(min)为横坐标，累计释放度(％)为纵坐标，绘制释放曲线。释放度结果见表1与图1。
表1
由表1释放结果和图1释放曲线可以证明，粒径为0.1～2.0mm的本发明肠溶微丸45min内体外释放度均达95％以上，符合药典对肠溶制剂的要求。其中，粒径为0.5～0.8mm的本发明肠溶微丸45min内体外释放不仅完全，而且释放更加均匀，可以使药物吸收波动更小。但是，坦度螺酮肠溶微丸粒径<0.1mm或粒径>2.0mm时，45min内体外释放度明显下降，且释放均匀度不好。
实验例2本发明坦度螺酮胶囊有关物质测定：
参照高效液相色谱法：中国药典2010年版二部附录VD测定。
色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，0.01mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈(60：40)为流动相，检测波长为243nm，理论板数按坦度螺酮峰计算应不低于5000。
取坦度螺酮或其可药用盐含量约在50mg左右的样品，加流动相溶解过滤，滤液转移至100ml量瓶中，并用流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；取有关物质A对照品适量，加流动相制成每1ml中约含2.5μg的对照溶液。精密量取对照溶液20μl，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20～25％；再精密量取供试品溶液和对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。供试品溶液色谱图中的杂质峰不得过对照溶液色谱图中的主峰面积(0.5％)。检测结果见表2。
表2
实验例3本发明坦度螺酮胶囊制剂评价试验：
参照中国药典2010年版附录X D第二法测定：量取0.1mol/L盐酸溶液750ml，注入每个溶出杯，待溶出介质温度恒定在37℃±0.5℃，将胶囊投入转篮中，设定转速为100转/分钟进行测定，2小时后在规定取样点取样并处理，作为供试品溶液。另精密称取枸橼酸坦度螺酮对照品适量并处理，作为对照品溶液。精密量取上述两种溶液各50μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；按外标法以峰面积计算每粒的溶出量，进而计算释放度(％)；接着在上述酸液中加入温度为37℃±0.5℃的0.2mol/L磷酸钠溶液250ml得到pH6.8的缓冲 液，继续运转45min后在规定取样点吸取溶液适量，照上述酸液中的方法测定释放度(％)。
色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.1％庚烷磺酸钠溶液(用磷酸调pH值至3.0)-乙腈(7:3)为流动相，检测波长为239nm，设定柱温为40℃，调整流速使坦度螺酮峰保留时间约为6分钟，理论板数按坦度螺酮峰计算应不低于3000，拖尾因子应不大于2.0。测定结果见表3。
表3
从表3实验结果可以证明，本发明坦度螺酮胶囊在胃部释放度低，在肠道内分布面积大，崩解溶出性好，从而能够提高生物利用度，减小对消化道黏膜刺激性及副作用，提高患者服药顺应性。
实验例4本发明坦度螺酮胶囊临床药效试验：
在研究期间病人被禁止使用其它镇静剂、抗炎药、肌松剂、降压药、抗精神病药、抗抑郁药或抗焦虑药。采用多中心的随机、双盲、安慰剂平行对照研究的临床试验，病人总例数为240人，随机分为12组，年龄从24～65岁，入组标准为轻度至中度的焦虑患者并符合伴有消化系统疾病、胃黏膜损 伤或易出血、年龄50岁以上其中至少一个条件。分别服用坦度螺酮普通胶囊、实施例1～10肠溶胶囊，给药剂量均为60mg/日。服药30天后，进行疗效(抗焦虑疗效根据汉密尔顿焦虑量表进行评价分析)和不良反应评价。结果列于表4。
表4
结果表明，坦度螺酮普通胶囊组和实施例1～10肠溶胶囊组与安慰剂组相比，均表现出明显疗效。而较之坦度螺酮普通胶囊，本肠溶胶囊质量更稳定，溶出性能更好，其有效率均明显高于坦度螺酮普通胶囊组；加之肠溶胶囊具有在肠道才开始释放药物的性质，解决了坦度螺酮在给药后对消化道产生刺激的问题，对消化道黏膜损伤少，带来的副作用少，服药顺应性高，不良反应率明显低于坦度螺酮普通胶囊；更适用于治疗各种神经症所致的焦虑状态，原发性高血压、消化性溃疡等躯体疾病伴发的焦虑状态，轻、中度抑郁症；尤其适合消化系统疾病引起焦虑的患者、胃黏膜损伤或易出血的患者、需长期服药的老年患者服用；可以使更多的患者受益。