本发明属于中药技术领域，尤其涉及一种防治失眠的药物组合物及其制备方法。
背景技术：
睡眠是生理行为,也是保障身心健康的重要条件。长时间失眠会给患者带来巨大的身心损害,严重影响人们的生活和工作。由于各种因素的影响,睡眠障碍和睡眠不足的现象越来越普遍。目前治疗睡眠障碍最常用的方法是用化学合成类镇静催眠药,久服会产生依赖性或成瘾。临床经验证明,中药及其复方在改善睡眠方面具有独特疗效,且不良反应较少。近年国内研究人员对中草药的镇静催眠作用开展研究,发现其中许多活性成分具有催眠作用。
近年对中药提取物的研究发现,中药提取物也具有与西药相类似作用于谷氨酸、DA、5-HT、NE 及 GABA 等神经递质而促进睡眠的作用,如灵芝提取物对褪黑素分泌的影响,柏子仁提取物对 5-HT 水平的提高,酸枣仁提取物同时作用于 GABA 及谷氨酸的表达,均与现代治疗失眠的西药机制相似,且中药治疗效果更有效、不良反应更小,对中药提取物的研究给临床治疗失眠带来了新的指导思路。但从整体来看,目前对中药提取物的实验研究方法未能统一,实验条件无统一标准,这使实验结果差异较大；另外,大多数中药提取物治疗失眠的实验研究都是动物实验,对人体研究较少；而因为对失眠原因的不明确性,目前的失眠动物模型的可信度仍有待考察；动物实验虽一方面表明中药提取物的有效性,但仍需相关临床的研究才可明确其安全性；由于失眠的因素与环境、精神、情绪等均有较为密切的联系,而在临床观察研究中,少有对此方面的控制,缺乏确切的标准和完善的方案,因而使研究结果缺乏说服力。笔者认为,未来的研究不仅需要对动物模型、研究标准等进行更详尽的完善,更多细致的临床观察和对失眠机制的探索也会带来更加新颖的思路与方向。
锦香草：本品为野牡丹科锦香草属植物锦香草Phyllagathis caualeriei(Levl.et van.)Guill.[Allomorphia caualerieiLevl. Et van.]的全草或根。春、夏季采收全草，根全年均可采，均洗净，切碎晒干。【性味】味苦；辛；性寒。【功能主治】清热凉血；利湿。主热毒血痢；湿热带下；月经不调；血热崩漏；肠热痔血；小儿阴囊肿大。【原植物形态】草本，高10-15cm。茎直立或匍匐，逐节生很，近肉质，密被长粗毛，四棱形，通常不分枝。叶对生；叶柄长1.5-9cm，密被长粗毛；叶片纸质，广卵形、广椭圆形或圆形，先端广急尖至近圆形，基部心形，长6-16cm，宽4.5-14cm，两面绿色或有时背面紫红色，表面被疏糙伏毛状长粗毛，背面仅基出脉及侧脉被平展的长粗毛；基出脉7-9，表面脉平整，背面脉隆起。伞形花序，顶生，总花梗长4-17cm，被长粗毛，稀几无毛；苞片倒卵形或近侧披针形，被粗毛，通常仅有4枚，长约1cm，或更长；花梗与花萼均被糠秕；花萼漏斗状四棱形，裂片广卵形；花瓣粉红色至紫色，上部略偏斜，先端急尖；雄蕊4，近等长，花药基部具小瘤或不明显，药隔下延呈短距；子房杯形，先端具冠。蒴果，先端冠4裂，伸出宿存萼，宿存萼具8纵肋，果梗伸长，被糠秕。花期6-8月，果期7-9月。收载于中药大辞典。
紫麻：本品为荨麻科紫麻属植物紫麻Oreocnide frutescens(Thunb.)Miq.［Ur-tica frutescens Thunb.］的全株。夏、秋季采收，洗净，晒干。【性味】甘；性凉。【功能主治】清热解毒；行气活血；透疹。主感冒发热；跌打损伤；牙痛；麻疹不透；肿疡。【性状】全株有毛，长达lm。茎上有棱槽。叶皱缩，展平后卵状长圆形或卵状披针形，长4-12cm，宽1.7-5cm，先端渐尖，基部楔形，边缘有锯齿；叶柄长1-4cm。果实卵形。气微，味微甜。收载于中药大辞典。
紫金沙：本品为伞形科囊瓣芹属植物五匹青Pternopetalum vulgare （Dunn）Hand.-Mazz.[Cryptotaceniopsis vulgaris Dunn]，的根或全草。秋季采挖，洗净切片晒干。【性味】辛，温。【功能主治】散寒，理气，止痛。用于胃痛，腹痛，胸胁痛。【原植物形态】多年生草本，高20~50cm。根茎粗糙，有节，根肉质，粗线形。茎单生或2~3个，中空，多数只有1个分枝，中部以上1个叶片，少数2~3.基生叶通常2~5，有长柄，长10~20厘米，基部有宽膜质叶鞘;叶片通常是1回三出分裂，或近于2回三出分裂，裂片纸质，卵形，长卵形或菱形，常2~3裂，基部楔形或截形，全缘，中部以上有锯齿，顶端短尖，沿叶脉和叶缘有粗伏毛;茎生叶和基生叶同形，无柄或有短柄。复伞形花序无总苞;伞辐15~30，一般长3~4cm，果实成熟后长可达6cm;小总苞片1~4，线状披针形，大小不等;小伞形花序有花2~5，萼齿大小不等，与花柱基近等长或长于花柱基;花瓣白色至浅紫色，倒卵形至长圆形。果实长卵形，基部宽而钝圆，成熟后长4~5mm，宽2~3mm，果棱微粗糙或有丝状细齿，每棱槽内油管1~3.花果期4~7月。收载于中药大辞典。
葫芦素C（Cucurbitacin C）：CAS号5988-76-1，分子式C32H48O8，分子量560.73。【成分来源】黄瓜 Cucumis sativus,苦黄瓜 Cucumis sativus var.hanzil。
葫芦素L（ Cucurbitacin L）：CAS号1110-02-7，分子式C30H44O7，分子量516.67。【生物活性】抗肿瘤 (动物Ehrlich 腹水癌 in vivo，生命延长率38％～42％），细胞毒（KB in vitro，ED50=0.01～0.1ug/ml，HeLa in vitro,ED50=0.1ug/ml）。【成分来源】白泻根 Bryonia alba，喷瓜 Ecballium elaterium，无卷须西瓜 Citrullus ecirrhosus，药西瓜 Citrullus colocynthis。
环木菠萝烷醇（Cycloartanol）：CAS号4657-58-3，分子式C30H52O，分子量428.75。【药理作用】具有抗炎作用 。【成分来源】豆油，枸杞子，火秧簕，水龙骨。
3个原料药的化学结构：
葫芦素C（Cucurbitacin C）
葫芦素L（ Cucurbitacin L） 环木菠萝烷醇（Cycloartanol）。
技术实现要素：
本发明的目的是克服背景技术的不足，提供一种有效防治失眠的药物组合物及其制备方法。
本发明是采用如下技术方案实现的：
制成该防治失眠的药物组合物的原料药的组成和重量份为：
锦香草530-540重量份 紫麻525-530重量份 紫金沙510-520重量份 葫芦素C15-20重量份 葫芦素L10-13重量份 环木菠萝烷醇6-9重量份。
优选的用于防治失眠的药物组合物，是由如下重量份的原料药组成：
锦香草535重量份 紫麻528重量份 紫金沙515重量份 葫芦素C18重量份 葫芦素L12重量份 环木菠萝烷醇8重量份。
一种防治失眠的药物组合物，其特征在于药物组合物可以采用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
一种防治失眠的药物组合物，其特征在于药物组合物与化学药或中药组成的防治失眠药物。
一种防治失眠的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备：
原料药的组成和重量份为：锦香草530-540重量份 紫麻525-530重量份 紫金沙510-520重量份 葫芦素C15-20重量份 葫芦素L10-13重量份 环木菠萝烷醇6-9重量份；
制备方法：
（1）按原料药配比取紫麻、紫金沙、锦香草、葫芦素C、葫芦素L、环木菠萝烷醇，混匀，用重量百分比浓度27%乙醇作为溶剂，在45℃温浸提取，提取次数为12次，每次提取时间为1.3小时，每次溶剂用量为原料药总重量的13.5倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.07，滤过，药液通过DM133 大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度41%乙醇溶液洗脱DM133 大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度41%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度53%乙醇作为溶剂，加热回流提取10次，每次提取时间为0.4小时，每次溶剂用量为药渣A重量的23.5倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.15，滤过，药液通过HP2MGL大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度72%乙醇溶液洗脱HP2MGL大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度72%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
优选的一种防治失眠的药物组合物的制备方法，其特征在于按如下步骤制备：
原料药的组成和重量份为：锦香草535重量份 紫麻528重量份 紫金沙515重量份 葫芦素C18重量份 葫芦素L12重量份 环木菠萝烷醇8重量份；
制备方法：
（1）按原料药配比取紫麻、紫金沙、锦香草、葫芦素C、葫芦素L、环木菠萝烷醇，混匀，用重量百分比浓度27%乙醇作为溶剂，在45℃温浸提取，提取次数为12次，每次提取时间为1.3小时，每次溶剂用量为原料药总重量的13.5倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.07，滤过，药液通过DM133 大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度41%乙醇溶液洗脱DM133 大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度41%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度53%乙醇作为溶剂，加热回流提取10次，每次提取时间为0.4小时，每次溶剂用量为药渣A重量的23.5倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.15，滤过，药液通过HP2MGL大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度72%乙醇溶液洗脱HP2MGL大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度72%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
一种防治失眠的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组合物可以采用制剂学的常规方法制备成片剂或胶囊剂或滴丸。
一种防治失眠的药物组合物的制备方法，其特征在于药物组合物与化学药或中药组成防治失眠药物。
药物组合物防治失眠作用显著。
具体实施方式
实施例1：防治失眠的药物组合物及其制备方法
防治失眠的药物组合物的原料药的组成和重量份为：锦香草535g 紫麻528g 紫金沙515g 葫芦素C18g 葫芦素L12g 环木菠萝烷醇8g；
制备方法：
（1）按原料药配比取紫麻、紫金沙、锦香草、葫芦素C、葫芦素L、环木菠萝烷醇，混匀，用重量百分比浓度27%乙醇作为溶剂，在45℃温浸提取，提取次数为12次，每次提取时间为1.3小时，每次溶剂用量为原料药总重量的13.5倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.07，滤过，药液通过DM133 大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度41%乙醇溶液洗脱DM133 大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度41%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度53%乙醇作为溶剂，加热回流提取10次，每次提取时间为0.4小时，每次溶剂用量为药渣A重量的23.5倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.15，滤过，药液通过HP2MGL大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度72%乙醇溶液洗脱HP2MGL大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度72%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
实施例2：防治失眠的药物组合物及其制备方法
防治失眠的药物组合物的原料药的组成和重量份为：锦香草530g 紫麻530g 紫金沙510g 葫芦素C20g 葫芦素L10g 环木菠萝烷醇9g；
制备方法：
（1）按原料药配比取紫麻、紫金沙、锦香草、葫芦素C、葫芦素L、环木菠萝烷醇，混匀，用重量百分比浓度27%乙醇作为溶剂，在45℃温浸提取，提取次数为12次，每次提取时间为1.3小时，每次溶剂用量为原料药总重量的13.5倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.07，滤过，药液通过DM133 大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度41%乙醇溶液洗脱DM133 大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度41%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度53%乙醇作为溶剂，加热回流提取10次，每次提取时间为0.4小时，每次溶剂用量为药渣A重量的23.5倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.15，滤过，药液通过HP2MGL大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度72%乙醇溶液洗脱HP2MGL大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度72%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
实施例3：防治失眠的药物组合物及其制备方法
防治失眠的药物组合物的原料药的组成和重量份为：锦香草540g 紫麻525g 紫金沙520g 葫芦素C15g 葫芦素L13g 环木菠萝烷醇6g；
制备方法：
（1）按原料药配比取紫麻、紫金沙、锦香草、葫芦素C、葫芦素L、环木菠萝烷醇，混匀，用重量百分比浓度27%乙醇作为溶剂，在45℃温浸提取，提取次数为12次，每次提取时间为1.3小时，每次溶剂用量为原料药总重量的13.5倍，滤过，得药渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，浓缩至相对密度1.07，滤过，药液通过DM133 大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度41%乙醇溶液洗脱DM133 大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度41%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物A；
（2）取步骤（1）药渣A，用重量百分比浓度53%乙醇作为溶剂，加热回流提取10次，每次提取时间为0.4小时，每次溶剂用量为药渣A重量的23.5倍，滤过，得药渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，浓缩至相对密度1.15，滤过，药液通过HP2MGL大孔吸附树脂柱，先用水洗脱，再用重量百分比浓度72%乙醇溶液洗脱HP2MGL大孔吸附树脂柱，收集重量百分比浓度72%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得提取物B；
（3）将提取物A和提取物B混匀，即得药物组合物。
实施例4：片剂的制备
取实施例1药物组合物420g，加入淀粉500g，混匀，制粒，干燥，加微晶纤维素200g，硬脂酸镁25g，混匀，压制成5000片， 即得药物组合物片剂。
实施例5：胶囊的制备
取实施例2药物组合物350g，加入淀粉450g，混匀，制粒，干燥，整粒，加入适量硬脂酸镁，混匀，装胶囊2000粒，即得药物组合物胶囊。
实施例6：滴丸的制备
称取聚乙二醇 6000 230g水浴(80℃)加热煮熔，加入实施例3药物组合物12g，充分搅拌均匀，以液体石蜡为冷却剂，置玻璃管（4*80cm）中，冷却温度为3℃，滴口内外径为7.0/2.0(mm/mm)，滴口距液面为2.0cm，滴速以每分42滴为最佳条件，用棉布吸干滴丸表面的冷凝剂，即得药物组合物滴丸。
实验例1：防治失眠的试验研究
1 材料与方法
1.1 受试物
药物组合物（实施例1药物组合物 批号20110721）, 人日推荐量为3.0 g,相当于0.05 g/kg BW (成人体重以60 kg计)。称取适量药物组合物,配置成每1 ml相当药物组合物0.075g)作为高剂量组药物组合物。
1.2 动物
清洁级ICR健康雄性小鼠,体重18-22 g。将动物分为4组(1组进行直接睡眠实验、2组延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、3组戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验、4组巴比妥钠睡眠潜伏期实验),每个实验组48只小鼠,按体重随机分成对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,每组12只。
1.3 剂量选择
按推荐量的5、10、30倍设3个剂量组:每公斤体重0.25、0.50和1.50g,蒸馏水对照组。动物每日称重,并按2.0 ml/100 g BW经口灌胃,连续30 d。
1.4 统计方法 数据以x±s表示,用SPSS 10.0软件包统计分析。
1.5 实验方法
1.5.1 直接睡眠实验
各剂量组动物每天分别给予相应的受试物,对照组给予等体积蒸馏水,连续30d后,观察是否出现睡眠现象:当小鼠置于背卧位时,能立即翻正身位,如超过30-60 s不能翻正者,即认为翻正反射消失,进入睡眠；翻正反射恢复即为动物觉醒,翻正反射消失至恢复的时间段为动物睡眠时间,记录各组入睡动物数及睡眠时间。
1.5.2 延长戊巴比妥钠睡眠时间实验
于末次灌胃15 min后,给各组动物腹腔注射50 mg/kg BW戊巴比妥钠,注射量0.1 ml/10g BW,以翻正反射消失为入睡判断标准,观察受试物是否延长戊巴比妥钠睡眠时间。
1.5.3 戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验
于末次灌胃15 min后,给各组动物腹腔注射35 mg/kg BW戊巴比妥钠(最大阈下催眠剂量),注射量0.1 ml/10g BW,以翻正反射消失达1min以上为入睡判断标准,记录30 min内入睡动物数。
1.5.4 巴比妥钠睡眠潜伏期实验
于末次灌胃15 min后,给各组动物腹腔注射280 mg/kg BW巴比妥钠,注射量0.1ml/10 g BW,以翻正反射消失达1 min以上为入睡判断标准,观察受试物对巴比妥钠睡眠潜伏期的影响。
2 结果
2.1 对小鼠体重的影响
组间小鼠的初始体重类似(P>0.05)；实验结束时组间末体重也类似(P>0.05),即该药物组合物对小鼠体重增长无不良影响。
2.2 对小鼠直接睡眠作用观察结果
各剂量组入睡动物数及睡眠时间均为0,与对照组类似(P>0.05)。表明该药物组合物对小鼠无明显的直接睡眠作用。
2.3 对戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠时间的影响
中、高剂量组睡眠时间长于对照组(P<0.05)。表明该药物组合物能延长戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间。
2.4 对戊巴比妥钠阈下剂量催眠作用的影响
各剂量组动物入睡率与对照组类似(P>0.05)。表明该药物组合物未能增加阈下剂量戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠发生率。
2.5 对巴比妥钠诱导小鼠睡眠潜伏期的影响
随剂量增高,动物入睡潜伏期有缩短之势,其中高剂量组短于对照组(P<0.05),表明该药物组合物能缩短巴比妥钠诱导的小鼠睡眠潜伏期。