本发明涉及医疗用材料的制造方法、医疗用材料以及防粘连材料。
背景技术：
已知透明质酸、藻酸等聚阴离子多糖类显示出适度的粘性、粘结性、保湿性和生物适应性。因此，这些聚阴离子多糖类及其盐被广泛用作医疗用材料、食品用材料和化妆品用材料等的原材料。
其中，透明质酸由于保水性等特征性的物性优异且安全性和生物适应性高，因此被用于食品、化妆品和药品等各种用途。例如，在医疗领域中，透明质酸被用于关节润滑剂、防粘连材料的原料等。但是，成为原料的透明质酸钠由于水溶性高，因而根据用途不同而需要实施某些不溶化处理。
迄今为止，对于通过利用羧基的交联反应而使透明质酸钠水不溶化的方法进行了各种研究。例如，专利文献1记载了如下方法：通过使用碳二亚胺的交联反应来制造透明质酸、羧甲基纤维素等聚阴离子多糖类的非水溶性衍生物。
此外，专利文献2和3记载了如下方法：通过使用多价阳离子进行离子键合，从而使透明质酸、羧基烷基纤维素等聚阴离子多糖类水不溶化。进而，专利文献4记载了如下方法：使用金属盐对羧甲基纤维素进行离子交换，得到水不溶化薄膜。
并且，专利文献5中记载了如下方法：将透明质酸钠水溶液在酸性条件下冷却到-20℃，使其形成分子内交联而进行水不溶化。此外，专利文献6中记载了：使粉末状透明质酸和乙酸酐在浓硫酸存在下反应而进行乙酰化。进而，专利文献7中记载了如下方法：使用含有醇的酸性液体来制造透明质酸凝胶。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本特表2003-518167号公报
专利文献2：日本特开平5-124968号公报
专利文献3：日本特开2008-13510号公报
专利文献4：日本特开平6-128395号公报
专利文献5：日本特开2003-252905号公报
专利文献6：日本特开平8-53501号公报
专利文献7：日本特开平5-58881号公报
技术实现要素：
发明要解决的问题
但是，专利文献1记载的方法使用交联剂，因此考虑到药品等被施与人体的用途等的安全性时，多数情况下难以应用。此外，专利文献2～4中对于所得到的薄膜等的水不溶性的程度没有任何记载。
进而，专利文献5记载的方法需要将透明质酸钠水溶液的ph调整到1.2左右，并且粘度显著上升，因此难以进行成形等操作。此外，由于长时间地进行冷冻干燥，因此在冷却所需的电力成本方面也存在课题。进而，将透明质酸钠水溶液置于酸性条件下时，粘度急剧上升，因此成形变得困难，有时用途受到限定。需要说明的是，专利文献5中，虽然确认了分子内的交联结构，但并未言及不溶化的程度。
此外，专利文献6中，对于所得到的透明质酸的乙酰化物的水不溶性的程度没有任何记载。进而，用专利文献7记载的方法得到的透明质酸凝胶含有大量水分，因此也难以拿起。因此，难以在维持成形体的形状的状态下进行不溶化。
本发明是鉴于此种现有技术所具有的问题而完成的，其课题在于提供一种制造医疗用材料的方法，所述医疗用材料保持了作为原料的聚阴离子多糖类本来的特性，并且由于无需使用化学交联剂而安全性高、且具有适度的强度和柔软性。此外，本发明的课题在于提供通过上述方法制造的医疗用材料和防粘连材料。
用于解决问题的方案
即，根据本发明，提供以下所示的医疗用材料的制造方法。
[1]一种医疗用材料的制造方法，其具有如下工序：
使采用含有第一酸酐的处理液进行了水不溶化处理的第一聚阴离子多糖类的粉末或粒状物分散于第二聚阴离子多糖类的水溶性盐的水溶液而得到分散液的工序；对得到的所述分散液进行干燥而得到干燥膜的工序；以及，用含有第二酸酐的处理液对得到的所述干燥膜进行水不溶化处理而得到医疗用材料的工序。
[2]根据所述[1]所述的医疗用材料的制造方法，其中，所述第一聚阴离子多糖类和所述第二聚阴离子多糖类分别为选自由透明质酸、羧甲基纤维素和藻酸组成的组中的至少一种。
[3]根据所述[1]或[2]所述的医疗用材料的制造方法，其中，所述第一酸酐和所述第二酸酐分别为乙酸酐和丙酸酐中的至少任一种。
此外，根据本发明，提供以下所示的医疗用材料。
[4]一种医疗用材料，其是通过所述[1]～[3]中的任一项所述的制造方法制造的。
进而，根据本发明，提供以下所示的防粘连材料。
[5]一种防粘连材料，其是在所述[4]所述的医疗用材料中保持多元醇或多元醇水溶液而成的。
发明的效果
根据本发明的医疗用材料的制造方法，能够简便地制造保持了作为原料的聚阴离子多糖类本来的特性，并且由于无需使用化学交联剂而安全性高、且具有适度的强度和柔软性的医疗用材料。
具体实施方式
以下对本发明的实施方式进行说明，但本发明不受以下实施方式限定。
(医疗用材料及其制造方法)
本发明的医疗用材料的制造方法具有如下工序：使采用含有第一酸酐的处理液进行了水不溶化处理的第一聚阴离子多糖类的粉末或粒状物分散于第二聚阴离子多糖类的水溶性盐的水溶液而得到分散液的工序(分散工序)；使得到的分散液干燥而得到干燥膜的工序(干燥工序)；以及，用含有第二酸酐的处理液对得到的干燥膜进行水不溶化处理而得到医疗用材料的工序(水不溶化处理工序)。以下对其细节进行说明。
分散工序中使用的第一聚阴离子多糖类的粉末或粒状物例如可以通过用含有第一酸酐的处理液对第一聚阴离子多糖类的水溶性盐的粉末进行水不溶化处理而得到。此外，用含有第一酸酐的处理液对由含有第一聚阴离子多糖类的水溶性盐的原材料形成的海绵状的原料成形体进行水不溶化处理后，使用切碎机等进行粉碎等，由此也可以得到第一聚阴离子多糖类的粉末或粒状物。需要说明的是，海绵状的原料成形体例如可以通过使第一聚阴离子多糖类的水溶性盐的水溶液流入适当的容器后进行干燥或冷冻干燥而制造。
第一聚阴离子多糖类是其分子结构中具有1个以上的羧基、磺酸基等带负电荷的阴离子性基团的多糖类。此外，第一聚阴离子多糖类的水溶性盐是使第一聚阴离子多糖类中的至少一部分阴离子性基团形成盐而得的。需要说明的是，第一聚阴离子多糖类中的阴离子性基团可以是导入到多糖类的分子中的阴离子性基团。
作为第一聚阴离子多糖类的具体例子，可以列举：羧甲基纤维素、羧乙基纤维素等羧基烷基纤维素、羧甲基淀粉、羧甲基直链淀粉(carboxymethylamylose)、硫酸软骨素(包含软骨素-4-硫酸和软骨素-6-硫酸)、透明质酸、肝素、硫酸肝素、硫酸乙酰肝素、藻酸、果胶、卡拉胶、硫酸皮肤素和皮肤素-6-硫酸等。这些第一聚阴离子多糖类可以单独使用一种或将两种以上组合使用。
作为第一聚阴离子多糖类的水溶性盐，可以列举：无机盐、铵盐和有机胺盐等。作为无机盐的具体例子，可以列举：钠、钾等的碱金属盐；钙盐等碱土金属盐；锌、铁等的金属盐等。
为了对第一聚阴离子多糖类的水溶性盐的粉末进行水不溶化处理而使用的处理液含有第一酸酐。作为酸酐的具体例子，可以列举：乙酸酐、丙酸酐、琥珀酸酐、丁酸酐、邻苯二甲酸酐和马来酸酐等。其中，优选乙酸酐和丙酸酐。这些酸酐可以单独使用一种或将两种以上组合使用。
处理液优选：进一步含有水和水溶性有机溶剂中的至少任一种介质，并且该介质中溶解或分散有第一酸酐。通过使用这种在介质中溶解或分散有第一酸酐的处理液，从而可以使第一聚阴离子多糖类的水溶性盐的粉末充分且迅速地水不溶化。
作为水溶性有机溶剂的具体例子，可以列举：甲醇、乙醇、丙醇、二甲基亚砜(dmso)、乙腈和四氢呋喃等。其中，优选甲醇、乙醇和二甲基亚砜。这些水溶性有机溶剂可以单独使用一种或将两种以上组合使用。
处理液中的第一酸酐的浓度通常为0.1～50质量％，优选为5～30质量％。第一酸酐的浓度小于0.1质量％时，有水不溶化的程度变得不充分或水不溶化需要较长时间的倾向。另一方面，第一酸酐的浓度超过50质量％时，有效果达到极限的倾向。
从使第一聚阴离子多糖类的水溶性盐的粉末更充分且迅速地水不溶化的观点出发，优选处理液含有水作为介质。处理液中的水含量优选为0.01～50质量％，进一步优选为5～20质量％。处理液中的水含量小于0.01质量％时，在除甲醇外的溶剂的情况下，有时水不溶化变得不充分。此外，处理液中的水含量超过50质量％时，有时第一聚阴离子多糖类的水溶性盐的粉末变得容易溶解。
如果将第一聚阴离子多糖类的粉末或粒状物和第二聚阴离子多糖类的水溶性盐的水溶液混合并适当搅拌等，就可以得到在水溶液中分散有第一聚阴离子多糖类的粉末等的分散液。作为第二聚阴离子多糖类，可以使用与前述第一聚阴离子多糖类同样的物质。第一聚阴离子多糖类和第二聚阴离子多糖类可以相同也可以不同。需要说明的是，分散液中可以进一步含有以硫酸钡等造影剂为代表的x射线不透过剂。
在干燥工序中，使得到的分散液干燥而得到干燥膜。然后，在水不溶化处理工序中，用含有第二酸酐的处理液对通过干燥工序而得到的干燥膜进行水不溶化处理而得到医疗用材料。作为第二酸酐，可以使用与前述第一酸酐同样的物质。第一酸酐与第二酸酐可以相同也可以不同。
在水不溶化处理工序中，通过用含有第二酸酐的处理液对干燥膜进行处理，从而干燥膜在其形状得以维持的状态下被水不溶化。对用处理液处理干燥膜的方法没有特别限制，优选按照处理液与干燥膜整体接触且处理液渗透到干燥膜的内部的方式来进行处理。作为具体的处理方法，可以列举如下方法：将干燥膜浸渍在处理液中；对干燥膜涂布或吹送(喷雾)处理液等。
水不溶化处理时的温度只要为不超过处理液的沸点的温度即可，没有特别限制。从抑制聚阴离子多糖类的分解变性的观点和抑制介质、副产物等的挥发的观点出发，水不溶化处理时的温度优选设为0～80℃，进一步优选设为0～70℃，特别优选设为室温(25℃)～60℃。其中，如果在水不溶化处理时处理液不挥发的条件下、例如通过热压机或热辊等进行处理，则可以不发生分解变性等而以更短时间得到医疗用材料。例如，在通过热压机或热辊等进行水不溶化处理时，水不溶化处理时的温度优选设为50～90℃，处理时间优选设为30分钟以下。在水不溶化处理后，根据需要使用水、水溶性有机溶剂等进行洗涤等，由此可以得到本发明的医疗用材料。
用乙酸酐的醇溶液对使用聚阴离子多糖类的钠盐而形成的成形体进行处理时，设想的反应如下所示。需要说明的是，设想的反应可能成为水不溶化的因素之一，但也可能由于与其它水不溶化因素的组合或完全不同的因素而进行水不溶化。即，本发明不受设想的以下反应的任何限定。
r1-coona+(ch3co)2+r2-oh
→r1-cooh+ch3coona+ch3coor2…(1)
反应式(1)中，r1表示聚阴离子多糖类的主链，r2表示醇的主链。乙酸酐在醇存在下开裂时，夺取聚阴离子多糖类的钠，羧基由钠盐型变为酸型。对于这一点，可以通过na含量的测定或利用碱溶液的滴定进行确认。
反应体系中存在水时，预测除了由上述反应式(1)所示的反应以外，还同时进行由下述式(2)所示的反应，羧基由钠盐型变为酸型。
ri-coona+(ch3co)2o+h2o
→r1-cooh+ch3coona+ch3cooh(2)
需要说明的是，得到的医疗用材料中，分子中的阴离子性基团也可不全部变为酸型。
即使将使用聚阴离子多糖类的水溶性盐形成的成形体等浸渍在盐酸等无机酸、乙酸等有机酸中，得到充分水不溶化的成形体也是极为困难的。此外，即使将处理液中的酸酐置换为与该酸酐对应的酸，也不能得到水不溶化的成形体。因此预测，还需要加入除了使聚阴离子多糖类的阴离子基团变为酸型以外的因素进行水不溶化。
本发明的医疗用材料由于制造时无需使用化学交联剂，因此分子中没有引入来自于化学交联剂的官能团等的结构。因此，本发明的医疗用材料保持了作为原料的聚阴离子多糖类本来的特性，并且安全性高。此外，按照上述那样制造的本发明的医疗用材料具有适度的强度和柔软性。因此，本发明的医疗用材料适合作为防粘连材料等。需要说明的是，在将本发明的医疗用材料作为防粘连材料的构成材料使用时，对医疗用材料的厚度没有特别限制，优选为20～200μm，进一步优选为60～120μm。
构成本发明的医疗用材料的聚阴离子多糖类的分子实质上未进行交联。进而，聚阴离子多糖类中实质上未形成新的共价键。但是推测，在聚阴离子多糖类的分子间形成了氢键、疏水键和范德华力等物理键。关于在聚阴离子多糖类的分子间形成有这样的物理键这一点，可以通过测定红外吸收光谱来进行确认。
本发明的医疗用材料在酸性至碱性的宽泛的ph区域内稳定且为水不溶性。但是，本发明的医疗用材料例如与ph12以上的水性介质接触或浸渍于其中等的情况下，分子间彼此的物理键可解离而容易溶解。
(防粘连材料)
本发明的防粘连材料是在前述医疗用材料中保持多元醇或多元醇水溶液而成的防粘连材料。作为多元醇的具体例子，可以列举：乙二醇、二乙二醇、聚乙二醇、甲基甘油、聚氧乙烯糖苷(polyoxyethyleneglycoside)、麦芽糖醇、甘露醇、木糖醇、山梨糖醇、还原麦芽糖、二丙二醇、丁二醇、缬氨酸、丙二醇、甘油(丙三醇)、聚甘油、甘油脂肪酸酯等。其中，优选使用甘油、木糖醇、山梨糖醇、低分子聚乙二醇等在医疗领域、食品领域中使用的多元醇。这些优选使用的多元醇可以从市场获得并直接使用。对于甘油、山梨糖醇等，期望使用符合日本药典的物质。甘油是安全性高至作为向静脉注射的注射剂也能使用的原材料，因此特别优选。
作为使医疗用材料保持多元醇或多元醇水溶液的方法，有在多元醇或规定浓度的多元醇水溶液中浸渍医疗用材料的方法等。即，通过在多元醇水溶液中浸渍医疗用材料、用多元醇水溶液置换医疗用材料的内部，从而能够保持期望浓度的多元醇水溶液，得到所期望的本发明的防粘连材料。需要说明的是，对本发明的防粘连材料的厚度没有特别限制，优选为20～200μm，进一步优选为60～120μm。
实施例
以下基于实施例具体地说明本发明，但本发明不受这些实施例限定。需要说明的是，实施例、比较例中的“份”和“％”在没有特别声明时为质量基准。
(实施例1)
使透明质酸钠(分子量80万da)的粉末1.0g分散于80％乙醇水溶液100ml中。在搅拌下加热到50℃后，添加乙酸酐20ml，进一步加热搅拌1小时。进行离心分离，将回收的沉淀用乙醇和水清洗后，进行干燥和粉碎，得到透明质酸粉末。使得到的透明质酸粉末0.5g分散于1％透明质酸钠(分子量80万da)水溶液50ml中，流入长12cm×宽10cm的不锈钢盘中后，在20℃的恒温槽内干燥，得到干燥膜。将得到的干燥膜浸渍在处理液(20％乙酸酐/80％乙醇溶液)中，在50℃放置1小时而进行水不溶化处理，得到厚度约50μm的透明质酸粉末-透明质酸复合膜。得到的透明质酸粉末-透明质酸复合膜具有适度的强度和柔软性。
(实施例2)
使1％透明质酸钠(分子量80万da)水溶液50ml流入长12cm×宽10cm的不锈钢托盘中，在-80℃冰柜中冷冻。对冷冻后的物质进行真空冷冻干燥(真空度-20pa、架子温度25℃)，得到由透明质酸钠形成的海绵。将得到的海绵浸渍在处理液(20％乙酸酐/80％乙醇溶液)中，在50℃放置1小时而进行水不溶化处理，得到由透明质酸形成的海绵。使用切碎机将得到的海绵粉碎，得到透明质酸的破碎物(粒状物)。使得到的破碎物0.5g分散在1％透明质酸钠(分子量80万da)水溶液50ml中，流入长12cm×宽10cm的不锈钢托盘中后，在20℃的恒温槽内干燥，得到干燥膜。将得到的干燥膜浸渍在处理液(20％乙酸酐/80％乙醇溶液)中，在50℃放置1小时而进行水不溶化处理，得到厚度约60μm的透明质酸破碎物(粒状物)-透明质酸复合膜。得到的透明质酸破碎物(粒状物)-透明质酸复合膜具有适度的强度和柔软性。
(评价1：溶解度试验)
将各实施例中制造的复合膜切成2cm见方，放入直径3.5cm、深度1.5cm的容器中，加入pbs缓冲液(ph6.8)5ml。将该容器放入调整为37℃的振荡机中，以10～20rpm进行振荡，目视观察经时的状态变化。其结果是，可知所有复合膜在72小时后均仍保持了膜的原形，是水不溶化的。此外，72小时后的溶胀率(溶胀膜/干燥膜(质量比))为2.4。
(比较例1)
使1％透明质酸钠(分子量80万da)水溶液50ml流入长12cm×宽10cm的不锈钢托盘中后，在20℃的恒温槽内干燥，得到干燥膜。将得到的干燥膜浸渍在处理液(20％乙酸酐/80％乙醇溶液)中，在50℃放置1小时而进行水不溶化处理，得到厚度约50μm的水不溶化透明质酸膜。
(评价2：拉伸试验)
实施基于jisk7311(聚氨酯系热塑性弹性体的试验方法)的拉伸试验，测定实施例1中制造的复合膜的拉伸强度。首先，通过哑铃刀对利用蒸馏水进行了充分溶胀的复合膜进行冲切，制作试验片。然后，使用单柱式材料试验机(商品名“sta-1150”、a&dcompany制)，以十字头速度10mm/秒测定断裂强度，算出复合膜的拉伸强度。实施例1中制造的复合膜的拉伸强度为3n/mm2。此外，通过同样的步骤测定和算出的比较例1中制造的水不溶化透明质酸膜的拉伸强度为1.5n/mm2。
(实施例3)
将实施例1中制造的复合膜浸渍在10体积％的甘油水溶液中后，风干并装入灭菌用袋中。照射25kgy的辐射线连同灭菌用袋进行灭菌，得到厚度约50μm的防粘连膜。对成年犬(小猎犬、雌、1.5岁、体重约10kg)在全身麻醉处置后进行开腹，剥离3cm见方的腹侧壁表皮。将防粘连膜按照覆盖剥离部分的方式进行配置并关腹。2周后，在全身麻醉处置后对该犬进行开腹，结果未发生粘连。此外，犬的体内所配置(埋植)的防粘连膜在埋植后2周消失。推测这是由于，构成防粘连膜的透明质酸的羧基逐渐被生物体内的钠离子等中和而变为可溶性的透明质酸盐并溶解，在生物体内被吸收。相对于此，对于在未配置防粘连膜的状态下关腹的犬而言，观察到剥离部分与肠道发生了粘连。
产业上的可利用性
本发明的医疗用材料作为用于构成防粘连材料的原材料是有用的。