本发明涉及清热抗炎药物的制备方法，尤其涉及了一种三叶青清热抗炎颗粒的制备方法。
背景技术：
：发热是由于发热激活物作用于机体，进而导致内生致热原的产生并入脑作用于体温调节反馈示意图体温调节中枢，导致发热中枢介质的释放继而引起调定点的改变，最终引起发热。常见的发热激活物有细菌、病毒、真菌、螺旋体、抗原抗体复合物及类固醇等。一定程度的体温升高，能使人体免疫功能明显增强，有利于清除病原体和促进疾病的痊愈。但发热超过了一定程度或长期发热，可影响机体的代谢过程，引起多系统特别是中枢神经系统的功能紊乱。发热多数伴随炎症的产生，炎症是机体对于刺激的一种防御反应，表现为红、肿、热、痛和功能障碍。在炎症过程中，一方面损伤因子直接或间接造成组织和细胞的破坏，另一方面通过炎症充血和渗出反应，以稀释、杀伤和包围损伤因子。三叶青(tetrastigmatishems-leyani)为葡萄科崖爬藤属植物三叶崖爬藤。其块根称为蛇附子，为民间常用的中草药，主要含黄酮类如槲皮素、山奈酚及三萜类化合物如蒲公英萜醇等化学成份，具有抗肿瘤、保肝、抗病毒、抗炎、调节免疫作用，并基本无毒。严余明等研究了传统的水煎、饮片打粉与冻干粉三种不同工艺加工的三叶青的抗炎作用，结果表明三叶青冻干粉的抗炎作用明显优于水煎剂与饮片粉。原因在于水煎剂和饮片粉在加工工艺中采用较高温度，从而使有效成份活性失活等。技术实现要素：本发明针对现有技术中的缺点，提供了一种可以保留有效成份活性的清热抗炎颗粒的制备方法，其以三叶草为主要原料，制得的颗粒可以作为清热抗炎的药物。为了解决上述技术问题，本发明通过下述技术方案得以解决：一种清热抗炎颗粒的制备方法，其包括以下步骤，步骤一：水煎将新鲜三叶青块根洗净，然后在-20～-10℃下冷冻干燥后粉碎得三叶青粗粉，取三叶青粗粉加水煎煮得煎煮液，水的添加量为三叶青粗粉重量的8～20倍，煎煮两次，每次1～2h，过滤，合并滤液，滤渣备用；步骤二：醇提将步骤一所得的滤渣加入60～80％乙醇水浴提取两次，60～80％乙醇的添加量为滤渣重量6～10倍，每次水浴后过滤，减压回收乙醇，得滤液；步骤三：浓缩将步骤一、步骤二所得滤液合并，真空浓缩后得到相对密度为1.07～1.10的浓缩浸膏，将浸膏进行保温；步骤四：减压干燥、制粒将保温后的浸膏在温度为70～90℃、压力为-0.2～-0.05mpa下进行减压干燥，干燥后将其粉碎，加入糊精、润湿剂，混合均匀，再以挤压方式通过筛网，制成均匀的颗粒；将颗粒置于干燥机中进行干燥，温度控制在70℃～100℃之间，干燥时间为8～15min，再用整粒机整粒。采用减压干燥法进行干燥，能较好保留主要有效成分，缩短干燥时间，所得干燥物呈蜂窝状，疏松易粉碎。作为优选，三叶青为野生三叶青。作为优选，步骤三中保温的温度为40～60℃，保温时间为1～3h。作为优选，保温的温度为50℃。作为优选，减压干燥时间为2～4h。作为优选，减压干燥时的温度为80℃，压力为-0.1mpa。作为优选，润湿剂为乙醇。本发明由于采用了以上技术方案，具有显著的技术效果：三叶草主要含黄酮类如槲皮素、山奈酚及三萜类化合物如蒲公英萜醇等化学成份，具有抗肿瘤、保肝、抗病毒、抗炎、调节免疫作用，而且基本无毒。本发明采用水煎、醇提、浓缩、减压干燥及制粒等制备步骤，能避免现有技术中因较高温度而使有效成份活性失活的缺点，而且采用减压干燥法进行干燥，能较好保留主要有效成分，缩短干燥时间，所得干燥物呈蜂窝状，疏松易粉碎；采用本方法制得的颗粒，不仅清热抗炎效果佳，同时还能提高免疫力。具体实施方式下面实施例是对本发明进一步详细描述，但不是限制本发明的范围。实施例1清热抗炎颗粒的制备方法，包括以下步骤，步骤一：水煎将新鲜三叶青块根洗净，然后在-20～-10℃下冷冻干燥2h后粉碎得三叶青粗粉，取300g三叶青粗粉加水煎煮得煎煮液，水的添加量为三叶青粗粉重量的8倍，煎煮两次，第一次煎煮1h，第二次煎煮1.5h，煎煮后过滤，合并滤液，滤渣备用；步骤二：醇提将步骤一所得的滤渣加入60％乙醇水浴提取两次，60％乙醇的添加量为滤渣重量8倍，每次水浴后过滤，减压回收乙醇，得滤液；步骤三：浓缩将步骤一、步骤二所得滤液合并，真空浓缩后得到相对密度为1.07～1.10(50℃热测)的浓缩浸膏，将浸膏在50℃下进行保温，保温时间为2h；步骤四：减压干燥、制粒将保温后的浸膏在温度为80℃、压力为-0.1mpa下进行减压干燥，干燥时间为2h，干燥后将其粉碎，加入糊精，混合均匀，糊精的加入量为浸膏干燥后质量的16.7％，以95％乙醇作润湿剂，再以挤压方式通过22目筛网，制成均匀的颗粒；将颗粒置于高效沸腾干燥机中进行干燥，干燥温度为70℃，干燥时间为13min，再用快速整粒机整粒。实施例2清热抗炎颗粒的制备方法，包括以下步骤，步骤一：水煎将新鲜三叶青块根洗净，然后在-20～-10℃下冷冻干燥1h后粉碎得三叶青粗粉，取400g三叶青粗粉加水煎煮得煎煮液，水的添加量为三叶青粗粉重量的13倍，煎煮两次，第一次煎煮2h，第二次煎煮2h，煎煮后过滤，合并滤液，滤渣备用；步骤二：醇提将步骤一所得的滤渣加入70％乙醇水浴提取两次，60％乙醇的添加量为滤渣重量8倍，每次水浴后过滤，减压回收乙醇，得滤液；步骤三：浓缩将步骤一、步骤二所得滤液合并，真空浓缩后得到相对密度为1.07～1.10(50℃热测)的浓缩浸膏，将浸膏在50℃下进行保温，保温时间为1h；步骤四：减压干燥、制粒将保温后的浸膏在温度为80℃、压力为-0.1mpa下进行减压干燥，干燥时间为4h，干燥后将其粉碎，加入糊精，混合均匀，糊精的加入量为浸膏干燥后质量的15％，以95％乙醇作润湿剂，再以挤压方式通过22目筛网，制成均匀的颗粒；将颗粒置于高效沸腾干燥机中进行干燥，干燥温度为90℃，干燥时间为10min，再用快速整粒机整粒。实施例3清热抗炎颗粒的制备方法，包括以下步骤，步骤一：水煎将新鲜三叶青块根洗净，然后在-20～-10℃下冷冻干燥2h后粉碎得三叶青粗粉，取325g三叶青粗粉加水煎煮得煎煮液，水的添加量为三叶青粗粉重量的20倍，煎煮两次，第一次煎煮1.5h，第二次煎煮1h，煎煮后过滤，合并滤液，滤渣备用；步骤二：醇提将步骤一所得的滤渣加入80％乙醇水浴提取两次，60％乙醇的添加量为滤渣重量8倍，每次水浴后过滤，减压回收乙醇，得滤液；步骤三：浓缩将步骤一、步骤二所得滤液合并，真空浓缩后得到相对密度为1.07～1.10(50℃热测)的浓缩浸膏，将浸膏在50℃下进行保温，保温时间为3h；步骤四：减压干燥、制粒将保温后的浸膏在温度为80℃、压力为-0.1mpa下进行减压干燥，干燥时间为2.8h，干燥后将其粉碎，加入糊精，混合均匀，糊精的加入量为浸膏干燥后质量的17％，以95％乙醇作润湿剂，再以挤压方式通过22目筛网，制成均匀的颗粒；将颗粒置于高效沸腾干燥机中进行干燥，干燥温度为100℃，干燥时间为8min，再用快速整粒机整粒。实施例4清热抗炎颗粒的制备方法，包括以下步骤，步骤一：水煎将新鲜三叶青块根洗净，然后在-20～-10℃下冷冻干燥2h后粉碎得三叶青粗粉，取360g三叶青粗粉加水煎煮得煎煮液，水的添加量为三叶青粗粉重量的16倍，煎煮两次，第一次煎煮1h，第二次煎煮1.2h，煎煮后过滤，合并滤液，滤渣备用；步骤二：醇提将步骤一所得的滤渣加入74％乙醇水浴提取两次，60％乙醇的添加量为滤渣重量8倍，每次水浴后过滤，减压回收乙醇，得滤液；步骤三：浓缩将步骤一、步骤二所得滤液合并，真空浓缩后得到相对密度为1.07～1.10(50℃热测)的浓缩浸膏，将浸膏在50℃下进行保温，保温时间为2.3h；步骤四：减压干燥、制粒将保温后的浸膏在温度为80℃、压力为-0.1mpa下进行减压干燥，干燥时间为4h，干燥后将其粉碎，加入糊精，混合均匀，糊精的加入量为浸膏干燥后质量的17.4％，以95％乙醇作润湿剂，再以挤压方式通过22目筛网，制成均匀的颗粒；将颗粒置于高效沸腾干燥机中进行干燥，干燥温度为80℃之间，干燥时间为15min，再用快速整粒机整粒。以下通过具体药效学试验证明本发明的有益成果。1、清热药效评价健康新西兰家兔，雌雄兼用，体重1.8～2.4kg，试验前1～2天进行体温预选，选用体温在38.0～39.0℃之间，3小时内体温变化<0.3℃的40只用于实验。按基础体温搭配分成6组，每组8只，分别灌胃给予蒸馏水(对照组)、阿司匹林(24mg/kg，阳性对照组)、细菌内毒素(24mg/kg，模型组)、三叶青颗粒低剂量(12.5mg/kg，三叶青低剂量组)、三叶青颗粒中剂量(25mg/kg，三叶青中剂量组)和三叶青颗粒高剂量(50mg/kg，三叶青高剂量组)，给药后立即耳缘静脉注射50u/kg的细菌内毒素生理盐水溶液，用wry电脑热原测温仪观察注射内毒素后6h内的温度变化，每隔30min记录1次体温；以各时段的升温值以及最大升温值作指标比较各组对内毒素所致发热家兔体温的影响。三叶青低剂量组、三叶青中剂量组及三叶青高剂量组所用颗粒为实施例1或实施例2或实施例3或实施例4所得颗粒。表1解热作用实验结果与对照组比较**p<0.01；与模型组比较##p<0.01。2、抗炎药效评价2.1对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响雄性icr小鼠50只，体重25～30g，按体重搭配平均分为5组，每组10只；分别灌胃给予蒸馏水(对照组)、阿司匹林(0.27mg/kg，阿司匹林组)、三叶青颗粒低剂量(1.5mg/kg，三叶青低剂量组)、三叶青颗粒中剂量(3.0mg/kg，三叶青中剂量组)和三叶青颗粒高剂量(6.0mg/kg，三叶青高剂量组)；每日2次，连续5d；末次给药后30min，小鼠右耳涂以二甲苯0.05ml/只致炎，左耳作对照；15min后脱颈臼处死，沿耳廓基线剪下双耳，用6mm角膜环钻在左右耳相同位置冲下耳片，在电子分析天平上称重(精确到0.1mg)，右耳重量减去左耳重量之差值(单位:mg)即为肿胀度，计算各组平均肿胀度并求出肿胀抑制率(％)，肿胀抑制率(％)＝[(空白对照组肿胀度-给药组肿胀度)/空白对照组肿胀度]×100％，见表2。表2显示三叶青颗粒明显减少二甲苯所致小鼠耳廓肿胀，肿胀抑制率30.29％～61％,剂量关系明确。三叶青低剂量组、三叶青中剂量组及三叶青高剂量组所用颗粒为实施例1或实施例2或实施例3或实施例4所得颗粒。表2三叶青颗粒对小鼠耳肿胀的影响与对照组比较**p<0.01,*p<0.05。2.2对小鼠碳粒廓清指数和吞噬指数的影响雄性icr小鼠50只，体重25～30g，按体重搭配平均分为5组，每组10只；分别灌胃给予蒸馏水(正常组)、氢化可的松(50mg/kg，模型组)、三叶青颗粒低剂量(1.5mg/kg，三叶青低剂量组)、三叶青颗粒中剂量(3.0mg/kg，三叶青中剂量组)和三叶青颗粒高剂量(6.0mg/kg，三叶青高剂量组)；每日2次，连续5d。除了正常组外，其余各组在灌胃给药的同时，皮下注射氢化可的松50mg/kg，1次/d，连续6d造成免疫低下阳性对照。于末次给药后0.5h，各组小鼠尾静脉注射20％印度墨汁5ul/g，于1min和5min分别眼眶取血，测廓清指数k，将小鼠处死，取肝脏和肾脏，计算吞噬指数ɑ。三叶青低剂量组、三叶青中剂量组及三叶青高剂量组所用颗粒为实施例1或实施例2或实施例3或实施例4所得颗粒。表3三叶青颗粒对小鼠碳粒廊清指数和吞噬指数的影响组别kɑ正常组0.064±0.0078.16±0.83模型组0.021±0.0034##4.31±0.454##三叶青低剂量组0.034±0.004*5.70±0.63*三叶青中剂量组0.047±0.007**6.64±0.41**三叶青高剂量组0.596±0.002**7.95±0.82**与对照组比较**p<0.01；与模型组比较##p<0.01。表3结果表明，三叶青颗粒各剂量组与模型组比较，碳粒廓清指数和吞噬指数明显升高，有显著差异，且随着剂量的增加，效果越明显，说明三叶青颗粒不仅具有明显的抗炎作用，而且还能提高小鼠的免疫力。总之，以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所作的均等变化与修饰，皆应属本发明专利的涵盖范围。当前第1页12