本发明属于化妆品
技术领域：
，具体涉及一种含大鲵低聚糖肽的防晒霜及其制备方法。
背景技术：
：大鲵(andriasdavidianus)是我国特有的珍稀特产，属国家二类保护动物。主要分布于长江中上游、珠江中上游及汉水上游的溪流中。随着养殖规模的发展，大鲵资源的精深加工利用成为一个关系大鲵产业持续发展的紧迫课题。大鲵体表无鳞多皮肤腺，在生长过程中不断分泌黏液，内含多种活性物质。如guo等人在《z.naturforsh》上发表了从大鲵黏液中提取出的磷脂酶a2[z.naturforsh,67c,86-92(2012)]；王立峰等人从大鲵黏液中分离出抗菌肽(《中国生化药物杂志》，2011年，第34卷第4期，269-272页)；冯叙桥等鉴定了从大鲵黏液中制备的糖肽结构(《食品工业科技》，2012年，第33卷第6期，128-131页)。大鲵低聚糖肽为大鲵体液中提取出来的一种低聚糖肽，其研究表明具有抗紫外线及抗皮肤老化、促进皮肤生长的等功能。但目前运用大鲵低聚糖肽制备化妆品的报道较少，也尚无含大鲵低聚糖肽相关化妆品上市满足消费者的美容需求，其主要技术难题在于，大鲵低聚糖肽不易保存，与其他基质相容性差，制成化妆品其氨基酸容易变性失活，失去护肤美容的功效。因此，克服上述技术难题，提供一种健康、天然的护肤产品，满足人们的护肤需求是非常有必要的。技术实现要素：为解决上述技术问题，本发明提供了一种含大鲵低聚糖肽的防晒霜，由大鲵低聚糖肽和霜剂基质制成，其制得防晒霜质量稳定性非常好，克服了大鲵低聚糖肽制备化妆品易于变性失活的技术问题，其抗紫外线效果显著，且制备工艺简单，非常适宜工业化生产。具体地，本发明提供了一种含大鲵低聚糖肽的防晒霜，按重量份计，由大鲵低聚糖肽12-18份、辛癸酸甘油酯20-26份、生育酚6-10份、葡萄籽油4-6份、硬脂醇醚10-16份、冰片2-4份、单硬脂酸甘油酯6-12份，红橘油2-4份、去离子水10-16份。更具体地，一种含大鲵低聚糖肽的防晒霜，按重量份计，由大鲵低聚糖肽15份、辛癸酸甘油酯23份、生育酚8份、葡萄籽油5份、硬脂醇醚13份、艾片3份、单硬脂酸甘油酯9份、红橘油3份、去离子水13份。所述的大鲵低聚糖肽是由以下步骤制成：将大鲵黏液在0～10℃时进行匀浆；向匀浆中加入1～3倍体积ph7～8的0.01～0.1m磷酸缓冲液及与匀浆质量比为0.1～1％的复海洋碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶按活力单位比为3∶3∶2∶2比例混合合酶，酶解12～48h，离心取上清，采用截留分子量为4000da以下的超滤膜分离器分离，取透过超滤膜的液体；通过sephadexlh-20分子筛层析柱，收集od280nm吸收峰；将所收集的液体通过大孔吸附树脂及活性炭后冷冻干燥，制得大鲵低聚糖肽。更进一步地，所述的大鲵低聚糖肽是由以下步骤制成：将大鲵黏液在5℃时进行匀浆；向匀浆中加入2倍体积ph7.5的0.05m磷酸缓冲液及与匀浆质量比为0.5％的复海洋碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶按活力单位比为3∶3∶2∶2比例混合合酶，酶解12～48h，离心取上清，采用截留分子量为4000da以下的超滤膜分离器分离，取透过超滤膜的液体；通过sephadexlh-20分子筛层析柱，收集od280nm吸收峰；将所收集的液体通过大孔吸附树脂及活性炭后冷冻干燥，制得大鲵低聚糖肽。本发明还提供了一种含大鲵低聚糖肽的防晒霜的制备方法，具体包括以下步骤：(1)将辛癸酸甘油酯、生育酚、葡萄籽油、红橘油单硬脂酸甘油酯混合作为a相，加热至60～70℃；(2)将去离子水、硬脂醇醚、羟基本甲酸丙酯作为b相，加热至80～90℃；(3)把a相加入b相中，进行均质，转速500～800r/min，均质时间10～20min；当温度回落至30℃～40℃时，将大鲵低聚糖肽、去离子水、水育酚混合均匀作为c相，加入a、b相的混合物中，再次进行均质，转速为1000-2000r/min，均质时间6～8min；冷却至室温，分装入瓶，即得到防晒霜。根据上述步骤(1)所述的a相加热温度优选65℃。根据上述步骤(2)所述的b相加热温度优选为80℃。根据上述所述的步骤(3)是把a相加入b相中，进行均质，转速700r/min，均质时间15min；当温度回落至35℃时，将大鲵低聚糖肽、去离子水、水育酚混合均匀作为c相，加入a、b相的混合物中，再次进行均质，转速为1500r/min，均质时间7min；冷却至室温，分装入瓶，即得到防晒霜。本发明的有益效果为：本发明通过对大鲵低聚糖肽的活性特征进行研究，为克服大鲵低聚糖肽制成护肤产品活性不稳定的技术难题，本发明通过了大量的筛选试验，发现大鲵低聚糖肽在辛癸酸甘油酯、生育酚、葡萄籽油组成的基质环境活性非常稳定，不易变性失活，并且发现葡萄籽油和艾片不仅协调大鲵低聚糖肽增强防紫外线功效，而且能改善膏霜对皮肤适应性，对皮肤的无刺激性，使用皮肤无紧绷感，清凉舒适，同时还具有清除自由基、抗氧化、消炎、保湿、养颜等功能。实验例1：本发明防晒霜防晒作用的试验研究：1.1试验对象：取普通级昆明种雌性小鼠80只，体重17-20g，由贵州医科大学提供。1.2试验材料：总超氧化物歧化酶(superoxidedismu－tase,sod)和丙二醛(malondialdehyde,mda)活性测定试剂盒。1.3仪器bf-x5-320低速医用离心机：白洋离心机厂；vis-722可见光分光光度计：上海绿宇生物科技有限公司；恒温水温箱：上海浦东荣丰科学仪器有限公司；olympusbx41光学纤维镜。1.4实验方法：1.4.1动物选择及分组造模前将80只小鼠随机分成6组：空白对照组、模型组、试验组1-5，对照组，每组10只。1.4.2动物模型制作及给药方法脱毛先用剪刀剪去鼠背上的粗毛，再用一次性医用刮毛刀将剩余的绒毛剃除干净，使背部皮肤充分暴露，剃毛面积约2cm×1cm。每周脱毛1次，脱毛后用温清水洗净。给药及紫外线照射每天正常喂养，给以充足的水分及食物。试验组1-5在晒前30min于剃毛小鼠背部按0.5g/cm2分别涂抹本发明实施例1-5制得的防晒霜，阳性对照组在晒前30min于剃毛小鼠背部按0.5g/cm2涂抹spf20(pa++)丁家宜美白防晒霜(购于屈臣氏)，模型组不涂任何防晒霜，以上8组在7-8月份11点到3点钟日光照射1h(分段完成每次照射至小鼠面部出汗约30min，即将小鼠移自室内休息30min，然后按上法再照射30min，累计照射量达1h)连续照射4周。空白对照组不予日光照射，也不涂任何防晒霜。1.5取材及指标测定取材实验第4周末，小鼠背部再次脱毛，面积为2cm×1cm。断颈处死全部小鼠后，立即取下背部脱毛处全层皮肤；每个小鼠皮肤组织标本取0.1-0.2g，在冰生理盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，用眼科小剪剪碎组织块，倒入玻璃匀浆管中；用量筒量取9倍冷生理盐水，倒入匀浆器中进行匀浆；以3000r/min的速度离心10min；取上清液严格按照sod和mda试剂盒要求进行指标测定。统计学方法采用spss16.0统计软件进行分析，实验数据以均数±标准差(x±s)表示，进行方差分析。试验结果如下表1：表1：各组试验动物皮肤中sod活性及mda含量的比较(x±s)组别动物数sod(u/mgprot)mda(nmol/mgprot)空白对照组10160.64±54.2915.83±3.25模型组1056.44±14.2921.93±3.25试验组110118.54±13.0310.33±4.16试验组210120.62±14.3110.97±3.88试验组310162.23±15.598.74±3.17试验组410165.43±17.436.69±3.37试验组510164.67±54.296.61±3.66阳性对照组10106.14±15.2313.23±5.4结果表明：结果与模型组比较，试验组1-5各组小鼠皮肤组织中sod活性逐渐上升，与模型组差异有统计学意义(p<0.01)；而各组小鼠皮肤组织中mda含量逐渐下降，且与模型组差异都有统计学意义(均p<0.01)；试验组1-5及对照组与模型组相比小鼠皮肤组织老化、炎症及色素沉着均有减轻，其中以中试验组3-4效果最为明显。说明基质葡萄籽油与冰片对协同大鲵低聚糖肽抗紫外线作用具有协同作用，说明本发明制得的含大鲵低聚糖肽防晒霜对日光所致小鼠剃毛背部皮肤有防晒作用，且防晒效果优于spf20(pa++)丁家宜美白防晒，防晒指数高于spf20(pa++)。2、产品质量稳定性考察：将本发明制得的防晒霜进行稳定性试验考察，试验组1-5为本发明实施例1-5制得的防晒霜，室温保存1年后，经常检测考察，考察指标：大鲵低聚糖肽变性失活率(％)＝试验前大鲵低聚糖肽活性含量-试验后大鲵低聚糖肽活性含量/试验前大鲵低聚糖肽活性含量*100％，试验结果如下表2：表2：含大鲵低聚糖肽质量稳定性考察结果组别试验后大鲵低聚糖肽变性失活率(％)试验组137.9试验组224.1试验组311.6试验组48.9试验组59.3试验组623.8试验结果表明：试验组3-5试验前、后大鲵低聚糖活性含量与试验组1-2和试验组6比较，其下降率明显低于试验组1-2和试验6，说明本发明筛选的基质：辛癸酸甘油酯、生育酚、葡萄籽油对提高大鲵低聚糖肽稳定性具有很好的效果，制得的防晒霜稳定性非常好。具体实施方式：实施例1含大鲵低聚糖肽防晒霜的制备：(去除葡萄籽油)配方：大鲵低聚糖肽12g、辛癸酸甘油酯20g、生育酚6g、硬脂醇醚10g、冰片2g、单硬脂酸甘油酯6g，红橘油2g、去离子水10g；制备方法：(1)将辛癸酸甘油酯、生育酚、红橘油、单硬脂酸甘油酯混合作为a相，加热至60℃；(2)将去离子水、硬脂醇醚、羟基本甲酸丙酯作为b相，加热至80℃；(3)把a相加入b相中，进行均质，转速500r/min，均质时间10min；当温度回落至30℃时，将大鲵低聚糖肽、去离子水、水育酚混合均匀作为c相，加入a、b相的混合物中，再次进行均质，转速为1000r/min，均质时间6min；冷却至室温，分装入瓶，即得到防晒霜。实施例2含大鲵低聚糖肽防晒霜的制备：(去除冰片)配方：大鲵低聚糖肽12g、辛癸酸甘油酯20g、生育酚6g、葡萄籽油4g、硬脂醇醚10g、单硬脂酸甘油酯6g，红橘油2g、去离子水10g；制备方法：(1)将辛癸酸甘油酯、生育酚、红橘油、单硬脂酸甘油酯混合作为a相，加热至60℃；(2)将去离子水、硬脂醇醚、羟基本甲酸丙酯作为b相，加热至80℃；(3)把a相加入b相中，进行均质，转速500r/min，均质时间10min；当温度回落至30℃时，将大鲵低聚糖肽、去离子水、水育酚混合均匀作为c相，加入a、b相的混合物中，再次进行均质，转速为1000r/min，均质时间6min；冷却至室温，分装入瓶，即得到防晒霜。实施例3含大鲵低聚糖肽防晒霜的制备：配方：大鲵低聚糖肽12g、辛癸酸甘油酯20g、生育酚6g、葡萄籽油4g、硬脂醇醚10g、单硬脂酸甘油酯6g，红橘油2g、冰片2g、去离子水10g；制备方法：(1)将辛癸酸甘油酯、生育酚、葡萄籽油、红橘油、单硬脂酸甘油酯混合作为a相，加热至60℃；(2)将去离子水、硬脂醇醚、羟基本甲酸丙酯作为b相，加热至80℃；(3)把a相加入b相中，进行均质，转速500r/min，均质时间10min；当温度回落至30℃时，将大鲵低聚糖肽、去离子水、水育酚混合均匀作为c相，加入a、b相的混合物中，再次进行均质，转速为1000r/min，均质时间6min；冷却至室温，分装入瓶，即得到防晒霜。实施例4含大鲵低聚糖肽防晒霜的制备：配方：大鲵低聚糖肽15g、辛癸酸甘油酯23g、生育酚8g、葡萄籽油5份、硬脂醇醚13份、艾片3份、单硬脂酸甘油酯9份、红橘油3份、去离子水13份。制备方法：(1)将辛癸酸甘油酯、生育酚、葡萄籽油、红橘油单硬脂酸甘油酯混合作为a相，加热至65℃；(2)将去离子水、硬脂醇醚、羟基本甲酸丙酯作为b相，加热至85℃；(3)把a相加入b相中，进行均质，转速700r/min，均质时间15min；当温度回落至30℃～40℃时，将大鲵低聚糖肽、去离子水、水育酚混合均匀作为c相，加入a、b相的混合物中，再次进行均质，转速为1500r/min，均质时间7min；冷却至室温，分装入瓶，即得到防晒霜。实施例5含大鲵低聚糖肽防晒霜的制备：配方：大鲵低聚糖肽18g、辛癸酸甘油酯26g、生育酚10g、葡萄籽油6g、硬脂醇醚16g、冰片4g、单硬脂酸甘油酯12g，红橘油4g、去离子水16g。制备方法：(1)将辛癸酸甘油酯、生育酚、葡萄籽油、红橘油单硬脂酸甘油酯混合作为a相，加热至70℃；(2)将去离子水、硬脂醇醚、羟基本甲酸丙酯作为b相，加热至90℃；(3)把a相加入b相中，进行均质，转速800r/min，均质时间20min；当温度回落至40℃时，将大鲵低聚糖肽、去离子水、水育酚混合均匀作为c相，加入a、b相的混合物中，再次进行均质，转速为2000r/min，均质时间8min；冷却至室温，分装入瓶，即得到防晒霜。实施例6含大鲵低聚糖肽防晒霜的制备：(去生育酚)配方：大鲵低聚糖肽18g、辛癸酸甘油酯26g、葡萄籽油6g、硬脂醇醚16g、冰片4g、单硬脂酸甘油酯12g，红橘油4g、去离子水16g。制备方法：(1)将辛癸酸甘油酯、葡萄籽油、红橘油单硬脂酸甘油酯混合作为a相，加热至70℃；(2)将去离子水、硬脂醇醚、羟基本甲酸丙酯作为b相，加热至90℃；(3)把a相加入b相中，进行均质，转速800r/min，均质时间20min；当温度回落至40℃时，将大鲵低聚糖肽、去离子水、水育酚混合均匀作为c相，加入a、b相的混合物中，再次进行均质，转速为2000r/min，均质时间8min；冷却至室温，分装入瓶，即得到防晒霜。当前第1页12