两亲性纳米药物及其制备方法和应用与流程

本发明属于药物化学领域，涉及两亲性纳米药物，还涉及两亲性纳米药物的制备方法和应用。

背景技术：

随着人们生活水平的提高，健康问题也日益突出。而癌症正是目前影响人类身体健康，威胁人类生命的主要疾病之一。因此，世界卫生组织和各国卫生部门将攻克癌症作为一项首要任务。目前治疗癌症的方法主要有三种：一是手术治疗，也是最古老的癌症治疗方法，即用手术切除的方法将癌变组织切除，防止癌细胞扩散。二是采用化疗或者放疗的方法，三是药物治疗。手术切除的方法对人体创伤较大，导致患者免疫力下降，对疾病的抵抗能力下降。而且手术切除属于局部性治疗，更多的只适用于癌症早期。同时手术治疗也存在这一定的风险，术后容易出现复发或者转移。用放疗的方法，在杀死癌细胞的同时也会杀死其他正常细胞，而使病人产生全身性的症状反应。而药物治疗，特别是靶向药物治疗，能够高效杀死癌细胞，而对患者身体毒副作用大大减低，使患者的整体效果得到很大的改善。而我们研究中的药物索拉非尼(sorafenib)正是一种靶向治疗药物，与化疗药物不同，其能有效抑制肿瘤细胞增殖和肿瘤血管生成，而非细胞毒效应，因此，索拉非尼具有潜在广谱的抗肿瘤作用。治疗无法手术或远处转移的肝肿瘤细胞；治疗不能手术的肾肿瘤细胞；治疗对放射性碘治疗不再有效的局部复发或转移性、逐步分化型甲状腺患者。索拉非尼无细胞毒效应，可稳定病情，延长患者的无疾病进展生存期。索拉非尼也是世界上第一个也是唯一一个被医学证实能够可以显著延长肝癌患者生存时间的有效治疗药物。而正是这一系列的优势促进了索拉非尼的发展和应用。其应用于不能手术的晚期肝癌患者的治疗具有重要意义。

索拉非尼抑制肿瘤细胞增殖和肿瘤血管生成的作用机制如下：通过抑制raf-1和b-raf丝氨酸和苏氨酸激酶的活性，从而抑制ras/raf/mek/erk信号传导通路，抑制肿瘤细胞的增殖；索拉非尼抑制肿瘤新生血管生成。肿瘤的生长依赖新生血管的形成，vegfr和pdgfr是最重要的促进血管形成的调节因子。索拉非尼对这两种受体的酪氨酸激酶活性有抑制作用，因此，阻断肿瘤新生血管的形成和切断肿瘤细胞的营养供应，间接抑制肿瘤细胞的生长。

索拉非尼是基于对肿瘤发生的分子生物学机制进一步明确的基础上研制成功的新药，具有独特的多靶点抗肿瘤作用。无细胞毒效应，可稳定病情，延长患者的无疾病进展生存期。其在晚期。肾癌治疗中所取得的成功给靶向药物的研发带来了新的启迪，在欧洲其治疗肝癌作为第2个适应症已经同意批准，在美国也得到了肯定的意见。如何制定最佳的方案以提高其疗效是我们当今研究中面临的重要问题。

索拉非尼的疏水性强，生物利用度低，所以改善其水溶性是我们急需解决的问题。甲苯磺酸索拉非尼的研制成功，给晚期肝癌患者带来了福音。现有的剂型是甲苯磺酸索拉非尼片，推荐的剂量是400毫克一次，每日两次，尽管已经减少了剂量，但任有不可避免的不良事件的发生。多个临床研究表明，索拉非尼常见的不良反应有腹泻、乏力、手足综合症、高血压、皮疹、呕吐等。其多为轻中度，经减量及对症治疗后可缓解，最主要的3/4级不良反应包括乏力、手足综合症和腹泻。减量、中断或退出索拉非尼治疗可能影响药物的疗效。因此，早期有效地控制不良反应，同时维持索拉非尼治疗，对于提高临床疗效，提高患者的生活质量和对药物的依从性尤为重要。降低索拉非尼的毒副作用，提高生物利用度，增加药物的水溶性等仍是我们亟待解决的问题。

技术实现要素：

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种两亲性纳米药物；本发明的目的之二在于提供两亲性纳米药物的制备方法，本发明的目的之三在于提供两亲性纳米药物的应用。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1、一种两亲性纳米药物，其结构为a-b-l-d，其中a为亲水性基团，选自或peg200～10000；b为n为1～10的正整数；l为可断裂基团，选自d为疏水性药物，选自阿霉素、喜树碱、吉西他滨、伊立替康、紫杉醇或雷公藤甲素。

本发明中，所述peg200～10000为直链peg200～10000、支链peg200～10000或3-8臂peg200～10000。

本发明中，所述可断裂基团为

本发明中，所述疏水性药物选自

本发明中，其结构为t-a-b-l-d形式，其中t为靶向基团，选自半乳糖、lhrh、乳糖或叶酸。

优选的，其结构如式ⅱ所示：

所述a、b和c为氢、

2、所述两亲性纳米药物的制备方法，包括如下步骤：

(1)将可断裂的二硫键通过迈克尔加成反应接到氨基功能化的peg上，制备得到末端功能化且具有两亲性peg分子；

(2)将步骤(1)所述两亲性peg分子与疏水性药物的酰胺基上的氢进行反应，从而得到两亲性纳米药物。

优选的，所述疏水性药物选自阿霉素、喜树碱、吉西他滨、伊立替康、紫杉醇或雷公藤甲素。

3、所述两亲性纳米药物制备治疗肿瘤药物中的应用。

优选的，所述两亲性纳米药物为索拉菲尼两亲性纳米药物，所述肿瘤为肝癌。

本发明的有益效果在于：在众多肿瘤治疗药物中，疏水性强，生物利用度低，毒副作用大。索拉非尼的本发明利用两亲性分子的特殊结构，既改善了疏水性药物的水溶性，又使新得到的分子在水溶性中能够形成纳米粒子，从而提高了药物的被动靶向性，增强了药效，减少了可能的副作用。本发明所设计的新药物分子，水溶性好，结构确定，易于进行重复和表征，并且较好的治疗作用。

附图说明

为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本发明提供如下附图进行说明：

图1为scns氢谱图。

图2为scns在水溶液中的粒径。

图3为scns与索拉非尼抗肝癌细胞(hepg2)结果(a：索拉非尼；b：scns)。

具体实施方式

下面将结合附图，对本发明的优选实施例进行详细的描述。

实施例1

将可断裂的二硫键通过迈克尔加成反应接到氨基功能化的peg上，制备得到末端功能化且具有两亲性的peg分子(化合物ⅰ)，具体路线如下：

然后将化合物i与索拉菲尼a部分酰胺基氢进行反应，从而得到最终化合物scns，具体路线如下：

化合物scns氢谱图结果如图1所示。结果表明：经过迈克尔加成反应，索拉菲尼被成功的接到了peg上。

实施例2

将实施例1合成的scns的水溶性与索拉菲尼的溶解性进行比较发现，结果如表1所示。

表1、scns与索拉菲尼的水溶性比较

结果显示，索拉菲尼几乎完全不溶于水，而经改进后的化合物scns具有良好的水溶性。

实施例3

将scns在水溶液中的形貌进行了粒径测定，结果如图2所示。实验结果表明，得到的化合物在水溶性中形成了200nm左右的纳米颗粒，有利于进入细胞和静脉给药。

实施例4

将scns以及索拉菲尼进行了肝癌细胞(hepg2)的mtt实验，具体方法如下：

1、取96孔板，每孔加入100μl培养液，将细胞悬液制备好后，轻轻混匀，再往加有培养液的孔中加入10ul细胞悬液。混匀之后放入5％co2，37℃培养箱孵育24小时。

2、24小时后，按照一定的浓度梯度加入对应量的药物，5％co2，37℃培养箱中培养48小时。

3、48小时后，吸出培养液，每个孔中加入20μlmtt溶液(mtt配成的终浓度为5mg/ml，用pbs做溶剂)，5％co2，37℃培养箱中培养4小时。

4、每个孔中加入100μldmso，即可看到有紫色的甲瓒析出。将溶剂与甲瓒充分混匀，酶标仪检测吸光度，即可得出细胞生存状态。

结果如图3所示，结果显示，随着scns浓度逐渐增加，肝癌细胞的存活率降低，并且趋势与索拉菲尼基本一致，表明本发明制得的scns同样具有很好的抗肝癌作用。

最后说明的是，以上优选实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。