治疗动物菌血症的复方穿心莲组合物的制作方法

本发明属于大肠杆菌引起的菌血症感染治疗
技术领域：
，尤其涉及一种治疗动物菌血症的复方穿心莲组合物。
背景技术：
：菌血症是指外界的细菌经由体表的入口或是感染的入口进入血液系统后，在机体血液内繁殖并随血流在全身播散，是机体感染的严重炎症反应，是全球重症监护病房的发病率和死亡率的主要原因；也是我国乃至全世界急危重症领域普遍面临的难题。在耐药性细菌增多的大环境下，无疑对icu病房来讲更是雪上加霜，在许多文献报道医院所有败血症发生的案例中，因耐药大肠杆菌感染而引起的菌血症竟占40％以上，尤其是因产超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrumβ-lactamase,esbl)耐药大肠杆菌导致的菌血症死亡率更高。大肠杆菌是常见的条件致病菌，也是常发的一种疾病，它可原发引起鸡急性败血症、腹膜炎、肝炎、肺炎、肠炎等多部位严重全身感染，亦可继发或混发于病毒病，给养殖业造成巨大的经济损失。阿莫西林、氨苄西林、头孢噻呋、头孢曲松、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦等β-内酰胺环类抗生素是防治该病的常用的重要药物，随着养殖规模集约化程度愈来愈大，用药愈来愈泛滥，其耐药菌株愈来愈多，关于大肠杆菌耐药性的报道也较多。研究证实，耐药的主要机制之一是产生β-内酰胺酶，尤其是超广谱β-内酰胺酶(esbls)，该酶能较强和快速地水解β-内酰胺环，使这类抗生素丧失抗菌活性。esbls是β-内酰胺酶的最主要酶型，它不仅对头孢三代和氨曲南耐药，而且对氨基糖苷类、喹诺酮类和磺胺类呈交叉耐药，仅对碳青霉烯类、头霉烯类药物敏感。许多文献已经报道大肠杆菌的多重耐药性与产生esbls有密切关系，国内外对之较为关注。发明人最近开展了食品动物源致病菌esbls的检测、提取、酶对抗生素的水解率及舒巴坦、他唑巴坦以及中药的抑酶保护作用等研究，对部分esbls大肠杆菌的药敏试验表明，其多重耐药率明显高于非esbls菌株。另外，结果还表明产esbls菌株不仅对头孢噻呋等第三代头孢菌素严重耐药，而且亦对氟喹诺酮类、氨基糖苷类和磺胺类、磷霉素等多种抗菌药耐药，呈严重的多重耐药。发明人在产esbls菌株中分离到耐磷霉素产fosa3耐药基因的大肠杆菌，更加强了细菌的耐药性。细菌的耐药性造成养殖户治疗耐药菌引起的菌血症疾病时用药成本增加，治疗疗程延长，畜禽死亡率增加，给生产带来较大经济损失，并且增加畜禽药物残留风险。因此，实际生产中亟需一种对无论是否耐药的大肠杆菌都能有较好治疗作用的药物，减少死亡率，降低经济损失且无药物残留的绿色产品，提高食品动物出栏的质量，为养殖户创造更高的经济效益，也保障人类的健康安全。技术实现要素：本发明要解决的技术问题是提供一种含穿心莲、大青叶、辣廖的复方组合物，它能够杀死无论是否耐药的大肠杆菌，克服抗菌药治疗由于耐药性问题造成的疗效差、用量大、残留高和成本高的缺陷，避免了单纯中药杀菌谱窄、杀菌慢的问题。为解决以上技术问题，本发明采用以下技术方案：一种治疗动物菌血症的复方穿心莲组合物，由以下重量份的原料组成：辣廖15-100份，大青叶15-100份，穿心莲15-170份。优选地，所述的辣廖30-80份，大青叶30-80份，穿心莲50-130份。优选地，所述的复方组合物制备成散剂、片剂、口服液或颗粒剂。优选地，所述的散剂的制备方法为将辣廖、大青叶、穿心莲粉碎至过20-100目筛、混匀，即得。优选地，所述片剂的制备方法为：将辣廖、大青叶、穿心莲粉碎、添加65％乙醇、5.5％玉米淀粉糊，混合均匀后，制粒，压片，即得。优选地，所述的口服液的制备方法为：将辣廖、大青叶、穿心莲70-80℃进行水提2小时，浓缩，加水稀释，浓度为10％，即得。优选地，所述的颗粒剂的制备方法为：将所述的辣廖、大青叶、穿心莲粉碎、添加65％乙醇、5.5％玉米淀粉糊，制粒即得。针对目前动物大肠杆菌感染存在的耐药性问题，发明人利用广西特色药材穿心莲与大青叶、辣廖组成复方组合物。本实验室研究证明穿心莲可以很好治疗菌血症，也有报道，本发明的创新是该药配伍大青叶、辣廖后效果较好，尤其比传统中药方剂四味穿心莲散(穿心莲、辣廖、大青叶、葫芦茶)少了1味药，成本更低，且效果更好，无论感染的病原是否具有耐药性，该组合物对全身感染的菌血症比单及四味穿心莲散具有更好的效果。经过实验确定穿心莲等三味中药进行复方配伍治疗菌血症为较好的配伍达到较好效果。按常规方法将该复方药物制成散剂、片剂、口服液或颗粒剂，按照1-10g主药/kg饲料的添加量添加到畜禽饲料中进行饲喂，可大幅降低用药成本和药物残留，为养殖户创造更高的经济效益，同时也确保了食品安全。附图说明图1：同时含fosa3(1)和ctx-m(2)菌株；图2：同时含ctx-m(1)和mcr-1(2)菌株具体实施方式一、实施例实施例1一种治疗动物菌血症的复方穿心莲组合物，由以下重量份的原料组成：辣廖15份，大青叶15份，穿心莲15份。所述的复方组合物制备成散剂。所述的散剂的制备方法为将辣廖、大青叶、穿心莲粉碎至过20-100目筛、混匀，即得。应用于病鸡的使用。实施例2一种治疗动物菌血症的复方穿心莲组合物，由以下重量份的原料组成：辣廖100份，大青叶100份，穿心莲170份。所述的复方组合物制备成片剂。所述片剂的制备方法为：将辣廖、大青叶、穿心莲粉碎、添加65％乙醇、5.5％玉米淀粉糊，混合均匀后，制粒，压片，即得。应用于病鸭的使用。实施例3一种治疗动物菌血症的复方穿心莲组合物，由以下重量份的原料组成：辣廖30份，大青叶30份，穿心莲50份。所述的复方组合物制备成口服液。所述的口服液的制备方法为：将辣廖、大青叶、穿心莲80℃进行水提2小时，浓缩，加水稀释，浓度为10％，即得。应用于病鹅的使用。实施例4一种治疗动物菌血症的复方穿心莲组合物，由以下重量份的原料组成：辣廖80份，大青叶80份，穿心莲130份。所述的复方组合物制备成颗粒剂。所述的颗粒剂的制备方法为：将所述的辣廖、大青叶、穿心莲粉碎、添加65％乙醇、5.5％玉米淀粉糊，制粒即得。应用于病猪的使用。实施例5一种治疗动物菌血症的复方穿心莲组合物，由以下重量份的原料组成：辣廖50份，大青叶50份，穿心莲90份。所述的复方组合物制备成颗粒剂。所述的颗粒剂的制备方法为：将所述的辣廖、大青叶、穿心莲粉碎、添加65％乙醇、5.5％玉米淀粉糊，制粒即得。应用于病牛的使用。实施例6一种治疗动物菌血症的复方穿心莲组合物，由以下重量份的原料组成：辣廖50份，大青叶50份，穿心莲90份。所述的复方组合物制备成颗粒剂。所述的颗粒剂的制备方法为：将所述的辣廖、大青叶、穿心莲粉碎、添加65％乙醇、5.5％玉米淀粉糊，制粒即得。应用于病羊的使用。二、穿心莲与大青叶、辣廖配伍治疗耐药大肠杆菌引起菌血症效果临床收集患有大肠杆菌疾病畜禽的病料，划线接种于麦康凯筛选培养基，37℃过夜培养，挑取单个的菌落，继续分离培养，然后革兰氏染色与镜检，初步确定为大肠杆菌，再用肠杆菌科的细菌生化鉴定管进行鉴定，确定分离细菌为大肠杆菌，并用fosa3、ctx-m、tem、shv等耐药基因的引物进行扩增，确定分离的耐药大肠杆菌的耐药基因型，再用小鼠回归实验确定其致病性。结果分离的耐药菌部分菌株含有tem、ctx-m、fosa3、mcr-1等，或同时含有两种耐药基因如ctx-m和fosa3、ctx-m和mcr-1，见图1、图2。确定致病性的细菌后，按本实验室的建立大肠杆菌菌血症疾病模型的方法进行建立疾病模型。经过攻毒后的小鼠发病后按本实验室建立的症状与疾病状态对应关系的方法进行打分，分别将计入1分阶段的小鼠进行分组，分别筛选单药及复方药物(根据传统方剂或辨证施治组合)体内治疗实验，以便确定最终治疗效果较好的药物。经过体内治疗实验，确定穿心莲+大青叶+辣廖治疗效果最好，单味中药也有一定效果，但不如三味中药进行复方。其他一些苦寒抗菌药物，虽然体外有效，但治疗大肠杆菌引起的败血症，其治疗效果一般，可能与辩证和体内吸收等情况原因有关。具体结果见下表：三、本发明复方药物的应用实例(一)本发明应用于病鸡按照以下方法制备实施例1-实施例4：将复方穿心莲按一定比例粉碎过60目筛后，作为基础原料，按常规方法，将复方药物制备成制剂产品。表2实施例1-4的配方及制备剂型编号穿心莲大青叶辣廖剂型实施例115g15g15g散剂实施例260g20g40g片剂实施例3120g100g60g口服液实施例4170g50g100g颗粒剂发明人将上述实施例1-4所得的复方药物产品，在广西贵港某鸡场进行疗效实验。临床症状：广西贵港某鸡场，25日龄肉鸡，鸡群出现零星死亡，剖检个别鸡出现包心包肝病理变化，典型的大肠杆菌疾病特征。实验室诊断：取病变肝脏染片，革兰氏染色，显微镜下观察，可见红色的革兰氏阴性杆菌；初步判断为大肠杆菌疾病。通过大肠杆菌培养，生化实验鉴别，判断小鸡感染为大肠杆菌疾病，pcr扩增，证明产有ctx-m型的esbls耐药基因。试验用药方案：将发病鸡群分成8组给药，第一组用实施例1按照1g/kg饲料的添加量给药，第二组用实施例2按照2g/kg饲料的添加量给药，第三组用实施例3按照6g/kg饲料的添加量给药，第四组用实施例4按照10g/kg饲料的添加量给药；第五组用穿心莲按照6g/kg饲料的添加量给药，第六组用辣廖散剂按照7g/kg饲料的添加量给药；第七组用大青叶按照6g/kg饲料的添加量给药，第八组用四味穿心莲散按照3g/kg饲料的添加量给药，以上八组用药方案均持续使用5天。其中，鸡饲料按照重量百分比为玉米55.3％，豆粕38％，磷酸氢钙1.4％，石粉1％，食盐0.3％，油3％，姜黄粉1％。效果反馈：第一组至第四组的鸡群用药后，病鸡采食量上升，不再出现死鸡，继续使用3天，鸡群基本痊愈；第五组的鸡群用药2天后，鸡群稍有明显改观，继续使用3天，鸡死亡现象仍没有得到有效控制；第六、七、八组的鸡群用药2天后，鸡群多数仍不健康，仍有个别鸡死亡，继续使用3天，鸡死亡现象仍没有得到有效控制；可见，三味穿心莲的复方组合物治疗菌血症时疗效优于单方，也优于四味穿心莲散，可能与四味穿心莲散主治消化道疾病有关。(二)本发明用于病鸭按照以下方法制备实施例1-实施例4：将复方穿心莲按一定比例粉碎过60目筛后，作为基础原料，按常规方法，将复方药物制备成制剂产品。表3实施例1-4的配方及制备剂型编号穿心莲大青叶辣廖剂型实施例115g15g15g散剂实施例260g20g40g片剂实施例3120g100g60g口服液实施例4170g50g100g颗粒剂发明人将上述实施例1-4所得的复方药物产品，在广西贵港某鸭场进行疗效实验。临床症状：广西贵港某鸭场，25日龄肉鸭，鸭群出现零星死亡，剖检个别鸭出现包心包肝病理变化，典型的大肠杆菌疾病特征。实验室诊断：取病变肝脏染片，革兰氏染色，显微镜下观察，可见红色的革兰氏阴性杆菌；初步判断为大肠杆菌疾病。通过大肠杆菌培养，生化实验鉴别，判断小鸭感染为大肠杆菌疾病，pcr扩增，证明产有ctx-m型的esbls耐药基因。试验用药方案：将发病鸭群分成8组给药，第一组用实施例1按照1g/kg饲料的添加量给药，第二组用实施例2按照2g/kg饲料的添加量给药，第三组用实施例3按照6g/kg饲料的添加量给药，第四组用实施例4按照10g/kg饲料的添加量给药；第五组用穿心莲按照6g/kg饲料的添加量给药，第六组用辣廖散剂按照7g/kg饲料的添加量给药；第七组用大青叶按照6g/kg饲料的添加量给药，第八组用四味穿心莲散按照3g/kg饲料的添加量给药，以上八组用药方案均持续使用5天。所述的鸭饲料按照重量百分比为玉米58.2％，豆粕35％，磷酸氢钙1.4％，石粉1.1％，食盐0.3％，油3％，姜黄粉1％。效果反馈：第一组至第四组的鸭群用药后，病鸭采食量上升，不再出现死鸭，继续使用3天，鸭群基本痊愈；第五组的鸭群用药2天后，鸭群稍有明显改观，继续使用3天，鸭死亡现象仍没有得到有效控制；第六、七、八组的鸭群用药2天后，鸭群多数仍不健康，仍有个别鸭死亡，继续使用3天，鸭死亡现象仍没有得到有效控制；可见，三味穿心莲的复方组合物治疗菌血症时疗效优于单方，也优于四味穿心莲散，可能与四味穿心莲散主治消化道疾病有关。(三)本发明用于病鹅按照以下方法制备实施例1-实施例4：将复方穿心莲按一定比例粉碎过60目筛后，作为基础原料，按常规方法，将复方药物制备成制剂产品。表4实施例1-4的配方及制备剂型编号穿心莲大青叶辣廖剂型实施例115g15g15g散剂实施例260g20g40g片剂实施例3120g100g60g口服液实施例4170g50g100g颗粒剂发明人将上述实施例1-4所得的复方药物产品，在广西贵港某鹅场进行疗效实验。临床症状：广西贵港某鹅场，25日龄肉鹅，鹅群出现零星死亡，剖检个别鹅出现包心包肝病理变化，典型的大肠杆菌疾病特征。实验室诊断：取病变肝脏染片，革兰氏染色，显微镜下观察，可见红色的革兰氏阴性杆菌；初步判断为大肠杆菌疾病。通过大肠杆菌培养，生化实验鉴别，判断小鹅感染为大肠杆菌疾病，pcr扩增，证明产有ctx-m型的esbls耐药基因。试验用药方案：将发病鹅群分成8组给药，第一组用实施例1按照1g/kg饲料的添加量给药，第二组用实施例2按照2g/kg饲料的添加量给药，第三组用实施例3按照6g/kg饲料的添加量给药，第四组用实施例4按照10g/kg饲料的添加量给药；第五组用穿心莲按照6g/kg饲料的添加量给药，第六组用辣廖散剂按照7g/kg饲料的添加量给药；第七组用大青叶按照6g/kg饲料的添加量给药，第八组用四味穿心莲散按照3g/kg饲料的添加量给药，以上八组用药方案均持续使用5天。所述的鹅饲料按照重量百分比为玉米59.2％，麦麸2％，豆粕22.5％，菜粕9.5％，磷酸氢钙1.3％，石粉1.2％，食盐0.3％，油3％，姜黄粉1％。效果反馈：第一组至第四组的鹅群用药后，病鹅采食量上升，不再出现死鹅，继续使用3天，鹅群基本痊愈；第五组的鹅群用药2天后，鹅群稍有明显改观，继续使用3天，鹅死亡现象仍没有得到有效控制；第六、七、八组的鹅群用药2天后，鹅群多数仍不健康，仍有个别鹅死亡，继续使用3天，鹅死亡现象仍没有得到有效控制；可见，三味穿心莲的复方组合物治疗菌血症时疗效优于单方，也优于四味穿心莲散，可能与四味穿心莲散主治消化道疾病有关。(四)本发明用于病猪按照以下方法制备实施例1-实施例4：将复方穿心莲按一定比例粉碎过60目筛后，作为基础原料，按常规方法，将复方药物制备成制剂产品。表5实施例1-4的配方及制备剂型编号穿心莲大青叶辣廖剂型实施例115g15g15g散剂实施例260g20g40g片剂实施例3120g100g60g口服液实施例4170g50g100g颗粒剂发明人将上述实施例1-4所得的复方药物产品，在广西贵港某猪场进行疗效实验。临床症状：广西贵港某猪场，25日龄肉猪，猪群出现零星死亡，剖检个别猪出现包心包肝病理变化，典型的大肠杆菌疾病特征。实验室诊断：取病变肝脏染片，革兰氏染色，显微镜下观察，可见红色的革兰氏阴性杆菌；初步判断为大肠杆菌疾病。通过大肠杆菌培养，生化实验鉴别，判断小猪感染为大肠杆菌疾病，pcr扩增，证明产有ctx-m型的esbls耐药基因。试验用药方案：将发病猪群分成8组给药，第一组用实施例1按照1g/kg饲料的添加量给药，第二组用实施例2按照2g/kg饲料的添加量给药，第三组用实施例3按照6g/kg饲料的添加量给药，第四组用实施例4按照10g/kg饲料的添加量给药；第五组用穿心莲按照6g/kg饲料的添加量给药，第六组用辣廖散剂按照7g/kg饲料的添加量给药；第七组用大青叶按照6g/kg饲料的添加量给药，第八组用四味穿心莲散按照3g/kg饲料的添加量给药，以上八组用药方案均持续使用5天。其中猪饲料按照重量百分比为玉米59％，小麦麸13％，花生饼(豆饼)15％，草粉(玉米秸、地瓜蔓、花生蔓、苜蓿粉和青草粉)5％，国产鱼粉6％，骨粉1.5％，食盐(咸鱼粉不加盐)0.5％。效果反馈：第一组至第四组的猪群用药后，病猪采食量上升，不再出现死猪，继续使用3天，猪群基本痊愈；第五组的猪群用药2天后，猪群稍有明显改观，继续使用3天，猪死亡现象仍没有得到有效控制；第六、七、八组的猪群用药2天后，猪群多数仍不健康，仍有个别猪死亡，继续使用3天，猪死亡现象仍没有得到有效控制；可见，三味穿心莲的复方组合物治疗菌血症时疗效优于单方，也优于四味穿心莲散，可能与四味穿心莲散主治消化道疾病有关。(五)本发明用于病牛按照以下方法制备实施例1-实施例4：将复方穿心莲按一定比例粉碎过60目筛后，作为基础原料，按常规方法，将复方药物制备成制剂产品。表6实施例1-4的配方及制备剂型编号穿心莲大青叶辣廖剂型实施例115g15g15g散剂实施例260g20g40g片剂实施例3120g100g60g口服液实施例4170g50g100g颗粒剂发明人将上述实施例1-4所得的复方药物产品，在广西贵港某牛场进行疗效实验。临床症状：广西贵港某牛场，25日龄肉牛，牛群出现零星死亡，剖检个别牛出现包心包肝病理变化，典型的大肠杆菌疾病特征。实验室诊断：取病变肝脏染片，革兰氏染色，显微镜下观察，可见红色的革兰氏阴性杆菌；初步判断为大肠杆菌疾病。通过大肠杆菌培养，生化实验鉴别，判断小牛感染为大肠杆菌疾病，pcr扩增，证明产有ctx-m型的esbls耐药基因。试验用药方案：将发病牛群分成8组给药，第一组用实施例1按照1g/kg饲料的添加量给药，第二组用实施例2按照2g/kg饲料的添加量给药，第三组用实施例3按照6g/kg饲料的添加量给药，第四组用实施例4按照10g/kg饲料的添加量给药；第五组用穿心莲按照6g/kg饲料的添加量给药，第六组用辣廖散剂按照7g/kg饲料的添加量给药；第七组用大青叶按照6g/kg饲料的添加量给药，第八组用四味穿心莲散按照3g/kg饲料的添加量给药，以上八组用药方案均持续使用5天。其中牛饲料按照重量百分比为育肥牛饲料配方棉粕15％、豆粕10％、麦麸9％、玉米61％、预混料5％。效果反馈：第一组至第四组的牛群用药后，病牛采食量上升，不再出现死牛，继续使用3天，牛群基本痊愈；第五组的牛群用药2天后，牛群稍有明显改观，继续使用3天，牛死亡现象仍没有得到有效控制；第六、七、八组的牛群用药2天后，牛群多数仍不健康，仍有个别牛死亡，继续使用3天，牛死亡现象仍没有得到有效控制；可见，三味穿心莲的复方组合物治疗菌血症时疗效优于单方，也优于四味穿心莲散，可能与四味穿心莲散主治消化道疾病有关。(六)本发明用于病羊按照以下方法制备实施例1-实施例4：将复方穿心莲按一定比例粉碎过60目筛后，作为基础原料，按常规方法，将复方药物制备成制剂产品。表7实施例1-4的配方及制备剂型编号穿心莲大青叶辣廖剂型实施例115g15g15g散剂实施例260g20g40g片剂实施例3120g100g60g口服液实施例4170g50g100g颗粒剂发明人将上述实施例1-4所得的复方药物产品，在广西贵港某牛场进行疗效实验。临床症状：广西贵港某牛场，25日龄肉牛，牛群出现零星死亡，剖检个别牛出现包心包肝病理变化，典型的大肠杆菌疾病特征。实验室诊断：取病变肝脏染片，革兰氏染色，显微镜下观察，可见红色的革兰氏阴性杆菌；初步判断为大肠杆菌疾病。通过大肠杆菌培养，生化实验鉴别，判断小牛感染为大肠杆菌疾病，pcr扩增，证明产有ctx-m型的esbls耐药基因。试验用药方案：将发病牛群分成8组给药，第一组用实施例1按照1g/kg饲料的添加量给药，第二组用实施例2按照2g/kg饲料的添加量给药，第三组用实施例3按照6g/kg饲料的添加量给药，第四组用实施例4按照10g/kg饲料的添加量给药；第五组用穿心莲按照6g/kg饲料的添加量给药，第六组用辣廖散剂按照7g/kg饲料的添加量给药；第七组用大青叶按照6g/kg饲料的添加量给药，第八组用四味穿心莲散按照3g/kg饲料的添加量给药，以上八组用药方案均持续使用5天。其中羊饲料按照重量百分比为玉米51.9％，小麦麸24％，花生饼(豆饼)15％，草粉3％，国产鱼粉4.3％，骨粉1.3％，食盐0.5％。效果反馈：第一组至第四组的牛群用药后，病牛采食量上升，不再出现死牛，继续使用3天，牛群基本痊愈；第五组的牛群用药2天后，牛群稍有明显改观，继续使用3天，牛死亡现象仍没有得到有效控制；第六、七、八组的牛群用药2天后，牛群多数仍不健康，仍有个别牛死亡，继续使用3天，牛死亡现象仍没有得到有效控制；可见，三味穿心莲的复方组合物治疗菌血症时疗效优于单方，也优于四味穿心莲散，可能与四味穿心莲散主治消化道疾病有关。本领域技术人员将认识到，对以上描述做出众多变通是可能的，所以实施例仅是用来描述一个或多个特定实施方式。尽管已经描述和叙述了被看作本发明的示范实施例，本领域技术人员将会明白，可以对其作出各种改变和替换，而不会脱离本发明的精神。另外，可以做出许多修改以将特定情况适配到本发明的教义，而不会脱离在此描述的本发明中心概念。所以，本发明不受限于在此披露的特定实施例，但本发明可能还包括属于本发明范围的所有实施例及其等同物。当前第1页12