专利名称：维生素d酰胺衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的维生素D类似物，尤其是涉及在17—位有修饰侧链和显示细胞调节活性的1α—羟基维生素D3类似物。
众所周知，具有下式的维生素D3在钙代谢方面起着重要的作用，即促进钙和亚磷的肠吸收，保持血清内适当水平的钙和亚磷，以及在甲状旁腺激素存在下刺激钙从骨液体分隔区迁移。 大约20年前，人们就认识到维生素D在体内要经过羟基化作用，在25—位的羟基化发生在肝脏以及在1α—位的羟基化发生在肾脏，得到的1α，25—二羟基代谢物为生物活性物质。这一发现导致维生素D多种类似物的合成。对它们的评价表明，这种化合物或代谢物在1α—位和在24R—或25—位的羟基对于显示对钙代谢的基本作用是必要的。尽管，如上所述，这些羟基正常情况下最终将被引入体内，在24R—或25—位的羟基化比在1α—位的羟基化更易发生已被羟基化的维生素D类似物的应用还是由于它们的活性水平提高和作用迅速以及随后从体内排出而表明了基本的优点。人们将会理解1α—羟基化维生素D衍生物对患有肾病的病人是非常有益的。
目前使用的羟基化维生素D类似物的实例包括天然代谢物1α，25—二羟基维生素D3和1α—羟基维生素D3(其在体内易被25—羟基化)。其它据报道有前途的化合物包括1α，24R—二羟基维生素D3，上述化合物的D2类似物和在24—，26—和/或27—位带有氟原子的1α，25—二羟基类似物(见De Luca and Schnoes，Ann.Rev.Biochem.(1983)，52，pp.411—439和De Luca et al.，Top.Curr.Chem.(1979)，83，pp.1—65)。
更近期，人们认识到自然代谢物1α，25—二羟基维生素D3对细胞代谢还具有其它作用。这些细胞调节作用包括促进细胞成熟和分化(Tanaka et al.，Biochem.J.(1982)，204，pp.713—719；Amento etal.，J.Clin.Invest.(1984)，73，pp.731—739；Colston et al.，En-docrinology(1981)，108，pp.1083—1086；Abe et al.，Proc.Nat.A-cad.Sci.(1981)，78，pp.4990—4994)和免疫抑制作用(例如，对白细胞介素II产生的抑制)(Regby，Immunology Today(1988)，9，pp.54—58)。
再近期，人们发现了1α，25—二羟基维生素D3的免疫强化作用，该化合物能够刺激杀菌氧代谢物的产生和白细胞趋化性反应(例如，见Cohen et al.，J.Immunol.(1986)，136，pp.1049—1053)。人们知道，在机体防御外部各种传染方面白细胞起着主要作用(例如，见Roitt，Brostoff and Male，″Immunology″2nd Ed.(1989)，C.V.Mosby，St.Louis，sec 16.10—16.13 and 17.4—17.5)，例如，通过粘着和吞食侵入的生物体(趋化性反应)和/或通过产生过氧化物和/或其它毒性氧代谢物。人们还知道这种反应也可以被促细胞分裂剂如复合致癌佛波醇酯和γ—干扰素(它们与维生素D类似物结构上完全不同)刺激。
由于对细胞代谢方面有这些作用，1α，25—二羟基维生素D3原则上在多个领域具有治疗能力，如在治疗牛皮癣，炎症和自身免疫疾病，肿瘤和增生方面，在传染(尤其是细菌，病毒和真菌的)的化学疗法的辅助作用方面，以及在其它牵涉到单核吞噬细胞的治疗方式方面。lα，25—二羟基维生素D3和1α—羟基维生素D3还被建议用于治疗高血压(Lind et al.，Acta Med.Scand.(1987)，222，pp.423—427)和糖尿病(Inomata et al.，Bone Mineral(1986)，1，pp.187—192)，1α，25—二羟基维生素D3还被认为可以促进毛发生长(Lancct，4March 1989，p.478)，并可用于治疗痤疮(Malloy et al.，TricontinentalMeeting for Investigative Dermatology，Washington，1989)。
然而，由于这一足以引起期望的细胞调节，免疫抑制或免疫强化作用的剂量水平有引起不可接受的高钙血症的趋势，因此，正常情况下，1α，25—二羟基维生素D3和1α—羟基维生素D3在钙代谢方面的有力作用将妨碍这种使用。这还导致试图合成对钙代谢作用降低的新类似物，但它对细胞代谢仍表现出所需的作用。
有关表现出这一所需的至少达到中等水平分离活性的新类似物已有报道。因此，化合物MC—903(calcipotriol)，不是胆甾烷侧链通常的C25—C27构型，而是在24—位带有环丙基的一种22，23—不饱和1α，24R—二羟基维生素D3类似物，而且被用于牛皮癣治疗的临床试验中，据报道其对细胞成熟表现出比1α，25—二羟基维生素D3更大的作用，且表现更小的高钙血作用(Calverley，Tetrahedron(1987)，43，pp.4609—4619；and Holick，Arch.Dermatol.(1989)，125，pp.1692—1696)。对1α，25—二羟基维生素D3类似物也有类似的报道，例如，22—氧杂(Abe et al.，Endocrinology(1989)，124，pp.2645—2647)，24—和26—高(Ostrem et al.，J.Biol.Chem.(1987)，262，pp.14164—14171)，16—脱氢—23，24—乙炔基(Zhou et al.，Blood(1989)，74，pp.82—93)和19—降—10—二氢(Perlman et al.，Tetra-hedron Lett.(1990)，pp.1823—1824)。
以提高诱发分化活性和高钙血作用的区分为目的而研究的1α，25—二羟基维生素D3的其它类似物包括23—氧杂，23—硫杂和23—氮杂衍生物(Kubodera et al.，Chem.Pharm.Bull.(1991)，39，pp.3221—3224)，22—氧杂类似物带有不同大小的侧链(Kubodera etal.，Chem.Pharm.Bull.(1992)，40，pp.1494—1499)，和20—表类似物(Binderup et al.，Biochemical Pharmacology(1991)，42，pp.1569—1575)。
现在还无法从这些公开的内容推断究竟哪些化合物会表现出细胞调节活性(或无论任何活性的水平)或确定导致与细胞调节和钙代谢有关的活性区分的因素。因此，比如，人们已经观察到诱发分化活性与侧链长度或亲水性之间没有严格的关系。
该结果的主要部分说明胆甾烷型侧链或它们同种化合物的末端羟基的存在对于要表现显著细胞调节活性的化合物来说是必要的。然而，Ostrem等人(op.cit.)的发现表明，只有短的、未取代的17—位侧链(例如，异丙基或仲丁基，以高—或双—高—孕甾烷形式)的类似物表现出相当基本的诱发分化活性，并且比带有侧链羟基的相应的短侧链化合物更有效力。
一些提议的类似物明显表现出与1α，25—二羟基维生素D3水平相似的细胞调节活性，但也明显表现出对钙代谢的显著作用，这种活性相对于1α，25—二羟基维生素D3的活性来说至多弱两个量级。因此，如果长期治疗中使用这些化合物就可能引起毒性积累问题，特别是需要全身应用时，例如，对于炎症和自身免疫疾病，瘤形成和骨质增生的治疗，或口服治疗牛皮癣。因此，不断需要表现强有力的细胞调节活性同时对钙代谢作用降低的类维生素D化合物。
在我们共同未决的国际专利申请公开WO—A—9309093中描述了一些1α—羟基维生素D3衍生物和它们的20—表类似物，其中，17—位侧链终止于任选N—取代的或N，N—二取代氨基甲酰基。虽然这些衍生物对钙代谢表现出最小的作用，但可具有强有力的细胞调节作用，例如，引起细胞分化和成熟，抑制增殖和/或激活单核细胞(例如，用Styrt et al.，Blood(1986)，67，pp.334—342中所述方法估测)。已经发现，即使服用1α，25—二羟基维生素D3常规用量的100倍的上述国际申请中的化合物，对大鼠血清内钙和亚磷含量也没有明显作用，并表现出细胞调节对血钙活性的有利的治疗比例。
这些化合物的另一个优点是它们对肠内1α，25—二羟基胆钙化醇(维生素D3)受体的亲和力极低。
本发明是建立在我们发现大范围的其它1α—羟基维生素D类似物也可以表现出所要求的细胞调节活性和血钙作用的区分的基础上的，在上述类似物中，17—位侧链终止于任选取代的氨基甲酰基。
因此，根据本发明的一个方面，提供了通式(I)化合物， 其中R1和R2可以相同或不同，分别代表氢原子或脂族，环脂族，芳脂族或芳香基或与它们连接的氮原子一起形成一个杂环基；R3代表具有α—或β—构型的甲基；X代表一个共价键或C1-2亚烷基；Y代表—O—，—S—，—CH2—或—NR—，其中R是氢原子或有机基团；Z代表一个共价键或C1-3亚烷基；A＝代表1α—羟基化维生素D3或其类似物的A—环上的环亚己基部分，但如果当—X—Y—Z—一起代表包含最多4个碳原子的亚烷基时，A＝在10—位不带有外向环亚甲基。
当式(I)中的R1和/或R2代表脂族基时，它们可以是，例如，低级(如C1-6)烷基如甲基，乙基，丙基和丁基。环脂族基R1和/或R2可以包括，例如，低级环烷基，比如含有3—8个碳原子的基团，如环丙基，环戊基和环己基。芳脂族基例如可以包括C6-12芳基C1-4烷基，如苄基或苯乙基。芳基例如可以包括C6-12碳环芳基，如苯基或萘基，可以任选带有一个或多个取代基，例如卤素(如氯或溴)，低级(如C1-4)烷基如甲基，低级烷氧基(如甲氧基)，低级烷酰基(如乙酰基)，低级烷基氨基(如甲氨基)，二(低级烷基)氨基(如二甲氨基)，硝基，氨基甲酰基和低级烷酰基氨基(如乙酰氨基)。
如果基团R1R2N—代表杂环基，则可以包含，比如，一个或多个其它选自O，N和S的杂原子，和可以含有一个或多个环，比如，每个环含有5—或6—个环成员，例如，N—连接的吡咯基，吡唑基，咪唑基，吲哚基，二氢吲哚基，嘌呤基，呲咯烷基，咪唑烷基，吡唑烷基，哌啶基，吗啉代，噻唑烷基或噻吗啉代。
如果式(I)中的R3是α—构型的甲基，则该化合物具有天然维生素D衍生物的20R构型特点；如果R3呈β—构型，则该化合物具有表—维生素D衍生物的20S构型。因此，本发明还包括上述两种异构体的混合物。
X和Z代表的亚烷基比如可以是直链的，如亚甲基，亚乙基或(对于Z)三亚甲基。X和Z中碳原子的总数优选1—4。
如果Y代表—NR—，由R代表的有机基团包括，比如，低级(如C1-6)烷基如甲基，乙基，丙基或丁基；低级(如C3-8)环烷基如环丙基，环戊基或环己基；低级芳烷基，比如C6-12芳基—C1-4烷基如苄基；或低级酰基，例如C1—6烷酰基如乙酰基。
正常情况下，A＝代表的环亚己基环在1α—和3β—位带有羟基或其被保护的衍生物，并可以带有，例如，其它有助于提高抗增殖活性和/或刺激分化的取代基。因此，A＝，例如，可以由式(A—1)代表 其中R4和R5可以相同或不同，分别代表氢原子或O—保护基；R6和R7可以相同或不同，选自氢原子和适当的一或二价取代基。
如果R4和R5代表O—保护基，则它们可以是，例如，现有技术中众所周知的可去保护的O—保护基。适宜的基团包括醚化基团如甲硅烷基(例如，三(低级烷基)甲硅烷基如三甲基甲硅烷基，三乙基甲硅烷基，三异丙基甲硅烷基或叔丁基二甲基甲硅烷基；三(芳基)甲硅烷基如三苯基甲硅烷基；以及混合的烷基—芳基甲硅烷基)；可任选被一个氧原子隔开的低级(如C1-6)烷基，如甲基，甲氧基甲基或甲氧基乙氧基甲基；环基如四氢吡喃基。酯化O—保护基包括低级(如C1-6)烷酰基如乙酰基，丙酰基，异丁酰基或新戊酰；芳酰基(如含有7—15个碳原子)如苯基甲酰基或4—苯基偶氮基苯甲酰基；低级烷磺酰基如(任选被卤化的)甲磺酰基；以及芳烃磺酰基如对甲苯磺酰基。
在式(I)的活性1α，3β—二醇的制备中O—保护的衍生物可用作中间体，其中R4和R5代表氢原子。另外，如果在体内O—保护基代谢不稳定，则式(I)的这些醚和酯可以直接用于治疗。
有利地，至少R6和R7之一是氢原子。可存在的另一R6和R7取代基包括，例如，亚甲基，甲基和螺连接的环丙基。
上式(A—1)中的代表性A＝基团包括 由图可见，包含基团(A—2)和(A—3)的化合物分别是维生素D类似物的5，6—顺(即5Z)和5，6—反(即5E)异构体。类似地，包含基团(A—4)和(A—5)的化合物分别是10，19—二氢维生素D类似物的5，6—顺和5，6—反异构体，合基团(A—8)的化合物是19—降维生素D类似物。
本发明5，6—反异构体作为相应的5，6—顺异构体制备过程中的中间体是极有意义的，这将在下文更详细地描述。然而，其中R4和R5是氢原子或代谢不稳定基团的5，6—反异构体经常表现出细胞调节活性，例如，比相应的5，6—顺异构体小约一个数量级，因此可用它们进行治疗，特别是它们提高血清中钙含量的作用也可以降低，这就使细胞调节和血钙活性两种作用之间保持着明显的区分。
式(I)活性化合物可以具有可变大小的类维生素D17—位侧链，该侧链不带有24—或25—羟基，且在多数情况下在这些位置没有被羟基化的可能。这一事实表明细胞调节活性在以往该领域的发现中是意想不到的，并强烈表明羟基的必要性。发现式(I)活性化合物具有有用的细胞调节活性更令人惊讶，回顾以往的报道，具有相似的侧链却缺少1α—羟基的化合物没有类维生素D活性，而且事实上可用作维生素D拮抗剂，显然这是因为阻断25—羟基化(见美国专利4,217,288)。
人们已经注意到了(Sorensen et al.，Biochemical Pharmacology(1990)，39，pp.391—393)上述1α，24R—二羟基维生素D3类似物MC—903在体内被氧化成相应的24—氧代化合物，并注意到相对于MC—903就在细胞增生和分化方面的作用而言该代谢物表现出大大降低的活性。与我们关于对24—氧代和本发明的同种化合物的发现相比，这说明24—氧基的引入包括了关于细胞调节活性的减活化作用步骤。
本发明活性化合物的细胞调节活性，以及它们基本上缺乏血钙作用，使得它们在治疗肿瘤疾病，特别是骨髓性白血病方面令人感兴趣(单独使用和作为辅剂使用)。它们可以单独使用或作为辅剂用于传染病的化学治疗和所有其它治疗方式(其中牵涉到单核吞噬细胞)，例如在骨病(如骨质疏松症，骨质稀少症和佝偻病中的骨营养不良或肾病性骨营养不良)，自身免疫疾病，宿主—移植物反应，移植物排斥作用，炎症(包括免疫炎症反应的调节)，肿瘤和增生，肌病，肠病和脊椎炎心脏病的治疗中。本发明活性化合物还可以用于促进伤口愈合，甲状旁腺激素的抑制(例如，血清中钙的体内平衡)，以及治疗皮肤病(比如包括痤疮，脱发，湿疹，瘙痒，牛皮癣和皮肤老化，包括光老化)，高血压，类风湿性关节炎，关节炎性牛皮癣，继发性甲状旁腺机能亢进和哮喘。本发明包括这些化合物在治疗或预防上述疾病中的应用以及在制备用于这些治疗或预防的药物中的应用。
我们确信式(I)活性20R异构体可以优选用于治疗传染病，例如，结合治疗，而活性20S表异构体可以优选用于涉及免疫抑制作用的应用，例如治疗自身免疫疾病和炎症，类风湿性关节炎，哮喘等等。这个观点受到，例如，Binderup等人发表在Biochemical Pharmacology(1991)，42(8)，pp.1569—1575上的有关20—表维生素D3类似物的论著的支持。
本发明活性化合物可以制成常规途径给药的制剂形式，如口服(包括舌下)，胃肠外，直肠，局部或吸入给药等形式；如此制成的药物组合物也是本发明的一个方面。
如果需要，口服给药的组合物可以含有一种或多种生理上可接受的载体和/或赋形剂并且可以是固体或液体。这些组合物可以任何常规形式存在，例如，包括片剂，包衣片剂，胶囊，锭剂，水或油悬浮液，溶液，乳液，糖浆，弛剂和适合于用水或其它适宜液体载体在使用前可再配剂的干产品。这些组合物可有利地以单位剂量形式制备。如果需要，本发明的片剂和胶囊可以含有常规组分如粘合剂，例如，糖浆，阿拉伯胶，明胶，山梨醇，黄蓍胶或聚乙烯基—吡咯烷酮；填充剂如乳糖，蔗糖，玉米淀粉，磷酸钙，山梨醇或甘氨酸；润滑剂如硬脂酸镁，滑石，聚乙二醇或二氧化硅；崩解剂如马铃薯淀粉；或可接受的润湿剂如十二烷基硫酸钠。片剂可用现有技术中已知方法包衣。
液体组合物可以含有常规添加剂如悬浮剂，例如，山梨醇糖浆，甲基纤维素，葡萄糖/蔗糖浆，明胶，羟甲基纤维素，羧甲基纤维素，硬脂酸铝凝胶或氢化的食用脂肪；乳化剂如卵磷脂，单油酸脱水山梨醇酯或阿拉伯胶；非水载体可以包括食用油，例如，植物油如花生油，杏仁油，分馏的椰子油，鱼肝油，油酯如多乙氧基醚80，丙二醇或乙醇；以及防腐剂如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯或山梨酸。液体组合物通常可以装入比如明胶胶囊，制成单位剂量的产品。
用于胃肠外给药的组合物可以用可注射液体载体如无菌无热原水，无菌无过氧化物油酸乙酯，脱水乙醇或丙二醇或脱水乙醇/丙二醇混合物配制，并可以静脉内、腹膜内或肌肉内注射。
用于直肠给药的组合物可以用常规栓剂基质如可可脂或其它甘油酯制成制剂。
用于局部给药的组合物包括软膏，乳膏，凝胶，洗液，香波，涂剂，粉剂(包括喷粉)，阴道栓剂，塞子，喷剂，浸泡剂，气雾剂，灌注剂和滴剂。活性成分可以，比如，在适当亲水或疏水基质中配制。
用于吸入给药的组合物可用常规方法制成自推进传送剂型，比如以计量剂型，例如作为推进剂中的悬浮液如充入气雾容器中的卤化烃由计量分配阀控制。
在本发明组合物中加入抗氧化剂如抗坏血酸，丁基化羟基茴香醚或氢醌，有利于延长它们的存储寿命。
如果上述任何一种组合物以单位剂量形式制备，则每单位药剂可以，例如，含有0.05—250μg如0.1—50μg本发明活性化合物。如果需要，该组合物还可以加入一种或多种其它活性成分。
本发明活性化合物适宜的日剂量，比如，在0.1—500μg如0.2—100μg/天范围内，这取决于诸多因素如正在接受治疗的病人的病情轻重以及年龄，重量和状况等。
本发明化合物可以用常规方法，比如，下列方法之一制备A)式(I)5，6—顺化合物可以通过相应的5，6—反化合物异构化来制备，接着，如果必要和/或需要，除去任何O—保护基。异构化可以，比如，用碘，用二硫化物或联硒化物处理，或用紫外线照射，优选在三重敏化剂存在下完成。
B)式(I)5，6—反化合物可以通过使相应的1—未取代—5，6—反化合物如具有A＝基为下式的式(I)化合物羟基化来制备 (其中R4是氢或O—保护基)。该羟基化作用可以用亚硒酸酯(可以就地通过二氧化硒或亚硒酸与一种醇反应生成)，例如GB—A—2038834中所述，或用PH值在3—9之间的亚硒酸，如GB—A—2108506所述，来实现；上述两个说明书的内容在此作为参考。1—未取代—5，6—反化合物，如果需要，可以在氧化反应条件下通过相应的5，6—顺维生素就地异构化来制备。如果必要和/或需要，羟基化作用之后接着进行异构化和/或除去O—保护基。
C)使含有需要的17—位侧链前体的化合物进行一步或多步反应并与一个或多个为形成所需的侧链而使用的反应物反应，如果必要和/或需要，接着进行异构化和/或除去O—保护基。这些反应可以被认为是通式(II)化合物中基团L的转变， 其中R3和A＝定义如上，A＝优选具有O—保护基形式的(A—2)～(A—8)基团中的一个。应该注意到，其中A＝定义为(A—9)基团的化合物(II)也可以使用，之后，按照以上B)中所述方法进行1α—羟基化。
化合物(II)的反应可以分成下列几种C1)其中Y是—CH2—的化合物的制备这类反应典型地是在酰胺形成阶段之前进行一步或多步同系化，例如，按下列步骤进行步骤序号起始L 试剂/反应最终L1 -(CH2)qQ 金属氰化物 -(CH2)qCN2 -(CH2)qCN具有将氰基还原成-(CH2)qCH＝O醛官能团能力的金属氢化物还原剂，优选二异丁基氢化铝*3 -(CH2)qCH＝O 还原剂，如NaBH4， -(CH2)q＋1OHLiAlH44 -(CH2)qQ 金属化丙二酸酯 -(CH2)qCH(COORe)25 -(CH2)q.CH(COORe)2i)氢解成单酯 -(CH2)q＋1COOReii)热脱羧6 -(CH2)q＋1.COORe还原剂，如LiAlH4， -(CH2)q＋2OHNa/EtOH7 -(CH2)qQ 金属化乙酰胺衍 -(CH2)q＋1.CO.NR1R2生物8 -(CH2)q.COORe胺或来自相同胺的-(CH2)qCONR1R2胺化剂(直接或间接)*见Ando et al.，Chem.Pharm.Bull.(1992)，40，p.1662 KeyR1和R2定义如上；q是零或整数；Q是离去基团，例如，磺化酯基如低级烷基磺酰氧基，低级氟烷基磺酰氧基或芳基磺酰氧基或，更优选的，卤原子如氯，溴或碘；以及Re是一个酯化基团，例如，烃基如低级烷基或芳基。
人们会理解，在制备步骤3和6中的羟基可以转化成离去基团Q，例如，通过反应如甲苯磺酰化反应，然后将产物进一步同系化，例如，根据步骤1—3或步骤4—6，和/或，比如根据步骤7，形成酰胺。
步骤8可以间接地通过，比如，将酯水解成相应的酸来实现，该酸中L为—(CH2)qCOOH基团，并且，例如，在偶合剂如二环己基碳化二亚胺存在下，将其与R1R2NH胺反应；或者，也可以将该酸转化成一种活性衍生物如酰基卤，然后与R1R2NH胺反应。通过其酯与R1R2NH胺反应可以直接形成酰胺，但更优选用该胺的活化金属衍生物实现，例如Wang等人所述的锡(II)酰胺(J.Org.Chem.(1992)，57，pp.6101—6103)。
上述系列反应所用的起始原料包括式(III)化合物， (其中R4和R5定义如上)和/或它们的5，6—反异构体和相应的1—脱氧化合物；这些化合物可以通过维生素D2，1α—羟基维生素D2或它们O—保护的衍生物22，23—双键的氧化裂解(如臭氧分解)反应得到，这些化合物优选通过形成Diels Alder亲二烯加合物来稳定，例如，用二氧化硫或如GB—A—2114570(该文献内容在此仅作为参考)中所述的一种二氮杂环化合物。
这些20S化合物(III)，优选仍保留它们的亲二烯加合物形式，可以通过，比如，用弱碱处理来异构化，例如，用无机碱如碳酸氢钠或用叔有机碱如1，4—二氮杂双环〔2.2.2〕辛烷(“DABCO”)或1，8—二氮杂双环〔5.4.0〕十一—7—烯(“DBU”)。这就产生了20R和20S异构体的混合物，由此用色谱法分离出纯20R表—异构体；或者所需的表—异构体的分离可以推迟到合成的后期，直到并包括最后步骤。
式(III)化合物或相应的表—异构体的醛基的还原，例如，用金属氢化物还原剂如硼氢化钠生成相应的羟甲基化合物，即其中L为—CH2OH的化合物(II)。这可以转化成上面定义的其中L为—CH2Q的化合物(II)，例如，通过转化成磺酸酯(如甲苯磺酸酯)，接着，如果需要，通过与卤酸盐(如碱金属溴化物)反应进行磺酸酯基的亲核置换。
化合物(III)也可以氧化脱羰基，例如，如WO90/09991中所述，用氧与乙酸铜，2，2′—二吡啶基反应，用DABCO作催化剂，生成相应的20—酮化合物。它可以还原成20—羟基化合物，该化合物又可被转化成L为—(CH2)qQ，其中q＝0，的化合物(II)，例如通过甲苯磺酸化。与20—酮反应的还原剂的性质可以影响产物的立体化学；因此，比如，硼氢化钠有利于形成20—羟基化合物，其中21—甲基呈β—构型，而氢化铝锂或钠的乙醇有利于形成21—甲基呈α—构型的产物。
人们会理解任何牵涉到20—羟基或由此衍生的离去基团的亲核置换的后续反应将促进C20碳原子构型的反转。因此，如果反应系列包括在C20有奇数个这样的亲核置换，则从与最终所需构型相反的构型开始是必要的。
其中A＝代表上面定义的(A—9)基团和L代表O—保护羟基或羟甲基(例如，其中羟基比如是用低级烷酰基如乙酰基酯化的)的式(II)化合物可以如上面B)中所述进行1α—羟基化，得到其中A＝代表前面定义的(A—2)或(A—3)基团(其中R5代表氢)的化合物(II)。这些化合物或其被保护的衍生物，例如，其中R5是三甲基甲硅烷基，可以被氢化(例如，在贵金属催化剂如三—三苯基膦氯化铑存在下)生成其中A＝代表前面定义的(A—4)或(A—5)基团的相应的化合物，或可以被环丙基化(例如，在锌/铜对存在下与二碘甲烷反应)，得到其中A＝代表前面定义的(A—6)或(A—7)基团的相应化合物。如果需要，这样得到的化合物可以被转化为其中R5是O—保护基(例如，通过甲硅烷化)的化合物，并且可以水解(例如用碱如氢氧化钾或碳酸钾)或还原(例如用氢化铝锂)以除去侧链酯基，生成有用的其中L代表—OH或—CH2OH的起始原料(II)。
其中A＝代表上面定义的(A—8)基团和L是—CH2OH或—CHO的化合物(II)可以按Perlman et al.，Tetrahedron Letters(1992)，33，pp.2937—2940中所述方法制备。C2)其中Y是—O—的化合物的制备实现标题化合物的制备通常可以通过其中L是—X.OH(其中X如式(I)中定义)的化合物(II)，例如按上述C1)所述制备的，与式(IV)化合物反应，
Q.Z.CO.NR1R2(IV)(其中R1，R2和Z如式(I)中定义，Q定义如上，优选Q为卤原子)，或当Z是共价键和R1是氢原子时，与式(IVa)反应。
O＝C—NR2(IVa)或者间接形成酰胺衍生物，例如首先与式(V)化合物反应，Q.Z.CO.ORe(V)(其中Q，Z和Re如前面定义，酯化基团Re比如是支链或直链脂族基团，例如，叔烷基如叔丁基，或芳香族基团，例如，2，6—二烷基苯基或2，4，6—三烷基苯基如2，4—二甲苯基或_基)。所得酯如上面C1)中第8步所述可以转化成所需的酰胺。
使用其中L是—X.Q(符号定义如上，Q优选高活性离去基团如三氟乙酸酯，甲苯磺酸酯或三氟甲烷磺酸酯)化合物(II)作为起始原料是同样可能的，以及将其与式(VI)或(VII)化合物反应也是可以理解的。
HO.Z.CO.NR1R2(VI)HO.Z.CO.ORe(VII)(其中R1，R2，Re和Z定义如上)。
用于其中Z是亚乙基的化合物(I)的制备的另一种方法包括将其中L是—X.OH(其中X定义如上)的化合物(II)碱催化Michael加成为式(VIII)的丙烯酸酯，CH2＝CH.CO.ORe(VIII)(其中Re定义如上)，接着，例如，按上面C1)中第8步中所述将该酯基转化成所需的酰胺。
反应物如上述式(IV)化合物可以通过，例如，适当的ω—卤烷酰氯(例如，如果要合成其中Z是三亚甲基的化合物(I)，则用4—溴丁酰氯)与胺R1R2NH反应(其中R1和R2定义如上)来制备。现场制备这样的反应物也是很方便的，即不需后续纯化，优选用摩尔过量的胺，以便使足够过量的碱与释放的酸反应以保证与其中L是—X.OH(X定义如上)的化合物(II)偶合。C3)其中Y是—S—的化合物的制备实现标题化合物的制备，比如，可以通过其中L代表—X.Q(符号含义同上述定义)的化合物(II)与式(IX)的ω—巯基酰胺反应，HS.Z.CO.NR1R2(IX)(其中R1，R2和Z定义如上)，或通过其中L是—X.SH(X定义如上)的化合物(II)与上述式(IV)或式(IVa)化合物的逆反应，在每种情况下反应须在碱存在下进行。
或者，可先将化合物(II)转化成酯衍生物，接着将酯基转化成所需的酰胺，例如，如上面C1)步骤8中所述。
例如，其中L是基团—X.SH(X定义如上)的式(II)起始原料的制备可以由相应的其中L是—X.Q(X和Q定义如上)的化合物与硫羟酸或黄原酸盐反应，接着产生要求的硫羟基，如通过与氨反应完成。C4)其中Y是—NR—的化合物的制备一种适当的反应包括还原胺化作用，即用适当的20—酮或其中L是—X′.CHO(其中X′是一个共价键或亚甲基)的化合物和式(X)化合物。
HNR.Z.CO.NR1R2(X)(其中R，R1，R2和Z定义如上)。从20—酮开始的反应主要产生表—异构体。
或者，其中L代表基团—X.NHR(其中X和R定义如上)或更优选由其中L是—X.N3的叠氮化物与膦P(RP)3(其中X定义如上，RP代表一个烃基)反应得到的活性基团—X.N＝P(RP)3的化合物(II)，可以通过与上述式(IV)或式(IVa)的化合物反应烷基化/酰化。
其中L代表—X.Q(符号含义同上述定义且Q优选为高活性离去基团如三氟乙酸酯，甲苯磺酸酯或三氟甲磺酸酯)的化合物(II)与上述式(X)化合物的转化反应也可以使用，但优选使用大量过量的胺(X)。
再者，在上述任一过程之初优选引入末端酯基，然后将其转化成所需的酰胺基，如上面C1)步骤8中所述。
D)通过式(I)化合物的反应改变A＝基的取代模式，接着，如果必要和/或需要，进行异构化和/或除去保护基。
因此，比如，其中A＝代表基团(A—4)或(A—5)的化合物(I)可以通过相应的其中A＝代表(A—2)或(A—3)的化合物氢化来制备，例如，用GB—A—1583749所述方法。应该理解，这种氢化作用也可以在反应过程的早期阶段进行，比如，对式(II)的起始原料或中间体进行。
其中A＝代表基团(A—6)或(A—7)的化合物(I)可以由相应的其中A＝代表(A＝2)或(A—3)的化合物(其中R4是O—保护基和R5是氢原子或三甲基甲硅烷基)通过Simmons—Smith亚甲基化来制备(见，比如，Neef et al.，Tetrahedron Letters(1991)，32，pp.5073—5076)。
其中A＝代表基团(A—8)的化合物(I)，比如，可以通过适当的维生素D衍生物(例如，其中A＝是(A—9)基团的前体化合物(I))的7，8—双键的裂解来制备，例如，通过臭氧分解或与高锰酸钾和高碘酸钠的连续反应，接着将所得8—酮与一个如式(XI)的适当的环A前体进行Wittig—Horner反应， (其中R4和R5代表O—保护基)(见，比如，Perlman et al.，Tetrahe-dron Letters(1992)，33，pp.2937—2940)。
总之，虽然在上述1α—羟基化和22，23—双键氧化裂解反应中优选使用5，6—反异构体，但5，6—顺或5，6—反几何异构体也可以出现在上面C)和D)中的任一步。因此，5，6—反几何异构体到5，6—顺的转化最好在引入1α—羟基后进行。
应该理解，上述多数反应也可以用适当的甾族化合物—5，7—二烯(或可转化成这种二烯的甾族化合物—5—烯)来完成，接着将该甾族化合物产物转化成所需的维生素D类似物，例如，用紫外线照射。
总之，存在于1α—和/或3β—位的O—保护基可以，比如，用文献中所述的常规方法除去。所以，酯化酰基可以通过碱水解除去，例如，用链烷醇中的碱金属醇盐。酯化基如甲硅烷基可以用酸水解或用氟化物的盐如四烷基氟化铵处理来除去。从将强碱条件正常使用于同系化步骤以建立所需的侧链这一角度来看，当使式(II)化合物反应时，使用这些酸不稳定而碱稳定的保护基是有利的。
下列非限制性实施例用于说明本发明。所有温度用℃表示。制备例1a)20α—乙酸基甲基—1α—羟基—3β—三异丙基甲硅烷氧基—9，10—断孕甾—5(E)，7—二烯〔式(II)—A＝(A—5)，R3＝α—CH3，R4＝(i—Pr)3Si，R5＝H，L＝CH2.O.CO.CH3〕将苯(30ml)(或苯和乙醇的1∶1混合液)中的三—三苯基膦氯化铑(450mg)溶液在氢气下搅拌直到观察不到进一步摄取。加入20α—乙酸基甲基—1α—羟基—3β—三异丙基甲硅烷氧基—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—三烯〔式(II)—A＝(A—3)，R3＝α—CH3，R4＝(i—Pr)3Si，R5＝H，L＝CH2.O.CO.CH3—，或者采用相应的1α—三甲基甲硅烷基醚〕(500mg)的苯(30ml)溶液，并将混合物在氢气下搅拌直到1当量氢被摄取(约21ml)。标题化合物用色谱法纯化〔在此阶段，10(R)和10(S)异构体可以任选地被拆分〕。UVλmax＝约243，251和261nm分别对应ε＝约35,000，40,000和27,000。
b)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α—羟甲基—9，10—断孕甾—5(E)，7—二烯〔式(II)—A＝(A—5)，R3＝α—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，L＝CH2OH〕将上面a)中所得二烯(约500mg)的二氯甲烷(2ml)用氯三异丙基甲硅烷(250mg)和咪唑(350mg)处理，并将混合物在室温下搅拌过夜。处理后将粗双—甲硅烷基醚溶解于四氢呋喃(10ml)，用氢化铝锂(100mg)处理，并在室温下搅拌1—2小时。过量氢化铝锂被分解(小心加入饱和硫酸钠水溶液)后，将反应混合物进一步处理得到标题醇。制备例21α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α—羟甲基—9，10—断孕甾—5(Z)，7—二烯〔式(II)—A＝(A—4)，R3=α—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，L＝CH2OH〕在吩嗪存在下将制备例1a)中的起始原料5(E)—三烯在苯中通过辐照1小时进行光致异构化，得到相应的5(Z)—三烯。该产物用制备例1a)中所述方法氢化，用制备例1b)中所述方法甲硅烷基化和脱乙酰化，得到标题化合物。UVλmax＝约243，251和261nm分别对应ε＝约35,000，40,000和27,000。
用相同的方法，以20—表化合物20β—乙酸基甲基—1α—羟基—3β—三异丙基甲硅烷氧基—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—三烯〔式(II)—A＝(A—3)，R3＝β—CH3，R4＝(i—Pr)3Si，R5＝H，L＝CH2.O.CO.CH3〕作为起始原料，制备对应于制备例1和2产物的表(即20β—羟甲基)化合物。其自身的制备是通过20—醛的异构化，该醛得自维生素D2的二氧化硫加合物的臭氧分解，接着进行20—表醛的还原反应和1α—羟基化实现的。制备例3a)20α—乙酸基甲基—1α—羟基—3β—三异丙基甲硅烷氧基—10—螺环丙基—9，10—断孕甾—5(E)，7—二烯〔式(II)—A＝(A—7)，R3＝α—CH3，R4＝(i—Pr)3Si，R5＝H，L＝CH2.O.CO.CH3〕
将锌/铜对(1.08g)和二碘甲烷(0.9ml)的乙醚(6ml)的混合物搅拌下加热回流40分钟。加入20α—乙酸基甲基—1α—羟基—3β—三异丙基甲硅烷氧基—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—三烯〔式(II)—A＝(A—3)，R3＝α—CH3，R4＝(i—Pr)3Si，R5＝H，L＝CH2.O.CO.CH3，或者使用相应的1α—三甲基甲硅烷基醚〕(约500mg)的乙醚(9ml)溶液，搅拌所得混合物，并加热回流至大部分起始原料消失(TLC控制通常对1α—三甲基甲硅烷基醚约为4小时，对1α—羟基化合物时间短一些)。将反应混合物过滤，除去溶剂，并经色谱法除去产物中残留的二碘甲烷，得到标题化合物。UVλmax＝约246，253和263nm分别对应ε＝约29,000，36,000和25,000。
b)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α—羟甲基—10—螺环丙基—9，10—断孕甾—5(E)，7—二烯〔式(II)—A＝(A—7)，R3＝α—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，L＝CH2OH〕将上述a)中所得二烯(约500mg)的二氯甲烷(2ml)用氯三异丙基甲硅烷(250mg)和咪唑(350mg)处理，并将混合物在室温下搅拌过夜。处理后将粗双—甲硅烷基醚溶解于四氢呋喃(10ml)，用氢化铝锂(100mg)处理，并在室温下搅拌1—2小时。过量氢化铝锂被分解(小心加入饱和硫酸钠水溶液)后，将反应混合物进一步处理得到标题醇。制备例41α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α—羟甲基—10—螺环丙基—9，10—断孕甾—5(Z)，7—二烯〔式(II)—A＝(A—6)，R3＝α—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，L＝CH2OH〕重复制备例3a)过程，只是以相应的5(Z)—三烯为起始原料，按制备例2所述方法通过5(E)—三烯光致异构化来制备；5(Z)—三烯反应一般比5(E)—三烯反应略慢。按照制备例3b)所述方法进行甲硅烷基化和脱乙酰化，得到标题化合物。UVλmax＝约246，253和263nm分别对应ε＝约29,000，36,000和25,000。实施例1a)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20—表—22—氧杂—9，10—断胆甾—5(E)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—3)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝共价键，Y＝O，Z＝CH2〕将18—冠—6—醚(132mg)的四氢呋喃(2ml)溶液滴加到1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20β—羟基—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—三烯〔式(II)—A＝(A—3)，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，L＝OH〕(194mg)和氢化钾(0.15ml，35wt％，分散在矿物油中)的四氢呋喃(1ml)溶液中。将所得混合物冷却至—10℃并滴加N—(溴乙酰基)哌啶(315mg)的四氢呋喃(1ml)溶液。15分钟后将反应混合物升至室温，搅拌4小时，然后用氯化铵处理并完成反应。将粗产物用色谱分离首先得到起始原料醇(80mg)，然后是标题产物(80mg)。
UV(Et2O)λmax268，λmin235nm；IR(CCl4)νmax1640，1460cm-1；NMR(CCl4)δ 5.4-6.4(2H，ABq，6，7-H′s)，4.7-4.9(2H，bs，19-H′s)，4.0-4.7(2H，bm，1，3-H′s)，3.83(2H，s，O-CH2C＝O)，3.1-3.6(4H，bm，NCH2)，0.57(3H，s，18-H′s).
b)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20—表—22—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝共价键，Y＝O，Z＝CH2〕将从上面(a)得到的5(E)产物(80mg)和吩嗪(36mg)的苯(10ml)的溶液辐照1小时。然后除去溶剂并用色谱分离标题5(Z)产物(65.2mg)。
NMR(CCl)4δ5.6-6.2(2H，ABq，6，7-H′s)，4.6 and 5.2(1H ea，s，19-H′s)，4.0-4.6(2H，bm，1，3-H′s)，3.77(2H，s，O-CH2C＝O)，3.1-3.6(4H，bm，NCH2)，0.53(3H，s，18-H′s).
c)1α，3β—二羟基—20—表—22—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(H)，X＝共价键，Y＝O，Z＝CH2〕将从上面(b)得到的双—甲硅烷基醚(62.5mg)的四氢呋喃溶液(1ml)用四丁基氟化铵(1ml，1M的四氢呋喃溶液)处理。4小时后处理反应混合物，并用制备性TLC(30％甲醇的乙酸乙酯)分离得到脱甲硅烷基化的标题产物(30.4mg)。
UV(EtOH)λmax263，λmin228nm；IR(CDCl3)νmax3160-3640，1630，1450cm-1；NMR(CCl4)δ5.7-6.6(2H，ABq，6，7-H′s)，4.8 and 5.3(1H ea，s，19-H′s)，3.9-4.5(4H，bm，1，3-H′s and O-CH2C＝O)，3.1-3.7(4H，bm，NCH2)，1.1(2H，d，j＝5hz，21-H′s)，0.57(3H，s，18-H′s).实施例2a)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20—表—23—高—22—氧杂—9，10—断胆甾—5(E)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—3)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝共价键，Y＝O，Z＝(CH2)2〕将1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20β—羟基—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—三烯〔式(II)—A＝(A—3)，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，L＝OH〕(539mg)与丙烯酸乙酯(2.1ml)在相转移条件下〔甲苯(21ml)，50％氢氧化钠水溶液(9ml)和四丁基氢氧化铵(0.135ml，10％w/w的水溶液)，室温2小时〕剧烈搅拌。除去水相并用新鲜的丙烯酸乙酯，氢氧化钠和氢氧化季铵代替，继续搅拌2小时。后面的步骤重复三次以上，然后除去有机相并处理。色谱分离粗产物得到对应于标题酰胺的乙酯(160mg)和起始醇(178mg)。酯具有UV(Et2O)λmax269，λmin228nm；IR(CCl4)νmax1630cm-1；NMR(CCl4)δ5.2-6.3(2H，ABq，6，7-H′s)，4.6-4.9(2H，bs，19-H′s)，4.2-4.6(2H，bm，1，3-H′s)，3.6-4.2(2H，q，O-CH2CH3)，2.9-3.6(m，O-CH2CH2C＝O)，0.57(3H，s，18-H′s).
将酯(106mg)的已烷(1ml)在-78℃用试剂(2ml)〔用哌啶(34mg)处理Sn〔N(TMS)2〕2(4ml，0.1M的己烷溶液)制备的〕处理。将反应混合物升至室温，按TLC所示将保留在反应混合物中的起始酯用上面剩余的锡试剂处理。将反应继续(包括用甲醇和氟化钾处理以除去锡)并将粗产物用色谱分离得到起始酯(12mg)和标题酰胺(42mg)。
UV(Et2O)λmax269，λmin229nm；IR(CCl4)νmax1640，1460cm-1；NMR(CCl4)δ5.3-6.5(2H，ABq，6，7-H′s)，4.6-5.07(2H，bs，19-H′s)，3.8-4.7(bm，1，3-H′s)，2.7-3.5(bm，NCH2)，0.53(3H，s，18-H′s).
b)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20—表—23—高—22—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝共价键，Y＝O，Z＝(CH2)2〕将用吩嗪(29mg)敏化的从上面(a)得到的5(E)酰胺(67mg)如实施例1(b)进行光致异构化，并用色谱分离该产物得到5(Z)标题产物(54.9mg)。
UV(Et2O)λmax262，λmin227nm；IR(CCl4)νmax1640，1460cm-1；NMR(CCl4)δ5.6-6.3(2H，ABq，6，7-H′s)，4.5 and 5.2(1H ea，bs，19-H′s)，3.9-4.5(bm，1，3-H′s)，3.0-3.7(bm，NCH2)，0.50(3H，s，18-H′s).
c)1α，3β—二羟基—20—表—23—高—22—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺，〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝H，X＝共价键，Y＝O，Z＝(CH2)2〕
将从上面(b)得到的甲硅烷基化的化合物(54mg)如实施例1(c)进行脱甲硅烷基得到标题二醇(28mg)。
UV(EtOH)λmax263，λmin227nm；IR(CDCl3)νmax3200-3660，1640，1460cm-1；NMR(CDCl3)δ5.6-6.5(2H，ABq，6，7-H′s)，4.7 and 5.4(1H ea，bs，19-H′s)，3.6-4.6(bm，1，3-H′s，3.1-3.6(bm，NCH2)，2.3-2.9(2H，t，CH2CH2-C＝O)，1.05(3H，d，j＝6Hz，21-H′s)，0.53(3H，s，18-H′s)用二甲胺和环丙胺代替(a)中的哌啶制备相应的二甲胺和环丙胺酰胺类似物(R1＝R2＝CH3及R1＝H，R2＝环丙基)，然后如(b)和(c)进行处理。实施例3a)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20—表—22—氧杂—9，10—断胆甾—5(E)，7，10(19)—三烯酸，吗啉酰胺〔式(I)—A＝(A—3)，R1＋R2＝—(CH2)2—O—(CH2)2—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝共价键，Y＝O，Z＝CH2〕将18—冠—6—醚(264mg)的四氢呋喃(4ml)溶液滴加到1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20β—羟基—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—三烯〔式(II)—A＝(A—3)，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，L＝OH〕(306mg)和氢化钾(0.9ml，11.7wt％，分散在矿物油中)的四氢呋喃(2ml)溶液中。将所得混合物冷却至-10℃并滴加N—(溴乙酰基)吗啉(686mg)的四氢呋喃(3ml)溶液进行处理。15分钟后将反应混合物升至室温，搅拌2小时，然后用氯化铵处理并完成反应。将粗产物用色谱分离首先得到起始原料醇(80mg)，然后是标题产物(80.2mg)。
UV(Et2O)λmax269，λmin231nm；IR(CCl4)νmax1650，1460cm-1；NMR(CCl4)δ5.3-6.3(2H，ABq，6，7-H′s)，4.7-5(2H，bs，19-H′s)，4.0-4.7(bm，1，3，20-H′s)，3.87(2H，s，O-CH2C＝O)，3.1-3.7(mostly 3.47)(8H，m，morpholine-H′s)，0.67(3H，s，18-H′s).
b)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20—表—22—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，吗啉酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)2—O—(CH2)2—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝共价键，Y＝O，Z＝CH2〕将从上面(a)得到的5(E)产物(109mg)和吩嗪(506mg)的苯(14ml)的溶液辐照1小时。然后除去溶剂并用色谱分离标题5(Z)产物(87mg)。
UV(Et2O)λmax261，λmin228nm；IR(CCl4)νmax1645，1455cm-1；NMR(CCl4)δ5.5-6.3(2H，ABq，6，7-H′s)，4.6 and 5.2(1Hea，s，19-H′s)，4.0-4.6(bm，1，3，20-H′s)，3.87(2H，s，O-CH2C＝O)，3.1-3.6(8H，m，morpholine-H′s)，0.53(3H，s，18-H′s).
c)1α，3β—二羟基—20—表—22—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，吗啉酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)2—O—(CH2)2—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝H，X＝共价键，Y＝O，Z＝CH2〕将从上面(b)得到的双—甲硅烷基醚(87mg)的四氢呋喃溶液(1ml)用四丁基氟化铵(0.68ml，1M的四氢呋喃溶液)处理。3小时后处理反应混合物并用制备性TLC(7％甲醇的乙酸乙酯)分离得到脱甲硅烷基化的标题产物(40.9mg)。
UV(EtOH)λmax263，λmin228nm；IR(CDCl3)νmax3160-3630，1635，1450cm-1；NMR(CDCl3)δ5.5-6.5(2H，ABq，6，7-H′s)，4.7 and 5.3(1H ea，s，19-H′s)，3.8-4.5(bm，1，3，20-H′s)，3.98(d，O-CH2C＝O)，3.1-3.8(8H，m，morpholine-H′s)，1.08(2H，d，j＝5Hz，21-H′s)，0.57(3H，s，18-H′s).实施例4a)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20—表—23—双—高—22—氧杂—9，10—断胆甾—5(E)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—3)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝共价键，Y＝O，Z＝(CH2)3〕在0℃将4—溴丁酰氯(6.2g)的乙醚(30ml)溶液滴加到哌啶(5.8g)的乙醚(150ml)中。将反应混合物在0℃搅拌0.5小时，接着在室温搅拌2小时。用水，饱和碳酸氢钠水溶液和盐水连续洗涤上述醚溶液，然后干燥并真空浓缩得到3.33g固体产物。其IR(CDCl3)νmax1690，1630cm-1。这样得到的试剂不需要进一步处理即可被用于下步反应。
将18—冠—6—醚(198mg)的四氢呋喃(4ml)溶液滴加到1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20β—羟基—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—三烯〔式(II)—A(A—3)，R3＝β—CH3，R4—R5＝(i—Pr)3Si，L＝OH〕(255mg)和氢化钾(0.225ml，35wt％，分散在矿物油中)的四氢呋喃(1ml)混合物中。将所得混合物冷却至0℃并用526mg上面制备的试剂处理。15分钟后将反应混合物升至室温，搅拌过夜，然后用氯化铵处理并完成反应。将粗产物用色谱分离得到标题产物(53mg)。
UV(Et2O)λmax270，λmin232nm；IR(CCl4)νmax1615，1445cm-1；NMR(CCl4)δ5.2-6.4(2H，ABq，6，7-H′s)，4.5-4.9(2H，bs，19-H′s)，3.7-4.5(bm，1，3，20-H′s)，3.1-3.7(bm，NCH2，OCH2)，0.6(3H，s，18-H′s).
b)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20—表—23—双—高—22—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝共价键，Y＝O，Z＝(CH2)3〕将从上面(a)得到的5(E)产物(53mg)和吩嗪(25mg)的苯(7ml)的溶液辐照1小时。然后除去溶剂并用色谱分离标题5(Z)产物(30mg)。
UV(Et2O)λmax262，λmin229nm；IR(CCl4)νmax1615，1435cm-1；NMR(CCl4)δ5.4-6.3(2H，ABq，6，7-H′s)，4.5 and 5.3(1Hea，s，19-H′s)，3.7-4.5(bm，1，3，20-H′s)，3.1-3.7(bm，NCH2，OCH2)，0.58(3H，s，18-H′s).
c)1α，3β—二羟基—20—表—23—双—高—22—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(H)，X＝共价键，Y＝O，Z＝(CH2)3〕将从上面(b)得到的甲硅烷基化的化合物(30mg)如实施例1(c)进行脱甲硅烷基得到标题二醇(12mg)。
UVλmax(EtOH)262，λmin226nm；IRνmx(CDCl3)3100-3620，1600，1435cm-1；NMRδ(CDCl3)5.7-6.6(2H，ABq，6，7-H′s)，4.8 and 5.3(1H ea，s，19-H′s)，3.8-4.6(bm，1，3，20-H′s)，3.2-3.8(bm，NCH2，OCH2)，0.63(3H，s，18-H′s).实施例5a)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20β—甲酰基—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—三烯〔式(II)—A＝(A—3)，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，L＝CHO〕将溶解在苯(15ml)和甲醇(15ml)中的根据GB—A—2114570得到的1α—羟基维生素D2的二氧化硫加合物的1，3—双—三异丙基甲硅烷基醚(1.34g)臭氧分解，得到20α—醛。将该醛在0℃与DBU(300μl)储存过夜进行异构化。将粗产物悬浮在乙醇(30ml)中，用碳酸氢钠(1.46g)处理，并加热回流搅拌2.5小时以除去二氧化硫。将醛混合物用色谱(硅胶，用15％苯的己烷洗脱)解析。洗脱的第一个化合物为标题(表)醛(289mg)。
UV(Et2O)λmax269，λmin227nm；IR(CCl4)νmax1620，1720cm-1；NMR(CCl4)δ10.0(1H，d，CHO)，5.5-6.4(2H，ABq，6，7-H′s)，4.7-5.0(2H，bs，19-H′s)，3.8-4.7(bm，1，3-H′s)，0.57(3H，s，18-H′s).
b)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20β—羟甲基—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—三烯〔式(II)—A＝(A—3)，R3＝β—CH3，R4＝ R5＝(i—Pr)3Si，L＝CH2OH〕在0℃将从上面(a)得到的醛(290mg)的苯(8ml)用硼氢化钠(100mg)的乙醇(4ml)逐滴处理，并将反应混合物在0℃再搅拌0.5小时。常规处理后用色谱纯化产物得到标题醇(262mg)。
UV(Et2O)λmax269，λmin228nm；IR(CCl4)νmax1620，3300-3600cm-1；NMR(CCl4)δ5.4-6.5(2H，ABq，6，7-H′s)，4.7-5.0(2H，bs，19-H′s)，3.7-4.7(bm，1，3-H′s)，0.57(3H，s，18-H′s).
c)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20—表—23—高—23—氧杂—9，10—断胆甾—5(E)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—3)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝CH2，Y＝O，Z＝CH2〕将叔—丁醇钾(1ml，1M的四氢呋喃溶液)滴加到从上面(b)得到的醇(131mg)和18—冠—6—醚(20mg)的四氢呋喃(1ml)溶液中。将该混合物在室温搅拌0.5小时，然后冷却至-10℃并滴加N—(溴乙酰基)哌啶(256mg)的四氢呋喃(1ml)。再搅拌10分钟后处理混合物，并用色谱纯化产物得到标题酰胺(113mg)。
UV(Et2O)λmax270，λmin231nm；IR(CCl4)νmax1645，1460cm-1；NMR(CCl4)δ5.4-6.5(2H，ABq，6，7-H′s)，4.7-5.0(2H，bs，19-H′s)，3.7-4.7(bm，1，3-H′s)，2.7-3.7(m，N-CH2-)，0.57(3H，s，18-H′s).
d)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20—表—23—高—23—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X—CH2，Y＝O，Z＝CH2〕将上面(c)得到的5(E)化合物(113mg)的苯(14ml)〔含吩嗪(54mg)〕如实施例1(b)进行光致异构化(1小时)。用色谱纯化该产物得到84mg标题化合物。
UV(Et2O)λmax262，λmin227nm；IR(CCl4)νmax1650，1465cm-1；NMR(CCl4)δ5.6-6.3(2H，ABq，6，7-H′s)，4.8-5.2(1H ea，bs，19-H′s)，3.6-4.8(bm，1，3-H′s)，3.0-3.6(m，N-CH2)，0.53(3H，s，18-H′s).
c)1α，3β—二羟基—20—表—23—高—23—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝H，X＝CH2，Y＝O，Z＝CH2〕将从上面(d)得到的甲硅烷基醚(84mg)的四氢呋喃溶液(0.6ml)用四丁基氟化铵(0.6ml，1M的四氢呋喃溶液)如实施例1(c)进行脱甲硅烷基。色谱纯化粗产物得到标题化合物(43mg)。
UV(EtOH)λmax263，λmin227nm；IR(CCl4)νmax1630，1450，3400-3660cm-1；NMR(CDCl3)δ5.6-6.4(2H，ABq，6，7-H′s)，4.7，5.4(1H ea，bs，19-H′s)，3.8-4.6(bm，1，3-H′s)，3.0-3.7(m，N-CH2-)，0.92(d，21-H′s)，0.53(3H，s，18-H′s).实施例6a)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α—甲酰基—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—三烯〔式(II)—A＝(A—3)，R3＝α—CH3，R4＝ R5＝(i—Pr)3Si，L＝CHO〕将根据GB—A—2114570得到的1α—羟基维生素D2的二氧化硫加合物的1，3—双—三异丙基甲硅烷基醚(0.49g)用臭氧分解，得列20α—醛。将该醛悬浮在正—丁醇(10ml)中，用碳酸氢钠(0.49g)处理，在80℃加热搅拌1.5小时以除去二氧化硫。将醛用色谱纯化得到标题(正)醛(330mg)。
UV(EtOH)λmax268，λmin228nm；IR(CCl4)νmax1620，1725cm-1；NMR(CCl4)δ10.1(1H，d，CHO)，5.4-6.4(2H，ABq，6，7-H′s)，4.7-5.0(2H，bs，19-H′s)，3.8-4.7(bm，1，3-H′s)，0.6(3H，s，18-H′s).
b)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α—羟甲基—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—三烯〔式(I)—A＝(A—3)，R3＝β—CH3，R4＝ R5＝(i—Pr)3Si，L＝CH2OH〕在0℃ 将从上面(a)得到的醛(330mg)的苯(8ml)用硼氢化钠(100mg)的乙醇(4ml)逐滴处理并将反应混合物在0℃再搅拌0.5小时。反应完成后用色谱纯化产物得到标题醇(250mg)。
UV(Et2O)λmax269，λmin228nm；(CCl4)IRνmax1620，3400-3600cm-1；NMR(CCl4)δ5.5-6.5(2H，ABq，6，7-H′s)，4.7-5.0(2H，bs，19-H′s)，3.8-4.7(bm，1，3-H′s)，0.57(3H，s，18-H′s).
c)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—23—高—23—氧杂—9，10—断胆甾—5(E)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—3)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝CH2，Y＝O，Z＝CH2〕将叔—丁醇钾(1ml，1M的四氢呋喃溶液)滴加到从上面(b)得到的醇(132mg)和18—冠—6—醚(20mg)的四氢呋喃(1ml)溶液中。将该混合物在室温搅拌0.5小时，然后冷却至-10℃并滴加N—(溴乙酰基)哌啶(258mg)的四氢呋喃(1ml)进行处理。搅拌10分钟后将混合物在室温搅拌3小时，然后处理混合物。用色谱纯化产物得到标题酰胺(60mg)。
UV(Et2O)λmax263，λmin231nm；IR(CCl4)νmax1650，1475cm-1；NMR(CCl4)δ5.4-6.4(2H，ABq，6，7-H′s)，4.7-5.1(2H，bs，19-H′s)，3.7-4.7(bm，1，3-H′s)，3.0-3.7(m，N-CH2-)，0.63(3H，s，18-H′s).
d)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—23—高—23—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝CH2，Y＝O，Z＝CH2〕将上面(c)得到的5(E)化合物(60mg)的苯(8ml)〔含吩嗪(29mg)〕如实施例1(b)进行光致异构化(1小时)。用色谱纯化该产物得到84mg标题化合物。
UV(Et2O)λmax261，λmin227nm；IR(CCl4)νmax1645，1455cm-1；NMR(CCl4)δ5.6-6.4(2H，ABq，6，7-H′s)，4.6-5.2(1H ea，bs，19-H′s)，3.7-4.6(bm，1，3-H′s)，3.0-3.7(m，N-CH2)，0.53(3H，s，18-H′s).
e)1α，3β—二羟基—23—高—23—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝CH2，Y＝O，Z＝CH2〕将从上面(d)得到的甲硅烷基醚(40mg)的四氢呋喃溶液(0.3ml)用四丁基氟化铵(0.6ml，1M的四氢呋喃溶液)如实施例1(c)进行脱甲硅烷基。色谱纯化粗产物得到标题化合物(19mg)。
UV(EtOH)λmax262，λmin228nm；IR(CCl4)νmax1640，1450，3300-3640cm-1；NMR(CDCl3)δ5.6-6.5(2H，ABq，6，7-H′s)，4.7-5.4(1H ea，bs，19-H′s)，3.8-4.7(bm，1，3-H′s)，3.0-3.8(m，N-CH2-)，1.0(d，21-H′s)，0.52(3H，s，18-H′s).
用N，N—二乙基溴乙酰胺和N—环丙基溴乙酰胺分别代替实施例6(c)中的N—(溴乙酰基)哌啶，然后进行实施例6(d)和6(e)的处理来制备化合物1α，3β—二羟基—23—高—23—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，二乙酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＝ R2＝Et，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝CH2，Y＝O，Z＝CH2〕和1α，3β—二羟基—23—高—23—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，环丙酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＝H，R2＝环丙基，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝CH2，Y＝O，Z＝CH2〕。
用1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α—羟甲基—9，10—断孕甾—5(E)，7—二烯(参见制备例1(b))；1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α—羟甲基—9，10—断孕甾—5(Z)，7—二烯(参见制备例2)；1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α—羟甲基—10—螺环丙基—9，10—断孕甾—5(E)，7—二烯(参见制备例3(b))；和1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α—羟甲基—10—螺环丙基—9，10—断孕甾—5(Z)，7—二烯(参见制备例4)分别代替实施例6(c)中的甾醇，然后根据实施例6(e)的方法从产物中除去甲硅烷基来制备化合物1α，3β—二羟基—23—高—23—氧杂—9，10—断胆甾—5(E)，7—二烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—5)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝CH2，Y＝O，Z＝CH2〕；1α，3β—二羟基—23—高—23—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7—二烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—4)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝CH2，Y＝O，Z＝CH2〕；1α，3β—二羟基—23—高—23—氧杂—10—螺环丙基—9，10—断胆甾—5(E)，7—二烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—7)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝CH2，Y＝O，Z＝CH2〕；和1α，3β—二羟基—23—高—23—氧杂—10—螺环丙基—9，10—断胆甾—5(Z)，7—二烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—6)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝CH2，Y＝O，Z＝CH2〕。
类似实施例6(c)的步骤以相似的方式分别用N，N—二乙基溴乙酰胺或N—环丙基溴乙酰胺制备上述式(I)产物〔A＝(A—4)，(A—5)，(A—6)或(A—7)〕的二乙基(R1＝R2＝Et)和环丙基(R1＝H，R2＝环丙基)酰胺类似物。
如上所述，用相应的R3＝β—CH3和L＝CH2OH的式(II)化合物作起始原料，以相似的方式制备上述化合物(R3＝β—CH3)的20—表类似物。实施例7a)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—23—降—9，10—断胆甾—5(E)，7，10(19)—三烯酸，腈(20—正和20—表异构体的混合物)〔式(I)—A＝(A—3)，R3＝α—和β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，L＝CH2CN〕将1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20(α，β)—甲苯磺酰氧基甲基—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—三烯〔式(II)—A＝(A—3)，R3＝α，β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，L＝CH2O.甲苯磺酰基〕(1g)含有氰化钾(390mg)的二甲亚砜(5ml)溶液在90℃加热2小时，并将产物萃取(乙醚)，洗涤和柱色谱纯化得到标题腈(748mg)。
UV(Et2O)λmax267，λmin229nm；NMR(CCl4)δ5.36-6.13(ABq，6，7-H′s)，4.83(bs，19-H′s)，4.13-4.46(m，1，3-H′s)，0.53(s，18-H′s).
b)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—23—降—9，10—断胆甾—5(E)，7，10(19)—三烯甲醛(20—正和20—表异构体的混合物)〔式(I)—A＝(A—3)，R3＝α—和β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，L＝CH2CHO〕将从上面(a)得到的腈(480mg)的己烷(3ml)冷却至-78℃并用二异丁基氢化铝(1.4ml，1M的庚烷溶液)处理。将该混合物在0℃搅拌1小时，用乙醚，饱和氯化铵溶液处理，并经萃取到乙醚中分离产物。粗产物具有UV(Et2O)λmax270，λmin229nm；IR(CCl4)νmax1730cm-1；NMR(CCl4)δ10.6(bs，CHO)，5.53-6.23(ABq，6，7-H′s)，4.76(bs，19-H′s)，4.16-4.43(m，1，3-H′s)，0.56(s，18-H′s).
c)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20(α，β)—(2—羟乙基)—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—三烯〔式(II)—A＝(A—3)，R3＝α—和β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，L＝CH2CH2OH〕将从上面(b)得到的醛(440mg)的苯(10ml)在0℃用硼氢化钠(105mg)的乙醇(10ml)溶液处理，接着在室温搅拌45分钟。反应完成后用色谱纯化产物得到标题化合物(380mg)。
UV(Et20)λmax269，λmin228nm；IR(CCl4)νmax3500-3700cm-1；NMR(CCl4)δ5.53-6.3(ABq，6，7-H′s)，4.73(bs，19-H′s)，4.16-4.43(m，1，3-H′s)，0.56(s，18-H′s).
在该阶段通过对1.2g混合物在硅胶上用30％苯的己烷展开，小心进行色谱解析异构体(在C—20)。20β—(表)异构体(145mg)极性较小并首先被洗脱，接着是异构体混合物和20α—(正)异构体(360mg)。
d)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α—(2—溴乙基)—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—三烯〔式(II)—A＝(A—3)，R3＝α—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，L＝CH2CH2Br〕将从上面(c)得到的正醇(200mg)置于含有对—甲苯磺酰氯(110mg)和吡啶(243μl)的二氯甲烷(5ml)中，室温搅拌2小时。加入碳酸氢钠(20ml饱和溶液)，再继续搅拌2小时，并处理反应混合物。将粗甲苯磺酰酯溶解在含有溴化锂(317mg)和1，8双—二甲氨基萘(“质子海绵”40mg)的乙腈(6.6ml)和二氯甲烷(6.6ml)中，并将该混合物在80℃加热回流30分钟。然后将该混合物冷却并处理得到标题溴化物(261mg，色谱纯化)。
UV(Et2O)λmax267，λmin228nm；NMR(CCl4)δ5.43-6.16(ABq，6，7-H′s)，4.76(bs，19-H′s)，4.14-4.45(m，1，3-H′s)，3.16(m，CH2Br)，0.5(s，18-H′s).
e)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—23—高—9，10—断胆甾—5(E)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—3)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝Y＝Z＝CH2〕将N—乙酰基哌啶(1.32ml)的四氢呋喃(24.7ml)用二异丙基氨化锂〔从二异丙基胺(2.79ml)和丁基锂(6.39ml，16M己烷溶液)制备的〕锂化。将从上面(d)得到的溴化物(261mg)的四氢呋喃(1.5ml)用上述溶液(2.75ml)处理。15分钟后用氯化铵除去过量的试剂，并处理混合物得到标题化合物(色谱分离后为218mg)。
UV(Et2O)λmax267，λmin228nm；IR(CCl4)νmax1620cm-1；NMR(CCl4)δ5.46-6.23(ABq，6，7-H′s)，4.73(bs，19-H′s)，3.33(nm，n-CH2)，0.53(s，18-H′s).
f)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—23—高—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝Y＝Z＝CH2〕将从上面(e)得到的5(E)化合物(218mg)的含有吩嗪(100mg)的苯(2.7ml)如实施例1(b)进行光致异构化(1小时)。色谱分离得到标题化合物(142mg)。
UV(Et2O)λmax263，λmin226nm；IR(CDCl3)νmax1640cm-1；NMR(CDCl3)δ5.73-6.16(ABq，6，7-H′s)，5.13，5.26(each s，19-H′s)，3.9-4.4(m，1，3-H′s)，3.4 3(nm，n-CH2)，0.53(s，18-H′s).
g)1α，3β—二羟基—23—高—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝Y＝Z＝CH2〕将从上面(f)得到的甲硅烷基醚(80mg)的四氢呋喃溶液(1ml)用四丁基氟化铵(1ml，1M的四氢呋喃溶液)在室温脱甲硅烷基1小时。用制备TLC分离得到标题化合物(38mg)。UV(Et2O)λmax263，λmin227nm；IR(CDCl3)νmax3350-3600，1640cm-1；NMR(CDCl3)δ5.7-6.23(ABq，6，7-H′s)，4.8，5.13(each s，19-H′s)，3.83-4.3(m，1，3-H′s)，3.60(nm，n-CH2)，0.83-0.93(d，21-H′s)，0.53(s，18-H′s).
h)1α，3β—二羟基—23—高—9，10—断胆甾—5(Z)，7—二烯酸，哌定酰胺〔式(I)—A＝(A—4)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝Y＝Z＝CH2〕根据制备例1(a)的方法氢化上述(g)产物或用类似方法氢化上述(f)产物接着如上述(g)进行脱甲硅烷基来制备标题化合物。
i)1α，3β—二羟基—23—高—9，10—断胆甾—5(E)，7—二烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—5)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝Y＝Z＝CH2〕
根据制备例1(a)的方法氢化上述(e)产物接着如上述(g)进行脱甲硅烷基来制备该化合物。
用1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α—羟甲基—9，10—断孕甾—5(E)，7—二烯(参见制备例1(b))；1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α—羟甲基—9，10—断孕甾—5(Z)，7—二烯(参见制备例2)；1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α—羟甲基—10—螺环丙基—9，10—断孕甾—5(E)，7—二烯(参见制备例3(b))；和1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α—羟甲基—10—螺环丙基—9，10—断孕甾—5(Z)，7—二烯(参见制备例4)分别代替实施例7(d)中的起始甾醇，然后进行实施例7(e)的过程，并用实施例7(g)的方法最后从产物中除去甲硅烷基，来制备化合物1α，3β—二羟基—9，10—断胆甾—5(E)，7—二烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—5)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝共价键，Y＝Z＝CH2〕；1α，3β—二羟基—9，10—断胆甾—5(Z)，7—二烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—4)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝共价键，Y＝Z＝CH2〕；1α，3β—二羟基—10—螺环丙基—9，10—断胆甾—5(E)，7—二烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—7)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝共价键，Y＝Z＝CH2〕；和1α，3β—二羟基—10—螺环丙基—9，10—断胆甾—5(Z)，7—二烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—6)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝共价键，Y＝Z＝CH2〕。
以类似的方式根据实施例7(d)分别甲苯磺酰化下列中间体，然后应用实施例7(a)，7(b)，7(c)，7(d)和7(e)的方法并根据实施例7(g)进行脱甲硅烷基；所述中间体为1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α—羟甲基—9，10—断孕甾—5(E)，7—二烯(参见制备例1(b))；1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α—羟甲基—9，10—断孕甾—5(Z)，7—二烯(参见制备例2)；1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α，—羟甲基—10—螺环丙基—9，10—断孕甾—5(E)，7—二烯(参见制备例3(b))；1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α—羟甲基—10—螺环丙基—9，10—断孕甾—5(Z)，7—二烯(参见制备例4)；和1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20α—羟甲基—19—降—9，10—断孕甾—5，7—二烯〔式(II)—A＝(A—8)，R3＝α—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，L＝CH2OH〕，来制备化合物1α，3β—二羟基—23—高—9，10—断胆甾—5(E)，7—二烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—5)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝Y＝Z＝CH2〕；1α，3β—二羟基—23—高—9，10—断胆甾—5(Z)，7—二烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—4)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝Y＝Z＝CH2〕；1α，3β—二羟基—23—高—10—螺环丙基—9，10—断胆甾—5(E)，7—二烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—7)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝Y＝Z＝CH2〕；1α，3β—二羟基—23—高—10—螺环丙基—9，10—断胆甾—5(Z)，7—二烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—6)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝Y＝Z＝CH2〕；和1α，3β—二羟基—23—高—19—降—9，10—断胆甾—5，7—二烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—8)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝Y＝Z＝CH2〕。实施例8a)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20β—(2—溴乙基)—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—三烯〔式(II)—A＝(A—3)，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，L＝CH2CH2Br〕将从上面7(c)得到的表醇〔式(II)—A＝(A—3)，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，L＝CH2CH2OH〕(200mg)根据实施例7(d)的方法转化为相应的溴化物，得到标题化合物(248mg)。
UV(Et2O)λmax269，λmin227nm；NMR(CCl4)δ5.46-6.23(ABq，6，7-H′s)，4.7，(bs，19-H′s)，4.13-4.4(m，1，3-H′s)，3.16(m，CH2Br)，0.56(s，18-H′s).
b)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20—表—23—高—9，10—断胆甾—5(E)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—3)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝Y＝Z＝CH2〕将从上面(a)得到的表—溴化物(248mg)如实施例7(e)用N—乙酰基哌啶的锂盐处理得到标题化合物(211mg)。
UV(Et2O)λmax269，λmin229nm；IR(CCl4)νmax1640cm-1；NMR(CDCl3)δ5.56-6.23(ABq，6，7-H′s)，4.83，(bs，19-H′s)，3.36(nm，n-CH2)，0.53(s，18-H′s).
c)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20—表—23—高—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝Y＝Z＝CH2〕将从上面(b)得到的5(E)化合物(211mg)的含有吩嗪(100mg)的苯(2.7ml)如实施例1(b)光致异构化(1小时)。色谱分离得到标题化合物(142mg)。
UV(Et2O)λmax263，λmin227nm；IR(CCl4)νmax1650cm-1；NMR(CDCl3)δ5.5-6.4(ABq，6，7-H′s)，4.76，5.1(each s，19-H′s)，4.1-4.3(m，1，3-H′s)，3.4(nm，n-CH2)，0.53(s，18-H′s).
d)1α，3β—二羟基—20—表—23—高—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝H，X＝Y＝Z＝CH2〕将从上面(c)得到的甲硅烷基醚(80mg)的四氢呋喃溶液(1ml)用四丁基氟化铵(1ml，1M的四氢呋喃溶液)在室温脱甲硅烷基1小时。用制备TLC分离得到标题化合物(35mg)。
UV(Et2O)λmax264，λmin227nm；IR(CCl4)νmax3350-3600，1620cm-1；NMR(CDCl3)δ5.63-6.2(ABq，6，7-H′s)，4.76，5.1(each s，19-H′s)，3.86-4.2(m，1，3-H′s)，3.3(nm，n-CH2)，0.76-0.86(d，21-H′s)，0.53(s，18-H′s).
c)1α，3β—二羟基—20—表—23—高—9，10—断胆甾—5(Z)，7—二烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—4)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝H，X＝Y＝Z＝CH2〕根据制备例1(a)的方法氢化上述(d)产物或用类似方法氢化上述(c)产物接着如上述(d)进行脱甲硅烷基来制备标题化合物。
f)1α，3β—二羟基—20—表—23—高—9，10—断胆甾—5(E)，7—二烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—5)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝H，X＝Y＝Z＝CH2〕氢化上述(b)产物接着如上述(d)进行脱甲硅烷基来制备标题化合物。实施例9a)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20—表—23—高—9，10—断—23—硫代胆甾—5(E)，7，10(19)—三烯酸，乙酯〔式(II)—A＝(A—3)，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，L＝CH2.S.CH2.CO.OEt〕将从上述实施例5(b)得到的20—表醇(131mg)的含有“质子海绵”(171mg)的二氯甲烷(3ml)溶液在-78℃用三氟甲磺酸酐(68mg)处理。将反应混合物升至室温，再回到-78℃，用2—巯基乙醇酸乙酯(72mg，滴加)处理，升至室温并再搅拌1小时。处理后色谱纯化产物得到标题化合物(75mg)。
UV(Et2O)，λmax268，λmin228nm；IR(CCl4)νmax1740，1630cm-1；NMR(CCl4)δ5.4-6.7(ABq，6，7-H′s)，4.7-5.0(bs，19-H′s)，3.8-4.7(m，q，1，3-H′s，Et-H′s)，2.96(s，S-CH2-CO2Et)，0.57(s，18-H′s).
b)1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20—表—23—高—9，10—断—23—硫代胆甾—5(E)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—3)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝CH2，Y＝S，Z＝CH2〕在-78℃向上面(a)得到的酯(62mg)的己烷(1ml)溶液中滴加由哌啶(34mg)和Sn〔N(TMS)2〕2(176mg)的己烷(2.1ml)制备的试剂进行处理。将反应混合物升至室温并搅拌1小时。用甲醇沉淀锡并完成反应。用色谱纯化产物得到标题化合物(47mg)。
UV(Et2O)λmax210，269，λmin230nm；IR(CCl4)νmax1645，1465cm-1；NMR(CCl4)δ5.4-6.6(ABq，6，7-H′s)，4.7-5.0(bs，19-H′s)，3.7-4.7(m，1，3-H′s)，3.2-3.7(m，N-CH2′s)，3.07(s，S-CH2-CO2Et)，0.6(s，18-H′s).
c)1α，3β—二羟基—20—表—23—高—9，10—断—23—硫代胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝H，X＝CH2，Y＝S，Z＝CH2〕将从上面(b)得到的5(E)化合物(47mg)如实施例1(b)光致异构化得到5(Z)化合物(38mg)。
UV(Et2O)λmax210，264，λmin229nm；IR(CCl4)νmax1645，1455cm-1；NMR(CCl4)δ5.6-6.4(ABq，6，7-H′s)，4.7，5.3(each s，19-H′s)，3.9-4.7(m，1，3-H′s)，3.1-3.6(m，N-CH2′s)，3.07(s，S-CH2-CO2Et)，0.53(s，18-H′s).将其如实施例1(c)进行脱甲硅烷基得到标题化合物(19mg，用色谱纯化)。
UV(EtOH)λmax209，264，λmin230nm；IR(CDCl3)νmax3200-3660，1630，1450cm-1；NMR(CDCl3)δ5.4-6.5(ABq，6，7-H′s)，4.7 and 5.4(each s，19-H′s)，3.7-4.7(m，1，3-H′s)，3.0-3.7(m，N-CH2，S-CH2)，0.97(d，j＝6Hz，21-H′s)，0.55(s，18-H′s).
通过类似的方式用N—(β—丙氨酰)哌啶(8当量)代替巯基乙醇酸酯，然后根据实施例1(b)进行光致异构化，并根据实施例1(c)进行脱甲硅烷基来制备化合物23—氮杂—1α，3β—二羟基—20—表—23—高—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝H，X＝CH2，Y＝NH，Z＝(CH2)2〕类似地，用N—甘氨酰哌啶(8当量)代替N—(β—丙氨酰)哌啶制备化合物23—氮杂—1α，3β—二羟基—20—表—23—高—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，X＝CH2，Y＝NH，Z＝CH2〕。进行20—表醇(120mg)反应得到5(E)甲硅烷基化合物(60mg)UV(Et2O)λmax204，269，λmin230nm；IR(CDCl3)νmax1640，1460，1440cm-1；NMR(CDCl3)δ5.5-6.6(ABq，6，7-H′s)，4.9-5.0(bs，19-H′s)，3.8-4.9(m，1，3-H′s)，3.0-3.7(m，H′s adjacent to N)，0.53(s，18-H′s).异构化得到相应的5(Z)甲硅烷基化合物(50mg)UV(Et2O)λmax207，263，λmin227nm；IR(CDCl3)νmax1630，1460，1440cm-1；NMR(CDCl3)δ5.6-6.5(ABq，6，7-H′s)，4.7，5.3，(each s，19-H′s)，3.9-4.7(m，1，3-H′s)，3.0-3.7(m，H′s adjacent to N)，0.53(s，18-H′s).脱甲硅烷基得到所需1α，3β—二羟基化合物(10mg)UV(EtOH)λmax207，263，λmin227nm；IR(CDCl3)νmax3660-3100，1630，1440cm-1；NMR(CDCl3)δ5.7-6.5(ABq，6，7-H′s)，4.8，5.4(each s，19-H′s)，3.8-4.6(m，1，3-H′s)，3.0-3.8(m，H′s adjacent to N)，0.97(d，21-H′s)， 0.53(s，18-H′s).实施例10a)1α，3β—双—叔丁基二甲基甲硅烷氧基—20β—羟甲基—19—降—9，10——断孕甾—5(E)，7—二烯〔式(II)—A＝(A—8)，R3＝β—CH3，R4＝R5＝t—Bu(Me)2Si，L＝CH2OH〕将如Tetrahedron Lett.(1992)，33，p 2937所述方法得到的1α，3β—双—叔丁基二甲基甲硅烷氧基—20α—甲酰基—19—降—9，10——断孕甾—5，7—二烯〔式(II)—A＝(A—8)，R3＝α—CH3，R4＝R5＝t—Bu(Me)2Si，L＝CHO〕(约1.5g)溶解在苯(15ml)和甲醇(15ml)中，并在0℃与DBU(400μl)储存过夜使其异构化。在0℃用硼氢化钠(400mg)的乙醇(15ml)逐滴处理在苯(30ml)中还原醛(约1g)之前或之后将正(20α—甲酰基)和表(20β—甲酰基)醛的混合物用色谱(硅胶，15％苯的己烷洗脱)解析，然后将反应混合物在0℃再搅拌0.5小时。处理后将产物用色谱(硅胶，用苯或乙醚的己烷洗脱)解析产生标题化合物。
b)1α，3β—双—叔丁基二甲基甲硅烷氧基—20—表—19—降—9，10——断胆甾—5，7—二烯，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—8)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝t—Bu(Me)2Si，X＝共价键，Y＝Z＝CH2〕将从上面(a)得到的表—醇(200mg)在含有对—甲苯磺酰氯(110mg)和吡啶(243μl)的二氯甲烷(5ml)中和室温下搅拌2小时。加入碳酸氢钠(20ml饱和溶液)，再搅拌2小时，并处理反应混合物。将粗甲苯磺酸盐溶解在含有溴化锂(317mg)和1，8双—二甲氨基萘(“质子海绵”，40mg)的乙腈(6.6ml)和二氯甲烷(6.6ml)中，并将混合物在80℃加热回流30分钟。冷却该混合物并处理得到相应的20—溴甲基化合物，将其溶解在四氢呋喃(1.5ml)中，并在-78℃用由用二异丙基氨化锂〔由二异丙基胺(2.79ml)和丁基锂(6.39ml，1.6M的己烷溶液)制备的〕锂化N—乙酰基哌啶(1.32ml)的四氢呋喃(24.7ml)制备的锂—N—乙酰基哌啶(2.75ml)溶液处理。将反应混合物升至室温，15分钟后用氯化铵除去过量的试剂并处理混合物，得到标题化合物。
c)1α，3β—二羟基—20—表—19—降—9，10—断胆甾—5，7—二烯，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—8)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R1＝R5＝H，X＝共价键，Y＝Z＝CH2〕将从上面(b)得到的甲硅烷基醚(约100mg)的四氢呋喃溶液(1.5ml)用四丁基氟化铵(1.3ml，1M的四氢呋喃溶液)在室温脱甲硅烷基1小时。色谱分离得到标题化合物。实施例11a)1α，3β—双—叔丁基二甲基甲硅烷氧基—23—高—19—降—23—氧杂—9，10—断胆甾—5，7—二烯，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—8)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝t—Bu(Me)2Si，X＝CH2，Y＝O，Z＝CH2〕将叔—丁醇钾(1.2ml，1M的四氢呋喃溶液)滴加到1α，3β—双—叔丁基二甲基甲硅烷氧基—20α—羟甲基—9，10—断孕甾—5，7—二烯(Tetrahedron Lett.(1992)，33，p 2937)(约150mg)和18—冠—6—醚(25mg)的四氢呋喃(1ml)溶液中。将反应混合物在室温搅拌0.5小时，然后冷却至-10℃并通过滴加N—(溴乙酰基)哌啶(256mg)的四氢呋喃(1ml)处理。再搅拌10分钟后，处理该混合物并用色谱纯化产物得到标题化合物。
b)1α，3β—二羟基—23—高—19—降—23—氧杂—9，10—断胆甾—5，7—二烯，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—8)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝CH2，Y＝O，Z＝CH2〕将从上面(a)得到的甲硅烷基醚(80mg)的四氢呋喃溶液(0.6ml)用四丁基氟化铵(0.6ml，1M的四氢呋喃溶液)如实施例1(c)脱甲硅烷基。色谱纯化粗产物得到标题化合物。实施例1223—氮杂—1α，3β—二羟基—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝CH2，Y＝NH，Z＝共价键〕将20α—氨基甲基—1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—二烯〔式(II)—A＝(A—3)，R3＝α—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，L＝CH2NH2〕溶解在四氢呋喃中并用N—氯甲酰基哌啶(1.2当量)乙酰化得到1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—23—氮杂—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—3)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝CH2，Y＝NH，Z＝共价键〕。将产物如实施例1(b)进行光致异构化并如实施例1(c)除去甲硅烷基得到标题化合物。实施例13a)22—氮杂—1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—23—高—9，10—断胆甾—5(E)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺和其20—表异构体的混合物〔式(I)—A＝(A—3)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝α，β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝共价键，Y＝NH，Z＝(CH2)2〕将1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—三烯—20—酮(248mg)，异丙醇钛(IV)(682mg)和N—(β—丙氨酰)哌啶(187mg)的混合物在室温搅拌3小时。加入乙醇(1ml)和氰基硼氢化钠(38mg)并继续搅拌过夜。处理之后将标题产物在氧化铝柱上进行色谱分离。较小极性异构体(推测是20—表)(170mg)具有UV(Et2O)λmax208，269，λmin230nm；IR(CDCl3)νmax1625，1450cm-1NMR(CDCl3)δ5.5-6.8(ABq，6，7-H′s)，4.8-5.1(bs，19-H′s)，4.0-4.8(m，1，3-H′s)，3.1-3.7(m，H′s adjacent to N)，0.58(s，18-H′s).较大极性(少量)异构体(96mg)具有UV(Et2O)λmax208，268，λmin229nm；IR(CDCl3)νmax1630，1450cm-1；NMR(CDCl3)δ5.5-6.5(ABq，6，7-H′s)，4.7-5.0(bs，19-H′s)，3.8-4.7(m，1，3-H′s)，3.1-3.8(m，H′s adjacent to N)，0.53(s，18-H′s).
b)22—氮杂—1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20—表—23—高—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝共价键，Y＝NH，Z＝(CH2)2〕将从上面(a)得到的主要的、极性较小的异构体(95mg)如实施例1(b)进行光致异构化得到标题化合物(65mg)。
UV(Et2O)λmax207，263，λmin227nm；IR(CDCl3)νmax1620，1450cm-1；NMR(CDCl3)δ5.6-6.4(ABq，6，7-H′s)，4.7，5.3(each s，19-H′s)，3.1-3.7(H′sadjacent to N)，0.57(s，18-H′s).
c)22—氮杂—1α，3β—二羟基—20—表—23—高—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＋R2＝—(CH2)5—，R3＝β—CH3，R4＝R5＝H，X＝共价键，Y＝NH，Z＝(CH2)2〕将从上面(b)得到的甲硅烷基醚(65mg)如实施例1(c)进行脱甲硅烷基。然后通过中性氧化铝柱，接着进行制备性TLC(氧化铝平板)，得到标题化合物(17mg)。UV(EtOH)λmax206，262，λmin228nm；IR(CDCl3)νmax3640-3200，1615，1440cm-1；NMR(CDCl3)δ5.5-6.4(ABq，6，7-H′s)，4.7，5.3(each s，19-H′s)，3.7-4.7(m，1，3-H′s)，3.0-3.7(m，H′s adjacent toN)，1.17(d，21-H′s)，0.63(s，18-H′s).实施例14a)20α—氨基甲基—1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—三烯〔式(II)—A＝(A—3)，L＝CH2NH2，R3＝α—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si〕
将相应的20α—叠氮甲基化合物(L＝CH2N3)(247mg)的乙醚(0.75ml)溶液在0℃用氢化铝锂(1.9ml，1M溶液)处理。将反应混合物在室温搅拌45分钟，然后冷却至0℃，用乙醚稀释，用湿硫酸钠处理并过滤。用水和盐水洗涤滤液，然后蒸发得到标题化合物(208mg)。
UV(Et2O)λmax269，λmin228nm.
b)23—氮杂—1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—9，10—断胆甾—5(E)，7，10(19)—三烯酸，二乙酰胺〔式(I)—A＝(A—3)，R1＝R2＝C2H5，R3＝α—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝CH2，Y＝NH，Z＝共价键〕将从上面(a)得到的20α—氨基甲基化合物(204mg)的四氢呋喃(1.0ml)溶液用10％氢氧化钠水溶液(0.720ml)处理，冷却至0℃，用N，N—乙基氨基甲酰氯(80μl)处理，然后在室温搅拌4小时。用乙醚萃取上述粗产物并处理。色谱分离得到标题产物(164mg)。
UV(Et2O)λmax269，λmin228nm；IR(CCl4)νmax1650cm-1；NMR(CCl4)δ6.26-5.5(ABq，6，7-H′s)，4.73(s，19-H′s)，4.46-4(m，1，3-H′s)，0.53(s，18-H′s).
c)23—氮杂—1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，二乙酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＝R2＝C2H5，R3＝α—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝CH2，Y＝NH，Z＝共价键〕将从上面(c)得到的5(E)化合物(160mg)和含有吩嗪(80mg)的苯(22ml)溶液辐照75分钟。除去溶剂并用制备性TLC分离得到标题产物(102mg)。
UV(Et2O)λmax262-3，λmin226nm；IR(CCl4)νmax1650cm-1；NMR(CCl4)δ5.7-5.93(ABq 6，7-H′s)，4.6，4.96(each s，19-H′s)，0.56(s，18-H′s).
d)23—氮杂—1α，3β—二羟基—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，二乙酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＝R2＝C2H5，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝CH2，Y＝NH，Z＝共价键〕将从上面(c)得到的甲硅烷基醚(102mg)的四氢呋喃溶液(0.7ml)用四丁基氟化铵(0.7ml，1M的四氢呋喃溶液)在室温脱甲硅烷基5小时。用制备性TLC分离(2x)得到标题产物(35.8mg)。
UV(EtOH)λmax26，λmin226nm；IR(CDCl3)νmax1630，3200-3600cm-1；NMR(CDCl3)δ5.76-6.36(ABq，6，7-H′s)，4.8，5.2(each s，19-H′s)，3.0-3.3(m，H′s adjacent toN)，0.9-1.23(m，21-H′s，Me H′s of ethyl)，0.53(s，18-H′s).实施例15a)20α—和20β—氨基甲基—1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—9，10—断孕甾—5(E)，7，10(19)—三烯的混合物〔式(II)—A＝(A—3)，L＝CH2NH2，R3＝α，β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si〕将相应的20α，β—叠氮甲基化合物(L＝CH2N3)(170mg)的乙醚(0.5ml)溶液在0℃用氢化铝锂(1.36ml，1M溶液)处理。将反应混合物在室温搅拌45分钟，然后冷却至0℃，用乙醚稀释，用湿硫酸钠处理并过滤。用水和盐水洗涤滤液，然后蒸发得到标题化合物(109mg)。
UV(Et2O)λmax268，λmin228nm.
b)23—氮杂—1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—9，10—断胆甾—5(E)，7，10(19)—三烯酸，二乙酰胺及其20—表异构体〔式(I)—A＝(A—3)，R1＝R2＝C2H5，R3＝α，β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝CH2，Y＝NH，Z＝共价键〕将从上面(a)得到的20α，β—氨基甲基化合物(102mg)的四氢呋喃(0.5ml)溶液用10％氢氧化钠水溶液(0.360ml)处理，冷却至0℃，用N，N—二乙基氨基甲酰氯(39μl)处理，然后在室温搅拌3小时。用乙酸乙酯萃取上述粗产物并处理。色谱分离得到两种产物，据推测极性较小的为20—表化合物(45mg)。它具有UV(Et2O)λmax268，λmin228nm；IR(CCl4)νmax1650cm-1；NMR(CCl4)δ6.3-5.56(ABq，6，7-H′s)，4.8(s，19-H′s)，4.36-4.03(m，1，3-H′s)，3.0-3.3(m，H′sadjacent to N)，0.56(s，18-H′s).
c)23—氮杂—1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20—表—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，二乙酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＝R2＝C2H5，R3＝β—CH3，R4＝R5＝(i—Pr)3Si，X＝CH2，Y＝NH，Z＝共价键〕将从上面(b)得到的5(E)化合物(45mg)的含有吩嗪(38mg)的苯(11ml)溶液辐照75分钟，并如实施例14(c)处理。用制备性TLC分离得到标题产物(102mg)。UV(Et2O)λmax262，λmin227nm；IR(CCl4)νmax1640 cm-1；NMR(CCl4)δ5.56-5.9(ABq，6，7-H′s)，4.59，4.96(each s，19-H′s)，3.96-4.3(m，1，3-H′s)，2.9-3.23(m，H′s adjacentto N)，0.56(s，18-H′s).
d)23—氮杂—1α，3β—二羟基—20—表—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，二乙酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＝R2＝C2H5，R3＝β—CH3，R4＝R5＝H，X＝CH2，Y＝NH，Z＝共价键〕将从上面(c)得到的甲硅烷基醚(32mg)的四氢呋喃(0.35ml)溶液如实施例14(d)用四丁基氟化铵(0.35ml，1M四氢呋喃溶液)处理进行脱甲硅烷基。处理并色谱分离得到标题产物(6mg)，再在减活化氧化铝上进行色谱分离。
UV(EtOH)λmax263，λmin227nm；IR(CDCl3)νmax1630，3400cm-1；NMR(CDCl3)δ5.76-6.33(ABq，6，7-H′s)，4.83，5.16(each s，19-H′s)，3.73-4.3(m，1，3-H′s)，2.96-3.3(m，H′s adjacent to N)，0.8-1.16(m，21-H′s，Me H′s ofethyl)，0.56(s，18-H′s).实施例161α，3β—二羟基—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，N—甲基—N—苯基酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＝CH3，R2＝Ph，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝CH2，Y＝CH2，Z＝共价键〕
将1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸(175mg)和二环己基碳化二亚胺(52mg)的二氯甲烷(0.75ml)的混合物在室温搅拌1小时，然后用N—甲基苯胺(27mg)处理。将所得混合物在室温搅拌过夜，用TLC监测——如果开始形成的酰基亚氨酸酯还没有完全反应，则可以加入更多的N—甲基苯胺(0.5—1当量)并再搅拌10—15小时。然后将混合物用乙醚稀释，依次用稀盐酸和水洗涤，干燥并蒸发溶剂。在硅胶上用色谱纯化产物。如实施例14(d)用四丁基氟化铵的四氢呋喃处理该产物进行脱甲硅烷基得到标题产物(如果需要，用色谱纯化)。或者，根据制备例1(a)氢化甲硅烷基醚，接着进行类似的脱甲硅烷基得到1α，3β—二羟基—9，10—断胆甾—5(Z)，7—二烯酸，N—甲基—N—苯基酰胺〔式(I)—A＝(A—4)，R1＝CH3，R2＝Ph，R3＝α—CH3，R4＝R5＝H，X＝CH2，Y＝CH2，Z＝共价键〕。实施例171α，3β—二羟基—20—表—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，N—甲基—N—苯基酰胺〔式(I)—A＝(A—2)，R1＝CH3，R2＝Ph，R3＝β—CH3，R4＝R5＝H，X＝CH2，Y＝CH2，Z＝共价键〕将1α，3β—双—三异丙基甲硅烷氧基—20—表—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸(175mg)和二环己基碳化二亚胺(52mg)的二氯甲烷(0.75ml)的混合物在室温搅拌1小时，然后用N—甲基苯胺(27mg)处理。将所得混合物在室温搅拌过夜，用TLC监测——如果开始形成的酰基亚氨酸酯还没有完全反应，则可以加入更多的N—甲基苯胺(0.5—1当量)并再搅拌10—15小时。然后将混合物用乙醚稀释，依次用稀盐酸和水洗涤，干燥并蒸发溶剂。在硅胶上用色谱纯化产物。如实施例14(c)用吩嗪的苯将该产物进行光敏异构化，接着如实施例14(d)用四丁基氟化铵的四氢呋喃处理进行脱甲硅烷基得到标题产物(如果需要，用色谱纯化)。或者，根据制备例1(a)氢化甲硅烷基醚，接着进行类似的脱甲硅烷基得到1α，3β—二羟基—20—表—9，10—断胆甾—5(E)，7—二烯酸，N—甲基—N—苯基酰胺〔式(I)—A＝(A—5)，R1＝CH3，R2＝Ph，R3＝β—CH3，R4＝R5＝H，X＝CH2，Y＝CH2，Z＝共价键〕。
权利要求
1.通式(I)化合物， 其中R1和R2可以相同或不同，分别代表氢原子或脂族，环脂族，芳脂族或芳香基或与它们连接的氮原子一起形成一个杂环基；R3代表一个具有α—或β—构型的甲基；X代表一个共价键或C1—2亚烷基；Y代表—O—，—S—，—CH2—或—NR—，其中R是氢原子或有机基团；Z代表一个共价键或C1—3亚烷基；A＝代表1α—羟基化维生素D3或其类似物的A—环上的环亚己基部分，但如果当—X—Y—Z—一起代表一个包含最多4个碳原子的亚烷基时，A＝在10—位不带有外向环亚甲基。
2.如权利要求1的通式(I)化合物，其中A＝代表下列基团之一 (其中R4和R5可以相同或不同，分别代表氢原子或O—保护基)。
3.如权利要求2的通式(I)化合物，其中R4和R5代表醚化甲硅烷基。
4.如权利要求2的通式(I)化合物，其中R4和R5选自氢原子和代谢不稳定醚化或酯化基。
5.如权利要求1的通式(I)化合物，其中A＝代表下列基团之
6.如上述任一权利要求中的通式(I)化合物，其中R1和R2选自氢原子，C1-6烷基，C3-8环烷基，C6-12芳基C1-4烷基和任选取代的C6-12碳环芳基。
7.如权利要求6的通式(I)化合物，其中R1和R2选自氢原子，C1-6烷基和C3-8环烷基。
8.如权利要求7的通式(I)化合物，其中R1和R2选自氢原子，甲基，乙基和环丙基。
9.如任一权利要求1—5中的通式(I)化合物，其中R1R2N—代表含有一个或多个5—和/或6—元环的杂环基，该环任选含有一个或多个其它选自O，N和S的杂原子。
10.如权利要求9的通式(I)化合物，其中R1R2N—代表哌啶子基。
11.化合物1α，3β—二羟基—20—表—22—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺；1α，3β—二羟基—20—表—23—高—22—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，二甲胺，环丙胺和哌啶酰胺；1α，3β—二羟基—20—表—22—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，吗啉酰胺；1α，3β—二羟基—20—表—23—双—高—22—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺；1α，3β—二羟基—20—表—23—高—23—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺；1α，3β—二羟基—23—高—23—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，二乙胺，环丙胺和哌啶酰胺以及它们的20—表类似物；1α，3β—二羟基—23—高—23—氧杂—9，10—断胆甾—5(Z)，7—二烯酸，二乙胺，环丙胺和哌啶酰胺以及它们的29—表类似物；1α，3β—二羟基—23—高—23—氧杂—10—螺环丙基—9，10—断胆甾—5(Z)，7—二烯酸，二乙胺，环丙胺和哌啶酰胺以及它们的20—表类似物；1α，3β—二羟基—9，10—断胆甾—5(Z)，7—二烯酸，哌啶酰胺；1α，3β—二羟基—10—螺环丙基—9，10—断胆甾—5(Z)，7—二烯酸，哌啶酰胺；1α，3β—二羟基—23—高—9，10—断胆甾—5(Z)，7—二烯酸，哌啶酰胺；1α，3β—二羟基—23—高—10—螺环丙基—9，10—断胆甾—5(Z)，7—二烯酸，哌啶酰胺；1α，3β—二羟基—23—高—19—降—9，10—断胆甾—5，7—二烯酸，哌啶酰胺；1α，3β—二羟基—20—表—23—高—9，10—断胆甾—5(Z)，7—二烯酸，哌啶酰胺；1α，3β—二羟基—20—表—23—高—9，10—断—23—噻胆汁—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺；23—氮杂—1α，3β—二羟基—20—表—23—双—高—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺；23—氮杂—1α，3β—二羟基—20—表—23—高—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺；1α，3β—二羟基—20—表—19—降—9，10—断胆甾—5，7—二烯酸，哌啶酰胺；1α，3β—二羟基—23—高—19—降—23—氧杂—9，10—断胆甾—5，7—二烯酸，哌啶酰胺；23—氮杂—1α，3β—二羟基—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺；22—氮杂—1α，3β—二羟基—20—表—23—高—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，哌啶酰胺；23—氮杂—1α，3β—二羟基—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，二乙酰胺和它们的20—表类似物；1α，3β—二羟基—9，10—断胆甾—5(Z)，7，10(19)—三烯酸，N—甲基—N—苯基酰胺和它们的20—表类似物；以及1α，3β—二羟基—9，10—断胆甾—5(Z)，7—二烯酸，N—甲基—N—苯基酰胺和它们的20—表类似物。
12.上述任一权利要求中的通式(I)活性化合物用于人或动物创伤愈合，甲状旁腺激素抑制或治疗或预防肿瘤疾病，传染，骨骼疾病，自身免疫疾病，宿主—移植物反应，移植物排斥作用，炎症，肿瘤，增生，肌病，肠病，脊椎炎心脏病，皮肤病，高血压，类风湿性关节炎，关节炎性牛皮癣，继发性甲状旁腺机能亢进或哮喘。
13.任一权利要求1—11中通式(I)的活性化合物在制药中的用途，该药物用于人或动物创伤愈合，甲状旁腺激素抑制或治疗或预防肿瘤疾病，传染，骨骼疾病，自身免疫疾病，宿主—移植物反应，移植物排斥作用，炎症，肿瘤，增生，肌病，肠病，脊椎炎心脏病，皮肤病，高血压，类风湿性关节炎，关节炎性牛皮癣，继发性甲状旁腺机能亢进或哮喘。
14.药物组合物，含有任一权利要求1—11中通式(I)活性化合物以及与其混合的一种或多种药物上可接受的载体或赋形剂。
15.一种治疗人或动物疾病以促进创伤愈合，甲状旁腺激素抑制或抵抗肿瘤疾病，传染，骨骼疾病，自身免疫疾病，宿主—移植物反应，移植物排斥作用，炎症，肿瘤，增生，肌病，肠病，脊椎炎心脏病，皮肤病，高血压，类风湿性关节炎，关节炎性牛皮癣，继发性甲状旁腺机能亢进或哮喘的方法，该方法包括给患有所说疾病的患者施用有效剂量的任一权利要求1—11中通式(I)的活性化合物。
16.一种权利要求1定义的通式(I)化合物的制备方法，包括A)将通式(I)的5，6—反异构体异构化为相应的5，6—顺异构体，接着，如果必要和/或需要，除去任何O—保护基；B)羟基化通式(I)化合物的1—未取代—5，6—反类似物以制备通式(I)的5，6—反异构体，接着，如果必要和/或需要，进行异构化和/或除去任何O—保护基；C)使含有所需的17—位侧链的前体的化合物进行一步或多步反应并与一个或多个为形成所需侧链而使用的反应物反应，接着，如果必要和/或需要，进行异构化和/或除去任何O—保护基；或D)使式(I)化合物反应以改变A＝基团的取代模式，接着，如果必要和/或需要，进行异构化和/或除去任何O—保护基。
全文摘要
新的1α-羟基维生素D衍生物和它们的20-表类似物，其包含通式(I)化合物，其中R
文档编号A61P43/00GK1125436SQ9419243
公开日1996年6月26日 申请日期1994年5月6日 优先权日1993年5月7日
发明者R·H·赫瑟, S·K·S·瑟逖, M·拉高帕尔 申请人:医学与化学研究所