专利名称：邻位取代的苯甲酰胍,其制法、用途以及含有它们的药物的制作方法
技术领域：
本发明涉及式I的苯甲酰胍类化合物及其药物可接受的盐，
其中R(1)是CF3；取代基R(2)和R(3)之一是氢；并且每种情况下，另一取代基R(2)或R(3)是-C(OH)(CH3)-CH2OH、-CH(CH3)-CH2OH或-C(OH)(CH3)2；R(4)是甲基、甲氧基、Cl或CF3。
优选的式I化合物是其中R(1)是CF3；取代基R(2)和R(3)之一是氢；并且每种情况下，另一取代基R(2)或R(3)是-C(OH)(CH3)-CH2OH、-CH(CH3)-CH2OH或-C(OH)(CH3)2；R(4)是甲基，及其药物可接受的盐。
特别优选的式I化合物是其中R(1)是CF3；取代基R(2)和R(3)之一是氢；并且每种情况下，另一取代基R(2)或R(3)是-CH(CH3)-CH2OH；R(4)是甲基，及其药物可接受的盐。
最优选的式I化合物是其中R(1)是CF3；R(2)是-CH(CH3)-CH2OH；R(3)是氢；R(4)是甲基，及其药物可接受的盐。
如果取代基R(2)或R(3)之一含有不对称中心，该不对称中心可具有S或R构型。该化合物可以以光学异构体、非对映异构体、外消旋体或它们的混合物存在。
本发明还涉及式I化合物的制备方法，该方法包括将式II化合物与胍反应，
其中R(1)-R(4)具有给定的意义并且L是易于被亲核取代的离去基团。
优选通过已知的方法从相应的酰氯(式II，L＝Cl)制备式II活泼的酸衍生物，其中L是烷氧基，优选甲氧基、苯氧基、苯硫基、甲硫基或2-吡啶硫基、含氮杂环，优选1-咪唑基，所述酰氯又可以通过已知的方法从相应的羧酸(式II，L＝OH)，例如用亚硫酰氯制得。
除式II的酰氯(L＝Cl)外，还可以通过已知方法从相应的苯甲酸衍生物(式II，L＝OH)制得其它的式II活泼的酸衍生物，例如用HCl气体在甲醇中处理制得式II的甲酯(L＝OCH3)、用羰基二咪唑处理制得式II的咪唑酰胺(imidazolides)[L＝1-咪唑基，Staab，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1，351-367(1962)l、与Cl-COOC2H5或甲苯磺酰氯在三乙胺的存在下在惰性溶剂中形成混合酸酐II、以及用二环己基碳二亚胺(DCC)或用O-[(氰基(乙氧羰基)亚甲基)氨基]-1，1，3，3-四甲基脲阳离子-四氟硼酸盐(“TOTU”)活化苯甲酸[Proceedings of the 21st European Peptides Symposium，Peptides 1990，Editors E.Giralt and D.Andreu，Escom，Leiden，1991]。在J.March，高等有机化学，第3版(John Wiley&Sons，1985)350页中详细给出了多种制备式II活泼的羧酸衍生物的适宜方法。
式II活泼的酸衍生物与胍的反应按照已知的方式在质子或非质子极性惰性有机溶剂中进行。在苯甲酸甲酯(II，L＝OMe)与胍的反应中，已证实在20℃到溶剂沸腾温度下的甲醇、异丙醇或THF中进行较为适宜。大部分化合物II与不含盐的胍的反应在非质子惰性溶剂如THF、二甲氧基乙烷或二噁烷中进行较为有利。然而，当使用碱如NaOH时，可以使用水作为II与胍反应的溶剂。
当L＝Cl时，在进行反应时最好加入酸清除剂，例如加入过量的胍，以结合氢卤酸。
某些基本的式II苯甲酸衍生物是已知的并在文献中有记载。式II的未知化合物可以通过文献中已知的方法制备。得到的苯甲酸衍生物通过上述方法之一进行反应生成本发明式I的化合物。
2-、3-、4-和5-位取代基的引入通过文献中已知的方法，经钯介导的芳基卤化物或芳基三氟甲基磺酸酯(aryl triflate)与例如，有机锡烷、有机硼酸或有机硼烷或有机铜或有机锌化合物的交叉偶联来完成。
一般地，苯甲酰胍I是弱碱，可与酸结合形成盐。可能的酸加成盐是所有药物可接受酸的盐，例如卤化物，特别是盐酸盐、乳酸盐、硫酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、乙酸盐、磷酸盐、甲磺酸盐和对甲苯磺酸盐。
化合物I是取代的酰基胍。
在欧洲专利申请公开640588(HOE 93/F 254)中公开了与本发明的式I化合物相似的化合物，根据其中的结构式可以推出本发明的化合物。然而，与已知化合物明显不同的是，它们抑制Na+/H+交换的活性非常高，并且水溶性非常好。
同已知化合物一样，它们没有不利的利尿特性，而具有很好的抗心律失常特性，例如对于治疗在氧缺乏症状中出现的疾病非常重要。根据其药学特性，本发明的化合物特别适于作为含有心脏保护组分的抗心律失常药物，该药物可以预防和治疗梗塞，还可以治疗心绞痛，此外它们还可以以预防性的方式抑制或大大减少局部缺血诱发的损伤形成的病理学过程，特别是局部缺血诱发的心律失常形成的病理学过程。由于本发明式I化合物对病理性缺氧和局部缺血部位的保护作用，可根据这些化合物对细胞Na+/H+交换机制的抑制作用将其用作治疗因局部缺血造成的各种急性或慢性损伤或由此引起的原发性或继发性疾病的药物。这涉及它们用作用于外科手术如器官移植的药物，在这种情况下可将化合物用于在移植前及移植过程中在供者体内保护器官，用于保护移植出的器官，例如在用生理浴液进行处理或保存的过程中，以及转移到受者体内的过程中。在对例如心脏或外周血管进行血管成形术时，所述化合物也是有价值的保护性药物。相应于其对局部缺血诱发的损伤所起的保护作用，所述化合物还适于用作治疗神经系统，特别是中枢神经系统局部缺血的药物，在这种情况下，它们适于例如用于治疗中风或脑水肿。此外，本发明式I的化合物还适于治疗休克，如过敏性、心原性、血容量减少性和细菌性休克。
此外，本发明式I的化合物的不同之处在于对细胞增殖，例如成纤维细胞增殖和血管平滑肌细胞增殖的强抑制作用。因此，式I化合物适于作为治疗其中细胞增殖是主要或次要原因之疾病的有价值药物，并因此可用作抗动脉粥样硬化剂、抗糖尿病晚期并发症、癌症、纤维化疾病如肺纤维化、肝纤维化或肾纤维化的药物，器官肥大和增生，特别是前列腺增生和前列腺肥大。
本发明的化合物是细胞钠-质子对向转运器(Na+/H+交换器)的有价值的抑制剂，在多种疾病(原发性高血压、动脉粥样硬化、糖尿病等)，甚至易于检测的细胞如红细胞、血小板或白细胞中均存在所述钠-质子交换器。因此本发明化合物适于作为优秀且简便的科研工具，例如将其用作测定和鉴别特定形式的高血压的诊断剂，但也可用作动脉粥样硬化、糖尿病、增殖性疾病等的诊断剂。另外，式I化合物还适于预防性治疗以预防高血压如原发性高血压的产生。
另外，还发现式I化合物对血清脂蛋白具有有益的作用。通常认为，对于动脉粥样硬化性血管改变的形成，特别是冠心病，血脂值过高、所谓的低脂蛋白血症是明显的危险因素。因此，降低升高的血清脂蛋白对于动脉粥样硬化性改变的预防和恢复是极为重要的。除降低血清总胆固醇外，降低所述总胆固醇中特定致动脉粥样硬化性脂部分的比例，特别是低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白(VLDL)非常重要，因为这些脂部分是致动脉粥样硬化的危险因素。另一方面，认为高密度脂蛋白对冠心病具有保护作用。因此，降血脂药应不仅能够降低总胆固醇，而且还应能够降低VLDL和LDL血清胆固醇部分。现已发现，式I化合物具有有价值的治疗可应用特性，因其能够影响血清的脂质水平。因此，它们可明显降低升高的LDL和VLDL的血清浓度，这些浓度的升高是由于例如饮食性摄入富含胆固醇和脂质食物的增加，或由于病理性代谢改变，如遗传性低脂血症。因此，它们可通过消除危险因素而用于预防或恢复动脉粥样硬化性改变。这些不仅包括原发性低脂血症，还包括某些继发性低脂血症，如在糖尿病中所发生的。此外，式I化合物可明显降低因代谢异常而诱发的梗塞，特别是显著降低诱发的梗塞大小和严重程度。此外，式I化合物可有效保护因代谢异常而引起的内皮损伤。由于这种对内皮紊乱综合症的血管保护作用，式I化合物是预防和治疗冠状动脉痉挛、动脉粥样硬化形成和动脉粥样硬化、左心室肥大和扩张性心肌病和血栓形成的有价值的药物。
因此，所述化合物可用于生产治疗高胆固醇血症的药物；用于生产预防动脉粥样硬化形成的药物；用于生产预防和治疗动脉粥样硬化的药物；用于生产预防和治疗因升高的胆固醇水平所引起之疾病的药物，用于生产预防和治疗因内皮功能紊乱所引起之疾病的药物，用于生产预防和治疗动脉粥样硬化诱发的高血压的药物，用于生产预防和治疗动脉粥样硬化诱发的血栓形成的药物，用于生产预防和治疗高胆固醇血症和内皮功能紊乱诱发的局部缺血性损伤和局部缺血后再灌损伤的药物，用于生产预防和治疗高胆固醇血症和内皮功能紊乱诱发的心脏肥大和心疾病的药物，用于生产预防和治疗高胆固醇血症和内皮功能紊乱诱发的冠状动脉痉挛和心肌梗塞的药物，用于和降血压物质，优选血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂和血管紧张素受体拮抗剂联合来生产治疗所述疾病的药物，式I的NHE抑制剂与降低血脂水平的活性化合物，优选HMG-CoA还原酶抑制剂(如洛伐他丁或普伐他丁)联合，在这种情况下，后者产生降血脂作用，由此增强式I的NHE抑制剂的降血脂作用，从活性化合物的作用增强而用量减少证实，这种联合是有利的。
本发明要求将式I的钠-质子交换抑制剂作为一种降低升高的血脂的新药，以及该钠-质子交换抑制剂与降压药和/或降血脂药联合来给药。
含有化合物I的药物可通过口服、胃肠外、静脉内、直肠或吸入给予，优选的给药方法取决于具体的疾病形式。可将化合物I单独或与药物辅料一起用于兽用或人用药。
本领域技术人员根据其经验对于适用于所需药物制剂的辅料是熟知的。除溶剂、凝胶形成剂、栓剂基质、片剂辅料和其它活性化合物载体外，还可使用例如抗氧剂、分散剂、乳化剂、消泡剂、矫味剂、防腐剂、增溶剂或着色剂。
对于口服给药的形式，可将活性化合物与适宜的添加剂如赋形剂、稳定剂或惰性稀释剂混合，并通过常规方法制成适于给药的形式，如片剂、包衣片剂、硬胶囊、水、醇或油溶液。可以使用的惰性载体是例如阿拉伯胶、镁盐、碳酸镁、磷酸钾、乳糖、葡萄糖或淀粉，特别是玉米淀粉。可以以干燥或湿润的颗粒进行制备。适宜的油赋形剂或溶剂是例如植物或动物油如葵花籽油或鱼肝油。
对于皮下或静脉内给药，可将活性化合物配制成溶液、悬浮液或乳液，如果需要可加入常用于该目的的物质如增溶剂、乳化剂或其它辅料。可用的溶剂是例如水、生理盐水或醇如乙醇、丙醇、甘油，以及糖溶液如葡萄糖或甘露糖醇溶液，或上述各种溶剂的混合物。
适于以气雾剂或喷雾形式给药的药物制剂是例如式I活性化合物在可药用溶剂如乙醇或水或这些溶剂的混合物中形成的溶液、悬浮液或乳液。
如需要，该制剂还可含有其它药物辅料如表面活性剂、乳化剂和增溶剂以及抛射剂。所述制剂含有的活性化合物的含量通常为约0.1-10％重量，特别是约0.3-3％重量。
待给药的式I活性化合物的剂量和给药频率取决于所用化合物的效力和作用持续的时间；此外，还取决于待治疗疾病的性质和严重程度以及待治疗哺乳动物的性别、年龄、体重和个体反应。
平均来说，对于体重为约75kg的患者，式I化合物的每日剂量为至少0.001mg/kg体重，优选0.01mg/kg体重，最多为10mg/kg体重，优选1mg/kg体重。在疾病的急性发作时，例如在心肌梗塞刚发作后，可能会需要更高特别是更频繁的剂量，例如多至每日4个单位剂量。具体地讲，在静脉内给药的情况下，例如在重症监护病房的梗塞患者中，可能需要高达200mg/天的剂量。
缩写MeOH 甲醇DMF N，N-二甲基甲酰胺RT室温EA乙酸乙酯(EtOAc)EI电子碰撞ES电子喷雾解离mp熔点THF 四氢呋喃eq当量实验部分制备苯甲酰胍(I)的一般方法方法A从苯甲酸(II，L＝OH)制备将1.0当量式II的苯甲酸衍生物溶于或悬浮在无水THF中(5ml/mmol)，然后用1.1当量的羰基二咪唑处理。在室温下搅拌2小时后，向反应溶液中加入5.0当量的胍。搅拌过夜后，减压蒸除THF(旋转蒸发仪)，将残余物用水处理，用2N盐酸将混合物调至pH6-7并蒸出相应的苯甲酰胍(式1)。通过用盐酸或其它药物可接受酸的水溶液、甲醇溶液或乙醚溶液处理，可将得到的苯甲酰胍转变成相应的的盐。制备苯甲酰胍(I)的一般方法方法B从苯甲酸烷基酯(II，L＝O-烷基)制备将1.0当量式II的苯甲酸烷基酯和5.0当量的胍(游离碱)溶于异丙醇或悬浮在THF中，然后加热至沸(一般反应2-5小时)直至转化完全(薄层检测)。减压蒸除溶剂(旋转蒸发仪)，将残余物溶于EA中并将混合物用碳酸氢钠溶液洗涤3次。将其用硫酸钠干燥，真空蒸除溶剂并将残余物用适宜的洗脱剂如EA/MeOH 51进行硅胶色谱。
(盐的形成与方法A相同)。实施例4-(1’-羟基-2’-丙基)-2-甲基-5-三氟乙基苯甲酰胍盐酸盐无色晶体，从100℃开始分解，MS(ES)M++H＝304
合成路线a)4-羟基-2-氯-5-碘苯甲酸甲酯从4-羟基-2-氯苯甲酸甲酯通过Olah碘代反应，用1当量N-碘代琥珀酰亚胺在5当量三氟甲磺酸中在室温下反应24时制得，无色晶体，mp.188-189℃，MS(EI)M+＝312b)4-苄氧基-2-氯-5-碘苯甲酸甲酯通过1a)与1当量苄基溴反应来制备，反应在室温下、在1.5当量碳酸钾的存在下在无水DMF中进行。用水处理并随后用异丙醇重结晶得到无色晶体，mp.107-108℃，MS(ES)M++H＝403c)4-苄氧基-2-氯-5-三氟甲基苯甲酸甲酯通过1b)与1当量三氟乙酸钾和1.1当量碘化铜(I)反应来制备，反应在DMF中于回流下进行。经柱色谱处理得到无色固体，mp.127-128℃，MS(ES)M++H＝345d)4-苄氧基-2-甲基-5-三氟甲基苯甲酸甲酯通过1c)与5当量氯化甲基锌进行交叉偶联来制备，反应在THF/DMF中于回流下、在存在0.1当量乙酸钯(II)催化剂、0.2当量三苯膦和0.11当量碘化铜(I)的条件下进行，用水处理，乙酸乙酯萃取并随后进行硅胶柱色谱得到无色固体，mp.105℃，MS(ES)M++H＝325e)4-羟基-2-甲基-5-三氟甲基苯甲酸甲酯通过将1d)在钯/炭(10％)存在下、在甲醇中于室温下氢化来制备。加入环己烷引发结晶，无色固体，mp.162-163℃，MS(ES)M++H＝235f)4-三氟甲磺酰氧基-2-甲基-5-三氟甲基苯甲酸甲酯通过将1e)与1.1当量三氟甲磺酸酐反应来制备，反应在1.1当量三乙胺的存在下，在无水二氯甲烷中于0℃进行。经柱色谱得到无定形固体。g)4-异丙基-2-甲基-5-三氟甲基苯甲酸甲酯通过将10与5当量氯化异丙基锌交叉偶联来制备，反应在THF/DMF中于回流下、在存在0.1当量乙酸钯(II)催化剂、0.2当量三苯膦和0.11当量碘化铜(I)的条件下进行，用水处理，乙酸乙酯萃取并随后进行硅胶柱色谱得到无色油，MS(ES)M++H＝259h)4-(1’-羟基-2’-丙基)-2-甲基-5-三氟甲基苯甲酸甲酯通过将1g)用1.05当量硼烷/四氢呋喃复合物硼氢化并随后进行氧化反应(碱性过氧化氢)来制备。经水处理柱色谱纯化后得到无色油，MS(ES)M++H＝277i)4-(1’-羟基-2’-丙基)-2-甲基-5-三氟甲基苯甲酰胍盐酸盐根据一般方法B从1h)制备。药理学数据对兔红细胞Na+/H+交换器的抑制用含有2％胆固醇的标准食物喂养白色新西兰兔(Ivanovas)6周以激活Na+/H+交换，从而可以通过火焰光度法来测定通过Na+/H+交换而流入红细胞的Na+。从耳动脉取血并加入25IU肝素钾抗凝。取部分每种样品，通过离心一式两份测定humatocrits。在各种情况中，使用100μl等分试样用于测定红细胞中Na+的初始浓度。
为了测定氨氯吡嗪脒敏感性钠流入，将100μl每种血液样品在37℃下，在5ml pH 7.4的高渗盐-蔗糖介质中保温(mmol/l140 NaCl，3KCl，150蔗糖，0.1毒毛旋花甙G，20三-羟甲基氨基甲烷)。然后将红细胞用冰冷的MgCl2-毒毛旋花甙G溶液(mmol/l112 MgCl2，0.1毒毛旋花甙G)洗涤三次，然后在2.0ml蒸馏水中溶血。通过火焰光度法测定细胞内的钠含量。
从钠的初始值和保温后红细胞钠含量的差异来计算Na+的净流入量。可被氨氯吡嗪脒抑制的钠流入量为在加和不加3×10-4mol/l氨氯吡嗪脒的条件下保温后红细胞钠含量的差异。在本发明化合物的情况下，该过程也是一样的。
结果Na+/H+交换器的抑制实施例IC50(mol/l)1 0.0012×10-权利要求
1.式I的苯甲酰胍或其药物可接受的盐，
其中R(1)是CF3；取代基R(2)和R(3)之一是氢；并且每种情况下，另一取代基R(2)或R(3)是-C(OH)(CH3)-CH2OH、-CH(CH3)-CH2OH或-C(OH)(CH3)2；R(4)是甲基、甲氧基、Cl或CF3。
2.权利要求1所述的式I化合物，其中R(1)是CF3；取代基R(2)和R(3)之一是氢；并且每种情况下，另一取代基R(2)或R(3)是-C(OH)(CH3)-CH2OH、-CH(CH3)-CH2OH或-C(OH)(CH3)2；R(4)是甲基。
3.权利要求1或2所述的式I化合物，其中R(1)是CF3；取代基R(2)和R(3)之一是氢；并且每种情况下，另一取代基R(2)或R(3)是-CH(CH3)-CH2OH；R(4)是甲基。
4.权利要求1-3中任意一项所述的式I化合物或其药物可接受的盐，其中R(1)是CF3；R(2)是-CH(CH3)-CH2OH；R(3)是氢；R(4)是甲基。
5.权利要求1所述式I化合物的制备方法，包括将式II化合物与胍反应，
其中R(1)-R(4)具有给定的意义并且L是易于被亲核取代的离去基团。
6.权利要求1所述化合物I在生产用于治疗或预防因局部缺血而造成之疾病的药物中的用途。
7.权利要求1所述化合物I在生产用于治疗或预防心肌梗塞的药物中的用途。
8.权利要求1所述化合物I在生产用于治疗或预防心绞痛的药物中的用途。
9.权利要求1所述化合物I在生产用于治疗或预防心脏局部缺血的药物中的用途。
10.权利要求1所述化合物I在生产用于治疗或预防外周和中枢神经系统局部缺血症状以及中风的药物中的用途。
11.权利要求1所述化合物I在生产用于治疗或预防外周器官和肢体局部缺血症状的药物中的用途。
12.权利要求1所述化合物I在生产用于治疗休克状态的药物中的用途。
13.权利要求1所述化合物I在生产用于外科手术和器官移植的药物中的用途。
14.权利要求1所述化合物I在生产用于防腐和保存外科用移植物的药物中的用途。
15.权利要求1所述化合物I在生产用于治疗以细胞增殖为主要或次要原因之疾病的药物中的用途，例如它们在生产抗动脉粥样硬化剂、治疗糖尿病晚期并发症、癌症、纤维化疾病如肺纤维化、肝纤维化或肾纤维化、前列腺增生的药物中的用途。
16.权利要求1所述化合物I在生产用于治疗或预防脂代谢疾病的药物中的用途。
17.含有有效量权利要求1-4所述式I化合物的药物。
全文摘要
式Ⅰ的苯甲酰胍类化合物,其中R(1)至R(4)如权利要求所定义,该化合物适于作为含有心脏保护组分的抗心律失常药物,可用于梗塞的预防和治疗,以及心绞痛的治疗。它们可以以预防性的方式抑制局部缺血诱发的损伤,特别是局部缺血诱发的心律失常形成的病理学过程。
文档编号A61P13/00GK1194976SQ9810592
公开日1998年10月7日 申请日期1998年3月30日 优先权日1997年4月1日
发明者A·威彻特, J·布伦德尔, H·W·克里曼, H·J·兰格, J·R·史瓦克, U·阿尔布斯, W·舒尔茨 申请人:赫彻斯特股份公司