专利名称：三羟乙基芦丁含量高的曲可芦丁及其制备方法
技术领域：
本发明涉及7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁含量高而且湿润性提高的制剂、以7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁含量高而且溶解度提高的曲可芦丁(troxerutine)为基础的药物组合物、以及它们的制备方法。
7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁是曲可芦丁的主要成分。曲可芦丁是一种可用于治疗与血管—淋巴机能不全有关的症状(腿脚迟钝、疼痛、初次褥疮导致的急躁)以及治疗与痔疮危险相关的功能症状的组合物。曲可芦丁是由多种类黄酮类衍生物的混合物组成的，更准确地说是芦丁的羟乙基衍生物。上述治疗适应症是建立在曲可芦丁之营养血管及保护血管的性质上。已在动物和人中进行的研究证实羟乙基芦丁具有增强血管张力以及降低毛细血管渗透性的作用。
专利FR—5072M描述了一种曲可芦丁，其包含三羟乙基芦丁与四羟乙基芦丁的混合物，并具有增强毛细血管耐受性的性质，因此可用于治疗由于血液微循环的问题导致的疾病。该曲可芦丁是由芦丁和碳酸乙烯酯制成的，并在碱催化剂存在下受热。该方法的一个变化方案描述在专利FR—A—2.267.327中，其是通过环氧乙烷与芦丁在配位剂存在下反应制备7—单—β—羟乙基—芦丁，该物质在调节毛细血管的渗透性以及增强毛细血管的耐受性方面具有相当的活性。
用现有技术的方法制备的而且现今通常用于治疗的曲可芦丁一般包含约80—85％的三羟乙基化衍生物(7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁)、8—10％的四羟乙基化衍生物(5，7，3＇，4＇—四羟乙基芦丁)、及4—5％的二羟乙基化衍生物(7，4＇—二羟乙基芦丁)，其余的由7，3＇，4＇—和7，5＇，4＇—三羟乙基异栎素—3—糖苷以及7，4＇—二羟乙基莰非醇—3—芦丁和组成。由该方法制得的曲可芦丁通常在水中难以湿润，使得需要长的溶出时间，对于以溶液形式给药粉剂的药物制剂构成不便，而且为即时配制快速使用该制剂，仍需要通过上述药物剂型来使用所述溶液。
申请人所进行的研究表明可制备7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁含量高的曲可芦丁，而且该制剂(由于其7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁含量高，以下称为“高含量的曲可芦丁”)在理化性质(在水中的湿润性)和药学活性(药物动力学常数，其中包括与血浆蛋白的结合，以及流变性质)之间具有更好的折衷性。
因此更具体而言，本发明的目的是提供一种高含量的曲可芦丁，其包含至少92重量％的7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁，以分钟计算的湿润性低于10分钟，其中所述湿润性是在以下实验中测定的将3.5g高含量的曲可芦丁粉末倾倒在包含100ml水的烧杯中的水表面上，温度稳定在20℃，测定所述高含量的曲可芦丁粉末离开所述烧杯中的水表面时的时间，而且在以下实验中测得的湿润性平均低于100秒将2mm粗、3mm高、重量为63±2mg的棒形的高含量的曲可芦丁放置在诸如烧杯的容器中的水表面上，温度稳定在20℃，测定所述曲可芦丁被容器中的水湿润的时间。
事先的紧密性可通过所有合适类型的装置来实现，例如在制造胶囊的装置中。
本发明涉及一种高含量的曲可芦丁，其包含至少92重量％的7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁、最多5重量％的5，7，3＇，4＇—四羟乙基芦丁、以及最多4重量％的7，4＇—二羟乙基芦丁，更具体而言，在上述类型的高含量的曲可芦丁中，5，7，3＇，4＇—四羟乙基芦丁(最多5重量％)和7，4＇—三羟乙基芦丁(最多4重量％)含量都低。
本发明的再一个目的是提供一种药物组合物，其中高含量的曲可芦丁作为主要活性成分，该曲可芦丁包含至少92重量％的7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁，还包含最多5重量％的5，7，3＇，4＇—四羟乙基芦丁以及最多4重量％的7，4＇—二羟乙基芦丁，该药物组合物具有令人感兴趣的性质，提高了药物效力，而且在水中具有良好的湿润性和溶解度性质。
更具体而言，本发明涉及的药物组合物基于高含量的曲可芦丁，并结合适用于通过口服给药的赋形剂，例如等重量的甘露醇，该药物组合物具有更高的溶解度以及更快的溶出速度，而且溶出时间平均低于140秒，其是如下测定的将7.25g的颗粒放置在250ml的烧杯(内径为78mm，高度为95mm)中，该烧杯包含200ml的水(其温度约为20℃)，用35×6.5mm的磁搅拌棒于仪器(IKAMAG)的4速下搅拌，然后测量颗粒的溶解时间。
本发明的再一个目的是提供一种在生产条件下制备高含量的曲可芦丁的方法，该曲可芦丁具有更好的湿润性。
根据本发明的制备方法包括在受热的条件下使芦丁与过量的环氧乙烷在水中反应，其中存在碱，然后在醇中产生结晶，其特征在于浓缩反应物，使结晶物中的水含量低于8％、优选包含1—6％。
根据本发明方法的一个优选实施方案，结晶是在醇中进行，所述醇选自于单独或者混合形式的甲醇和异丙醇，优选为混合形式，结晶结束时的温度为35—15℃。更特别有利的是在温度下降的条件下进行结晶，以便与芦丁的二和四羟乙基化衍生物相比更适合三羟乙基化衍生物的结晶动力学。实际上，根据本发明方法的操作条件，在应用快速温度下降以及确定的溶剂比时，更有利于三羟乙基化衍生物的沉淀，并限制四和二羟乙基化衍生物的沉淀，在反应物中的最终浓度不足以在最后形成结晶。
如以上所述，温度的下降速度应快，在工业条件下，优选为高于每小时约20℃，优选每小时30℃。
添加在反应物中的碱可选自于氢氧化钠或氢氧化钾、或者碳酸钠、碳酸钾、碳酸锂或碳酸钙。
所得到的高含量的曲可芦丁包含至少92重量％的7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁、最多5重量％的5，7，3＇，4＇—四羟乙基芦丁、以及最多4重量％的7，4＇—二羟乙基芦丁。优选的是，7，4＇—二羟乙基芦丁的含量在1—3重量％之间，而5，7，3＇，4＇—四羟乙基芦丁的含量在2—4重量％之间。
有利的实施方案是，本发明的高含量的曲可芦丁包含至少93重量％的7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁、2—3.5重量％的5，7，3＇，4＇—四羟乙基芦丁、以及1.7—2.5重量％的7，4＇—二羟乙基芦丁。如以上所述，其可包含痕量的7，3＇，4＇—和7，5＇，4＇—三羟乙基异栎素—3—糖苷以及7，4＇—二羟乙基莰非醇—3—芦丁。
如以上所述，根据本发明的高含量的曲可芦丁包含至少92重量％的7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁。其还可包含由5，7，4＇—三羟乙基芦丁组成的异构体，用常规的分析技术不能容易地分离上述异构体。为方便起见，在本说明书中7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁如果需要也包括第二个异构体。相同地，7，4＇—二羟乙基芦丁如有必要也可包括7，3＇—二羟乙基芦丁异构体。
根据本发明制得的并包含如上所述含量的二、三和四羟乙基化衍生物的高含量的曲可芦丁，具有令人感兴趣的性质。具体而言，本发明的高含量的曲可芦丁在水中具有良好的湿润性，而且与常规的曲可芦丁相比，更好地抑制了红血球的凝聚。
实际上，在人血中进行的体外研究证实，当存在三或四羟乙基芦丁时对红血球凝聚的抑制作用被显著地提高，而且三羟乙基化衍生物的效力比四羟乙基化衍生物的更好。该效力的差异己由以下事实证实本发明之高含量的曲可芦丁(三羟乙基芦丁含量约为95％)优于市售的曲可芦丁(含量约为84％)。红血球凝聚降低的益处在于降低了全血的粘度，并由此形成更好的血液流动。该性质可通过血管回流及微循环流量(灌注毛细血管的密度增加)的增加来证实。
根据本发明制备的高含量的曲可芦丁的湿润性可与市售的曲可芦丁相媲美，后者包含约84％的三羟乙基化芦丁衍生物、约8％四羟乙基化芦丁衍生物、及约4％的二羟乙基化芦丁衍生物，其余的是上述异栎素—3—糖苷以及莰非醇—3—芦丁的羟乙基化衍生物。
将待测试的曲可芦丁3.5g倒入250ml的烧杯(低矮形的)中，该烧杯包含100ml的水，其中的温度与实验室的温度一致(约20℃)。在实验开始时升高温度，并测量高含量的曲可芦丁被完全湿润所需要的时间，也就是说其完全沉降到烧杯的底部。
下表显示了达到约100％分散液所需要的时间，其中用本发明之高含量的曲可芦丁以及市售曲可芦丁各三个样品进行测量。每个实验在进行时水溶液的温度都保持在20℃，没有搅拌。
对比表
相同地，将棒形的高含量的曲可芦丁粉末放置在80ml烧杯的表面上，所述曲可芦丁为2mm粗、3mm长，重量为63±3mg，而所述烧杯中包含100ml的水。在实验开始时升高水的温度，并测量高含量的曲可芦丁被完全湿润所需要的时间，也就是说其完全改变颜色。
下表显示了湿润本发明之高含量的曲可芦丁棒以及市售曲可芦丁棒所需要的平均时间。
上述两个实验的结果表明，本发明之高含量的曲可芦丁与参考的曲可芦丁相比具有更好的完全湿润性。
在以本发明之高含量的曲可芦丁为基础的药物组合物中进行的研究表明，流变性质基本上取决于7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁的高剂量，也就是说至少为92％；实际上，体外的研究表明在流变校正现象(缓解红血球的凝聚动力学以及解聚常数)与7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁的浓度之间存在关联性。
另外还证实本发明之高含量的曲可芦丁较少地与血浆蛋白结合，这限制了药物的相互作用所产生的危险。该优点对于老年患者更为重要，使得他们可以服用更多的药物。
以本发明之高含量的曲可芦丁为基础的药物组合物具有更高的溶解性，特别是在以下条件中。
制备例如包含500g待测试的高含量的曲可芦丁、500g甘露醇以及0.035g糖精钠的混合物。可混合上述组分，然后用乙醇/水的混合物使它们成粒。
在烘箱中干燥所得的颗粒。干燥颗粒在筛孔标称直径为800μm的筛网上进行筛分，然后在其中添加35.71g的桔味调料。混合5分钟直至均匀。将7.25g的颗粒倒入250ml(内径为78mm，高度为95mm)的烧杯中，该烧杯包含200ml的水(其温度约为20℃，用35×6.5mm的磁搅拌棒搅拌，为仪器(IKAMAG)的速度4)。测量颗粒溶解所需要的时间。
结果
用本发明之高含量的曲可芦丁制得的最终产物表明有很大的溶解性提高。同样，对于以高含量的曲可芦丁为基础的最终药物组合物，在产物最终为颗粒的形式时，成粒所需要的湿润液体体积更少。在湿润1000g以500g常规曲可芦丁和相同重量的甘露醇为基础的制剂时，需要150g的水。而在湿润相同量的以高纯曲可芦丁为基础的本发明组合物时，仅需要少于100g的水。
结果
以下实施例更为详细地说明本发明，但不是用于限制本发明的范围。除非另有说明，所有的份数和百分数都是以重量为基础。
在60—70℃之间的温度下减压(约2×104Pa)浓缩含水反应物，使最终结晶物中的水含量约为2％。
浓缩物添加在240ml甲醇中，然后过滤除去所形成的盐。在溶液中添加220ml的异丙醇，并在控制水含量后，在约8小时的时间内进行结晶，其中在最初的2个小时中使温度由65℃下降至25℃，然后在余下的6个小时中使温度保持在25—20℃之间。
得到89.4g(产率为80％)的曲可芦丁，其包含92％的三取代衍生物、4％的四取代衍生物和3％的二取代衍生物，余下的是上述异栎素—3—糖苷以及莰非醇—3—芦丁的羟乙基化衍生物。
得到87.2g(产率为78％)的曲可芦丁，其包含93％的三取代衍生物、3.5％的四取代衍生物和2.5％的二取代衍生物，余下的是上述相同的衍生物。
浓缩物放入800ml的甲醇中，然后在该溶液中添加30ml的异丙醇。如上进行结晶2小时，其中在结晶结束时使温度在25—15℃下保持l小时。
得到84.2g(产率为75％)的曲可芦丁，其包含95％的三取代衍生物、2.8％的四取代衍生物和1.7％的二取代衍生物，余下的是上述相同的衍生物。
权利要求
1.一种高含量的曲可芦丁，其包含至少92重量％的7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁，以分钟计算的湿润性低于10分钟，其中所述湿润性是在以下实验中测定的将3.5g高含量的曲可芦丁粉末倾倒在包含100ml水的烧杯中的水表面上，温度稳定在20℃，测定所述高含量的曲可芦丁粉末离开所述烧杯中的水表面时的时间，而且在以下实验中测得的湿润性低于100秒将2mm粗、3mm高、重量为63±2mg的棒形的高含量的曲可芦丁放置在诸如烧杯的容器中的水表面上，温度稳定在20℃，测定所述曲可芦丁被容器中的水湿润的时间。
2.一种高含量的曲可芦丁，其特征在于，其包含至少92重量％的7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁、最多5重量％的5，7，3＇，4＇—四羟乙基芦丁、以及最多4重量％的7，4＇—二羟乙基芦丁。
3.如权利要求1或2所述的高含量的曲可芦丁，其特征在于，7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁的含量超过或等于93重量％。
4.如权利要求2或3所述的高含量的曲可芦丁，其特征在于，7，4＇—二羟乙基芦丁的含量在1—3重量％之间。
5.如权利要求2—4之一所述的高含量的曲可芦丁，其特征在于，5，7，3＇，4＇—四羟乙基芦丁的含量在2—4重量％之间。
6.如权利要求2—5之一所述的高含量的曲可芦丁，其特征在于，其包含至少93重量％的7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁、2—3.5重量％的5，7，3＇，4＇—四羟乙基芦丁、以及1.7—2.5重量％的7，4＇—二羟乙基芦丁。
7.一种药物组合物，其包含如权利要求1—6之一所述的高含量的曲可芦丁以及药物赋形剂，优选通过口服给药。
8.一种药物组合物，其是基于高含量的曲可芦丁，并结合适用于通过口服给药的赋形剂，该药物组合物具有更高的溶解度以及更快的溶出时间，其溶出时间平均低于140秒，该溶出时间是如下测定的将7.25g的颗粒放置在250ml的烧杯(内径为78mm，高度为95mm)中，该烧杯包含200ml的水(其温度约为20℃，用35×6.5mm的磁搅拌棒于仪器(IKAMAG)的4速下搅拌)，然后测量颗粒的溶出时间。
9.如权利要求8所述的药物组合物，其特征在于，主要活性成分是7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁，并由高含量的曲可芦丁组成，该曲可芦丁包含至少92重量％的7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁。
10.如权利要求9所述的药物组合物，其特征在于，高含量的曲可芦丁的组成与权利要求2—6之一所述的相同。
11.如权利要求1—6之一所述的高含量的曲可芦丁在制备用于治疗与血管—淋巴机能不全有关的症状(腿脚迟钝、疼痛、初次褥疮导致的急躁)以及治疗与痔疮危险相关的功能症状的药物中的应用。
12.制备曲可芦丁的方法，该曲可芦丁包含至少92重量％的7，3＇，4＇—三羟乙基芦丁、最多5重量％的5，7，3＇，4＇—四羟乙基芦丁、以及最多4重量％的7，4＇—二羟乙基芦丁，所述方法包括在受热并存在碱的条件下使芦丁与过量的环氧乙烷反应，然后在醇中形成结晶，其特征在于，浓缩反应物，使结晶物中的水含量低于8％。
13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，水含量在1—6％之间。
14.如权利要求12或13所述的方法，其特征在于，结晶时的溶剂为单独或混合物形式的甲醇或异丙醇。
15.如权利要求12—14之一所述的方法，其特征在于，在进行结晶时，在1—2小时的时间内将温度快速降低约20℃以上。
16.如权利要求12—15之一所述的方法，其特征在于，在35—15℃的温度下进行结晶。
全文摘要
本发明涉及一种三羟乙基芦丁含量高的曲可芦丁。该曲可芦丁包含至少92重量%的7,3′,4′一三羟乙基芦丁,以分钟计算的湿润性低于10分钟,其中所述湿润性是在以下实验中测定的:将3.5g高含量的曲可芦丁粉末倾倒在包含100ml水的烧杯中的水表面上,温度稳定在20℃,测定所述高含量的曲可芦丁粉末离开所述烧杯中的水表面时的时间,而且在以下实验中测得的湿润性平均低于100秒:将2mm粗、3mm高、重量为63±2mg的棒形的高含量的曲可芦丁放置在诸如烧杯的容器中的水表面上,温度稳定在20℃,测定所述曲可芦丁被容器中的水湿润的时间。该曲可芦丁在水中具有更高的湿润性及溶解度。
文档编号A61K31/7048GK1331697SQ9981436
公开日2002年1月16日 申请日期1999年12月10日 优先权日1998年12月11日
发明者西里尔·埃斯塔诺夫, 弗朗索瓦·普吕沃 申请人:纳吉玛实验室