包含抗cd79b抗体的免疫偶联物的制作方法
【专利说明】包含抗CD79B抗体的免疫偶联物 发明领域
[0001] 本发明涉及包含抗CD79b抗体的免疫偶联物和使用它们的方法。
【背景技术】
[0002] CD79是由含有CD79a(Iga，mb-1)和CD79b(Ig0，B29)的共价异二聚体组成的 B细胞受体的信号传导组分。CD79a和CD79b各自含有细胞外免疫球蛋白（Ig)结构域、跨 膜结构域和细胞内信号传导结构域，后者为基于免疫受体酪氨酸的活化基序（ITAM)结构 域。⑶79在B细胞上并且例如在非霍奇金氏（Non-Hodgkin's)淋巴瘤细胞（NHL)上表 达（Cabezudo等，Haematologica，84 :413_418(1999) ;D'Arena等，Am.J.Hematol.，64 : 275-281 (2000) ;01ejniczak等，Immunol.Invest.，35 :93-114 (2006))。CD79 的表面表达都 需要CD79a和CD79b以及slg(Matsuuchi等Curr.Opin.Immunol.，13 (3) :270_7))。CD79b 在NHL上的平均表面表达与在正常B细胞上的相似，但具有更大范围（Matsuuchi等，Curr. Opin.Immunol. ,13(3) ：27〇-7 (2001)) 〇
[0003] 本领域需要用于诊断和治疗CD79b相关的病状（诸如癌症）的靶向CD79b的药剂。 本发明满足该需要并提供其他益处。
[0004] 发明概述
[0005] 本发明提供抗CD79b抗体和免疫偶联物以及使用它们的方法。
[0006] 在一些实施方案中，提供包含结合与细胞毒性剂共价连接的CD79b的 抗体的免疫偶联物。在一些实施方案中，细胞毒性剂为吡咯并苯并二氮杂卓 (pyrrolobenzodiazepine)。在一些实施方案中，结合⑶79b的抗体包含（i)含有SEQID NO:21的氨基酸序列的HVR-H1，（ii)含有SEQIDNO:22的氨基酸序列的HVR-H2,和（iii) 含有SEQIDN0:23的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗体还包含（i)含有选 自SEQIDNO:18、24和35的氨基酸序列的HVR-L1，（ii)含有SEQIDNO:25的氨基酸序 列的爪^-12，和（也）含有3￡〇10勵：26的氨基酸序列的爪^-13。在一些实施方案中，抗 体包含含有SEQIDNO:24的氨基酸序列的HVR-L1。
[0007] 在一些实施方案中，抗体包含：a)与SEQIDNO:11的氨基酸序列具有至少95% 序列同一性的VH序列；或b)与SEQIDNO: 12的氨基酸序列具有至少95 %序列同一性的 VL序列；或c)如（a)中的VH序列和如（b)中的VL序列。在一些实施方案中，抗体包含具 有选自SEQIDN0:7、9、ll和13的氨基酸序列的VH序列。在一些实施方案中，抗体包含具 有SEQIDNO: 11的氨基酸序列的VH序列。在一些实施方案中，抗体包含具有选自SEQID NO:8、10、12和14的氨基酸序列的VL序列。在一些实施方案中，抗体包含具有SEQIDNO: 12的氨基酸序列的VL序列。在一些实施方案中，抗体为IgGl、IgG2a或IgG2b抗体。
[0008] 在一些实施方案中，提供包含结合与细胞毒性剂共价连接的CD79b的抗体的免疫 偶联物，其中所述抗体包含（a)具有SEQIDN0:11的氨基酸序列的VH序列和具有SEQID NO:12的氨基酸序列的VL序列，并且其中所述细胞毒性剂为吡咯并苯并二氮杂卓。
[0009] 在一些实施方案中，免疫偶联物具有式Ab-(L_D)p，其中：（a)Ab为抗体；(b)L为连 接子；（c)D为细胞毒性剂；并且（d)p的范围为1-8。
[0010] 在一些此类实施方案中，D为式A的吡咯并苯并二氮杂卓：
[0011]
【主权项】
1. 一种包含结合与细胞毒性剂共价连接的CD79b的抗体的免疫偶联物，其中结合 ⑶79b的所述抗体包含（i)含有SEQ ID NO :21的所述氨基酸序列的HVR-H1，（ii)含有SEQ ID NO :22的所述氨基酸序列的HVR-H2,和（iii)含有SEQ ID NO :23的所述氨基酸序列的 HVR-H3 ;并且其中所述细胞毒性剂为吡咯并苯并二氮杂卓。
2. 根据权利要求1所述的免疫偶联物，其中所述抗体还包含（i)含有选自SEQ ID NO : 18、24和35的氨基酸序列的HVR-L1，（ii)含有SEQ ID N0:25的所述氨基酸序列的HVR-L2， 和（iii)含有SEQ ID NO :26的所述氨基酸序列的HVR-L3。
3. 根据权利要求2所述的免疫偶联物，其中所述抗体包含含有SEQ ID NO :24的所述 氨基酸序列的HVR-Ll。
4. 根据权利要求1至3中任一项所述的免疫偶联物，其中所述抗体包含： a) 与SEQ ID NO :11的所述氨基酸序列具有至少95%序列同一性的VH序列；或 b) 与SEQ ID NO : 12的所述氨基酸序列具有至少95%序列同一性的VL序列；或 c) 如（a)中的VH序列和如（b)中的VL序列。
5. 根据权利要求1至4中任一项所述的免疫偶联物，其包含具有选自SEQ ID NO :7、9、 11和13的氨基酸序列的VH序列。
6. 根据权利要求5所述的免疫偶联物，其包含具有SEQ ID NO :11的所述氨基酸序列 的VH序列。
7. 根据权利要求1至6中任一项所述的免疫偶联物，其包含具有选自SEQ ID NO :8、 10、12和14的氨基酸序列的VL序列。
8. 根据权利要求7所述的免疫偶联物，其包含具有SEQ ID NO : 12的所述氨基酸序列 的VL序列。
9. 一种包含结合与细胞毒性剂共价连接的CD79b的抗体的免疫偶联物，其中所述抗体 包含（a)具有SEQ ID NO :11的所述氨基酸序列的VH序列和具有SEQ ID NO : 12的所述氨 基酸序列的VL序列，并且其中所述细胞毒性剂为吡咯并苯并二氮杂卓。
10. 根据权利要求1至9中任一项所述的免疫偶联物，其中所述抗体为IgGl、IgG2a或 IgG2b抗体。
11. 一种根据权利要求1至10中任一项所述的免疫偶联物，其中所述免疫偶联物具有 所述式Ab-(L-D)p，其中： (a) Ab为所述抗体； (b) L为连接子； (c) D为所述细胞毒性剂；并且 (d) p的范围为1-8。
12. 根据权利要求11所述的免疫偶联物，其中D为式A的吡咯并苯并二氮杂卓：
其中波浪线表示与所述连接子的所述共价连接位点； 虚线表示Cl和C2之间或C2和C3之间双键的任选存在； R2独立地选自 H、0H、= 0、= CH 2、CN、R、OR、= CH-RD、= C (Rd) 2、0-S02-R、CO2R 和 COR， 并且还任选地选自卤基或二卤基，其中Rd独立地选自1?、〇)21?、〇?、〇10、〇) 2!1和卤基； R6和 R 9独立地选自 H、R、0H、OR、SH、SR、NH 2、NHR、NRR'、N02、Me3Sn 和卤基； R7独立地选自 H、R、0H、OR、SH、SR、NH 2、NHR、NRR'、N02、Me3Sn 和卤基； Q独立地选自0、S和NH; R11为H或R或其中Q为0、SO具其中M为金属阳离子； R和R'各自独立地选自任选取代的Cp12烷基、C 3_2(|杂环基和C 5_2(|芳基，并且任选地关 于基团NRR'，R和R'与它们连接的所述氮原子一起形成任选取代的4_、5_、6-或7-元杂 环； R12、R16、R19和R 17分别如对于R2、R6、R9和R 7所定义； R"为(：3_12亚烷基，该链可以被一个或多个杂原子和/或任选取代的芳环中断；并且 X和X'独立地选自0、S和N(H)。
13. 根据权利要求12所述的免疫偶联物，其中D具有以下结构：
其中η为0或1。
14. 根据权利要求12所述的免疫偶联物，其中D具有选自以下的结构：
其中Re和RE"各自独立地选自H或RD，其中Rd独立地选自R、CO 2R、COR、CHO、CO2H和卤 基； 其中Ar1和Ar 2各自独立地为任选取代的C 5_2(|芳基；并且 其中η为0或1。
15. 根据权利要求11所述的免疫偶联物，其中D为式B的吡咯并苯并二氮杂卓：
其中水平波浪线表示与所述连接子的所述共价连接位点； Rvi和Rv2独立地选自Η、甲基、乙基、苯基、氟-取代的苯基和C 5_6杂环基；并且 η为0或1。
16. 根据权利要求11至15中任一项所述的免疫偶联物，其中所述连接子可被蛋白酶裂 解。
17. 根据权利要求16所述的免疫偶联物，其中所述连接子包含val-cit二肽或 Phe-homoLys 二月太。
18. 根据权利要求13所述的免疫偶联物，其具有下式：
19. 根据权利要求11至18中任一项所述的免疫偶联物，其中p的范围为1-3。
20. -种免疫偶联物，其具有下式：
其中Ab为包含以下的抗体（i)包含SEQ ID NO :21的所述氨基酸序列的HVR-H1，（ii) 包含SEQ ID NO :22的所述氨基酸序列的HVR-H2,（iii)包含SEQ ID NO :23的所述氨基酸 序列的HVR-H3,（iv)包含SEQ ID NO :24的所述氨基酸序列的HVR-Ll，（V)包含SEQ ID NO : 25的所述氨基酸序列的HVR-L2,和（vi)包含SEQ ID NO :26的所述氨基酸序列的HVR-L3 ; 并且其中P的范围为1至3。
21. 根据权利要求20所述的免疫偶联物，其中所述抗体包含SEQ ID NO :11的VH序列 和 SEQ ID NO: 12 的 VL 序列。
22. 根据权利要求21所述的免疫偶联物，其中所述抗体包含SEQ ID NO :39的重链和 SEQ ID NO : 37 的轻链。
23. 根据前述权利要求中任一项所述的免疫偶联物，其中所述抗体为单克隆抗体。
24. 根据前述权利要求中任一项所述的免疫偶联物，其中所述抗体为人抗体、人源化抗 体或嵌合抗体。
25. 根据前述权利要求中任一项所述的免疫偶联物，其中所述抗体为结合CD79b的抗 体片段。
26. 根据前述权利要求中任一项所述的免疫偶联物，其中所述抗体结合人CD79b
27. 求26所述的免疫偶联物，其中人CD79b具有SEQ ID NO :40或SEQ ID NO :41的所 述序列。
28. -种药物制剂，其包含前述权利要求中任一项所述的免疫偶联物和药学上可接受 的载体。
29. 根据权利要求28所述的药物制剂，其还包含另外的治疗剂。
30. -种治疗患有CD79b阳性癌症的个体的方法，所述方法包括向所述个体施用有效 量的根据权利要求1至27中任一项所述的免疫偶联物。
31. 根据权利要求30所述的方法，其中所述CD79b阳性癌症选自淋巴瘤、非霍奇金氏淋 巴瘤（NHL)、侵袭性NHL、复发性侵袭性NHL、复发性无痛NHL、顽固性NHL、顽固性无痛NHL、 慢性淋巴细胞性白血病（CLL)、小淋巴细胞性淋巴瘤、白血病、多毛细胞白血病（HCL)、急性 淋巴细胞性白血病（ALL)、伯基特氏淋巴瘤和套细胞淋巴瘤。
32. 根据权利要求31所述的方法，其还包括向所述个体施用另外的治疗剂。
33. 根据权利要求32所述的方法，其中所述另外的治疗剂包含结合CD22的抗体。
34. 根据权利要求33所述的方法，其中所述另外的治疗剂为包含结合与细胞毒性剂共 价连接的CD22的抗体的免疫偶联物。
35. -种抑制CD79b阳性细胞增殖的方法，所述方法包括在允许所述免疫偶联物与所 述细胞的表面上的CD79b结合的条件下使所述细胞暴露于根据权利要求1至27中任一项 所述的免疫偶联物，从而抑制所述细胞的增殖。
36. 根据权利要求35所述的方法，其中所述细胞为肿瘤B细胞。
37. 根据权利要求36所述的方法，其中所述细胞为淋巴瘤细胞。
【专利摘要】本发明提供包含与吡咯并苯并二氮杂卓共价连接的抗CD79b抗体的免疫偶联物以及使用它们的方法。
【IPC分类】A61K47-48, A61P35-00
【公开号】CN104540526
【申请号】CN201380036617
【发明人】P·波拉基斯, A·波尔森, S·D·斯潘塞, S-F·于
【申请人】基因泰克公司
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2013年7月8日
【公告号】CA2873884A1, EP2869850A1, US20140030280, WO2014011519A1