描述处 于临床（前）开发中的一些靶向D114的生物化合物：REGN-421 ( = SAR153192 ; Regeneron，Sanofi-Aventis ;W02008076379)、0PM-21M18(0ncoMed;Hoey 等，Cell Stem Cell.2009 年 8 月 7 日；5 (2):168-77)和 MEDI0639 (Medlmmune LLC, AstraZeneca Jenkins 等，Mol Cancer Ther.2012年 8 月；11(8):1650-60)全人 D114抗体；YW152F(Genentech)， 一种人源化 D114 抗体（Ridgway 等，Nature. 2006 年 12 月 21 日；444 (7122) :1083-7) ;D11 4_Fc (Regeneron, Sanofi-Aventis)，一种由D114细胞外区和人IgGl的Fe区构成的重组融 合蛋白（Noguera-Troise 等，Nature. 2〇〇6 年 I2 月 2I 日；444(T7I22)) 〇
[0022] 但是，现有技术单克隆抗体（Mb)和融合蛋白鉴于它们的治疗应用而具有一些缺 点：为防止它们降解，必须将它们储存在接近冰冻的温度下。此外，因为它们在肠内迅速消 化，所以它们不适于口服施用。mAb用于癌症疗法的另一主要限制是肿瘤组织穿透不良，这 导致低浓度和缺乏对肿瘤中所有细胞的靶向。本领域中现有技术抗体的最严重的缺点是它 们受限的临床功效。
[0023] 发明概述
[0024] 当前可获得的抗血管生成疗法的缺点是受限的功效。因此本发明的一个目的为改 进抗血管生成疗法。
[0025] 本发明的另一目的是就对疗法的固有抗性或获得性抗性而言改进抗血管生成疗 法。
[0026] 本发明的另一目的是提供对患者耐受性良好的这类疗法。
[0027] 本发明人已发现，包含双重抗Ang2/抗Dl 14结合物和抗VEGF药剂的药物组合具 有高于单独个别药剂的抗癌功效，其可用于人疗法中。
[0028] 基于这个发现，本发明提供包含双重抗Ang2/抗Dl 14结合物和抗VEGF药剂的新 型药物组合，所述药物组合尤其适用于癌症和眼病的治疗。
[0029] 根据本发明的组合的另一有益特征是，对疗法的抗性可通过若干冗余的血管生成 信号转导途径介导。
[0030] 在另一方面中，本发明还涉及用于与抗VEGF药剂组合治疗癌症的双重抗Ang2/抗 Dl 14结合物。
[0031] 在另一方面中，本发明涉及一种治疗癌症的方法，所述方法包括向有需要的患者 施用治疗有效量的双重抗Ang2/抗Dl 14结合物，并且还包括在施用所述双重抗Ang2/抗 D114结合物之前或之后72小时内向同一患者施用治疗有效量的抗VEGF药剂。
[0032] 附图简述
[0033] 图1示出NCI-H1975肿瘤生长动力学。将携带NCI-H1975肿瘤的小鼠用贝伐单抗、 BIBF 1120、BI-1、贝伐单抗与BI-I的组合、BIBF 1120与BI-I的组合或仅用媒介物治疗。 随时间绘制中值肿瘤体积。第1天是实验的第一天，第14天是实验的最后一天。
[0034] 图2示出第19天的绝对肿瘤体积。将携带NCI-H1975肿瘤的小鼠用贝伐单抗、 BIBF 1120、BI-1、贝伐单抗与BI-I的组合、BIBF 1120与BI-I的组合或仅用媒介物治疗。 在第14天绘制个别绝对肿瘤体积。每一符号表示个别肿瘤。水平线表示中值肿瘤体积。
[0035] 图3示出体重随时间的变化。将携带NCI-H1975肿瘤的小鼠用贝伐单抗、BIBF 1120、BI-1、贝伐单抗与BI-I的组合、BIBF 1120与BI-I的组合或仅用媒介物治疗。随时 间绘制体重的中值改变。第1天是实验的第一天，第14天是实验的最后一天。
[0036] 图4示出CXF 243肿瘤生长动力学。将携带CXF 243肿瘤的小鼠用BI-1、BIBF 1120、BI-1与BIBF 1120的组合或仅用媒介物治疗。随时间绘制中值肿瘤体积。
[0037] 图5示出LXFE 211肿瘤生长动力学。将携带LXFE 211肿瘤的小鼠用BI-1、贝伐 单抗、BI-I与贝伐单抗的组合或仅用媒介物治疗。随时间绘制中值肿瘤体积。
[0038] 图6示出LXFE 211肿瘤生长动力学。将携带LXFE 211肿瘤的小鼠用BI-UBIBF 1120、BI-1与BIBF 1120的组合或仅用媒介物治疗。随时间绘制中值肿瘤体积。
[0039] 图7示出LXFE 1422肿瘤生长动力学。将携带LXFE 1422肿瘤的小鼠用則-1、贝 伐单抗、BI-I与贝伐单抗的组合或仅用媒介物治疗。随时间绘制中值肿瘤体积。
[0040] 图8示出LXFE 1422肿瘤生长动力学。将携带LXFE 1422肿瘤的小鼠用BI-UBIBF 1120、BI-1与BIBF 1120的组合或仅用媒介物治疗。随时间绘制中值肿瘤体积。
[0041] 图9示出MAXF 401肿瘤生长动力学。将携带MAXF 401肿瘤的小鼠用BI-1、贝伐 单抗、BI-I与贝伐单抗的组合或仅用媒介物治疗。随时间绘制中值肿瘤体积。
[0042] 图10示出MAXF 401肿瘤生长动力学。将携带MAXF 401肿瘤的小鼠用BI-UBIBF 1120、BI-1与BIBF 1120的组合或仅用媒介物治疗。随时间绘制中值肿瘤体积。
[0043] 图11示出OVXF 1353肿瘤生长动力学。将携带OVXF 1353肿瘤的小鼠用BI-1、 BIBF 1120、BI-1与BIBF 1120的组合或仅用媒介物治疗。随时间绘制中值肿瘤体积。
[0044] 图12示出PAXF 546肿瘤生长动力学。将携带PAXF 546肿瘤的小鼠用BI-1、贝伐 单抗、BI-I与贝伐单抗的组合或仅用媒介物治疗。随时间绘制中值肿瘤体积。
[0045] 图13示出PAXF 546肿瘤生长动力学。将携带PAXF 546肿瘤的小鼠用BI-UBIBF 1120、BI-1与BIBF 1120的组合或仅用媒介物治疗。随时间绘制中值肿瘤体积。
[0046] 图14示出RXF 1220肿瘤生长动力学。将携带RXF 1220肿瘤的小鼠用BI-1、舒尼 替尼（Sunitinib)、BI-1与舒尼替尼的组合或仅用媒介物治疗。随时间绘制中值肿瘤体积。
[0047] 发明详述
[0048] 如本文所用的"药物组合"是指两种或更多种不同的药物活性物质，所述物质旨在 当一起向患者应用时在所述患者中产生特定的治疗效果，即在本发明的情形下是一种或多 种双重抗Ang2/抗Dl 14结合物和一种或多种抗VEGF药剂。本文中"一起应用"意味着随 后应用或同时应用。
[0049] 在一个实施方案中，双重抗Ang2/抗Dl 14结合物有待在抗VEGF药剂的施用之前 6个月与1周之间的任何时间点施用。在优选实施方案中，双重抗Ang2/抗D114结合物有 待在抗VEGF药剂的施用之前3个月与1周、6周与1周、1个月与1周、3周与1周以及2周 与1周之间的任何时间点施用。在一个实施方案中，双重抗Ang2/抗D114结合物有待在抗 VEGF药剂的施用之前1周与0天之间的任何时间点施用。
[0050] 当然，抗VEGF药剂在双重抗Ang2/抗Dl 14结合物之前施用也在本发明的范围内。 因此，前述实施方案加以必要的改动适用于本替代实施方案。
[0051] 与抗VEGF药剂同时施用双重抗Ang2/抗Dl 14结合物意味着将两种药物同时施 用。这可通过使双重抗Ang2/抗D114结合物和抗VEGF药剂存在于一个剂量、小瓶、袋子、 容器、注射器等中实现。
[0052] 随后施用双重抗Ang2/抗Dl 14结合物和抗VEGF药剂意味着抗VEGF药剂在双重抗 Ang2/抗Dl 14结合物之后不久施用或反之亦然。不久包括1分钟、2分钟、3分钟、4分钟、5 分钟、10分钟、20分钟、30分钟、45分钟、60分钟、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小 时、8小时、9小时、10小时、12小时、14小时、16小时、18小时、20小时、22小时或24小时。
[0053] 本文中"患者"是指哺乳动物，尤其指人。
[0054] 如本文所用的"双重抗Ang2/抗Dl 14结合物"是指能够抑制Ang2和Dl 14的促血 管生成活性至少80%的任何基于肽的分子。合适的双重抗Ang2/抗D114结合物优选包含 Ang2和D114中每一个的单独的结合区。合适的双重抗Ang2/抗D114结合物可由本领域 中已知的任何双特异性结合分子形成，例如交联Fab、交联scFv、双特异性IgG、crossmab、 Fcab、zybody、替代抗体（surrobody)、单轻链（sLC)抗体、DART、nanobodies'结构域抗 体（dAb)、DARPin。在一个具体实施方案中，双重抗Ang2/抗D114结合物是；nan〇b〇dies R。 在优选实施方案中，双重抗Ang2/抗Dl 14结合物具有用于延长它们在身体中的半衰期的装 备（means)。用于这个目的的合适装备是例如与双重抗Ang2/抗D114结合物融合的人Fc 区或血清白蛋白分子。本文中优选的其它合适装备是由双重抗Ang2/抗D114结合物所包 含的另外结合区，这些区与血清白蛋白结合。尤其优选的是与人白蛋白-Il(Albll)结合 的这类另外结合区。合适的双重抗Ang2/抗D114结合物可见于共同待审的PCT申请PCT/ EP2012/055897中。在本发明的优选实施方案中，双重抗Ang2/抗D114结合物选自根据 SeqID No: 1-20中任一个的结合分子。
[0055] 是根据 SeqID No: 14 的双重抗 Ang2/ 抗 Dl 14 nanobodyκ结合物。
[0056] 如本文所用的"抗VEGF药剂"包括所有药学上可接受的分子，这些分子抑制至 少VEGF-A的促血管生成活性，优选还抑制VEGF-B和/或VEGF-C和/或VEGF-D的促血 管生成活性。尤其优选的抗VEGF药剂是贝伐单抗、哌加他尼（pegaptanib)、雷珠单抗 (ranibizumab)、阿柏西普（aflibercept)以及 PRS-050。
[0057] 在一个优选实施方案中，本文的药物组合包含选自贝伐单抗、哌加他尼、雷珠单 抗、阿柏西普以及PRS-050的一种或多种抗VEGF药剂和选自SeqID No :1-20的一种或多种 双重抗Ang2/抗Dl 14结合物。
[0058] 在另一优选实施方案中，本文的药物组合包含根据SeqID No: 14的双重抗Ang2/ 抗Dl 14结合物和贝伐单抗。
[0059] 在另一优选实施方案中，本文的药物组合包含根据SeqID No: 15的双重抗Ang2/ 抗Dl 14结合物和贝伐单抗。
[0060] 在另一优选实施方案中，本文的药物组合包含根据SeqID No: 16的双重抗Ang2/ 抗Dl 14结合物和贝伐单抗。
[0061] 在另一优选实施方案中，本文的药物组合包含根据SeqID No: 17的双重抗Ang2/ 抗Dl 14结合物和贝伐单抗。
[0062] 在另一优选实施方案中，本文的药物组合包含根据SeqID No: 18的双重抗Ang2/ 抗Dl 14结合物和贝伐单抗。
[0063] 如本文所用的"癌症"通常是指所有恶性肿瘤性疾病。例如，以下癌症可用根据本 发明的组合来治疗，但不受限于此：
[0064] 脑肿瘤，例如像听神经鞘瘤、星形细胞瘤（如毛细胞型星形细胞瘤、纤维型星形细 胞瘤、原浆型星形细胞瘤、肥胖型星形细胞瘤、间变性星形细胞瘤以及成胶质细胞瘤）、脑淋 巴瘤、脑转移、垂体肿瘤（如催乳素瘤、HGH(人生长激素）产生肿瘤和ACTH(促肾上