一种中药组合物在制备治疗急性心肌梗死的药物中的应用
【专利说明】
[0001] 本申请是分案申请，原申请的发明名称为：一种中药组合物在制备减少肾脏 水通道蛋白2表达的药物中的应用；原申请的申请号为：200910074701.9 ;申请日为： 2009.06.10〇
技术领域
[0002] 本发明涉及一种中药组合物的新用途，具体地，涉及一种中药组合物在制备减少 肾脏水通道蛋白2表达的药物中的应用。
【背景技术】
[0003] 慢性心力衰竭（CHF)的发生、发展是一个由诸多神经体液因素参与的过程，过度 的神经体液激活，引起体液潴留等病理生理表现。已有证据表明，由精氨酸加压素（AVP)调 节的肾脏水通道蛋白2 (AQP2)增加集合管对水的重吸收，对CHF时水潴留起着重要的作用。
[0004] 中医络病理论认为，心气虚乏、运血无力是充血性心衰发生的中医病机之本；络脉 瘀阻是发病的中心环节，津液不循脉络运行，渗出脉外而为水湿之邪发为水肿，瘀血水饮阻 滞络脉，日久结聚成形导致心络络息成积是其发展加重的结果。与现代医学提出的神经内 分泌系统过度激活引起血流动力学改变，导致心肌重塑，进而出现慢性心力衰竭的基本机 制相一致。因此，当代预防治疗慢性心力衰竭的关键，已经从过去的改善临床症状，转变为 阻断神经-内分泌的过度激活，抑制心肌重塑
[0005] 本发明是在中国专利ZL 02146573. 8的基础上进行的改进发明，在此全文引用该 专利文件记载的内容。中国专利ZL 02146573. 8未记载该中药组合物在制备减少肾脏水通 道蛋白2表达的药物中的应用；
【发明内容】
[0006] 本发明目的是提供一种中药组合物在制备减少肾脏水通道蛋白2表达的药物中 的应用；
[0007] 本发明还提供了该中药组合物在制备改善心脏功能药物中的应用；
[0008] 本发明中药组合物的有效成分主要包括黄芪、附子、丹参及苈葶子等祖国传统中 药材，以益气温阳药为治络强心之本，辅以活血通络药，使气旺血行络通，阻断血瘀络阻的 病理中心环节，兼用利水消肿药以治其标，可以有效减少肾脏水通道蛋白2的表达，并且有 效改善心脏功能。
[0009] 本发明中药组合物中，作为活性组分的原料药的拉丁名及其加工方法来自《中药 大辞典》（1977年7月，第一版，上海科学技术出版社）和《中国药典》（2005年版，化学工业 出版社）。
[0010] 所述中药组合物由如下重量份的原料药制成：
[0011] 黄芪150-450份、附子40-120份、人参或党参75-225份、丹参75-225份、葶苈子 50-150份、香加皮或南五加皮60-180份、泽泻75-225份、玉竹25-75份、桂枝30-90份、红 花30-90份、陈皮25-75份；
[0012] 优选地，所述中药组合物由如下重量份的原料药制成：
[0013] 黄芪450份、附子112. 5份、人参或党参225份、丹参225份、葶苈子150份、香加 皮或南五加皮180份、泽泻225份、玉竹75份、桂枝90份、红花90份、陈皮75份；
[0014] 或：
[0015] 黄芪250份、附子112. 5份、人参或党参200份、丹参120份、葶苈子135份、香加 皮或南五加皮150份、泽泻200份、玉竹60份、桂枝75份、红花75份、陈皮60份。
[0016] 本发明还提供了所述中药组合物的活性成分由下列步骤制成：
[0017] 1)将黄芪、葶苈子、泽泻、人参或党参、香加皮或南五加皮加7-9倍量70%乙醇提 取，滤过，浓缩提取液至60°C测定相对密度为1. 25-1. 30的清膏；
[0018] 2)用水提取桂枝、陈皮的挥发油，得挥发油A、水溶液B、药渣C ;
[0019] 3)加6-10倍量水煎煮附子、丹参、玉竹、红花2次，每次2小时，将所得水溶液滤 过，得滤液D ;
[0020] 4)将桂枝、陈皮提挥发油后的水溶液B滤过，收集得水溶液滤液E，再加水煎煮药 渣C，滤过得滤液F ;
[0021] 5)合并滤液D、滤液E、滤液F，浓缩至相对密度为1. 25-1. 30清膏，搅拌中加入乙 醇，至醇浓度70%，静置，滤过，滤液浓缩至60°C测定相对密度为1. 25-1. 30清膏G ;
[0022] 6)步骤1)所得清膏、挥发油A和步骤5)所得清膏G构成中药组合物的活性成分。
[0023] 本发明中药组合物还可以按常规的制剂工艺，例如，范碧亭《中药药剂学》（上海科 学出版社1997年12月第1版）记载的制备工艺，制成药剂学可接受的任意常规剂型，例如 胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液或丸剂等。
[0024] 为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，如范碧亭 《中药药剂学》（上海科学出版社1997年12月第1版）中各剂型记载的辅料，例如：填充剂、 崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括：淀粉、预胶 化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括：淀粉、预胶化淀粉、微晶 纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等； 润滑剂包括：硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括：聚乙烯吡咯烷 酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、 羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括：糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂 包括：甜味剂及各种香精；防腐剂包括：尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯 扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括：PEG6000, PEG4000,虫蜡等。
[0025] 本发明还提供了该中药组合物胶囊剂的制备方法：
[0026] (1)将黄芪、葶苈子、泽泻、人参或党参、香加皮或南五加皮按照比例量称取，加8 倍量70%乙醇回流提取2次，第一次3小时，第二次2小时，合并提取液，滤过，滤液减压回 收乙醇，浓缩至60°C测定相对密度为1. 25-1. 30的清膏，备用；
[0027] (2)按照比例称取桂枝、陈皮，蒸馏提取挥发油，提油后的水溶液滤过，备用，残渣 再加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并水煎液，备用；
[0028] (3)按比例量称取附子、丹参、玉竹、红花，加水9倍量煎煮2次，每次2小时，合并 提取液，滤过，与步骤（2)中桂枝、陈皮水煎液合并，浓缩至60°C测定相对密度为1. 25-1. 30 清膏，搅拌中加入乙醇，至醇浓度70%，4°C以下静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，浓 缩至60°C测定相对密度为1. 25-1. 30清膏，与步骤（1)的醇提清膏混合，65-70°C烘干；
[0029] (4)将步骤⑶所得干膏粉碎成100目粉，加适量70%乙醇制粒，喷入步骤⑵所 得桂枝、陈皮挥发油，混匀，装胶囊，即得。
[0030] 本发明中药组合物的用量，按活性组分原料药总重量计，为4-20克/日，可每日服 用一次，优选为分2-4次服用，还优选为6-12克/日，分2-4次服用，更优选为7. 59克/日， 分3次服用。
[0031] 实验例：
[0032] 为阐明本发明中药组合物减少肾脏水通道蛋白2表达的活性，用按实施例1方法 所制得的药物（以下称本发明药物）进行了下列试验。
[0033] 1、材料和方法
[0034] I. 1主要试剂和仪器
[0035] 呋塞米片由上海万安特公司生产，批号0200456 ;Trizol (Invitrogen Life Technologies公司）；cDNA合成试剂盒（Gene Copoeia公司）；小动物呼吸机（第二军医 大学DW-2000型）；冰点渗透压仪（美国Advanced Instruments公司）；荧光定量PCR仪 (BI0-RAD公司）；彩色Doppler超声显像仪（Acuson公司）；精密电子天平（TA1003);显微 照相摄像（OLYMPUS BX51) ;VerSi〇n4.0图像分析系统（美国Kodak公司）；低温超速离心机 (Sigma);超纯水装置（MilliQ) ;MPA-V型多道生物信号分析系统（第二军医大学）；电泳仪 (BIO-RAD);冰冻切片机（Sandon);酶标仪（BioTek，ELX800);全自动生化分析仪（OLYMPUS AU640);兔抗大鼠多克隆抗体（购自Santa Cruz公司）；辣根过氧化物酶标记的二抗（羊 抗兔IgG，购自武汉博士德公司）；羊抗兔荧光抗体IgG(北京中杉生物）；本发明药物粉碎 药粉（石家庄以岭药业股份有限公司生产）。
[0036] L 2 方法
[0037] 1. 2. 1实验动物模型制作和分组
[0038] 雄性SD大鼠180~220g (由南方医科大学南方医院实验动物中心提供），采用左 冠状动脉结扎致急性心肌梗死（AMI)后心力衰竭大鼠模型，在盐酸戊巴比妥钠（35mg. kg， 腹腔麻醉