Pd-1拮抗剂及其使用方法
【专利说明】PD-1拮抗剂及其使用方法
[0001 ] 本申请是中国申请200980142349. 6的分案申请，该母案的国际申请日为2009年 8月25日，本分案采用了与该母案一致的发明名称。
[0002] 对相关申请的交叉引用
[0003] 本申请要求均在2008年8月25日提交的美国临时申请No. 61/091，502、 61/091，694、61/091，709和61/091，705,在2009年1月5日提交的美国临时申请 No. 61/142, 548,及在2009年4月1日提交的美国临时申请No. 61/165, 652的优先权和利 益，而且在允许的情况中通过述及而完整收录。 发明领域
[0004] 本发明涉及用于调控T细胞活化的组合物和方法，特别是用于增强T细胞活化的 组合物和方法。
[0005] 发明背景
[0006] 抗原特异性T细胞应答是由两种信号介导的：1) T细胞受体（TCR)与在MHC背景 中呈递的抗原性肽的衔接（信号1)，及2)通过不同受体/配体对之间的接触递送的第二 抗原独立信号（信号2)。这种"第二信号"在决定T细胞应答的类型（活化对抑制）以及 该应答的强度和持续时间方面是至关重要的，而且受来自共刺激分子，诸如B7蛋白质家族 的正和负两种信号调节。最广泛表征的T细胞共刺激途径是B7-⑶28,其中B7-1 (⑶80)和 B7-2(⑶86)各自能参与活化⑶28受体和抑制性CTLA-4(⑶152)受体。与经由T细胞受体 的信号传导联合，CD28连接提高T细胞的抗原特异性增殖，增强细胞因子的生成，激活分化 和效应器功能，及促进 T 细胞的存活（Lenshow 等，Annu. Rev. Immunol.，14:233-258 (1996); Chambers 和 Allison,Curr.Opin. Immunol.,9:396-404 (1997);及 Rathmell 和 Thompson, Annu. Rev. Immunol.，17:781-828 (1999))。相反，认为经由 CTLA-4 的信号传导 递送抑制T细胞增殖、IL-2生成和细胞周期行进的负信号（Krummel和Allison，J. Exp. Med.，183:2533-2540 (1996);及 Walunas 等，J. Exp. Med.，183:2541-2550 (1996))。B7 家族 的其它成员包括 F1D-Ll (Dong 等，Nature Med.，5:1365-1369 (1999);及 Freeman 等，J. Exp. Med.，192:1-9 (2000) )、PD-L2 (Tseng 等，J. Exp. Med.，193:839-846 (2001);及 Latchman 等，Nature Immunol. ,2:261-268 (2001))、B7-H2 (Wang 等，Blood, 96:2808-2813 (2000); Swallow等，Immunity, 11:423-432 (1999);及 Yoshinaga等，Nature, 402:827-832 (1999))、 B7-H3(Chapoval 等，Nature Immunol. ,2:269-274 (2001))和 B7-H4 (Choi 等，J. Immunol.， 171:4650-4654(2003) ;Sica 等，Immunity,18:849-861(2003); Prasad 等，Immunity, 18:863-873 (2003);及 Zang 等，Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A.，100:10388-10392 (2003))。B7-H5 是 B7 家族的一个相对较新发现的成员。B7-H5 记载于PCT公开号为WO 2006/012232的文件中。功能研宄指示B7-H5是T细胞活性的正 调节物，发挥活化T细胞的功能。
[0007] PD-Ll和PD-L2是PD-I (程序性细胞死亡-1)的配体，B7-H2是ICOS的配体，而 B7-H3、B7-H4 和 B7-H5 此时仍然是孤儿配体（Dong 等，Immunol. Res.，28:39-48 (2003))。
[0008] 大多数B7家族分子在细胞表面上表达，具有近膜恒定IgC结构域和远膜 IgV结构域。这些配体的受体共享共同的细胞外IgV样结构域。受体-配体对的相 互作用主要经由配体和受体的IgV结构域中的残基来介导（Schwartz等，Nature Immunol.，3:427434(2002))。通常，IgV结构域被描述为具有两个片层，每个含有一层0链 (Williams 和 Barclay, Annu. Rev. Immunol.，6:381-405 (1988))。CTLA-4 的前和后片层分别 含有链 A'GFC' C 和 ABEDC"(Ostrov 等，Science, 290:816-819 (2000))，而 B7IgV 结构域的前 和后片层分别包含链 AGFCC'C"和 BED (Schwartz 等，Nature, 410:604-608(2001) ;Stamper 等，Nature, 410:608-611 (2001);及 Ikemizu 等，Immunity, 12:51-60 (2000))。结晶学分析 揭示了 CTLA-4/B7结合界面受来自CTLA-4包含MYPPPY基序的⑶R3类似环与B7上主要由 G、F、C、C'和C"链形成的表面的相互作用支配（Schwartz等，Nature, 410:604-608 (2001); 及Stamper等，Nature, 410:608-611 (2001))。来自氨基酸同源性、突变和计算机建模的 数据给这种基序也是⑶28的主要B7结合位点的观念提供了支持（Bajorath等，J. Mol. Graph. Model.，15:135-139(1997))。虽然MYPPPY基序在ICOS中不保守，但是研宄指示具 有序列FDPPPF且位于类似位置的一种相关基序是ICOS结合B7-H2的主要决定子（Wand 等，J. Exp. Med.，195:1033-1041 (2002))。
[0009] H)-L2(也称作B7-DC)是B7家族的一个相对较新的成员，而且具有与H)-L1 (也 称作B7-H1)约34 %相同的氨基酸序列。人和小鼠PD-L2直向同源物共享约70 % 氨基酸同一性。虽然在多种组织中找到了 PD-Ll和TO-L2转录物（Dong等，Nature Med. ,5:1365-1369 (1999) ;Latchman 等，Nature Immunol. ,2:261-268 (2001);及 Tamura, Blood, 97:1809-1816 (2001))，但是这两种蛋白质的表达谱是相当不同的。虽然在巨噬细 胞样细胞以外的正常组织中基本上没找到ro-Li蛋白的表达，但是可以在多种组织和细 胞类型中诱导 PD-Ll 蛋白的表达（Dong 等，Nature Med. ,5:1365-1369 (1999);和 Ishida 等，Immunol. Lett.，84:57-62(2000))。相反，PD-L2只在树突细胞和单核细胞中表达。
[0010] 已经显示了 PD-Ll 和 PD-L2 都结合 PD-I (Freeman 等，了.￡叉？.]^(1.，192:1027 -1034(2000))，CD28家族的一个远亲成员，在它的细胞质结构域中有免疫受体基于酪 氨酸的抑制性基序（ITM) (Ishida 等，EMBO J.，11:3887 - 3895(1992))。ro-1 在淋 巴细胞的一个亚类上表达，而且在活化后的T、B和髓样细胞上上调（Agata等，Int. Immunol.，8:765 - 772(1996))。H)-l在其结合由主要组织相容性复合物（MHC)呈递的肽抗 原后起拮抗TCR下游信号转导的作用。认为H)-l信号传导需要其结合极近于TCR:MHC复 合物的配体，这在T细胞与抗原呈递细胞之间的免疫学联会时发生（Freeman, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A, 105:10275-10276 (2008))。PD-I被其配体连接的主要结果是抑制TCR下 游的信号传导。因此，经由ro-i的信号转导通常给T细胞提供遏制或抑制信号，导致降低 的T细胞增殖或T细胞活性的其它降低。
[0011] ro-1+小鼠的表型提供了 ro-1在体内是免疫应答的负调节物的直接证据。在 ro-l缺失下，C57BL/6背景的小鼠缓慢形成狼疮样肾小球肾炎和渐进性关节炎（Nishimura 等，Immunity，11:141 - 151 (1999))。BALB/c背景的ro-1+小鼠迅速形成致命的自身免疫 性扩张型心肌病（Nishimura等，Science. 291:319 - 322(2001))。然而，有力的证据表明 PD-L2能发挥活化T细胞应答的功能。在次优TCR信号存在下，PD-L2在体外刺激升高的增 殖和细胞因子生成（Tseng等，J. Exp. Med 193:839 - 846 (2001))。另一方面，体外研宄表明 了 ro-L2在T细胞应答中的负调节作用。这些表面上矛盾的数据通过T细胞上ro-L2而非 ro-i的别的受体的表达得到最好的解释。
[0012] PD-Li是引起T细胞中抑制性信号转导的主要ro-i配体。由于认为ro-i信号传导 需要其结合极近于tcr:mhc复合物的ro-i配体（通常是ro-Li)，因此阻断ro-i受体与其 内源配体相互作用（或是通过阻断受体或是通过抑制其配体，并因此阻止T细胞膜上ro-i 和TCR共连接）的蛋白质、抗体或小分子是所涵盖的有用ro-i拮抗剂。
[0013] 因此，本发明的一个目的是提供用于抑制经由T细胞上ro-1的信号转导的组合物 和方法。
[0014] 本发明的另一个目的是提供结合ro-i但不活化ro-i信号转导的ro-i拮抗剂。 [0015] 本发明的另一个目的是提供结合ro-i配体及抑制或降低该配体与ro-i相互作用 的ro-i拮抗剂。
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