天然萘醌二聚体及其在制备抗菌药物中的用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于药学领域，涉及从中药材分离得到的天然萘醌二聚体及其在制备抗菌 药物中的用途，尤其是在抗耐药金葡菌药物中的用途。
【背景技术】
[0002] 研究报道，耐甲氧西林金黄葡萄球菌（Methicillin-ResistantStaphylococcusa ureus，MRSA)为医院内最常见的传染病菌之一，除了浅表皮肤感染，它还可以引起人体深 度感染。有研究显示，对所有内酰胺类抗生素如青霉素等药物具有耐药性的MRSA，对大环 内酯，氟喹诺酮，四环素等抗生素也都产生了耐药性，这使得它的感染变得更加难以治疗。 目前，可用于治疗MRSA的抗生素仅有万古霉素，然而不幸的是，完全抗万古霉素MRSA菌株 2002年在美国已经出现。我国近年来由于抗生素广泛的使用，甚至滥用，特别是万古霉素 在多家医院成为常规抗生素类用药之后，这一形势变得愈加严峻。有关部门和人员认为，除 了采取措施通过限制滥用抗生素以减缓耐药MRSA增长的速度，同时必须研发新的抗耐药 MRSA药物，以防现有的抗菌药物无法起作用时，细菌感染的大规模爆发。
[0003] 诺氟沙星是一种氟喹诺酮类抗生素，1986年开始被用于临床。因它对革兰氏阳性 菌及革兰氏阴性菌，尤其是金黄色葡萄球菌，具有较强的抑制作用而广泛用于尿道、呼吸道 等的抗感染治疗。也正因为诺氟沙星在临床及畜牧业的广泛应用，导致细菌对其产生了严 重耐药性，从而限制了诺氟沙星的应用。研究显示，细菌产生耐药性的机制多样，其中之一 是细菌外排泵。因此，选择具有NorA外泵基因的MRSA细菌株作为外泵抑制剂的筛选靶标 被认为是寻找具有外泵抑制作用的抗耐药金葡菌抗生素增敏剂的一种重要途径。
[0004]中药软紫草（Arnebiaeuchroma(Royle)Johnst.)，是紫草科（Boraginaceae)多年 生草本植物。作为药用紫草的主要来源，紫草始载于《神农本草经》，列为中品。味苦，性寒。 有凉血、活血、解毒和透疹的功能，主治血热毒盛、斑疹紫黑、麻疹不透、疮疡、湿疹、水火烫 伤等。
[0005] 紫草中的特征性和主要化学成分是萘醌类化合物，到目前为止，从紫草中分离得 到的萘醌类化合物母核结构为5, 8-二羟基-2-异己烯-1，4-萘醌。所不同的是旋光性、侧 链中羟基的位置和羟基酯化的酸。目前在紫草属植物中发现的几类主要化合物在多种紫草 中均有存在，并具有相应的药理活性。作为紫草的主要成分的萘醌类化合物，具有抗炎、抗 菌、抗肿瘤和抗凝血等多方面的活性。
[0006] 本发明的申请人拟提供与目前报道的二聚体结构不同的为紫草萘醌形成的二聚 体结构化合物，进一步将该萘醌二聚体天然成分与诺氟沙星制备组合药物，以期降低诺氟 沙星的最低抑菌浓度，对诺氟沙星产生抗耐药金葡菌的增效作用。
[0007] 于本发明相关的现有技术有：
[0008] [1]BeardenDT,DanzigerLH.Mechanismofactionofandresistancetoquinolones. Pharmacotherapy2001, 21:40-61.
[0009] [2]Holmes，B，etal.Norfloxacin.Drugs. 1985, 30 (6) :482-513.
[0010] [3]MarkhamPN,NeyfakhAA.InhibitionofthemultidrugtransporterNorAInStaph ylococcusaureuspreventsemergenceofnorfloxacinresistance.AntimicrobialAgentsC hemotheropy. 1996,40(11) :2673-2674.
[0011] [4]HooperDC.Emergingmechanismsoffluoroquinoloneresistance.EmergingInf ectiousDiseases. 2001，7:337 - 341.
[0012] [5]WangW.J. ,BaiJ.Y. ,LiuD.P. ,XueL.M. ,ZhuX. Y.TheantiinflammatoryactivityofshikoninanditsinhibitoryeffectonleukotrieneB4 biosynthesis.ActaPharmaceuticaSinica，1994, 29:161-165.
[0013] [6]ShenC.C. ,SyuW.J. ,LiS.Y. ,LinC.H. ,LeeG.H. ,SunC. M.AntimicrobialActivitiesofNaphthazarinsfromArnebiaeuchroma.JournalofNatural Products，2002, 65:1857-1862.
[0014] [7]LiuH，JinYS，SongY，YangXN，YangXW，GengDSandChenHS. ThreenewcompoundsfromArnebiaeuchroma.JournalofAsianNaturalProductsResearc h，2010, 12(4) :286 - 292.。
【发明内容】
[0015] 本发明的目的是提供新的天然萘醌二聚体及其在制备抗菌药物中的用途，尤其是 在抗耐药金葡菌药物中的用途。
[0016] 本发明的天然萘醌二聚体为可用作抗耐药增效剂的天然物质，其结构特征在于， 构成化合物的单元为一个去氧紫草素与一个具有紫草萘醌类化合物紫草素（Alkanin和 Shikonin)及其衍生物，通过萘环之间结合形成的二聚体结构。
[0017]本发明提供了与目前报道的二聚体结构不同的为紫草萘醌形成的二聚体结构化 合物，进一步将该萘醌二聚体天然成分与诺氟沙星制备组合药物，以期降低诺氟沙星的最 低抑菌浓度，对诺氟沙星产生抗耐药金葡菌的增效作用。
[0018] 本发明从软紫草(又称新疆紫草）中分离得到萘醌二聚体化合物，经实验表明，这 些化合物本身不具有抗菌活性，但与诺氟沙星共同给药，能使抗生素最低抑菌浓度分别降 低4 - 64倍，表现出较强的协同抗耐药菌作用。
[0019] 本发明的化合物通过下述方法制备：
[0020] 采用紫草科（Boraginaceae)紫草属（Arnebia)植物软紫草(又称新疆紫草 (Arnebiaeuchroma))的根，粉碎,95%乙醇45摄氏度以下浸泡提取，合并提取液减压浓 缩至乙醇全部挥发完毕，加水至浸膏混悬，用乙酸乙酯萃取；有机相减压蒸干后用硅胶和 RP-18正反相柱层析多次分离得到紫色固体化合物。
[0021] 本发明所涉及萘醌二聚体化合物1 _ll(C〇mp〇undl-ll)其药材可通过市购渠道 得到。本发明制得的化合物其理化数据如下所示：
[0022]
[0023] 本发明通过下述实验表明所述化合物具有抗菌及增效作用：
[0024] C?细菌培养及检测
[0025]细菌培养在细胞培养室超净台中操作，在96孔板中进行细菌培养