超声波辅助从番杏中提取多酚类物质的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及超声波辅助从番杏中提取多酚类物质的方法，属植物提取领域。 技术背景
[0002] 番杏是一种易于种植的绿色蔬菜，学名Tetragoniatetragonioides或New ZealandSpinach，具有清热凉血、抗菌消炎、消疮挤、抗氧化、抗癌等功能，可用于治疗偏头 痛、胃溃疡、胃癌、食道癌、胃炎、败血症和哮喘等疾病，全草可入药。其主要原因是番杏中含 有多种多酚类物质，具有较高的抗氧化活性。
[0003] 植物多酚是广泛存在的一类次生代谢产物，现代研宄表明，诸多疾病如组织器官 病变衰老等都与体内过多的自由基有关，多酚能够通过清除自由基而避免由自由基诱发而 导致的生物大分子损伤，因此，多酚类化合物在抗肿瘤、抗动脉硬化、抑制高血压、防治冠心 病与中风等心脑血管疾病以及抗菌等方面具有良好的生理活性。
[0004] 目前在食品行业中应用较多的多酚主要是从茶叶、苹果、葡萄等植物的叶片、果实 果皮或果渣中提取出来的。国内外对多酚的应用研宄均在逐渐增多，茶多酚（申请号/专 利号：200810181108)、苹果多酚（申请号/专利号：201010171146)、车前草多酚（申请号/ 专利号：201210452503. 3)等已申请专利。而对番杏多酚的研宄较少。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是：提供一种具有抗氧化活性的番杏多酚的制备新技术，它是利用 超声波辅助从新鲜番杏中提取、分离番杏中多酚类物质的技术。
[0006] 超声波辅助从番杏中提取番杏多酚类物质的方法，其特征在于：步骤如下：
[0007] 步骤一：将新鲜番杏粉碎后过10目筛；
[0008] 步骤二：将所述的番杏碎片加入到乙醇中，番杏渣与乙醇的质量比为1:3_1:7,经 超声波处理；
[0009] 步骤三：重复提取，过滤离心，然后真空旋转蒸发回收乙醇，得多酚粗提液；
[0010] 步骤四：将所述多酚粗提液配制为8mg/mL的溶液，流过大孔吸附树脂进行吸附；
[0011] 步骤五：将吸附后的树脂用蒸馏水洗两次后，用乙醇进行动态洗脱，洗脱液浓缩后 干燥，得到多酚提取物。
[0012] 步骤二中所述的乙醇为无水乙醇。
[0013] 步骤二中所述的超声波功率为150-250W，超声波振荡时间为30-60min，提取温度 为 30-50 °C。
[0014] 步骤三中所述的浸提次数为1-3次。
[0015] 步骤三中的离心20min，离心转速为4000r/min，
[0016] 步骤四中所述的大孔吸附树脂类型为D101、X-5、ADS-17或ADS-7。
[0017] 所述的大孔吸附树脂类型优选为D-101。
[0018]步骤四中所述的多酚粗提液流过大孔吸附树脂的流速为2-4BV/h。
[0019] 步骤五中所述的洗脱乙醇的体积分数为90%。
[0020] 步骤五中所述的洗脱速率为I. 5_2BV/h。
[0021] 有益效果：本发明的操作条件温和；简便易行；提取剂可以回收再利用，对环境无 危害；提取成本低，在番杏多酚生产中具有较好的应用前景。
[0022] 本发明的超声波辅助从番杏中提取多酚类物质的方法，是经多次实验后得到的优 选的实验参数，每个步骤均可有效地提高番杏多酚类提取物的提取率。
[0023] 上述实验主要结果如下：
[0024] 番杏在不同操作条件下提取，提取液对DPPH自由基清除率的实验结果见表1。
[0025] 表1响应面实验设计及结果
[0026]
[0028] 对表1中的番杏醇溶性多酚的DPPH自由基清除率进行响应面回归分析，得到拟合 方程：
[0029] Y2= -53868. 51+1128. 04A+285. 59B+1605. 92C+164. 73D+0. 78AB+86. 06AC+8. 85AD -15. 28BC+1. 68BD+82. 05CD-23. 51A2-0. 75B2-560. 22C2-16. 19D2
[0030] 对模型和实验结果的方差分析见表2。
[0031] 表2实验结果的方差分析
[0032]
[0033] 注：#.P〈0. 01，差异极显著；*.P〈0. 05,差异显著；P>0. 1，差异不显著
[0034] 从表2中可知，以DPPH自由基清除率为响应值时，模型P〈0. 0001表明该二次方程 模型极显著，具有统计学意义。本实验中失拟项P= 0. 8436>0. 05,对模型是有利的，表示正 交试验结果和数学模型拟合良好，因此可用该回归方程代替试验真实点对实验结果进行分 析。其方程的相关系数为R2= 0.9767,表明97. 67%的数据可用此方程解释。本实验的CV 为1. 68%，说明其置信度较高，模型方程能够较好地反映真实的试验值，可用此模型分析响 应值的变化。
[0035] 超声波功率为150-250W时，对细胞的破坏力最佳，使得番杏中的多酚类物质充分 溶出并向外扩散，若继续增大功率，可能导致析出的多酚变性，或与其他溶出组分发生反 应，导致其抗氧化活性降低。
[0036] 经多次实验验证，类型为D101、X-5、ADS-17或ADS-7的大孔吸附树脂对番杏中的 多酚类物质的静态吸附率和解吸率较高，更为优选的D-101型大孔树脂的吸附率和解吸率 可分别达到52. 50%、93. 43%。
【具体实施方式】
[0037] 实施例1 :
[0038] 以如下步骤提取番杏中的多酚类物质：
[0039] (1)将新鲜番杏粉碎后过10目筛；
[0040] (2)将所述的番杏碎片加入到无水乙醇中，番杏碎片与无水乙醇的添加比为 1:5 (m/V)，经超声波处理，超声波功率为200W，超声辅助提取时间为44min，提取温度为 400C；
[0041] (3)重复提取2次，过滤后离心20min，离心转速为4000r/min，然后真空旋转蒸发 回收乙醇，得多酚粗提液；
[0042] 此时测量番杏多酚的提取率为17. I%。
[0043] (4)将所述多酚粗提液配制为8mg/mL的溶液，流过D-101型大孔吸附树脂进行吸 附，流速为3BV/h;
[0044] (5)将吸附后的树脂用蒸馏水洗两次后，用乙醇进行动态洗脱，乙醇浓度为90%， 洗脱速率为I. 5BV/h，洗脱液浓缩后冷冻干燥，得到多酚提取物。
[0045] 经以上步骤得到番杏多酚的纯度为75. 7%。
[0046] 实施例2 :
[0047] 以如下步骤提取番杏中的多酚类物质：
[0048] (1)将新鲜番杏粉碎后过10目筛；
[0049] (2)将所述的番杏碎片加入到无水乙醇中，番杏碎片与无水乙醇的添加比为 1:5 (m/V)，经超声波处理，超声波功率为175W，超声辅助提取时间为45min，提取温度为 350C；
[0050] (3)重复提取2次，过滤后离心20min，离心转速为4000r/min，然后真空旋转蒸发 回收乙醇，得多酚粗提液；
[0051] 此时测量番杏多酚的提取率为16. 2%。
[0052] (4)将所述多酚粗提液配制为8mg/mL的溶液，流过D-101型大孔吸附树脂进行吸 附，流速为4BV/h;
[0053] (5)将吸附后的树脂用蒸馏水洗两次后，用乙醇进行动态洗脱，乙醇浓度为90%， 洗脱速率为2BV/h，洗脱液浓缩后冷冻干燥，得到多酚提取物。
[0054] 经以上步骤得到番杏多酚的纯度为74. 5%。
[0055] 实施例3 :
[0056] 以如下步骤提取番杏中的多酚类物质：
[0057] (1)将新鲜番杏粉碎后过10目筛；
[0058] (2)将所述的番杏碎片加入到无水乙醇中，番杏碎片与无水乙醇的添加比为 1:6 (m/V)，经超声波处理，超声波功率为225W，超声辅助提取时间为45min，提取温度为 400C；
[0059] (3)提取1次，过滤后离心20min，离心转速为4000r/min，然后真空旋转蒸发回收 乙醇，得多酚粗提液；
[0060] 此时测量番杏多酚的提取率为16. 6%。
[0061] (4)将所述多酚粗提液配制为8mg/mL的溶液，流过D-101型大孔吸附树脂进行吸 附，流速为2BV/h;
[0062] (5)将吸附后的树脂用蒸馏水洗两次后，用乙醇进行动态洗脱，乙醇浓度为90%， 洗脱速率为I. 5BV/h，洗脱液浓缩后冷冻干燥，得到多酚提取物。
[0063] 经以上步骤得到番杏多酚的纯度为75. 1%。
[0064] 实施例4:
[0065] 以如下步骤提取番杏中的多酚类物质：
[0066] (1)将新鲜番杏粉碎后过10目筛；
[0067] (2)将所述的番杏碎片加入到无水乙醇中，番杏碎片与无水乙醇的添加比为 1:4(m/V)，经超声波处理，超声波功率为200W，超声辅助提取时间为40min，提取温度为 40°C；
[0068] (3)重复提取3次，过滤后离心20min，离心转速为4000r/min，然后真空旋转蒸发 回收乙醇，得多酚粗提液；
[0069] 此时测量番杏多酚的提取率为16. 4%。
[0070] (4)将所述多酚粗提液配制为8mg/mL的溶液，流过D-101型大孔吸附树脂进行吸 附，流速为3BV/h;
[0071] (5)将吸附后的树脂用蒸馏水洗两次后，用乙醇进行动态洗脱，乙醇浓度为90%， 洗脱速率为2BV/h，洗脱液浓缩后喷雾干燥，得到多酚提取物。
[0072] 经以上步骤得到番杏多酚的纯度为74. 7%。
【主权项】
1. 超声波辅助从番杏中提取多酚类物质的方法，其特征在于：步骤如下： 步骤一：将新鲜番杏粉碎后过10目筛； 步骤二：将所述的番杏碎片加入到乙醇中，番杏碎片与乙醇的质量比为1:3-1:7,经超 声波处理； 步骤三：重复提取，过滤离心，然后真空旋转蒸发回收乙醇，得多酚粗提液； 步骤四：将所述多酚粗提液配制为8mg/mL的溶液，流过大孔吸附树脂进行吸附； 步骤五：将吸附后的树脂用蒸馏水洗两次后，用乙醇进行动态洗脱，洗脱液浓缩后干 燥，得到多酚提取物。2. 如权利要求1所述的超声波辅助从番杏中提取多酚类物质的方法，其特征在于：步 骤二中所述的乙醇为无水乙醇。3. 如权利要求1所述的超声波辅助从番杏中提取多酚类物质的方法，其特征在于：步 骤二中所述的超声波功率为150-250W，超声波振荡时间为30-60min，提取温度为30-50°C。4. 如权利要求1所述的超声波辅助从番杏中提取多酚类物质的方法，其特征在于：步 骤三中所述的浸提次数为1-3次。5. 如权利要求1所述的超声波辅助从番杏中提取多酚类物质的方法，其特征在于：离 心20min，离心转速为4000r/min。6. 如权利要求1所述的超声波辅助从番杏中提取多酚类物质的方法，其特征在于：步 骤四中所述的大孔吸附树脂类型为D101、X-5、ADS-17或ADS-7。7. 如权利要求5所述的超声波辅助从番杏中提取多酚类物质的方法，其特征在于：所 述的大孔吸附树脂类型优选为D-101。8. 如权利要求1所述的超声波辅助从番杏中提取多酚类物质的方法，其特征在于：步 骤四中所述的多酚粗提液流过大孔吸附树脂的流速为2-4BV/h。9. 如权利要求1所述的超声波辅助从番杏中提取多酚类物质的方法，其特征在于：步 骤五中所述的洗脱乙醇的体积分数为90%。10. 如权利要求1所述的超声波辅助从番杏中提取多酚类物质的方法，其特征在于：步 骤五中所述的洗脱速率为I. 5-2BV/h。
【专利摘要】本发明公开了超声波辅助从番杏中提取多酚类物质的方法，步骤如下：(1)将番杏粉碎成小碎片；(2)向番杏碎片中加入乙醇，料液比为1:3-7，放入超声振荡清洗器中，在超声功率为150-250W，提取温度为30-50℃，提取时间为30-60min，重复步骤(2)提取1-3次，提取结束，合并提取液；(3)将提取液放入离心机中进行离心，旋转蒸发后得到番杏粗提物。(4)通过大孔树脂分离，减压浓缩，干燥后得到番杏多酚。本发明的操作条件温和；简便易行；提取剂可以回收再利用，对环境无危害；提取成本低，在番杏多酚生产中具有较好的应用前景。
【IPC分类】A61K36/185
【公开号】CN104906154
【申请号】CN201510250618
【发明人】李欣欣, 张玉洁, 李晓莉, 王楠, 王昕
【申请人】吉林大学
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年5月16日