栝楼二醇在制备抗肿瘤药物中的应用

栝楼二醇在制备抗肿瘤药物中的应用
【技术领域】
[0001]、本发明属于医药领域，涉及栝楼二醇在制备抗肿瘤药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 栝楼二醇（Karounidiol)，mD201-203°C ,主要存在于萌芦科(Cucurbitaceae)括 楼 Trichosanthes kirilowii Maxim.的种子中，分子式：C3tlH48O2,分子量：440. 71，结构式 为
现代药理研宄表明，栝楼二醇具有抗肿瘤促进作用。能抑制小鼠注入肿瘤促进剂TPA 所致炎症（ID50为0· 4mg/耳）。对于由7, 12-二甲基苯并[α ]蒽（DMBA)和TPA诱发的小 Μ肤肿瘤也有明显的抑制作用。
[0003] 通过文献检索，国内尚未见栝楼二醇用于制备抗肿瘤药物。

【发明内容】

[0004] 为满足临床需要，扩大用药品种，更好地治疗肿瘤疾病，应用栝楼二醇制备抗肿瘤 药物。
[0005] 本发明的技术方案如下： 本发明所述的栝楼二醇，其制备方法包括以下步骤： (1) 取栝楼种子粉碎，按固液体积比为5 :1. 5-2加入夹带剂，在压力22-35MPa，温度 35-48°C条件下，通入液态CO2萃取90-180min，在压力7-9MPa，温度30-35°C条件下解析，收 集萃取液； (2) 将步骤（1)中得到的萃取液加硅藻土搅拌脱色，过滤得到脱色液； (3) 将步骤（2)中得到的脱色液浓缩至相对密度为1. 12,上中性氧化铝柱，用石油 醚-乙酸乙酯洗脱纯化，得到栝楼二醇粗品； (4) 粗品经过制备型高效液相色谱精制得到高纯度的栝楼二醇。
[0006] 所述步骤（1)中，夹带剂为甲醇或乙醇溶液。
[0007] 所述步骤（2)中，硅藻土加入量为药材量的3-4. 5% 所述步骤（3)中，石油醚-乙酸乙酯的体积比为3:14。
[0008] 所述步骤（4)中，制备型高效液相色谱流动相为甲醇-乙腈-水，体积比为 19:38:45〇
[0009] 栝楼二醇在制备抗肿瘤药物中的应用。
[0010] 通过体外肿瘤细胞体外抑制试验，观察栝楼二醇的抗肿瘤作用，结果表明栝楼二 醇对腹水型S180、肝癌及黑忾素瘤Β16均有一定的抑制作用，具有显著抗癌活性，且其毒副 作用小。
[0011] 本发明的有益效果通过以下实验得到了验证： 实验方法： 1、受试提取物：栝楼二醇提取物 (1)性状：针晶，味苦。
[0012] (2)规格：含栝楼二醇彡90%。
[0013] (3)溶剂：乙醇或甲醇。
[0014] (4)储存条件：4°C，密封保存。
[0015] 2、细胞株:腹水瘤细朐株S180、肝癌细朐株BEL-7404及黑色素瘤细朐株B16。
[0016] 3、给药剂量和方法 栝楼二醇组：10mg/kg/天，灌胃给药，隔一天一次，共五天。
[0017] 阴性对照组：10mg/kg/天，生理盐水肌注给药，隔一天一次，共五天。
[0018] 阳性对照组：30mg/kg/天，5-氟尿喃啶肌注给药，隔一天一次，共五天。
[0019] 灌胃后2h，用HPLC检测血浆药物浓度。
[0020] 4、种植瘤模型的建立与给药 (1)皮下种植：分别将上述细胞培养至90%融合，收集细胞，取2 X 10 6细胞悬液，注射 至小鼠肋下皮下组织，于术后15天取材，称量瘤重。另取同样模型，观察30天，计算药物对 模型动物存活率的影响。
[0021] (2)脾内种植瘤肝转移模型：取2X10 6细胞悬液注射至小鼠脾包膜内，于术后15 天取脾和肝脏，测量瘤重和肝转移数。
[0022] (3)给药方式：种植瘤细胞同时给药。
[0023] 5、结果 结果如表1、表2和表3显示，栝楼二醇组用药均有不同程度的抑制肿瘤生长和转移的 作用，可延长实验小鼠的生存期。
[0024] 表1栝楼二醇对种植瘤的抑制作用（η=20，Σ ±S)


由表1、表2和表3可以看出，栝楼二醇组用药抑制肿瘤生长、转移的效果与阳性对照组 基本相当，可有效延缓实验小鼠的生存寿命，其效果明显优于对照组。
[0025] 本发明用于制备抗肿瘤药物时，将栝楼二醇与医学上可接受的辅料一起制成抗肿 瘤的药物，药物的剂型为注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、合剂、口服液中的一种。
[0026] 本发明用于制备抗肿瘤药物时，在其口服配方中添加肠吸收促进剂，包含中链脂 肪酸盐、胆酸盐、鹅去氧胆酸盐、壳聚糖及其衍生物中的一种或几种。
[0027] 下面将结合【具体实施方式】进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限 于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0028] 实施例1 栝楼二醇的制备 取500g栝楼种子粗粉，置于萃取釜中，按固液体积比为5 :2加入甲醇作为夹带剂，在压 力22MPa，温度38°C条件下，通入液态C02, C02流量为4. 5ml/g生药/min，萃取120min，在 压力7MPa，温度32°C条件下解析，收集萃取液，加入15g硅藻土搅拌脱色，过滤得到脱色液， 浓缩至相对密度为1. 12,上中性氧化铝柱(柱压为6bar，柱径高比为1:8)，用石油醚-乙酸 乙酯3:14洗脱纯化，得到栝楼二醇粗品；以体积比19:38:45甲醇-乙腈-水为流动相，粗 品用流动相溶解，注入制备型高效液相色谱仪，控制流速为20ml/min，收集目标流分，连续 制备，冷冻干燥得高纯度的栝楼二醇，经HPLC检测，纯度95. 1%。
[0029] 实施例2 片剂：栝楼二醇40g，淀粉135g，鹅去氧胆酸盐25g，制粒，压片制成1000片。服用方法： 成人一次1片，一日2次。
[0030] 实施例3 胶囊：栝楼二醇40g，淀粉135g，壳聚糖25g，混匀，制成1000粒。服用方法：成人一次 1粒，一日2次。
【主权项】
1.结构式如下所示的括楼二醇在制备抗肿瘤药物中的应用。如权利要求1所述的括楼二醇在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，括楼二醇在 肝癌药物中的应用。3.如权利要求1所述的括楼二醇在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，括楼二醇 在肝癌药物中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种栝楼二醇在制备抗肿瘤药物中的应用，通过体外肿瘤细胞体外抑制试验，观察栝楼二醇的抗肿瘤作用，结果表明栝楼二醇对腹水型S180、肝癌、U937、U14及Lewis黑色素瘤均有一定的抑制作用，具有显著抗癌活性，且其毒副作用小。将栝楼二醇与医学上可接受的辅料一起制成抗肿瘤的药物，药物的剂型为注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、合剂、口服液中的一种。
【IPC分类】A61P35/00, A61K31/56
【公开号】CN104922134
【申请号】CN201510263173
【发明人】刘东锋, 杨成东
【申请人】南京泽朗医药科技有限公司
【公开日】2015年9月23日
【申请日】2015年5月22日