时所述GLP-1受体激动剂为0. 1-10% )。
[0144] 通常，组分e)以肽活性剂（例如GLP-1受体激动剂）与脂溶性酸的摩尔比为1 : 1 至1 : 30存在，优选1 : 1至1 : 20,最优选1 : 1至1 : 15,例如1 : 2至1 : 10。由 于典型的脂溶性酸的分子量比肽（例如GLP-1受体激动剂）的小，所以脂溶性酸的重量比 可相对较小。例如，对于小分子量的pH调节剂（例如小于500amu)来说，所述组合物的 0. 1-5 %可以是脂溶性酸，优选0.2-2%。
[0145] 除非有其他说明，否则本文中所有的百分数均为重量比。所述预制剂可基本上仅 由这些组分组成，并且在一个方面中完全由这些组分组成。
[0146] 组分a)的优选范围为33-60 % (例如43-60 % )，特别优选为35-55 % (例 如40-55 % );组分b)的优选范围为33-55 % (例如35-55 % )，特别是35-50 % (例如 40-50% ) 〇
[0147]a:b的比例通常为40 : 60到70 : 30,优选45 : 55到60 : 40并且更优选 48 : 52到55 : 45。约50 : 50的比例是高度有效的。
[0148] 所述非水性预制剂中溶剂组分ii)(例如组分c))的量对几个方面具有相当大的 影响。特别地，粘度和释放速率（以及持续时间）会随溶剂水平显著改变。因此，所述溶剂 的量至少足以提供低粘度混合物，但还会另外进行确定以提供所期望的释放速率。这可由 以下实施例所示的常规方法确定。通常的水平为〇. 1-20%，特别是0. 1-15%的溶剂提供合 适的释放和粘度性质。这优选为2-15% (例如2-12%)并且约10%的量是非常有效的。
[0149] 本发明组合物相对于聚合物制剂（例如PLGA球）而言的一个优点是活性剂的低 初始释放（"非突释特性")。低初始释放可定义为使得最初24小时内血浆浓度对时间的曲 线下面积小于整个曲线（从时间0到无限或从时间0到最后的取样时间点来测量或外推） 下面积的15 %，更优选小于10 %，最优选小于7 %。这特别适用于本发明的酰基糖和脂质方 面，W02005/117830中对此进行了更详细地讨论。
[0150] 如前所述，本发明所述预制剂中组分c的量应至少足够提供组分i)和ii)(脂质 方面的a、b和c)的低粘度混合物（例如参见前面的分子溶液），并且易于通过标准方法确 定所述组分的任何特定组合。
[0151] 当使用脂质基质时，相行为可通过例如目测与偏光显微镜法、核磁共振和低温透 射电子显微镜（cryo-TEM)技术的组合来分析，以寻找溶液、L2或L3相，或液晶相，或者在 cryoTEM的情况下，寻找这些相的分散片段。粘度可直接通过标准方法来测量。如前所述， 合适的实际粘度是可以有效地进行注射特别是无菌过滤的粘度。这可如本文所述来容易地 进行评估。
[0152] 本文所述的优选的基于脂质的基质系统包含脂质组分a)和b)，以及溶剂（c)、活 性剂（d)和脂溶性酸（e)组分。本文所述的组分"a"优选为至少一种二酰基甘油（DAG)并 由此具有两个非极性的"尾"基团。所述两个非极性基团可具有相同或不同的碳原子数并 且可各自独立地是饱和或不饱和的。非极性基团的实例包括C6_C32烷基和烯基，其通常作为 长链羧酸的酯而存在。它们通常通过碳原子数和碳链中不饱和键的数目来描述。因此，CX: Z表示具有x个碳原子和Z个不饱和键的烃链。实例尤其包括己酰基（C6 :0)、辛酰基（C8 : 0)、癸酰基（C10 :0)、月桂酰基（C12 :0)、肉豆蔻酰基（C14 :0)、棕榈酰基（C16 :0)、植烷酰 基（C16 :0)、棕榈油酰基（C16 :1)、硬脂酰基（C18 :0)、油酰基（C18 :1)、反油酰基（C18 :1)、 亚油酰基（C18 :2)、亚麻酰基（C18 :3)、花生四烯酰基（C20 :4)、二十二烷酰基（C22 :0)和 二十四烷酰基（C24:9)。因此，典型的非极性链基于天然酯脂质的脂肪酸，包括己酸、辛酸、 癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、植酸、棕榈炔酸、硬脂酸、油酸、反油酸、亚油酸、亚麻酸、花 生四烯酸、二十二烷酸或二十四烷酸或相应的醇。优选的非极性链为棕榈酸、硬脂酸、油酸 和亚油酸，特别是油酸。
[0153] 可将任意量的二酰基脂质的混合物用作组分a。优选该组分包含至少部分甘油二 油酸酯（⑶〇)。非常优选的实例是包含至少50%、优选至少80%、甚至基本上100%⑶0的 DAG〇
[0154] 由于⑶0和其他二酰基甘油是源自天然来源的产物，因此通常存在一定比例的具 有其他链长的"杂质"脂等。因此，在一个方面中，本文所用的GD0用于表示含有伴随杂质 的任何商品级的GD0(即商品纯度的GD0)。这些杂质可通过纯化来分离和除去，但是如果级 别相符，则所述纯化很少有必要。但是，如果必要，"GD0"可以基本上为化学纯的GD0,例如 至少80 %纯度，优选至少85 %纯度，更优选至少90 %纯度的⑶0。
[0155] 在本发明优选的脂质基质中的组分"b"是至少一种磷脂酰胆碱（PC)。与组分a相 似，此组分包含极性头基团和至少一个非极性尾基团。组分a和b之间的不同主要在于所 述极性基团。因此，对于组分a)而言，所述非极性部分可合适地源自前述的脂肪酸或相应 的醇。与组分a) -样，所述PC包含两个非极性基团。
[0156] 所述磷脂酰胆碱部分，甚至比任意的二酰基甘油部分更合适，可源自天然来源。磷 脂的合适来源包括卵、心脏（例如牛的）、脑、肝脏（例如牛的）和包括大豆的植物来源。此 类来源可提供组分b的一种或多种成分，其可包含磷脂的任意混合物。可使用来自这些或 其他来源的任何单一PC或PC的混合物，但是含大豆PC或卵PC的混合物是非常合适的。所 述PC组分优选包含至少50 %的大豆PC或卵PC，更优选包含至少75 %的大豆PC或卵PC， 最优选包含基本纯的大豆PC或卵PC。
[0157]在一个替代的但是同样优选的实施方案中，所述PC组分可包含合成的二油酰基PC。据认为这提高了稳定性，因此特别优选对于长期贮存和/或在体内具有长期释放而言 需要稳定的组合物。在该实施方案中，所述PC组分优选含有至少50%的合成二油酰基PC， 更优选至少75%的合成二油酰基PC，最优选基本上纯的合成二油酰基PC。任何余下的PC 优选是上述的大豆PC或卵PC。
[0158] 由于本发明所述的预制剂将施用给对象以控制释放肽活性剂，因此重要的是，所 述组分是生物相容的。在此方面，由于PC和DAG都是良好耐受的并且在体内分解为哺乳动 物体内天然存在的组分，因此用于本发明的所述预制剂的优选脂质基质是非常有利的。
[0159] 组分a和b的特别有利的组合是⑶0和PC，特别是⑶0与大豆PC。适用于所述组 合的每种组分的适当量是本文中针对任意组合中各组分所示的量。当上下文允许时，这也 适用于本文所述组分的任意组合。
[0160] 本发明预制剂的组分iii)(包括合适的组分c))是有机溶剂，优选含氧有机溶剂。
[0161] 由于所述预制剂是在施用后（例如体内）通常在和水性流体接触后而形成贮库组 合物的，因此此溶剂可被对象所耐受并且能和所述水性流体相混合和/或使所述预制剂扩 散或溶解而进入水性流体中是理想的。因此，具有至少中等水溶性的溶剂是优选的。
[0162] 在优选的形式中，所述溶剂使得可以相对少地（即优选低于15% )加入到基质组 合物（例如含a和b的混合物）中，导致一个数量级或更多数量级的大的粘度降低。如本 文所述，加入10%的溶剂可导致粘度相对于不含溶剂组合物或含有不合适溶剂（例如水或 甘油）的基质下降两个或更多个数量级。
[0163] 适合用于本发明的典型溶剂包括选自醇、酮、酯（包括内酯）、醚、酰胺和亚砜中的 至少一种。醇类是特别合适的并且形成溶剂的优选类别。合适的醇类的实例包括乙醇、异 丙醇、苯甲醇和甘油形式。乙醇是最优选的。一元醇比二元醇和多元醇更优选。在使用二 元醇或多元醇的情况下，优选与至少等量的一元醇或其他优选的溶剂进行组合。或者，二元 醇（例如丙二醇）可单独使用或更优选与至少五分之一量（以重量计）的一元醇（特别是 乙醇）一起使用。酮类的实例包括丙酮和碳酸亚丙酯。合适的醚包括乙醚、四氢呋喃聚乙 二醇醚、二甘醇单乙醚、二甲基异山梨醇（dimethylisobarbid)和聚乙二醇。合适的酯类包 括乙酸乙酯、苯甲酸苄酯和乙酸异丙酯，二甲基硫醚是合适的硫化物溶剂。合适的酰胺包括 N-甲基吡咯烷酮（NMP)，2-吡咯烷酮和二甲基乙酰胺（DMA)。亚砜包括甲基亚砜和二甲基 亚砜（DMS0)。
[0164] 脂质基质的非常优选的组合是大豆PC、⑶0和乙醇。如上所述，适用于所述组合的 每种组分的合适量是针对任意组合中各组分所示的量。
[0165] 优选组分c极少或完全不包含卤素取代烃，这是由于它们往往具有较低的生物相 容性。在需要部分卤代溶剂例如二氯甲烷或氯仿的情况下，这个比例会通常被最小化。
[0166] 本发明中所用的组分c可以是单一溶剂或合适溶剂的混合物，但是通常会具有低 粘度。这是重要的，因为本发明的一个关键的方面在于其提供了低粘度的预制剂，合适溶剂 的主要作用就是降低此粘度。所述降低是所述溶剂的较低粘度效应和溶剂与脂质组合物之 间分子相互作用的效应的组合。本发明人的一个发现是本文所述的低粘度含氧溶剂与所述 组合物的脂质部分之间具有非常有利的并且出乎意料的分子相互作用，由此提供了随着小 体积溶剂的加入的非线性粘度降低。
[0167] 所述"低粘度"溶剂组分c(单一溶剂或混合物）的粘度在20°C时通常不大于 18mPas。所述粘度在20°C下优选不大于15mPas，更优选不大于lOmPas，最优选不大于 7mPas〇
[0168] 本发明所述的预制剂通常不含有显著量的水。由于将所有微量的水都从脂质组合 物中除去基本上是不可能的，所有这就是说表明只有该最小微量的水由于不能容易地除去 而存在。该量通常小于所述预制剂重量的lwt%，优选小于0.5wt%。在一个优选的方面， 本发明的预制剂不含有丙三醇、乙二醇或丙二醇并且含有不超过微量的水，如刚刚所述的。 关于此点的例外情形是较大量的水被适量的水溶性有机溶剂平衡，如上文所述。
[0169] 本发明所述的预制剂含有一种或多种肽活性剂。这些肽可以是天然肽或由天然肽 衍生的，或者可以是化学修饰的或完全合成的肽分子。任何氨基酸可包含在所述肽中，包括 本文所述的那些，并且所述肽可以是化学修饰的或经酶修饰的。
[0170] 典型的肽活性剂的分子量范围为500至lOOOOOamu，显然包括蛋白质活性剂。在 一个实施方案中，所述肽在中性和/或生理pH下可具有至少一个阳离子电荷，最优选地，在 PH6. 5或以上、优选pH7. 5或以上需要至少一个阴离子反离子。所述反离子是生理上可接受 的，因此可以是卤素或生理上可接受酸的离子。乙酸根反离子是特别优选的，因此，在本发 明的一个实施方案中，所述活性剂是乙酸肽。在一个替代性实施方案中，所述肽活性剂可以 是基本上中性的，并且可具有PH5至pH8、优选pH5. 2至pH7. 5的等电点。
[0171] 合适种类的肽的实例包括肽激素和合成类似物（例如促黄体激素释放激素 (LHRH)和类似物（例如亮丙瑞林、戈舍瑞林、布舍瑞林、曲普瑞林、地盖瑞利（degarelix))、 增泌素（incretin)及增泌素模拟物（例如GLP-1及类似物或者葡萄糖依赖性促胰岛 素释放肽（GIP)、胰高血糖素、胰岛素和类似物、干扰素、加压素、降钙素等）、细胞因子、 抗体片段（FAb;scVF)、抗微生物肽（g，肾上腺皮质激素抑制素（corticostatin)、防御 素、histatin)、特异性祀向肽（例如CurrentOpinionGenetics&Development10， 71-77(2006)中所述的实施例）、毒液肽（例如芋螺肽）和免疫源性肽（例如用于疫苗接种 目的的蛋白质片段）。
[0172] 在本发明的一个优选实施方案中，所述肽活性剂不是生长激素释放抑制激素 (somatostatin)或其任何类似物或衍生物。
[0173] 本发明的整个说明书中通过举例方式使用的最优选的活性剂是GLP-1受体激动 剂。由于GLP-1为肽激素，因此典型的GLP-1受体激动剂是天然GLP-1及其类似物。一般而 言，这些物质是肽，特别是具有约30个氨基酸的肽，例如20-48,特别是25-45 (例如25-38) 个氨基酸的肽。优选地，此类肽在结构上与GLP-1、艾塞那肽（extendin-4)和/或一种或多 种已知类似物相关，包括本文所列的那些。肽可仅含有选自遗传密码所示的20个a氨基 酸的氨基酸，或者更优选地，可含有它们的异构体和其他天然和非天然氨基酸（通常是a、 0或y氨基酸，L-或D-氨基酸）和它们的类似物和衍生物。优选的氨基酸包括上面所列 的作为已知的GLP-1类似物成分的那些。
[0174] 氨基酸衍生物在肽的末端处特别有用，其中所述末端氨基或羧酸酯基可被任意其 他官能团取代，所述其他官能团例如羟基、烷氧基、羧基（在N-末端）、酯基、酰胺、硫代基、 酰氨基、氨基（在C末端）、烷基氨基、二烷基氨基或三烷基氨基、烷基（本文中指全部CfC2。 烷基，优选Ci-Cw烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基 等）、芳基（例如苯基、苯甲基、萘基等）、杂芳基或其他官能团，优选含有至少一个杂原子并 优选含有总共不超过20个原子，更优选不超过10个并且最优选不超过6个原子（任选地 排除氢）。
[0175] 本文所用的"GLP-1受体激动剂"表示任何GLP-1受体的任意肽激动剂，包括所有 修饰的和非天然的肽，例如本文所述的那些，显然包括本文【背景技术】中所述的那些。优选 地，这些物质是GLP-1类似物或天然激动剂艾塞那肽（"exendin-4"）的类似物，包括来自 于人或来自于其他物种的天然形式的GLP-1和艾塞那肽（exendin-4)。这些类似物是肽、 肽衍生物或肽模拟物。肽衍生的GLP-1受体激动剂是最优选的，例如前述的那些，特别是 GLP-1 (7-37)、GLP-1 (7-36)酰胺、利拉鲁肽、AVE-010 (ZP10)、TH0318、B頂 51077、NN2211、 CJC-1131、LY315902和艾塞那肽（extendin-4)。上文中显示了几种优选的GLP-1受体激 动剂的具体序列，这些物质均是非常合适的。文献中还提供了其它合适的GLP-1受体激动 剂，特别地，这些物质包括JMedChem43,1664-1669(2000)中列举的肽和酰基肽（特别是 第1665页中表1所示的GLP-1类似物）；可通过JMed.Chem. 47,4128-4134(2004)中提供 的工作而制得的衍生物，特别是符合必需氨基酸的结构、可利用脂肪酸衍生的位点以及第 4130页中图3中总结的可修饰以提高肽酶抗性的位点；已知的类似物和可通过Diabetes Metab.Res.Rev. 21，313-331 (2005)中所述的工作获得的所有类似物，包括第322-323页所 述的类似物以及第323-325页所述的为肽酶抗性而衍生或制备的类似物；以及Curr.Med. Chem. 10,2471-2483(2003)中所述的所有激动剂，特别是具有第2477页中所述的序列和修 饰的那些。因此，这些文献，特别是构成本申请公开内容部分的那些部分在此明确通过引用 并入本文。
[0176] 在一个典型的实施方案中，所述肽活性剂（例如GLP-1受体激动剂）通常按总制 剂重量的0.02%到12%来配制。典型的值为0. 1 %到10%，优选0.2 %到8%，更优选为 0. 5%到6%。在允许的情况下，这些水平可适用于本发明的所有方面。
[0177] 在一个相关的实施方案中，可以在混合物不存在脂溶性酸组分的情况下以不易达 到的水平配制所述肽活性剂（例如GLP-1受体激动剂