肽是具有两个净正电荷以及至少一个芳香族氨 基酸的三肽。在特定的实施方式中，所述芳香族阳离子肽是具有两个净正电荷和两个芳香 族氨基酸的三肽。
[0162] 芳香族阳离子肽包括但不限于以下肽的示例：
[0163] Lys-D-Arg-Tyr-NH2
[0164] Phe-D-Arg-His
[0165] D-Tyr-Trp-Lys-NH2
[0166] Trp-D-Lys-Tyr-Arg-NH2
[0167] Tyr-His-D-Gly-Met
[0168] Phe-Arg-D-Hi s~Asp
[0169] Tyr-D-Arg-Phe-Lys-Glu-NH2
[0170] Met-Tyr-D-Lys-Phe-Arg
[0171] D-His-Glu-Lys-Tyr-D-Phe-Arg
[0172] Lys-D-Gln-Tyr-Arg-D-Phe-Trp-NH2
[0173] Phe-D-Arg-Lys-Trp-Tyr-D-Arg-His
[0174] Gly-D-Phe-Lys-Tyr-His-D-Arg-Tyr-NH2
[0175] Val-D-Lys-His-Tyr-D-Phe-Ser-Tyr-Arg-NH2
[0176] Trp-Lys-Phe-D-Asp-Arg-Tyr-D-His-Lys
[0177] Lys-Trp-D-Tyr-Arg-Asn-Phe-Tyr-D-His-NH 2
[0178] Thr-Gly-Tyr-Arg-D-His-Phe-Trp-D-His-Lys
[0179] Asp-D-Trp-Lys-Tyr-D-His-Phe-Arg-D-Gly-Lys-NH 2
[0180] D-His-Lys-Tyr-D-Phe-Glu-D-Asp-D-His-D-Lys-Arg-Trp-NH 2
[0181] Ala-D-Phe-D-Arg-Tyr-Lys-D-Trp-His-D-Tyr-Gly-Phe
[0182] Tyr-D-Hi s-Phe-D-Arg-Asp-Lys-D-Arg-Hi s-Trp-D-Hi s-Phe
[0183] Phe-Phe-D-Tyr-Arg-Glu-Asp-D-Lys-Arg-D-Arg-His-Phe-NH 2
[0184] Phe-Try-Lys-D-Arg-Trp-His-D-Lys-D-Lys-Glu-Arg-D-Tyr-Thr
[0185] Tyr-Asp-D-Lys-Tyr-Phe-D-Lys-D-Arg-Phe-Pr〇-D-Tyr-His-Lys
[0186] Glu-Arg-D-Lys-Tyr-D-Val-Phe-D-His-Trp-Arg-D-Gly-Tyr-Arg-D-Met-NH 2
[0187] Arg-D-Leu-D-Tyr-Phe-Lys-Glu-D-Lys-Arg-D-Trp-Lys-D-Phe-Tyr-D-Arg-Gly
[0188] D-Glu-Asp-Lys-D-Arg-D-His-Phe-Phe-D-Val-Tyr-Arg-Tyr-D-Tyr-Arg-His-Phe -nh2
[0189] Asp-Arg-D-Phe-Cys-Phe-D-Arg-D-Lys-Tyr-Arg-D-Tyr-Trp-D-His-Tyr-D-Phe-L ys-Phe
[0190] His-Tyr-D-Arg-Trp-Lys-Phe-D-Asp-Ala-Arg-Cys-D-Tyr-His-Phe-D-Lys-Tyr-H is_Ser_NH 2
[0191] Gly-Ala-Lys-Phe-D-Lys-Glu-Arg-Tyr-His-D-Arg-D-Arg-Asp-Tyr-Trp-D-His-T rp-Hi s-D-Lys-Asp
[0192] Thr-Tyr-Arg-D-Lys-Trp-Tyr-Glu-Asp-D-Lys-D-Arg-His-Phe-D-Tyr-Gly-Val-I le-D-His-Arg-Tyr-Lys-NH 2
[0193] 在一个实施方式中，具有y型阿片（mu-opioid)受体激动剂活性的肽具有式 Tyr-D-Arg-Phe-Lys-NH 2 (本文中称为"SS-01"）。SS-01具有由氨基酸一酪氨酸、精氨酸 和赖氨酸提供的3个净正电荷以及由氨基酸一苯丙氨酸和酪氨酸提供的两个芳香基团。 SS-01的酪氨酸可以是酪氨酸的改性的衍生物，例如2'，6' -二甲基酪氨酸，以产生具有式 2'，6' -Dmt-D-Arg-Phe-Lys-My^化合物（本文中称为"SS-02"）。SS-02 具有分子量 640 且在生理pH条件下携带3个净正电荷。SS-02以能量非依存方式容易地穿过若干哺乳动物 细胞类型的细胞膜（Zhao 等，J. Pharmacol Exp Ther. 304:425-432, 2003)。
[0194] 不具有y型阿片受体激动剂活性的肽一般在N末端（即，氨基酸位置1)上不具 有酪氨酸残基或酪氨酸衍生物。N末端上的氨基酸可以是与酪氨酸不同的任何自然存在的 氨基酸或非自然存在的氨基酸。在一个实施方式中，N末端上的氨基酸是苯丙氨酸或其衍 生物。苯丙氨酸的示例性衍生物包括2' -甲基苯丙氨酸（Mmp)、2'，6' -二甲基苯丙氨酸 (2'，6' -Dmp)、N，2'，6' -三甲基苯丙氨酸（Tmp)和2' -羟基-6' -甲基苯丙氨酸（Hmp)。
[0195] 不具有y型阿片受体激动剂活性的芳香族阳离子肽的示例具有式 Phe-D-Arg-Phe-Lys_NH 2 (本文中称为"SS-20"）。可选地，N末端苯丙氨酸可以是苯丙氨酸 的衍生物，比如2'，6' -二甲基苯丙氨酸（2'，6' -Dmp)。在氨基酸位置1包括2'，6' -二 甲基苯丙氨酸的SS-01具有式2'，6' -Dmp-D-Arg-Phe-Lys-NH2。在一个实施方式中，SS-02 的氨基酸序列重排，以使Dmt不在N末端。不具有y型阿片受体激动剂活性的芳香族阳离 子肽的示例具有式 D-Arg-2'，6' -Dmt-Lys-Phe-NH2(SS-31)。
[0196] SS-01、SS-20、SS_31和它们的衍生物还可包括功能类似物。如果肽具有与SS-01、 SS-20或SS-31相同的功能，则其可以看作是SS-0USS-20或SS-31的功能类似物。例如， 该类似物可以是SS-0USS-20或SS-31的取代变型，其中，一个或多个氨基酸被另一氨基酸 取代。
[0197] SS-0USS-20或SS-31的合适的取代变型包括保守的氨基酸取代物。氨基酸可以 根据其物理化学性质而进行如下分组：
[0198] (a)非极性氨基酸：Ala (A) Ser (S) Thr (T) Pro (P) Gly (G) Cys (C);
[0199] 〇3)酸性氨基酸：厶811〇'〇厶8卩(0)6111(￡)6111(9);
[0200] (〇)碱性氨基酸此8(}{^找(1?)1^(1();
[0201] (d)疏水性氨基酸：Met(M)Leu(L)Ile(I)Val(V);以及
[0202] (e)芳香族氨基酸：Phe (F) Tyr (Y) Trp (W) His (H)。
[0203] 肽中的氨基酸被同一组中的另一种氨基酸取代称为保守取代，且可以保留原始肽 的物理化学性质。相反，肽中的氨基酸被不同组中的另一种氨基酸取代通常更有可能改变 原始肽的物理化学性质。
[0204] 在一些实施方式中，芳香族阳离子肽具有表5中所示的式。
[0205] 表5.具有y型阿片活性的肽类似物
[0206]
[0210] Dab =二氨丁基
[0211] Dap =二氨基丙酸
[0212] Dmt =二甲基酪氨酸
[0213] Mmt =2' -甲基酪氨酸
[0214] Tmt = N，2'，6'-三甲基酪氨酸
[0215] Hmt = 2'-羟基-6'-甲基酪氨酸
[0216] dnsDap = 0 -丹磺酰-L- a，0 -二氨基丙酸
[0217] atnDap = 0 -邻氨基苯甲酰-L-a，0 -二氨基丙酸
[0218] bio=生物素
[0219] 不活化ii型阿片受体的其他芳香族阳离子肽的示例包括但不限于表6中所示的 芳香族阳离子肽。
[0220] 表6.缺少y型阿片活性的肽类似物
[0221]
[0222]
[0223] Cha =环己基丙氨酸
[0224] 表5和表6中显示的肽的氨基酸可以是左旋结构或右旋结构。
[0225] 还可通过本领域熟知的任何方法来合成肽。例如，用于以化学方式合成 肽的合适方法包括诸如Stuart和Young在以下文献中描述的方法：Sol id Phase Peptide Synthesis,第二版，Pierce Chemical Company(1984);以及 Methods Enzymol. 289, Academic Press 公司，纽约（1997)。
[0226] 芳香族阳离子肽的预防用涂和治疗用涂
[0227] 本文中描述的芳香族阳离子肽可用于预防或治疗疾病。具体地，本发明提供了用 于治疗处于眼科疾病或眼科病症的危险中（或易得眼科疾病或眼科病症）的对象的预防和 治疗方法。因此，本方法提供了通过将有效量的芳香族阳离子肽给药至需要该芳香族阳离 子肽的对象来预防和/或治疗对象中的眼科病症。例如，可以将芳香族阳离子肽组合物给 药至对象，来试图改善造成眼科疾病或眼科病症的一个或多个因素。
[0228] 本发明的一个方面包括出于治疗目的来减轻对象中的眼睛病症的方法。在治疗性 应用中，将足以治愈或者至少部分地抑制疾病的症状（包括其并发症和该疾病发展中的中 间病理表现型）的量的组合物或药物给药至疑似患上这样的疾病的对象或者已患有这样 的疾病的对象。就这点而论，本发明提供了治疗患上眼科病症的个体的方法。在一些实施 方式中，本发明提供了一种通过给药芳香族阳离子肽来治疗或预防哺乳动物中的特定的眼 科失调的方法，所述眼科失调比如糖尿病性视网膜病变、白内障、色素性视网膜炎、青光眼、 脉络膜新生血管、视网膜变性和氧诱导视网膜病变。
[0229] 在一个实施方式中，将芳香族阳离子肽给药至一对象来治疗或预防糖尿病性视网 膜病变。糖尿病视网膜病变的特征为毛细血管瘤和圆点状出血。因此，毛细血管阻塞物导 致棉絮状斑形成在视网膜上。而且，由于血管通透性增加，可能在具有糖尿病性视网膜病变 的个体中形成视网膜水肿和/或硬性渗出。随后，新生血管出现，玻璃体中生长的结缔组织 的牵引导致视网膜脱落。还可能发生虹膜红变和新生血管性青光眼，它们进而会导致失明。 糖尿病性视网膜病变的症状包括但不限于阅读困难、视力模糊、眼睛的视力突然丧失、看到 灯周围有光环、看到黑点和/或看到闪光。
[0230] 在一个实施方式中，将芳香族阳离子肽给药至对象来治疗或预防白内障。白内障 是先天性或后天性疾病，其特征是自然晶状体的透明度降低。具有白内障的个体可以表现 出一种或多种症状，包括但不限于晶状体表面浑浊、晶状体内部浑浊和/或晶状体肿胀。与 先天性白内障相关的疾病的典型示例是假性白内障、膜性白内障、冠状白内障、板层白内 障、点状白内障和丝状白内障。与后天性白内障关联的疾病的典型示例是老年性白内障、继 发性白内障、褐变白内障、并发性白内障、糖尿病性白内障和外伤性白内障。后天性白内障 还可由电休克、放射、超声波、药物、系统疾病和营养障碍引起。后天性白内障还包括术后白 内障。
[0231] 在一个实施方式中，将芳香族阳离子肽给药至一对象来治疗或预防色素性视网 膜炎。色素性视网膜炎是特征为视杆细胞和/或视锥细胞损伤的失调。视网膜中存在黑 线在患有色素性视网膜炎的个体中是常见的。具有色素性视网膜炎的个体还具有多个症 状，包括但不限于头疼、四肢麻痹或刺痛、闪光和/或视觉变化。例如，参见Eeckenlively 等，Clinical findings and common symptoms in retinitis pigmentosa. Am J Ophthal mol. 105(5) :504-511 (1988)。
[0232] 在一个实施方式中，将芳香族阳离子肽给药至一对象来治疗或预防青光眼。青光 眼是特点为眼内压增高的遗传性疾病，其导致视力减退。青光眼可以源于个体中已存在的 各种眼科病症，比如伤口、手术以及其他结构畸形。虽然青光眼可以在任何年龄发生，但其 经常在年老的个体中发展并导致失明。青光眼患者通常具有超过21mmHg的眼内压。然而， 正常眼压性青光眼可以在不具有这样高的眼内压（即大于21mmHg)的情况下发生，对于正 常眼压性青光眼，可以在视野和视神经乳头中发现青光眼改变。青光眼的症状包括但不限 于视力模糊、严重的眼疼、头疼、在灯周围看到光晕、恶心和/或呕吐。
[0233] 在一个实施方式中，将芳香族阳离子肽给药至对象来治疗或预防黄斑变性。黄斑 变性是通常与年龄相关的疾病。黄斑变性的常见类别包括湿性黄斑变性、干性黄斑变性和 非年龄相关的黄斑变性。占所有情况的约80%到90%的干性黄斑变性也称为萎缩性、非化 脓性或玻璃疣样黄斑变性。对于干性黄斑变性，玻璃疣通常累积在视网膜色素上皮组织的 下面。随后地，当玻璃疣影响黄斑中的感光体的功能时，发生视力减退。干性黄斑变性的病 症包括但不限于斜视、中央视力失真、光线失真或黑暗失真和/或色彩感觉改变。干性黄斑 变性可以导致视力逐渐减退。
[0234] 湿性黄斑变性也称为血管新生、视网膜下血管新生、渗出性或盘状黄斑变性。对于 湿性黄斑变性，不正常的血管生长在黄斑的下面。所述血管使流体流到黄斑中并损伤感光 细胞。湿性黄斑变性可以迅速地发展并对中央视力造成严重的损害。湿性黄斑变性和干性 黄斑变性可以具有相同的症状。然而，非年龄相关的黄斑变性不常见且可能与遗传、糖尿 病、营养缺乏、损伤、感染或其他因素有关。非年龄相关性黄斑变性的病症还包括但不限于 斜视、中央视力失真、光线失真或黑暗失真和/或色彩感觉改变。
[0235] 在一个实施方式中，将芳香族阳离子肽给药至一对象以治疗或预防脉络膜新生血 管。脉络膜新生血管（CNV)是特征为在眼睛的脉络膜层中形成新血管的疾病。新生成的血 管穿过布鲁赫膜（Bruch membrane)在脉络膜中生长并侵入视网膜下腔。CNV可以导致视力 损失或视力完全失去。CNV的症状包括但不限于看到闪动的、忽明忽暗的光或者在受影响的 一只眼睛或双眼中有灰斑、视力模糊、斜视和/或视力丧失。
[0236] 在一个实施方式中，将芳香族阳离子肽给药至一对象以治疗或预防视网膜变性。 视网膜变性是与视网膜损坏有关的遗传疾病。视网膜组织可以出于各种原因变性，比如动 脉或静脉阻塞、糖尿病性视网膜病变、早产儿视网膜病变和/或晶状体后纤维增生。视网膜 变性通常包括视网膜劈裂、格子样变性，并且与进行性黄斑变性有关。视网膜变性的症状包 括但不限于视力下降、视力丧失、夜盲症、视野狭窄、周边视觉丧失、视网膜脱落和/或光敏 感性问题。
[0237] 在一个实施方式中，将芳香族阳离子肽给药至一对象以治疗或预防氧诱导视网 膜病变。氧诱导视网膜病变（0IR)是特征为微血管变性的疾病。0IR是用于研究早产儿 视网膜病变而建立的模型。0IR与最终为不正常血管新生的血管细胞损伤有关。微血管 变性导致局部缺血，局部缺血导致造成与0IR相关的物理变化。氧化应急同样在内皮细 胞易于过氧化损伤的0IR的血管堵塞中发挥重要作用。然而，周细胞，平滑肌细胞和血管 周围的星形胶质细胞通常抗过氧化损伤。如参见：Beauchamp等，Role of thromboxane in retinal microvascular degeneration in oxygen-induced retinopathy,J Appl Physiol. 90:2279-2288(2001) ^ 0IR，包括早产儿视网膜病变，通常无症状。但是非正常眼 运动、斗鸡眼、严重近视和/或白瞳孔可以为0IR或早产儿视网膜病变的征兆。
[0238] 在一个方面中，本发明提供了一种用于通过将芳香族阳离子肽给药至对象来预防 该对象中的眼科病症的方法，所述芳香族阳离子肽调节眼科病症的一种或多种症状或标 记。有患眼睛病症风险的对象可以由例如本文描述的诊断分析或预后分析中的任一个或 者组合来识别。在预防性应用中，芳香族阳离子肽的药物组合物或药物制剂以足以消除或 降低疾病的危险、减轻疾病的严重程度或者延迟疾病发病的量给药至易患疾病或病症或者 处于疾病或病症的危险中的对象，疾病包括疾病的生物化学的、组织学的、和/或行为的症 候、该疾病的并发症和该疾病发展期间的中间病理表型。将预防性的芳香族阳离子肽进行 给药可以发生在异常的症状特点表现出来之前，使得疾病或失调得到预防，或者选择性地 其发展得到延迟。取决于异常的种类，例如，起到增强或提高线粒体功能或者降低氧化损伤 的作用的芳香族阳离子肽可以用于治疗对象。适当的化合物可以基于本文描述的筛选试验 确定。
[0239] 确定基于芳香族阳离子肽的治疗药物的生物效果。在各种实施方式中，进行合适 的体外测定或体内测定来确定基于特定的芳香族阳离子肽的治疗药物的效果以及其给药 是否适于治疗。在各种实施方式中，可以对对象的病症所涉及的典型细胞类型进行体外测 定，以确定给定的基于芳香族阳离子肽的治疗药物是否对所述细胞类型产生了期望的效 果。在对人类对象进行测试之前，可以在合适的动物模型系统中测试治疗中所用的化合物， 所述动物模型系统包括但不限于大鼠、小鼠、鸡、牛、猴、兔等。类似地，对于体内测试，将给 药至人类对象之前，可以使用本领域已知的任一动物模型系统。在一个实施方式中，将芳香 族阳离子肽给药至表现出与眼科病症相关的症状的对象将引起这些症状中的一种或多种 症状得到改善。
[0240] 给药樽式和有效剂量
[0241] 可以使用本领域的技术人员所知的任何方法来将细胞、器官或组织与肽接触。适 当的方法包括体外法、间接体内法或体内法。体内法通常包括将芳香族阳离子肽（比如上 文描述的芳香族阳离子肽）给药至哺乳动物、优选地给药至人。当用在体内以治疗时，芳香 族阳离子肽可以以有效的量（即具有期望的治疗效果的量）给药至对象。剂量和给药方案 将取决于对象中的眼科病症的程度、使用的特定的芳香族阳离子肽的性质（例如其治疗指 数）、该对象以及该对象的病史。
[0242] 可以在临床前试验和临床试验期间利用内科医生和临床医生熟悉的方法来测定 有效量。在本发明的方法中有用的、优选地在药物组合物中有用的肽的有效量可以通过用 于给药药物组合物的多种已知方法中的任一方法来给药至需要该肽的哺乳动物。在一些实 施方式中，肽可以以全身给药、局部给药或眼内给药。
[0243] 本文描述的芳香族阳离子肽可以单独地或组合地加入到药物组合物以给药至对 象来治疗或预防本文中描述的疾病。所述组合物通常包括活性剂和药学上可接受的载体。 本文中使用的术语"药学上可接受的载体"包括与给药药物可配伍的生理盐水、溶剂、分散 介质、涂层、抗菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延缓剂等。辅助性的活性化合物也可以加入 到所述组合物中。
[0244] 通常将药物组合物制备成与其计划给药途径相符。给药途径的示例包括肠胃外 (例如，静脉内、皮内、腹腔或皮下）、口服、吸入、经皮肤（局部）、眼内、离子渗入和经粘膜透 过给药。用于肠胃外、皮内或皮下的溶液或悬浮液可以包括以下成分：诸如注射用水的消毒 稀释液、生理盐水、不挥发油、聚乙二醇、丙三醇、丙二醇或其它合成溶剂；抗菌剂，比如苯甲 醇或对羟基苯甲酸甲酯；抗氧化剂，比如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；络合剂，比如乙二胺四乙 酸；缓冲液，比如醋酸盐、柠檬酸盐和磷酸盐；以及用于调节渗透压的试剂，比如氯化钠或 右旋糖。可以用酸或碱来调节pH，比如盐酸或氢氧化钠。肠胃外制剂可以装在玻璃或塑料 制的安瓿瓶、一次性注射器或多剂量瓶中。为了患者或治疗医师的方便，可以以包括治疗过 程所需的所有用具（例如，药瓶、稀释液瓶、注射器和针头）的试剂盒的形式提供剂量制剂。
[0245] 适于注射用途的药物组合物可以包括无菌水溶液（在水溶性的情况下）或者用于 临时制备无菌注射液或分散液的分散剂或无菌粉末。为了静脉注射，合适的载体包括生理 盐水、抑菌水、Cremophor EL?(BASF，帕西波尼，N. J.)或磷酸盐缓冲盐水（PBS)。在所有情 况下，用于肠胃外给药的组合物必须无菌且应当是达到易于注射的程度的的液体。用于肠 胃外给药的组合物在制造和存储条件下应当稳定且必须被保存同时防止微生物（例如细 菌和真菌）的污染行为。
[0246] 所述芳香族阳离子肽组合物可以包括载体，该载体可以是包括诸如水、乙醇、多元 醇（例如，丙三醇、丙二醇以及液态聚乙二醇等）及其合适的组合物的溶剂或分散介