一种芋头花提取物及其制备方法和医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明设及中药提取物领域，具体设及一种免疫增强作用的芋头花提取物及其制 备方法，该提取物可W应用于制备增强免疫的药物。
【背景技术】
[0002] 芋头花为天南星科植物芋的花序。又名芋苗花。花开时采收，鲜用或晒干。
[0003] 原植物芋为湿生草本。根茎卵形，常生多数小球茎，褐色，具纤毛。叶基生，2-3枚 或更多，叶柄肉质，长20-90畑1，绿色，基部呈銷状；叶片卵状广楠圆形，长20-50畑1，质厚， 盾状着生，先端短而锐尖，基部耳形，耳片纯头，全缘，呈波状。花序柄常单生，短于叶柄；佛 焰巷长短不一，一般为长20cm左右；管部绿色，长约4畑1，粗2. 2畑1，长卵形；檐部披针形或 楠圆形，长约17畑1，展开成舟状，边缘内郑，淡黄色至绿白色；肉穗花序长约10cm，短于佛 焰巷；雌花序位于下部，长3-3. 5畑1，中性花序位于中部，长3-3. 3畑1，雄花序位于上部，长 4-4. 5cm，先端骤狭，附属器钻形，长约1cm。期期2-8月。我国南方及华北各地均有栽培。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种芋头花提取物，其制备方法和液相分析方法，含有该 提取物的药物制剂及利用该提取物制备增强免疫的药物的用途。
[0005] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得W实现的：
[0006] -种芋头花提取物，该提取物由W下方法制备：(a)W重量计，每100份药材包含 干燥的芋头花75~85份和干燥的甘草15~25份，混合粉碎，用乙醇热回流提取，合并提取 液，浓缩至无醇味；化）将步骤（a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释，依次用石油酸、乙酸乙醋 和水饱和的正下醇萃取，分别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；（C)正 下醇萃取物用大孔树脂富集，先用5~15 %乙醇冲洗8~12个柱体积除去多糖，再用65~ 75%乙醇洗脱7~9个柱体积，收集65~75%洗脱液，减压浓缩，喷雾干燥。
[0007] 进一步地，步骤（a)中所述用乙醇热回流提取所采用的乙醇浓度为85~95%。
[0008] 进一步地，步骤（a)中所述用乙醇热回流提取所采用的乙醇浓度为90 %。
[0009] 进一步地，步骤（C)中所述大孔树脂为AB-8型大孔树脂。
[0010]进一步地，步骤（C)为：正下醇萃取物用AB-8型大孔树脂富集，先用10%乙醇冲 洗10个柱体积除去多糖，再用70%乙醇洗脱8个柱体积，收集70 %洗脱液，减压浓缩，喷雾 干燥。
[0011] 为了能够通过建立HPLC指纹图谱的方法控制不同批次制备的提取物的批间差 异，所述提取物的液相分析方法为：
[0012] 色谱柱：AgilentTCC18 柱（4. 6mmX250mm，5ym);
[001引流动相：A为乙腊，B为0. 1 %甲酸溶液（S乙胺调节抑值至6. 0);
[0014] 梯度洗脱程序：0~4min，A35%;4~14min，A35%-70%;14~16min，A70% 一 35% ;16 ~20min，A35% ;
[001引流动相流速：1. 0血?min1;
[0016] 检测波长：267nm;柱溫：30°C;
[0017]进样量 10yL。
[0018] 药物制剂，含有治疗有效量的所述提取物和药学上可接受的载体。
[0019] 所述的提取物在制备增强免疫的药物中的应用。
[0020] 所述的药物制剂在制备增强免疫的药物中的应用。
[0021] 本发明提取物用作药物时，可W直接使用，或者W药物制剂的形式使用。
[0022] 所述药物制剂含有治疗有效量的本发明芋头花提取物，其余为药物学上可接受 的、对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0023] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 W及药物制品辅剂。将本发明的药物制剂W单位体重服用量的形式使用。本发明提取物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等；用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
[0024] 本发明的优点：本发明通过对干燥的芋头花和甘草进行提取、除杂、富集处理，能 得到具有增强免疫的提取物；本发明提供的液相分析方法可W用于建立该提取物的指纹图 谱，用于控制不同批次制备的提取物的批间差异。
【附图说明】
[0025] 图1为芋头花提取物HPLC液相图谱。
【具体实施方式】
[0026] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不W此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可W对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0027] 实施例1 :芋头花提取物①制备（80份芋头花，20份甘草）
[002引药材来源：甘草购自安徽毫州中药材市场。芋头花为天南星科植物芋的花序，采摘 晒干。
[0029] 主要试剂：食品级乙醇购自上海凌峰化学试剂有限公司；AB-8型大孔树脂购自天 津波鸿树脂有限公司；乙腊为HPLC级，购于TEDIA;甲酸为HPLC级，购于TEDIA;色谱用纯 净水为哇哈哈纯净水。
[0030] 制备方法：将8. 0kg干燥芋头花和2. 0kg干燥甘草混合粉碎，用90 %乙醇热回流 提取3次，每次提取2小时，每次用95%乙醇25以合并提取液，浓缩至无醇味（化）；浓缩液 依次用石油酸（化X3次）、乙酸乙醋（化X3次）和水饱和的正下醇（化X3次）萃取，分 别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；正下醇萃取物用AB-8大孔树脂富 集，先用10%乙醇冲洗10个柱体积除去多糖，再用70%乙醇洗脱8个柱体积，收集70%洗 脱液，减压浓缩，喷雾干燥（约225g)。
[0031] 实施例2:芋头花提取物②制备（75份芋头花，25份甘草）
[0032] 制备方法：将7. 5kg干燥芋头花和2. 5kg干燥甘草混合粉碎，用90 %乙醇热回流 提取3次，每次提取2小时，每次用95%乙醇25以合并提取液，浓缩至无醇味（化）；浓缩液 依次用石油酸（化X3次）、乙酸乙醋（化X3次）和水饱和的正下醇（化X3次）萃取，分 别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；正下醇萃取物用AB-8大孔树脂富 集，先用10%乙醇冲洗10个柱体积除去多糖，再用70%乙醇洗脱8个柱体积，收集70%洗 脱液，减压浓缩，喷雾干燥（约225g)。
[0033] 实施例3 :芋头花提取物③制备（85份芋头花，15份甘草）
[0034] 制备方法：将8. 5kg干燥芋头花和1. 5kg干燥甘草混合粉碎，用90 %乙醇热回流 提取3次，每次提取2小时，每次用95%乙醇25以合并提取液，浓缩至无醇味（化）；浓缩液 依次用石油酸（化X3次）、乙酸乙醋（化X3次）和水饱和的正下醇（化X3次）萃取，分 别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；正下醇萃取物用AB-8大孔树脂富 集，先用10%乙醇冲洗10个柱体积除去多糖，再用70%乙醇洗脱8个柱体积，收集70 %洗 脱液，减压浓缩，喷雾干燥（约225g)。
[0035] 实施例4 :芋头花提取物④制备（90份芋头花，10份甘草）
[0036] 制备方法：将9. 0kg干燥芋头花和1. 0kg干燥甘草混合粉碎，用90 %乙醇热回流 提取3次，每次提取2小时，每次用95%乙醇25以合并提取液，浓缩至无醇味（化）；浓缩液 依次用石油酸（化X3次）、乙酸乙醋（化X3次）和水饱和的正下醇（化X3次）萃取，分 别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；正下醇萃取物用AB-8大孔树脂富 集，先用10%乙醇冲洗10个柱体积除去多糖，再用70%乙醇洗脱8个柱体积，收集70%洗 脱液，减压浓缩，喷雾干燥（约225g)。
[0037] 实施例5 :芋头花提取物⑥制备（70份芋头花，30份甘草）
[0038] 制备方法：将7. 0kg干燥芋头花和3. 0kg干燥甘草混合粉碎，用90 %乙醇热回流 提取3次，每次提取2小时，每次用95%乙醇25以合并提取液，浓缩至无醇味（化）；浓缩液 依次用石油酸（化X3次）、乙酸乙醋（化X3次）和水饱和的正下醇（化X3次）萃取，分 别得到石油酸萃取物、乙酸乙醋萃取物和正下醇萃取物；正下醇萃取物用AB-8大孔树脂富 集，先用10%乙醇冲洗10个柱体积除去多糖，再用70%乙醇洗脱8个柱体积，收集70 %洗 脱液，减压浓缩，喷雾干燥（约225g)。
[003引实施例6 :液相色谱分析
[0040] 供试品溶液配制：取实施例1方法制得的提取物5mg至50mL栋色容量瓶中，加 30mL10 %乙腊水溶液超声溶解，冷却至室溫后，继续加10 %乙腊水溶液定容。分析方法如 下：
[0041] 高效液相色谱仪：Agilent1260,二元累；
[0042] 色谱柱：AgilentTCC18 柱（4. 6mmX250mm，5ym);
[004引流动相：A为乙腊，B为0. 1 %甲酸溶液（S乙胺调节抑值至6. 0);
[0044] 梯度洗脱程序：0~4min，A35%;4~14min，A35%-70%;14~16min，A70% 一 35% ;16 ~20min，A35% ;
[004引 流动相流速：1. 0血?min1;
[0046] 检测波长：267nm;柱溫：30°C;
[0047] 进样量10化。
[0048] 用制备的10批次的芋头花提取物进行分析，进行色