含有鸟氨酸和/或门冬氨酸的组合物及其应用
【专利说明】含有鸟氨酸和/或门冬氨酸的组合物及其应用
【背景技术】
[0001 ] 高脂血症是一种异源性疾病，表现为机体血液中胆固醇、胆固醇酯、磷脂和甘油三 酯等脂质水平过高，该类脂质以大型脂蛋白方式在血液中转运。高脂血症主要源于糖尿病、 甲状腺疾病、肾脏疾病、肝脏疾病及柯兴综合征等疾病；此外，肥胖、饮酒、使用雌激素和其 它可改变脂代谢的药物也可引起高脂血症；高脂血症也是动脉粥样硬化、心血管疾病例如 冠心病的主要、可调节的风险因素。正常条件下，脂质在血液中随血液流动；假如血液中的 脂质水平太高，过量的脂质可在动脉壁上积累，其中的胆固醇和其它物质进一步堆积形成 斑块，引起动脉腔狭窄，导致动脉粥样硬化或动脉硬化，硬化的动脉反过来又使正常组织变 得更加脆弱。
[0002] 从临床方面讲，治疗高脂血症的药物众多，如HMG-CoA抑制剂（他汀类药物）、尼 克酸、贝特类药物、非诺贝特、非诺贝特粉末、胆酸结合树脂、考来替泊、CETP拮抗剂和胆固 醇吸收抑制剂（例如依泽麦布）。他汀类特别是阿托伐他汀（立普妥）是常规的临床用于 治疗高脂血症的药物，临床研究结果表明，他汀类药物可有效降低患者血液中胆固醇和低 密度脂蛋白水平，然而对于患者血液中甘油三酯的疗效并不明显，降低幅度仅为8~35%。 此外，尽管大多数临床数据证实他汀类药物可降低血液中的脂质水平，但效果并不总是那 么明显，少数临床结果报道他汀类药物甚至可增加甘油三酯水平。在临床上5种不同类型 的高脂血症，分别为I~V型，其中I、III、IV和V型高脂血症患者的血清甘油三酯水平会 增高，而II型高脂血症患者仅出现胆固醇水平增高。临床证据表明，甘油三酯水平的增高 是高脂血症患者的最普遍特征，也是导致心血管疾病特别是冠心病发生的关联性最强的风 险因素。
[0003] 尽管他汀类药物对于治疗高脂血症通常是有效和安全的，但也有临床证据提示， 长期给予阿托伐他汀或其它他汀类药物治疗，特别在高剂量的情况下，可导致横纹肌溶解 和肌肉病变，且这些副作用呈现明显的剂量相关性，可导致患者出现严重的肌肉疼痛和虚 弱症状。
[0004] 此外，有报道表明，与低剂量他汀相比，高剂量的他汀可显著增加患者机体的血糖 水平，进而进一步增加原发性糖尿病的发病风险。FDA发布的药物警告建议降胆固醇药物 (如立普妥）可能增加服药患者的血糖水平进而导致意识障碍。他汀药物的这类副作用可 能导致这种治疗方案的提前终止，从而限制了它在临床方面的应用。
[0005] 鸟氨酸和门冬氨酸可以以盐的形式形成复合物，在本申请文件中命名为"鸟氨 酸-门冬氨酸"或"门冬氨酸鸟氨酸"，两种成分中间的符号代表离子键，其中的一个成 分是另一个成分的反荷离子。门冬氨酸鸟氨酸最初被用于治疗临床上诸如肝性脑病、肝炎、 脂肪肝、黄疸、肝硬化等疾病。在肝硬化阶段，肝代谢紊乱及血流变化可导致血清和中枢神 经系统氨浓度增加。鸟氨酸和门冬氨酸是机体生化通路中重要的氨基酸，具有解氨毒的功 效。由氨代谢紊乱导致毒性氨的积累是肝性脑病的发病机制之一，鸟氨酸和门冬氨酸分别 是将氨代谢成为尿素和谷氨酰胺的基质。与尿素一样，L-鸟氨酸是精氨酸酶催化L-精氨 酸形成的一个产物，补充L-鸟氨酸可延缓个体的疲劳感，改善能量损耗的效能，促进氨的 排泄，具体可见 Sugino 等的报道（Sugino et al. (2008) 〃L_ornithine supplementation attenuates physical fatigue in healthy volunteers by modulating lipid and amino acid metabolism", Nutrition Research 28(11) :738_43)。L_ 鸟氨酸也可以缓解 个体的精神紧张，详见 Kurata 等的报道（Kurata et al. (2011) "Orally administered L-〇rnithine elevates brain L-〇rnithine levels and has an anxiolytic-like effect in mice"，Nutritional Neuroscience 14(6):243-8)〇
【发明内容】
[0006] 如上所述，目前迫切需要研发可有效地降低个体血液中一种或多种高脂血症风险 因素的药物成分和方法。同样，也需要研发可有效降低降脂药物如他汀类药物副作用的药 物。为此，本发明实施了这方面的研究并报道了其优势性。
[0007] 在一个实施例中，本发明提供了 一种方法旨在降低需要帮助的个体的一种或多种 高血脂风险因素，本方法包含给予个体一个有效剂量的含有鸟氨酸和/或门冬氨酸的组合 物， 以有效降低个体的一种或多种高血脂风险因素。
[0008] 在另一个实施例中，本发明提供了一种对于需要帮助个体给予一种降脂药物的方 法，该方法包括将该降脂药的一个有效剂量和将含有鸟氨酸和/或门冬氨酸的组合物的一 个有效剂量同时对个体实施给药。如需要，本配方也可经口给药。本配方可在降脂药给药 前或后实施给药，或者与降脂药同时给药。
[0009] 在另一项实施例中，本发明提供了一种可以降低治疗药物副作用的方法，这里所 指的副作用是指个体服用上述治疗药物后产生的CPK活性水平增加，也包括鸟氨酸和/或 门冬氨酸与上述治疗药物联合给药后产生的副作用（CPK活性增高）。
[0010] 在另一项实施例中，本发明提供了一种可以治疗受试个体横纹肌溶解及肌肉病变 的方法，该方法包括给予个体一种内含鸟氨酸和/或门冬氨酸的化合物组分的一个有效剂 量，该剂量大约低于9g。
[0011] 在本申请文件中提及的任何方法的实践过程中，对个体给药的组合物可能至少包 括形成门冬氨酸鸟氨酸盐的一个分子结构；在另一方面，对个体给药的组合物可能包括鸟 氨酸和本申请文件显示的一个共存阴离子；与之相反，对个体给药的组合物也可能包括门 冬氨酸和本申请文件显示的一个共存阳离子；在某些情况下，该组合物也可能包括鸟氨酸 和/或门冬氨酸的游离态分子；在某些情况下，该组合物也可能包括鸟氨酸和/或门冬氨酸 及其药学可接受的盐。
[0012] -方面，鸟氨酸和/或门冬氨酸的日给药剂量为0. 01g到100g，另一方面，鸟氨酸 和/或门冬氨酸的日给药剂量为〇. 01 g到20g ;有时，鸟氨酸和/或门冬氨酸的日给药剂量 低于9g，然而也有可能低于3g ;在某些情况下，鸟氨酸和/或门冬氨酸的给药剂量并不导致 上述个体的血糖水平增高。
[0013] 某些情况下，使用本申请文件公布的组合物治疗的个体可能患有高脂血症、由高 脂血症诱导的脂肪肝疾病、肥胖、动脉粥样硬化、心血管疾病、横纹肌溶解或肌肉疾病。在某 些情况下，给予如上所述的化合物、降脂药治疗的个体血浆CPK活性水平低于400U/L。
[0014] 本申请文件提供的方法包括将本发明公开的组合物通过以下途径给药：口服、静 脉注射、吸入、鼻腔吹入、动脉注射、皮下给药、粘膜给药或者咽部给药。对受试者给药的持 续时间可能至少为10天，或者至少为1、2、3、4、5、6个月或更长时间。可以将组合物添加在 食物中给药，也可以添加在药物配方中给药。
[0015] 在一些实施例中，本申请文件提供的方法可降低一种或多种高血脂风险因素包括 甘油三酯、低密度脂蛋白和胆固醇。
[0016] 在一些实施例中，本申请文件提供的方法可能减轻由某种降脂药产生的副作用， 包括但不限于上述提及的CPK活性增高、血糖水平增高、横纹肌溶解和肌肉病变等副作用。
[0017] 本发明方法和组合物中提到的降脂药包括但不局限于HMG-CoA抑制剂、尼克酸、 贝特类药物、非诺贝特、胆酸螯合剂、依折麦布、洛美他派、植物固醇、CETP拮抗剂、奥司利他 以及他们之间的联合药物。本发明方法使用的降脂药包括但不局限于HMG-CoA抑制剂，如 阿托伐他汀、氟伐他汀、普伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀或瑞舒伐他汀，以及它们其中的任意 联合用药；降脂药可能是阿托伐他汀/依折麦布的联用。如需要，降脂药可以单剂量的方式 给药，包括但不限于一种片剂、胶囊、丸剂、颗粒剂、乳剂、胶体、采用胶囊封装的玻璃粉、粉 末、悬浮剂、液体、半液体、半固体、糖衆、悬浮液、阻嚼片。
[0018] 本发明也提供了一种组合产品，包括：(a) -种降脂药物，和（b) -种组分，包括有 效剂量的鸟氨酸和/或门冬氨酸。一方面，包含的门冬氨酸和/或鸟氨酸剂量可有效降低 个体血浆中一种或多种高血脂风险因素水平；另一方面，这种组合产品制备成一种剂型。另 一方面，这种组合产品可以被配制成一种固态或液态形式。一方面，制备的组合物可适合于 口服、静脉注射、吸入、鼻腔吹入、动脉注射、皮下给药、粘膜给药或者咽部给药。另一方面， 该组合产品可被制成口服配方。
[0019] -方面，该组合产品可有效降低一种或多种高血脂风险因素包括甘油三酯、低密 度脂蛋白和胆固醇；另一方面，该组合产品并不增加上述个体血浆中的CPK活性水平；该组 合产品因需要可被包装成一种固态或液态剂型包括但不局限于一种片剂、胶囊、丸剂、颗粒 剂、乳剂、胶体、采用胶囊封装的玻璃粉、粉末、悬浮剂、液体、半液体、半固体、糖浆、悬浮液、 咀嚼片。如果需要，成分（a)和成分（b)也可分别包装或混合包装。本申请文件提及的组 分中的降脂药包括HMG-CoA抑制剂、尼克酸、贝特类药物、胆汁酸螯合剂、依折麦布、洛美他 派、植物固醇、CETP拮抗剂、奥利司他，或它们的任意组合。上述提及的HMG-CoA抑制剂数 量众多，包括但不限于阿托伐他汀、氟伐他汀、普伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、瑞舒伐他汀。
[0020] 在某些方面，本申请文件公布的组合物包含一个有效剂量的可有效降低高脂血症 患者的甘油三酯水平的降脂药。
[0021] 在某些方面，本申请文件公开的组合物约含0. 01~100g的鸟氨酸和/或门冬氨 酸、约含〇. 01~20g的鸟氨酸和/或门冬氨酸或约含低于9@、88、78、68、58、48、38、甚至更 低的鸟氨酸和/或门冬氨酸。 引置条款
[0022] 上述所有公开案、专利案及专利申请案以引用的方式全部并入本文中，该引用的 程度就如同已特定地及个别地将各个公开案、专利案或专利申请案之整体揭示内容以引用 的方式并入一般。 附图概述
[0023] 本专利的新颖性特点在附录权利要求书中已被特别公布。为更好地理解本发明的 特色和优点，可参考以下所详细陈述的关于本发明原理的说明性实施例及附图：
【具体实施方式】
[0024] 本发明使用的术语目的在于描述具体的实施例，并非意图限制本发明。除非特别 标示，本文使用的单数格式如"一个"、"这个"也包括相关的复数形式。除此之外，在一定程 度上，说明书和（或）权利要求书内提到的术语"包括"、"包含"、"具有"、"与或和"或者诸 如此类的其它表述，在某种程度上类似于术语"包括"。
[0025] 在本领域，术语"大约"、"接近于"的含义是指被采用本领域一项常规技术测定特 定值时一个合理的可接受的误差范围，这一定程度上依赖于该数值是如何被测量或测定， 诸如测量系统的局限性等。例如，"大约"可译为本领域每次实践的一个或更多个标准偏差， 也可以为某一给定值的20%、10%、5%或1%上限；涉及生物学系统或进程时，本术语也指 和某一给定值在一个数量级内，如为给定值的5倍以内，更优为给定值的2倍之内。除非另 有说明，本发明说明书和权利要求书中的"大约"指某一给定值的合理的误差范围。
[0026] 本专利出现的"疗法"、"治疗"、"减轻"、"缓解"等术语可互换使用，这些术语与采用 一种方法出现的获益或者期望值有关，包括但不局限于疗效获益和（或）预防性获益。疗 效获益包括患者被治愈或者疾病有所缓解，也包括与疾病相关的一个或多个生理学症状的 消失或缓解，尽管病人仍然受疾病折磨。预防获益指的是为防止某一病人患某种疾病而提 前服用本组合物或者病人主诉具有某一疾病的生理学症状但该疾病尚未被临床医生诊断 时服用本组合物。
[0027] 本发明使用的"药剂"代表一种生物学、制药学、化学化合物或者它的一部分结构。 包括但不局限于单一或复合有机或无机分子、肽段、蛋白、寡核苷酸、抗体、抗体衍生物、抗 体片段、维生素衍生物、碳水化合物、毒素、化学治疗化合物。大多数化合物能够通过合成得 到，例如小分子和低聚物（低聚肽段、低聚核苷酸）、基于各种母核结构合成的有机化合物 等。此外，很多天然资源也可以用于这些化合物的筛选，例如植物或动物的提取物等。本领 域技术人员也公知这些获得方式不会对本发明中这些药剂的性质带来本质的影响。
[0028] 总体上，术语"同时给药"、"协同给药"、或者"与….同时给药"表示给予两种或以 上药物到一个个体体内，如化合物、试剂、物质、材料、合成物等等，与给药的使用剂量、时间 间隔（如同时给药至一个个体体内）、在个体体内的作用部位、可接受的超时范围有关。时 间间隔可以是任何合适的时间段，例如分钟、小时、天或周等时间范围。对个体给药时药物 可以共同作为一个药剂的一部分一起给药，或以其他方式共同给药。给药时间可以大体上 一致（例如给药间隔小于或等于5min，大约3分钟或大约1分钟）或在短期内给药（例如 小于或等于lh、30min、10min或者大约5min至lh)，均可理解为相同时间同时给药。本领 域的普通技术人员可根据掌握的公知常识确定适宜的剂量、时间间隔将药物给予于个体体 内，保证药物超于个体体内的最低水平和（或）个体体内的有效浓度。当对个体实施同时 给药时，任何一种药物都处于给药的有效量范围内，但这一有效量可能低于单独给药时使 用的有效量。
[0029] 本发明使用的"有效量"包括较小有效量和常规有效量和能引起一种特定条件 (影响和/或反应）的任意有效剂量。例如，当某一药物协同给药于某一个体时，其使用剂 量可能低于该药单独给药时应使用的剂量，而某一药物对某一个体或群体的一个或多个效 应也可能是累积的或叠加的，此外，个体或群体也有可能被多次给药。依赖预期用途（体外 或体内研究）、个体与疾病发病条件如个体的年龄和体重、疾病的严重程度、给药的方式以 及在实施例中易于被普通技术人员测定的其它有关因素，有效量也可能是多样化的。本术 语也适用于在靶细胞中引起某一具体反应的一个剂量，例如它改善了细胞的增生或者促进 了靶蛋白活性的下调。受候选化合物的类型、研究设计中将要实施的给药剂量、是否联合联 合用药、给药时间、靶组织、载药的物理传递系统的影响，具体剂量可能有所变化。
[0030] 本发明中的术语"药理学可接受的盐"指的是本发明中提到的大量已知的有机和 无机平衡离子所产生的盐。药理学可接受的酸添加盐可以通过无机酸和有机酸成盐实现， 可成盐的无机酸包括盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等等，可成盐的有机酸包括醋酸、丙酸、 羟基乙酸、丙酮酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、苯丙烯 酸、苯基乙醇酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。药理学可接受的碱添加盐可以通 过无机碱和有机碱成盐实现，可成盐的无机碱包括钠、钾、锂、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰、铝 等，可成盐的有机碱包括伯胺、仲胺、叔胺、取代胺包括自然形成的取代胺、循环胺、碱离子 交换树脂及类似物，特别包括诸如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺和乙醇胺。在一 些具体实例中，药理学可接受的碱添加盐可以从铵、钾、钠、钙、镁盐中选择。
[0031 ] "药理学可接受的载体"或"药理学可接受的赋形剂"包括全部溶剂、分散介质、涂 覆剂、抗细菌及真菌剂、等压和吸收延迟剂及类似物。这些介质和试剂作为药理学活性物质 的使用方法是本领域公知的。本发明提供的在治疗成分中使用的介质或试剂是可以预计 的，但与活性成分不相容者除外。附加的活性成分也本专利组合产品的一部分。
[0032] 正如以前提到的，本发明涉及的抗高血脂药例如他汀类药物可能无法安全、有效 地降低能预示高血脂风险的血清标志物浓度，例如甘油三酯、胆固醇和LDL水平。本发明涉 及的血清标志物浓度也包括其它体液的标志物如血浆、血流浓度。因此，可安全、有效地降 低甘油三酯、胆固醇和（或）低密度脂蛋白水平的药物成分或方法需要临床进行确证。同 时，临床也需要降低抗高血脂药物（如他汀类）的不良反应和降低血清CPK的水平。本专 利提供的包括鸟氨酸和/或门冬氨酸的组合产品可解决相应需求。本专利提供的组合产品 和方法也可以用于降低血流中高血脂风险因子水平。有时候，医学领域中常用的有效量的 治疗药物如降脂药可以与该个体组分协同给药，本发明组合物和方法也可以用于减小治疗 药物（如他汀类）的副作用和降低血清CPK水平。本专利从各个方面、特性、具体特征以及 实施例方面对此进行了描述。
[0033] 本发明中公布了包括鸟氨酸和/或门冬氨酸的组合产品以及使用这一组合产品 的方法。本产品可有效降低个体血清中一个或多个高血脂风险因子（如甘油三酯、低密度 脂蛋白、胆固醇）水平。在某些情况下，本产品也可增加高密度脂蛋白水平。在某些情况下， 本产品也可有效降低某种治疗药物的副作用，例如降低CPK活性水平。在某些情况下，本产 品对与血清活性CPK水平升高相关的病症的有效。本方法和产品可能包括鸟氨酸但不包括 门冬氨酸，本方法和产品也有可能包括门冬氨酸而不包括鸟氨酸，本方法和产品也可能包 括门冬氨酸和鸟氨酸单体而不是复合物。
[0034] 本专利的产品可能包括鸟氨酸，鸟氨酸可能与一个平衡阳离子形成复合物。平衡 阳离子可以是本发明列举的任何阳离子。阳离子包括但不限于门冬氨酸、谷氨酸、氯化物、 硫酸盐、磷酸盐、碳酸盐、醋酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐。门冬氨酸在哺乳动物中并非必需氨基 酸，可由草酰乙酸转氨基生成，也可以由尿素循环中的鸟氨酸和瓜氨酸合成。门冬氨酸能被 用于预防疲劳和肝脏紊乱。门冬氨酸是一种羧酸阴离子、盐或者天门冬氨酸酯。本专利发 明的个体产品可能包括门冬氨酸，门冬氨酸可以与平衡阴离子相复合，平衡阴离子可以是 本发明指出的任何阴离子，包括但不限于精氨酸、半胱氨酸、谷氨酸盐、甘氨酸、丝氨酸、钠、 钙、镁和钾。鸟氨酸平衡阳离子和（或）门冬氨酸平衡阴离子可以是盐的形式。
[0035] 本专利公布的适合个体给药的一个组分可能包括至少由一个鸟氨酸组成的成分 和（或）由门冬氨酸组成的成分，这种成分可能是任何适宜的鸟氨酸和/或门冬氨酸组成 的成分，例如一种适宜的具有生物效应的鸟氨酸和/或门冬氨酸组成成分；这种成分也可 以是任意适宜的生物学上可接受的鸟氨酸和/或门冬氨酸组成的成分；这种成分也可以是 适宜的有机酸盐；这种成分也可以是一个氨基酸的鸟氨酸和/或门冬氨酸盐。
[0036] 在一个实施例中，本专利公开的化合物至少包括一个鸟氨酸和/或门冬氨酸平衡 离子复合物。在另一些实施例中，本发明公开的化合物包括2, 3, 4, 5或更多个鸟氨酸和/ 或门冬氨酸平衡离子化合物。在另一些实施例中，平衡离子对可能会以有机形式存在。在 一些实施例中，有机态的平衡离子可能存在1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或者更多个碳原子。
[0037] 本专利公开的方法或组合产品可以包括鸟氨酸与门冬氨酸彼此复合形成的以盐 的形式存在的门冬氨酸鸟氨酸复合物。符号代表两个实体复合在一起成盐的离子键。一 项发明专利（Marum〇，US3360549)公布的方法可使鸟氨酸和门冬氨酸形成复合物。一项报 道证实门冬氨酸鸟氨酸盐已被用于治疗肝硬化（Sikorska et al. (2010) "Physiological functions of L-〇rnithine and L-aspartate in the body and the efficacy of administration of L-〇rnithine-L_aspartate in conditions of relative deficiency 〃，PolskiMerkuriuszLekarski 28(168) :490-5) D尿素循环是一个代谢通路，可通过将氨转 换为中性物质-尿素以达到消除氨的作用，而门冬氨酸鸟氨酸复合物可通过尿素循环增加 尿素的生成。如果单独作用对症状控制无效，门冬氨酸鸟氨酸还可与乳果糖、利福昔明联合 用药。正如本发明所述，门冬氨酸鸟氨酸的化合物和制备方法可用于降低一个或多个血清 高血脂风险因素例如脂蛋白和（或）脂质（如甘油三酯）、减小治疗药物的不良反应（如抗 高血脂药物，他汀类）或降低血清CPK水平。
[0038] 适用于治疗高血脂或与高血脂有关的一种疾病条件的组合物可能包含鸟氨