上交感神经节IRS1表达升高。实验分组：正常对照组、糖尿病模型组、糖尿病模型+长非编 码核糖核酸N0NRATT021972小干扰RNA组和糖尿病模型+乱序的小干扰RNA阴性对照组；
[0021] 图6为本发明实时定量PCR检测颈上交感神经节长非编码核糖核酸 N0NRATT021972的表达变化图。糖尿病模型组大鼠颈上交感神经节长非编码核糖核酸 N0NRATT021972表达明显高于正常对照组，长非编码核糖核酸N0NRATT021972小干扰RNA 处理后模型大鼠的颈上交感神经节长非编码核糖核酸N0NRATT021972表达降低。实验分 组：正常对照组、糖尿病模型组、糖尿病模型+长非编码核糖核酸N0NRATT021972小干扰 RNA组和糖尿病模型组+乱序的小干扰RNA阴性对照组；其中、〈0. 01表示和正常组比较， ##p〈0. 01表示与糖尿病模型组比较。
[0022] 图7为本发明实时定量PCR检测颈上交感神经节Pannexin-Ι的mRNA表达变化 图。糖尿病模型组大鼠颈上交感神经节Pannexin-Ι的mRNA表达明显高于正常对照组，长非 编码核糖核酸N0NRATT021972小干扰RNA处理后模型大鼠的颈上交感神经节Pannexin-1 的mRNA表达降低。实验分组：正常对照组、糖尿病模型组、糖尿病模型+长非编码核糖核酸 N0NRATT021972小干扰RNA组和糖尿病模型+乱序的小干扰RNA阴性对照组；其中wp〈0. 01 表示和正常组比较，##P〈〇. 01表示与糖尿病模型组比较。
[0023] 图8为本发明实时定量PCR检测颈上交感神经节IRS1的mRNA表达变化图。糖尿 病模型组大鼠颈上交感神经节IRS1的mRNA表达明显高于正常对照组，长非编码核糖核酸 N0NRATT021972小干扰RNA处理后模型大鼠的颈上交感神经节IRS1的mRNA表达降低。实 验分组：正常对照组、糖尿病模型组、糖尿病模型+长非编码核糖核酸N0NRATT021972小干 扰RNA组和糖尿病模型+乱序的小干扰RNA阴性对照组；其中、〈0. 01表示和正常组比较， ##p〈0. 01表示与糖尿病模型组比较。
[0024] 图9为本发明蛋白印迹技术检测颈上交感神经节Pannexin-Ι蛋白表达变化图。 糖尿病模型组大鼠颈上交感神经节Pannexin-Ι蛋白表达明显高于正常对照组，长非编 码核糖核酸N0NRATT021972小干扰RNA处理后模型大鼠的颈上交感神经节Pannexin-1 蛋白表达降低。实验分组：正常对照组、糖尿病模型组、糖尿病模型+长非编码核糖核酸 N0NRATT021972小干扰RNA组和糖尿病模型+乱序的小干扰RNA阴性对照组；图9 (a)为蛋 白印迹实验结果图，图9(b)为实验数据分析比较柱状图，其中#p〈0. 01表示和正常组比较， ##p〈0. 01表示与糖尿病模型组比较。
[0025] 图10为本发明蛋白印迹技术检测颈上交感神经节IRS1及p-IRSser302蛋白表 达变化图。糖尿病模型组大鼠颈上交感神经节IRS1蛋白表达明显低于正常对照组，长非 编码核糖核酸N0NRATT021972小干扰RNA处理后模型大鼠的颈上交感神经节IRS1蛋白表 达升高。糖尿病模型组大鼠颈上交感神经节P-IRSser302蛋白表达明显高于正常对照组， 长非编码核糖核酸N0NRATT021972小干扰RNA处理后模型大鼠的颈上交感神经节p-IRS Ser302蛋白表达降低。实验分组：正常对照组、糖尿病模型组、糖尿病模型+长非编码核糖 核酸N0NRATT021972小干扰RNA组和糖尿病模型+乱序的小干扰RNA阴性对照组；图10 (a) 为蛋白印迹实验结果图，图10(b)为实验数据分析比较柱状图，其中#p〈0. 01表示和正常组 比较，其中#P〈〇. 01表示和正常组比较，##P〈〇. 01表示与糖尿病模型组比较。
【具体实施方式】
[0026] 下面结合实施例并对照附图对本发明作进一步详细说明。
[0027] 实施例1。
[0028] 用本技术领域公知的方法，制成适用于糖尿病并发心脏自主神经疾病治疗的口服 或注射的长非编码核糖核酸N0NRATT021972小干扰RNA制剂。
[0029] 实施例2。
[0030] 用本技术领域公知的方法，制成适用于涉及交感神经相关疾病治疗的口服或注射 的长非编码核糖核酸N0NRATT021972小干扰RNA制剂。
[0031] 实施例3。
[0032] 用本技术领域公知的方法，制成适用于涉及Pannexin-Ι功能异常介导疾病治疗 的口服或注射的长非编码核糖核酸N0NRATT021972小干扰RNA制剂。
[0033] 实施例4。
[0034] 用本技术领域公知的方法，制成适用于涉及IRS1功能异常介导疾病治疗的口服 或注射的长非编码核糖核酸N0NRATT021972小干扰RNA制剂。
[0035] 总之，长非编码核糖核酸N0NRATT021972小干扰核糖核酸以口服、注射、含片或其 它局部或全身用药剂型药物进行上述疾病防治。
[0036] 为了更好地理解本发明的实质，下面以长非编码核糖核酸N0NRATT021972小干扰 核糖核酸对糖尿病并发心交感自主神经疾病治疗作用研究的实验和结果来证明长非编码 核糖核酸N0NRATT021972小干扰核糖核酸的用途。
[0037] -、材料和方法
[0038] 1.建立2型糖尿病大鼠模型。
[0039] SD雄性大鼠（体重180g左右），分笼饲养，每笼饲养7只，温度20_25°C，相对湿度 40% -70%，昼夜明暗交替12h/12h，自由饮水，适应1周后剪尾采血测空腹血糖和餐后2小 时血糖。将大鼠随机分成正常对照组（15只）和模型处理组（60只），正常对照组始终喂养 普通饲料（由南昌大学医学院实验动物科学部提供），模型组喂养高糖高脂饲料（基础饲料 66. 5%，蔗糖20 %，猪油10 %，胆固醇2. 5 %，胆酸钠1 %，加水做成条状放在恒温鼓风干燥 箱中80°C干烤3小时）。第5周末（即模型组喂高糖高脂饲料4周后），所有大鼠剪尾采血 测空腹血糖和餐后2小时血糖。模型组大鼠空腹腹腔注射链脲佐菌素（STZ)30mg/kg(临用 前将STZ溶解于4°C冰箱预冷的pH为4. 2的0.lmol/L柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液中，配制成 2. 5g/L的STZ溶液）。第6周末，空腹血糖< 7. 8mmol/L且餐后2小时血糖< 11.lmmol/L的造模组个体再空腹腹腔注射STZ30mg/kg-次，第7周末测空腹血糖和餐后2小时血糖， 以空腹血糖> 7. 8mmol/L或餐后2小时血糖> 11.lmmol/L确定糖尿病造模成功。
[0040] 2.糖尿病大鼠长非编码核糖核酸N0NRATT021972小干扰RNA实验及动物分组。
[0041] 长非编码核糖核酸N0NRATT021972小干扰RNA(siRNA)序列由 Invitrogen(Carlsbad，CA)公司提供，靶序列为 5' -GAATGTTGGTCATATCAAA-3' ；阴性对照 scrambledsiRNA(乱序小干扰核糖核酸，NCsi)购至Invitrogen(Carlsbad,CA)公司。在 体转染试剂由Entranster?公司提供。根据Entranster?在体转染说明书，实验第7周末 对糖尿病造模成功的大鼠进行长非编码核糖核酸N0NRATT021972-siRNA在体小干扰实验。 320yLsiRNA(长非编码核糖核酸N0NRATT021972si)或阴性对照siRNA(NCsi)溶液通过舌 下静脉注射糖尿病模型大鼠体内，大鼠随机分为正常对照组（control)、糖尿病大鼠模型组 (DM)、糖尿病大鼠模型长非编码核糖核酸N0NRATT021972小干扰RNA处理组（长非编码核 糖核酸N0NRATT021972si)和糖尿病大鼠模型小干扰RNA对照处理组（NCsi)，其中正常对照 组（control)和糖尿病大鼠模型组（DM)舌下静脉注射生理盐水320μL。实验期间，大鼠自 由饮水，除正常对照组外其余各组均以高糖高脂饲料继续喂养1周。分别于第5周末和第 8周末，测量各组大鼠相关指标并取血样，第8周末实验结束后采集标本。
[0042] 3.药物与试剂。
[0043]动物体内转染试剂（Engreen?公司）、长非编码核糖核酸N0NRATT021972-siRNA、 scrambledsiRNA(Invitrogen公司）、β-actin、长非编码核糖核酸N0NRATT021972、 Pannexin-1 和IRS1 引物（GenerayBiotech公司）、兔抗Pannexin-1 抗体（Abeam公司）、 兔抗IRS1 抗体（UpstateBiotechnology公司）、兔抗p_IRSlser302 抗体（Santacruz公 司）、链脲佐菌素（Sigma公司）、大鼠肿瘤坏死因子-α定量酶联检测试剂盒（武汉伊莱瑞 特生物科技有限公司）、大鼠白细胞介素-6定量酶联检测试剂盒（武汉伊莱瑞特生物科技 有限公司）、大鼠去甲肾上腺素酶联检测试剂盒（上海森熊科技实业有限公司）。
[0044] 4.主要仪器。
[0045] 罗康全活力型血糖仪（德国罗氏公司）；Softron智能无创血压计-鼠记测仪 (Gene&I公司）；消毒纱布、手巾、棉签等，碘酒及75%酒精，手术器械包：剪刀、眼科小弯镊、 血管钳、丝线、有齿镊等。
[0046] 5.大鼠血糖的测定。
[0047] 各组大鼠分别于适应1周、第5周末和第8周末剪尾采血，采用罗康全活力型血糖 仪测定禁食12h后的空腹血糖以及禁食12h并按葡萄糖2g/kg剂量灌胃2h后的餐后血糖。
[0048] 6.大鼠血压、心率测定。
[0049] 各组大鼠分别于适应1周、第5周末和第8周末使用BP-2006A智能无创血压计 监测正常对照组（control)、糖尿病大鼠模型组（DM)、糖尿病大鼠模型长非编码核糖核酸 N0NRATT021972小干扰RNA处理组（长非编码核糖核酸N0NRATT021972si)和糖尿病大鼠模 型小干扰RNA对照处理组（NCsi)大鼠血压和心率的变化。在安静的监测室，将清醒状态的 大鼠放入含鼠网的鼠袋中，尾巴置于鼠袋外面，鼠袋温度控制在37°C，待大鼠安静后，加压 感应器套在鼠尾根部三分之一处，启动无创智能血压计，进入监测状态，点击开始键可自动 测量各组大鼠血压和心率的变化。同一大鼠在相同时间内重复测量三次血压和心率，取其 平均值，每次操作由同一人完成。
[0050] 7.大鼠心电图和心率变异性（heartratevariability,HRV)指标的测定。
[0051] 腹腔注射10%水合氯醛（0. 3ml/100g)进行麻醉。麻醉后大鼠取仰卧位，固定于手 术台，心电图电极固定在双上肢和右下肢皮下，前胸备皮、消毒，使用Medlab生物信号采集 处理系统记录标准II导联的心电图。将采集的心电信号用心率变异性分析软件分析，采用 短时程5min频域分析法，取5min心电图作HRV分析。HRV频域分析法有关参数：
[0052] 总频谱（Totalpower，TP):为24小时内NN间期变化的总功率，是功率频度密度 曲线函数在OHz-O. 4Hz范围内的积分值，也就是功率频谱密度曲线在OHz-O. 4Hz范围内与 横轴所夹的面积，单位为ms2。
[0053] 极低频（Verylowfrequency,VLF):是功率谱密度曲线分解成的极低频分量曲线 (中心频率位于〇. 003HZ-0. 04Hz)的积分值，也就是极低频分量曲线与横轴所夹的面积，单 位为ms2。
[0054] 低频（Lowfrequency,LF):为低频分量曲线（中心频率位于0· 04Ηζ-0· 15Hz)的 积分值，也就是低频分量曲线与横轴所夹的面积，单位为ms2。