茴香酸对羟基苯乙酯的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药技术领域，具体涉及茴香酸对羟基苯乙酯的应用。
【背景技术】
[0002] 肾脏是人体的重要器官，用于保证机体内环境的稳定，是新陈代谢得以正常进行。 肾损伤时泌尿外科常见的急症之一，对肾损伤做出适当的治疗方案，对减轻患者的伤情，改 善预后情况至关重要。因此，近年来肾损伤保护药物在不断的研究和开发中。
[0003] 研究发现中药对肾损伤具有明显的保护作用，而且相对于西药来说，中药更加温 和安全，副作用较小。羌活，伞形科、羌活属植物，性温，散表寒；祛风湿；利关节；止痛。主 外感风寒；头痛无汗；风水浮肿；疮疡肿毒。用于阳痿遗精，遗尿尿频，腰膝冷痛，肾虚作喘， 五更泄泻；外用治白癜风，斑秃。解表散寒，祛风胜湿，止痛。羌活中含有多种活性物质，如 凯林内酯、紫花前胡苷元、异虎耳草素、茴香酸对羟基苯乙酯、比克白芷内酯、佛手酚等，这 些活性物质具有多种药用作用。其中，茴香酸对羟基苯乙酯尚未报道其有何具体活性作用。 同时，也未见文献报道茴香酸对羟基苯乙酯具有防止肾损伤的功效。
【发明内容】
[0004] 有鉴于此，本发明的目的在于提供茴香酸对羟基苯乙酯的新应用，茴香酸对羟基 苯乙酯具有防止肾损伤、保护肾损伤细胞的功效，使其能够应用于肾损伤保护药物的制备 中。
[0005] 其中，作为优选，所述肾损伤为顺铂所致肾损伤。
[0006] 茴香酸对羟基苯乙酯获取途径既可以从含有该成分的天然物质如羌活中提取，也 可以利用化学合成方法加以人工合成。作为优选，本发明所述茴香酸对羟基苯乙酯从羌活 中提取获得，更进一步优选地，米取以下方法获得：
[0007] 步骤1、粉碎羌活根茎，加入乙醇溶液提取，提取液过滤、浓缩后加盐酸调节pH为 2,加热回流并浓缩蒸干获得粗提物；
[0008] 步骤2、粗提物加入乙醇溶液复溶，通过大孔树脂柱吸附，依次水洗脱4个柱体积， 40%乙醇洗脱3个柱体积，60%乙醇洗脱6个柱体积，收集60%乙醇洗脱液，除去溶剂，浓缩 至浸膏，然后加入乙酸乙酯溶解、过滤，滤液除去溶剂，浓缩、干燥，获得羌活提取物；
[0009] 步骤3、羌活提取物加甲醇溶解后，加入等量的粗硅胶中搅拌均匀，烘干后倒入到 含4~5倍量的200-300目硅胶柱中；石油醚平衡D-101柱子以后，利用石油醚-乙酸乙酯 50:1、20:1、10:1各洗脱4个柱体积，收集10:1洗脱部位浓缩蒸干，加甲醇溶解后，离心，取 上清液，利用高压制备液相色谱进行制备分离，获得茴香酸对羟基苯乙酯。
[0010] 其中，步骤1所述羌活根茎与乙醇溶液的体积质量比优选为lg:6-10mL。
[0011] 高压制备液相色谱条件优选如下：
[0012] 安捷伦1260型制备色谱仪，色谱柱为Fuji C18 (250 X 50mm);流动相为乙腈-水； 检测波长为310nm ;洗脱程序为0~60min，乙腈30%，水70%;流速为30mL ·π?η %柱温为 30 Γ 〇
[0013] 步骤2所述粗提物加入乙醇溶液复溶优选为粗提物加入羌活根茎总重1倍量的 40%乙醇溶液溶解。
[0014] 述大孔树脂柱优选为D-101型大孔树脂柱。
[0015] 所述大孔树脂柱重量优选为羌活根茎总重的2倍。
[0016] 步骤1所述乙醇溶液的体积百分浓度优选为70%。
[0017] 顺式茴香酸对羟基苯乙酯以及反式茴香酸对羟基苯乙酯在对顺铂所致ΗΚ-2细胞 肾损伤模型的试验中均表现出对正常ΗΚ-2细胞的安全性以及对肾损伤细胞的保护作用。 因此，本发明提供茴香酸对羟基苯乙酯在制备肾损伤保护药物中的应用。
[0018] 由以上技术方案可知，本发明提供了茴香酸对羟基苯乙酯在保护肾损伤细胞中的 应用，从而为临床上防止肾损伤提供多一种安全有效的用药选择。茴香酸对羟基苯乙酯在 安全剂量内能够有效地保护肾损伤细胞，可进一步开发为肾损伤保护药物，具有广泛的应 用前景。
【附图说明】
[0019] 图1所示为羌活提取物高压制备液相色谱图。
【具体实施方式】
[0020] 本发明公开了茴香酸对羟基苯乙酯的应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容， 适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来 说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明所述产品和制备方法以及应用已经 通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
【发明内容】
、精神和范围内对本文 所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
[0021] 以下就本发明所提供的茴香酸对羟基苯乙酯的应用做进一步说明。
[0022] 实施例1 :茴香酸对羟基苯乙酯的提取分离
[0023] 将羌活根茎粉碎成粗粉，按体积/质量加入6~10倍的70%乙醇溶液提取两次， 每次1. 5小时，合并过滤液，浓缩至无醇味后加水至药材重量的1倍；浓缩液加入浓盐酸调 节pH至2,加热回流0. 5个小时，浓缩蒸干，加入药材重量1倍量的40%乙醇溶液使其完全 溶解。水解液通过2倍药材重量的D-101大孔树脂柱（径高比为1:8)吸附后，水洗脱4个 柱体积，40 %乙醇洗脱3个柱体积，60 %乙醇洗脱6个柱体积。60 %乙醇洗脱液合并，回收溶 剂，浓缩至浸膏。浸膏加入乙酸乙酯溶液，使其溶解完全，滤过，回收溶剂，浓缩至浸膏，60°C 真空干燥，粉碎即得羌活提取物。
[0024] 羌活提取物加适量甲醇溶解后，加入等量的粗硅胶（80-100目）中搅拌均匀，烘干 后倒入到含4~5倍量的硅胶（200-300目）柱中。石油醚平衡D-101柱子以后，利用石油 醚-乙酸乙酯50:1、20:1、10:1各洗脱4个柱体积，收集10:1部位浓缩蒸干。石油醚-乙 酸乙酯10:1洗脱部位加甲醇溶解后，离心，取上清液，利用高压制备液相进行制备，收集茴 香酸对羟基苯乙酯色谱峰，浓缩干燥后获得茴香酸对羟基苯乙酯。
[0025] 高压制备液相色谱条件：安捷伦1260型制备色谱仪，色谱柱为Fuji C18(250X50mm);流动相为乙腈（A)-水（B);检测波长为310nm;洗脱程序为0~60min， A30%，B70% ;流速为 30mL · min-1;柱温为 30°C。
[0026] 茴香酸对羟基苯乙酯鉴定结果如下：
[0027] NMR(400MHz, CH30D) δ ： 7. 92 (2H, d, J = 8. 8Hz, H-2, 6), 6. 96 (2H, d, J =8. 8Hz, H-3, 5) , 7. 09 (2H, d, J = 8. 4Hz, H-2 r ,6 r ) , 6. 72 (2H, d, J = 8.4Hz,H-3 ' ,5 ' ) , 4. 40 (2H, t, J = 7. 0Hz, H-2 ) , 2. 94 (2H, t, J = 7.0Hz，H-3 " )，3.84(3H，s，-0Me