专利名称：咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯在制备抗肿瘤药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明属医药领域，涉及中药肿节风活性物质咖啡酸3，4_ 二羟基苯乙酯(CADPE)在制备治疗骨髓瘤、食道癌和五官科肿瘤药物中的应用，更具体的说由咖啡酸3，4- 二羟基苯乙酯或其衍生物单独或与其它植物提取物、化合物或/和药物混合制成的各种药物制剂在治疗骨髓瘤、食道癌和五官科肿瘤的应用。
背景技术：
中药肿节风为金粟兰科草珊瑚属植物干燥全草，又名草珊瑚、九节茶、接骨木、驳骨茶、骨消风等。近代用于癌症辅助治疗，对多种恶性肿瘤如胃癌、胰腺癌、肝癌、食道癌、直肠癌等均有疗效。《中国药典》2000年版和2005年版收载了肿节风片、血康口服液、草珊瑚含片3个制剂。肿节风片(肿节风浸膏制成)用于肺炎、阑尾炎、蜂窝组织炎，并可用于癌·症辅助治疗。《卫生部药品标准》收载了肿节风注射液制剂。肿节风注射液用于肺炎、阑尾炎、蜂窝组织炎，癌症辅助治疗。我们之前研究证明，从肿节风分离得到的咖啡酸3，4_ 二羟基苯乙酯对胃癌、肝癌、肠癌、胰腺癌、妇科肿瘤、前列腺癌、脑瘤、黑色素瘤和白血病均有显著抗肿瘤作用。骨髓瘤，又称多发性骨髓瘤，是一种骨髓癌，会影响红细胞、白细胞和干细胞的再造。骨髓瘤是仅次于白血病的第二大血癌，全球的骨髓瘤患者约有75万人。在工业化的国家，骨髓瘤患者正日益增多并且正在影响着越来越多的年轻人。五官科肿瘤特别是鼻咽癌我国发病率较世界其他国家高。食管癌是常见的恶性肿瘤之一，分布于世界各地，而且不同的国家与地区其发病率不一。我国是食管癌的高发区，河南省最高，其次为江苏、山西、河北、福建、陕西、安徽、湖南、新疆等省、自治区的部分地区。河南林州县35飞4岁男性食管癌发病率为478. 87/10万。我们之前研究未涉及到CADPE对骨髓瘤、食道癌和五官科肿瘤的抗肿瘤活性。
发明内容
本发明的目的是提供一种咖啡酸3，4- 二羟基苯乙酯在制备抗肿瘤药物中的应用，所述肿瘤为骨髓瘤、食道癌和五官科肿瘤，骨髓瘤包括单发性和多发性骨髓瘤，五官科肿瘤包括口腔癌和鼻癌；所述的咖啡酸3，4_ 二羟基苯乙酯可来源于肿节风和其它植物、也可通过人工合成制备。咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯化学结构为67I'
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本发明提供的咖啡酸3，4- 二羟基苯乙酯的前药或咖啡酸3，4- 二羟基苯乙酯的药学上可以接受的盐在制备抗骨髓瘤、食道癌和五官科肿瘤药物中的应用，所述骨髓瘤包括单发性和多发性骨髓瘤，五官科肿瘤包括口腔癌和鼻癌；所述的药物可以是以咖啡酸3，4_ 二羟基苯乙酯、其衍生物或它们药学上可接受的盐为有效成分与药学上可接受的载体制成的药物，也可以是咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯、其衍生物或药学上可接受的盐作为活性成分之一与其它中药或植物提取物、天然产物或合成化合物或已知药物组合与药学上可接受的载体制成的复方药物制剂。·本发明所述的咖啡酸3，4- 二羟基苯乙酯的前药包括咖啡酸3，4- 二羟基苯乙酯各种衍生物，特别是咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯的任何一个或多个酚羟基的甲酰化、乙酰化、丙酰化或丁酰化。本发明所指的含咖啡酸3，4_ 二羟基苯乙酯、其前药或它们药学上可以接受的盐药物制剂包括口服制剂有口服片、含片、咀嚼片、丸剂、滴丸、胶囊、软胶囊、颗粒、口服液、糖浆、乳剂、合剂；针剂小针剂、大针剂、粉针剂、乳剂、混悬液；经鼻腔喷雾制剂；缓释剂；控释剂；靶向制剂；泡腾剂。中国专利(ZL200910134180.I ；ZL200910114960. X ；ZL200610050821. I)公开了咖
啡酸3，4-二羟基苯乙酯(CADPE)对肠癌、胃癌、肝癌、白血病、黑色瘤、肺癌、肾癌、卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌、脑瘤等12种肿瘤的抗肿瘤作用。但是，人肿瘤发病机制非常复杂，不同瘤种间存在巨大差异，咖啡酸3，4_ 二羟基苯乙酯对其它肿瘤细胞是否有抑制作用无法通过上述专利公开的内容来预测，需要创造性的实验来证明和回答。本发明利用体外肿瘤模型证明咖啡酸3，4_ 二羟基苯乙酯对骨髓瘤、食道癌和五官科肿瘤有显著的抗肿瘤作用。为防治骨髓瘤、食道癌和五官科肿瘤提供了有效的治疗药物。
图I是咖啡酸3，4- 二羟基苯乙酯对小鼠骨髓瘤细胞FO生长的抑制作用。图2是咖啡酸3，4- 二羟基苯乙酯对小鼠骨髓瘤细胞FO生长的抑制作用。图3是咖啡酸3，4- 二羟基苯乙酯对人食管癌细胞TE-I生长的抑制作用。图4是咖啡酸3，4- 二羟基苯乙酯对人鼻咽癌细胞CNE生长的抑制作用。图5是咖啡酸3，4- 二羟基苯乙酯对人咽鳞癌细胞FaDu生长的抑制作用。
具体实施方式
本发明结合附图和实施例作进一步详细的说明。但是，本发明不限于这些实施例。实施例I咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯对骨髓瘤的细胞毒性
材料试验用咖啡酸3，4- 二羟基苯乙酯(CADPE)参照CN101497567公开的方法制备，或者参照CN1879672记载的方法从肿节风中分离制备，纯度为> 97%。小鼠骨髓瘤FO细胞株购自科学院上海细胞库。
方法培养24小时的小鼠骨髓瘤细胞FO在含不同浓度(5 μ M，10 μ Μ, 25 μ Μ, 50 μ Μ)的咖啡酸3，4- 二羟基苯乙酯的培养基中再培养72小时。用磺基罗丹明B (SulforhodamineB, SRB)染色分析方法测定细胞活力，并对细胞进行拍照。结果SRB实验结果表明，CADPE于5μΜ至50μΜ的浓度范围均可显著降低小鼠骨髓瘤细胞FO的活力(图1)，各给药组细胞活力均显著低于对照组(C0N);从拍照图片可见细胞数量显著减少，细胞体积显著增大(图2)，而且随着浓度的增加，作用越强。图I中，CADPE-5: CADPE 5 μM, CADPE-10: CADPE 5 μ Μ, CADPE-25: CADPE 25 μM, CADPE-50:CADPE 50μΜ。实施例2咖啡酸3，4- 二羟基苯乙酯对食道癌的细胞毒性
材料试验用咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯(CADPE)来源同前。人食管癌TE-I细胞株购自科学院上海细胞库。方法培养24小时的人食管癌细胞TE-I在含不同浓度的咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯的培养基中再培养72小时。用磺基罗丹明B (Sulforhodamine B, SRB)染色分析方法测定细胞活力。结果实验结果表明，CADPE于10 μ M至50 μ M均可显著降低人食管癌细胞TE-I的活力(图3);而且随着浓度的增加，作用越强。实施例3咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯对人鼻咽癌的细胞毒性
材料试验用咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯(CADPE)来源同前。人鼻咽癌CNE细胞株购自科学院上海细胞库。方法培养24小时的人鼻咽癌细胞CNE在含不同浓度的咖啡酸3，4_ 二羟基苯乙酯的培养基中再培养72小时。用磺基罗丹明B (Sulforhodamine B, SRB)染色分析方法测定细胞活力。结果实验结果表明，CADPE于25_50 μ M均可显著降低人鼻咽癌细胞CNE的活力(图4);而且随着浓度的增加，作用越强。实施例4咖啡酸3，4- 二羟基苯乙酯对人咽鳞癌的细胞毒性
材料试验用咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯(CADPE)来源同前。人咽鳞癌FaDu细胞株购自科学院上海细胞库。方法培养24小时的人咽鳞癌细胞FaDu在含不同浓度的咖啡酸3，4_ 二羟基苯乙酯的培养基中再培养72小时。用磺基罗丹明B (Sulforhodamine B，SRB)染色分析方法测定细胞活力。结果实验结果表明，CADPE于25 μ M至50 μ M均可显著降低人咽鳞癌细胞FaDu的活力(图5);而且随着浓度的增加，作用越强。
权利要求
1.一种咖啡酸3，4- 二羟基苯乙酯在制备抗肿瘤药物中的应用，所述咖啡酸3，4- 二羟基苯乙酯化学结构为
2.根据权利要求I所述的应用，其特征在于，所述骨髓瘤为单发性和多发性骨髓瘤，五官科肿瘤为口腔癌和鼻癌。
3.根据权利要求I所述的应用，其特征在于，所述的药物是以咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯、其衍生物或它们药学上可接受的盐为有效成分与药学上可接受的载体制成的药物。
4.根据权利要求I所述的应用，其特征在于，所述的药物是由咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯、其衍生物或药学上可接受的盐作为活性成分之一与其它中药或植物提取物、天然产物或合成化合物或已知药物组合与药学上可接受的载体制成的复方药物制剂。
5.根据权利要求I或3所述的应用，其特征在于，所述药物制剂为口服制剂、注射制剂、经鼻腔喷雾制剂、缓释剂、控释剂、靶向制剂或泡腾剂。
全文摘要
本发明提供一种咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯在制备抗肿瘤药物中的应用，所述肿瘤为骨髓瘤、食道癌和五官科肿瘤，骨髓瘤包括单发性和多发性骨髓瘤，五官科肿瘤包括口腔癌和鼻癌。体外肿瘤模型证明咖啡酸3，4-二羟基苯乙酯对骨髓瘤、食道癌和五官科肿瘤有显著的抗肿瘤作用，为防治骨髓瘤、食道癌和五官科肿瘤提供了有效的治疗药物。
文档编号A61K31/216GK102949384SQ20121042044
公开日2013年3月6日 申请日期2012年10月29日 优先权日2012年10月29日
发明者连晓媛, 张艳花, 杨勇, 张治针 申请人:浙江大学