。
[0213] 式（I)，（II)或（III)化合物可以根据现有技术中描述的程序合成（如 WO 02/059116、 WO 03/002560、 WO 03/031443、 WO 03/032962、 WO 2004/096221、 WO 2005/058888、W0 2008/056335和WO 2009/136379)。所述杂合物的抗菌活性在这些文件中 有记载，并进一步在如US 8, 329, 908和US 8, 513, 231及其引用文件中记载。
[0214] 例如，化合物2对多种细菌表现出如下活性。MIC测试根据CLSI (原NCCLS)指南 进行：药敏试验执行标准（Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing)第11次信息增补，第21卷No 1，M100-S11，2001年I月.NCCLS.修订版第17次 信息增补，第27卷No 1，M100-S16, 2007年1月。
实施例
[0216] 实施例1(输注速率）：
[0217] 通过静脉（iv.)推注对不同物种的动物（其中包括小鼠和大鼠）施用化合物1。 推注的持续时间设置为2分钟，以确保给定剂量下，前体药物（化合物1)以及药物（化合 物2)的暴露尽可能尚。
[0218] 根据药物静脉推注期间以及之后在血液循环中的分布原则，在推注结束时观察到 前体药物（化合物1)的最大血药浓度（Cmax)。此外，根据所有独立的动物研究的推导结 果，可以断定前体药物（化合物1)非常迅速地转化成了药物（化合物2):在所有研究中， 药物（化合物2)的Cmax在最初的取样时间观察到（例如静脉推注结束后< 5min)
[0219] 为确定人体的最高暴露可能，设计关于化合物1的研究。因此，在首次人体试验 中，通过2min的静脉推注，对38个健康高加索男性志愿者施用认为安全的递增的前体药物 (化合物1)剂量。
[0220] 通过持续2min的静脉推注，对志愿者施用剂量多至3. Omg/kg体重（BW)的化合物 1。此外，施用剂量为1. 5和3. Omg/kg BW的化合物1作为持续20分钟的短时输注，使得输 注速率分别达到4. 5和9. OmgAkg BW X h)。
[0221] 与所研究的所有动物物种中观测到的一致，在应用的所有剂量中，人中也存在非 常迅速的前体药物（化合物1)到药物（化合物2)的转化。药物（化合物2)的Cmax在静 脉推注施用前体药物后的IOmin已经观察到。
[0222] 这些观察结果引发这样的假定，将静脉给药持续时间从2min的推注延长到20min 的短时输注，并不能引起前体药物（化合物1)向药物（化合物2)转化的任何进一步改善。
[0223] 然而，出人意料的是，20min输注（输注速率为9mgAkg BW X h))后的药物（化合 物2)暴露远高于3. Omg/kg BW的推注，即，曲线下面积（AUC)和最大血药浓度（Cmax)分别 为149%和130% (见表1)。20min内输注I. 5mg/kg BW的剂量（输注速率4. 5mgAkg BW X h))，该药物（化合物2)的剂量归一化暴露水平甚至高于3mg/kg BW剂量后检测到的，无 论是静脉推注或是20min输注（见表1)。
[0224] 表1 :分别静脉推注3. Omg/kg BW前体药物（化合物1)或以9. 0和4. 5mgAkg BW X h)的输注速率在20min内输注3. 0或I. 5mg/kg BW前体药物（化合物1)后的药物（化 合物2)的平均暴露水平。
[0226] *根据3. Omg/kg BW的剂量归一化的数值
[0227] 因此，与以9. Omg/(kg BW X h)的速率输注3. Omg/kg BW的剂量相比，以4. 5mg/ (kg BW X h)的速率输注1.5mg/kg BW的剂量，得到相似的暴露水平。
[0228] 对于前体药物（化合物1)，与推注给药相比，将3. Omg/kg BW的给药延长到20min 导致了更低的AUC，因为向药物（化合物2)的转化更有效。
[0229] 考虑到首次人体试验的结果，系统性地研究了输注速率对前体药物（化合物1)到 药物（化合物2)的转化效率的影响
[0230] 在这一临床研究中，对30个健康高加索男性志愿者施用前体药物（化合物I)， 输注速率在0.4-3. OmgAkg BW X h)之间变化。这一输注速率的范围通过组合不同剂量 (l_6mg/kg BW)和不同的输注时间（20_720min)来实现。
[0231] 因此，可能评价以一系列输注速率进行输注的3组（群组）志愿者，这一系列的输 注速率由应用于该组的不同剂量和输注时间产生。
[0232] 利用药物与前体药物（化合物2/化合物1)的AUC值之比来度量转化效率。表2 显示了各组的输注速率和所得比值；比值越高，前体药物（化合物1)到药物（化合物2)的 转化效率越高。
[0233] 表2 :用于各组志愿者的输注速率和所得的化合物2/化合物1的AUC之比
[0235] 化合物2/化合物1的AUC平均比值基本在0. 8到0. 60之间变化。可以观察到， 即使给药剂量不同，相同输注速率下的比值却是相似的。
[0236] 在组1中，随着输注速率从3降至0. 75mgAkg BW X h)，平均比值从0. 65稳定增 长到0.86。在组2中，当输注速率从1.5降至0.75mgAkg BW X h)时，平均比值从0.75稳 定增长到0.83。组2中的最低输注速率0.4mgAkg BW X h)显示的比值为0.62,与组3中 输注速率为0. 5mgAkg BW X h)观察到的比值没有不同，始终在0. 60至0. 65间变化。
[0237] 因此，通过人体中的系统性药代动力学研究，发现就输注的前体药物（化合物1) 转化为药物（化合物2)的最大量而言，0.4-3mgAkg BW X h)的输注速率是一个优选的范 围。
[0238] 此外，在给定的输注剂量下，安全性和耐受性会随输注速率的下降而提高。
[0239] 因此，0. 4-0. 75mgAkg BW x h)的输注速率是特别优选的。
[0240] 实施例2 (肠道疾病的治疗）
[0241] 连续5天向健康志愿者静脉内输注化合物1，剂量为6mg/kg体重，持续12h。第5 天时，所有志愿者的排泄物中化合物2的浓度，均在98-226mgAkg排泄物）之间变动。排 泄物中化合物2的浓度被认为对革兰氏阳性好氧菌群和厌氧菌群有显著影响。从给药前到 第五天，梭状芽孢杆菌的活菌数的减少量为3. OloglO CFU/g，并且，除了一位志愿者，活菌 数量在给药后的第三天下降到检测极限以下。从给药前到第五天，乳酸杆菌的活菌数量减 少了 4. OloglO CFU/g。化合物2对双歧杆菌的影响最显著：从给药前到第五天，活菌数量减 少了 7.91oglO CFU/g。同样，从给药前到第五天，肠球菌平均减少了 3.81oglO CFU/g。粪 便菌群暴露于MCB3681，并不会影响革兰氏阴性菌。
[0242] 化合物2抵御艰难梭状芽孢杆菌活性的评估：
[0243] 从67名患者中收集了 114株艰难梭状芽孢杆菌，通过细胞毒性中和试验分析艰难 梭菌毒素 B的存在情况，利用PCR研究毒素 A、毒素 B、二元毒素基因和TcdC缺失基因。全 部菌株也进行了 PCR-核糖分型。通过琼脂稀释法，测定分离菌株抵御化合物2的MIC(最 小抑菌浓度）。全部分离菌株均为毒素 B阳性。113株分离菌为毒素 A、毒素 B基因阳性。 此外，13株分离菌株为二元毒素基因阳性。共鉴定出32种不同的核糖型。没有发现核糖型 027的菌株。全部114株分离菌均对化合物2敏感（MIC范围0. 008-0. 5mg/l)。因此，化合 物2对艰难梭菌具有强效的体外活性。
[0244] 1.材料与方法
[0245] I. 1.菌株的收集和分型
[0246] 从67名患有原发性和/或复发性⑶I的患者（26名男性和41名女性）中分离得 到114株艰难梭菌。患者的平均年龄为74岁（年龄范围19-97岁）。利用菌落的形态特 征、特有气味和革兰氏染色对菌株（67株原发性分离菌和47株复发性分离菌）进行鉴定。 利用气相色谱分析检测艰难梭菌产生的挥发性短链脂肪酸，以进行最终鉴定。
[0247] 1.2.毒素和毒素基因的检测
[0248] 利用细胞毒性中和试验检测毒素 B的产生。通过常规PCR检测毒素 A的基 因 [Kato H, Kato N, atanabe K, Iwai N, Nakamura H, Yamamoto T,等·利用 PCR 鉴定 毒素 A-阴性、毒素 B-阳性的艰难梭菌（Identification of toxin A-negative, toxin B-positive Clostridium difficile by PCR). J Clin Microbiol 1998;36:2178-82]。利 用 GeneXpert? 系统（C^pheid, Sunnyvale, CA, USA)进行实时 PCR，检测毒素 B 基因，二元 毒素基因和TcdC缺失基因 [Huang H，Weintraub A, Fang H，Nord CE.用于艰难梭菌感染诊 断的多重实时PCR和细胞毒性中和试验的比较（Comparison of a commercial multiplex real-time PCR to the cell cytotoxicity neutralization assay for diagnosis of Clostridium difficile infections). J Clin Microbiol 2009;47:3729-31]。
[0249] I. 3.核糖分型
[0250] 根据先前描述的方法进行PCR核糖分型和凝胶电泳[Stubbs SL, Brazier JS，0'Neill GL，Duerden BI.艰难梭菌16S-23S rRNA基因的基因间隔区定向PCR和包 含116种不同PCR核糖型的数据库的构建（PCR targeted to the 16S-23S rRNA gene intergenic spacer region of Clostridium difficile and construction of a library consisting of 116different PCR ribotypes). J Clin Microbiol 1999;37:461-3; Rashid MU, Lozano HM, Weintraub A, Nord CE. cadazolid 抗艰难梭菌（分离自瑞典斯德哥 尔摩的原发性或继发性感染）的体外活性（In vitro activity of cadazolid against Clostridium difficile strains isolated from primary and recurrent infections in Stockholm, Sweden) .Anaerobe 2013;20:32-5]。利用 Bionumerics 软件 6.6 版本（应用数 学公司-Applied Maths，Kortrijk,比利时）扫描并分析所述凝胶。对全部凝胶以4到5 泳道的间隔运行分子级别的标准品（IOObp ;GE医疗保健，Little Chalfont，白金汉郡，英 国），使从而能够对凝胶图谱标准化。在每个凝胶中，运行2种已知的PCR核糖型（005和 012)作为对照。将条带图谱与包含艰难梭菌参考菌株的数据库进行比较。通过集群相关算 法（利用算术平均数和精校准的非加权配对法），检测数据库中构成各个类型的条带图谱 的稳定性、可靠性和同质性。
[0251] 1.4.抗菌剂敏感性
[0252] 根据CLSI指导方针，利用琼脂稀释法，检测艰难梭菌的抗菌剂敏感性，以脆弱拟 杆菌（Bacteroides fragilis) ATCC 25285 和艰难梭菌 ATCC 700057 为参考菌株。[CLSI. 厌氧菌的抗菌剂敏感性检测（Methods for Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobic Bacteria) !Approved Standard-Eighth Edition. 2012]。根据TO 2005/058888 中的记载制备化合物2。
[0253] MIC定义为完全抑制生长的最低药物浓度。MICavs。对应于分别抑制50%和90% 测试菌株生长的浓度。
[0254] 1.5.统计学方法
[0255] Pearson相关系数最大匹配比较临床分离菌株的PCR核糖型与定义数据库的核糖 型。利用IBM SPSS Statistics 22 (Armonk，纽约，美国）软件计算MIC结果的百分位数 50和90。利用描述性统计对结果进行总