山药地上部分提取物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种山药地上部分的提取物，W及该提取物的制备方法，还设及该提 取物在制备a-葡萄糖巧酶抑制剂类药物或保健品方面的应用。
【背景技术】
[0002] 山药(Disocorea opposi1:a Thunb.)为馨葫科馨葫的干燥根茎，具有补脾养肺，固 肾益精之功效，临床上广泛用于治疗消渴症，慢性腹泻，虚劳咳嗽等症，是我国传统的药食 同源中药之一，自古W河南焦作（古怀庆府)所产最为道地，故称"怀山药"，为著名的"四大 怀药"之一。2006年河南省武跋县获批山药GAP种植基地，解决了野生山药资源短缺，资源可 持续利用发展等问题。山药W地下根茎入药，地上部分常作为废弃物被遗弃，导致了资源的 极大浪费。目前对于山药的研究主要集中于地下根茎(入药部位）的研究，药理研究显示其 具有降血糖、降血脂、抗氧化、抗肿瘤等活性。然而对于山药地上部分的研究非常少，未见其 在降血糖方面的研究报道。
[0003] 由于人民生活水平的提高、饮食结构的改变W及少动多坐的生活方式等诸多因 素，全球糖尿病发病率增长迅速，糖尿病已经成为继肿瘤、屯、血管病变之后第=大严重威胁 人类健康的慢性疾病。糖尿病的发病过程中最先出现的症状往往是餐后高血糖，即糖尿病 的早期征兆，特别是n型糖尿病病人，餐后高血糖不仅极易诱发各种并发症，还会极大地提 高糖尿病的死亡率。所W，降低餐后血糖是预防糖尿病、减少并发症和降低死亡率的重要措 施之一。O-葡萄糖巧酶是碳水化合物消化过程的一种关键酶，它可将多糖或二糖水解成为 能够供人体吸收的单糖，因此抑制O-葡萄糖巧酶的活性就能延缓食物中碳水化合物的分 解，从而减少葡萄糖的摄入，达到抑制餐后血糖升高的目的。目前临床上的此类药物有阿卡 波糖、伏格列波糖和米格列醇。现有的O-葡萄糖巧酶抑制剂种类较少，并伴有肠道副作用， 因此人们仍不断致力于开发新型O-葡萄糖巧酶抑制剂。
【发明内容】
[0004] 为了解决现有技术的不足，本发明研究山药地上部分的降血糖功能，所得提取物 可用于O-葡萄糖巧酶抑制剂药物或保健品的开发。
[0005] 本发明的技术方案是：山药地上部分提取物的制备方法，由W下步骤提取获得，步 骤一，将山药地上部分干燥粉碎后，用乙醇渗漉提取，提取液减压回收溶剂得乙醇浸膏，将 乙醇浸膏分散于水中，然后先用等体积的石油酸萃取，萃取至少1次，合并萃取液减压浓缩 得石油酸提取物。
[0006] 本发明的进一步改进包括：
[0007] 水层接着依次用乙酸乙醋和正下醇萃取，萃取方法同石油酸萃取，分别浓缩得到 乙酸乙醋和正下醇提取物。
[000引山药地上部分提取物的制备方法，由W下步骤提取获得，步骤一，将山药地上部分 干燥粉碎后，用乙醇渗漉提取，减压回收溶剂得浓缩物;步骤二，将浓缩物分散于水中，依次 用石油酸、乙酸乙醋和正下醇各萃取3-4次，减压回收溶剂得相应的石油酸提取物、乙酸乙 醋提取物和正下醇提取物。
[0009] 所述的乙醇浓度为90-95%。
[0010] 本发明的另一目的在于提供了按照上述的方法制得的山药地上部分提取物。
[0011] 本发明还提供了山药地上部分在制备降血糖药物或保健品方面的应用。
[0012] 本发明进一步提供了山药地上部分提取物在制备降血糖药物或保健品方面的应 用。
[0013] 本发明进一步提供了山药地上部分提取物在制备a-葡萄糖巧酶抑制剂类药物或 保健品的应用。本发明所述的山药地上部分提取物在制备a-葡萄糖巧酶抑制剂药物或保健 品方面的应用，研究发现山药地上部分石油酸提取物、乙酸乙醋提取物和正下醇提取物对 曰-葡萄糖巧酶均有显著的抑制作用。
[0014] 山药地上部分提取物所述包括石油酸提取物、乙酸乙醋提取物和或正下醇提取 物。
[0015] 本发明通过体外a-葡萄糖巧酶抑制活性研究发现山药地上部分石油酸提取物、乙 酸乙醋提取物和正下醇提取物对Q-葡萄糖巧酶均有显著的抑制作用，其ICso分别为1.54± 0.09mg/血、0.065 ± 0.002mg/血和1.32 ± 0.24mg/血，明显强于阳性对照药阿卡波糖的活性 (IC日日为40.55 ±0.78mg/mL)，且对a-葡萄糖巧酶的抑制率均呈剂量依赖性。
【附图说明】
[0016] 图1为山药地上部分石油酸提取物对a-葡萄糖巧酶抑制率随药物浓度的变化图。
[0017] 图2为山药地上部分乙酸乙醋提取物对a-葡萄糖巧酶抑制率随药物浓度的变化 图。
[0018] 图3为山药地上部分正下醇提取物对a-葡萄糖巧酶抑制率随药物浓度的变化图。
【具体实施方式】
[0019] W下实施例用于说明本发明，但本发明的实施方式不限于此。
[0020] 本发明所述试剂和仪器在无特殊说明的情况下，均为商业途径获得。
[0021] 实施例1
[0022] 本实施例为山药地上部分提取物的制备方法。
[0023] 取山药地上部分阴干，粉碎，用95%乙醇润湿后装渗漉筒，然后用95%乙醇渗漉提 取，提取液减压回收溶剂得乙醇浸膏，将乙醇浸膏分散于水中，然后先用等体积的石油酸萃 取，萃取4次，合并萃取液减压浓缩得石油酸提取物。
[0024] 实施例2
[0025] 本实施例为山药地上部分提取物的制备方法。
[00%]取山药地上部分阴干，粉碎，用90%乙醇润湿后装渗漉筒，然后用90%乙醇渗漉提 取，提取液减压回收溶剂得乙醇浸膏，将乙醇浸膏分散于水中，然后先用等体积的石油酸萃 取，萃取4次，合并萃取液减压浓缩得石油酸提取物。
[0027] 实施例3
[0028] 本实施例为山药地上部分提取物的制备方法。
[0029] 取山药地上部分阴干，粉碎，用93%乙醇润湿后装渗漉筒，然后用95%乙醇渗漉提 取，提取液减压回收溶剂得乙醇浸膏，将乙醇浸膏分散于水中，然后先用等体积的石油酸萃 取，萃取4次，合并萃取液减压浓缩得石油酸提取物。
[0030] 实施例4
[0031] 本实施例为山药地上部分提取物的制备方法。
[0032] 取山药地上部分阴干，粉碎，用95%乙醇润湿后装渗漉筒，然后用95%乙醇渗漉提 取，提取液减压回收溶剂得乙醇浸膏，将乙醇浸膏分散于水中，然后先用等体积的石油酸萃 取，萃取4次，合并萃取液减压浓缩得石油酸提取物，水层接着依次用乙酸乙醋和正下醇萃 取，萃取方法同石油酸萃取，分别浓缩得到乙酸乙醋和正下醇提取物。
[0033] 实施例5
[0034] 本实施例为山药地上部分提取物的制备方法。
[0035] 取山药地上部分阴干，粉碎，用90%乙醇润湿后装渗漉筒，然后用90%乙醇渗漉提 取，提取液减压回收溶剂得乙醇浸膏，将乙醇浸膏分散于水中，然后先用等体积的石油酸萃 取，萃取4次，合并萃取液减压浓缩得石油酸提取物，水层接着依次用乙酸乙醋和正下醇萃 取，萃取方法同石油酸萃取，分别浓缩得到乙酸乙醋和正下醇提取物。
[0036] 实施例6
[0037] 本实施例为实施例4山药地上部分提取物对a-葡萄糖巧酶的抑制活性测试。
[0038] 方法:微孔板法。
[0039] 仪器:酶标仪，恒溫培养箱，分析天平，各种型号移液枪。
[0040] 试剂:Q-葡萄糖巧酶，4-硝基苯-a-D-化喃葡萄糖巧，阿卡波糖，憐酸盐缓冲液，二 甲基亚讽。
[0041 ] 测试方法:取96孔板，每孔加入2. Ommol/L的PNPG溶液(PBS溶解)8化L，再分别加入 10化不同浓度样品溶液(DMSO溶解），WDMSO为空白对照组，每组设3个平行孔，在酶标仪 400nm下测定背景组吸光度(A值）。然后再加入10化1.62U/mLa-葡萄糖巧酶溶液(PBS溶 解），置于恒溫培养箱中，在37°C下恒溫解育30min，测定试验组吸光度(A值）。抑制率（％)用 W下公式计算：
[0042] 抑制率（％ ) = ( A A绝-A Ai^aVA A绝X 100%
[0043] A Asaa为空白组酶与底物反应后A值-背景A值
[0044] A A|^。。为样品组酶与底物反应后A值-背景A值
[0045] 山药地上部分石油酸提取物、乙酸乙醋提取物和正下醇提取物对a-葡萄糖巧酶的 抑制活性结果如下(表1):
[0046] 表1.山药地上部分提取物对a-葡萄糖巧酶的抑制活性
[004引从表1可W看出，山药地上部分石油酸提取物、乙酸乙醋提取物和正下醇对a-葡萄 糖巧酶的抑制活性均强于阳性对照药阿卡波糖的活性，其中乙酸乙醋提取物的活性最强， 远优于阳性对照药阿卡波糖的活性。
[0049] W上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术 人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本 发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，运些变 化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其 等效物界定。
【主权项】
1. 山药地上部分提取物的制备方法，其特征在于：由以下步骤提取获得，步骤一，将山 药地上部分干燥粉碎后，用乙醇渗漉提取，提取液减压回收溶剂得乙醇浸膏，将乙醇浸膏分 散于水中，然后先用等体积的石油醚萃取，萃取至少1次，合并萃取液减压浓缩得石油醚提 取物。2. 根据权利要求1所述的山药地上部分提取物的制备方法，其特征在于:水层接着依次 用乙酸乙酯和正丁醇萃取，萃取方法同石油醚萃取，分别浓缩得到乙酸乙酯和正丁醇提取 物。3. 根据权利要求1所述的山药地上部分提取物的制备方法，其特征在于：山药地上部分 提取物的制备方法，其特征在于：由以下步骤提取获得，步骤一，将山药地上部分干燥粉碎 后，用乙醇渗漉提取，减压回收溶剂得浓缩物；步骤二，将浓缩物分散于水中，依次用石油 醚、乙酸乙酯和正丁醇各萃取3-4次，减压回收溶剂得相应的石油醚提取物、乙酸乙酯提取 物和正丁醇提取物。4. 根据权利要求1-3任一项所述的山药地上部分提取物的制备方法，其特征在于:所述 的乙醇浓度为90-95 %。5. 山药地上部分提取物，其特征在于:按照权利要求1-3任一项所述的方法制得。6. 山药地上部分在制备降血糖药物或保健品方面的应用。7. 山药地上部分提取物在制备降血糖药物或保健品方面的应用。8. 山药地上部分提取物在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂类药物或保健品的应用。9. 根据权利要求8所述的应用，其特征在于：山药地上部分提取物所述包括石油醚提取 物、乙酸乙酯提取物和或正丁醇提取物。
【专利摘要】本发明公开了山药地上部分提取物及其制备方法和应用，该提取物包括山药地上部分的石油醚提取物、乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物，其制备方法为：将干燥后的山药地上部分粉碎，用乙醇渗漉提取，减压浓缩后，分别用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取而得。本发明的山药地上部分石油醚提取物、乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物对α-葡萄糖苷酶均有显著的抑制活性，在相同条件下均强于降血糖药阿卡波糖的活性，其中乙酸乙酯提取物的抑制活性最强。本发明的山药地上部分提取物可用于降血糖药物或降血糖保健品的开发。
【IPC分类】A23L19/10, A23L33/105, A23L33/10, A61P3/10, A61K36/8945
【公开号】CN105497413
【申请号】CN201510959358
【发明人】张来宾, 吕洁丽, 刘军伟
【申请人】新乡医学院
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2015年12月21日