但不限于侧向对穿射野，成对楔形射野，旋转射野或多射野技术。 建议将CT引导的治疗方案用于射野排列的选择中以改进准确度。建议将原始治疗区域和缩 野(cone-down)治疗区域的等剂量分布用于所有患者，包括采用平行对穿射野的患者。显示 剂量分布于原始治疗区域和加强(boost)治疗区域的复合方案是可取的。治疗区域的最小 剂量和最大剂量优选保持在治疗区域中心的剂量的约10%以内。
[0129] 本公开的方面也可描述如下：
[0130] 1.-种药物组合物，其包含治疗有效量的基于噻吨酮的自噬抑制剂。
[0131 ] 2. -种药物组合物，其包含治疗有效量的癌症治疗自噬诱导化合物。
[0132] 3. -种药物组合物，其包含：
[0133] a)治疗有效量的基于噻吨酮的自噬抑制剂;和
[0134] b)治疗有效量的癌症治疗自噬诱导化合物。
[0135] 4.根据实施方案1至3所述的组合物，其中所述组合物进一步包括药学上可接受的 载体。
[0136] 5.根据实施方案1、3或4所述的组合物，其中所述基于噻吨酮的自噬抑制剂是1-((2-(二乙氨基）乙基)氨基)-4-甲基噻吨-9-酮、1-(2-二乙氨基乙氨基)-4-(羟甲基)-9-噻 吨酮、N-[[l-[[2-(二乙氨基）乙基]氨基]-9-氧代-9H-噻吨-4-基]甲基]甲磺酰胺，其吲唑 类似物或其盐。
[0137] 6.根据实施方案2至4所述的组合物，其中所述癌症治疗自噬诱导化合物是三氧化 二砷、依托泊苷、雷帕霉素、组蛋白脱乙酰酶抑制剂、酪氨酸激酶抑制剂、他莫昔芬、替莫唑 胺、伊马替尼或硼替佐米。
[0138] 7.根据实施方案6所述的组合物，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂是异羟肟酸类 组蛋白脱乙酰酶抑制剂或苯甲酰胺类组蛋白脱乙酰酶抑制剂。
[0139] 8.根据实施方案6所述的组合物，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂是(2E，4E，6R)_ 7-(4-二甲氨基苯基)-N-羟基-4，6-二甲基-7-氧代庚-2，4-二烯酰胺、N-羟基-N 苯基辛二 酰胺、4-二甲氨基-N-(6-羟基氨基甲酰基己基)-苯甲酰胺、N-羟基-3-[(E)-3-(羟基氨基)- 3-氧代丙烯基]苯甲酰胺、（2E)-3-[3_(苯胺基磺酰基)苯基]-N-羟基丙稀酰胺、（(E)-N-羟基-3-[4-[[2-羟乙基-[2-(1Η-吲哚-3-基）乙基]氨基]甲基]苯基]丙-2-烯酰胺、（E)-N-羟基-3-[4-[[2-(2-甲基-1H-吲哚-3-基）乙氨基]甲基]苯基]丙-2-烯酰胺、N-(2-氨基苯 基)-Ν'-苯基-辛二酰胺、4-(2-氨基苯基氨基甲酰基)苄基氨基甲酸酯、4-乙酰氨基-N-( 2-氨基苯基)苯甲酰胺、N-(2-氨基苯基)-4-[ [(4-吡啶-3-基嘧啶-2-基)氨基]甲基]苯甲酰 胺、3_(二甲氨基甲基)-N-[2-[4-(羟基氨基甲酰基)苯氧基]乙基]-1-苯并呋喃-2-甲酰胺 或{4-[(羟基氨基)羰基]苯基}氨基甲酸{6-[(二乙氨基）甲基]-2-萘基}甲酯。
[0140] 9.-种根据实施方案1至8所述的组合物的用途，其用于治疗癌症的药剂的生产。
[0141 ] 10. -种治疗癌症的方法，所述方法包括
[0142] a)将有效量的实施方案1或3至6的基于噻吨酮的自噬抑制剂施用于需要其的哺乳 动物;和
[0143] b)将有效量的实施方案2至6的癌症治疗自噬诱导化合物施用于需要其的哺乳动 物；
[0144] 其中所述基于噻吨酮的自噬抑制剂和所述癌症治疗自噬诱导化合物两者的施用 减轻与癌症相关的症状，从而治疗所述癌症。
[0145] 11.根据实施方案1至8所述的组合物的用途，其用于癌症的治疗，其中所述基于噻 吨酮的自噬抑制剂和所述癌症治疗自噬诱导化合物两者的所述施用减轻与癌症相关的症 状，从而治疗所述癌症。
[0146] 12.根据实施方案10所述的方法或根据实施方案11所述的用途，其中所述基于噻 吨酮的自噬抑制剂和所述癌症治疗自噬诱导化合物被同时施用。
[0147] 13.根据实施方案10所述的方法或根据实施方案11所述的用途，其中所述基于噻 吨酮的自噬抑制剂和所述癌症治疗自噬诱导化合物被相继施用。
[0148] 14.根据实施方案13所述的方法或用途，其中所述基于噻吨酮的自噬抑制剂和所 述癌症治疗自噬诱导化合物彼此相隔约三小时内被施用。
[0149] 15.根据实施方案13所述的方法或用途，其中所述基于噻吨酮的自噬抑制剂和所 述癌症治疗自噬诱导化合物彼此相隔约两小时内被施用。
[0150] 16.根据实施方案13所述的方法或用途，其中所述基于噻吨酮的自噬抑制剂和所 述癌症治疗自噬诱导化合物彼此相隔约一小时内被施用。
[0151] 17.根据实施方案10所述的方法或根据实施方案11所述的用途，其中所述治疗有 效量的所述基于噻吨酮的自噬抑制剂和所述治疗有效量的所述癌症治疗自噬诱导化合物 以单次日剂量被施用或分为多于1个日剂量。
[0152] 18.根据实施方案17所述的方法或用途，其中所述多于1个日剂量是2个日剂量。
[0153] 19.根据实施方案10所述的方法或根据实施方案11所述的用途，其中所述基于噻 吨酮的自噬抑制剂和所述癌症治疗自噬诱导化合物被口服施用。
[0154] 20.根据实施方案10所述的方法或根据实施方案11所述的用途，其中所述基于噻 吨酮的自噬抑制剂和所述癌症治疗自噬诱导化合物被胃肠外施用。
[0155] 21.根据实施方案10所述的方法或根据实施方案11所述的用途，其中所述基于噻 吨酮的自噬抑制剂和所述癌症治疗自噬诱导化合物以胶囊剂或片剂的形式被施用。
[0156] 22.根据实施方案10所述的方法或根据实施方案11所述的用途，其中所述基于噻 吨酮的自噬抑制剂和所述癌症治疗自噬诱导化合物被施用一个或多个疗程。
[0157] 23.根据实施方案10所述的方法或根据实施方案11所述的用途，其中所述一个疗 程包括每4天7次。
[0158] 24.根据实施方案10或12至23所述的方法或实施方案11-23所述的用途，其中所述 癌症是肺癌、脑癌、中枢神经系统癌症、乳腺癌、结肠癌、白血病、骨髓瘤、前列腺癌或卵巢 癌。
[0159] 25.根据实施方案24所述的方法或用途，其中所述肺癌是非小细胞肺癌。
[0160] 26.根据实施方案10至25所述的方法或用途，其中所述方法或用途进一步包括施 用放射治疗、激素治疗或免疫治疗。
[0161] 27. -种药物试剂盒，其包括：
[0162] a)包含治疗有效量的基于噻吨酮的自噬抑制剂和药学上可接受的载体的药物组 合物，和
[0163] b)包含治疗有效量的癌症治疗自噬诱导化合物和药学上可接受的载体的药物组 合物。
[0164] 28. -种治疗癌症的方法，所述方法包括
[0165] a)将有效量的实施方案1、4或5的基于噻吨酮的自噬抑制剂施用于需要其的哺乳 动物;和
[0166] b)将有效量的电离放射施用于需要其的哺乳动物；
[0167] 其中所述基于噻吨酮的自噬抑制剂和所述电离放射两者的所述施用减轻与癌症 相关的症状，从而治疗所述癌症。
[0168] 29. -种治疗癌症的方法，所述方法包括
[0169] a)将有效量的实施方案1或3至6的基于噻吨酮的自噬抑制剂施用于需要其的哺乳 动物；
[0170] b)将有效量的实施方案1、4或6至8的癌症治疗自噬诱导化合物施用于需要其的哺 乳动物;和
[0171] c)将有效量的电离放射施用于需要其的哺乳动物；
[0172] 其中所述基于噻吨酮的自噬抑制剂、所述癌症治疗自噬诱导化合物和所述电离放 射的所述施用减轻与癌症相关的症状，从而治疗所述癌症。
[0173] 31.根据实施方案1、4或5所述的组合物的用途，其用于对需要其的哺乳动物的癌 症的所述治疗，其中所述基于噻吨酮的自噬抑制剂的施用，连同有效量的电离放射的施用， 减轻与癌症相关的症状，从而治疗所述癌症。
[0174] 32.根据实施方案1至8所述的组合物的用途，其用于对需要其的哺乳动物的癌症 的治疗，其中所述基于噻吨酮的自噬抑制剂、所述癌症治疗自噬诱导化合物或两者，连同施 用有效量的电离放射，减轻与癌症相关的症状，从而治疗所述癌症。
[0175] 实施例
[0176] 出于说明的目的而提供以下非限制性实施例，仅为了促进更全面地理解目前所涵 盖的代表性实施方案。这些实施例不应解释为限制本说明书中描述的任何实施方案，包括 化合物、药物组合物、药物试剂盒或治疗癌症的方法相关的实施方案。
[0177] 实施例1
[0178] 硫蒽酮抑制自噬降解
[0179] 硫蒽酮诱导溶酶体膜通透(LMP)。自噬促进细胞存活并通过促使癌细胞再循环细 胞组分以产生ATP而导致耐药性。由此，从基因方面抑制自噬或使用化合物例如3-MA增强许 多抗癌剂的活性。硫蒽酮是抗血吸虫剂，其基于化学结构能够破坏溶酶体功能并抑制自噬 降解中的最终步骤。为检验这一假设，将乳腺癌细胞用硫蒽酮或氯喹处理，并测定LC3-II的 积聚、空泡化的增加，以及溶酶体膜通透的出现。
[0180] LC3-II的积聚通过免疫细胞化学显影。将来自MDA-MB-231乳腺癌细胞株的细胞涂 在腔室玻片（培养玻片）上，并过夜使其贴壁。然后将细胞用1〇μΜ硫蒽酮或50μΜ氯喹处理48 小时。经药物处理后，用4%多聚甲醛固定细胞，使用0.2% TRIΤ0Ν-Χ-100透化，并用标记的 一抗孵育过夜。将Alexa Fluor 488偶联的荧光二抗用于显影蛋白质定位。使用带有DP71镜 头和60X物镜的Olympus荧光显微镜（Center Valley，PA)获取图像。使用Image-Pro Plus软 件版本6 · 2 · 1 (MediaCybernetics，Bethesda，MD)进行图象米集。
[0181 ] 通过Giemsa染色和透射（transit ion)电子显微镜显影空泡化增加。将来自MDA-MB-231乳腺癌细胞株的细胞涂在腔室玻片上，并用10μΜ硫蒽酮或50μΜ氯喹处理48小时。经 药物处理后，将细胞用roS冲洗并用甲醇固定5分钟。然后以去离子水1:20稀释的Giemsa染 色剂中孵育细胞1小时。用水冲洗细胞并使用Olympus荧光显微镜成像。用Image-Pro Plus 软件版本6.2.1进行图象采集。使用常规程序进行细胞的透射电子显微镜检查。在LKB Ultracut切片机(Leica，Deerfield，IL)中切片，用乙酸双氧铀和柠檬酸铅染色，并且在JEM 1230透射电子显微镜（JE0L，USA，Inc ·，Peabody，MA)中检查。使用AMT成像系统(Advanced Microscopy Techniques Corp，Danvers，MA)获取图像。
[0182] 用吖啶橙荧光的减少来监测LMP的出现。酸性溶酶体通过吖啶橙染色显影。用10μΜ 硫蒽酮或50μΜ氯喹处理48小时后，将来自MDA-MB-231乳腺癌细胞株的细胞在37°C用ΙμΜ吖 啶橙染色15分钟。用PBS冲洗细胞并且使用Olympus荧光显微镜获取图像。基于酸度，溶酶体 呈橙色荧光的细胞质囊。通过免疫荧光法进行5个随机视野吖啶橙强度定量的测量，并使用 Image-Pro Plus软件版本6.2.1进行图像采集。
[0183] 硫蒽酮诱导LC3-1至LC3-II的脂质修饰，其通过LC3点状定位于自噬体来表征（图 IB)。硫蒽酮还诱导细胞质空泡化，其为溶酶体膜通透和自噬的特征（图IB)。此外，硫蒽酮降 低含吖啶橙的溶酶体的红色染色强度，表明用氯喹和硫蒽酮处理后溶酶体酸度降低（图IB 和 1C)。
[0184] 自噬的抑制导致蛋白质的积聚。当用透射电子显微镜显影时，硫蒽酮或氯喹诱导 电子致密颗粒的积聚，表明蛋白质聚集（图IB)。为确认该发现，将乳腺癌细胞用硫蒽酮或氯 喹处理，并测定聚泛素结合蛋白p62或死骨片I (sequestosome I) (SQSTMI)的积聚。该蛋白 质通过自噬降解，聚集成细胞包涵体，并且已经提出其在通过自噬促进蛋白质聚集物的清 除中起作用。因此，该过程的中断将导致SQSTMI/p62的积聚。
[0185] 通过免疫印记和免疫细胞化学测定SQSTMI/p62的水平和积聚作用。对于免疫印 记，将MDA-MB-231乳腺癌细胞株癌细胞用ΙΟμΜ硫蒽酮或50μΜ氯喹孵育48小时。收获细胞然 后使用常规程序将其溶解。对来自各个样品的大约50yg细胞总蛋白进行SDS-PAGE，将蛋白 质转移至硝基纤维素膜，用5%脱脂乳的Tris-缓冲盐水溶液(含0.1%TWEEN-20)将膜封闭1 小时。然后将印记与一抗在4°C下探测过夜，洗涤，并通过增强化学发光法，用与辣根过氧化 物酶偶联的种属特异性二抗探测。检测免疫活性物质（West Pico，Pierce，Inc .， Rockville，IL)〇
[0186] 用硫蒽酮处理后，自噬抑制SQSTMI/p62水平的其它一致的标记物大大增加（图 ID)。免疫细胞化学表明在基本条件下SQSTMI/p62呈分散染色模式，但响应硫蒽酮而聚集。 这些结果表明，硫蒽酮激发SQSTMl/p62积聚和聚集，该作用与所报道的其与泛素化蛋白质 的相互作用一致(图ID)。
[0187] 实施例2
[0188] 硫蒽酮对乳腺癌细胞有细胞毒性
[0189] 据报道，溶酶体膜通透和随后的自噬的抑制可诱导癌细胞中的细胞死亡。为研究 抗癌硫蒽酮的活性，使用一组7个乳腺癌细胞株通过MTT测定来测量细胞活力。
[0190] 将来自乳腺癌细胞株 MDA-MB-231、HCC1954、BT-474、SKBR-3、MDA-MB-435、HCC1937 和BT-20的细胞以10，000细胞/孔接种于96孔微量培养板，使其贴壁24小时。然后将细胞用 不同浓度的硫蒽酮或氯喹处理72小时。经药物处理后，加入3-(4,5_二甲基噻唑-2-基)-2， 5-二苯基溴化四氮唑(MTT)并且使用Bi〇Tek(Win〇〇Ski，VT)微孔板读数器将细胞活力定量 化。通过碘化丙啶(PI)染色和sub-Go/GiDNA含量的荧光激活细胞分选(FACS)分析，将体外药 物暴露后的促细胞凋亡作用定量化。数据是三次独立实验的代表。由MTT测定的结果计算 IC50 值。
[0191] 在一组7个乳腺癌细胞株中，硫蒽酮将细胞活力减少至类似的程度(图2)。此外，直 接对比表明，硫蒽酮在减轻乳腺癌细胞活力上明显比CQ更有效，硫蒽酮的平均IC5Q是7.2μΜ， 对比CQ的平均IC 5Q是66μΜ (图2)。
[0192] 实施例3
[0193] 硫蒽酮诱导组织蛋白酶D表达
[0194] 硫蒽酮对癌细胞作用的表征(使用Affymetrix表达阵列）。为进一步表征硫蒽酮对 乳腺