一种发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂及其制备方法。其目的是为解决生产冬虫夏草菌丝体后的发酵液丢弃处理，浪费资源、能源、人力、物力和财力，且存在对周围水体及土壤污染的问题，满足市场对富含冬虫夏草胞外多糖成分产品的需求。其技术方案：菌种采集、菌种培养、无菌分离、低温培养、纯化、菌种鉴定、原始菌种保藏、发酵性能测定、液体发酵、菌液分离、发酵液浓缩、提取精制冬虫夏草胞外粗多糖；取发酵冬虫夏草胞外多糖相关辅料，混合均匀后过筛；制软材，制粒，干燥，整粒，即得发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂。本发明产品具有抗肿瘤、抗氧化、增强单核巨噬细胞的吞噬能力、提高血清IgG的含量、促进体外淋巴细胞转化和抗辐射等作用。
【专利说明】
一种发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂及其制备方法
技术领域
[0001]本发明涉及一种发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂及其制备方法，具体来说，是指对发酵冬虫夏草胞外多糖进行分离纯化添加辅料制得的颗粒剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002]发酵冬虫夏草菌粉是经菌种采集、菌种培养、无菌分离、低温培养、纯化、菌种鉴定、原始菌种保藏、发酵性能测定、液体发酵、菌液分离、菌丝体干燥等工艺制得。而发酵液常被作为废液进行处理，由于发酵液中含有大量微生物和其他功效成分，直接排放会对周围水体及土壤发生污染，需要经过高温高压灭菌处理才可以排放，不仅浪费了大量资源、能源、人力、物力和财力，而且对周围环境存在安全隐患。
[0003]试验表明，发酵冬虫夏草胞外多糖具有抗肿瘤、抗氧化、增强单核巨噬细胞的吞噬能力、提高血清中IgG的含量、促进体外淋巴细胞转化和抗辐射等作用。而冬虫夏草发酵液也含有多种功能性有效成分，如对病菌有抑制作用的多糖、虫草菌素、多肽类、甘露醇、单糖、有机酸、多胺、磷脂酰胆碱、微量元素及VB12等成分。它们的生理活性极其丰富多彩，可抗菌、抗癌、抗血小板凝结、抗辐射、改善和提高记忆力、调节机体免疫能力、钙离子拮抗、对脑和心脏在常压缺氧下有保护作用、镇静和镇痛等。
[0004]目前，对于发酵冬虫夏草胞外多糖的研究和生产属于空白。
[0005]在此基础上，本发明的实施，不仅提供了具有抗肿瘤、增强单核巨噬细胞的吞噬能力、提高小鼠血清中IgG的含量、对体外淋巴细胞转化有促进作用和抗辐射等作用的胞外多糖颗粒剂产品，最大限度的利用了冬虫夏草发酵液，变废为宝，还达到了节约资源、能源、人力、物力和财力，降低环境污染的目的。
【发明内容】
[0006]为解决人工发酵冬虫夏草方式生产冬虫夏草菌丝体后的发酵液丢弃处理，浪费资源、能源、人力、物力和财力，且存在对周围水体及土壤污染的问题，并为满足市场对富含胞外多糖成分产品的需求，本发明的目的在于提供一种利用人工发酵冬虫夏草方式生产冬虫夏草菌丝体后的发酵液生产冬虫夏草胞外多糖颗粒剂及其制备方法。该方法生产的冬虫夏草胞外多糖颗粒剂具有抗肿瘤、抗氧化、增强单核巨噬细胞的吞噬能力、提高血清中IgG的含量、促进体外淋巴细胞转化和抗辐射等作用。
[0007]为达到上述目的，本发明提供一种利用人工发酵冬虫夏草方式生产冬虫夏草菌丝体后的发酵液生产冬虫夏草胞外多糖颗粒剂，包括有:含量介于20%至55%重量百分比的发酵冬虫夏草胞外多糖、含量介于20%至60%重量百分比的填充剂、含量介于5%至20%重量百分比的缓释材料、含量介于I %至5 %重量百分比的粘合剂、含量介于0.5 %至I %重量百分比的崩解剂、以及含量介于0.1%至0.5%重量百分比的矫味剂。
[0008]所述的填充剂选自蔗糖或可溶性淀粉或乳糖或糊精或微晶纤维素中的一种或多种混合物；所述的缓释材料选自羟丙甲基纤维素或乙基纤维素或醋酸纤维素或乙基纤维素水分散体中的一种或多种混合物；所述的粘合剂选自糊精或聚维酮或乙基纤维素或羟丙基纤维素中的一种或多种混合物；所述的崩解剂选自羧甲基淀粉钠或微晶纤维素或交联羧甲基纤维素钠或低取代羟丙基纤维素中的一种或多种混合物；所述的矫味剂选自甜菊苷或阿斯巴坦中的一种或两种混合物；所述的润湿剂选自蒸馏水或食用乙醇中的一种或两种混合物。
[0009]优选的，用于发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂包括有:
[0010]含量为44%重量百分比的发酵冬虫夏草胞外多糖，80至100的筛粉；
[0011]含量为40%重量百分比的填充剂，所述填充剂是将含量介于20%至60%重量百分比的乳糖加上含量介于40%至80%重量百分比的可溶性淀粉混合均匀，粉碎过筛，80至100的筛粉；
[0012]含量为12%重量百分比的缓释材料，所述缓释材料是将含量介于10%至30%重量百分比的羟丙基甲基纤维素、含量介于20%至60%重量百分比的乙基纤维素、含量介于10%至70%重量百分比的醋酸纤维素混合均匀，粉碎过筛，80至100的筛粉；
[0013]含量为3%重量百分比的粘合剂，所述粘合剂是将聚维酮粉碎过筛，80至100的筛粉；
[0014]含量为0.7%重量百分比的崩解剂，所述崩解剂是将微晶纤维素粉碎过筛，80至100的筛粉；以及
[0015]含量为0.3%重量百分比的矫味剂,所述矫味剂是将甜菊苷粉碎过筛,80至100的筛粉。
[0016]本发明亦有关于发酵冬虫夏草胞外多糖的提取方法。
[0017]本发明的发酵冬虫夏草胞外多糖的提取方法，包括有:利用冬虫夏草菌株，液体发酵生产冬虫夏草菌丝体；发酵结束后，提取菌丝体并收集发酵液；发酵液用外加热式三效浓缩器浓缩，各效真空度和蒸发温度:一效-0.02?-0.04MPa, 70?90°C ;二效-0.04?-0.06MPa, 60?80°C;三效-0.06?-0.08MPa, 50?70°C，发酵液浓缩至相对密度1.20?1.35 ;将浓缩后的发酵液的pH调至6.5?8.5，常温静置I?4h，3000r/min?10000r/min离心5?20min去除沉淀；将75%?95%的食用乙醇以lL/min?10L/min的流速贴容器壁加入40r/min?500r/min的浓缩发酵液中，发酵液中乙醇浓度达到60%?75%时停止加入，停止搅拌，O?20°C静置8?12h后同收上清液并收集沉淀，沉淀即为冬虫夏草胞外粗多糖；对所得的粗多糖进行提纯，干燥，粉碎过筛，即得发酵冬虫夏草胞外多糖。
[0018]优选的，用于制备发酵冬虫夏草胞外多糖的方法包括有:
[0019]利用冬虫夏草菌株，液体发酵生产冬虫夏草菌丝体；
[0020]发酵结束后，提取菌丝体并收集发酵液；发酵液用外加热式三效浓缩器浓缩，各效真空度和蒸发温度:一效-0.025MPa, 80°C ;二效-0.05MPa, 70°C ;三效-0.07MPa, 60°C，发酵液浓缩至相对密度1.28 ;
[0021]将浓缩后的发酵液的pH调至7.0，常温静置1.5h,5000r/min离心1min去除沉淀；
[0022]将95%的食用乙醇以6L/min的流速贴容器壁加入100r/min的去除沉淀后的浓缩发酵液中，发酵液中乙醇浓度达到60%时停止加入，停止搅拌，4°C静置8h后回收上清液并收集沉淀，沉淀即为冬虫夏草胞外粗多糖；
[0023]对所得的粗多糖进行提纯，干燥，粉碎过筛，即得发酵冬虫夏草胞外多糖。
[0024]本发明还有关于发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂的制备方法。
[0025]本发明的发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂的制备方法，包括有:取发酵冬虫夏草胞外多糖，填充剂，缓释材料，崩解剂，矫味剂，混合均匀后过筛，取80?100目筛粉；将粘合剂加入含量为上述组分总重量5?25%的润湿剂中，所述润湿剂是用蒸馏水稀释至浓度为60%?80%的食用酒精；润湿剂与筛粉混合制软材，制粒，30?80°C干燥2?12小时，过筛，取20?40目筛粉，即得发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂。
[0026]优选的，用于制备发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂的方法包括有:
[0027]取发酵冬虫夏草胞外多糖，填充剂，缓释材料，崩解剂，矫味剂，混合均匀后过筛，取100目筛粉；
[0028]将粘合剂加入含量发酵冬虫夏草胞外多糖、填充剂、缓释材料、崩解剂、矫味剂和粘合剂总重量20%质量百分比的润湿剂中，所述润湿剂是用蒸馏水稀释至浓度为60%的食用酒精；
[0029]润湿剂与筛粉混合制软材，制粒；
[0030]60°C干燥8小时，过筛，取30目筛粉，即得发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂。
[0031]由本发明可以利用适合商业化生产的发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂，进而提供发酵冬虫夏草深加工产品满足市场需求，达到本发明的目的。
【具体实施方式】
[0032]以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
[0033](一 )冬虫夏草胞外多糖颗粒剂
[0034]实施例1
[0035]10.0Okg发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂包括有:
[0036]5.0Okg发酵冬虫夏草胞外多糖，100的筛粉；
[0037]2.60kg的填充剂，所述填充剂是将0.52kg重量百分比的乳糖加上2.08kg的可溶性淀粉混合均匀，粉碎过筛，100的筛粉；
[0038]2.0Okg的缓释材料，所述缓释材料是将0.20kg的羟丙基甲基纤维素、0.40kg的乙基纤维素、1.40kg的醋酸纤维素混合均匀，粉碎过筛，100的筛粉；
[0039]0.30kg的粘合剂，所述粘合剂是将0.30kg的聚维酮粉碎过筛，100的筛粉:
[0040]0.075kg的崩解剂，所述崩解剂是将0.075kg的微晶纤维素粉碎过筛，100的筛粉；以及
[0041]0.025kg的矫味剂，所述矫味剂是将0.025kg的甜菊苷粉碎过筛，100的筛粉。
[0042]所述冬虫夏草胞外多糖颗粒剂具有21.58IU/g的超氧化物歧化酶的活性。
[0043]实施例2
[0044]10.0Okg发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂包括有:
[0045]2.0Okg发酵冬虫夏草胞外多糖，100的筛粉；
[0046]6.0Okg的填充剂，所述填充剂是将1.20kg重量百分比的乳糖加上4.80kg的可溶性淀粉混合均匀，粉碎过筛，100的筛粉；
[0047]1.34kg的缓释材料，所述缓释材料是将0.134kg的羟丙基甲基纤维素、0.268kg的乙基纤维素、0.938kg的醋酸纤维素混合均匀，粉碎过筛，100的筛粉；
[0048]0.1Okg的粘合剂，所述粘合剂是将0.30kg的聚维酮粉碎过筛，100的筛粉；
[0049]0.05kg的崩解剂，所述崩解剂是将0.05kg的微晶纤维素粉碎过筛，100的筛粉；以及
[0050]0.0lkg的矫味剂，所述矫味剂是将0.0lkg的甜菊苷粉碎过筛，100的筛粉。
[0051]所述冬虫夏草胞外多糖颗粒剂具有5.62IU/g的超氧化物歧化酶的活性。
[0052]( 二 )用于制备发酵冬虫夏草胞外多糖的方法
[0053]实施例3
[0054]利用冬虫夏草菌株，液体发酵生产冬虫夏草菌丝体；
[0055]发酵结束后，提取菌丝体并收集发酵液；发酵液用外加热式三效浓缩器浓缩，各效真空度和蒸发温度:一效-0.04MPa,70°C ;二效-0.06MPa,60°C:三效-0.08MPa，50°C，发酵液浓缩至相对密度1.22 ;
[0056]将50L浓缩后的发酵液的pH调至6.5，常温静置1.5h，3000r/min离心20min去除沉淀；
[0057]将75%的食用乙醇以lL/min的流速贴容器壁加入40 r/min的去除沉淀后的浓缩发酵液中，发酵液中乙醇浓度达到60%时停止加入，停止搅拌，(TC静置8h后回收上清液并收集沉淀，沉淀即为冬虫夏草胞外粗多糖，得粗多糖3.62kg ；
[0058]对所得的粗多糖进行提纯，干燥，粉碎过筛，即得发酵冬虫夏草胞外多糖。
[0059]实施例4
[0060]利用冬虫夏草菌株，液体发酵生产冬虫夏草菌丝体；
[0061]发酵结束后，提取菌丝体并收集发酵液；发酵液用外加热式三效浓缩器浓缩，各效真空度和蒸发温度:一效-0.02MPa,90°C ;二效-0.04MPa,80°C ;三效-0.06MPa，80°C，发酵液浓缩至相对密度1.31 ;
[0062]将50L浓缩后的发酵液的pH调至8.5，常温静置4h，10000r/min离心5min去除沉淀；
[0063]将95%的食用乙醇以10L/min的流速贴容器壁加入500r/min的去除沉淀后的浓缩发酵液中，发酵液中乙醇浓度达到75%时停止加入，停止搅拌，20°C静置12h后回收上清液并收集沉淀，沉淀即为冬虫夏草胞外粗多糖，得粗多糖4.28kg ；
[0064]对所得的粗多糖进行提纯，干燥，粉碎过筛，即得发酵冬虫夏草胞外多糖。
[0065](三)用于制备发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂的方法
[0066]实施例5
[0067]取发酵冬虫夏草胞外多糖，填充剂，缓释材料，崩解剂，矫味剂，混合均匀后过筛，取80目筛粉；
[0068]将粘合剂加入含量发酵冬虫夏草胞外多糖、填充剂、缓释材料、崩解剂、矫味剂和粘合剂总重量25%质量百分比的润湿剂中，所述润湿剂是用蒸馏水稀释至浓度为60%的食用酒精；
[0069]润湿剂与筛粉混合制软材，制粒；
[0070]60°C干燥8小时，过筛，取20目筛粉，即得发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂。
[0071]实施例6
[0072]取发酵冬虫夏草胞外多糖，填充剂，缓释材料，崩解剂，矫味剂，混合均匀后过筛，取100目筛粉；
[0073]将粘合剂加入含量发酵冬虫夏草胞外多糖、填充剂、缓释材料、崩解剂、矫味剂和粘合剂总重量5%质量百分比的润湿剂中，所述润湿剂是用蒸馏水稀释至浓度为80%的食用酒精；
[0074]润湿剂与筛粉混合制软材，制粒；
[0075]60°C干燥8小时，过筛，取40目筛粉，即得发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂。
[0076]由上述可知本发明的具体制造及实施方法，确实可以解决目前人工发酵冬虫夏草方式生产冬虫夏草菌丝体后的发酵液处理方法的弊端。由于发酵液中含有大量微生物，直接排放会对周围水体及土壤发生污染，需要经过高温高压灭菌处理才可以排放，不仅浪费了大量资源、能源、人力、物力和财力，而且对周围环境存在安全隐患。
[0077]发酵冬虫夏草采集不易和生产困难之问题，并满足市场的需求，从而能够达成本发明的目的。
【主权项】
1.一种发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂，其特征在于其所采用的活性成分为发酵冬虫夏草胞外多糖，辅以其他药用辅料，其原料组分如下，各组重量百分比为:发酵冬虫夏草胞外多糖20%?55%、填充剂20%?60%、缓释材料5%?20%、粘合剂1%?5%、崩解剂0.5% ?I %、矫味剂 0.1%?0.5%。2.根据权利要求1所述的一种发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂，其特征在于:所述的填充剂选自蔗糖或可溶性淀粉或乳糖或糊精或微晶纤维素中的一种或多种混合物。3.根据权利要求1所述的一种发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂，其特征在于:所述的缓释材料选自羟丙基甲基纤维素或乙基纤维素或醋酸纤维素或乙基纤维素水分散体中的一种或多种混合物。4.根据权利要求1所述的一种发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂，其特征在于:所述的粘合剂选自糊精或聚维酮或乙基纤维素或羟丙基纤维素中的一种或多种混合物。5.根据权利要求1所述的一种发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂，其特征在于:所述的崩解剂选自羧甲基淀粉钠或微晶纤维素或交联羧甲基纤维素钠或低取代羟丙基纤维素中的一种或多种混合物。6.根据权利要求1所述的一种发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂，其特征在于:所述的矫味剂选自甜菊苷或阿斯巴甜中的一种或两种混合物。7.根据权利要求1所述的一种发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂，其特征在于:所述的发酵冬虫夏草胞外多糖通过以下步骤制得: (1)利用冬虫夏草菌株，液体发酵生产菌丝体； (2)发酵结束后，提取菌丝体并收集发酵液； ⑶发酵液用外加热式三效浓缩罐浓缩，各效真空度和蒸发温度:一效-0.02 ?-0.04MPa，70 ?90 °C ； 二 效-0.04 ?-0.06MPa，60 ?80 °C ；三效-0.06?-0.08MPa, 50?70°C，发酵液浓缩至相对密度1.20?L 35 ; (4)将75%?95 %的食用乙醇以lL/min?10L/min的流速贴壁加入40r/min?200r/min的浓缩发酵液中，发酵液中乙醇浓度达到60%?75%时停止加入，停止搅拌，O?20°C静置8?12h后收集沉淀得到粗多糖； (5)对粗多糖进行提纯，干燥，粉碎后即得发酵冬虫夏草胞外多糖。8.根据权利要求1?6所述的一种发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂，其特征在于:其制备方法如下:取发酵冬虫夏草胞外多糖，填充剂，缓释材料，崩解剂，矫味剂，混合均匀后过100目筛，润湿剂中加入粘合剂，与筛粉混合制软材，制粒，30?80°C干燥2?12小时，过筛，取20?40目筛粉，即得发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂。9.根据权利要求8所述的一种发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂，其特征在于:所述的润湿剂选自蒸馏水或食用乙醇中的一种或两种混合物。10.根据权利要求8所述的一种发酵冬虫夏草胞外多糖颗粒剂，其特征在于:所述的润湿剂的用量为5%?25% (重量)。
【文档编号】A61P39/06GK105878188SQ201410618258
【公开日】2016年8月24日
【申请日】2014年11月6日
【发明人】王玉花, 王辉
【申请人】王辉