专利名称：一种制备丝组环二肽的方法
技术领域：
本发明涉及一种制备环二肽的方法，特别是涉及一种制备丝组环二肽的方法。
背景技术：
环二肽常被发现存在于天然化合物当中。许多环二肽具有生物活性，如可以抑制胆固醇的生物合成、神经末稍对多巴胺的摄取、催乳激素的分泌、哺乳类细胞周期和白鼠进食等，甚至有的环二肽还具有植物生长调节活性。同时，很重要的一点，环二肽还是一些药物设计的平台。
目前，已有几种通过固相途径合成环二肽方法的报道。在固相肽合成中，环二肽常产生于二肽阶段而成为副产物。
发明内容
本发明的目的是提供一种简单有效的制备丝组环二肽的方法。
为实现上述目的，本发明采取以下技术方案一种制备丝组环二肽的方法，包括以下步骤1)将组氨酸甲酯与保护的丝氨酸反应，得到保护的丝组二肽甲酯；2)分别去羟基保护和氨基保护制成丝组二肽甲酯的三氟乙酸盐；3)将丝组二肽甲酯的三氟乙酸盐进行环化反应得到丝组环二肽。
其中，如下面的反应方程式所示，所述保护的丝组二肽甲酯，是组氨酸甲酯盐酸盐与保护的丝氨酸在1-羟基苯丙三氮唑(HOBt)和二环己基炭二亚胺(DCC)的作用下生成的。
所述氨基保护的丝组二肽甲酯，是保护的丝组二肽甲酯在钯碳和氢气的作用下去羟基保护生成的。
所述丝组二肽甲酯的三氟乙酸盐，是将氨基保护的丝组二肽甲酯用三氟乙酸处理得到的。
所述丝组环二肽，是丝组二肽甲酯的三氟乙酸盐在氨水与硅胶的作用下进行环化反应得到的。
如式I-式IV所示，用本发明的方法可以得到任何构型的丝组环二肽，即L-L型丝组环二肽、D-L型丝组环二肽、L-D型丝组环二肽和D-D型丝组环二肽。
式I 式II 式III 式IV本发明巧妙地采用液相方法合成丝组环二肽，简单、有效，四步反应的总产率可达69-84％。具有可观的经济实用价值，同时在药物设计合成领域具有广泛的应用前景。
具体实施例方式
实施例1、合成L-L型丝组环二肽1、将100毫克L型组氨酸甲酯盐酸盐(His-OCH3·2HCl)和83毫克三乙胺(Et3N)加入到4毫升N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中搅拌溶解，再加入60毫克HOBt和122毫克保护的L型丝氨酸(Boc-L-Ser(Bn)-OH)，冷却至0℃，滴入1毫升含有123毫克DCC的DMF溶液，并在该温度下搅拌2小时后，在室温下搅拌反应8小时。减压浓缩反应液并经硅胶柱层析分离得到保护的丝组二肽甲酯(Boc-L-Ser(Bn)-L-His-OCH3)170毫克，产率为93％。经电喷雾质谱(ESI-MS)和多级质谱(ESI-MS/MS)以及核磁共振谱(1H NMR)测定，证明所得产物正确。
2、将得到的保护的丝组二肽甲酯186毫克溶于3毫升甲醇和水(9∶1)的混和液，加入14毫克钯碳(Pd-C)并通氢气在室温下搅拌反应过夜。过滤、减压浓缩反应液并经硅胶柱层析分离得氨基保护的丝组二肽甲酯(Boc-L-Ser-L-His-OCH3)149毫克，产率为100％。经电喷雾质谱(ESI-MS)和多级质谱(ESI-MS/MS)以及核磁共振谱(1HNMR)测定，证明所得产物正确。
3、将得到的氨基保护的丝组二肽甲酯46毫克溶于1毫升三氟乙酸和水(9∶1)的混和液，在室温下静置过夜。减压浓缩反应液得L-L型丝组二肽甲酯的三氟乙酸盐(L-Ser-L-His-OCH3·TFA)46毫克，产率为96％。经电喷雾质谱(ESI-MS)和多级质谱(ESI-MS/MS)以及核磁共振谱(1H NMR)测定，证明所得产物正确。
4、将得到的丝组二肽甲酯的三氟乙酸盐34毫克溶于3毫升甲醇和25％氨水(100∶3)的混和液，加入2毫克柱层析用硅胶在室温下搅拌过夜完成环化反应。滤去硅胶减压浓缩反应液并经硅胶柱层析分离得L-L型丝组环二肽(C-Ser-His)19毫克。产率为94％。1H NMR(CD3OD，500MHz)7.05(s，1H)，5.69(s，1H)，2.62(t，1H，J＝11.5，5.5)，2.32(s，1H)，2.21(d，1H，J＝11.5)，2.02(d，1H，J＝11.5)，1.66(m，2H)；13C NMR(CD3OD，500MHz)169.3，169.2，135.4，130.9，119.3，64.0，59.1，31.6；ESI MS/MS(rel.int.)m/z 225(49)，207(55)，195(100)，179(22)，167(17)，证明所得产物正确。
实施例2、合成D-L型丝组环二肽1、将470毫克L型组氨酸甲酯盐酸盐(His-OCH3·2HCl)和394毫克三乙胺(Et3N)加入到100毫升N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中搅拌溶解，再加入290毫克HOBt和575毫克保护的D型丝氨酸(Boc-D-Ser(Bn)-OH)，冷却至0℃，滴入3毫升含有442毫克DCC的DMF溶液，并在该温度下搅拌2小时后，在室温下搅拌反应8小时。减压浓缩反应液并经硅胶柱层析分离得到保护的丝组二肽甲酯(Boc-D-Ser(Bn)-L-His-OCH3)800毫克，产率为92％。经电喷雾质谱(ESI-MS)和多级质谱(ESI-MS/MS)测定，证明了所得的产物。
2、将得到的保护的丝组二肽甲酯800毫克溶于3毫升甲醇和水(9∶1)的混和液，加入20毫克钯碳(Pd-C)并通氢气在室温下搅拌反应过夜。过滤、减压浓缩反应液并经硅胶柱层析分离得氨基保护的丝组二肽甲酯(Boc-D-Ser-L-His-OCH3)500毫克，产率为79％。经电喷雾质谱(ESI-MS)和多级质谱(ESI-MS/MS)测定，证明了所得的产物。
3、将得到的氨基保护的丝组二肽甲酯185毫克溶于3毫升三氟乙酸和水(9∶1)的混和液，在室温下静置过夜。减压浓缩反应液得D-L型丝组二肽甲酯的三氟乙酸盐(L-Ser-L-His-OCH3·TFA)190毫克，产率为99％。经电喷雾质谱(ESI-MS)和多级质谱(ESI-MS/MS)以及核磁共振谱(1H NMR)测定，证明了所得的产物。
4、将得到的丝组二肽甲酯的三氟乙酸盐70毫克溶于3毫升甲醇和25％氨水(100∶3)的混和液，加入2毫克柱层析用硅胶在室温下搅拌过夜完成环化反应。滤去硅胶减压浓缩反应液并经硅胶柱层析分离得D-L型丝组环二肽(C-Ser-His)42毫克。产率为94％。
以同样方法还可以得到L-D(C-Ser-D-His)和D-D(C-D-Ser-D-His)型环丝组二肽。
权利要求
1.一种制备丝组环二肽的方法，包括以下步骤1)将组氨酸甲酯与保护的丝氨酸反应，得到保护的丝组二肽甲酯；2)分别去羟基保护和氨基保护制成丝组二肽甲酯的三氟乙酸盐；3)将丝组二肽甲酯的三氟乙酸盐进行环化反应得到丝组环二肽。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述保护的丝组二肽甲酯，是组氨酸甲酯盐酸盐与保护的丝氨酸在HOBt和DCC的作用下生成的。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述去羟基保护，是保护的丝组二肽甲酯在钯碳和氢气的作用下完成的。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述去氨基保护，是将去羟基保护的丝组二肽甲酯用三氟乙酸处理完成的，其结果生成丝组二肽甲酯的三氟乙酸盐。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述丝组环二肽，是丝组二肽甲酯的三氟乙酸盐在氨水与硅胶的作用下进行环化反应得到的。
6.根据权利要求1-5中任意一项所述的方法，其特征在于所述丝组环二肽为L-L型丝组环二肽、D-L型丝组环二肽、L-D型丝组环二肽或D-D型丝组环二肽。
全文摘要
本发明公开了一种制备丝组环二肽的方法，本发明的技术方案包括以下步骤1)将组氨酸甲酯与保护的丝氨酸反应，得到保护的丝组二肽甲酯；2)分别去羟基保护和氨基保护制成丝组二肽甲酯的三氟乙酸盐；3)将丝组二肽甲酯的三氟乙酸盐进行环化反应得到丝组环二肽。本发明巧妙地采用液相方法合成丝组环二肽，简单、有效，具有可观的经济实用价值，同时在药物设计合成领域具有广泛的应用前景。
文档编号C07K5/12GK1500804SQ0214881
公开日2004年6月2日 申请日期2002年11月18日 优先权日2002年11月18日
发明者朱长进, 赵玉芬, 刘艳 申请人:清华大学