专利名称：可用于反流病的新化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及可用于治疗，尤其是用于抑制暂时性下食管括约肌松弛和治疗胃-食管反流病(GORD)的新化合物，以及它们的可药用盐、溶剂化物和立体异构物。本发明还涉及它们的制备方法，含有该治疗活性化合物的药物组合物及该活性化合物的治疗用途。
背景技术：
反流胃-食管反流病(GORD)是最普遍的上胃肠道疾病。目前的疗法是旨在减少胃酸分泌，或者通过提高食管清除能力、下食管括约肌紧张度和胃排空来减少食管与酸的接触。早期曾认为反流主要是由下食管括约肌张力减退造成的。然而近来的研究(例如Holloway & Dent(1990)Gastroenterol.Clin.N.Amer.19，517-535)表明，大多数反流发作是在暂时性下食管括约肌松弛(以后称作TLOSR)期间，即，不是由吞咽引起的松弛期间发生。研究还表明，在GORD患者中胃酸分泌通常是正常的。
因此，需要能减少TLOSR的发生并因此能防止反流的化合物。
在WO 87/04077和US 5,036,057中公开了适合抑制下食管括约肌松弛的含局部麻醉药的药物组合物。最近，WO 98/11885公开的GABAB、受体激动剂显示出能抑制TLOSR。
GABAB受体激动剂GABA(4-氨基丁酸)是中枢和外周神经系统中的一种内源性神经递质。GABA的受体传统上被分成GABAA和GABAB受体亚型。GABAB受体属于G-蛋白偶联受体的超家族。GABAB受体激动剂被认为可用于治疗CNS疾病，例如脊髓痉挛状态中的肌肉松弛、心血管病、哮喘、肠能动性障碍(例如应激性肠综合症(IBS))，并可作为促运动剂和镇咳药使用。还公开了GABAB受体激动剂可用于治疗呕吐(WO 96/11680)，以及如上所述，近来用于抑制TLOSR(WO 98/11885)。
研究得最多的GABAB受体激动剂是公开于瑞士专利CH 449,046中的巴氯芬(4-氨基-3-(氯苯基)丁酸)。巴氯芬已作为解痉挛剂使用了几年。EP 0356128 A2描述了一种特殊化合物(3-氨丙基)甲基次膦酸作为有效的GABAB受体激动剂在治疗中的应用。EP 0181833 A1公开了取代的3-氨基丙基次膦酸，发现该化合物对GABAB受体位有很高的亲和性。与巴氯芬相似，该化合物可用来作为速效肌肉松弛剂。EP 0399949 A1公开了据称是有效的GABAB受体激动剂的(3-氨丙基)甲基次膦酸的衍生物。据说这些化合物可用来作为肌肉松弛剂。EP0463969 A1和FR 2722192 A1都是与4-氨基丁酸衍生物有关的专利申请，该衍生物在丁基链的第3碳原子上有不同的杂环取代基。在J.Med.Chem.(1995)，38，3297-3312中讨论了几种次膦酸类似物在其对GABAB受体的亲合性及其肌肉松弛剂效力方面的结构-活性关系。此外，在Bioorg.& Med.Chem.Lett.(1998)，8，3059-3064中公开了一些亚磺酸类似物及其GABAB受体活性。
发明内容
本发明提供了式I新化合物及其可药用盐、溶剂化物和立体异构物， 其中R1代表氢，羟基，C1-C7烷基，C1-C7烷氧基或卤素；R2代表氢，羟基，巯基，卤素或氧基；R3代表氢或C1-C7烷基(任选地被羟基、巯基、C1-C7烷氧基、C1-C7硫代烷氧基、芳基或杂芳基取代)，芳基或杂芳基；R4代表氢，C1-C7烷基(任选地被芳基或杂芳基取代)，芳基或杂芳基；但以下化合物除外
(3-氨丙基)亚磺酸；(3-氨基-1-甲基丙基)亚磺酸的外消旋物；(3-氨基-3-甲基丙基)亚磺酸的外消旋物；(N-甲基-3-氨丙基)亚磺酸；(N-苄基-3-氨丙基)亚磺酸；(3-氨基-2-羟丙基)亚磺酸的外消旋物；(N-(4-氯苯基甲基)-3-氨丙基)亚磺酸；(N-(2-苯乙基)-3-氨丙基)亚磺酸。
根据本发明的一项实施方案，该新化合物是选自(3-氨基-2-氟丙基)亚磺酸，(2S)-(3-氨基-2-氟丙基)亚磺酸，(2R)-(3-氨基-2-氟丙基)亚磺酸，(2S)-(3-氨基-2-羟丙基)亚磺酸，(2R)-(3-氨基-2-羟丙基)亚磺酸和(3-氨基-2-氧丙基)亚磺酸。
在本发明的范围内，应该明白，当R2是氧基时，R2与碳之间的键是双键。
在本发明中，C1-C7烷基可以是直链、支链或环形的烷基，例如是C1-C4烷基，如甲基、乙基、正丙基或正丁基，以及异丙基、异丁基、仲丁基或叔丁基，但是也可以是C5-C7烷基，例如戊基、己基或庚基。
C1-C7烷氧基是例如C1-C4烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基或正丁氧基，以及异丙氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基，但是也可以是C5-C7烷氧基，例如戊氧基、己氧基或庚氧基。
C1-C7硫代烷氧基是例如C1-C4硫代烷氧基，例如硫代甲氧基、硫代乙氧基、硫代正丙氧基或硫代正丁氧基，以及硫代异丙氧基、硫代异丁氧基、硫代仲丁氧基或硫代叔丁氧基，但是也可以是C5-C7硫代烷氧基，例如硫代戊氧基、硫代己氧基或硫代庚氧基。
本文中使用的卤素是氯、氟、溴或碘中的任一种。
这里使用的芳基一词是指有6-14个碳原子的芳族环，包括单环和多环化合物，例如苄基或萘基，它们可任选地被一个多个取代基取代，例如任选地被一个或多个取代基(例如C1-C7烷基、C1-C7烷氧基、卤素、C1-C7硫代烷氧基、羟基、巯基、羧酸、羧酸酯、羧酸酰胺或腈)取代的多元环。
这里使用的杂芳基一词是指有5-14个碳原子的芳香环，包括单环和多环化合物，其中一个或几个环原子是氧、氮或硫。杂芳基可任选地被一个或多个取代基取代，取代基的实例包括C1-C7烷基、C1-C7烷氧基、C1-C7硫代烷氧基、卤素、羟基、巯基、羧酸、羧酸酯、羧酸酰胺或腈。
本发明的式I化合物具有两性本质，可以以内盐形式存在。它们也可以形成酸加成盐和与碱形成盐。这类盐特别是可药用的酸加成盐以及与碱形成的可药用盐。适合形成这些盐的酸包括例如无机酸，如盐酸、氢溴酸、硫酸或磷酸，或者有机酸，如磺酸和羧酸。与碱形成的盐是例如碱金属盐，如钠盐或碱盐，或碱土金属盐，如钙盐或镁盐，以及铵盐，例如与氨或有机胺形成的盐。这些盐可以用常规方法制备。
当分子中存在一个或多个立体中心时，式I化合物可以以立体异构混合物的形式存在，即，非对映体的混合物和/或外消旋物，或以单个立体异构物的形式存在，即，单个对映体和/或非对映体。化合物也可以是溶剂化物、例如水化物的形式。
式I化合物可用于抑制TLOSR，因此可用于治疗胃-食管反流病。所述的TLOSR的抑制也暗示式I化合物可用于治疗婴儿的反胃。有效地控制婴儿反胃会是对付由于摄入的营养过度损失而发育不良的一个重要途径。另外，该化合物可用于治疗与GORD有关或无关的哮喘、打嗝、咳嗽、疼痛、可卡因成瘾、打呃、IBS、消化不良、呕吐和伤害感受。
本发明的一个方面是式I化合物及其可药用盐、溶剂化物和立体异构物在药物制造中的应用 其中R1代表氢，羟基，C1-C7烷基，C1-C7烷氧基或卤素；R2代表氢，羟基，巯基，卤素或氧基；R3代表氢或C1-C7烷基(任选地被羟基、巯基、C1-C7烷氧基、C1-C7硫代烷氧基、芳基或杂芳基取代)，芳基或杂芳基；
R4代表氢，C1-C7烷基(任选地被芳基或杂芳基取代)，芳基或杂芳基；所述药物可用于抑制TLOSR，并因此用于治疗胃-食管反流病、婴儿反胃和治疗与GORD有关或无关的哮喘、打嗝、咳嗽、疼痛、可卡因成瘾、打呃、IBS、消化不良、呕吐和伤害感受。
本发明的另一方面是一种抑制TLOSR的方法，用于治疗胃-食管反流病、婴儿反胃、以及治疗与GORD有关或无关的哮喘、肌肉运动过度、打嗝、咳嗽、疼痛、可卡因成瘾、酒精戒除症、尼古丁依赖症、打呃、IBS、消化不良、呕吐和伤害感受，该方法包括用含有式I化合物及其可药用盐、溶剂化物和立体异构物的药物制剂治疗患有该病症的对象 其中R1代表氢，羟基，C1-C7烷基，C1-C7烷氧基或卤素；R2代表氢，羟基，巯基，卤素或氧基；R3代表氢或C1-C7烷基(任选地被羟基、巯基、C1-C7烷氧基、C1-C7硫代烷氧基、芳基或杂芳基取代)，芳基或杂芳基；R4代表氢，C1-C7烷基(任选地被芳基或杂芳基取代)，芳基或杂芳基。
本发明的再一方面是含有本发明化合物的药物制剂，其中含有治疗上可接受数量的式I化合物作为活性成分，并任选地与稀释剂、赋形剂或惰性载体结合使用。
“TLOSR”一词(暂时性下食管括肌松弛)在本文中按照以下文献定义Mittal，R.K.，Holloway，R.H.，Penagini，R.，Blackshaw，L.A.，Dent，J.，1995；Transient lower esophageal sphincterrelaxation.Gastroenterology 109，pp.601-610。
“反流”一词在本文中定义为，因为机械屏障暂时丧失，胃中的流体能够流入食管。
“GORD”(胃-食管倒流病)是根据以下文献定义van Heerwarden，M.A.，Smout A.J.P.M.，2000；Diagnosis of reflux disease.Bailliere’s Clin.Gastroenterol.14，pp.759-774。
“治疗”一词，除非特地说明，也包括“预防”。术语“治疗的”和“治疗上”应同样理解。
制备本发明的式I化合物可以用以下方法之一制备A)一种式II化合物 其中R1和R3同以上式I的定义，Pht是一个保护基，例如邻苯二甲酰亚氨基，Y是氢或保护基，例如C1-C7烷基，该式II化合物可以按照方案I利用合适的N-保护的氨基酸酯(其中R3的定义如上，W是一个保护基，例如C1-C7烷基，Pht同式II中的定义)与合适的被保护的磺酸衍生物(其中R1同式I中定义，Y同式II中定义)及一种碱，例如二异丙基氨基化锂，进行缩合反应来合成 方案1a)将式II化合物任选地利用酮缩醇的形成反应进行转化，以便保护该酮基；进行水解反应，随后进行脱氧卤化反应以得到磺酰卤；进行肼解作用以使N-保护基脱离，同时得到亚磺酸衍生物；任选地进行N-烷基化反应以便引入R4(如果希望R4不是氢)；随后进行水解反应，得到式III化合物 其中R1、R3和R4同以上式I中的定义；任选地将以上得到的化合物III转化成另一种式III化合物并/或将所形成的异构体混合物分离成个别的异构体和/或将形成的盐转化成游离的式III化合物和/或转化成另一种盐和/或将所形成的游离的式III化合物转化成与以上定义相应的盐，或者b)将式II化合物利用还原反应还原其酮基；在水解反应后进行脱氧卤化反应以便得到磺酰卤；进行肼解反应以去掉N-保护基，同时得到亚磺酸衍生物；任选地进行N-烷基化反应以便引入R4(如果希望R4不是氢)，随后进行水解反应得到式IV化合物 其中R1、R3、R4同以上式I中的定义，任选地将以上得到的化合物IV转化成另一种式IV化合物和/或将形成的异构体混合物分离成个别异构体和/或将形成的盐转化成游离的式IV化合物和/或转化成另一种盐和/或将形成的游离的式IV化合物转化成与以上定义相对应的盐，或者c)式II化合物利用还原反应后进行脱氧卤化反应，水解反应后脱氧卤化反应，进行转化，以便得到磺酰卤；进行肼解反应以去掉N-保护基，同时得到亚磺酸衍生物；任选地进行N-烷基化反应以便引入R4(如果希望R4不是氢)；随后进行水解反应，得到式V化合物
其中R1、R3和R4同式I定义，Halo是卤原子，任选地将以上得到的化合物V转化成另一种式V化合物和/或将形成的异构体混合物分离成个别的异构体和/或将形成的盐转化成游离的式V化合物和/或另一种盐，和/或将形成的游离的式V化合物的转化成与以上定义相对应的盐；或者B)一种式VI化合物 其中R1、R2和R3同式I中定义，Pht是一个保护基，例如邻苯二甲酰亚氨基，该式VI化合物可以按照方案2利用2，3-环氧丙基衍生物，例如合适的N-保护的2，3-环氧丙胺衍生物(其中R1和R3同以上式I中定义，Pht同以上式VI中定义)和2-硫基苯并噻唑及碱反应来合成 方案2a)式VI化合物进行肼解反应，随后如果希望将N-保护基从邻苯二甲酰亚氨基转化成例如叔丁氧羰基，进行酰化反应；任选地进行N-烷基化反应以便引入R4(如果希望R4不是氢)；进行氧化反应，接着进行还原反应，以得到亚磺酸；然后进行水解，得到式IV化合物 其中R1、R3和R4同式I中的定义；任选地将以上形成的化合物IV转化成另一式IV化合物并/或分离所形成的异构体混合物分离成个别的异构体和/或转化所形成的盐成游离的式IV化合物和/或另一种盐，和/或将形成的游离的式IV化合物转化成与以上定义相应的盐，或者b)式VI化合物肼解后进行酰化反应(如果希望将N-保护基由邻苯二甲酰亚氨基转化成例如叔丁氧羰基)；任选地进行N-烷基化反应以便引入R4(如果希望R4不是氢)；进行氧化反应然后酮缩醇形成反应；氧化反应后进行还原反应，以便得到亚磺酸，随后进行水解，得到式VII化合物 其中R1、R3、R4同式I中定义，任选地将以上形成的化合物VII转化成另一种式VII化合物并/或将形成的异构体混合物分离成个别异构体和/或将形成的盐转化成游离的式VII化合物和/或另一种盐，和/或将形成的游离的式VII化合物转化成与以上定义相对应的盐，或者c)式VI化合物任选地进行肼解，随后进行酰化反应(如果希望N-保护基由邻苯二甲酰亚氨基改变成例如叔丁基)；任选地进行N-烷基化反应以引入R4(如果希望R4不是氢)；进行脱氧卤化反应，氧化反应，随后进行还原反应，以便得到亚磺酸；然后进行水解反应以得到式VIII化合物
其中R1、R3和R4的定义同式I，Halo是卤原子，将以上形成的式VIII化合物任选地转化成另一种式VIII化合物并/或将形成的异构体混合物分离成个别的异构体和/或将形成的盐转化成游离的式VIII化合物和/或另一种盐，和/或将形成的式VIII化合物转化成与以上定义相应的盐；或者C)一种式IX化合物 其中R1、R2和R3同以上式I中的定义，该式IX化合物可以按照方案3利用两个连接的取代反应合成，反应中使用一种化合物(其中R1、R2和R3同以上式I中定义，L1和L2是离去基团)和邻苯二甲酰亚氨基化钾以及2-巯基苯并噻唑和一种碱
方案3式IX化合物任选地依次进行肼解和酰化反应(如果希望N-保护基由邻苯二甲酰亚氨基改变成例如叔丁氧羰基)；任选地进行N-烷基化反应以便引入R4(如果希望R4不是氢)；氧化反应进行还原反应以便得到亚磺酸；随后进行水解反应得到式I化合物 其中R1和R4与以上式I中的定义相同，任选地将以上形成的式I化合物转化成另一种式I化合物和/或将形成的异构体混合物分离成个别异构体和/或将形成的盐转化成游离的式I化合物和/或另一种盐，和/或将形成的游离的式I化合物转化成与以上定义相应的盐。
发明详述利用以下的非限制性实施例更详细地描述本发明。
实施例1.(2S)-(3-氨基-2-羟丙基)亚磺酸将(2S)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基磺酰基)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯(9.30g，25.0mmol)溶于乙醇(100ml)中，然后冷却至0℃。加入固体硼氢化钠(1.89g，50.0mmol)，然后将反应混合物温热至室温并搅拌过夜。将反应混合物再冷却至0℃，加入乙酸乙酯/HCl(15ml)使反应猝灭，然后搅拌1.5小时。减压除去溶剂，残余物用离子交换色谱法纯化(Dowex50WX-8-200，H+形式)。将粗产物悬浮于1∶1甲醇/水中，装在树脂柱上，用1∶1甲醇/水洗。洗脱液改成1∶1的甲醇/浓氢氧化铵以除去产物。减压浓缩含产物的级分得到固体，将其用甲醇研制，得到白色固体状(2S)-(3-氨基-2-羟丙基)亚磺酸(1.51g，43％)。关于(2S)-(3-氨基-2-羟丙基)亚磺酸的数据mp＝206-208℃，APCI质谱m/z＝140；旋光度[α]25D＝+86.94°(c＝1.0，水)；1H NMR(300MHz，D2O)δ4.14(m，1H)，3.11(dd，J＝13Hz，J＝3Hz，1H)，2.91(dd，J＝13Hz，J＝9Hz，1H)，2.61(dd，J＝13Hz，J＝9Hz，1H)，2.30(dd，J＝13Hz，J＝4Hz，1H)。
实施例2.(2R)-(3-氨基-2-羟丙基)亚磺酸将(2R)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基磺酰)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯(6.47g，17.3mmol)溶于乙醇(100ml)中，然后冷却至0℃。加入固体硼氢化钠(1.70g，44.9mmol)，将反应混合物温热至室温并搅拌过夜。然后将反应混合物再冷至0℃，加入乙酸乙酯/HCl(100ml)使反应猝灭，然后搅拌2小时。减压蒸发溶剂，残余物用离子交换色谱法纯化(Dowex50WX-8-200，H+形式)。将粗产物悬浮于1∶1的甲醇/水中，装在树脂柱上，用1∶1甲醇/水洗。将洗脱液改成1∶1的甲醇/浓氢氧化铵以除去该产物。减压浓缩含产物的级分得到固体，将其用甲醇研制，得到(2R)-(3-氨基-2-羟丙基)亚磺酸(1.03g，43％)，为白色固体。关于(2R)-(3-氨基-2-羟丙基)亚磺酸的数据mp＝210℃，APCI质谱m/z＝140；旋光度[α]25℃D＝-88.6°(c＝1.00，水)；1H NMR(300MHz，D2O)δ4.17(m，1H)，3.14(m，1H)，2.95(dd，J＝13Hz，J＝9Hz，1H)，2.63(dd，J＝13Hz，J＝9Hz，1H)，2.33(dd，J＝13Hz，J＝4Hz，1H)。
以下中间体被用来制备本发明化合物。
实施例33-氨基-(2R)-2-氟-1-丙烷亚磺酸[(2R)-3-[(1，1-二甲基乙基)磺酰]-2-氟丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(5g，16.8mmol)溶于二氯甲烷(60ml)中，冷却至0℃。在3分钟内向该快速搅拌的溶液中逐滴加入不稀释的三氟甲磺酸(12.5mL，141mmol)。2小时后在旋转蒸发仪上除去二氯甲烷，残余物冷却至0℃，然后加水(30mL)。过滤除去形成的任何沉淀物，然后将溶液装在Dowex 50WX 8-200柱上，该柱预先用1∶1甲醇/水洗，然后只用水洗。用水洗脱该柱，直到去掉所有的三氟甲磺酸，随后用3∶1的甲醇/浓氢氧化铵洗下产物。将合适的级分浓缩，得到粗制的3-氨基-2-氟-(2R)-1-丙烷亚磺酸。用硅胶柱色谱法纯化，用6∶3∶1的二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵洗脱，得到纯标题化合物(782mg，33％)，为白色固体。
数据mp 136-138℃，Rf＝0.35(二氯甲烷/甲醇/浓氢氧化铵(6∶3∶1)，茚三酮显示色)，m/z＝140(M-H)，1H NMR(300MHz，D2O)，δ5.22(m，0.5H)，5.06(m，0.5H)，3.32(m，2H)，2.88(m，1H)，2.48(m，1H)。
中间体实施例I1.(2S)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基磺酰)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯将(2S)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯(33.5g，68.8mmol，即，最大理论量)溶于二氯甲烷(750mL)中，用3-氯过氧苯甲酸(29.7g，172mmol)分小批处理。搅拌3天后，该混合物依次用碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗。有机层用硫酸镁干燥，过滤后减压浓缩，得到粗制的(2S)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基磺酰)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯。在硅胶上纯化，用4∶1的二氯甲烷/乙酸乙酯洗脱，得到(2S)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基磺酰)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯(9.30g，由(2S)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯出发为36％)，为白色固体。关于(2S)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基磺酰)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯的数据
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.22(d，1H)，8.04(d，1H)，7.70-7.60(m，2H)，5.03(m，1H)，4.48(m，1H)，4.19(m，1H)，3.72(m，2H)，3.50-3.30(m，2H)，1.43(s，9H)。
实施例I2.(2S)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯将N-[(2S)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基]邻苯二甲酰亚胺(25.5g，68.8mmol)在乙醇(550mL)中的悬浮液用水合肼(5.3mL，109mmol)处理，在50℃加热3小时。将反应混合物冷却，过滤后减压除去溶剂。残余物粗品溶于二氯甲烷(250ml)中，用二碳酸二叔丁酯(22.5g，103mmol)处理，搅拌过夜。减压除去溶剂，得到(2S)-3-(1，3-苯半噻唑-2-基硫)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯粗品。在硅胶上纯化，先用二氯甲烷洗脱，然后改成乙酸乙酯，得到(2S)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯(33.5g)，为油状物，其中夹杂着残余的二碳酸二叔丁酯。此化合物直接用于下一步骤。关于(2S)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯的数据1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.85(d，1H)，7.76(d，1H)，7.45(dd，1H)，7.55(dd，1H)，5.35(m，1H)，5.05(m，1H)，4.15(m，1H)，3.57-3.40(m，3H)，3.35-3.25(m，1H)，1.48(s，9H)。
实施例I3.N-[(2 S)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基]邻苯二甲酰亚胺将N-[(2S)-环氧乙烷-2-基甲基]邻苯二甲酰亚胺(18.4g，90.6mmol)和2-巯基苯并噻唑(15.8g，94.5mmol)在乙醇(530ml)中的悬浮液加热回流14.5小时。然后将反应混合物冷却，减压浓缩。粗制的混合物自乙醇中结晶，过滤后得到N-[(2S)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基]邻苯二甲酰亚胺(25.5g，76％)固体。关于N-[(2S)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基]邻苯二甲酰亚胺的数据
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.88(m，2H)，7.75(m，4H)，7.45-7.26(m，2H)，5.15(m，1H)，4.42(m，1H)，4.08-3.88(m，2H)，3.61(m，1H)，3.42(m，1H)。
实施例I4.N-[(2S)-环氧乙烷-2-基甲基]邻苯二甲酰亚胺将三苯膦(77.0g，294mmol)和邻苯二甲酰亚胺(44.2g，300mmol)在THF(330ml)中混合，冷却至0℃。各反应瓶中逐滴加入偶氮二羧酸二乙酯(52.2g，300mmol)和(S)-(-)-缩水甘油(24.3g，328mmol)在THF(110mL)中的溶液。一旦加完之后，将反应混合物温热至室温，同时搅拌过夜。减压除去溶剂，残余物在乙醚(1L)中搅拌1小时。过滤除去固体，滤液在减压下浓缩，得到粗制的N-[(2S)-环氧乙烷-2-基甲基]邻苯二甲酰亚胺。此粗产物自乙醇中结晶纯化，得到N-[(2S)-环氧乙烷-2-基甲基]邻苯二甲酰亚胺(18.4g，30％)，为白色固体。关于N-[(2S)-环氧乙烷-2-基甲基]邻苯二甲酰亚胺的数据手性HPLC97％ee(Daicel Chiralpak AD柱)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.88(m，2H)，7.76(m，2H)，3.97(dd，1H)，3.83(dd，1H)，3.27(m，1H)，2.82(m，1H)，2.71(m，1H)。
实施例I5.(2R)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基磺酰)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯将(2R)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯(18.0g，52.8mmol)溶于二氯甲烷(700ml)中，然后分小份加入3-氯过氧苯甲酸(22.8g，132mmol)。搅拌3天后，该混合物依次用碳酸氢钠溶液和氯化钠饱和溶液洗。有机层用硫酸镁干燥，过滤后减压浓缩，得到粗制的(2R)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基磺酰)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯。在硅胶上纯化，用4∶1的二氯甲烷/乙酸乙酯洗脱，得到(2R)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基磺酰)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯(6.47g，33％)，为白色固体。关于(2R)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基磺酰)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯的数据
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.22(d，1H)，8.04(d，1H)，7.70-7.60(m，2H)，5.03(m，1H)，4.48(m，1H)，4.19(m，1H)，3.72(m，2H)，3.51-3.30(m，2H)，1.43(s，9H)。
实施例I6.(2R)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯将N-[(2R)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基]邻苯二甲酰亚胺(22.5g，60.7mmol)在乙醇(500ml)中的悬浮液用水合肼(4.0mL，82.4mmol)处理，在50℃加热4小时。将反应混合物冷却，过滤并减压去除溶剂。粗制的残余物溶于二氯甲烷(500mL)中，用二碳酸二叔丁酯(19.9g，91.1mmol)处理，然后搅拌过夜。减压除去溶剂，得到粗制的化合物2。在硅胶上纯化，最初用二氯甲烷洗脱，然后改换成乙酸乙酯，得到油状的(2R)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯(18.0g，87％)。关于(2R)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯的数据1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.80(d，1H)，7.71(d，1H)，7.40(dd，1H)，7.30(dd，1H)，5.35(m，1H)，5.00(m，1H)，4.10(m，1H)，3.52-3.35(m，3H)，3.30-3.20(m，1H)，1.45(s，9H)。
实施例I7.N-[(2R)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基]邻苯二甲酰亚胺将化合物N-[(2R)-环氧乙烷-2-基甲基]邻苯二甲酰亚胺(21.1g，104mmol)和2-巯基苯并噻唑(17.4g，104mmol)在乙醇(600mL)中的悬浮液加热回流16.5小时。然后将反应混合物冷却，减压浓缩。粗制的混合物自乙醇中结晶，过滤，得到N-[(2R)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基]邻苯二甲酰胺(22.5g，59％)，为黄色固体。关于N-[(2R)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基]邻苯二甲酰亚胺的数据
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.88(m，2H)，7.75(m，4H)，7.45-7.26(m，2H)，5.18(m，1H)，4.42(m，1H)，4.08-3.88(m，2H)，3.61(m，1H)，3.42(m，1H)。
实施例I8.N-[(2R)-环氧乙烷-2-基甲基]邻苯二甲酰亚胺对三苯膦(49.5g，189mmol)和邻苯二甲酰亚胺(28.4g，193mmol)在THF(220mL)中混合并冷却至0℃。向反应瓶中逐滴加入偶氮二羧酸二乙酯(33.6g，193mmol)和(R)-(+)-缩水甘油(16.4g，222mmol)在THF(75ml)中的溶液。一旦反应完全，即将反应混合物温热至室温并搅拌过夜。减压除去溶剂，残余物在乙醚(750mL)中搅拌1小时。过滤除去固体，滤液减压蒸发，得到粗制的N-[(2R)-环氧乙烷-2-基甲基]邻苯二甲酰亚胺。将该粗产物用硅胶色谱法纯化，使用1∶1庚烷/乙酸乙酸作洗脱剂，得到化合物N-[(2R)-环氧乙烷-2-基甲基]邻苯二甲酰亚胺(19.1g，50％)，为白色固体。N-[(2R)环氧乙烷-2-基甲基]邻苯二甲酰亚胺的数据1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.88(m，2H)，7.76(m，2H)，3.97(dd，1H)，3.83(dd，1H)，3.27(m，1H)，2.82(m，1H)，2.71(m，1H)。
实施例I9[(2R)-2-氟-3-[(甲磺酰)氧]丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(实施例4化合物的中间体将[(2R)-2-氟-3-羟丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(1627g，8.43mol)溶于THF(7100mL)中并用三乙胺(1117g，11mol)处理，将该混合物冷却至0-5℃。以保持温度在0-5℃的速度逐滴加入甲磺酰氯(940g，8.21mol)。30分钟后再加入三乙胺(225g，2.22mol)和甲磺酰氯(185g，1.62mol)。2小时后中入水(8000ml)猝灭反应，同时保持温度低于10℃，用叔丁基甲基醚(8000ml)萃取，分离出有机相。用水(5000mL)洗该溶液，用无水硫酸镁干燥，过滤并浓缩成残余物，在接近完成浓缩时变成浆体。该浆体随后用己烷(3000mL)处理，冷却至0-5℃，过滤，固体用己烷(1000ml)洗。将滤液浓缩成残余物，自己烷溶液中结晶分离出第二批产物。两批产物的分析表明是纯产物样品，因此将其合并后在40-50℃下真空干燥，得到白色晶状产物(1240g，53％)。
数据1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.89(m，1.5H)，4.74(m，0.5H)，4.43(m，1H)，4.36(m，1H)，3.50(m，1H)，3.43(m，1H)，3.08(s，3H)，1.45(s，9H)。
实施例I10[(2R)-3-[(1，1-二甲基乙基)硫]-2-氟丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(实施例4化合物的中间体2)将[(2R)-2-氟-3-[(甲磺酰)氧]丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(13.0g，47.9mmol)、2-甲基-2-丙硫醇(5.39mL，47.8mmol)和碳酸铯(23.4g，71.8mmol)在乙腈(300mL)中混合并加热回流3.5小时。将粗制的反应混合物过滤以除去固体，将滤液减压浓缩。用硅胶柱色谱法纯化，90∶10的二氯甲烷/乙酸乙酯作洗脱液，得到[(2R)-3-[(1，1-二甲基乙基)硫]-2-氟丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯，为油状物(11.1g，87％)。
数据1H NMR(300MHz，CDCl3)δ4.87(br s，1H)，4.72(m，0.5H)，4.58(m，0.5H)，3.59(m，1H)，3.30(m，1H)，2.78(m，2H)，1.32(s，9H)，1.45(s，9H)。
实施例I11[(2R)-3-[(1，1-二甲基乙基)磺酰]-2-氟丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(实施例4化合物的中间体3)将[(2R)-3-[(1，1-二甲基乙基)硫]-2-氟丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(11.1g，41.9mmol)溶于二氯甲烷(300mL)中，在冰浴中冷却。分批加入3-氯过氧苯甲酸(23.3g，77％，0.10mol)，然后将混合物温热至室温。2小时后加入碳酸钾稀溶液，反应混合物用二氯甲烷萃取，用硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，得到粗制的[(2R)-3-[(1，1-二甲基乙基)磺酰]-2-氟丙基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯。用硅胶柱色谱法纯化，用90∶10的二氯甲烷/乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物，为白色固体(8.12g，65％)。
数据
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.28(m，0.5H)，5.12(m，0.5H)，4.98(br s，1H)，3.65-3.27(m，4H)，1.48(s，9H)，1.46(s，9H)。
药物制剂本发明的式I化合物可以作为活性成分用于口服、直肠、硬膜外、静脉内、肌内、皮下、鼻内给药和以输注方式或任何其它合适途径给药的药物制剂中。优选的服药途径是口服或注射/输注。
药物制剂中含有本发明化合物和与其组合的一种或多种可药用的组分。成品剂型是用已知的药学方法制造的。通常活性化合物量占制剂重量的0.1-95％，在用于肠道外给药的制剂中优选占0.2-20％重量，在用于口服给药的制剂中优选占1-50％重量。
在制备用于口服的含本发明化合物的固体剂型药物制剂中，所选择的化合物可以与可药用的固体组分(其中有例如崩解剂和润滑剂)混合。然后将混合物加工成粒剂、片剂、胶囊剂或香囊剂。
用于直肠给药的剂量单元可以制备成栓剂剂型，明胶直肠胶囊形式，配好备用的微灌肠剂形式，或是在用药前的即刻于合适溶剂中重新组成的干的微灌肠剂的形式。
用于口服给药的液体制剂可以配制成浆剂或混悬剂的形式，或者是使用前用合适溶剂重新组成的干混合物的形式。
用于肠道外给药的溶液剂可配制成本发明化合物在可药用的溶剂中的溶液并分装在安瓿或小瓶中。它们也可以制备成使用前临时用合适溶剂重组的干制剂。
活性化合物的典型日剂量将取决于多种因素，例如每个患者的个别需要，用药途径和疾病本身。一般来说，剂量是在每天每kg体重1μg至100mg的范围内。本发明的另一方面是每天每kg体重服用活性化合物10μg至20mg。该活性成分在一种实施方案中可以是每天用药一次，在另一实施方案中可以每天用药几次，在又一实施方案中则可以常常少于每天一次。
生物学研究[3H]GABA放射性配体结合试验基本上如前所述地由Sparague Dawley雄性大鼠的全脑制备大鼠突触膜(Zukin等(1974)，Proc.Natl.Acad.USA 71，4802-4807)。使用96孔板，在含有20nM[3H]GABA(比活性3×1012贝克勒尔(TBq)/mmol)、试验化合物或溶剂、及80μg突触膜蛋白的200μl TCI(Tris异四氢烟酸钙)缓冲液(50mM Tris(三(羟甲基)氨基甲烷)，pH 7.4，2.5mM CaCl2和40μM异四氢烟酸)中进行Olpe等((1990)Eur.J.Pharmacol.187，27-38)改良的[3H]GAPA竞争试验。在室温下培养12-20分钟后，利用96孔板细胞收取器(Skatron或Tomtec)经过预先用0.3％聚亚乙基亚胺处理的玻璃纤维滤器(Printed filtermat Bfilters)快速过滤，使培养中止。将滤器用含50mM Tris(三(羟甲基)氨基甲烷)和2.5mM CaCl2、pH 7.4的4℃缓冲液洗，然后在55℃下干燥。将MeltiLex B/HS闪烁剂片(Wallac)于滤器上熔化，在Microbeta闪烁计数器(Wallac)上测定放射性。
结果和讨论正如在结合试验和回肠试验中的低IC50及EC50分别揭示的，本发明化合物对于GABAB受体有高的亲合性和效能。还发现本发明化合物在动物模型中静脉内及口服给药时能减少TLOSR。另外，CNS副作用(如由小鼠体温降低所测定的)观察不到或只在高剂量时出现。因此，治疗量(在狗模型中抑制TLOSR)和引起副作用(在鼠模型)的剂量之间的差别出乎意料地高。
权利要求
1.一种式I化合物及其可药用盐、溶剂化物和立体异构物 其中R1代表氢；R2代表羟基，氟或氧基；R3代表氢；R4代表氢；但(3-氨基-2-羟丙基)亚磺酸的外消旋物除外。
2.权利要求1的化合物，该化合物是(3-氨基-2-氟丙基)亚磺酸。
3.权利要求2的化合物，该化合物是(2S)-(3-氨基-2-氟丙基)亚磺酸。
4.权利要求2的化合物，该化合物是(2R)-(3-氨基-2-氟丙基)亚磺酸。
5.权利要求1的化合物，该化合物是(2S)-(3-氨基-2-羟丙基)亚磺酸。
6.权利要求1的化合物，该化合物是(2R)-(3-氨基-2-羟丙基)亚磺酸。
7.权利要求1的化合物，该化合物是(3-氨基-2-氧丙基)亚磺酸。
8.权利要求1-7中任一项的化合物用于治疗。
9.式I化合物及其可药用的盐、溶剂化物及立体异构物在制造用于抑制下食管括约肌松弛的药物中的应用。 其中R1代表氢、R2代表羟基、氟或氧基，R3代表氢，R4代表氢。
10.式I化合物及其可药用的盐、溶剂化物及立体异构物在制造用于治疗胃-食管反流病的药物中的应用 其中R1代表氢、R2代表羟基、氟或氧基，R3代表氢，R4代表氢。
11.式I化合物及其可药用的盐、溶剂化物及立体异构物在制造用于治疗婴儿反胃的药物中的应用 其中，R1代表氢、R2代表羟基、氟或氧基，R3代表氢，R4代表氢。
12.权利要求1的化合物及其可药用的盐、溶剂化物和立体异构物在制造用于治疗与GORD有关或无关的哮喘、肌肉运动过度、打嗝、咳嗽、疼痛、可卡因成瘾、酒精戒除症、尼古丁依赖、打呃、IBS、消化不良、呕吐或伤害感受的药物中的应用 其中R1代表氢、R2代表羟基、氟或氧基，R3代表氢，R4代表氢。
13.一种用于抑制暂时性下食管括约肌松弛的方法，该方法中向需要这种抑制作用的对象施用治疗有效量的式I化合物或其可药用的盐、溶剂化物和立体异构物，以及任选一起服用的可药用的载体 其中R1代表氢、R2代表羟基、氟或氧基，R3代表氢，R4代表氢。
14.一种用于治疗胃-食管反流病的方法，该方法中向患有该病症的患者施用治疗有效量的式I化合物或其可药用的盐、溶剂化物和立体异构物，以及任选一起服用的可药用的载体 其中R1代表氢、R2代表羟基、氟或氧基，R3代表氢，R4代表氢。
15.一种用于治疗婴儿反胃的方法，该方法中向患有该病症的患者施用治疗有效量的式I化合物或其可药用的盐、溶剂化物和立体异构物，以及任选一起服用的可药用的载体 其中R1代表氢、R2代表羟基、氟或氧基，R3代表氢，R4代表氢。
16.一种用于治疗与GORD有关或无关的哮喘、肌肉运动过度、打嗝、咳嗽、疼痛、可卡因成瘾、酒精戒除症、尼古丁依赖、打呃、IBS、消化不良、呕吐或伤害感受的方法，该方法中间患有所述症疾的对象施用治疗有效量的式I化合物或其可药用的盐、溶剂化物和立体异构物，以及任选一起服用的可药用的载体 其中R1代表氢、R2代表羟基、氟或氧基，R3代表氢，R4代表氢。
17.一种药物制剂，其中含有作为活性成分的治疗有效量的权利要求1的式I化合物，以及至少一种药理和药学上可接受的载体。
18.一种化合物，选自(2S)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基磺酰)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯，(2S)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯，N-[(2S)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基]邻苯二甲酰亚胺，N-[(2S)-环氧乙烷-2-基甲基]邻苯二甲酰亚胺，(2R)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基磺酰)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯，(2R)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基氨基甲酸叔丁酯，N-[(2R)-3-(1，3-苯并噻唑-2-基硫)-2-羟丙基]邻苯二甲酰亚胺和N-[(2R)-环氧乙烷-2-基甲基]邻苯二甲酰亚胺。
全文摘要
新颖的式(I)化合物，其中R
文档编号C07D277/00GK1514825SQ02811455
公开日2004年7月21日 申请日期2002年6月4日 优先权日2001年6月8日
发明者K·菲茨帕特里克, W·盖斯, A·莱曼, G·森登, S·冯翁格尔, K 菲茨帕特里克, 谈穸 申请人:阿斯特拉曾尼卡有限公司