专利名称：银杏内酯提取和纯化工艺的制作方法
技术领域：
本发明属于中药制药领域，涉及的是从银杏叶中提取纯化银杏叶主要活性成分银杏内酯的工艺。
背景技术：
银杏内酯类化合物是国内外文献一致公认的強活性的血小板活化因子拮抗剂。血小板活化因子是心脑血管等多种疾病发病的重要介质。2001年沈阳药科大学张预阳等研究证明银杏内酯B是血小板活化因子强抑制剂，而银杏内酯A、C等具有协同作用。用银杏内酯32mg/kg能降低小鼠的死亡时间；4、8、16mg/kg能降低MCAO大鼠脑梗塞范围，改善行为障碍及脑组织病理形态。同年中国药科大学王秋娟等研究证明银杏内酯10、20、40mg/kg使脑缺血大鼠神经行为明显改善，脑梗塞面积和脑含水量显著降低；研究表明银杏内酯具有降低缺血后脑组织匀浆中的MDA、LD含量，提高SOD和GSH活性。脑组织病理切片证实银杏内酯对神经细胞有保护作用。结论是银杏内酯对大鼠局灶性脑缺血有保护作用。文献研究认为凡在缺血组织中，由于血小板聚集使组织血流量减少，影响该组织细胞机能恢复。倘若脑组织的血流量不足，则可导致多发性脑缺血或中风。银杏内酯类化合物在临床可用于缺血性中风及脑梗塞的治疗已得到文献和大量实验研究的支持认同。基于此，对银杏叶中银杏内酯类化合物的研究，开发和应用已成为当前新药研发的热点。但是银杏叶中银杏内酯含量低，目前用于提取银杏内酯的工艺成本高，得率低，无法满足科研、生产和应用的需求。为此寻找优化的银杏内酯提取工艺，也是近年来大家研究的课题之一。
发明内容
本发明的目的是提供一种成本低、得率高、安全性好的银杏内酯提取和纯化工艺。
本发明的目的是通过下列措施实现的一种银杏内酯的提取和纯化工艺，包含下列步骤称取银杏干叶，粉碎，按药材重量加数倍量的乙醇或甲醇提取，提取液回收醇后用脱脂溶剂除杂，萃取，再除杂，得粗制品，用乙醇重结晶，过滤，干燥得银杏内酯精制品。
所述的提取和纯化工艺，其中银杏干叶提取所用的乙醇是浓度为5％乙醇～95％乙醇，甲醇是浓度为5％甲醇～无水甲醇，乙醇或甲醇的用量为药材重量的2～10倍。
所述的提取和纯化工艺，其中脱脂溶剂是四氯化碳、煤油或汽油。
所述的提取和纯化工艺，其中萃取溶剂为丁酮、正丁醇、乙醚、氯仿或乙酸乙酯。
所述的提取和纯化工艺，其中再除杂溶剂为饱和石灰水、0.4-5％硼砂水溶液、0.5-5％碳酸氢钾溶液或5-15％醋酸钠溶液。
所述的提取和纯化工艺，其中银杏内酯重结晶溶液是浓度为40～95％乙醇溶液，银杏内酯干燥温度为80～90℃。
本发明的优点1、本法采用溶剂法提取纯化银杏内酯，割除国内目前常用的树脂柱和其他吸附剂生产银杏内酯。本法操作简单，车间设备投入少，无须增设树脂柱等特殊车间。
2、本法除杂溶剂为汽油，石灰水、硼砂水溶液，比目前常用的石油醚、氯仿等价格便宜，成本低，安全性高。
3、本法常用提取溶剂为稀醇溶液，比目前常用的丙酮溶液毒性小，价格低廉。
4、本法提取银杏内酯转移率达60％以上(结果见表1)。
表1 本发明三批银杏内酯样品检测结果
5、本法提取银杏内酯A、B、C及白果内酯总含量高达92％以上，其中银杏内酯B含量达40％以上(结果见表2)。
表2 按本发明提取银杏内酯多个批号测定结果
6、本法提取银杏内酯中主要杂质银杏酚酸含量可以小于百万分之二(结果见表3)。
表3 本发明提取银杏内酯中主要杂质银杏酚酸含量测定结果
上述表1、2、3测定结果均按照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。(批号031016、031028、040109是按实施例2分3次制备获得的银杏内酯，批号031110、040105、040107是按实施例4分3次制备获得的银杏内酯)具体实施方式
以下通过实施例对本发明作进一步的阐述，但不限制本发明。
实施例1称取银杏叶200克粉碎，加80％乙醇回流提取3次，乙醇每次用量为药材重量的8倍，每次回流时间为2小时。合并3次提取液，回收乙醇至无醇味，用汽油脱脂5次，水相用丁酮萃取5次，合并丁酮液，用饱和石灰水洗涤再除杂，回收丁酮液，得银杏内酯粗品，用40％乙醇液重结晶，放置，过滤，90℃干燥，得银杏内酯精制品。
经测定银杏内酯转移率达60％以上，银杏内酯A、B、C及白果内酯总含量高达92％以上，其中银杏内酯B含量达40％以上，主要杂质银杏酚酸含量小于百万分之二。
实施例2称取银杏叶200克粉碎，加70％乙醇回流提取3次，乙醇每次用量为药材重量的7倍，回流时间分别为2.5、2.5、2小时。合并3次提取液，回收乙醇至无醇味，用四氯化炭脱脂5次，水相用乙醚萃取6次，合并乙醚液，0.4％硼砂水溶液洗涤再除杂，回收乙醚，得银杏内酯粗品，用50％乙醇液重结晶，放置，过滤，90℃干燥，得银杏内酯精制品。
经测定银杏内酯转移率达60％以上，银杏内酯A、B、C及白果内酯总含量高达92％以上，其中银杏内酯B含量达40％以上，主要杂质银杏酚酸含量小于百万分之二。
实施例3称取银杏叶200克粉碎，加10％甲醇温浸提取3次，甲醇每次用量为药材重量的10倍，温浸时间每次5小时。合并3次提取液，回收甲醇，用四氯化炭脱脂5次，水相用乙醚萃取6次，合并乙醚液，用0.5％碳酸氢钾溶液洗涤再除杂，回收乙醚，得银杏内酯粗品，用70％乙醇液重结晶，放置，过滤，80℃干燥，得银杏内酯精制品。
经测定银杏内酯转移率达60％以上，银杏内酯A、B、C及白果内酯总含量高达92％以上，其中银杏内酯B含量达40％以上，主要杂质银杏酚酸含量小于百万分之二。
实施例4称取银杏叶200克粉碎，加70％乙醇回流提取3次，乙醇用量分别为药材重量的8、6、5倍，回流时间分别为3.0、2.5、2.0小时。合并3次提取液，用汽油脱脂6次，水相用乙酸乙酯萃取6次，合并乙酸乙酯液，用5％醋酸钠洗涤再除杂，回收乙酸乙酯，得银杏内酯粗品，用80％乙醇液重结晶，放置，过滤，80℃干燥，得银杏内酯精制品。
经测定银杏内酯转移率达60％以上，银杏内酯A、B、C及白果内酯总含量高达92％以上，其中银杏内酯B含量达40％以上，主要杂质银杏酚酸含量小于百万分之二。
实施例5称取银杏叶200克粉碎，加70％甲醇温浸提取3次，甲醇每次用量为药材重量的4倍，温浸时间每次2小时。合并3次提取液，回收甲醇，用四氯化炭脱脂5次，水相用氯仿萃取6次，合并氯仿液，用0.5％碳酸氢钾溶液洗涤再除杂，回收氯仿，得银杏内酯粗品，用90％乙醇液重结晶，放置，过滤，80℃干燥，得银杏内酯精制品。
经测定银杏内酯转移率达60％以上，银杏内酯A、B、C及白果内酯总含量高达92％以上，其中银杏内酯B含量达40％以上，主要杂质银杏酚酸含量小于百万分之二。
实施例6称取银杏叶200克粉碎，加60％乙醇回流提取3次，乙醇每次用量为药材重量的8倍，回流时间分别为3、3、2.5小时。合并3次提取液，回收乙醇至无醇味，用四氯化炭脱脂5次，水相用正丁醇萃取6次，合并正丁醇液，0.4％硼砂水溶液洗涤再除杂，回收正丁醇，得银杏内酯粗品，用95％乙醇液重结晶，放置，过滤，90℃干燥，得银杏内酯精制品。
经测定银杏内酯转移率达60％以上，银杏内酯A、B、C及白果内酯总含量高达92％以上，其中银杏内酯B含量达40％以上，主要杂质银杏酚酸含量小于百万分之二。
权利要求
1.一种银杏内酯的提取和纯化工艺，其特征在于包含下列步骤称取银杏干叶，粉碎，按药材重量加数倍量的乙醇或甲醇提取，提取液回收醇后用脱脂溶剂除杂，萃取，再除杂，得粗制品，用乙醇重结晶，过滤，干燥得银杏内酯精制品。
2.根据权利要求1所述的提取和纯化工艺，其特征在于银杏干叶提取所用的乙醇是浓度为5％乙醇～95％乙醇，甲醇是浓度为5％甲醇～无水甲醇，乙醇或甲醇的用量为药材重量的2～10倍。
3.根据权利要求1所述的提取和纯化工艺，其特征在于脱脂溶剂是四氯化碳、煤油或汽油。
4.根据权利要求1所述的提取和纯化工艺，其特征在于萃取溶剂为丁酮、正丁醇、乙醚、氯仿或乙酸乙酯。
5.根据权利要求1所述的提取和纯化工艺，其特征在于再除杂溶剂为饱和石灰水、0.4-5％硼砂水溶液、0.5-5％碳酸氢钾溶液或5-15％醋酸钠溶液。
6.根据权利要求1所述的提取和纯化工艺，其特征在于银杏内酯重结晶溶液是浓度为40～95％乙醇溶液，银杏内酯干燥温度为80～90℃。
全文摘要
本发明公开了一种银杏内酯提取和纯化工艺。该工艺包含下列步骤称取银杏干叶，粉碎，按药材重量加数倍量的乙醇或甲醇提取，提取液回收醇后用脱脂溶剂除杂，萃取，再除杂，得粗制品，用乙醇重结晶，过滤，干燥得银杏内酯精制品。该工艺成本低、污染少、安全性高、所得银杏内酯纯度高。
文档编号C07D307/00GK1733768SQ20051004126
公开日2006年2月15日 申请日期2005年7月29日 优先权日2005年7月29日
发明者曹庆先, 楼凤昌, 成仁曼, 薛永新, 薛永宏, 时丹 申请人:四川恩威中医药研究开发有限公司