Iap的吡咯烷抑制剂的制作方法

专利名称：Iap的吡咯烷抑制剂的制作方法
本申请根据35U.S.C.§119(e)(1)要求2004年12月20日提交的美国临时申请60/638,202的优先权，其全文引用在此作为参考。
发明领域 本发明涉及可用于哺乳动物疗法和/或预防的有机化合物，特别是可用于治疗癌症的IAP蛋白抑制剂。

背景技术：
程序性细胞死亡(Apoptosis)或编程性细胞死亡是一种受遗传和生化调节的机理，它在无脊椎动物以及脊椎动物的发育和内环境稳定中扮演重要角色。引起过早细胞死亡的程序性细胞死亡异常已经与多种发育障碍有联系。导致细胞死亡缺乏的程序性细胞死亡缺陷已经与癌症和慢性病毒感染有联系(Thompson et al.，(1995)Science267，1456-1462)。
程序性细胞死亡中关键的效应器分子之一是胱天蛋白酶(caspases)(含有天冬氨酸特异性蛋白酶的半胱氨酸)。胱天蛋白酶是强大的蛋白酶，在天冬氨酸残基之后裂解，并且一旦被活化，消化细胞内的生命细胞蛋白质。由于胱天蛋白酶是如此强大的蛋白酶，牢牢控制这种蛋白质家族是防止过早细胞死亡所必需的。一般而言，胱天蛋白酶是作为多半无活性的酶原而被合成的，它们需要蛋白酶解加工，目的是成为有活性的。这种蛋白酶解加工是调节胱天蛋白酶的唯一方式。第二机理是通过结合和抑制胱天蛋白酶的蛋白质家族。
抑制胱天蛋白酶的分子家族是程序性细胞死亡抑制剂(IAP)(Deveraux etal.，J Clin Immunol(1999)，19388-398)。IAP最初是由于它们取代P35蛋白的功能能力而在杆状病毒中被发现的，P35是一种抗程序性细胞死亡基因(Crook et al.(1993)J Virology67，2168-2174)。IAP广泛分布在从果蝇到人类的生物体中。与它们的来源无关，在结构上，IAP包含一至三个杆状病毒IAP重复(BIR)结构域，它们大多数也具备羧基-末端的RING指针基序。BIR结构域本身是约70个残基的锌结合性结构域，包含4条α-螺旋和3条β链，具有配位锌离子的半胱氨酸和组氨酸残基(Hinds et al.，(1999)Nat.Struct.Biol.6,648-651)。正是BIR结构域被相信通过抑制胱天蛋白酶、从而抑制程序性细胞死亡而导致抗程序性细胞死亡效应。举例而言，人X-染色体连接的IAP(XIAP)抑制胱天蛋白酶3、胱天蛋白酶7和Apaf-l-细胞色素C介导的胱天蛋白酶9活化(Deveraux et al.，(1998)EMBO J.17，2215-2223)。胱天蛋白酶3和7受到XIAP的BIR2结构域的抑制，而XIAP的BIR3结构域负责胱天蛋白酶9活性的抑制。XIAP普遍在大多数成人和胎儿组织中被表达(Liston et a1，Nature，1996，379(6563)349)，在NCI60细胞系组的大量肿瘤细胞系中被过度表达(Fong et al，Genomics，2000，70113；Tamm et al，Clin.Cancer Res.2000，6(5)1796)。XIAP在肿瘤细胞中的过度表达已被证明赋予对抗多种促程序性细胞死亡性刺激的保护作用，促进对化学疗法的抵抗性(LaCasse et al，Oncogene，1998，17(25)3247)。与此相一致，XIAP蛋白水平与存活之间的密切相互关系已经在急性骨髓性白血病患者中得到证明(Tammet al，supra)。反义寡核苷酸对XIAP表达的减量调节已经显示体外和体内使肿瘤细胞敏感于由广泛多种促程序性细胞死亡剂诱导的死亡(Sasaki et al，Cancer Res.，2000，60(20)5659；Lin et al，Biochem J.，2001，353299；Hu et al，Clin.Cancer Res.，2003，9(7)2826)。Smac/DIABLO-衍生的肽已被证明使大量不同的肿瘤细胞系敏感于由多种促程序性细胞死亡药诱导的程序性细胞死亡(Arnt et al，J.Biol.Chem.，2002，277(46)44236；Fulda et al，Nature Med.，2002，8(8)808；Guo et al，Blood，2002，99(9)3419；Vucic et al，J.Biol.Chem.，2002，277(14)12275；Yang et al，Cancer Res.，2003，63(4)831)。
黑素瘤IAP(ML-IAP)是在大多数正常成人组织中不可检测的IAP，但是在黑素瘤中被强烈地增量调节(Vucic et al.，(2000)Current Bio101359-1366)。蛋白质结构的测定证明了ML-IAP BIR和RING指针结构域(finger domain)与存在于人XIAP、C-IAP1和C-IAP2中的相应结构域之间显著的同源性。ML-IAP的BIR结构域似乎对XIAP的BIR2与BIR3、C-IAP1和C-IAP2具有最多的相似性，并且似乎负责程序性细胞死亡的抑制，这是根据缺失分析所测定的。此外，Vucic等证明，ML-IAP可能抑制化学治疗剂诱导的程序性细胞死亡。在过度表达ML-IAP的黑素瘤细胞培养系统中测试了诸如阿霉素和4-叔丁基苯酚(4-TBP)等药物，在与正常黑素细胞对照相比较时，这些化学治疗剂在杀死细胞上没有显著效果。ML-IAP产生抗程序性细胞死亡活性的机理在部分程度上借助胱天蛋白酶3和9的抑制。ML-IAP没有有效地抑制胱天蛋白酶1、2、6或8。
由于程序性细胞死亡是由多个作用因素的严格控制途径，调节IAP本身的发现并非非比寻常。在果蝇中，收割蛋白(rpr)、头部退化缺陷性(hid)和GRIM蛋白在物理上作用于和抑制果蝇家族IAP的抗程序性细胞死亡活性。在哺乳动物中，蛋白质SMAC/DIABLO起到阻滞IAP和允许程序性细胞死亡进行的作用。在正常的程序性细胞死亡期间，SMAC被加工成活性形式，从线粒体中释放到细胞质中，在那里它在物理上与IAP结合，并且防止IAP与胱天蛋白酶结合。IAP的这种抑制作用允许胱天蛋白酶保留活性，从而进行程序性细胞死亡。有趣地，IAP抑制剂之间的序列同源性表明，在经过加工的活性蛋白质的N-末端中存在四个氨基酸的基序。这种四肽似乎结合到BIR结构域的疏水性袋中，破坏BIR结构域与胱天蛋白酶结合(Chai et al.，(2000)Nature406855-862，Liu et al.，(2000)Nature4081004-1008，Wu et al.，(2000)Nature4081008-1012)。
发明概述 本发明在一方面提供新颖的具有通式I的IAP蛋白抑制剂∶
其中 A是带有1至4个杂原子N、O或S的5-元芳族杂环，任选地被一个或多个R7和R8基团取代； Q是H、烷基、碳环、杂环；其中烷基的一个或多个CH2或CH基团任选地被-O-、-S-、-S(O)-、S(O)2、-N(R8)-、-C(O)-、-C(O)-NR8-、-NR8-C(O)-、-SO2-NR8-、-NR8-SO2-、-NR8-C(O)-NR8-、-NR8-C(NH)-NR8-、-NR8-C(NH)-、-C(O)-O-或-O-C(O)-取代；烷基、碳环和杂环任选地被一个或多个羟基、烷氧基、酰基、卤素、巯基、氧代基、羧基、卤代烷基、氨基、氰基、硝基、脒基、胍基、任选被取代的碳环或任选被取代的杂环取代； X1和X2各自独立地是O或S； Y是键、(CR7R7)n、O或S；其中n是1或2，R7是H、卤素、烷基、芳基、芳烷基、氨基、芳基氨基、烷基氨基、芳烷基氨基、烷氧基、芳氧基或芳烷氧基； R1是H，或者R1和R2一起构成5-8元杂环； R2是烷基、碳环、碳环基烷基、杂环或杂环基烷基，各自任选地被卤素、羟基、氧代基、硫酮、巯基、羧基、烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、磺酰基、氨基和硝基取代； R3是H或者任选被卤素或羟基取代的烷基；或者R3和R4一起构成3-6元杂环； R3’是H，或者R3和R3’一起构成3-6元碳环； R4和R4’独立地是H、羟基、氨基、烷基、碳环、碳环烷基、碳环烷氧基、碳环烷氧基羰基、杂环、杂环烷基、杂环烷氧基或杂环烷氧基羰基；其中烷基、碳环烷基、碳环烷氧基、碳环烷氧基羰基、杂环、杂环烷基、杂环烷氧基和杂环烷氧基羰基各自任选地被卤素、羟基、巯基、羧基、烷基、烷氧基、氨基、亚氨基和硝基取代；或者R4和R4’一起构成杂环； R5是H或者烷基； R6，和R6’各自独立地是H、烷基、芳基或芳烷基； R7是H、氰基、羟基、巯基、卤素、硝基、羧基、脒基、胍基、烷基、碳环、杂环或-U-V；其中U是-O-、-S-、-S(O)-、S(O)2、-N(R8)-、-C(O)-、-C(O)-NR8、-NR8-C(O)-、-SO2-NR8-、-NR8-SO2-、-NR8-C(O)-NR8-、-NR8-C(NH)-NR8-、-NR8-C(NH)-、-C(O)-O-或-O-C(O)-，V是烷基、碳环或杂环；其中烷基的一个或多个CH2或CH基团任选地被-O-、-S-、-S(O)-、S(O)2、-N(R8)-、-C(O)-、-C(O)-NR8-、-NR8-C(O)-、-SO2-NR8-、-NR8-SO2-、-NR8-C(O)-NR8-、-C(O)-O-或-O-C(O)-取代；烷基、碳环和杂环任选地被羟基、烷氧基、酰基、卤素、巯基、氧代基、羧基、酰基、卤代烷基、氨基、氰基、硝基、脒基、胍基、任选被取代的碳环或任选被取代的杂环取代； R8是H、烷基、碳环或杂环，其中所述烷基的一个或多个CH2或CH基团任选地被-O-、-S-、-S(O)-、S(O)2、-N(R8)或-C(O)-取代；所述烷基、碳环和杂环任选地被羟基、烷氧基、酰基、卤素、巯基、氧代基(＝O)、羧基、酰基、卤代烷基、氨基、氰基、硝基、脒基、胍基、任选被取代的碳环或任选被取代的杂环取代； 或其盐或溶剂化物。
本发明在另一方面提供包含式I化合物和载体、稀释剂或赋形剂的组合物。
本发明在另一方面提供诱导细胞中的程序性细胞死亡的方法，包含向所述细胞引入式I化合物。
本发明在另一方面提供使细胞敏感于程序性细胞死亡信号(apoptoticsignal)的方法，包含向所述细胞引入式I化合物。
本发明在另一方面提供抑制IAP蛋白与胱天蛋白酶蛋白结合的方法，包含使所述IAP蛋白与式I化合物接触。
本发明在另一方面提供治疗哺乳动物与IAP蛋白过度表达有关的疾病或病症的方法，包含对所述哺乳动物给予有效量的式I化合物。
优选实施方式的详细说明 “酰基”表示由式-C(O)-R代表的含羰基取代基，其中R是H、烷基、碳环、杂环、碳环-取代的烷基或杂环-取代的烷基，其中烷基、烷氧基、碳环和杂环是如本文所定义的。酰基包括烷酰基(例如乙酰基)、芳酰基(例如苯甲酰基)和杂芳酰基。
“烷基”表示分支或不分支的、饱和或不饱和的(即烯基、炔基)脂族烃基团，除非另有指定具有至多12个碳原子。当作为另一术语的一部分使用时，例如“烷基氨基”，该烷基部分优选地是饱和的烃链，不过也包括不饱和的烃碳链，例如“烯基氨基”和“炔基氨基”。具体的烷基的实例为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基丁基、2，2-二甲基丙基、正己基、2-甲基戊基、2，2-二甲基丁基、正庚基、3-庚基、2-甲基己基等。术语“低级烷基”、“C1-C4烷基”和“1至4个碳原子的烷基”是同义的，可互换地用于表示甲基、乙基、1-丙基、异丙基、环丙基、1-丁基、仲丁基或叔丁基。除非另有指定，取代的烷基可以含有一个，例如两个、三个或四个取代基，它们可以是相同或不同的。除非另外指定，取代基的实例为卤素、氨基、羟基、受保护的羟基、巯基、羧基、烷氧基、硝基、氰基、脒基、胍基、脲、磺酰基、亚磺酰基、氨基磺酰基、烷基磺酰基氨基、芳基磺酰基氨基、氨基羰基、酰基氨基、烷氧基、酰基、酰氧基、碳环、杂环。上述取代的烷基的实例包括但不限于氰基甲基、硝基甲基、羟甲基、三苯甲氧基甲基、丙酰氧基甲基、氨甲基、羧甲基、羧基乙基、羧基丙基、烷氧基羰基甲基、烯丙氧基碳酰氨甲基、氨甲酰氧基甲基、甲氧基甲基、乙氧基甲基、叔丁氧基甲基、乙酰氧基甲基、氯甲基、溴甲基、碘甲基、三氟甲基、6-羟基己基、2，4-二氯(正丁基)、2-氨基(异丙基)、2-氨甲酰氧基乙基等。烷基也可以被碳环基团取代。实例包括环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基和环己基甲基，以及对应的-乙基、-丙基、-丁基、-戊基、-己基等。取代的烷基包括取代的甲基，例如被与“取代的Cn-Cm烷基”相同的取代基取代的甲基。取代的甲基的实例包括羟甲基、被保护的羟甲基(例如四氢吡喃氧基甲基)、乙酰氧基甲基、氨甲酰氧基甲基、三氟甲基、氯甲基、羧甲基、溴甲基和碘甲基。
“脒”表示基团-C(NH)-NHR，其中R是H，或者烷基或芳烷基。具体的脒是基团-NH-C(NH)-NH2。
“氨基’’表示伯(即NH2)、仲(即-NRH)和叔(即-NRR)胺。具体的仲和叔胺是烷基胺、二烷基胺、芳基胺、二芳基胺、芳烷基胺和二芳烷基胺，其中所述烷基如本文所定义且被任选取代。具体的二元和三元胺是甲胺、乙胺、丙胺、异丙胺、苯胺、苄胺、二甲胺、二乙胺、二丙胺和二异丙胺。
本文所用的“氨基-保护基团”表示普遍用于阻滞或保护氨基的基团衍生物，同时反应是在该化合物的其他官能团上进行的。这类保护基团的实例包括氨基甲酸酯、酰胺、烷基与芳基、亚胺以及很多N-杂原子衍生物，它们可以被除去而生成所需的胺基团。具体的氨基保护基团是Boc、Fmoc和Cbz。这些基团的进一步实例参见T.W.Greene and P.G.M.Wuts，“ProtectiveGroups in Organic Synthesis”，2nded.，John Wiley&Sons，Inc.，New York，NY，1991，chapter7；E.Haslam，“Protective Groups in Organic Chemistry”，J.G.W.McOmie，Ed.，Plenum Press，New York，NY,1973，Chapter5，和T.W.Greene，“Protective Groups in OrganicSynthesis”，John Wiley and Sons，New York，NY，1981。术语“被保护的氨基”表示被上述氨基-保护基团之一取代的氨基。
“芳基”当单独或者作为另一术语的一部分使用时表示碳环芳族基团，无论稠合与否都具有所指明的碳原子数，或者如果没有指明数量则具有至多14个碳原子。具体的芳基为苯基、萘基、联苯、菲基、并四苯基等(例如参见Lang’sHandbook of Chemistry(Dean，J.A.，ed)13thed.Table7-2[1985])。具体的芳基是苯基。取代的苯基或取代的芳基表示被一个、两个、三个、四个或五个、例如1-2、1-3或1-4个取代基取代的苯基或芳基，除非另有指定，取代基选自卤素(F，Cl，Br，I)、羟基、被保护的羟基、氰基、硝基、烷基(优选C1-C6烷基)、烷氧基(优选C1-C6烷氧基)、苄氧基、羧基、被保护的羧基、羧甲基、被保护的羧甲基、羟甲基、被保护的羟甲基、氨甲基、被保护的氨甲基、三氟甲基、烷基磺酰氨基、烷基磺酰氨基烷基、芳基磺酰氨基、芳基磺酰氨基烷基、杂环基磺酰氨基、杂环基磺酰氨基烷基、杂环基、芳基或者其他所指定的基团。这些取代基中的一个或多个次甲基(CH)和/或亚甲基(CH2)可以继而被与上述那些相似的基团取代。术语“取代的苯基”的实例包括但不限于单或二(卤代)苯基，例如2-氯苯基、2-溴苯基、4-氯苯基、2，6-二氯苯基、2，5-二氯苯基、3，4-二氯苯基、3-氯苯基、3-溴苯基、4-溴苯基、3，4-二溴苯基、3-氯-4-氟苯基、2-氟苯基等；单或二(羟基)苯基，例如4-羟基苯基、3-羟基苯基、2，4-二羟基苯基、其被保护的羟基衍生物等；硝基苯基，例如3-或4-硝基苯基；氰基苯基，例如4-氰基苯基；单或二(低级烷基)苯基，例如4-甲基苯基、2，4-二甲基苯基、2-甲基苯基、4-(异丙基)苯基、4-乙基苯基、3-(正丙基)苯基等；单或二(烷氧基)苯基，例如3，4-二甲氧基苯基、3-甲氧基-4-苄氧基苯基、3-甲氧基-4-(1-氯甲基)苄氧基-苯基、3-乙氧基苯基、4-(异丙氧基)苯基、4-(叔丁氧基)苯基、3-乙氧基-4-甲氧基苯基等；3-或4-三氟甲基苯基；单或二羧基苯基或者(被保护的羧基)苯基，例如4-羧基苯基；单或二(羟甲基)苯基或者(被保护的羟甲基)苯基，例如3-(被保护的羟甲基)苯基或3，4-二(羟甲基)苯基；单或二(氨甲基)苯基或者(被保护的氨甲基)苯基，例如2-(氨甲基)苯基或2，4-(被保护的氨甲基)苯基；或者单或二(N-(甲基磺酰氨基))苯基，例如3-(N-甲基磺酰氨基)苯基。而且，术语“取代的苯基”包括二取代的苯基，其中取代基是不同的，例如3-甲基-4-羟基苯基、3-氯-4-羟基苯基、2-甲氧基-4-溴苯基、4-乙基-2-羟基苯基、3-羟基-4-硝基苯基、2-羟基-4-氯苯基等，以及三取代的苯基，其中取代基是不同的，例如3-甲氧基-4-苄氧基-6-甲基磺酰氨基、3-甲氧基-4-苄氧基-6-苯基磺酰氨基，和四取代的苯基，其中取代基是不同的，例如3-甲氧基-4-苄氧基-5-甲基-6-苯基磺酰氨基。具体的取代的苯基包括2-氯苯基、2-氨基苯基、2-溴苯基、3-甲氧基苯基、3-乙氧基-苯基、4-苄氧基苯基、4-甲氧基苯基、3-乙氧基-4-苄氧基苯基、3，4-二乙氧基苯基、3-甲氧基-4-苄氧基苯基、3-甲氧基-4-(1-氯甲基)苄氧基-苯基、3-甲氧基-4-(1-氯甲基)苄氧基-6-甲基磺酰氨基苯基。稠合的芳基环也可以被任意的，例如1、2或3个本文以与取代的烷基相同的方式所指定的取代基取代。
“碳环基”、“碳环的”、“碳环”和“碳环并”单独和作为复杂基团中的片段使用时，例如碳环烷基，表示单、二或三环的脂族环，具有3至14个碳原子，优选3至7个碳原子，它可以是饱和或不饱和的、芳族或非芳族的。具体的饱和碳环基团为环丙基、环丁基、环戊基和环己基，具体的是环丙基。另一具体的饱和碳环是环己基。具体的不饱和碳环是芳族的，例如前文所定义的芳基，例如苯基。术语“取代的碳环基”、“碳环”和“碳环并”表示被与“取代的烷基”相同的取代基取代的这些基团。
本文所用的“羧基-保护基团”表示普遍用于阻滞或保护羧酸基团的羧酸酯衍生物之一，同时反应是在该化合物的其他官能团上进行的。这类羧酸保护基团的实例包括4-硝基苄基、4-甲氧基苄基、3，4-二甲氧基苄基、2，4-二甲氧基苄基、2，4，6-三甲氧基苄基、2，4，6-三甲基苄基、五甲基苄基、3，4-亚甲二氧基苄基、二苯甲基、4，4’-二甲氧基二苯甲基、2，2’，4，4’-四甲氧基二苯甲基、烷基(例如叔丁基或叔戊基)、三苯甲基、4-甲氧基三苯甲基、4，4’-二甲氧基三苯甲基、4，4’，4”-三甲氧基三苯甲基、2-苯基丙-2-基、三甲基甲硅烷基、叔丁基二甲基甲硅烷基、苯甲酰甲基、2，2，2-三氯乙基、β-(三甲基甲硅烷基)乙基、β-(二(正丁基)甲基甲硅烷基)乙基、对-甲苯磺酰基乙基、4-硝基苄基磺酰基乙基、烯丙基、肉桂基、1-(三甲基甲硅烷基甲基)丙-1-烯-3-基等基团。所采用的羧基-保护基团的品种不是关键，只要所衍生的羧酸稳定于随后在该分子其他位置上的反应的条件，并且能够在适当的时间点除去而不破坏分子其余部分。特别重要的是不使羧基-保护的分子受到强亲核性碱的作用，例如氢氧化锂或NaOH，或者采用高度活化的金属氢化物的还原性条件的作用，例如LiAlH4(在除去氨基-保护基团和羟基-保护基团时，也要避免这类严格的除去条件，参见下文讨论)。具体的羧酸保护基团是烷基(例如甲基、乙基、叔丁基)、烯丙基、苄基和对-硝基苄基。用在头孢菌素、青霉素和肽领域中的相似羧基-保护基团也可以用于保护羧基取代基。这些基团的进一步实例参见T.W.Greene and P.G.M.Wuts，“ProtectiVe Groups in OrganicSynthesis”，2nd ed.，John Wiley&Sons，Inc.，New York，N.Y.，1991，chapter5；E.Haslam，“Protective Groups in Organic Chemistry”，J.G.W.McOmie，Ed.，Plenum Press，New York，N.Y.，1973，Chapter5，和T.W.Greene，“ProtectiveGroups in OrganicSynthesis”，John Wiley and Sons，New York，NY，1981，Chapter5。术语“被保护的羧基”表示被上述羧基-保护基团之一取代的羧基。
“胍”表示基团-NH-C(NH)-NHR，其中R是H，或者烷基或芳烷基。具体的胍是基团-NH-C(NH)-NH2。
本文所用的“羟基-保护基团”表示普遍用于阻滞或保护羟基的羟基基团衍生物，同时反应是在该化合物的其他官能团上进行的。这类保护基团的实例包括四氢吡喃氧基、苯甲酰基、乙酰氧基、氨甲酰氧基、苄基和甲硅烷基醚(例如TBS、TBDPS)基团。这些基团的进一步实例参见T.W.Greene andP.G.M.Wuts，“Protective Groups in Organic Synthesis”，2nd ed.，John Wiley&Sons，Inc.，New York，NY，1991，chapters2-3；E.Haslam，“Protective Groups inOrganic Chemistry”，J.G.W.McOmie，Ed.，Plenum Press，New York，NY，1973，Chapter5，和T.W.Greene，“Protective Groups in OrganicSynthesis”，JohnWilev and Sons，New York，NY，1981。术语“被保护的羟基”表示被上述羟基-保护基团之一取代的羟基。
“杂环基团”、“杂环的”、“杂环”、“杂环基”或“杂环并”单独和当作为复杂基团中的片段使用时，例如杂环烷基，是可互换使用的，表示任何单、二或三环的、饱和或不饱和的、芳族(杂芳基)或非芳族环，具有所指明的原子数，一般为5至约14个环原子，其中这些环原子是碳和至少一个杂原子(氮、硫或氧)，例如1至4个杂原子。通常，5-元环具有0至2条双键，6-或7-元环具有0至3条双键，氮或硫杂原子可以任选地被氧化(例如SO、SO2)，任何氮杂原子可以任选地被季铵化。具体的非芳族杂环为吗啉基(吗啉代基)、吡咯烷基、环氧乙烷基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、2，3-二氢呋喃基、2H-吡喃基、四氢吡喃基、硫杂环丙烷基、硫杂环丁烷基、四氢硫杂环丁烷基、环乙亚氨基、氮杂环丁烷基、1-甲基-2-吡咯基、哌嗪基和哌啶基。“杂环烷基”是如上所定义的杂环基，共键合于如上所定义的烷基。具体的含有硫或氧原子和一至三个氮原子的5-元杂环为噻唑基，特别是噻唑-2-基和噻唑-2-基N-氧化物；噻二唑基，特别是1，3，4-噻二唑-5-基和1，2，4-噻二唑-5-基；噁唑基，例如噁唑-2-基；和噁二唑基，例如1，3，4-噁二唑-5-基和1，2，4-噁二唑-5-基。具体的含有2至4个氮原子的5-元杂环包括咪唑基，例如咪唑-2-基；三唑基，例如1，3，4-三唑-5-基、1，2，3-三唑-5-基、1，2，4-三唑-5-基；和四唑基，例如1H-四唑-5-基。具体的苯并-稠合5-元杂环是苯并噁唑-2-基、苯并噻唑-2-基和苯并咪唑-2-基。具体的6-元杂环含有一至三个氮原子和任选的硫或氧原子，例如吡啶基，例如吡啶-2-基、吡啶-3-基和吡啶-4-基；嘧啶基，例如嘧啶-2-基和嘧啶-4-基；三嗪基，例如1，3，4-三嗪-2-基和1，3，5-三嗪-4-基；哒嗪基，特别是哒嗪-3-基；和吡嗪基。吡啶N-氧化物与哒嗪N-氧化物和吡啶基、嘧啶-2-基、嘧啶-4-基、哒嗪基和1，3，4-三嗪-2-基是具体的基团。任选被取代的杂环的取代基和如上所讨论的5-与6-元环系的进一步实例可以参见W.Druckheimer etal.，美国专利No.4,278,793。在具体的实施方式中，这些任选取代的杂环基团被羟基、烷基、烷氧基、酰基、卤素、巯基、氧代、羧基、酰基、卤素取代的烷基、氨基、氰基、硝基、脒基和胍基取代。
“杂芳基”单独和当作为复杂基团中的片段使用时，例如杂芳烷基，表示任何单、二或三环的芳族环系，具有所指明的原子数，其中至少一个环是5-、6-或7-元环，含有一至四个选自氮、氧和硫的杂原子，并且至少一个杂原子是氮(Lang’s Handbook of Chemistry，supra)。在该定义中包括任何二环基团，其中任何上述杂芳基环与苯环稠合。其中氮或氧是杂原子的杂芳基是具体的。下列环系是由术语“杂芳基”所表示的杂芳基的实例(无论取代或未取代)噻吩基、呋喃基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、三唑基、噻二唑基、噁二唑基、四唑基、噻三唑基、噁三唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、噻嗪基、噁嗪基、三嗪基、噻二嗪基、噁二嗪基、二噻嗪基、二噁嗪基、噁噻嗪基、四嗪基、噻三嗪基、噁三嗪基、二噻二嗪基、咪唑啉基、二氢嘧啶基、四氢嘧啶基、四唑并[1，5-b]哒嗪基和嘌呤基，以及苯并-稠合的衍生物，例如苯并噁唑基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基、苯并咪唑基和吲哚基。特别的“杂芳基”包括1，3-噻唑-2-基、4-(羧基甲基)-5-甲基-1，3-噻唑-2-基、4-(羧基甲基)-5-甲基-1，3-噻唑-2-基钠盐、1，2，4-噻二唑-5-基、3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基、1，3，4-三唑-5-基、2-甲基-1，3，4-三唑-5-基、2-羟基-1，3，4-三唑-5-基、2-羧基-4-甲基-1，3，4-三唑-5-基钠盐、2-羧基-4-甲基-1，3，4-三唑-5-基、1，3-噁唑-2-基、1，3，4-噁二唑-5-基、2-甲基-1，3，4-噁二唑-5-基、2-(羟基甲基)-1，3，4-噁二唑-5-基、1，2，4-噁二唑-5-基、1，3，4-噻二唑-5-基、2-硫醇-1，3，4-噻二唑-5-基、2-(甲硫基)-1，3，4-噻二唑-5-基、2-氨基-1，3，4-噻二唑-5-基、1H-四唑-5-基、1-甲基-1H-四唑-5-基、1-(1-(二甲氨基)乙-2-基)-1H-四唑-5-基、1-(羧基甲基)-1H-四唑-5-基、1-(羧基甲基)-1H-四唑-5-基钠盐、1-(甲基磺酸)-1H-四唑-5-基、1-(甲基磺酸)-1H-四唑-5-基钠盐、2-甲基-1H-四唑-5-基、1，2，3-三唑-5-基、1-甲基-1，2，3-三唑-5-基、2-甲基-1，2，3-三唑-5-基、4-甲基-1，2，3-三唑-5-基、吡啶-2-基N-氧化物、6-甲氧基-2-(n-氧化物)-哒嗪-3-基、6-羟基哒嗪-3-基、1-甲基吡啶-2-基、1-甲基吡啶-4-基、2-羟基嘧啶-4-基、1，4，5，6-四氢-5，6-二氧代-4-甲基-as-三嗪-3-基、1，4，5，6-四氢-4-(甲酰基甲基)-5，6-二氧代-as-三嗪-3-基、2，5-二氢-5-氧代-6-羟基-三嗪-3-基、2，5-二氢-5-氧代-6-羟基-as-三嗪-3-基钠盐、2，5-二氢-5-氧代-6-羟基-2-甲基-三嗪-3-基钠盐、2，5-二氢-5-氧代-6-羟基-2-甲基-as-三嗪-3-基、2，5-二氢-5-氧代-6-甲氧基-2-甲基-as-三嗪-3-基、2，5-二氢-5-氧代-as-三嗪-3-基、2，5-二氢-5-氧代-2-甲基-as-三嗪-3-基、2，5-二氢-5-氧代-2，6-二甲基-as-三嗪-3-基、四唑并[1，5-b]哒嗪-6-基和8-氨基四唑并[1，5-b]-哒嗪-6-基。“杂芳基”的替代选择包括4-(羧基甲基)-5-甲基-1，3-噻唑-2-基、4-(羧基甲基)-5-甲基-l，3-噻唑-2-基钠盐、1，3，4-三唑-5-基、2-甲基-1，3，4-三唑-5-基、1H-四唑-5-基、1-甲基-1H-四唑-5-基、1-(1-(二甲氨基)乙-2-基)-1H-四唑-5-基、1-(羧基甲基)-1H-四唑-5-基、1-(羧基甲基)-1H-四唑-5-基钠盐、1-(甲基磺酸)-1H-四唑-5-基、1-(甲基磺酸)-1H-四唑-5-基钠盐、1，2，3-三唑-5-基、1，4，5，6-四氢-5，6-二氧代-4-甲基-as-三嗪-3-基、1，4，5，6-四氢-4-(2-甲酰基甲基)-5，6-二氧代-as-三嗪-3-基、2，5-二氢-5-氧代-6-羟基-2-甲基-as-三嗪-3-基钠盐、2，5-二氢-5-氧代-6-羟基-2-甲基-as-三嗪-3-基、四唑并[1，5-b]哒嗪-6-基和8-氨基四唑并[1，5-b]哒嗪-6-基。
“抑制剂”表示减少或防止IAP蛋白与胱天蛋白酶蛋白结合或者减少或防止程序性细胞死亡被IAP蛋白抑制的化合物。作为替代选择，“抑制剂”表示防止X-IAP与胱天蛋白酶的结合性相互作用或者ML-IAP与SMAC的结合性相互作用的化合物。
除非另外说明，“任选取代的”表示基团可以被对所述基团所列举的一个或多个(例如0、1、2、3或4)取代基所取代的基团，所述取代基可以是相同或不同的。在一种实施方式中，任选取代的基团具有1个取代基。在另一实施方式中，任选取代的基团具有2个取代基。在另一实施方式中，任选取代的基团具有3个取代基。
“可药用盐”包括酸和碱加成盐。“可药用酸加成盐”表示这样的盐，它们保留游离碱的生物有效性和性质，在生物学上或其他方面不是不可取的，是与如下酸生成的无机酸，例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、碳酸、磷酸等；有机酸可以选自脂族、环脂族、芳族、芳脂族、杂环、羧酸和磺酸类的有机酸，例如甲酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、葡糖酸、乳酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、天冬氨酸、抗坏血酸、谷氨酸、邻氨基苯甲酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、扑酸、苯基乙酸、甲磺酸、乙磺酸、对-甲苯磺酸、水杨酸等。
“可药用碱加成盐”包括从无机碱衍生的那些，例如钠、钾、锂、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰、铝盐等。具体的碱加成盐是铵、钾、钠、钙和镁盐。从可药用有机无毒碱衍生的盐包括如下碱的盐一元、二元和三元胺；取代的胺，包括天然存在的取代的胺、环状胺和碱性离子交换树脂，例如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二乙氨基乙醇、三甲胺、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、海巴明、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚胺树脂等。具体的有机无毒碱是异丙胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二环己胺、胆碱和咖啡因。
“磺酰基”表示-SO2-R基团，其中R是烷基、碳环、杂环、碳环烷基或杂环烷基。确切的磺酰基是烷基磺酰基(即-SO2-烷基)，例如甲基磺酰基；芳基磺酰基，例如苯基磺酰基；芳烷基磺酰基，例如苄基磺酰基。
本文所用的措辞“或其盐或溶剂化物”意味着本发明化合物可以存在一种盐和溶剂化物形式或者混合物。例如，本发明化合物可以是基本上纯的一种特定的盐或溶剂化物形式，或者可以是两种或多种盐或溶剂化物形式的混合物。
本发明提供新颖的具有通式I的化合物
其中A、Q、X1、X2、Y、R1、R2、R3、R4、R4’、R5、R6和R6’是如本文所述的。
环A是带有1至4个杂原子N、O或S的5-元芳族杂环，它被基团Q取代，任选地进一步被一个或多个R7(就环碳原子取代而言)和一个或多个R8(就环氮取代而言)取代。
R7各自独立地是H、氰基、羟基、巯基、卤素、硝基、羧基、脒基、胍基、烷基、碳环、杂环或-U-V；其中U是-O-、-S-、-S(O)-、S(O)2、-N(R8)-、-C(O)-、-C(O)-NR8-、-NR8-C(O)-、-SO2-NR8-、-NR8-SO2-、-NR8-C(O)-NR8-、-NR8-C(NH)-NR8-、-NR8-C(NH)-、-C(O)-O-或-O-C(O)-，V是烷基、碳环或杂环；其中烷基的一个或多个CH2或CH基团任选地被-O-、-S-、-S(O)-、S(O)2、-N(R8)-、-C(O)-、-C(O)-NR8-、-NR8-C(O)-、-SO2-NR8-、-NR8-SO2-、-NR8-C(O)-NR8-、-NR8-C(NH)-NR8-、-NR8-C(NH)-、-C(O)-O-或-O-C(O)-取代；烷基、碳环和杂环任选地被羟基、烷氧基、酰基、卤素、巯基、氧代基、羧基、酰基、卤代烷基、氨基、氰基、硝基、脒基、胍基、任选被取代的碳环或任选被取代的杂环取代。“任选被取代的碳环”和“任选被取代的杂环”的取代基是如本文所定义的。在确切的实施方式中，这类碳环和杂环基团被羟基、烷基、烷氧基、酰基、卤素、巯基、氧代基、羧基、酰基、卤代烷基、氨基、氰基、硝基、脒基和胍基取代。在一种实施方式中，R7是H、卤素、氰基、烷基、羟基烷基或烷氧基烷基。
R8是H、烷基、碳环或杂环，其中所述烷基的一个或多个CH2或CH基团任选地被-O-、-S-、-S(O)-、S(O)2、-N(R8)或-C(O)-取代；所述烷基、碳环和杂环任选地被羟基、烷氧基、酰基、卤素、巯基、氧代基(＝O)、羧基、酰基、卤代烷基、氨基、氰基、硝基、脒基、胍基、任选被取代的碳环或任选被取代的杂环取代。“任选被取代的碳环”和“任选被取代的杂环”的取代基是如本文所定义的。在确切的实施方式中，这类碳环和杂环基团被羟基、烷基、烷氧基、酰基、卤素、巯基、氧代基、羧基、酰基、卤代烷基、氨基、氰基、硝基、脒基和胍基取代。在确切的实施方式中，R8是H、烷基或酰基。在一种实施方式中，R8是甲基。在另一种实施方式中，R8是乙酰基。在确切的实施方式中，R8是H。在一种实施方式中，R7是H、卤素、氨基、羟基、羧基、烷基、卤代烷基或芳烷基。在确切的实施方式中，R7是卤素，例如Cl或F。在确切的实施方式中，R7是H。不言而喻，关于R7和R8以及本文所有其他可变基团所定义的取代都是可允许的化合价。
在确切的实施方式中，环A具有通式II
其中Z1是NR8、O或S；Z2、Z3和Z4各自独立地是N或CR7。基团Q与式II和II’的环A连接在Z2与Z3之间的环成员。在确切的实施方式中，Z1是S。在确切的实施方式中，Z1是O。在另一种确切的实施方式中，Z1是NR8，其中R8是如本文所定义的。在确切的实施方式中，Z1是NR8，其中R8是H。在另一种确切的实施方式中，Z1是NR8，其中R8是Me。在另一种实施方式中，Z1是O或S，而Z2是N，Z3是N或CR7。在确切的实施方式中，Z1是S，而Z2是N，Z3是CR7。在确切的实施方式中，Z1是S，而Z2是N，Z3是CH。
在具体的实施方式中，环A是芳族杂环，选自由IIa-IIcc组成的组

其中R7和R8是如本文所定义的。Q不是环A的一部分，出于位置的目的被显示出来。在具体的实施方式中，环A是基团IIa-IIz的任意一个，其中R8是H，R7是H、Cl或羟基丙炔基。在另一种具体的实施方式中，环A是基团IIa-IIz的任意一个，其中R7和R8都是H。在另一种实施方式中，环A是IIg。在另一种实施方式中，环A是IIg，R7是H。
Q是H、烷基、碳环、杂环；其中烷基的一个或多个CH2或CH基团任选地被-O-、-S-、-S(O)-、S(O)2、-N(R8)-、-C(O)-、-C(O)-NR8-、-NR8-C(O)-、-SO2-NR8-、-NR8-SO2-、-NR8-C(O)-NR8-、-NR8-C(NH)-NR8-、-NR8-C(NH)-、-C(O)-O-或-O-C(O)-取代；其中任意上述烷基、碳环和杂环任选地被一个或多个羟基、烷氧基、酰基、卤素、巯基、氧代基、羧基、酰基、卤代烷基、氨基、氰基、硝基、脒基、胍基、任选被取代的碳环或任选被取代的杂环取代。“任选被取代的碳环”和“任选被取代的杂环”的取代基是如本文所定义的。在具体的实施方式中，这类碳环和杂环基团被羟基、烷基、烷氧基、酰基、卤素、巯基、氧代基、羧基、酰基、卤代烷基、氨基、氰基、硝基、脒基和胍基取代。在具体的实施方式中，Q是碳环或杂环，任选地被卤素、氨基、氧代基、烷基、碳环或杂环取代；其中烷基的一个或多个CH2或CH基团任选地被-O-、-S-、-S(O)-、S(O)2、-N(R8)-、-C(O)-、-C(O)-NR8-、-NR8-C(O)-、-SO2-NR8-、-NR8-SO2-、-NR8-C(O)-NR8-、-NR8-C(NH)-NR8-、-NR8-C(NH)-、-C(O)-O-或-O-C(O)-取代；其中所述烷基、碳环或杂环任选地被卤素、氨基、羟基、巯基、羧基、烷氧基、烷氧基烷氧基、羟基烷氧基、烷硫基、酰氧基、酰氧基烷氧基、烷基磺酰基、烷基磺酰基烷基、烷基亚磺酰基和烷基亚磺酰基烷基取代。
在具体的实施方式中，Q是碳环或杂环，选自由IIIa-IIIs组成的组

其中n是1-4，例如1-3，例如1-2，例如1；T是O、S、NR8或CR7R7；W是O、NR8或CR7R7；R7和R8是如本文所定义的。在具体的实施方式中，Q是IIIa-IIIi的任意一个，其中R8是H，R7选自H、F、Cl、Me、甲氧基、羟基乙氧基、甲氧基乙氧基、乙酰氧基乙氧基、甲基磺酰基、甲基磺酰基甲基、苯基和吗啉-4-基。在另一种具体的实施方式中，Q是IIId。在具体的实施方式中，Q是IIId，它在4-位被R7取代。在另一种具体的实施方式中，Q是IIId，它在5-位被R7取代。
X1和X2各自独立地是O或S。在具体的实施方式中，X1和X2都是O。在另一种具体的实施方式中，X1和X2都是S。在另一种具体的实施方式中，X1是S，而X2是O。在另一种具体的实施方式中，X1是O，而X2是S。
Y是键、(CR7R7)n、O或S；其中n是1或2，R7是H、卤素、烷基、芳基、芳烷基、氨基、芳基氨基、烷基氨基、芳烷基氨基、烷氧基、芳氧基或芳烷氧基。在具体的实施方式中，Y是(CHR7)n、O或S；其中n是1或2，R7是H、卤素、烷基、芳基、芳烷基、氨基、芳基氨基、烷基氨基、芳烷基氨基、烷氧基、芳氧基或芳烷氧基。在具体的实施方式中，Y是CH2。在具体的实施方式中，n是1。在具体的实施方式中，Y是键。在具体的实施方式中，n是1，Y是CHR7，其中R7是芳烷氧基，例如苄氧基。在具体的实施方式中，n是1，Y是CHR7，其中R7是F。在具体的实施方式中，n是1，Y是CHR7，其中R7是芳烷基氨基，例如苄基氨基。在另一种具体的实施方式中，Y是O。在另一种具体的实施方式中，Y是S。
R1是H，或者R1和R2一起构成5-8元环。在具体的实施方式中，R1是H。在具体的实施方式中，R1和R2一起构成6-元环。在具体的实施方式中，R1和R2一起构成7-元环。在另一种具体的实施方式中，R1和R2一起构成8-元环。在另一种具体的实施方式中，R1和R2一起构成7-元环，而Y是S。在另一种具体的实施方式中，R1是H而Y是CH2。在另一种具体的实施方式中，R1是H，而Y是S。在另一种具体的实施方式中，R1是H，而Y是O。
R2是烷基、碳环、碳环基烷基、杂环或杂环基烷基，各自任选地被卤素、羟基、氧代基、硫酮、巯基、羧基、烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、磺酰基、氨基和硝基取代。在具体的实施方式中，R2是烷基、碳环、碳环基烷基、杂环或杂环基烷基，各自任选地被卤素、羟基、氧代基、巯基、硫酮、羧基、烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、磺酰基、氨基和硝基取代。在一种实施方式中，R2是烷基、碳环、碳环基烷基、杂环或杂环基烷基，各自任选地被卤素、羟基、巯基、羧基、烷基、烷氧基、氨基和硝基取代。在具体的实施方式中，R2是烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂环或杂环基烷基。在具体的实施方式中，R2是烷基、环烷基或杂环。在具体的实施方式中，R2选自由叔丁基、异丙基、环己基、四氢吡喃-4-基、N-甲基磺酰基哌啶-4-基、四氢噻喃-4-基、四氢噻喃-4-基(其中S为氧化形式SO或SO2)、环己烷-4-酮、4-羟基环己烷、4-羟基-4-甲基环己烷、1-甲基-四氢吡喃-4-基、2-羟基丙-2-基、丁-2-基、苯基和1-羟基乙-1-基。在本发明的一种实施方式中，R2是叔丁基、异丙基、环己基、环戊基、苯基或四氢吡喃-4-基。在具体的实施方式中，R2是苯基。在具体的实施方式中，R2是环己基。在另一种实施方式中，R2是四氢吡喃-4-基。在另一种具体的实施方式中，R2是异丙基(也就是缬氨酸氨基酸侧链)。在另一种具体的实施方式中，R2是叔丁基。在具体的实施方式中，R2是这样取向的，以便其所构成的氨基酸或氨基酸类似物处于L-构型。
R3是H或者任选被卤素或羟基取代的烷基；或者R3和R4一起构成3-6元杂环。在一种实施方式中，R3是H或者烷基；或者R3和R4一起构成3-6元杂环。在一种实施方式中，R3是H或者甲基、乙基、丙基或异丙基。在更具体的实施方式中，R3是H或甲基。在另一种具体的实施方式中，R3是甲基。在另一种具体的实施方式中，R3是乙基。在具体的实施方式中，R3是氟甲基。在具体的实施方式中，R3是羟基乙基。在另一种实施方式中，R3是这样取向的，以便其所构成的氨基酸或氨基酸类似物处于L-构型。在具体的实施方式中，R3和R4与它们所依赖的原子一起构成3-6元杂环。在具体的实施方式中，R3和R4一起构成氮杂环丁烷环。在具体的实施方式中，R3和R4一起构成吡咯烷。
R3’是H，或者R3和R3’一起构成3-6元碳环。在一种实施方式中，R3’是H。在另一种实施方式中，R3和R3’一起构成3-6元碳环，例如环丙基环。在具体的实施方式中，R3和R3’都是甲基。
R4和R4’独立地是H、羟基、氨基、烷基、碳环、碳环烷基、碳环烷氧基、碳环烷氧基羰基、杂环、杂环烷基、杂环烷氧基或杂环烷氧基羰基；其中烷基、碳环烷基、碳环烷氧基、碳环烷氧基羰基、杂环、杂环烷基、杂环烷氧基和杂环烷氧基羰基各自任选地被卤素、羟基、巯基、羧基、烷基、烷氧基、氨基、亚氨基和硝基取代；或者R4和R4’一起构成杂环。在一种实施方式中，R4和R4’独立地是H、羟基、氨基、烷基、芳基、芳烷基、环烷基、环烷基烷基、杂芳基或杂芳基烷基，其中烷基、芳基、芳烷基、环烷基、环烷基烷基、杂芳基和杂芳基烷基各自任选地被卤素、羟基、巯基、羧基、烷基、烷氧基、氨基和硝基取代；或者R4和R4’一起构成杂环。在具体的实施方式中，R4和R4’一起构成杂环，例如氮杂环丁烷环或吡咯烷环。在具体的实施方式中，R4和R4’都是H。在另一种具体的实施方式中，R4是甲基，R4’是H。在具体的实施方式中，R4和R4’之一是羟基(OH)，而另一个是H。在另一种实施方式中，R4和R4’之一是氨基，例如NH2、NHMe和NHEt，而另一个是H。在具体的实施方式中，R4’是H，R4是H、烷基、芳基、芳烷基、环烷基、环烷基烷基、杂芳基或杂芳基烷基。在具体的实施方式中，R4是选自下组的基团

R5是H或者烷基。在具体的实施方式中，R5是H或甲基。在具体的实施方式中，R5是H。在另一种具体的实施方式中，R5是甲基。
R6，和R6’各自独立地是H、烷基、芳基或芳烷基。在具体的实施方式中，R6是烷基，例如甲基。在另一种具体的实施方式中，R6是芳基，例如苯基。在另一种具体的实施方式中，R6是芳烷基，例如苄基。在具体的实施方式中，R6和R6’是相同的，例如都是烷基，例如都是甲基。在另一种具体的实施方式中，R6是甲基，R6’是H。在另一种实施方式中，R6和R6’都是H。
本发明化合物含有一个或多个不对称的碳原子。因此，这些化合物可以以非对映体、对映体或其混合物形式存在。这些化合物的合成可以采用外消旋物、非对映体或对映体作为原料或者作为中间体。非对映体化合物可以借助色谱或结晶方法分离。与之相似，对映体混合物可以利用同样的技术或者本领域已知的其他技术加以分离。每个不对称碳原子可以是R或S构型，这些构型都在本发明的范围内。在具体的实施方式中，本发明化合物具有下列式I’的立体化学构型
其中环A、Q、X1、X2、Y、R1、R2、R3、R4、R4’、R6、R6和R6’是如本文所述的。
在一种实施方式中，本发明化合物具有通式IV
其中Q、X1、X2、Y、R1、R2、R3、R4、R4’、R5、R6、R6和R7是如本文所述的。在具体的实施方式中，Q是碳环或杂环，任选地被一个或多个羟基、烷基、烷氧基、酰基、卤素、巯基、氧代基、羧基、氨基、氰基、硝基、脒基、胍基、任选被取代的碳环或任选被取代的杂环取代，其中所述烷基的一个或多个CH2或CH基团任选地被-O-、-S-、-S(O)-、S(O)2、-N(R8)-、-C(O)-、-C(O)-NR8-、-NR8-C(O)-、-SO2-NR8-、-NR8-SO2-、-NR8-C(O)-NR8-、-NR8-C(NH)-NR8-、-NR8-C(NH)-、-C(O)-O-或-O-C(O)-取代。在具体的实施方式中，Q是芳基或杂芳基，任选地被一个或多个羟基、烷基、烷氧基、酰基、卤素、巯基、氧代基、羧基、氨基、氰基、硝基、脒基、胍基、任选被取代的碳环或任选被取代的杂环取代，其中所述烷基的一个或多个CH2或CH基团任选地被-O-、-S-、-S(O)-、S(O)2、-N(R8)-、-C(O)-、-C(O)-NR8-、-NR8-C(O)-、-SO2-NR8-、-NR8-SO2-、-NR8-C(O)-NR8-、-NR8-C(NH)-NR8-、-NR8-C(NH)-、-C(O)-O-或-O-C(O)-取代。在具体的实施方式中，Q是芳基或杂芳基，任选地被一个或多个羟基、烷基、烷氧基、烷氧基烷氧基、酰基、卤素、巯基、羧基、酰基、卤代烷基、氨基、氰基、硝基、脒基、胍基取代。在具体的实施方式中，Q是芳基或杂芳基，任选地被卤素、烷基、烷氧基、烷氧基烷氧基、氰基取代。在一种实施方式中，Q是IIIa至IIIs，其中R7、R8和n是如本文所定义的。在具体的实施方式中，Q是IIIq。在具体的实施方式中，Q是IIId。在具体的实施方式中，Q是IIIb、IIIc、IIIe、IIIf、IIIj、IIIk、IIIl、IIIn、IIIo、IIIq、IIIr或IIIs。
在一种实施方式中，此时本发明化合物具有通式IV，R1是H。在一种实施方式中，此时本发明化合物具有通式IV，R2是烷基、碳环、碳环基烷基、杂环或杂环基烷基，各自任选地被卤素、羟基、巯基、羧基、烷基、烷氧基、氨基和硝基取代。在一种实施方式中，此时本发明化合物具有通式IV，R3是H或者甲基、乙基、丙基或异丙基。在一种实施方式中，此时本发明化合物具有通式IV，R4是甲基，R4’是H。在一种实施方式中，此时本发明化合物具有通式IV，R5是H。在一种实施方式中，此时本发明化合物具有通式IV，R6和R6，都是H。在一种实施方式中，此时本发明化合物具有通式IV，R7是H、卤素、氰基、烷基、羟基烷基或烷氧基烷基。在一种实施方式中，此时本发明化合物具有通式IV，X1和X2都是O。在一种实施方式中，此时本发明化合物具有通式IV，Y是CH2。
本发明也涵盖上述化合物的前体药物。酌情适合的前体药物包括已知的氨基-保护基团和羧基-保护基团，它们在生理条件下被释放，例如水解，得到母体化合物。具体的前体药物种类是这样的化合物，其中氨基、脒基、氨基亚烷基氨基、亚氨基亚烷基氨基或胍基中的氮原子被羟基(OH)、烷基羰基(-CO-R)、烷氧基羰基(-CO-OR)、酰氧基烷基-烷氧基羰基(-CO-O-R-O-CO-R)取代，其中R是如上所定义的一价或二价基团，或者具有式-C(O)-O-CPlP2-卤代烷基的基团，其中P1和P2是相同或不同的，是H、低级烷基、低级烷氧基、氰基、卤代低级烷基或芳基。在具体实施方式
中，该氮原子是本发明化合物的脒基的氮原子之一。这些前体药物化合物是如下制备的，使上述本发明化合物与活化的酰基化合物反应，使本发明化合物中的氮原子键合于活化酰基化合物的羰基。适合的活化羰基化合物含有与羰基碳键合的良好离去基团，包括酰基卤、酰基胺、酰基吡啶鎓盐、酰基醇化物，特别是酰基酚盐，例如对-硝基苯氧基酰基、二硝基苯氧基酰基、氟苯氧基酰基和二氟苯氧基酰基。反应一般是放热的，在惰性溶剂中、在低温下进行，例如-78至50℃。反应通常也是在无机碱或有机碱的存在下进行的，前者例如碳酸钾或碳酸氢钠，后者例如胺，包括吡啶、三乙胺等。在1997年4月15日提交的USSN08/843,369(相当于PCT公报WO9846576)中描述了一种制备前体药物的方式，其内容完整结合在此作为参考。
具体的式I化合物包括如下



















合成 利用标准有机合成技术，从商业上可获得的原料和试剂制备本发明化合物。将被领会的是，在本发明化合物的制备中所采用的合成工艺将依赖于存在于化合物中的确切取代基，并且可能需要各种保护和去保护步骤，这是有机合成中的标准做法，但在下面的一般流程中没有解释。在一般合成流程中，本发明化合物可以如下制备，采用典型的肽化学技术，利用典型的酰胺偶联工艺偶联氨基酸残基类似物。在流程1中，先后偶联和去保护胺-保护的氨基酸残基类似物，得到最终的化合物。
流程1
将被领会的是，可以以任意顺序偶联氨基酸类似物，并且可以使用本领域惯用的固相载体制备。例如，流程2阐述替代的氨基酸残基类似物偶联途径。
流程2
中间体结合性环A是采用标准有机化学技术从商业上可获得的试剂制备的。例如，当环A是噻唑时，可以按照流程3制备中间体。
流程3
其中Q、Y、R1、R6和R6’是如本文所定义的，Pr是胺保护基团。将脯氨酸类似物，其中α氮被例如Boc(叔丁氧羰基)或Cbz(苄酯基)保护(Pr)并且被酰胺化，转化为对应的硫代酰胺，例如使用Lawesson氏试剂，按照Williams等所述工艺(J.Org.Chem，2001，668463)。然后将硫代酰胺用适当的溴化物环化，得到所需被基团Q取代的噻唑，例如利用Ciufolini等所述工艺(J.Org.Chem.1997，623804)。作为替代选择，本流程中的溴化物可以带有这样一种官能团，它可以用于偶联所需基团Q与从环化步骤生成的噻唑。
就其中环A是噁唑的本发明化合物而言，可以按照流程4制备中间体。
流程4
其中Q、Y、R1、R6和R6’是如本文所定义的，Pr是胺保护基团。利用标准的酰胺生成工艺，使起始性脯氨酸类似物与适当的胺反应。环化所得酰胺，例如使用Burgess试剂，按照Pihko等所述工艺(J.Org.Chem.，1999，64652)，得到二氢噁唑。然后还原二氢噁唑，得到所需被基团Q取代的噁唑。作为替代选择，本流程中第一步的胺可以带有这样一种官能团代替Q，它可以用于直接或间接偶联所需基团Q与从环化步骤生成的噻唑。
其中R4或R4’不是H的本发明化合物可以按照标准有机化学技术制备，例如还原性胺化，其中使起始性氨基酸残基类似物，例如NH2-CH(R3)-C(O)-OH与适合的醛或酮反应，得到所需的R4和R4’取代基。参见流程5。然后利用标准的肽偶联工艺，所得R4/R4’取代的氨基酸中间体可以与下一氨基酸中间体或化合物的其余部分缀合。
流程5
在具体的实施方式中，使丙氨酸与1-甲基吲哚-2-甲醛反应，用氰基硼氢化钠的1％HOAc/DMF溶液还原，得到N-取代的丙氨酸残基，它可以用于制备本发明化合物。参见流程6。
流程6
作为替代选择，引入R4/R4’取代基的还原性胺化工艺是化合物制备中的最后一步。
当本发明化合物带有除H以外的R4或R4’取代基时，它们也可以如下制备，用所需的胺取代带有离去基团的适合的酸中间体。例如，按照流程7，用胺R4-NH2或R4-NH-R4’取代Br-CH(R3)-C(O)-OH。
流程7
作为替代选择，引入R4或R4’取代基的取代反应可以作为化合物制备中的最后一步进行，如流程8所述。
流程8
在具体的实施方式中，使2-溴丙酸与下列胺的DMF溶液反应，鼓泡直至取代完全，生成N-取代的丙氨酸残基
其中X1或X2是硫的本发明化合物、也就是带有硫代酰胺的化合物可以按照既定的有机化学技术制备。例如，其中X2是硫的化合物可以按照流程9制备，始于Fmoc(芴基甲氧羰基)保护的氨基酸残基类似物NH2-CH(R2)-COOH，将其溶于THF，冷却至-25℃，加入DIPEA，继之以加入氯甲酸异丁酯。10分钟后，加入二胺4-硝基苯-1，2-二胺，将反应混合物在-25℃下连续搅拌2小时，然后在室温下过夜。真空除去THF，混合物然后受到快速色谱处理，使用50％EtOAc/己烷洗脱，得到产物。将Fmoc-丙氨酸衍生物、五硫化磷和碳酸钠混合在THF中，搅拌过夜。浓缩溶液，直接色谱处理，使用80％EtOAc/己烷洗脱，得到活化的硫代丙氨酸。然后将活化硫代丙氨酸和亚硝酸钠混合在乙酸中，用H2O稀释。过滤所得沉淀，干燥，得到产物。将硫代丙氨酸和A环取代的脯氨酸氨基酸残基类似物溶于DMF，使二者偶联。然后将硫代酰胺产物用20％PIP/DMA去保护15分钟，用于与R4/R4’-N-C(R3)(R3’)-COOH缀合。作为替代选择，首先使Fmoc-保护的硫代酰胺与A环取代的脯氨酸氨基酸残基类似物偶联，继之以Fmoc去保护，随后与R4/R4’-R4/R4’-N-C(R3)(R3’)-COOH氨基酸残基类似物偶联。
流程9
实用性 本发明化合物抑制IAP蛋白与胱天蛋白酶结合，特别是X-IAP与胱天蛋白酶3和7的结合性相互作用。这些化合物也抑制ML-IAP与Smac蛋白结合。因此，本发明化合物可用于诱导细胞中的程序性细胞死亡或者使细胞敏感于程序性细胞死亡信号，特别是癌细胞。本发明化合物可用于诱导过度表达IAP蛋白的细胞中的程序性细胞死亡。作为替代选择，本发明化合物可用于诱导其中线粒体程序性细胞死亡途径被破坏、以致Smac从ML-IAP蛋白中释放被抑制的细胞中的程序性细胞死亡，例如借助Bcl-2的增量调节或者Bax/Bak的减量调节。更广泛地，本发明化合物能够用于治疗所有不能经历程序性细胞死亡的癌症类型。这类癌症类型的实例包括成神经母细胞瘤、肠癌(例如直肠癌、结肠癌、家族性腺瘤息肉癌(familiary adenomatous polyposiscarcinoma)和遗传性非息肉结肠直肠癌)、食道癌、唇癌、喉癌、咽下部癌(hypopharynx carcinoma)、舌癌(tong carcinoma)、唾液腺癌、胃癌、腺癌、髓样甲状腺癌、乳头状甲状腺癌(papillary thyroidea carcinoma)、肾癌、肾实质癌(kidney parenchym carcinoma)、卵巢癌、宫颈癌、子宫体癌、子宫内膜癌、绒膜癌、胰腺癌、前列腺癌、睾丸癌、乳腺癌、泌尿系癌(urinary carcinoma)、黑素瘤、脑肿瘤(例如成胶质细胞瘤、星形细胞瘤、脑脊膜瘤、成神经管细胞瘤和外周神经外胚层肿瘤(peripheral neuroectodermal tumors))、何杰金氏淋巴瘤、非何杰金氏淋巴瘤、Burkitt淋巴瘤、急性淋巴性白血病(ALL)、慢性淋巴性白血病(CLL)、急性骨髓性白血病(AML)、慢性骨髓性白血病(CML)、成年T-细胞白血病淋巴瘤(adult T-cell leukemia lymphoma)、肝细胞癌、胆囊癌、支气管癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、多发性骨髓瘤、基底细胞癌、畸胎瘤、成视网膜细胞瘤、脉络膜黑素瘤(choroidea melanoma)、精原细胞瘤、横纹肌肉瘤(rhabdomyo sarcoma)、颅咽管瘤(craniopharyngeoma)、骨肉瘤、软骨肉瘤、肌肉瘤、脂肉瘤、纤维肉瘤、尤因氏肉瘤和浆细胞瘤。
本发明化合物可用于使细胞敏感于程序性细胞死亡信号。因此，这些化合物可以在给予放射疗法或者细胞抑制性或抗肿瘤性化学疗法之前、伴随或之后给药。适合的细胞抑制性化学疗法化合物包括但不限于(i)抗代谢产物，例如阿糖胞苷、氟达拉滨、5-氟-2’-脱氧尿苷、吉西他滨、羟基脲或甲氨蝶呤；(ii)DNA-片段化剂，例如博来霉素；(iii)DNA-交联剂，例如苯丁酸氮芥、顺铂、环磷酰胺或氮芥；(iv)插层剂(intercalating agents)，例如阿德里亚霉素(阿霉素)或米托蒽醌；(v)蛋白质合成抑制剂，例如L-天门冬酰胺酶、放线菌酮、嘌呤霉素或白喉毒素；(vi)拓扑异构体酶I毒素，例如喜树碱或托泊替堪；(vii)拓扑异构体酶II毒素，例如依托泊苷(VP-16)或替尼泊苷；(viii)微管-指引剂，例如秋水仙胺(colcemid)、秋水仙碱、紫杉醇(paclitaxel)、长春花碱或长春新碱；(ix)激酶抑制剂，例如flavopiridol、staurosporin、STI571(CPG57148B)或UCN-01(7-羟基staurosporine)；(x)各种研究剂，例如硫铂、PS-341、丁酸苯基酯、ET-18-OCH3或法呢基转移酶抑制剂(L-739749，L-744832)；多元酚，例如槲皮素、白藜芦醇(resveratrol)、piceatannol、epigallocatechinegallate、茶黄素(theaflavins)、黄烷醇、原花青素、桦木酸及其衍生物；(xi)激素，例如糖皮质激素或芬维A胺(fenretinide)；(xii)激素拮抗剂，例如他莫西芬、非那雄胺(finasteride)或LHRH拮抗剂。在具体的实施方式中，本发明化合物是与选自如下的细胞抑制性化合物共同给药的顺铂、阿霉素、红豆衫醇(taxol)、泰索帝(taxotere)和丝裂霉素C。在具体的实施方式中，细胞抑制性化合物是阿霉素。
另一类能够用在本发明中的活性化合物是通过与死亡受体结合能够敏感于或者诱导程序性细胞死亡的那些(“死亡受体激动剂”)。这类死亡受体激动剂包括死亡受体配体，例如肿瘤坏死因子a(TNF-α)、肿瘤坏死因子β(TNF-β，淋巴毒素-α)、LT-β(淋巴毒素-β)、TRAIL(Apo2L，DR4配体)、CD95(Fas，APO-1)配己体、TRAMP(DR3，Apo-3)配体、DR6配体以及任何所述配体的片段和衍生物。在实施方式中，死亡受体配体是TNF-α。在具体实施方式
中，死亡受体配体是Apo2L/TRAIL。此外，死亡受体激动剂包含死亡受体的激动性抗体，例如抗-CD95抗体、抗-TRAIL-R1(DR4)抗体、抗-TRAIL-R2(DR5)抗体、抗-TRAIL-R3抗体、抗-TRAIL-R4抗体、抗-DR6抗体、抗-TNF-R1抗体和抗-TRAMP(DR3)抗体以及任何所述抗体的片段和衍生物。
出于使细胞敏感于程序性细胞死亡的目的，本发明化合物也能够与放射疗法联合使用。措辞“放射疗法”表示电磁或粒子放射在肿瘤形成治疗中的应用。放射疗法基于递送至靶区域的高剂量放射将导致肿瘤与正常组织中繁殖细胞死亡的原理。放射剂量制度一般按照放射吸收剂量(rad)、时间和分次加以限定，并且必须由肿瘤学家谨慎地限定。患者接受的放射量将依赖于各种考虑因素，但是两种最重要的考虑因素是肿瘤相对于机体其他关键结构或器官的位置和肿瘤蔓延的程度。放射治疗剂的实例提供在放射疗法中但不限于此，并且是本领域已知的(Hellman，Principles of Radiation Therapy，Cancer，inPrinciples I and Practice of Oncology，24875(Devita et al.，4th ed.，vol 1，1993)。最近在放射疗法上的进展包括三维保形外束放射、强度可调的放射疗法(IMRT)、趋实体性放射外科和近程治疗(组织内放射疗法)，后者将放射源直接置于肿瘤内作为所植入的“种子”。这些新近的治疗形态递送较大剂量的放射至肿瘤，这就解释了它们与标准外束放射疗法相比增加有效性的原因。
具有β-发射性放射性核素的离子化放射被认为对于放射治疗应用是最有用的，因为离子化粒子(电子)的线性能量转移(LET)适中及其范围居间(在组织中通常为若干毫米)。γ射线递送剂量的水平较低，不过距离大得多。α粒子代表另一种极端，它们递送非常高的LET剂量，但是具有极为有限的范围，因此必须与所要治疗的组织细胞紧密接触。另外，α发射体一般是重金属，这限制了可能的化学过程，呈现过度的危害，放射性核素从所要治疗的区域泄漏。依赖于所要治疗的肿瘤，所有种类的发射体在本发明的范围内都是可想象的。
此外，本发明涵盖非离子化放射类型，例如紫外(UV)放射、高能可见光、微波放射(高温疗法)、红外(IR)放射和激光。在本发明的确切实施方式中，应用UV放射。
本发明也包括含有本发明化合物和治疗惰性载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物或药品，以及使用本发明化合物制备这类组合物和药品的方法。通常，如下将用在本发明方法中的式I化合物配制成盖仑给药形式(galenicaladministration form)，在环境温度和适当的pH下，在所需的纯度下，与生理学上可接受的载体混合，也就是在所采用的剂量和浓度下对接受者无毒的载体。制剂的pH主要依赖于化合物的特定用途和浓度，但是可以为从约3至约8。在pH5的乙酸盐缓冲液中的制剂是适合的实施方式。在一种实施方式中，用于本文的抑制性化合物是无菌的。化合物一般将被作为固体组合物贮存，不过冻干制剂或水溶液是可接受的。
本发明组合物将以符合良好医药实践的方式被配制、服用和给药。在这种上下文中的考虑因素包括所治疗的特定病症、所治疗的特定哺乳动物、个体患者的临床条件、病症的原因、药物的递送部位、给药的方法、给药的安排和医务人员已知的其他因素。所要给予的化合物的“有效量”将受这类考虑因素支配，是抑制IAP与胱天蛋白酶相互作用、诱导程序性细胞死亡或者使恶性细胞敏感于程序性细胞死亡信号所必需的最小量。这类量可以低于对正常细胞或哺乳动物整体有毒的量。
一般而言，每剂肠胃外给予本发明化合物的初始药学有效量将在约0.01-100mg/kg的范围内，例如约0.1至20mg/kg患者体重每天，所用化合物的典型初始范围为0.3至15mg/kg/天。口服单元剂型、例如片剂和胶囊可含有约25至约1000mg本发明化合物。
本发明化合物可以借助任意适合的手段给药，包括口服、外用、透皮、肠胃外、皮下、腹膜内、肺内和鼻内，如果需要局部治疗的话还有伤口内给药。肠胃外输注包括肌内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下给药。适合的口服剂型的实例是片剂，含有约25mg、50mg、100mg、250mg或500mg本发明化合物，复合有约90-30mg无水乳糖、约5-40mg交联羧甲基纤维素钠、约5-30mg聚乙烯吡咯烷酮(PVP)K30和约1-10mg硬脂酸镁。先将粉碎的成分混合在一起，然后与PVP溶液混合。可以将所得组合物干燥，造粒，与硬脂酸镁混合，利用常规设备压制成片。气雾剂可以如下制备，将例如5-400mg的本发明化合物溶于适合的缓冲溶液，例如磷酸盐缓冲液，如果需要的话加入张性剂，例如盐，例如氯化钠。通常过滤该溶液，例如利用0.2微米滤器，以除去杂质和污染物。
实施例 参照下列实施例将更加充分地理解发明。不过，它们不应被解释为限制发明的范围。从商业来源获得试剂和溶剂，原样使用。ISCO色谱表示Teledyne-Isco，Inc.Lincoln，Nebraska的Companion系统预包装硅胶柱。借助LCMS和1H NMR分析检查所有化合物的特性和纯度。
本文所用的缩写如下 ACN乙腈； Chg环己基甘氨酸； DCM二氯甲烷； DIPEA二异丙基乙胺； DMAP4-二甲氨基吡啶； DME1，2-二甲氧基乙烷； DMF二甲基甲酰胺； DMSO二甲基亚砜； EDC1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺； EEDQ2-乙氧基-1-乙氧羰基-1，2-二氢喹啉 LCMS液相色谱-质谱； HATUO-(7-偶氮苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐； HOBtN-羟基苯并三唑； HBTU2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基-脲鎓六氟磷酸盐； HPLC高效液相色谱； NBSN-溴琥珀酰亚胺； TASF三(二甲氨基)锍二氟三甲基硅酸盐； TEA三乙胺； TFA三氟乙酸盐； THF四氢呋喃。
实施例12-[叔丁氧羰基-(1H-吡咯-2-基甲基)-氨基]-丙酸
将丙氨酸乙酯b(5g，32.5mmol)、吡咯-2-甲醛a(3.1g，32.5mmol)、氰基硼氢化钠(2.04g，32.5mmol)和AcOH(1％)混合在DMF中，搅拌过夜。用H2O淬灭反应，蒸发DMF。将混合物用EtOAc稀释，用0.1N NaOH洗涤，干燥，浓缩，得到产物c2.5g。将所得酯c(2.5g，12.8mmol)、二碳酸二叔丁酯(3.06g，14mmol)混合在THF、H2O与NaHCO3中，搅拌过夜。蒸发THF，将混合物用EtOAc稀释，用1N NaOH、饱和NH4Cl和盐水洗涤。干燥后，浓缩混合物，得到Boc-保护的酯d3.3g。将Boc-保护的酯d(1.67g，5.6mol)、氢氧化锂一水合物(284mg，6.77mmol)混合在0℃的THF和H2O中。真空除去THF，将溶液用稀H2SO4酸化，用EtOAc萃取两次。合并有机层，干燥，蒸发，得到产物2-[叔丁氧羰基-(1H-吡咯-2-基甲基)-氨基]-丙酸e。
实施例2噻唑取代的吡咯烷
遵循Williams的一般工艺(Williams，D.R.et al，M.J.Org.Chem.2001，66，8463)，将N-Cbz-脯氨酸酰胺a(500mg，2.0mmol)、Lawesson氏试剂(420mg，1.05mmol)与甲苯(5mL)的混合物在回流下加热2h。浓缩溶液，吸附到Celite上，经过快速色谱纯化(SiO2，40％乙酸乙酯-己烷)，得到393mg(74％)化合物b，为无色固体。

遵循Ciufolini的一般工艺(Ciufolini，M.A.et al，J.Org.Chem.1997，62，3804)，将溴丙酮酸乙酯(200μl，1.43mmol)加入到硫代酰胺b(378mg，1.43mmol)的乙醇(5mL)悬液中，将混合物在80℃下加热5min。在减压下蒸发溶剂，残余物经过快速色谱纯化(SiO2，梯度洗脱，30-40-50％乙酸乙酯-己烷)，得到393mg(74％)噻唑c，为无色固体。

将溴化苯基镁(2.1mL1.0M THF溶液，2.1mmol)历经5min滴加到冷的(-78℃)酯c(360mg，1.0mmol)的THF(5mL)溶液中。除去冷却浴，使溶液达到室温，此时倒入饱和NH4Cl水溶液(50mL)中。水层用50％乙酸乙酯-己烷萃取(3×10mL)。合并有机层，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩。残余物经过快速色谱纯化(SiO2，梯度洗脱，30-40％乙酸乙酯-己烷)，得到404mg(84％)噻唑d，为无色固体。

将三乙基硅烷(850μl，5.3mmol)和TFA(5mL)先后加入到醇d中，使所得溶液在室温下放置1h。蒸发溶剂，残余物经过快速色谱纯化(SiO2，30％乙酸乙酯-己烷)，得到定量收率的化合物e，为无色的油。

遵循Thurston的一般工艺(Bose，S.D.；Thurston，D.E.Tetrahedron Lett.1990，31，6903)，在室温下将BF3·Et2O(0.78mL，6.2mmol)加入到氨基甲酸酯e(280mg，0.62mmol)、丙硫醇(560μl，6.2mmol)与CH2Cl2(3mL)的溶液中。在室温下1天后，将反应物倒入1N NaOH(50mL)中，剧烈搅拌1h。分离各层，有机相用1N NaOH洗涤(2×5mL)。合并水层，用CH2Cl2萃取(2×5mL)，合并有机层，干燥(K2CO3)，过滤，浓缩。残余物经过快速色谱纯化(SiO2，梯度洗脱，40-50-60％乙酸乙酯-己烷，1％TEA)，得到122mg(61％)胺f，为无色固体。
实施例3噁唑取代的吡咯烷
将N-Boc-脯氨酸a(5.35g，24.9mmol)、丝氨酸甲酯盐酸盐b(3.50g，22.5mmol)、EDC(4.76g，24.85mmol)、DIPEA(4.0mL，22.5mmol)与CH2Cl2(90mL)的混合物维持过夜。将混合物用CH2Cl2(200mL)稀释，用1N HCl(3×100mL)、0.1N NaOH(3×100mL)和盐水(1×100mL)洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，得到5.2g(73％)二肽c，为无色泡沫。

向凉的(0℃)二肽c(4.57g，14.4mmol)与THF(100mL)的溶液历经30min分3份加入Burgess试剂(Pihko，P.M.；Koskinen，A.M.P.；Nissinen，M.J.；Rissanen，K.J.Org.Chem.1999，64，652和其中的参考文献)(3.77g，15.8mmol)。除去冷却浴，使反应达到室温，然后在回流下加热1h。冷却至室温后，在减压下除去THF，使残余物在EtOAc(200mL)与饱和NH4Cl水溶液(200mL)之间分配。有机层用饱和NH4Cl水溶液洗涤(2x50mL)。合并水相，用EtOAc萃取(1x50mL)，合并有机相，用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩。残余物经过快速色谱纯化(SiO2，50-75-100％乙酸乙酯-己烷)，得到2.94g(68％)化合物d，为无色固体。

遵循Koskinen的一般工艺(Pihko，P.M.；Koskinen，A.M.P.；Nissinen，M.J.；Rissanen，K.J.Org.Chem.1999，64，62和其中的参考文献)，向经过脱气的CH2Cl2(25mL)加入CuBr(8.79g，39.3mmol)、六亚甲基四胺(5.51g，39.3mmol)和DBU(5.9mL，39.3mmol)，将所得深色混合物剧烈搅拌，同时冷却至0℃。向该混合物历经5min加入经过脱气的d(2.94g，9.83mmol)与CH2Cl2(25mL)的溶液。除去冷却浴，将混合物剧烈搅拌2h。然后将反应物倒入1∶1饱和NH4Cl水溶液浓NH4OH(200mL)中，搅拌30min，然后用EtOAc萃取(3x50mL)。合并有机相，用饱和NH4Cl水溶液(2x50mL)、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩。残余物经过快速色谱纯化(SiO2，40-50％乙酸乙酯-己烷)，得到1.1g(38％)噁唑e，为无色固体。

将溴化苯基镁(4.4mL1.0M THF溶液，4.4mmol)历经5min滴加到冷的(-78℃)酯e(600mg，2.0mmol)的THF(10mL)溶液中。除去冷却浴，使溶液达到室温，此时倒入饱和NH4Cl水溶液(50mL)中。水层用50％乙酸乙酯-己烷萃取(3×10mL)。合并有机层，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩。残余物经过快速色谱纯化(SiO2，梯度洗脱，20-30-40％乙酸乙酯-己烷)，得到443mg(52％)噁唑f，为无色固体。

将三乙基硅烷(20μl)和TFA(1mL)先后加入到醇f(50mg，0.1mmol)与CH2Cl2(1mL)的溶液中。使所得溶液在室温下放置1h。蒸发溶剂，使残余物在EtOAc(20mL)与1N NaOH(20mL)之间分配。有机相用1N NaOH洗涤(2x20mL)。合并水相，用EtOAc萃取(1x20mL)，合并有机相，用盐水洗涤(1x20mL)，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，得到胺g，为无色的油，被残留的三乙基硅烷污染。这种产物直接用于下面的偶联。
实施例4甲基酮的合成
将二氢苯并呋喃a(Davies，H.M.L；Grazini，M.V.A.；Aouad，E.Org.Lett.2001，3，1475)(160mg，0.9mmol)、DDQ(300mg)与CH2Cl2(11mL)的混合物维持在室温下达2天。将溶液用50％乙酸乙酯-己烷稀释，用0.5N NaOH(3×10mL)、盐水(1×10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，得到150mg(93％)苯并呋喃b。

将氯化异丙基镁(7.1mL2.0M THF溶液，14.2mmol)滴加到苯并呋喃甲基酯b(500mg，2.84mmol)与N，O-二甲基羟胺盐酸盐(690mg，7.1mmol)在THF(8mL)中的混合物中，维持<-20℃。使混合物历经20min升温至0℃，然后倒入50mL饱和NH4Cl水溶液中。水相用EtOAc萃取(3×20mL)，合并有机相，用盐水洗涤(1×50mL)，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，得到577mg(85％)酰胺c，为澄清的油。

在0℃下，向酰胺c(660mg，3.22mmol)与THF(6mL)的溶液加入MeMgBr(3mL3.0M THF溶液，9mmol)。使溶液维持在0℃达30min，然后升温至20℃达30min，此时有沉淀生成。将混合物倒入100mL饱和NH4Cl水溶液中。水相用EtOAc萃取(3×50mL)，合并有机相，用盐水洗涤(1×50mL)，干燥(Na2O4)，过滤，浓缩，得到460mg(89％)酮d，为澄清的油。

将叔丁醇钾(2.2g，17.5mmol)、氟代酮e(3.0g，15.9mmol)与乙二醇(30mL)的混合物在50℃下加热1h，然后在60℃下加热2h。然后将混合物倒入500mL饱和NH4Cl水溶液中。水相用Et2O萃取(3×150mL)，合并有机相，用水(3×150mL)、盐水(1×50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)。使混合物吸附到Celite上，色谱处理(ISCO，120g二氧化硅柱，10-60％EtOAc-己烷)，得到2.23g(61％)羟基醚f，为无色固体。

将氰化钾(6.9g，106mmol)、氟代酮e(2.0g，10.6mmol)与DMSO(20mL)的混合物维持在室温下达4天，然后在50℃下加热1天。然后将混合物倒入500mL1N NaOH中。水相用Et2O萃取(3×150mL)，合并有机相，用水(3×150mL)、盐水(1×50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)。使混合物吸附到Celite上，经过色谱处理(ISCO，120g-二氧化硅柱，0-20％EtOAc-己烷)，得到1.15g(55％)腈g，为黄色固体。

将二溴化物h(2.33g，7.78mmol)、NaSMe(600mg，8.56mmol)与EtOH(5mL)的混合物维持在室温下达18h。将混合物倒入75mL 1N NaOH中，用EtOAc萃取(3×50mL)。合并有机相，用1N NaOH(1×50mL)、盐水(3×50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，得到2.06g(98％)硫醚i，为无色的油。

向-78℃的溴化物i(500mg，1.87mmol)与THF(15mL)的溶液历经5min加入sec-BuLi(1.6mL1.4M环己烷溶液，2.25mmol)。在-78℃下5min后，用DMF(0.5mL)迅速淬灭深紫色溶液，使溶液升温至0℃，维持在该温度下达5min。然后将溶液倒入饱和NH4Cl水溶液(50mL)中。水相用EtOAc萃取(3×25mL)，合并有机相，用盐水洗涤(1×50mL)，干燥(Na2SO4)，过滤。使混合物吸附到Celite上，经过色谱处理(ISCO，12g二氧化硅柱，0-10％EtOAc-己烷)，得到260mg(64％)醛j，为澄清的油。

在0℃下，向醛j(400mg，1.86mmol)与THF(5mL)的溶液加入MeMgCl(0.9mL3.0M THF溶液，2.8mmol)。使溶液维持在0℃下达30min，然后升温至20℃达30min。将混合物倒入50mL饱和NH4Cl水溶液中。水相用EtOAc萃取(3×25mL)，合并有机相，用盐水洗涤(1×50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，得到粗的醇k，为澄清的油，无需进一步纯化即可使用。

在0℃下，向粗的硫化物k与MeOH(5mL)的溶液历经20min加入Oxone(1.3g，2.1mmol)的水(5mL)悬液。使混合物达到室温，然后倒入50mL饱和NH4Cl水溶液中。水相用EtOAc萃取(3×25mL)，合并有机相，用盐水洗涤(1×50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩。将这种残余物溶于MeOH(10mL)，冷却至0℃，向其中历经20min加入Oxone(2.6g，4.2mmol)的水(10mL)悬液。将混合物在室温下搅拌过夜，然后倒入50mL饱和NH4Cl水溶液中。水相用EtOAc萃取(3×25mL)，合并有机相，用盐水洗涤(1×50mL)，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，得到550mg(100％两步)砜l，为澄清的油。

将醇l(550mg，2.1mmol)、Celite(680mg)与PCC(500mg，2.31mmol)的混合物在室温下剧烈搅拌6h。加入更多的PCC(200mg)，将混合物搅拌过夜。使混合物吸附到更多的Celite(5g)上，经过色谱处理(ISCO，12g二氧化硅柱0-50％EtOAc-己烷)，得到380mg(69％)酮m，为无色固体。

将亚硫酰氯(26mL,365mmol)加入到2-甲氧基-1-萘甲酸n(4.5g，22.3mmol)与甲苯(45mL)的混合物中。将所得混合物在75℃下加热3h。在减压下除去溶剂，中间体酰氯在高真空下干燥1h。将其溶于THF(50mL)，在N2下冷却至0℃。历经15min加入二甲基锌(45mL1.0M庚烷溶液，44.6mmol)。将反应混合物保持在0℃下达5min，升温至室温。缓慢加入饱和NH4Cl(200mL)淬灭反应。水相用EtOAc萃取(3x100mL)，合并有机相，用盐水洗涤(1×100mL)，干燥(MgSO4)，过滤，在真空中浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash40g柱纯化(5-15％乙酸乙酯-己烷)，得到1.96g(44％)酮o，为白色固体。

遵循Caldwell的一般工艺(Ichinose，N.；Mizuno，K.；Otsuji，Y.；Caldwell，R.A.；Helms，A.M.J.Org.Chem.1998，63，3176-84)，向CH3MgCl(3.4mL3.0MTHF溶液，10.0mmol)的THF(20mL)溶液滴加4-甲氧基-1-萘甲腈p(0.5g，2.7mmol)的甲苯(10mL)溶液。加入后，向混合物加入甲苯(10mL)。将所得溶液加热至回流达8h。加入AcOH水溶液(50％，10mL)，将混合物加热至回流达4h。冷却后，将混合物用水稀释，分离有机相，干燥(MgSO4)，过滤，在真空中浓缩，得到0.5g(93％)酮q，为黄色的油，无需进一步纯化即可使用。

按照Boswell的一般工艺(Boswell，E.G.；Licause，J.F.J.Org.Chem.1995，60，6592-94)，在0℃N2下向硫代甲醇钠(0.41g，5.8mmol)的无水DMSO(8mL)溶液滴加4-氟-1-乙酰基萘e(1.0g，5.3mmol)的DMSO(8mL)溶液。在室温下搅拌1.5h，将混合物用水稀释，用CH2Cl2萃取(3x20mL)，合并有机相，干燥(MgSO4)，过滤，在真空中浓缩，得到1.0g(88％)硫化物r，为浅黄色固体，无需进一步纯化即可继续反应。

按照Trost的一般工艺(Trost，B.M.；Curran，D.P Tetrahedron Lett.1981，22，1287-90)，向冷的(0℃)硫化物r(2.3g，10.6mmol)的甲醇(50mL)溶液滴加过硫酸氢钾(Oxone，22.8g，37.1mmol)的水(75mL)溶液，保持反应温度低于5℃。将所得浆液在室温下搅拌72h，用水稀释，用CH2Cl2萃取(2x100mL)。合并有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到粗产物。使残余物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash40g柱纯化(10-40％乙酸乙酯-己烷)，得到2.32g(88％)砜s，为灰白色固体。

将4-氟-1-乙酰基萘e(4.75g，25.2mmol)、吗啉(6.60mL，75.8mmol)、K2CO3(5.21g，37.8mmol)、DMSO(30mL)与水(12mL)的混合物在90℃下加热8h。将反应混合物用水稀释，用CH2Cl2萃取(2x100mL)。合并有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，在真空中浓缩，得到粗产物。将其用水研制，过滤，用水洗涤，干燥，得到6.40g(99％)吗啉基酮t，为黄色固体。

将2’-羟基-1’-乙酰萘u(5.0g，26.9mmol)和K2CO3(11.1g，81.0mmol)在丙酮(150mL)中搅拌20min。向这种混合物加入溴乙基甲基醚(3.8mL，39.5mmol)和催化性KI。将所得混合物加热至回流达72h。冷却后，在真空中除去溶剂。将残余物溶于EtOAc，用1N NaOH水溶液、盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，在真空中浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash120g柱纯化(5-25％乙酸乙酯-己烷)，得到3.21g(49％)醚v，为油。

按照Short的一般工艺(Short，W.F.；Wang，H.J.Chem.Soc.1950，991-4)，向配有回流冷凝器、滴液漏斗和NaOH水溶液捕集器的三颈圆底烧瓶加入1-萘甲酸w(10.0g，58.0mmol)和AcOH(35mL)。将这种溶液在110℃下加热，在溴(3.12mL，61.0mmol)的加入期间搅拌。加入后，将混合物加热另外1.5h(在加热期间有黄色固体沉淀出来)，然后在室温下搅拌24h。将混合物倒入冰水中。过滤固体，用水洗涤，从乙酸(250mL)中结晶，得到8.9g(61％)溴代酸x，为白色固体。

将溴代酸x(6.0g，23.9mmol)、N，O-二甲基羟胺盐酸盐(2.33g，23.9mmol)、EDC(4.6g，23.9mmol)与DIPEA(6.3mL，35.8mmol)的DMF(35mL)溶液在室温下搅拌4h。将混合物倒入水中，用CH2Cl2萃取(2x200mL)。合并有机层，用0.5N HCl水溶液、0.5N NaOH水溶液洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，在真空中浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash120g柱纯化(2-10％乙酸乙酯-CH2Cl2)，得到4.6g(65％)酰胺y，为油。

将氯化甲基镁(8.5mL3M THF溶液，25.5mmol)滴加到冷的(0℃)酰胺z(2.5g，8.5mmol)与THF(80mL)的溶液中。将所得溶液在0℃下搅拌1h，然后升温至室温。2.5h后，缓慢加入AcOH水溶液(50％，10mL)淬灭，用水(100mL)稀释，分离。水层用EtOAc萃取(1x100mL)。合并有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，在真空中浓缩，得到1.9g(90％)酮a’，为黄色固体。

将2’-羟基-1’-乙酰萘u(5.0g，26.9mmol)、K2CO3(7.41g，53.7mmol)与1-溴-2-氯乙烷(4.4mL，53.7mmol)在DMF(70mL)中的混合物在80℃下加热24h。将冷却了的混合物用水稀释，用CH2Cl2萃取(2x100mL)。合并有机相，用0.5N NaOH水溶液、盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到粗产物。使残余物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash40g柱纯化(5-25％乙酸乙酯-己烷)，得到1.6g(24％)氯乙氧基酮b’，为浅黄色固体。

将氯乙氧基酮b’(3.0g，12.1mmol)、苯甲酸(1.47g，12.1mmol)与Cs2CO3(4.73g，14.5mmol)在DMF(25mL)中的混合物在50℃下加热16h。加入苯甲酸(0.735g，6.0mmol)和Cs2CO3(2.36g，7.2mmol)，将混合物在80℃下加热24h。过滤混合物，用EtOAc(100mL)稀释，用水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，在真空中浓缩，得到3.95g(98％)酮c’，为黄色的油。

按照Oda的一般工艺(Oda，M.；Yamamuro，A.；Watabe，T.Chem.Lett.1979，1427-30)，将三甲基甲硅烷基氰(4.5mL，34.1mmol)缓慢加入到5-甲氧基-1-四氢萘酮d’(5.0g，28.4mmol)、催化性ZnI2在甲苯(12mL)中的混合物中。将所得混合物在室温下搅拌24h。加入吡啶(40mL)和POCl3(8.0mL，85.2mmol)，将混合物加热至回流达8h。将冷却了的深色溶液倒入冰水(300mL)和浓HCl(10mL)中，同时搅拌，用EtOAc萃取(3x400mL)。合并有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到4.78g粗的不饱和腈e’，为褐色固体。
将上述不饱和腈e’(4.78g，25.8mmol)与DDQ(5.86g，25.8mmol)在甲苯(100mL)中的混合物在100℃下加热3.5h。冷却后，过滤除去沉淀，用甲苯洗涤。合并甲苯层，用0.5N NaOH(2x100mL)洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩，得到4.22g(81％)腈f’，为黄色固体，无需进一步纯化即可继续反应。

遵循p向q转化的一般工艺，从腈f’(2.20g，12.0mmol)得到1.64g(68％)酮g’，为褐色的油。

将(2-氯乙氧基)三甲基硅烷(8.70mL，53.8mmol)加入到2’-羟基-1’-乙酰萘u(5.0g，26.9mmol)、KOH(3.0g，53.8mmol)在DMSO(60mL)与水(20mL)中的混合物中。将所得混合物在80℃下加热24h。混合物用水(400mL)稀释。过滤收集结晶性沉淀，用水洗涤，干燥，得到5.21g(84％)羟基酮h’，为褐色固体。

在室温下，将溴(610μl，11.9mmol)历经10min加入到羟基酮h’(2.50g，10.9mmol)在CH2Cl2(30mL)与AcOH(8.0mL)中的溶液中。2h后，用10％Na2S2O3水溶液(5mL)淬灭，用CH2Cl2(50mL)稀释。分离各层，水层用50mLCH2Cl2萃取。合并有机层，用0.5N NaOH水溶液洗涤，直至水性洗液为碱性，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到3.70g(96％)溴代酮i’，为深褐色油。

将2-甲氧基乙醇(3.35mL，42.5mmol)与叔丁醇钾(4.76g，42.5mmol)在THF(80mL)中的混合物在室温下搅拌10min。向这种混合物滴加4-氟-1-乙酰基萘(4.0g，21.3mmol)的THF(20mL)溶液，将混合物在室温下搅拌24h。将混合物用水(50mL)稀释，分离各相。将有机层用0.5N NaOH、盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到5.6g(106％，额外重量为溶剂)酮j’，为褐色液体，在高真空下固化。

按照Tagat的一般工艺(Tagat，J.R.；McCombie，S.W.；Nazareno，D.V.；Boyle，C.D.；Kozlowski，J.A.；Chackalamannil，S.；Josien，H.；Wang，Y.；Zhou，G.J.Org.Chem.2002，67，1171-77)，将溴代酸x(3.0g，12.0mmol)的甲苯(18mL)悬液在80℃下加热。向这种反应混合物滴加N，N-二甲基甲酰胺二叔丁基缩醛(10.0mL，42mmol)，将所得混合物加热另外30min。冷却至室温，用水、饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，在真空中浓缩，得到2.87g(78％)叔丁基酯k’，为黄色的油，无需进一步纯化即可继续反应。

按照Tagat的一般工艺，在N2下将搅拌着的叔丁基酯k’(1.4g，4.5mmol)的无水THF(30mL)溶液冷却至-78℃。加入n-BuLi(3.65mL1.6M己烷溶液，5.85mmol)，将所得溶液搅拌2min，继之以加入N-氟苯磺酰亚胺(2.83g，9.0mmol)的THF(10mL)溶液。在-78℃下搅拌30min后，在-78℃用饱和NH4Cl水溶液淬灭反应。将水层用Et2O萃取(2x50mL)，干燥(MgSO4)，过滤，在真空中浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash40g柱纯化(2-20％，EtOAc-己烷)，得到0.57g(52％)氟代化合物l’，为无色液体。

在室温下，将三氟乙酸(3.85mL，50mmol)加入到搅拌着的氟代化合物1’(1.23g，5.0mmol)的CH2Cl2(50mL)溶液中。搅拌3h后，在真空中浓缩溶液，得到0.95g(100％)氟代酸m’，为油，继续反应。

将氟代酸m’(820mg，4.3mmol)、N，O-二甲基羟胺盐酸盐(420mg，4.3mmol)、EDC(825mg，4.3mmol)与DIPEA(750μl，4.3mmol)在DMF(12mL)中的混合物在室温下搅拌3h。将混合物用EtOAc(50mL)稀释，用10％柠檬酸、0.5N NaOH洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，吸附到Celite上，经过ISCOCombiFlash12g柱纯化(2-10％，EtOAc-己烷)，得到0.48g(48％)氟代酰胺n’，为油。

在0℃下，向氟代酰胺n’(1.07g，4.6mmol)THF溶液滴加CH3MgCl溶液(4.6mL3M THF溶液，13.8mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌1h，然后在室温下搅拌2h。将混合物用50％AcOH水溶液(10mL)淬灭，用水(50mL)、EtOAc(50mL)稀释，分离。水层用EtOAc(50mL)萃取。合并EtOAc层，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到0.77g(89％)氟代酮o’，为油。

按照Coudret的一般工艺(Hortholary，C.；Coudret，C.J.Org.Chem.2003，68，2167-74)，在0℃下向4-氨基-1-萘甲腈p’(5.0g，29.7mmol)的浓HCl(50mL)溶液小心地加入亚硝酸钠(3.07g，44.5mmol)。将混合物在0℃下搅拌1h，然后转移至加液漏斗，滴加到冰冷的CuCl(5.3g，53.5mmol)的水(150mL)溶液中。加入后，向反应混合物加入CH2Cl2(80mL)。使所得混合物升温至室温，搅拌4h。将混合物用CH2Cl2稀释，分离各相。水相小心地用CH2Cl2萃取(2x150mL)。合并CH2Cl2相，用饱和硫代硫酸钠洗涤一次，干燥(MgSO4)，过滤，吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash120g柱纯化(2-12％，EtOAc-己烷)，得到2.63g(46％)氯代化合物q’，为白色固体。

遵循p向q转化的一般工艺，从氯代化合物q’(2.63g，14.1mmol)得到2.1g(74％)氯代酮r’，为黄色液体。

遵循Hallberg的工艺(Alterman，M.；Hallberg，A.J.Org.Chem.2000，68，7984-89)，将溴代酮x(1.40g，5.62mmol)、Zn(CN)2(790mg，6.74mmol)、Pd(PPh3)4(216mg，0.19mmol)与DMF(8mL)的混合物在密封重壁试管微波反应器(Emry’s Optimizer)中、在180℃下加热5min。冷却后，将其用水(30mL)稀释，用EtOAc(50mL)萃取，干燥(MgSO4)，过滤，吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash40g柱纯化(5-20％，EtOAc-己烷)，得到900mg(83％)腈酮s’，为白色固体。

遵循Leadbeater的工艺(Arvela，R.；Leadbeater，N.E.SynLett.2003，8，1145-48)，将溴代酮x(100mg，0.40mmol)、NiCl2(103mg，0.80mmol)与DMF(2mL)的混合物在密封重壁试管微波反应器(Emry’s Optimizer)中、在200℃下加热8min。冷却后，将其用水(15mL)稀释，用EtOAc(20mL)萃取，干燥(MgSO4)，过滤，吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash4g柱纯化(5-15％，EtOAc-己烷)，得到55mg(68％)氯代酮t’，为灰白色固体。
实施例5甲基酮的溴化和噻唑的制备
将溴(260μl，5.07mmol)历经20min加入到酮a(784mg，4.6mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液中。将溶液维持在室温下达1h，然后用10％Na2S2O3水溶液(10mL)淬灭，剧烈搅拌20min。分离各层，将有机相用饱和NaHCO3水溶液(1×10mL)、盐水(1×10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，得到1.15g溴代酮b，为黄色的油。1H NMR分析表明是产物、起始性酮和二溴化产物的70∶15∶15混合物。

具体的工艺将Boc-脯氨酸-酰胺c(8.4g，39.2mmol)、Lawesson氏试剂(8.25g，20.4mmol)与甲苯的混合物在50℃下加热1h(更高温度的使用会导致对映体纯度的丧失)。然后使混合物吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCO，120g二氧化硅柱，梯度洗脱10-70％EtOAc-己烷)，得到7.6g(84％)硫代酰胺d，为无色固体。

噻唑生成的具体工艺将硫代酰胺d(7.81g，34mmol)、溴代酮b(7.05g，80％纯，根据1H NMR，22.6mmol)、吡啶(1.76mL，20.3mmol)与乙醇(75mL)的混合物在80℃下加热1h。在减压下除去乙醇，使残余物吸附到Celite上。残余物经过色谱处理(SiO2，梯度洗脱0-2.5-5％EtOAc/CH2Cl2)，得到6.3g(73％)噻唑e，为无色固体。

将溴化物f(145mg，0.33mmol)、PhB(OH)2(107mg，0.88mmol)、K2CO3(825μl 2.0M水溶液，1.65mmol)、Pd(PPh3)4(15mg，0.13mmol)与20％EtOH-甲苯(2.5mL)的混合物维持在80℃下达3h。将混合物用CH2Cl2(10mL)稀释，用lN NaOH洗涤(2×5mL)。合并水层，用CH2Cl2(1×10mL)。合并有机相，用盐水洗涤(1×10mL)，干燥(Na2SO4)，过滤，吸附到Celite上，经过快速色谱纯化(SiO2，10-15-20％丙酮-己烷)，得到74mg(52％)噻唑g，为无色固体。

将噻唑e(70mg，0.18mmol)的1∶1二氯甲烷己烷(1.5mL)溶液用N-氯琥珀酰亚胺(30mg，0.22mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌2h，此时加入另外的NCS(10mg)，将混合物搅拌过夜。加入Celite，在减压下除去二氯甲烷。产物经过色谱纯化(ISCO，12g二氧化硅柱，梯度洗脱0-30％EtOAc/己烷)，得到70mg(99％)氯代噻唑h。

将噻唑e(120mg，0.31mmol)的二氯甲烷(1.5mL)溶液用N-溴琥珀酰亚胺(65mg0.37mmol)处理。将反应混合物在室温下搅拌3h。此后加入Celite，在减压下除去二氯甲烷。产物经过色谱纯化(ISCO，12g二氧化硅柱，柱子先用CH2Cl2冲洗7分钟，再用0-9％EtOAc/CH2Cl2梯度冲洗9分钟)，得到128mg(90％)溴化物i。

遵循文献工艺((1)Maguire，M.P.；Sheets，K.R.；McVety，K.；Spada，A.P；Zilberstein，A.J.Med.Chem.1994，37，2129-2137；(2)Moreno，I.；Tellitu，I.；Dominguez，E.；SanMartin，R.；Eur.J.Org.Chem.2002，2126-2135)，将溴代噻唑i(280mg，0.61mmol)、炔基锡烷j(Dabdoub，M.J.；Dabdoub，V.B.；Baroni，A.C.M.J.Am.Chem.Soc.2001，123，9694-9695)(250mg，0.73mmol)、LiCl(大约50mg,120mmol)与toluene(6mL)的混合物用氮脱气30min。加入四(三苯膦)钯(0)(28mg，0.02mmol)，将混合物在100℃下加热3h。冷却后，向混合物加入Celite，在减压下除去溶剂。残余物经过色谱纯化(ISCO，12g二氧化硅柱，柱子先用CH2Cl2冲洗5分钟，再用0-20％EtOAc/CH2Cl2梯度冲洗10分钟)，得到160mg(60％)醇k。

遵循文献工艺(Neidlein，R.；Nussbaumer，T Heterocycles，2000，52,349)，将溴化物i(600mg，1.3mmol)、TMS-乙炔l(1.8mL，13mmol)和TMG(0.6mL，5mmol)溶于二甲基乙酰胺(6mL)。这种混合物用氮脱气30min。加入二氯化双(三苯膦)钯(46mg，0.07mmol)和碘化铜(I)(62mg，0.3mmol)，将混合物密封，在70℃下加热30分钟。将混合物用1/2-饱和氯化铵稀释，通过Celite垫过滤。将水性混合物用70％乙醚的己烷溶液萃取(3x20mL)，干燥(Na2SO4)，过滤，吸附到Celite上，经过色谱处理(ISCO，40g柱，用己烷冲洗3分钟后的溶剂梯度为0-11％乙酸乙酯的己烷溶液)。分离末端炔烃产物27mg(5％)以及200mg甲硅烷基衍生物。在室温下用碳酸钾(200mg)的甲醇(5mL)溶液处理3h，从这种产物中除去TMS基团。向混合物加入Celite和甲苯(1mL)，在减压下除去溶剂。产物经过色谱纯化(ISCO40g柱，用纯己烷冲洗3分钟后的溶剂梯度为0-11％乙酸乙酯/己烷)，得到另外110mg末端炔烃m(26％总计)。

将末端炔烃m(50mg，0.12mmol)溶于THF(0.3mL)，冷却至-78℃。滴加LHMDS(0.15mL1.0M THF溶液，0.15mmol)，搅拌10分钟。加入甲基碘(0.1mL，过量)，将反应在-78℃下搅拌10分钟，然后历经45分钟逐渐升温至室温。然后向反应混合物加入Celite，在减压下蒸发溶剂，残余物经过色谱纯化(ISCO，12g柱，梯度洗脱0-18％乙酸乙酯的己烷溶液)，得到25mg(63％)甲基炔烃n。

典型的Boc去保护将氨基甲酸酯o(75mg，0.18mmol)用TFA(2mL)和水(2滴)在CH2Cl2(2mL)中处理2h。在减压下除去挥发物，将残余物溶于乙酸乙酯(10mL)，用1N NaOH洗涤(3×3mL)。合并水层，用乙酸乙酯萃取(1×2mL)。合并有机相，用盐水洗涤(1×3mL)，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，得到定量收率的胺p。
实施例6线性偶联工艺
典型的HATU偶联将胺a(169mg，0.59mmol)、N-Boc-叔丁基甘氨酸(150mg，0.65mmol)、HATU(450mg，1.18mmol)、DIPEA(200μl，1.18mmol)与DMF(2mL)的混合物维持在室温下达2h。将溶液用乙酸乙酯(50mL)稀释，用1N HCl(3×10mL)、1N NaOH(3×5mL)、盐水(1×10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩。残余物经过快速色谱纯化(SiO2，10-15-20％乙酸乙酯-己烷)，得到286mg(97％)酰胺b，为无色固体。

遵循上述一般Boc去保护工艺，从Boc胺b(317mg，0.64mmol)得到定量收率的胺c，为无色固体。

典型的EDC偶联将胺c(300mg，0.76mmol)、N-Boc-丙氨酸(158mg，0.84mmol)、EDC(161mg，0.84mmol)、催化性DMAP与MeCN(3mL)的溶液维持在室温下达3h。将溶液用乙酸乙酯(50mL)稀释，用1N HCl(3×10mL)、1N NaOH(3×5mL)、盐水(1×10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，得到453mg粗残余物d，直接继续反应
典型的最后Boc除去和纯化将上述粗残余物d用TFA(2mL)和水(2滴)在CH2Cl2(2mL)中处理2h。在减压下除去挥发物。残余物经过反相HPLC纯化(C18，MeCN-H2O，0.1％TFA)，冻干除去溶剂，得到166mg(38％2步)胺e，为无色粉末。
实施例7 N-Boc-N-甲基-L-丙氨酸-L-环己基甘氨酸
将Fmoc-L-环己基甘氨酸(3.6g，9.6mmol)在DCM(50mL)与DIPEA(5.6mL，32mmol)中的溶液加入到2-氯三苯甲基氯树脂(5g，8mmol)中，在室温下轻轻搅动3小时。将树脂用DCM洗涤4次，DCM/MeOH/DIPEA(17∶2∶1)3次，DCM 3次，和二甲基乙酰胺(DMA)2次。用20％哌啶/DMA(50mL)处理树脂15分钟，除去Fmoc基团。树脂用DMA洗涤6次。向树脂加入Boc-N-甲基丙氨酸(3.3g，16mmol)、HBTU(6.1g，16mmol)与DIPEA(5.6mL，32mmol)的DMA/DCM(1∶1，50mL)溶液，在室温下轻轻搅动2小时。将树脂用DMA洗涤5次，DCM 2次，在减压下干燥。在室温下与HOAc/TFE/DCM(1∶1∶3,100mL)轻轻搅动2小时，使二肽从树脂上裂解。过滤除去树脂，浓缩溶液。与己烷(15倍体积)共沸除去残留的AcOH。固体残余物经过反相HPLC纯化(C18，MeCN-H2O，0.1％TFA)，冻干除去溶剂，得到1.2g(43％)二肽N-Boc-N-甲基-L-丙氨酸-L-环己基甘氨酸，为白色粉末。
实施例8 N-Boc-N-甲基-L-丙氨酸-L-脱氢吡喃基甘氨酸
将N-Cbz-脱氢吡喃基甘氨酸甲基酯a(Burk，M.J.；Gross，M.F.；Martinez，J.P.J.Am Chem.Soc.1995，117，9375和其中的参考文献)(5.2g，17mmol)、5％Pd.C(500mg)、MeOH(75mL)与THF(25mL)的混合物维持在H2气氛下达24h。将混合物通过Celite过滤，Celite用MeOH洗涤，在减压下浓缩，得到定量收率的胺b，为无色的油，直接继续反应。

将如上制备的胺b与CH2Cl2(40mL)、饱和NaHCO3水溶液(40mL)合并，冷却至0℃。然后滴加苄氧基碳酰氯(3.0mL)，将混合物剧烈搅拌过夜。分离各相，水相用CH2Cl2萃取(3×20mL)。合并有机相，用盐水洗涤(1×50mL)，干燥(Na2SO4)，过滤，吸附到Celite上，经过色谱处理(ISCO,120g二氧化硅柱，梯度洗脱5-55％EtOAc-己烷)，得到4.15g(80％)外消旋的Cbz-吡喃基甘氨酸甲基酯。在Chiracel OD柱上分离对映体，用10％EtOH-己烷洗脱。在这些条件下所需的S-对映体c首先洗脱出来。

将(S)-N-Cbz-吡喃基甘氨酸c甲基酯(2.4g，7.82mmol)、10％Pd·C(700mg)、MeOH(80mL)的混合物维持在1大气压H2下达24h。将混合物通过Celite过滤，用MeOH洗脱，在减压下浓缩，得到1.35g(100％)胺d，为无色的油。作为替代选择，遵循Ghosh的工艺(Ghosh，A.K.；Thompson，W.J.；Holloway，M.K.；McKee，S.P.；Duong，T.T.；Lee，H.Y.；Munson，P.M.；Smith，A.M.；Wai，J.M.；Darke，P.L.；Zugay，J.A.；Imini，E.A.；Schleif，W.A.；Huff，J.R.；Anderson，P.S.J.Med.Chem.，1993，36，2300)，可以合成吡喃基甘氨酸的对映体纯的形式。

将胺d(1.35g，7.8mmol)、N-Boc-N-甲基丙氨酸e(1.74g，8.6mmol)、EDC(1.65g，8.8mmol)与MeCN(50mL)的混合物维持在室温下过夜。在减压下除去MeCN，将残余物用EtOAc稀释，用0.5N HCl(3×10mL)、0.5N NaOH(3×10mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到2.1g(75％)被保护的二肽f，为澄清的油。

向0℃的酯f(2.10g，5.86mmol)与THF(50mL)的溶液加入LiOH·H2O(1.23g，29.3mmol)和水(2mL)。将混合物维持在0℃下达2h，然后除去冷却浴，将混合物搅拌过夜。然后在减压下除去大多数THF，将残余物用CH2Cl2稀释，用0.5N HCl洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩，得到1.53g(78％)二肽N-Boc-N-甲基-L-丙氨酸-L-脱氢吡喃基甘氨酸g，为无色固体。

会集偶联(convergent coupling)的具体工艺将胺h(69mg，0.26mmol)、来自实施例7的二肽N-Boc-N-甲基-L-丙氨酸-L-环己基甘氨酸(60mg，0.23mmol)、HOAt(Carpino，L.A.；EI-Faham，A.Tetrahedron，1999，55，6813)(47mg，0.24mmol)、DIC(53μl，0.34mmol)与CH2Cl2(2mL)的混合物维持在室温下过夜。使混合物吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCO，4g二氧化硅柱，梯度洗脱5-50％EtOAc-己烷)，得到94mg产物i，为无色固体，被二异丙基脲污染。混合物直接进行下一步。

将上述粗残余物i用TFA(2mL)和水(2滴)在CH2Cl2(2mL)中处理2h。在减压下除去挥发物。残余物经过反相HPLC纯化(C18，MeCN-H2O，0.1％TFA)，冻干除去溶剂，得到77mg(54％2步)胺盐i，为无色粉末。

将乙酸酯产物k(228mg，0.32mmol)、K2CO3(53mg，0.38mmol)在含水甲醇(1∶2，v∶v，15mL)中的混合物在室温下搅拌1h。在真空中除去甲醇。将残余物用水稀释，用CH2Cl2萃取(1x50mL)，将有机相干燥(MgSO4)，在真空中浓缩，得到粗产物。遵循一般工艺完成向胺盐l的转化，收率18％(3步)。
实施例8
ab 将按照Kice等所述工艺(J.Org.Chem.1989，54，3596-3602)制备的酸a(1.5g，6.9mmol)、胺HCl盐(868mg，8.9mmol)、EDC(1.3g，6.9mmol)与DIPEA(1.2mL，6.9mmol)在DMF(17mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。将混合物用EtOAc(50mL)稀释，用0.5N HCl、0.5N NaOH洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，在真空中浓缩，得到1.3g(74％)酰胺b，为黄色固体，无需进一步纯化即可继续反应。

在Parr反应器中，将10％Pd/C(200mg)加入到酸a(500mg，2.3mmol)、NaOH(92mg，2.3mmol)在EtOH(25mL)与水(5mL)中的溶液中。将混合物用N2净化10min，然后用Parr氢化器在50psi和室温下氢化2.5h。将所得混合物通过Celite过滤，在真空中浓缩，得到50mg(104％)胺盐b，为绿色-褐色固体。
实施例10
在0℃冷却下，向搅拌着的胺盐a(500mg，2.4mmol)在6N HCl(30mL)中的混合物一次性加入NaNO2(248mg，3.6mmol)(注意反应温度升高)。在0℃下搅拌1h后，经由滴液漏斗将这种溶液历经20min滴加到冰水冷却的CuBr(618mg，4.3mmol)的水(30mL)溶液中。然后向反应混合物缓慢加入二氯甲烷(40mL)(注意发生泡沫)。使反应混合物达到室温，搅拌4h。将其用CH2Cl2(100mL)稀释，分离，水层用另一部分CH2Cl2(100mL)洗涤。合并CH2Cl2，用饱和Na2S2O3水溶液洗涤一次，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash12g柱纯化(20-100％乙酸乙酯-己烷)，得到175mg(29％)溴代酸b，为浅黄色固体。
实施例11
将溴代酸a(680mg，2.7mmol)、胺HCl盐(264mg，2.7mmol)、EDC(520mg，2.7mmol)与DIPEA(472μL，2.7mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。使混合物在水(50mL)与乙酸乙酯(100mL)之间分配，分离，水层用另一部分EtOAc(100mL)洗涤。合并有机层，用1N HCl(50mL)、1N NaOH(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，在真空中浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash 12g柱纯化(10-50％乙酸乙酯-己烷)，得到300mg(38％)溴代酰胺b，为黄色的油。
实施例12
在0℃下，向溴代酰胺a(300mg，1.0mmol)的THF(8mL)溶液滴加CH3MgCl溶液(2.0mL3M THF溶液，6.0mmol)。将所得混合物搅拌1h，然后升温至室温达2h。将混合物用50％aq.AcOH(4mL)淬灭，用水(50mL)和EtOAc(50mL)稀释，分离。水层用EtOAc(50mL)萃取。合并EtOAc，干燥(MgSO4)，过滤，浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash12g柱纯化(2-l0％乙酸乙酯-己烷)，得到150mg(60％)溴代酮b，为浅黄色油。也可以采用Alvaro等(WO2004099143)和Tsuno等(Bull.Chem.Soc.of Japan1975，48(11)，3347-55)所述工艺制备化合物b。
实施例13
在78℃下，将起始性酸a(6.6g，30.4mmol)用亚硫酰氯(50mL)、CHCl3(50mL)和1滴DMF处理5h。将所得混合物在真空中浓缩，在高真空下干燥过夜。将所得黄色固体在冰水浴中冷却，缓慢加入MeOH(200mL)。然后回流1h。冷却至室温后，过滤收集所得沉淀，用冷的MeOH洗涤，干燥，得到5.0g(71％)酯b，为黄色固体。
实施例14
将酯a(5.0g，21.6mmol)与10％Pd/C(1.2g)的MeOH(200mL)悬液用N2净化5min，然后用H2气囊在室温下处理，直至反应完全(根据LCMS检查)。将反应混合物用N2净化10min后，混合物通过Celite过滤，用MeOH洗涤，在真空中浓缩，高真空干燥，得到4.2g(97％)胺b，为褐色的油。
实施例15
将溴代酮a(285mg，1.1mmol)、Zn(CN)2(400mg，3.4mmol)与Pd(PPh3)4(88mg，0.076mmol)在DMF(2mL)中的混合物在200℃微波中加热600sec。冷却后，用水(10mL)稀释，用EtOAc萃取(2x10mL)。过滤除去不溶物；将溶剂干燥(MgSO4)，浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash12g柱纯化(5-20％乙酸乙酯-己烷)，得到147mg(66％)腈酮b，为白色固体。也可以采用Alvaro等(WO2004099143)和Tsuno等(Bull.Chem.Soc.ofJapan1975，48(11)，3347-55)所述工艺制备化合物a。
实施例16
在冰水浴冷却下，向胺a(4.2g，20.9mmol)的6N HCl(100mL)悬液逐份加入NaNO2(2.2g，31.4mmol)(注意反应温度升高)。在冰水温度下搅拌1h后，将这种冷溶液滴加到冰冷的CuBr(5.4g，37.6mmol)的水(150mL)溶液上。加入后，向混合物缓慢加入CH2Cl2(80mL)。使反应混合物达到室温，搅拌4h。用更多的CH2Cl2(50mL)稀释。分离各相。水相用CH2Cl2萃取(2x50mL)。合并CH2Cl2，用饱和硫代硫酸钠(100mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash 120g柱纯化(1-8％乙酸乙酯-己烷)，得到3.1(66％)氯代酯b，为白色固体。
实施例17
遵循Williams等的一般工艺(Tetrahedron Lett.1995，36(31)，5461-5464)，在-5℃和N2下向搅拌着的酯a(1.5g，5.7mmol)与胺(700mg，7.1mmol)的THF(30mL)悬液历经20min加入CH3MgCl(16.1mL3M THF溶液，48.4mmol)，同时保持温度低于0℃。在-5℃下0.5h后，使反应混合物升温至室温，搅拌过夜。将反应用1N HCl淬灭，用1N HCl(100mL)稀释，混合物在35℃下加热3h，然后冷却，用EtOAc(150mL)洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash40g柱纯化(1-10％乙酸乙酯-己烷)，得到900mg(64％)氯代酮b，为澄清的液体。也可以采用Alvaro等(WO2004099143)和Tsuno等(Bull.Chem.Soc.ofJapan1975，48(11)，3347-55)所述工艺制备化合物b。
实施例18
将浓硫酸(2mL)缓慢加入到搅拌着的2-氟苯基乙酸a(10.0g，65.0mmol)在甲苯(100mL)与EtOH(7.6mL，130mmol)中的溶液中。将所得混合物在100℃下加热1.5h。在真空中浓缩，用EtOAc(200mL)稀释，用10％K2CO3洗涤，直至洗液为碱性，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩，得到9.9g(84％)酯b，为浅黄色油。
实施例19
将浓硫酸(3mL)缓慢加入到搅拌着的2，4-二氟苯基乙酸a(10.0g，58.1mmol)的EtOH(100mL)溶液中，在室温下搅拌2天。将其浓缩，用EtOAc(200mL)稀释，用10％K2CO3洗涤，直至洗液为碱性，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩，得到11.1g(95.5％)二氟代酯b，为白色固体。
实施例20
遵循实施例19制备酯的工艺，从2-硝基苯基乙酸a(10.0g，55.2mmol)得到10.9g(95％)硝基酯b，为浅黄色固体。
实施例21
遵循Kemp等所述的一般工艺(J.Am.Chem.Soc.1975，97，7305-7312)，二氟代酯a(4.0g，20.0mmol)、异戊腈(3.2mL，24.0mmol)与NaOEt(1.4g，20.0mmol)在EtOH(40mL)中反应，经过ISCO CombiFlash 80g柱纯化(2-30％乙酸乙酯-己烷)后，得到2.1g(47％)二氟代肟b，为浅黄色固体。
实施例22
在N2下，将按照Kemp等所述工艺(J.Am.Chem.Soc.1975，97，7305-7312)制备的硝基肟a(5.0g，21.0mmol)的DMF(30mL)溶液历经25min滴加到剧烈搅拌着的经过己烷洗涤的NaH(60％矿物油分散体,840mg，21.0mmol)的DMF(40mL)悬液中。将所得深色溶液缓慢加热至130℃达8h。将其用水(200mL)稀释，用EtOAc萃取(2x200mL)，EtOAc用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash120g柱纯化(1-10％乙酸乙酯-己烷)，得到1.6g(41％)苯并异噁唑b，为灰白色固体。
实施例23
将按照Kemp等所述工艺(J.Am.Chem.Soc.1975，97，7305-7312)制备的苯并异噁唑酸a(1.23g，7.5mmol)、胺HCl盐(736mg，7.5mmol)、EDC(1.44g，7.5mmol)与DIPEA(1.2mL，6.7mmol)在MeCN(50mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。将其在真空中浓缩，溶于EtOAc(200mL)，用0.5N HCl和水洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到1.4g(88％)苯并异噁唑酰胺b，为灰白色固体。
实施例24
遵循实施例12制备溴代酮的工艺，向苯并异噁唑酰胺a(1.2g，5.9mmol)加入CH3MgCl(6.0mL3M THF溶液，17.8mmol)。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash40g柱纯化(1-5％乙酸乙酯-己烷)，得到670mg(71％)苯并异噁唑酮b，为白色晶体。也可以按照Smalley等(Science of Synthesis2002，11，289-335)和Farooq等(WO9614305)所述工艺制备化合物b。
实施例25
将溴(184μL，3.6mmol)滴加到苯并异噁唑酮a(525mg，3.3mmol)在AcOH(1.5mL)与CH2Cl2(6.0mL)中的溶液中。在室温下1h后，LCMS表明没有反应。向反应混合物加入5滴浓HCl，在室温下搅拌过夜。将其用l0％Na2S2O3淬灭，用CH2Cl2(100mL)稀释，用5％NaHCO3洗涤，分离，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩，得到820mg(105％)溴代酮b，为褐色的油。
实施例26
按照Strupczewski等的一般工艺(J.Med.Chem.1985，28，761-769)，向NaH(60％矿物油分散体，37mg，0.92mmol)的THF(3.0mL)悬液滴加二氟代肟a(140mg，0.61mmol)的DMF(1.5mL)溶液。将所得混合物在70℃下加热4h。将其冷却，倒在水(30mL)上，用EtOAc萃取(2x50mL)。将EtOAc用水洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash 12g柱纯化(1-5％乙酸乙酯-己烷)，得到60mg(47％)苯并异噁唑酯b，为灰白色固体。
实施例27
将苯并异噁唑a(1.6g，7.8mmol)的70％H2SO4(30mL)悬液在80℃下加热4h。将其冷却，倒在碎冰上。过滤收集固体，用水洗涤，干燥，得到1.3g(89％)苯并异噁唑酸b，为白色固体。
实施例28
遵循实施例23制备酰胺的工艺，在经过ISCO CombiFlash12g柱纯化(2-15％乙酸乙酯-己烷)纯化后，从苯并异噁唑酸a(1.3g，7.0mmol)得到740mg(47％)苯并异噁唑酰胺b，为白色固体。
实施例29
遵循实施例24制备酮的工艺，从苯并异噁唑酰胺a(740mg，3.3mmol)得到390mg(66％)苯并异噁唑酮b，为灰白色固体。
实施例30
遵循实施例19制备酯的工艺，从2，5-二氟苯基乙酸a(9.56g，55.6mmol)得到9.24g(83％)二氟代酯b，为澄清液体。
实施例31
遵循实施例19制备酯的工艺，从2，3-二氟苯基乙酸a(10.0g，58.1mmol)得到10.8g(93％)二氟代酯b，为澄清液体。
实施例32
遵循实施例21制备肟的工艺，从二氟代酯a(9.2g，46.0mmol)得到5.57g(53％)二氟代肟b，为白色固体。
实施例33
遵循实施例21制备肟的工艺，从二氟代酯a(10.8g，54mmol)得到4.9g(40％)二氟代肟b，为白色固体。
实施例34
遵循实施例26制备酯的工艺，在经过ISCO CombiFlash40g柱纯化(1-5％乙酸乙酯-己烷)后，从二氟代肟a(5.5g，24.0mmol)得到2.66g(53％)苯并异噁唑酯b，为灰白色固体。
实施例35
遵循实施例26制备酯的工艺，从二氟代肟a(4.9g，21.4mmol)得到2.9g(65％)苯并异噁唑酯b，为浅黄色晶体。
实施例36
遵循实施例27制备酸的工艺，从苯并异噁唑酯a(2.1g，10.0mmol)得到1.92g(86％)苯并异噁唑酸b，为灰白色固体。
实施例37
遵循实施例27制备酸的工艺，从苯并异噁唑酯a(2.4g，11.5mmol)得到1.92g(76％)苯并异噁唑酸b，为灰白色固体。
实施例38
a b 遵循实施例23制备酰胺的工艺，从苯并异噁唑酸a(1.4g，7.73mmol)得到1.95g(83％)苯并异噁唑酰胺b，为黄色固体。
实施例39
遵循实施例23制备酰胺的工艺，从苯并异噁唑酸a(1.9g，10.5mmol)得到1.7g(72％)苯并异噁唑酰胺b，为褐色固体。
实施例40
遵循实施例12制备酮的工艺，从苯并异噁唑酰胺a(1.95g，8.7mmol)得到448mg(30％)苯并异噁唑酮b，为褐色的油。也可以按照Farooq等所述工艺(WO9614305)制备化合物b。
实施例41
遵循实施例12制备酮的工艺，从苯并异噁唑酰胺a(1.70g，7.6mmol)得到192mg(14％)苯并异噁唑酮b，为白色结晶性固体。
实施例42
将1，4-萘二羧酸a(10.0g，46.3mmol)在MeOH(70mL)与H2SO4(5mL)中的悬液在室温下搅拌2天，然后在50℃下加热10h。将其在真空中浓缩，重新溶于CH2Cl2(300mL)，用10％K2CO3(200mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到6.6g(60％)二酯b，为黄色固体。
实施例43
将二酯a(2.0g，8.2mmol)、LiOH(344mg，8.2mmol)在THF(40mL)、水(5mL)与MeOH(1mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。LCMS表明仍有一些起始性二酯未反应。向反应混合物加入额外的LiOH(84mg，2.0mmol)。4h后，将其用0.5N HCl(100mL)稀释，用EtOAc(100mL)萃取，干燥(MgSO4)，浓缩，得到1.4g(74％)单酸b，为浅黄色固体。
实施例44
将单酸a(1.4g，6.1mmol)与SOCl2(9mL)在甲苯(15mL)中的混合物在75℃下加热4h。在真空中除去溶剂，用甲苯(50mL)稀释，浓缩，在高真空下干燥过夜。将残余物悬浮在甲苯(30mL)中，在冰水浴中冷却。缓慢加入Me2Zn(12mL 1M庚烷溶液，12.0mmol)，在室温下搅拌3.5h。将反应物用饱和NH4Cl淬灭，用水(100mL)稀释，用EtOAc萃取(2x100mL)，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩.使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash40g柱纯化(1-10％乙酸乙酯-己烷)，得到890mg(86％)酮酯b，为灰白色固体。也可以按照Uehata等所述工艺(JP2003073357)制备化合物b。
实施例45
在室温下，将溴(1.49g，9.3mmol)缓慢加入到搅拌着的按照Berg等所述工艺(WO02066480)制备的酮a(1.47g，8.5mmol)的33％HBr/AcOH(20mL)溶液中。将其搅拌1h，用乙醚(ether)(65mL)稀释，剧烈搅拌1h。过滤收集固体，用乙醚洗涤，高真空干燥，得到2.88g(100％)溴甲基酮b，为黄色固体。
实施例46
将2-羟基喹啉-4-羧酸a(6.25g，33.1mmol)、MeI(10.33g，72.7mmol)与K2CO3(10.0g，72.7mmol)在DMF(110mL)中的混合物在80℃下加热16h过夜。LCMS表明反应不完全。向反应混合物加入额外的MeI(4.69g，33.1mmol)，在100℃下加热3h。将其冷却，倒入冰水和10％K2CO3(50mL)中，用EtOAc萃取(2x150mL)。合并EtOAc，用水洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash80g柱纯化(2-50％乙酸乙酯-己烷)，得到4.68g(65％)二氢喹啉酯b，为灰白色固体。
实施例47
将氢氧化锂(1.45g，34.5mmol)加入到二氢喹啉酯a(1.50g，6.91mmol)的THF(40mL)溶液中，继之以加入水(10mL)。将混合物在室温下搅拌16h。将其在真空中浓缩，用EtOAc(100mL)和0.5N HCl(100mL)稀释。有白色固体沉淀出来，过滤收集，用水洗涤。分离EtOAc，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩，得到白色固体产物。合并得到1.41g(100％)二氢喹啉酸b，为白色固体，无需进一步纯化即可使用。
实施例48
将N，N-二异丙基乙胺(1.37g，10.7mmol)加入到二氢喹啉酸a(2.42g，11.9mmol)、胺(1.40g，14.3mmol)与EDC(2.28g，11.9mmol)的MeCN(80mL)悬液中，在室温下搅拌2h。将其在真空中浓缩，用CH2Cl2(100mL)稀释，用0.5N HCl(50mL)和0.5N NaOH(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到1.98g(67％)二氢喹啉酰胺b，为白色固体，无需进一步纯化即可使用。
实施例49
遵循实施例12制备酮的工艺，从二氢喹啉酰胺a(2.17g，8.82mmol)、CH3MgCl(8.82mL3M THF溶液，26.5mmol)得到766mg(43％)二氢喹啉酮b，为黄色固体。也可以按照Fujita等所述工艺(Chem.&Pharm.Bull.2001，49(7)，900-904and Chem.&Pharm.Bull.2001，49(4)，407-412)制备化合物b。
实施例50
按照Legros等的一般工艺(Tetrahedron2001，57，2507-2514)，从4-溴异喹啉a(1.0g，4.8mmol)得到707mg(86％)酮b，为浅黄色固体。
实施例51
遵循实施例48制备酰胺的工艺，从按照Deady等所述工艺(J.Heterocyclic Chem.2001，38，1185)制备的二氢异喹啉酸a(1.25g，6.2mmol)得到754mg(50％)二氢异喹啉酰胺b，为黄色胶状物。
实施例52
遵循实施例49制备酮的工艺，从二氢异喹啉酰胺a(0.754g，3.06mmol)得到510mg(85％)二氢异喹啉酮b，为黄色固体。也可以按照Alvarez等(Science of Synthesis2005，15,839-906)、Kimura等(Chem.&Pharm.Bull.1983，31(4)，1277-82)、Tomisawa等(Chem.& Pharm.Bull.1975，23(3),592-6)和Dyke等(Tetrahedron 1973，29(23)，3881-8)所述工艺制备化合物b。
实施例53
将2-羟基喹啉-4-羧酸a(4.0g，21.2mmol)、POBr3(25.0g，87.2mmol)在甲苯(40mL)中的混合物在100℃下加热3h。将其冷却至室温，小心地倒在碎冰上，用EtOAc萃取(2x250mL)，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。将残余物溶于1N NaOH(150mL)，用EtOAc萃取(2x100mL)。水层然后用1N HCl酸化至pH3。过滤收集白色固体，用水洗涤，干燥，得到3.0g(56％)溴代酸b，为白色固体。
实施例54
遵循实施例48制备酰胺的工艺，从溴代酸a(3.0g，11.9mmol)得到2.67g(77％)溴代酰胺b，为白色固体。
实施例55
遵循实施例49制备酮的工艺，从溴代酰胺a(1.0g，3.4mmol)得到800mg(94％)溴代酮b，为灰白色固体。
实施例56
在冰水浴温度和N2下，将三氟甲磺酸酐(6.82g，24.2mmol)滴加到乙基-4-羟基喹啉羧酸酯a(5.0g，23.0mmol)与吡啶(1.95mL，24.2mmol)在CH2Cl2(100mL)中的混合物上。将混合物在室温下搅拌过夜。将其用CH2Cl2(100mL)稀释，用0.5N NaOH(100mL)洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash 80g柱纯化(2-15％乙酸乙酯-己烷)，得到7.4g(93％)三氟甲磺酸酯b，为白色固体。
实施例57
按照Legros等的一般工艺(Tetrahedron2001，57，2507-2514)，将三氟甲磺酸酯a(1.0g，2.86mmol)、双(二亚苄基丙酮)钯(0)(82mg，0.14mmol)、1，3-双(二苯膦基)丙烷(65mg，0.16mmol)与Et3N(1.19mL，8.58mmol)在DMF(10mL)中的混合物在室温和N2下搅拌15min。加入正丁基乙烯基醚(1.43g，14.3mmol)的DMF(5mL)溶液，将所得混合物在80℃下搅拌24h。将其冷却至室温，缓慢加入1N HCl(30mL)，在室温下搅拌24h。将混合物用1N NaOH中和，用醚萃取(2x100mL)，干燥(MgSO4)，浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash 12g柱纯化(2-20％乙酸乙酯-己烷)，得到460mg(66％)酮b，为白色固体。
实施例58
将酮酯a(1.50g，6.17mmol)、KOH(640mg，11.35mmol)在EtOH(30mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用水(150mL)稀释，用EtOAc(100mL)萃取。然后将水层用1N HCl酸化，用EtOAc萃取(2x100mL)，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩，得到1.53g(100％)酮酸b，为黄色固体。也可以按照Priestly等所述工艺(Bioorg.&Med.Chem.1996，4(7)，1135-1147)制备化合物b。
实施例59
将酮酸a(1.30g，5.16mmol)、盐酸二甲胺(480mg，5.93mmol)、EDC(1.14g，5.93mmol)与DIPEA(765mg，5.93mmol)在MeCN(30mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。除去溶剂。将残余物溶于CH2Cl2(100mL)，用1N HCl(50mL)和lN NaOH(50mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩。使残余物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash 40g柱纯化(2-20％乙酸乙酯-二氯甲烷)，得到656mg(53％)酮酰胺b，为浅黄色胶状物。
实施例60
遵循实施例56制备三氟甲磺酸酯的工艺，从5-羟基喹啉a(3.42g，23.6mmol)得到6.0g(92％)三氟甲磺酸酯b，为浅黄色液体。
实施例61
遵循实施例57制备酮的工艺，从三氟甲磺酸酯a(6.0g，21.7mmol)得到3.58g(97％)酮b，为褐色的油。
实施例62
遵循实施例56制备三氟甲磺酸酯的工艺，从2-(三氟甲基)-4-羟基喹啉a(6.87g，32.3mmol)得到9.31g(84％)三氟甲磺酸酯b，为黄色固体。
实施例63
遵循实施例57制备酮的工艺，从三氟甲磺酸酯a(7.35g，21.3mmol)得到1.79g(35％)酮b，为黄色固体。
实施例64
遵循实施例59制备酰胺的工艺，从2-苯基-4-喹啉羧酸a(5.0g，20.1mmol)得到3.29g(56％)酰胺b，为灰白色固体。
实施例65
遵循实施例49制备酮的工艺，从酰胺a(3.29g，11.26mmol)得到3.29g(118％)酮b，为黄色固体。也可以按照Sato等(JP2002371078)、Wong等(WO9846572)、Leardini等(j.Chem.Soc.，Chem.Communications1984，20，1320-1)、Kaneko等(Chem.&Pharm.Bull.1982，30(1)，74-85)、Schwenk等(j.Org.Chem.1946，11,798-802)和Shivers等(J.Am.Chem.Soc.1947，69,119-23)所述工艺制备化合物b。
实施例66
遵循实施例59制备酰胺的工艺，从2-羟基-4-喹啉羧酸a(5.0g，26.4mmol)得到1.88g(30％)酰胺b，为奶油色固体。
实施例67
遵循实施例49制备酮的工艺，从酰胺a(1.88g，8.1mmol)得到993mg(66％)酮b，为浅黄色固体。也可以按照Wetzel等(J.Med.Chem.1973，16(5)，528-32)、Jones等(J.Chem.Soc.[Section C]Organic1967，19，1808-13)和Ochia等(Chem.&Pharm.Bull.1963，11，137-8)所述工艺制备化合物b。
实施例68
在冰水浴温度下，将Boc-酯a(900mg，2.0mmol)溶于THF(20mL)和MeOH(1mL)。加入NaBH4(300mg，8.0mmol)，将混合物搅拌1h，然后在室温下搅拌另外lh。加入几滴水淬灭反应，然后用更多的水(100mL)稀释，用EtOAc萃取(2x100mL)，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩，得到739mg(90％)醇b，为黄色泡沫状固体。
实施例69
向胺a(159mg，0.46mmol)、Boc-环己基-Gly-OHb(129mg，0.50mmol)与HATU(350mg，0.92mmol)在MeCN(4mL)中的混合物加入DIPEA(162μL)，将所得混合物在室温下搅拌2h。LCMS表明反应不完全。加入额外的HATU(175mg，0.46mmol)和DIPEA(81μL，0.46mmol)，搅拌另外1h。在真空中除去溶剂，用CH2Cl2(10mL)稀释，用0.5N HCl(10mL)和水洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash 12g柱纯化(0-5％MeOH/CH2Cl2)，得到187mg(74％)产物c，为褐色固体。
实施例70
向胺a(62mg，0.13mmol)、Boc-N-Me-Ala-OHb(27mg，0.13mmol)与HATU(99mg，0.26mmol)在MeCN(2mL)中的混合物加入DIPEA(46μL，0.26mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2h。在真空中除去溶剂，用CH2Cl2(10mL)稀释，用0.5N HCl(10mL)和水洗涤干燥(MgSO4)，浓缩，得到69mg(85％)产物c，为澄清的油。
实施例71
将二肽a(100mg，0.29mmol)、噻唑胺b(113mg，0.32mmol)、HOAt(59mg，0.435mmol)与DIC(67μL，0.435mmol)在CH2Cl2(3mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。将混合物用CH2Cl2(10mL)稀释，用0.5N HCl(10mL)和0.5N NaOH(10mL)洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCOCombiFlash 12g柱纯化(10-90％乙酸乙酯-己烷)，得到175mg(89％)产物c，为澄清的油。
实施例72
将Boc-胺a(175mg，0.26mmol)用(1∶1)TFA/CH2Cl2(8mL)、催化性甲苯在室温下处理1h。在真空中除去溶剂。残余物经过反相HPLC纯化(C18，MeCN-H2O，0.1％TFA)，冻干，得到98mg(49％，2步)所需产物b，为吸湿性白色固体。
实施例73
将Boc-酯a(200mg，0.30mmol)、LiOH(200mg，0.30mmol)在THF(2mL)与水(25μL)中的混合物在室温下搅拌1h。加入MeOH(500μL)，在室温下搅拌过夜。将其用EtOAc(10mL)稀释，用0.5N HCl(10mL)洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩，得到160mg(82％)Boc酸187，为白色固体。
实施例74
将Boc腈a(200mg，0.31mmol)、NaN3(309mg，4.75mmol)与NH4Cl(252mg，4.75mmol)在DMF(3mL)中的混合物在100℃下加热3.5天。将其冷却至室温，用水稀释，用EtOAc萃取(2x50mL)，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash4g柱纯化(10-90％乙酸乙酯-己烷)，得到37mg四唑b，为褐色的油。用CH2Cl2萃取水层回收更多的产物，回收到65mg产物。总计分离到102mg(49％)四唑b。
实施例75
将Boc酯a(135mg，0.20mmol)、KOH(14.5mg，0.26mmol)在EtOH(4mL)中的混合物在室温下搅拌2h，然后用EtOAc(8mL)稀释，用1N HCl酸化，分离，干燥(MgSO4)，在真空中浓缩，高真空干燥。粗产物b无需进一步纯化即可继续反应。
实施例76
按照Yamamoto的一般工艺[Asao，N；Lee，S.；Yamamoto，Y.TetrahedronLetters，2003，4265-4266.]，将MeLi(20mL1.6M醚溶液，30.2mmol)加入到0℃的粉碎的CuI(2.90g，15.1mmol)与醚(5mL)的悬液中。将所得灰色溶液剧烈搅拌10min，然后在0℃减压下浓缩。加入二氯甲烷(20mL，预冷却至0℃)，然后将悬液冷却至-78℃，加入TMSCl(1.9mL，15.1mmol)，继之以迅速加入酯192[WO01168603](1.0g，5.0mmol)与CH2Cl2(50mL)的溶液，将混合物在-78℃下剧烈搅拌30min，然后在0℃下搅拌2h。然后将混合物倒入200mL1∶1饱和NH4Cl∶NH4OH中。分离各层，水相用CH2Cl2萃取(2x20mL)。合并有机相，用盐水(1x20mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCO CombiFlash 12g柱，0-8％乙酸乙酯-己烷)，得到783mg(72％)酯193，为澄清的油。
实施例77
将酯a(780mg)、CH2Cl2(5mL)与TFA(2mL)的溶液维持在室温下过夜。在减压下回收溶剂，得到定量收率的酸b，为无色的油，无需进一步纯化即可使用。
实施例78
按照Evans的一般工艺[Evans，D.A.；Britton，T.C.；Ellman，J.A.；Dorow，R.L.J.Am.Chem.Soc.1990，1112，401l-4030]，将新戊酰氯(3.2mL，26mmol)加入到-10℃的酸a(3.72g，23.5mmol)、TEA(4.3mL，31mmol)与THF(50mL)的溶液中。使所得白色浆液历经20min升温至-5℃，同时剧烈搅拌。然后将混合物冷却至-78℃，历经10min经由套管加入(S)-4-苄基-2-噁唑烷酮锂盐的溶液(从(S)-4-苄基-2-噁唑烷酮(7.5g，42.3mmol)、n-BuLi(26mL1.6M己烷溶液，42.3mmol)和THF(150mL)在-78℃下制备)。将混合物维持在-78℃下达1h，然后用饱和NH4Cl(200mL)淬灭，在减压下除去THF。水相用EtOAc萃取(3x50mL)。合并有机相，用盐水(1x50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCO CombiFlash120g柱，5-40％乙酸乙酯-己烷)，得到5.7g(76％)酰亚胺b，为澄清的油。
实施例79
按照Evans的一般工艺[Evans，D.A.；Britton，T.C.；Ellman，J.A.；Dorow，R.L.J.Am.Chem.Soc.1990，112，4011-4030]，将冷的(-78℃)酰亚胺a(5.7g，18mmol)与THF(64mL)的溶液历经10min加入到冷的(-78℃)KHMDS(20mmol)与THF(120mL)的溶液中。将无色溶液在-18℃保持30min，然后历经5min经由套管加入冷的(-78℃)TrsylN3(6.9g，22.4mmol)与THF(40mL)的溶液。加入乙酸(5.3mL，90mmol)，使混合物立即升温至30℃，保持1h。用盐水(200mL)和CH2Cl2(200mL)淬灭反应。分离各相，水相用CH2Cl2萃取(2x50mL)。合并有机相，用饱和NaHCO3(1x50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCO CombiFlash330g柱，5-45％乙酸乙酯-己烷)，得到4.2g(65％)偶氮酰亚胺b，为无色固体。
实施例80
将叠氮基-酰亚胺a(4.7g，13mmol)、LiOH·H2O(660mg，15.6mmol)、THF(93mL)与水(31mL)的混合物维持在室温下达1天。加入另外的LiOH·H2O(200mg)，将混合物搅拌2h。加入固体NaHCO3(2.18g)，在减压下除去THF。用水(150mL)稀释后，水相用CH2Cl2萃取(3x50mL)，合并有机相，用饱和NaHCO3洗涤(1x50mL)。合并水相，用浓HCl酸化至pH＜2，用EtOAc萃取(4x50mL)。合并有机相，干燥(Na2SO4)，浓缩，得到1.38g(53％)酸b，为无色固体。
实施例81
将异喹啉羧酸a(5.0g，28.9mmol)、N，O-二甲基-羟胺盐酸盐(3.1g，31.8mmol)、EDC(6.1g，32mmol)、DIPEA(5.7mL，32mmol)和MeCN(50mL)混合在一起，在室温下搅拌过夜。在减压下除去MeCN，使残余物在水(200mL)与EtOAc(200mL)之间分配。分离各相，水相用EtOAc萃取(2x50mL)。合并有机相，为b，为无色固体。
实施例82
将氯化甲基镁(12.3mL3.0M THF溶液)加入到0℃的酰胺a(4.0g，18.5mmol)与THF(40mL)的溶液中。在0℃下30mmin后，除去冷却浴达40min。将反应物倒入冷的饱和NH4Cl(200mL)中，用EtOAc萃取(3x50mL)。合并有机相，用水、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，浓缩，得到3.15g(100％)酮b，为无色的油。
实施例83
按照Barlin的一般工艺[Barlin，G.A.；Davies，L P.；Ireland，S.J.；Ngu，M.M.L.Aust.J.Chem.1989，42，1735-1748]，将Br2(150μL，2.92mmol)一次性加入到酮a(500mg，2.92mmol)与33％HBr/AcOH(10mL)的溶液中。1h后，加入醚(20mL)，在滤纸上收集ppt，用醚洗涤，在真空下干燥，得到910mg(94％)溴化物b，为黄色固体。
实施例84
将4-羧基-2-羟基喹啉a(500mg，2.64mmol)与POCl3(5mL)的混合物在100℃下加热1h。在减压下除去溶剂，将残余物溶于CH2Cl2(10mL)，冷却至0℃。滴加吗啉(1.0mL，13.2mmol)，使混合物达到室温。然后将混合物重新冷却至0℃，滴加更多的吗啉(1.0mL，13.2mmol)，使混合物达到室温过夜。然后将混合物用CH2Cl2(50mL)稀释，用饱和NH4Cl洗涤(3x20mL)。合并水相，用CH2Cl2萃取(1x20mL)，合并有机相，干燥(Na2SO4)，吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCO CombiFlash 12g柱，5-75％乙酸乙酯-己烷)，得到570mg(78％)酰胺b，为无色固体。
实施例85
将二乙基锌(2.3mL1.1M甲苯溶液，2.5mmol)加入到酰胺a(500mg，1.8mmol)、NiCl2DPPP(100mg，0.18mmol)与THF(5mL)的混合物中(注意，放热反应)。然后将深色溶液在100℃μW反应器中加热15min。然后将反应物淬灭到饱和NH4Cl(50mL)中，用EtOAc萃取(3x20mL)。合并有机相，干燥(Na2SO4)，吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCO CombiFlash 12g柱，0-75％乙酸乙酯-己烷)，得到350mg(71％)酰胺b，为无色固体。
实施例86
将二异丙基锌(3mL1.0M甲苯溶液，2.5mmol)加入到氯化物a(500mg，1.8mmol)、NiCl2DPPP(115mg，0.18mmol)与THF(3mL)的混合物中。然后将深色溶液在100℃μW反应器中加热15min。然后将反应物淬灭到饱和NH4Cl(50mL)中，用EtOAc萃取(3x20mL)。合并有机相，干燥(Na2SO4)，吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCO CombiFlash12g柱，0-15％乙酸乙酯-己烷)，得到383mg(74％)酰胺b，为无色固体。
实施例87
氯化甲基镁(12.3mL3.0M THF溶液，37mmol)加入到0℃的酰胺a(2.84g，10.51mmol)与THF(20mL)的溶液中。使溶液达到室温，然后维持在该温度下达4h。将反应物淬灭到冷的饱和NH4Cl(100mL)中，用EtOAc萃取(3x50mL)。合并有机相，用盐水(1x50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCO CombiFlash40g柱，0-30％乙酸乙酯-己烷)，得到1.88g(86％)酮b，为无色的油。
实施例88
按照Barlin的一般工艺[Barlin，G.A.；Davies，L P；Ireland，S.J.；Ngu，M.M.L.Aust.J.Chem.1989，42，1735-1748]，将Br2(640μL，2.92mmol)一次性加入到酮a(2.27g，11.4mmol)与33％HBr/AcOH(40mL)的溶液中。1h后，加入醚(50mL)，在滤纸上收集ppt，用乙醚洗涤，在真空下干燥，得到3.88g(94％)溴化物b，为黄色固体。
实施例89
按照Rieke的一般工艺[Zhu，L；Wehmeyer，R.M.；Rieke，R.D.J.Org.Chem.1991，56，1445-1453]，将溴化丙基锌(4.0mL0.5M THF溶液，2.0mmol)加入到氯化物a(500mg，1.81mmol)、Pd(PPh3)4(100mg，0.09mmol)与THF(3mL)的混合物中。将所得溶液在70℃μW反应器中加热15min。然后将反应物淬灭到饱和NH4Cl(50mL)中，用EtOAc萃取(3x20mL)。合并有机相，干燥(Na2SO4)，吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCO CombiFlash12g柱，0-75％乙酸乙酯-己烷)，得到400mg(77％)酰胺b，为无色固体。
实施例90
按照Rieke的一般工艺[Zhu，L；Wehmeyer，R.M.；Rieke，R.D.J.Org.Chem.1991，56，1445-1453]，将溴化环戊基锌(4.0mL0.5M THF溶液，2.0mmol)加入到氯化物a(500mg，1.81mmol)、Pd(PPh3)4(100mg，0.09mmol)与THF(3mL)的混合物中。将所得溶液在70℃μW反应器中加热15min。然后将反应物淬灭到饱和NH4Cl(50mL)中，用EtOAc萃取(3x20mL)。合并有机相，干燥(Na2SO4)，吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCO CombiFlash12g柱，0-75％乙酸乙酯-己烷)，得到333mg(59％)酰胺b，为无色固体。
实施例91
将氯化甲基镁(7.3mL3.0M THF溶液，22mmol)加入到0℃的酰胺a(1.77g，6.2mmol)与THF(15mL)的溶液中。使溶液达到室温，然后维持在该温度下达4h。将反应物淬灭到冷的饱和NH4Cl(100mL)中，用EtOAc萃取(3x50mL)。合并有机相，用盐水(1x50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCO CombiFlash40g柱，0-30％乙酸乙酯-己烷)，得到1.14g(85％)酮b，为无色的油。
实施例92
按照Angibaud的一般工艺[Angibaud，P；et.al，Bioorg.Med.Chem.Lett.2003，13，4365-4369]，将氯化物a(1.0g，5.0mmol)、NaN3(1.6g，25mmol)、DMF(10mL)与水(1.0mL)的混合物在120℃μW反应器中加热2h。然后将反应物淬灭到水(50mL)中，用EtOAc萃取(3x20mL)。合并有机相，干燥(Na2SO4)，吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCO CombiFlash40g柱，0-50％乙酸乙酯-己烷)，得到300mg(28％)四唑b，为黄色固体。
实施例93
在冰水浴温度和N2下，将三氟甲磺酸酐(5.0g，17.7mmol)滴加到2-甲基-4-羟基喹啉a(2.56g，16.1mmol)与吡啶(1.54mL，17.7mmol)在CH2Cl2(25mL)中的混合物中。使混合物升温至10℃。将其用CH2Cl2(100mL)稀释，用饱和NaHCO3洗涤(3x50m)，干燥(Na2SO4)，吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash40g柱纯化(0-30％乙酸乙酯-己烷)，得到2.57g(54％)三氟甲磺酸酯b，为深色的油。
实施例94
遵循一般三氟甲磺酸化工艺，从7-氯-4-羟基喹啉a(10.0g，35.4mmol)得到7.5g(68％)三氟甲磺酸酯b，为无色固体。
实施例95
遵循一般三氟甲磺酸化工艺，从6-氟-4-羟基喹啉a(5.0g，28.2mmol)得到6.6g(75％)三氟甲磺酸酯b，为无色固体。
实施例96
按照Legros的一般工艺[Tetrahedron2001，57，2507-2514]，将三氟甲磺酸酯a(7.5g，24.1mmol)、双(二亚苄基丙酮)钯(0)(690mg，1.2mmol)、1，3-双(二苯膦基)丙烷(546mg，1.33mmol)与Et3N(10mL，72.3mmol)在DMF(50mL)中的混合物在室温和N2下搅拌15min。加入正丁基乙烯基醚(15mL，120mmol)的DMF(15mL)溶液，将所得混合物在80℃下搅拌24h。将其冷却至室温，缓慢加入1N HCl(150mL)，在室温下搅拌24h。将混合物用1N NaOH中和，用醚萃取(3x100mL)，干燥(MgSO4)，浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash120g柱纯化(5-30％乙酸乙酯-己烷)，得到1.62g(32％)酮b，为白色固体。
实施例97
遵循实施例96制备酮的一般工艺，从6.56g三氟甲磺酸酯a得到3.14g(73％)酮b，为无色固体。
实施例98
遵循实施例96制备酮的一般工艺，从2.57g三氟甲磺酸酯a得到820mg(50％)酮b，为无色固体。
实施例99
a b 将氯化甲基镁(0.5mL3.0M THF溶液，1.5mmol)加入到0℃的酯a(230mg，0.5mmol)与THF(5mL)的溶液中。将溶液维持在0℃下达2h。将反应物淬灭到冷的饱和NH4Cl(50mL)中，用EtOAc萃取(3x20mL)。合并有机相，用盐水(1x50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCOCombiFlash 12g柱，0-50％乙酸乙酯-己烷)，得到135mg(61％)醇b，为无色的油。
实施例100
将溴(122μL，2.4mmol)加入到苯并异噁唑酮a(390mg，2.2mmol)在AcOH(1.5mL)与CH2Cl2(6mL)中的溶液中。在室温下1h后，LCMS表明没有反应。向反应混合物加入四滴浓HCl，在室温下搅拌过夜。将其用10％Na2S2O3淬灭，用CH2Cl2(100mL)和水稀释，分离，有机层用5％NaHCO3洗涤，干燥(MgSO4)，浓缩，得到537mg(95％)溴代酮b，为灰白色固体。
实施例101
将溴代酮a(537mg，2.1mmol)、硫代酰胺b(718mg，3.1mmol)与吡啶(153μL，1.9mol)在EtOH(15mL)中的混合物在70℃下加热1h。在真空中浓缩。使粗产物吸附到Celite上，经过ISCO CombiFlash 40g柱纯化(3-30％乙酸乙酯-己烷)，得到190mg(23％)噻唑c，为浅黄色胶状物。
实施例102四氢吡喃基甘氨酸
四氢吡喃基甘氨酸购自NovaBiochem，或者按照文献合成Ghosh，A.K.；Thompson，W.J.；holloWay，M.K.；McKee，S.P.；Duong，T.T.；Lee，H.Y.；Munson，P M.；Smith，A.M.；Wai，J.M；Darke，P.L；Zugay，J.A.；Emini，E.A.；Schleife，W.A.；Huff，J.R.；Anderson，P S.J.Med.Chem，1993，36，2300-2310。
实施例103哌啶基甘氨酸
哌啶基甘氨酸是按照Shieh等所述工艺合成的(TetrahedronAsymmetry，2001，12，2421-2425)。
实施例104 4，4-二氟环己基甘氨酸
4，4-二氟环己基甘氨酸是按照US2003/0216325所述工艺制备的。
实施例105Boc(S)-2-氨基-2-(4-羟基环己基)乙酸
遵循Sheih等所述工艺(TetrahedronAsymmetry，2001，12，2421-2425)，将酮a(8.4g)与EtOAc(30mL)的溶液加入到N-Cbz-膦酰甘氨酸甲基酯b、TMG(4.5mL)与EtOAc(30mL)的溶液中。将溶液维持在室温下达48h，然后用1NHCl(3x50mL)、盐水(1x50mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩。使残余物吸附到Celite上，经过色谱纯化，然后进一步从EtOAc/己烷中重结晶纯化，得到5.2g产物c。

遵循Sheih所述工艺(TetrahedronAsymmetry，2001，12，2421-2425)，将烯酰胺(eneamidec(5.0g)、(S，S)-Me-BPE-Rh(I)(1.5g，Strem Chemicals，Newburypo室温，MA)与MeOH(100mL)的溶液在70psi H2下剧烈摇动48h。在减压下除去溶剂。将残余物溶于EtOAc，用更多的EtOAc通过SiO2过滤。在减压下除去溶剂，得到4.0g产物d，为无色固体。

将Cbz-氨基甲酸酯d，(4.0g)、Boc2O(2.9g)、20％Pd(OH)2·C(1.0g)与MeOH(30mL)的混合物维持在H2气氛下达6h。用MeOH将混合物通过Celite过滤。在减压下除去溶剂，得到4.5g残余物e，直接继续反应。

将上述残余物e溶于H2O(10mL)、AcOH(30mL)、THF(5mL)和二氯乙酸(3mL)，维持在室温下过夜。加入水(5mL)，维持直至根据HPLC-MS监测水解完全。小心地加入固体Na2CO3，直至气体放出停止，将混合物用aq.NaHCO3稀释，用10％EtOAc/DCM萃取。合并有机相，用盐水洗涤一次，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩。残余物经过色谱纯化，得到2.9g产物f。

在0℃下，将酮f(1.5g)、MeOH(50mL)的混合物用NaBH4(290mg)处理20min。将混合物用10％柠檬酸水溶液酸化至～pH1，在减压下除去MeOH。将残余物用水稀释，用20％EtOAc/DCM萃取。合并有机相，用盐水洗涤一次，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩。残余物经过色谱纯化，得到1.17g产物g和0.23g产物h。

将酯g(1.17g)、LiOH·H2O(160mg)、THF(3mL)与水(4.5mL)的混合物在室温下剧烈搅拌过夜。将混合物用盐水稀释，用EtOAc彻底萃取。合并有机相，用盐水洗涤一次，干燥(Na2SO4)，过滤，浓缩，得到酸i(525mg)。
实施例106 N-Boc-N-环丙基甲基-L-丙氨酸
将L-丙氨酸甲基酯盐酸盐a(5g，35.8mmol)和环丙烷甲醛b(2.67ml，35.8mmol)悬浮在50ml THF w/1％AcOH中。5mL CH3OH的加入使浑浊溶液变得澄清。加入NaCNBH4(2.25g，35.8mmol)，将反应混合物搅拌过夜。加入1N NaOH水溶液淬灭反应，用EtOAc萃取两次，有机层经Na2SO4干燥，浓缩至干。粗产物经过色谱纯化，使用30％EtOAc/己烷(被茚三酮染色)洗脱，得到化合物c(1g，18％)。将化合物c(1g，6.37mmol)和二碳酸二叔丁氧羰基酯(2.1g，9.55mmol)稀释在THF(20ml)和H2O(20ml)中，加入NaHCO3(1.3g，15.9mmol)。将反应混合物搅拌过夜，使反应完全。在减压下除去THF，水层用EtOAc萃取3次。合并有机层，用1N NaOH、饱和NH4Cl继之以盐水洗涤，浓缩至干。在室温下，将Boc-保护的化合物d(1.39g，5.40mmol)与LiOH.H2O(1.14g，27mmol)在THF(20ml)和H2O(20ml)中搅拌过夜。脱去THF，向水层加入10％柠檬酸调节pH＝4，然后用EtOAc萃取3次。合并有机层，用盐水洗涤，浓缩。粗产物经过反相C-18柱纯化，用0％-50％乙腈/H2O洗脱，得到纯的化合物e，为白色固体(794mg)。
实施例107
在室温下，将膦酸酯b(7.2g，21mmol)溶于THF(25mL)，滴加TMG(3.6mL，29mmol，1.3当量)。将混合物在室温下搅拌15min。将商业上可获得的酮a(6.7g，43mmol)溶于THF(25mL)，滴加到膦酸酯与碱的混合物中。将反应物在室温下搅拌24h，加入大约200mL 1N HCl淬灭。将有机产物快速萃取到80％乙酸乙酯-己烷(总计400mL)中。合并有机相，干燥(Na2SO4)，吸附到Celite上，经过色谱纯化两次(ISCO CombiFlash120g柱，0-55％乙酸乙酯-己烷20min，继之以55％乙酸乙酯-己烷5min)，得到3.83g(10.6mmol，50％)产物氨基酯c，为白色固体。
实施例108
将缩酮a(1.56g，4.73mmol)溶于6mL THF。向这种溶液加入去离子水(15mL)、冰乙酸(6mL)和二氯乙酸(1mL)。将混合物在室温下搅拌过夜。加入1N氢氧化钠水溶液(大约100mL)，将粗产物萃取到二氯甲烷(大约200mL)中。蒸发溶剂，使有机产物吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCO CombiFlash80g柱，溶剂梯度0-40％乙酸乙酯-己烷20min)，得到452mg(1.58mmol，33％)酮b。
实施例109
将酯a(184mg，0.55mmol)溶于2mL THF。加入去离子水(1mL)，继之以氢氧化锂一水合物(42mg，1.0mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜，然后用1NHCl水溶液酸化，萃取到二氯甲烷中。干燥(Na2SO4)，过滤，蒸发溶剂，得到175mg(定量收率)的羧酸b。
实施例110
向小瓶装入胺b(130mg，0.46mmol)、酸a(175mg，O.55mmol)和EDC·HCl(135mg，0.70mmol)。将混合物溶于二氯甲烷(3mL)，在室温下搅拌过夜。向反应物加入Celite，在减压下除去溶剂。粗产物经过色谱纯化(ISCOCombiFlash 40g柱，溶剂梯度0-45％乙酸乙酯-己烷10min，继之以45％乙酸乙酯-己烷5min)。将从这种偶联反应所得到的BOC-保护的胺溶于二氯甲烷(2mL)、去离子水(0.5mL)和三氟乙酸(1mL)，在室温下搅拌3h。在减压下除去有机溶剂，将水层用少量1N NaOH调至碱性，产物萃取到二氯甲烷中。除去有机溶剂，得到110mg(0.25mmol，45％胺c)游离胺c。
实施例111
使用胺b(110mg，0.25mmol)、L-BOC-N-甲基丙氨酸a(72mg，0.35mmol)和EDC(67mg，0.35mmol)进行标准的EDC偶联工艺。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCO CombiFlash12g柱，溶剂梯度5-55％乙酸乙酯-二氯甲烷15min，继之以55％乙酸乙酯-二氯甲烷4min)。使用含有几滴水的2∶1 DCM∶TFA进行BOC-去保护。最终的产物c(54mg，66％)经过反相HPLC纯化(C18-柱，溶剂梯度5-50％乙腈-水20min)。
实施例112
按照Burk的一般工艺[Burk，M.J.；Gross，M.F.；Martinez，J.P J.Am.Chem.Soc.1995，117，9375-9376.]，将5.0g(13.8mmol)烯烃a、100mL无水甲醇和[(S,S)-Me-BPE-Rh(COD)]+OTf(1.5g，2.4mmol)混合在用氮净化过的Parr摇动烧瓶中。排空Parr摇动器，随后充以70psi氢气达32小时。在减压下除去甲醇，用乙酸乙酯将粗产物通过小硅胶塞过滤。蒸发溶剂，得到4.0g(11mmol，80％)产物b，收率>98％。
实施例113
将Z-保护的氨基酯a(4.0g，11mmol)溶于甲醇(30mL)。向这种溶液加入BOC-酸酐(2.9g，13.5mmol)，继之以20％Pd(OH)2·C(1.0g)。借助室内真空除去反应烧瓶中的全部空气，将混合物剧烈搅拌5min。然后向烧瓶填充氢气，在室温下剧烈搅拌6h。排空氢气氛后，用甲醇将混合物通过Celite过滤，蒸发溶剂得到粗产物。
将产物BOC-保护的胺b溶于5mL THF。然后先后加入下列溶剂∶去离子水(15mL)、冰乙酸(30mL)和二氯乙酸(3mL)。将混合物在室温下搅拌过夜，缓慢加入固体碳酸钠淬灭反应，同时剧烈搅拌，直至不再见到气体的释放。将粗产物萃取到10％乙酸乙酯-二氯甲烷中。蒸发溶剂，使产物吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCO CombiFlash120g柱，溶剂梯度0-36％乙酸乙酯-己烷20min，继之以用36％乙酸乙酯-己烷冲洗5min)，得到2.86g(10.0mmol，91％)酮b。
实施例114
使用胺b(46mg，0.15mmol)、羧酸a(42mg，0.15mmol syn-非对映体)和EDC(33mg，0.17mmol)进行标准的EDC偶联。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCO CombiFlash stacker2x4g柱，溶剂梯度0-28％乙酸乙酯-二氯甲烷15min，继之以28％乙酸乙酯-二氯甲烷3min)。使用含有几滴水的2∶1DCM∶TFA进行标准的BOC-去保护。将TFA盐用碱(1N NaOH水溶液)处理，萃取到二氯甲烷中。
实施例115
加入EDC(10mg0.052mmol)和溶于二氯甲烷(1mL)，进行产物伯胺a(20mg，0.044mmol)与L-BOC-N-甲基丙氨酸b(12mg，0.059mmol)的偶联。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCO CombiFlash stacker2x12g柱，溶剂梯度0-70％乙酸乙酯-二氯甲烷20min，继之以70％乙酸乙酯-二氯甲烷5min)。使用含有几滴水的2∶1 DCM∶TFA进行BOC-去保护。最终的产物c经过反相HPLC纯化(C18柱，梯度5-50％乙腈-水20min)。产物anti-非对映体c的收率为22mg。
实施例116
使用胺b(110mg，0.38mmol)、羧酸a(105mg，0.38mmol)和EDC(86mg，0.45mmol)进行标准的EDC偶联。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCOCombiFlash stacker2x4g柱，溶剂梯度0-28％乙酸乙酯-二氯甲烷15min，继之以28％乙酸乙酯-二氯甲烷3min)。使用含有几滴水的2∶1 DCM∶TFA进行标准的BOC-去保护。将TFA盐用碱(1N NaOH水溶液)处理，萃取到二氯甲烷中。
实施例117
加入EDC(77mg0.40mmol)和溶于二氯甲烷(2mL)，进行产物伯胺b(170mg，0.35mmol)与L-BOC-N-甲基丙氨酸a(81mg，0.40mmol)的偶联。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCO CombiFlash stacker2x12g柱，溶剂梯度0-70％乙酸乙酯-二氯甲烷20min，继之以70％乙酸乙酯-二氯甲烷5min)。使用含有几滴水的2∶1 DCM∶TFA进行标准的BOC-去保护。最终的产物c经过反相HPLC纯化(C18柱，梯度5-50％乙腈-水20min)。产物anti-非对映体c的收率为106mg。
实施例1118
将酮a(1.45g，5.3mmol)溶于无水二乙醚(20mL)，冷却至-78℃。向反应混合物滴加甲基锂(1.6M Et2O溶液，9.5mL，15mmol)，在减压下剧烈搅拌1h。如下淬灭反应，将冷混合物倒入饱和氯化铵水溶液中，有机物萃取到二氯甲烷中。将有机层干燥(Na2SO4)，过滤，吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCOCombiFlash120g柱，0-50％乙酸乙酯-己烷25min，继之以50％乙酸乙酯-己烷冲洗3min，和90％乙酸乙酯-己烷3min)。这种纯化得到344mg(1.1mmol，42％)syn-非对映体c和299mg(0.99mmol，37％)anti-非对映体b。
实施例119
如下进行甲基酯a(300mg，0.99mmol)的水解，溶于THF(0.8mL)，加入去离子水(1.2mL)和LiOH·H2O(47mg，1.1mmol)。将混合物在室温下搅拌2h，然后用1N HCl水溶液重新酸化，萃取到90％乙酸乙酯-二氯甲烷中。向酸水层加入盐水，以帮助萃取。干燥(Na2SO4)，过滤，蒸发溶剂，得到羧酸b(79mg，0.28mmol)。
实施例120
如下进行甲基酯a(340mg，1.1mmol)的水解，溶于THF(0.9mL)，加入去离子水(1.4mL)和LiOH·H2O(50mg，1.2mmol)。将混合物在室温下搅拌2h，然后用1N HCl水溶液重新酸化，萃取到90％乙酸乙酯-二氯甲烷中。向酸水层加入盐水，以帮助萃取。干燥(Na2SO4)，过滤，蒸发溶剂，得到羧酸b(254mg，0.88mmol)，足够洁净无需纯化即可用于下一步。
实施例121
使用胺b(62mg，0.21mmol)、羧酸a(32mg，0.11mmol)和EDC(21mg，0.11mmol)进行标准的EDC偶联。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCOCombiFlash12g柱，溶剂梯度0-40％乙酸乙酯-二氯甲烷22min，继之以67％乙酸乙酯-二氯甲烷3min)。使用含有几滴水的2∶1 DCM∶TFA进行标准的BOC-去保护。将TFA盐用碱(1N NaOH水溶液)处理，萃取到含有10％二氯甲烷的乙酸乙酯中。
实施例122
加入EDC(61mg0.32mmol)和溶于二氯甲烷(2mL)，进行伯胺b(47mg，0.1mmol)与L-BOC-N-甲基丙氨酸a(65mg，0.30mmol)的偶联。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCO CombiFlash12g柱，溶剂梯度5-65％乙酸乙酯-二氯甲烷25min)。使用2∶1 DCM∶TFA+几滴水进行标准的BOC-去保护。最终的产物c经过反相HPLC纯化(C18柱，溶剂梯度5-50％乙腈-水20min)。anti-非对映体产物c的收率为22mg(31％，从脯氨酸胺原料计)。
实施例123
使用胺b(82mg，0.27mmol)、羧酸a，(95mg，0.33mmol)和EDC(65mg，0.34mmol)进行标准的EDC偶联。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCOCombiFlash12g柱，溶剂梯度0-40％乙酸乙酯-二氯甲烷22min，继之以67％乙酸乙酯-二氯甲烷3min)。使用含有几滴水的2∶1 DCMTFA进行标准的BOC-去保护。将TFA盐用碱(1N NaOH水溶液)处理，萃取到含有10％二氯甲烷的乙酸乙酯中。
实施例124
加入EDC(36mg0.19mmol)和溶于二氯甲烷(2mL)，完成产物伯胺b(70mg，0.15mmol)与L-BOC-N-甲基丙氨酸a(37mg，0.18mmol)的偶联。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCO CombiFlash12g柱，溶剂梯度1-51％乙酸乙酯-二氯甲烷20min，继之以51％乙酸乙酯-二氯甲烷3min)。使用2∶1DCM∶TFA+几滴水进行标准的BOC-去保护。最终的产物c经过反相HPLC纯化(C18柱，溶剂梯度5-50％乙腈-水20min)。产物c的收率为49mg。
实施例125
将按照Shieh的一般工艺[Shieh，W-C.；Xue，S.；Reel，N.；Wu，R.；Fitt，J.；Repic，O.Tetrahedron.Asymmetry，2001，12，2421-2425]合成的硫化物溶于甲醇(25mL)。将Oxone(4.5g)溶于去离子水(25mL)。将底物的甲醇溶液冷却至-10℃，向反应物缓慢加入Oxone的水溶液。将反应物保持在冰上，逐渐升温至室温，同时搅拌过夜。用去离子水稀释反应物至大约150mL，倒入90％乙酸乙酯-己烷中萃取。将有机相干燥(Na2SO4)，吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCO CombiFlash40g柱，5-90％乙酸乙酯-己烷30min)，得到804mg(2.27mmol，91％)产物砜b。
实施例126
按照Burk的一般工艺[Burk，M.J.；Gross，M.F.；Ma室温inez，J.P.J.Am.Chem.Soc.1995，117，9375-9376.]，将烯烃a(774mg2.19mmol)、无水甲醇(40mL)和[(S,S)-Me-BPE-Rh(COD)]+OTf-(500mg，0.8mmol)混合在用氮净化过的Parr摇动烧瓶中。排空Parr摇动器，随后充以60psi氢气，剧烈摇动过夜。在减压下除去甲醇，用乙酸乙酯将粗产物通过小硅胶塞过滤。蒸发溶剂，得到730mg(2.0mmol，94％)产物b，收率>98％。
实施例127
将Z-保护的氨基酯a(804mg，2.27mmol)溶于甲醇(16mL)。向这种溶液加入BOC-酸酐(1.5g，6.8mmol)，继之以20％Pd(OH)2·C(250mg)。借助室内真空除去反应烧瓶中的全部空气，将混合物剧烈搅拌5min。然后向烧瓶填充氢气，在室温下剧烈搅拌6h。排空氢气氛后，用甲醇将混合物通过Celite过滤，蒸发溶剂得到粗产物b(508mg，1.56mmol，70％收率)。
实施例128
将酯a(508mg，1.56mmol)溶于8mL THF。加入去离子水(4mL)，继之以LiOH·H2O(120mg，2.8mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜，用1N HCl水溶液酸化，萃取到乙酸乙酯中。干燥(Na2SO4)，过滤，蒸发溶剂，得到372mg(1.21mmol，78％收率)羧酸b，足够洁净无需纯化即可用于下一步。
实施例129
使用胺b(100mg，0.2mmol)、羧酸a，(58mg，0.29mmol)和EDC(56mg，0.29mmol)进行标准的EDC偶联。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCOCombiFlash12g柱，溶剂梯度0-65％乙酸乙酯-二氯甲烷15min)。使用含有几滴水的2∶1 DCMTFA进行标准的BOC-去保护。最终的产物c经过反相HPLC纯化(C18柱，溶剂梯度5-50％乙腈-水18min)。产物c的收率为132mg。
实施例130
使用胺b(130mg，0.3mmol)、羧酸a，(60mg，0.28mmol)和EDC(60mg，0.3mmol)进行标准的EDC偶联。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCOCombiFlash12g柱，溶剂梯度0-65％乙酸乙酯-二氯甲烷15min)。使用含有几滴水的2∶1 DCM∶TFA进行标准的BOC-去保护。最终的产物c经过反相HPLC纯化(C18柱，溶剂梯度5-50％乙腈-水18min)。产物c的收率为78mg。
实施例131
按照Grigg的一般工艺[Blaney，P；Grigg，R.；Rankovic，Z.；Thornton-Pett，M.；Xu，J.Tetrahedron，2002，58，1719-1737]，向圆底烧瓶装入氢化钠(480mg，60％油分散体，12.0mmol，4.0equiv)，用氮净化15min。向烧瓶加入THF(6.0mL)，利用冰水浴将悬液冷却至0℃。向单独的烧瓶装入BOC-甘氨酸a(525mg，3.0mmol)、无水THF(6.0mL)和乙基碘(1.0mL，12mmol，4equiv)。在0℃下将这种混合物滴加到NaH的THF悬液中，同时剧烈搅拌。搅拌1h后，使反应物升温至室温，搅拌过夜。将反应物再次冷却至0℃，非常缓慢地加入甲醇(4mL)，以淬灭过量的氢化物。加入去离子水以稀释混合物，在减压下除去甲醇。将杂质萃取到90％乙酸乙酯-己烷中，然后加入固体柠檬酸酸化水层，直至pH达到2-3。将产物萃取到90％乙酸乙酯-己烷中。将这种有机层干燥(Na2SO4)，过滤。在减压下除去溶剂，得到定量收率的产物b。
实施例132
使用胺b(70mg，0.16mmol)、羧酸a，(49mg，0.24mmol)和EDC(46mg，0.24mmol)进行标准的EDC偶联。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCOCombiFlash12g柱，溶剂梯度0-55％乙酸乙酯-二氯甲烷15min)。使用含有几滴水的2∶1 DCM∶TFA进行标准的BOC-去保护。最终的产物c经过反相HPLC纯化(C18柱，溶剂梯度5-50％乙腈-水18min)。产物c的收率为82mg。
实施例133
将游离伯胺b(35mg，0.056mmol)、无水碳酸钾(70mg，0.5mmol)和盐酸甲脒a(30mg，0.37mmol)一起混合在小瓶中，溶于甲醇(1.2mL)。将混合物在室温下搅拌1.5h。加入冰乙酸，直至不再见到气体释放，过滤混合物。经过反相HPLC处理(C18柱，溶剂梯度5-50％乙腈-水25min，含有0.1％TFA)，分离所需产物c，冻干后得到8.2mg(0.015mmol，27％收率)TFA盐。
实施例134
将未保护的氨基酸a(775mg，7.24mmol)与碳酸钠(1.69g，16.0mmol)的混合物溶于1∶1去离子水与THF(各15mL)的溶液。向这种混合物加入BOC-酸酐b(1.73g，7.96mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜，在减压下除去THF。然后将混合物用饱和柠檬酸水溶液酸化至pH2-3，产物萃取到10％乙酸乙酯-二氯甲烷中。将有机层干燥(Na2SO4)，在减压下过滤，浓缩，得到洁净的BOC-保护的氨基酸c(1.40g，6.7mmol，93％)，无需进一步纯化即可使用。
实施例135
使用胺b(64mg，0.14mmol)、羧酸a(41mg，0.2mmol)和EDC(38mg，0.2mmol)进行标准的EDC偶联。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCOCombiFlash12g柱，溶剂梯度0-55％乙酸乙酯-二氯甲烷10min，继之以稳态流动的55％乙酸乙酯-二氯甲烷3min)。使用2∶1 DCM∶TFA+几滴水进行标准的BOC-去保护。最终的产物c经过反相HPLC纯化(C18柱，溶剂梯度5-50％乙腈-水18min)。产物c的收率为70.2mg。
实施例136
使用胺盐酸盐b(250mg，0.67mmol)、羧酸a(187mg，0.81mmol)、DIPEA(0.35mL，2.0mmol)和EDC(157mg，0.81mmol)进行标准的EDC偶联。将反应物在室温下搅拌48h。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCO CombiFlash12g柱，溶剂梯度0-25％乙酸乙酯-己烷10min，继之以稳态流动的26％乙酸乙酯-己烷3min)。使用HCl的二噁烷溶液(4.0M，3.0mL)进行标准的BOC-去保护。
向伯胺盐酸盐c(170mg，0.38mmol)和L-BOC-N-甲基丙氨酸(91mg，0.45mmol)加入二氯甲烷(2mL)、DIPEA(0.20mL，1.1mmol)和EDC(86mg，0.45mmol)，在室温下搅拌24h。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCOCombiFlash12g柱，溶剂梯度0.5-52％乙酸乙酯-己烷13min，继之以52％乙酸乙酯-己烷3min)。使用含有几滴水的2∶1 DCM∶TFA进行标准的BOC-去保护。最终的产物经过反相HPLC纯化(C18柱，溶剂梯度5-60％乙腈-水20min)。最终产物的收率为90mg。
实施例137
使用胺盐酸盐b(250mg，0.67mmol)、羧酸a(187mg，0.81mmol)、DIPEA(0.350mL，2.0mmol)和EDC(157mg，0.81mmol)进行标准的EDC偶联。将反应物在室温下搅拌3h。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCO CombiFlash12g柱，溶剂梯度0-25％乙酸乙酯-己烷10min，继之以稳态流动的26％乙酸乙酯-己烷3min)。使用HCl的二噁烷溶液(4.0M，3.0mL)进行标准的BOC-去保护。
向伯胺盐酸盐(160mg，0.35mmol)和L-BOC-N-甲基丙氨酸(91mg，0.45mmol)加入二氯甲烷(2mL)、DIPEA(0.200mL，1.1mmol)和EDC(86mg，0.45mmol)，在室温下搅拌24h。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCOCombiFlash12g柱，溶剂梯度0.5-52％乙酸乙酯-己烷13min，继之以52％乙酸乙酯-己烷3min)。使用含有几滴水的2∶1 DCM∶TFA进行标准的BOC-去保护。最终的产物经过反相HPLC纯化(C18柱，溶剂梯度5-60％乙腈-水20min)。产物c的收率为79mg。
实施例138
a bc 使用胺盐酸盐b(230mg，0.61mmol)、羧酸a(165mg，0.75mmol)、DIPEA(0.350mL，2.0mmol)和EDC(157mg，0.81mmol)进行EDC偶联。将反应物在室温下搅拌3h，LC/MS表明仅完成一半。向反应物加入更多的羧酸(160mg)和EDC(150mg)，将混合物在室温下搅拌过夜。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCO CombiFlash40g柱，溶剂梯度0-55％乙酸乙酯-己烷17min，继之以稳态流动的56％乙酸乙酯-己烷5min)。使用2∶1 DCM∶TFA+几滴水进行标准的BOC-去保护。用EDC(135mg，0.7mmol)和二氯甲烷(3mL)进行产物伯胺c(199mg，0.5mmol)与L-BOC-N-甲基丙氨酸(140mg，0.7mmol)的偶联。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCO CombiFlash12g柱，溶剂梯度0-40％乙酸乙酯-二氯甲烷15min，继之以40％乙酸乙酯-二氯甲烷3min)。使用含有几滴水的2∶1 DCM∶TFA进行标准的BOC-去保护。最终的产物经过反相HPLC纯化(C18柱，溶剂梯度5-50％乙腈-水20min)。最终产物的收率为178mg。
实施例139
将按照Miki的一般工艺[Miki，Y.；Nakamura，N.；Hachiken，H.；Takemura，S.J.Heterocyclic Chem.，1989，26，1739-1745]合成的甲基酮a(480mg，3.0mmol)悬浮在33％HBr的乙酸溶液(6mL)中。分六份加入元素溴(6x0.025mL，总计0.15mL，3.0mmol)，同时在室温下剧烈搅拌。搅拌10min后加入二-乙醚(10mL)，反应物呈现明亮的颜色。继续在室温下搅拌30min。将混合物通过釉料过滤，剩余固体用20mL醚冲洗，转移至小瓶，在高真空下干燥。所得固体(840mg)是所需产物b与原料HBr盐的混合物，无需进一步纯化即可用在噻唑生成步骤中。
实施例140
在圆底烧瓶中，将硫代酰胺a(2.26mg，9.8mmol)加入到溴甲基酮b与甲基酮的混合物(1.44g)中。加入乙醇(30mL)，溶解硫代酰胺，悬浮盐。然后滴加吡啶(0.4mL，5.0mmol)，将混合物在室温下搅拌5min。然后将反应烧瓶在油浴中加热至70℃，同时剧烈搅拌。10min后，不再见到盐的悬液，反应物是均匀的。使反应物冷却至室温达45min，加入Celite以及甲苯(20mL)。在减压下除去溶剂。使粗产物吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCO CombiFlash120g柱，0-30％乙酸乙酯-二氯甲烷20min，继之以梯度30-70％乙酸乙酯-二氯甲烷5min)，得到518mg(1.4mmol，47％)产物噻唑。如下完成脯氨酸胺的BOC除去，将底物溶于含有几滴水的2∶1 DCM∶TFA，遵循标准工艺。将TFA盐用1N氢氧化钠水溶液处理，胺萃取到二氯甲烷中，得到游离碱。将有机层干燥(Na2SO4)，过滤，在减压下除去溶剂，得到356mg(1.3mmol，93％)游离胺c。
实施例141
利用HOAt，DIC工艺偶联上述二肽与胺。使用仲胺b(65mg，0.25mmol)、羧酸a(97mg，0.28mmol)、HOAt(53mg，0.4mmol)和DIC(50mg，0.4mmol)。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCO CombiFlash12g柱，溶剂梯度0-65％乙酸乙酯-二氯甲烷15min)。使用2∶1 DCM∶TFA+几滴水进行标准的BOC-去保护。最终的产物c经过反相HPLC纯化(C18柱，溶剂梯度5-50％乙腈-水18min)。产物c的收率为98mg。
实施例142
利用HOAt，DIC工艺偶联上述二肽与胺。使用仲胺b(50mg，0.2mmol)、羧酸a(72mg，0.21mmol)、HOAt(40mg，0.3mmol)和DIC(38mg，0.3mmol)。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCO CombiFlash12g柱，溶剂梯度10-85％乙酸乙酯-二氯甲烷20min)。使用2∶1 DCM∶TFA+几滴水进行标准的BOC-去保护。最终的产物c经过反相HPLC纯化(C18柱，溶剂梯度3-40％乙腈-水20min)。产物c的收率为25mg。
实施例143
将未保护的氨基酸a(1.1g，10mmol)与碳酸钠(850mg，10mmol)的混合物溶于1∶1去离子水与THF(各13mL)的溶液。向这种混合物历经1h加入FMOC-OSub(6x550mg，总计3.3g，9.8mmol)。在FMOC-OSu的每次加入后都加入2-3mL1M碳酸氢钠水溶液，以保持反应混合物在碱性pH下。将混合物在室温下搅拌过夜，在减压下除去THF。然后将混合物用去离子水稀释，在分液漏斗中倒入乙酸乙酯中，加入6N HCl调至酸性。萃取到乙酸乙酯中后，有机层用去离子水、继之以盐水洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)，在减压下过滤，浓缩，得到洁净的FMOC-保护的氨基酸c(1.05g，3.19mmol，32％)，无需进一步纯化即可使用。
实施例144
按照Freidinger的一般工艺[Freidinger，R.M.；Hinkle，J.S.；Perlow，D.S.；Arison，B.H.J.Org.Chem.，1983，48，77-81]，将FMOC-保护的伯胺a(1.04g，3.17mmol)溶于甲苯(60mL)。加入低聚甲醛(630mg)，继之以催化量的对-甲苯磺酸(70mg，0.37mmol)。将混合物在回流温度下剧烈搅拌45min，在Dean Stark捕集器中收集任何所生成的水。然后使反应混合物冷却至室温，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤(2x30mL)。将有机层干燥(Na2SO4)，在减压下过滤，浓缩，得到910mg(2.7mmol)噁唑烷酮b。将该噁唑烷酮(337mg，0.99mmol)溶于二氯甲烷(20mL)。向这种溶液加入无水三氯化铝(260mg，2.0mmol)，继之以三乙基硅烷(0.32mL，2.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌5h，然后用20mL1N HCl水溶液淬灭。将产物羧酸萃取到25％乙酸乙酯-二氯甲烷中，用1NHCl水溶液(20mL)、继之以盐水洗涤。将有机层干燥(Na2SO4)，过滤。加入Celite，在减压下除去溶剂。使粗产物吸附到Celite上，经过色谱纯化(ISCOCombiFlash40g柱，1-55％乙酸乙酯-二氯甲烷25min)，得到272mg(0.79mmol，25％收率，从FMOC-伯胺计)FMOC保护的N-甲基氨基酸c。
实施例145
使用胺b(140mg，0.4mmol)、粗羧酸a(176mg，0.4mmol)和EDC(80mg，0.4mmol)进行标准的EDC偶联。BOC-保护的最终产物经过色谱纯化(ISCOCombiFlash 40g柱，溶剂梯度1-40％乙酸乙酯-二氯甲烷20min)。将所得BOC-保护的产物分成两份除去FMOC基团。将第一份(50mg，0.065mmol)溶于二氯甲烷(1.0mL)，用哌啶(0.10mL，1.0mmol)处理，在室温下搅拌2h。将第二份(100mg，0.13mmol)溶于20％哌啶的DMF(1.0mL)溶液，在室温下搅拌过夜。加入几滴TFA淬灭两份反应物。最终的产物经过反相HPLC纯化(C18柱，溶剂梯度3-40％乙腈-水20min)。最终产物c的总收率为55mg。
实施例146 IAP抑制作用测定法 在下列实验中使用被称为MLXBIR3SG的嵌合BIR结构域，其中110个残基中有11个对应于在XIAP-BIR3中见到的那些，其余对应于ML-IAP-BIR。已经显示嵌合蛋白LXBIR3SG结合和抑制胱天蛋白酶-9显著好于天然BIR结构域，但是所结合的Smac-类肽和成熟Smac具有与天然ML-IAP-BIR相似的亲和性。在转染到MCF7细胞中时，嵌合BIR结构域MLXBIR3SG的胱天蛋白酶-9抑制作用提高已经与阿霉素-诱导的程序性细胞死亡的抑制作用增加有关连。
MLXBIR3SG序列 MGSSHHHHHHSSGLVPRGSHMLETEEEEEEGAGATLSRGPAFPGMGSEELRLASFY DWPLTAEVPPELLAAAGFFHTGHQDKVRCFFCYGGLQSWKRGDDPWTEHAKWFP GCQFLLRSKGQE IN THSL(SEQ IDNO1) TR-FRET肽结合测定法 按照Kolb等的工艺(Journal of Biomolecular Screening，1996，1(4):203)，在Wallac Victor2Multilabeled Counter Reader(Perkin Elmer LifeandAnalytical Sciences，Inc.)上进行定时-解析的荧光共振能量转移竞争实验。在试剂缓冲液(50mM Tris[pH7.2],120mM NaCl，0.1％牛球蛋白，5mM DTT和0.05％辛基糖苷)中制备鸡尾酒试剂，其中含有300nM his-标记的MLXBIR3SG、200nM生物素基化SMAC肽(AVPI)、5μg/mL抗-his别藻蓝蛋白(XL665)(CISBio International)和200ng/mL链霉抗生物素蛋白-铕(PerkinElmer)(作为替代选择，这种鸡尾酒试剂可以使用铕-标记的抗-His(PerkinElmer)和链霉抗生物素蛋白-别藻蓝蛋白(Perkin Elmer)制备，浓度分别为6.5nM和25nM)。在室温下温育鸡尾酒试剂达30分钟。温育后，将鸡尾酒试剂加入到拮抗剂化合物(起始浓度为50μM)在384-孔黑色FIA平板(GreinerBio-One，Inc.)中的1∶3系列稀释液中。在室温下温育90分钟后，用滤光器读取荧光，铕的激发波长为340nm，铕和别藻蓝蛋白的发射波长分别为615nm和665nm。计算拮抗剂数据，为别藻蓝蛋白在665nm下的发射信号与铕在615nm下的发射信号之比(这些比例乘以系数10,000，以便数据处理)。将所得数值对拮抗剂浓度作图，利用Kaleidograph软件(Synergy Software，Reading，PA)带入4-参数方程。从IC50值测定拮抗剂效力的指标。在本测定法中所测试的本发明化合物表现小于200μM的IC50值，说明有IAP抑制活性。
荧光极化肽结合测定法 按照Keating，S.M.，Marsters，J，Beresini，M.，Ladner,C.，Zioncheck，K.，Clark，K.，Arellano，F.，and Bodary.，S.(2000)in ProceedingsofSPIEIn VitroDiagnostic Instrumentation(Cohn，G.E.，Ed.)pp128-137，Bellingham，WA的工艺，在Analyst HT96-384(Molecular Devices Corp.)上进行极化实验。向5-羧基荧光素-缀合的AVPdi-Phe-NH2(AVP-diPhe-FAM)(最终浓度5nM)加入MLXBIR3SG在极化缓冲液(50mM Tris[pH7.2],120mM NaCl，1％牛球蛋白，5mM DTT和0.05％辛基糖苷)中的1∶2系列稀释液(始于5μM的最终浓度)，制备荧光极化亲和性测量样品。

AVP-diPhe-FAM探针 在96-孔黑色HE96平板(Molecular Devices Corp.)中，利用荧光素荧光团(λex＝485nm；λem＝530nm)的标准截留滤光器读取在室温下温育10分钟后的反应。将荧光数值对蛋白质浓度作图，利用Kaleidograph软件(Synergy software，Reading，PA)将数据带入4-参数方程，得到IC50。向小孔加入30nM的MLXBIR3SG，进行竞争实验，小孔含有5nM AVP-diPhe-FAM探针以及拮抗剂化合物在极化缓冲液中的1∶3系列稀释液(始于300μM的浓度)。温育10分钟后读取样品。将荧光极化值对拮抗剂浓度作图，利用Kaleidograph软件(Synergy software，Reading，PA)将数据带入4-参数方程，得到IC50值。从IC50值测定拮抗剂的抑制常数(Ki)。在本测定法中测试的本发明化合物表现小于l00μM的Ki。
权利要求
1.式I化合物或其盐或溶剂化物
其中
A是带有1至4个杂原子N、O或S的5-元芳族杂环，任选地被一个或多个R7和R8基团取代；
Q是H、烷基、碳环、杂环；其中烷基的一个或多个CH2或CH基团任选地被-O-、-S-、-S(O)-、S(O)2、-N(R8)-、-C(O)-、-C(O)-NR8-、-NR8-C(O)-、-SO2-NR8-、-NR8-SO2-、-NR8-C(O)-NR8-、-NR8-C(NH)-NR8-、-NR8-C(NH)-、-C(O)-O-或-O-C(O)-取代；烷基、碳环和杂环任选地被一个或多个羟基、烷氧基、酰基、卤素、巯基、氧代基、羧基、卤代烷基、氨基、氰基、硝基、脒基、胍基、任选被取代的碳环或任选被取代的杂环取代；
X1和X2各自独立地是O或S；
Y是键、(CR7R7)n、O或S；其中n是1或2，R7是H、卤素、烷基、芳基、芳烷基、氨基、芳基氨基、烷基氨基、芳烷基氨基、烷氧基、芳氧基或芳烷氧基；
R1是H，或者R1和R2一起构成5-8元环；
R2是烷基、碳环、碳环基烷基、杂环或杂环基烷基，各自任选地被卤素、羟基、氧代基、硫酮、巯基、羧基、烷基、卤代烷基、烷氧基、烷硫基、磺酰基、氨基和硝基取代；
R3是H或者任选被卤素或羟基取代的烷基；或者R3和R4一起构成3-6元杂环；
R3’是H，或者R3和R3’一起构成3-6元碳环；
R4和R4’独立地是H、羟基、氨基、烷基、碳环、碳环烷基、碳环烷氧基、碳环烷氧基羰基、杂环、杂环烷基、杂环烷氧基或杂环烷氧基羰基；并且其中烷基、碳环烷基、碳环烷氧基、碳环烷氧基羰基、杂环、杂环烷基、杂环烷氧基和杂环烷氧基羰基各自任选地被卤素、羟基、巯基、羧基、烷基、烷氧基、氨基、亚氨基和硝基取代；或者R4和R4’一起构成杂环；
R5是H或者烷基；
R6，和R6’各自独立地是H、烷基、芳基或芳烷基；
R7各自独立地是H、氰基、羟基、巯基、卤素、硝基、羧基、脒基、胍基、烷基、碳环、杂环或-U-V；其中U是-O-、-S-、-S(O)-、S(O)2、-N(R8)-、 -C(O)-、 -C(O)-NR8-、 -NR8-C(O)-、 -SO2-NR8-、 -NR8-SO2-、-NR8-C(O)-NR8-、-NR8-C(NH)-NR8-、-NR8-C(NH)-、-C(O)-O-或-O-C(O)-，V是烷基、碳环或杂环；其中烷基的一个或多个CH2或CH基团任选地被-O-、-S-、-S(O)-、S(O)2、 -N(R8)-、-C(O)-、-C(O)-NR8-、-NR8-C(O)-、-SO2-NR8-、-NR8-SO2-、-NR8-C(O)-NR8-、-NR8-C(NH)-NR8-、-NR8-C(NH)-、-C(O)-O-或-O-C(O)-取代；烷基、碳环和杂环任选地被羟基、烷氧基、酰基、卤素、巯基、氧代基、羧基、酰基、卤代烷基、氨基、氰基、硝基、脒基、胍基、任选被取代的碳环或任选被取代的杂环取代；
R8是H、烷基、碳环或杂环，其中所述烷基的一个或多个CH2或CH基团任选地被-O-、-S-、-S(O)-、S(O)2、-N(R8)或-C(O)-取代-；所述烷基、碳环和杂环任选地被羟基、烷氧基、酰基、卤素、巯基、氧代基(＝O)、羧基、酰基、卤代烷基、氨基、氰基、硝基、脒基、胍基、任选被取代的碳环或任选被取代的杂环取代。
2.权利要求1的化合物，其中环A具有通式II或II’
其中Z1是NR8、O或S；Z2、Z3和Z4各自独立地是N或CR7；其中R8是H、烷基或酰基；R7是H、卤素、氨基、羟基、羧基、烷基、卤代烷基或芳烷基。
3.权利要求1的化合物，其中环A和Q一起选自IIa-IIz
其中R8是H、烷基或酰基；R7是H、卤素、氨基、羟基、羧基、烷基、卤代烷基或芳烷基。
4.权利要求1的化合物，其中Q是碳环或杂环，任选地被卤素、氨基、氧代基、烷基、碳环或杂环取代；其中烷基的一个或多个CH2或CH基团任选地被-O-、-S-、-S(O)-、S(O)2、-N(R8)-、-C(O)-、-C(O)-NR8-、-NR8-C(O)-、-SO2-NR8-、-NR8-SO2-、-NR8-C(O)-NR8-、-NR8-C(NH)-NR8-、-NR8-C(NH)-、-C(O)-O-或-O-C(O)-取代；并且其中所述烷基、碳环或杂环任选地被卤素、氨基、羟基、巯基、羧基、烷氧基、烷氧基烷氧基、羟基烷氧基、烷硫基、酰氧基、酰氧基烷氧基、烷基磺酰基、烷基磺酰基烷基、烷基亚磺酰基与烷基亚磺酰基烷基取代。
5.权利要求1的化合物，其中Q是选自IIIa-IIIs的碳环或杂环
其中n是1-4；T是O、S、NR8或CR7R7；W是O、NR8或CR7R7。
6.权利要求1的化合物，其中R1是H。
7.权利要求1的化合物，其中R2是烷基、环烷基或杂环。
8.权利要求1的化合物，其中R2选自叔丁基、异丙基、环己基、四氢吡喃-4-基、N-甲基磺酰基哌啶-4-基、四氢噻喃-4-基、四氢噻喃-4-基(其中S是氧化形式SO或SO2)、环己烷-4-酮、4-羟基环己烷、4-羟基-4-甲基环己烷、1-甲基-四氢吡喃-4-基、2-羟基丙-2-基、丁-2-基、苯基和1-羟基乙-1-基。
9.权利要求1的化合物，其中R3是甲基。
10.权利要求1的化合物，其中R4是H或甲基，R4’是H。
11.权利要求1的化合物，其中R5是H或甲基。
12.权利要求1的化合物，其中R6和R6’独立地是H或甲基。
13.权利要求1的化合物，其中X1和X2独立地是O。
14.权利要求2的化合物，其中R1是H；R2是异丙基、叔丁基、环己基或吡喃；R3是甲基；R4是H或甲基，R4’是H；R5是H或甲基；X1和X2都是O。
15.在细胞中诱导程序性细胞死亡的方法，包含向所述细胞引入权利要求1的化合物。
16.使细胞敏感于程序性细胞死亡信号的方法，包含向所述细胞引入权利要求1的化合物。
17.权利要求16的方法，其中所述程序性细胞死亡信号是通过使所述细胞与选自下列的化合物接触来诱导的阿糖胞苷、氟达拉滨、5-氟-2’-脱氧尿苷、吉西他滨、甲氨蝶呤、博来霉素、顺铂、环磷酰胺、阿德里亚霉素(阿霉素)、米托蒽醌、喜树碱、托泊替康、秋水仙胺、秋水仙碱、紫杉醇、长春花碱、长春新碱、他莫西芬、非那雄胺、泰索帝和丝裂霉素C或者放射。
18.权利要求16的方法，其中所述程序性细胞死亡信号是通过使所述细胞与Apo2L/TRAIL接触来诱导的。
19.抑制IAP蛋白与胱天蛋白酶蛋白结合的方法，包含使所述IAP蛋白与权利要求1的化合物接触。
20.治疗哺乳动物与IAP过度表达有关的疾病或病症的方法，包含对所述哺乳动物给予有效量的权利要求1的化合物。
21.治疗癌症的方法，包含对所述哺乳动物给予有效量的权利要求1的化合物。
全文摘要
本发明提供新颖的IAP抑制剂，它们可用作治疗剂治疗恶性肿瘤，其中这些化合物具有通式I，其中A、Q、X1、X2、Y、R1、R2、R3、R4、R4’、R5、R6和R6’是如本文所述的。
文档编号C07D417/04GK101146803SQ200580048466
公开日2008年3月19日 申请日期2005年12月19日 优先权日2004年12月20日
发明者弗雷德里克·科恩, 崔晓薇, 李国强, 约翰·A·弗莱加雷 申请人:健泰科生物技术公司