专利名称：一种葫芦素族单体天然脂肪酸单酯的衍生物的制作方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，涉及一种葫芦素单体天然脂肪酸单酯的衍生物，具体涉及葫芦素B、E、Q、I天然脂肪酸单酯的衍生物。
背景技术：
葫芦素(Cucurbitacins)是从葫芦科植物中提取得到的苦味甙元成分，是一类高度氧化的四环三萜类化合物。从甜瓜蒂中提取的药用葫芦素以葫芦素B、E(Cucurbitacin B、E，CuB、E)为主要成分，临床试验证明其对原发性肝癌和肝炎的治疗有显著疗效。有研究者经试验证明CuB对人结肠、乳腺、肝脏及中枢神经系统的癌细胞均表现出比同类化合物强的生长抑制作用。近年来，以葫芦素B、E为主的活性成分已被制成多种剂型，有葫芦素片，葫芦素滴丸，葫芦素胶囊，软胶囊等，目前国内只有CuB、E片剂上市，其片剂的溶出度/生物利用度均存在一定问题且毒副反应比较严重，所以针对CuB、E的结构改造使其更安全有效意义重大。
脂肪酸类物质包括饱和脂肪酸类物质及不饱和脂肪酸类物质，也有长链或中链之分，它是人体能量的来源，能够提高机体的免疫能力，且具有无毒的特点。而且，它是细胞膜的重要组成物质，参与细胞多种生理功能。有研究者将肝细胞瘤组织独立分离出来，保留一个动脉进血，一个动脉出血，用于研究肿瘤细胞对于脂肪酸和其他代谢产物的摄取，试验结果表明天然脂肪酸易被肿瘤的动脉血摄取，用于生化反应和作为能量来源。因此通过酰化或酯化反应将天然脂肪酸连接到葫芦素B或葫芦素E的结构上后，由于肿瘤细胞对天然脂肪酸的摄取实现肿瘤细胞对药物的摄取，使药物能够浓集于肿瘤组织并通过体内酯酶的酯解作用使酯键断裂、释药，发挥疗效，同时药物在正常组织分布却大大减少，从而实现药物的靶向性，减少对正常组织的毒性，天然脂肪酸类物质在体内作为能源物质，代谢成为CO2和H2O，并释放出能量。
发明内容
本发明的一个目的是提供一类活性更强、毒性更低的葫芦素族单体(葫芦素B、E、Q、I)衍生物。
本发明的另一个目的是提供这种葫芦素族单体(葫芦素B、E、Q、I)衍生物的制备方法。
本发明的再一个目的是提供含有这种葫芦素族单体(葫芦素B、E、Q、I)衍生物的药物组合物。
本发明提供的葫芦素族单体(葫芦素B、E、Q、I)衍生物是由葫芦素族单体(葫芦素B、E、Q、I)与天然脂肪酸类(饱和或不饱和)物质酰化或酯化反应生成。它的结构通式如下
(1)葫芦素B天然脂肪酸单脂 当R2，R3为-OH时，R1为
的饱和或不饱和链式脂肪烃； 当R1，R3为-OH时，R2为
的饱和或不饱和链式脂肪烃； 当R1，R2为-OH时，R3为
的饱和或不饱和链式脂肪烃。
(2)葫芦素E天然脂肪酸单脂 当R2，R3为-OH时，R1为
的饱和或不饱和链式脂肪烃； 当R1，R3为-OH时，R2为
的饱和或不饱和链式脂肪烃； 当R1，R2为-OH时，R3为
的饱和或不饱和链式脂肪烃。
(3)葫芦素I天然脂肪酸单脂 当R2，R3，R4，为-OH时，R1为
的饱和或不饱和链式脂肪烃； 当R1，R3，R4，为-OH时，R2为
的饱和或不饱和链式脂肪烃； 当R1，R2，R4，为-OH时，R3为
的饱和或不饱和链式脂肪烃； 当R1，R2，R3，为-OH时，R4为
的饱和或不饱和链式脂肪烃
(4)葫芦素Q天然脂肪酸单脂 当R2，R3，R4，为-OH时，R1为
的饱和或不饱和链式脂肪烃； 当R1，R3，R4，为-OH时，R2为
的饱和或不饱和链式脂肪烃； 当R1，R2，R4，为-OH时，R3为
的饱和或不饱和链式脂肪烃； 当R1，R2，R3，为-OH时，R4为
的饱和或不饱和链式脂肪烃 本发明是将葫芦素族单体与天然饱和或不饱和脂肪酸类物质溶于有机溶媒中，可在适量的碱及脱水剂作用下，制得葫芦素单体，使用制备薄层法及柱层析法将产物分离并纯化。
有机溶媒为氯仿，二氯甲烷，四氢呋喃，乙醚，乙酸乙酯，丙酮；所述的碱为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠和碳酸氢钾等无机碱和三乙胺、吡啶、4-二甲胺基吡啶等有机碱及脱水剂二环己基碳二亚胺。
本发明的合成制备方法包括下面五个步骤 (1)精密称取葫芦素单体(葫芦素B、E、Q、I)、4-二甲胺基吡啶(DMAP)置25ml园底三颈颈中，用CH2Cl2溶解，加入梭形搅拌子，在装置上用温度计套管连接温度计监测反应温度并用三通阀连接氩气保护装置，密闭装置，闭光置于冰浴中，开动磁力搅拌。
(2)待温度计显示温度已降至-10℃时开始用2ml玻璃注射器透过胶头向密闭的装置中滴加用CH2Cl2稀释过的酸液，半小时滴加结束，反应装置中CH2Cl2不超过3ml。温度保持在-5℃～0-0℃之间5小时，后让温度缓慢升至室温，但不超过20℃。
(3)室温继续反应15小时后，停止磁力搅拌，结束反应。将反应液用CH2Cl2稀释转移至120ml分液漏斗中，分别用冷水、2mol/l HCl、冷水处理反应液，用饱和NaCl溶液去乳化，最后将反应液转移至50ml锥形瓶中，加入无水MgSO4干燥过夜。
(4)抽滤除去无水MgSO4，闭光旋转蒸发除去CH2Cl2，得到黄色油状物，为单脂产物和双脂产物的混合物。
(5)根据两个产物的Rf值不同，选择柱层析法或制备薄层法制备得到最终产物。
以上步骤和工艺路线制得葫芦素单体(B、E、Q、I)天然脂肪酸单脂的纯度为98.7％。
本发明的抗癌药物组合物具体涉及到脂质体，乳剂，软胶囊。
所述的的脂质体包含有效剂量的葫芦素单体天然脂肪酸单酯作为药物，并含有药用辅料，药用辅料包括膜材pH调节剂、表面修饰辅料或不含表面修饰辅料。所述的膜材为天然磷脂，包括大豆磷脂、氢化大豆磷脂、卵磷脂、磷脂酰乙醇胺(PE)、胆固醇、脑磷脂、胆固醇乙酰脂、β-谷甾醇、磷脂酰肌醇(Phosphatidyl inostiols简称PI)、神经鞘磷脂(SPH)、鞘髓磷脂(SM)、牛胆酸钠；也包括合成磷脂，二棕榈酰-DL-α磷脂酰胆碱(SyntheticdialmitoylpDL α-Phosphatidyl choline简称DPPC)、二肉豆蔻酰卵磷脂(DMPC)、二硬脂酰磷脂酰胆碱、合成磷脂酰丝氨酸(Phosphatidyl Serine，PS)、二鲸蜡磷酸酯(DCP)、硬脂胺(SA)等中的一种或几种的混合物，用量为1～30％(w/v)；可以根据需要加入/或不加表面修饰辅料，如与体内某些抗原对应的抗体、单克隆抗体、转铁蛋白、半乳糖及其衍生物、PEG及其衍生物，如PEG2000-CH-S(聚乙二醇胆固醇硫酸酯)、PEG2000-CHS(聚乙二醇胆固醇琥珀酸酯)中的一种或几种的混合物；还可以加入pH调节剂，盐酸、氢氧化钠、醋酸、醋酸钠、柠檬酸、柠檬酸钠、碳酸钠、碳酸氢钠、磷酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、磷酸钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸钾中的一种或几种，pH范围是3～9，所制脂质体的粒径范围为10nm～10μm。脂质体的制备工艺为 1)在配制罐中制备药物溶液在配制罐中，将膜材加入适量无水乙醇(或其它有机溶剂)中，加热至30-90℃，搅拌使其完全溶解，再加入药物搅拌使其溶解，形成药物溶液。
2)在配制罐中制备水相将水和pH调节剂在30～90℃下搅拌5min，使之完全溶解。
3)在30～80℃时，将药物溶液加入水相(或水相加入药物溶液)中，搅拌孵化10-1000分钟。
4)过均质仪，第一步调节匀化压力至520～600kg/cm2，第二步再调节至100～140kg/cm2，(或微射流仪，第一步调节匀化压力至4000-8000psi，第二步再调节至10000-16000psi)将溶液反复匀化，得到均匀的脂质体，过微孔滤膜，封装，灭菌，即得本品。
所述的乳剂(包括注射乳剂和口服乳剂)含有效剂量的葫芦素单体天然脂肪酸单酯作为药物，并含有药用辅料，药用辅料包括油、乳化剂、助乳化剂、等渗调节剂、pH调节剂；药∶油＝1∶3～1∶300。所述的油为C6-C28的植物油或动物油(包括经过结构改造和水解后的植物油)、甘油三酸酯，如椰子油、橄榄油、大豆油、红花油、海豹油、辛葵酸甘油酯
(称为中链三甘油酯MCT)；也包括脂肪酸的衍生物，如油酸乙酯，用量为1～30％(w/v)。乳化剂包括磷脂(蛋黄磷脂或大豆磷脂)(0.5％～5％)(w/v)、HS15(聚乙二醇12-羟基硬脂酸酯、polyethylene glycol 660hydroxystearate)(0.1％～5％)(w/v)、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)(0.1％～5％)(w/v)、DSPE-PEG、泊洛沙姆(0.05％～5％)(w/v)、吐温类(0.1％～5％)(w/v)、司盘类中的一种或几种的混合物；口服乳剂还可以采用明胶、阿拉伯胶作为乳化剂；可以根据需要加入助乳化剂，如油酸、辛酸、葵酸、月桂酸、棕榈酸、亚油酸、亚麻油酸、硬脂酸、二十二碳六烯酸(DHA)、胆酸(包括猪、鹅、熊去氧胆酸)中的一种或几种的混合物；等渗调节剂是甘油、葡萄糖、甘露醇、木糖醇中的一种或几种的混合物；pH调节剂是盐酸、氢氧化钠、醋酸、醋酸钠、磷酸、磷酸钠、柠檬酸、柠檬酸钠等中的一种或几种的混合物，最佳pH范围是4～9；所制乳剂的粒径范围是10nm～10μm。乳剂的制备工艺为 1)在配制罐中制备油相在配制罐中，将注射用油加热至40-90℃，加入乳化剂(或加在水相中)，强烈搅拌至溶解，加入药物，强烈搅拌混匀。
2)在配制罐中制备水相将水和甘油在40～90℃下搅拌5min，使之完全混溶。
3)在40～80℃时，将油相加入水相(或水相加入油相)，强烈搅拌混匀，形成初乳。
4)调节pH值到4～9。
5)过均质仪，第一步调节匀化压力至520～600kg/cm2，第二步再调节至100～140kg/cm2，(或微射流仪，第一步调节匀化压力至4000-8000psi，第二步再调节至10000-16000psi)将溶液反复匀化，得到均匀的乳剂，过微孔滤膜，封装，灭菌，即得本品。
所述的软胶囊剂(包括自乳化软胶囊剂)，其溶剂可以是C6-C18的植物油或动物油(包括经过结构改造和水解后的植物油)、甘油三酸酯，如椰子油、玉米油、橄榄油、大豆油、红花油、海豹油、辛葵酸甘油酯
(称为中链三甘油酯MCT)；也包括脂肪酸的衍生物，如油酸乙酯。自乳化软胶囊剂中所采用的油为C8-C10的中链油，除此之外，尚有乳化剂、助乳化剂。所说的乳化剂包括磷脂、高HLB表面活性剂，如聚氧乙烯蓖麻油、HS15(聚乙二醇12-羟基硬脂酸酯、polyethylene glycol 660 hydroxystearate)、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)、泊洛沙姆、吐温类、蔗糖脂肪酸酯类中的一种或几种的混合物；助乳化剂(乙醇、丙二醇、聚乙二醇200-600、二甲基异山梨酯中的一种或几种的混合物)；除此之外，还可以加入抗氧化剂，包括丁基羟基茴香醚(BHA)、二丁基羟基甲苯(BHT)、α-生育酚、α-醋酸生育酚、α-硫辛酸、维生素C棕榈酸酯中的一种或几种的混合物。本实验中应用PSS.NICOMPTM380作为测定粒径的仪器。
本发明的优点是首次合成了葫芦素族单体葫芦素B、E、Q、I的天然脂肪酸单酯衍生物，通过本发明所提供的结构改造，使葫芦素族单体葫芦素B、E、Q、I实现了药物的靶向性，使药物浓集于肿瘤细胞，并在正常组织分布大大减少，与葫芦素单体葫芦素B、E、Q、I相比，治疗指数增大而毒性却大大降低。
图1为葫芦素B月桂酸单酯质谱图 图2为葫芦素B月桂酸单酯核磁共振氢谱图 图3为葫芦素B月桂酸单酯的HPLC纯度检查图 图中1为葫芦素B月桂酸单质；2为溶剂峰 图4为葫芦素B油酸单酯的核磁氢谱图 图5为葫芦素B油酸单酯的质谱图 图6为葫芦素B-α亚麻酸单酯的核磁氢谱图
具体实施例方式 实施例1葫芦素B与月桂酰氯的酰化反应 称取葫芦素B50mg，二甲氨基吡啶11mg，至闭光反应器中，2ml二氯甲烷溶解，密闭，干燥，盐冰浴下(-5℃-10℃)磁力搅拌，同时滴加月桂酰氯的二氯甲烷溶液1ml。6小时后停止反应，关闭磁力搅拌，撤下氮气保护，升至室温，用二氯甲烷稀释反应液，CH2Cl2稀释反应液，转移至分液漏斗中，冷水振摇，洗涤有机层洗，为了减少损失，用CH2Cl2三次萃取水层合并CH2Cl2溶液，再依次用2mol/L HCl、水处理合并后的CH2Cl2溶液，最后用饱和NaCl水溶液去乳化后分离得到的有机层，加入无水硫酸镁干燥过夜，经旋转蒸发除去有机溶剂，得到黄色油状物产物，Rf值小的产物为目标产物。
实施例2葫芦素B与油酸的酰化反应 精密称取葫芦素B50mg，二甲氨基吡啶11mg，二环己基碳二亚胺37mg至闭光反应器中，2ml二氯甲烷溶解，密闭，抽真空加氮气保护，室温下(15-25℃)磁力搅拌，同时滴加油酸(31.07mg)的二氯甲烷溶液1ml。6小时后停止反应，关闭磁力搅拌，撤下氮气保护，用二氯甲烷稀释反应液，抽滤除去反应中生成的白色沉淀二环己基脲。浓缩反应液，均匀上样至实现准备好的制备薄层板上，石油醚-乙酸乙酯(2∶1)作展开剂，并在展开系统中记入非常少量的冰醋酸，展开分离后得到两条生成物色带硅胶，装柱，石油醚-乙酸乙酯(1∶1)作洗脱剂，得到两种产物，Rf值小的产物为目标产物。
实施例3葫芦素B与α-亚麻酸的酰化反应 精密称取葫芦素B50mg，二甲氨基吡啶11mg，二环己基碳二亚胺37mg至闭光反应器中，2ml二氯甲烷溶解，密闭，抽真空加氮气保护，室温下(15-25℃)磁力搅拌，同时滴加α-亚麻酸的二氯甲烷溶液1ml。6小时后停止反应，关闭磁力搅拌，撤下氮气保护，用二氯甲烷稀释反应液，抽滤除去反应中生成的白色沉淀二环己基脲。浓缩反应液，均匀上样至实现准备好的制备薄层板上，石油醚-乙酸乙酯(2∶1)作展开剂，并在展开系统中记入非常少量的冰醋酸，展开分离后得到两条生成物色带硅胶，装柱，石油醚-乙酸乙酯(1∶1)作洗脱剂，得到两种产物，Rf值小的产物为目标产物。
实施例4葫芦素B月桂酸单酯的结构确证 质谱数据M++Na(m/z)为764.4；氢谱数据1H-NMR(CDCl3)δ7.06(1H，d，J＝15.6Hz)，6.47(1H，d，J＝15.6Hz)，5.79(1H，m)，4.41(2H，m)，4.25(1H，s)，3.25(1H，d，J＝14.6Hz)，2.76(1H，brs)，2.69(1H，d，J＝14.5Hz)，2.01(3H，s)，1.57(3H，s)，1.55(3H，s)，1.44(3H，s)，1.35(3H，s)，1.34(3H，s)，1.28(3H，s)，1.08(3H，s)，0.98(3H，s)。
实施例5葫芦素B油酸单酯的结构确证 质谱数据M++Na(m/z)为845.3；氢谱数据1H-NMR(CDCl3)δδ7.12(1H，d，J＝15.3Hz)，6.41(1H，d，J＝15.6Hz)，5.78(1H，m)，5.78(2H，m)，5.19(1H，m)，4.41(2H，m)，4.25(1H，s)，3.25(1H，d，J＝14.6Hz)，2.76(1H，brs)，2.01(3H，s)，1.58(3H，s)，1.55(3H，s)，1.42(3H，s)，1.34(3H，s)，1.29(3H，s)，1.26(3H，s)，1.09(3H，s)，0.91(3H，s)。
实施例6葫芦素Bα-亚麻酸单酯的结构确证 氢谱数据1H-NMR(CDCl3)δ7.12(1H，d，J＝15.3Hz)，6.41(1H，d，J＝15.6Hz)，5.78(1H，m)，5.78(2H，m)，5.38(1H，m)，4.41(2H，m)，4.25(1H，s)，3.25(1H，d，J＝14.6Hz)，2.03(3H，s)，1.58(3H，s)，1.42(3H，s)，1.34(3H，s)，1.29(3H，s)，1.27(3H，s)，1.25(3H，s)，1.00(3H，s)，0.98(3H，s)。
实施例7葫芦素B月桂酸单酯HPLC纯度检查 仪器P230高压横流泵；UV200II紫外可变波长检测器；色谱柱DiamonsilODS C18柱(ID 4.6mm×200mm，5μm)；流动相甲醇∶水＝95∶5；室温；检测波长228nm；浓度70μg/mL。结果见图 实施例8葫芦素B月桂酸单酯脂质体的制备 成分为有效剂量的葫芦素B月桂酸单酯0.1g，氢化大豆磷脂2g，胆固醇0.25g，无水乙醇适量，其余为5mM的磷酸钠缓冲液，共100mL。
制备方法 1)在配制罐中制备药物溶液在配制罐中，将磷脂与胆固醇溶于适量无水乙醇中加热至50℃，强烈搅拌至溶解，加入药物，强烈搅拌5min使之溶解； 2)在配制罐中制备水相将5mM的磷酸钠缓冲液加热至50℃，备用。
3)在40℃时，将含有的药物溶液加入水相，强烈搅拌20min； 4)过均质仪，第一步调节匀化压力至500kg/cm2，第二步再调节至100kg/cm2，将溶液反复匀化，得到均匀半透明的脂质体，过微孔滤膜，封装，灭菌，即得本品。平均粒径为85nm，不含大于5μm的粒子。所得脂质体可用于注射。
实施例9葫芦素B月桂酸单酯乳剂的制备 成分为有效剂量的葫芦素B月桂酸单酯0.1g，磷脂1.2g，中链油10g，甘油2.4g，HS156g，其余为注射用水，共100mL。
制备方法 1)在配制罐中制备油相在配制罐中，加入磷脂，MCT，HS15在60℃下搅拌至溶解，加入药物，搅拌10min使之溶解； 2)在配制罐中制备水相将甘油加入注射用水中，在60℃下搅拌5min，使之完全混溶； 3)在40℃时，将水相加入油相，强烈搅拌15min，形成初乳； 4)过均质仪，第一步调节匀化压力至，第二步再调节至，将溶液反复匀化，得到均匀的乳剂，过微孔滤膜，封装，灭菌，即得本品。平均粒径为90nm，不含大于2μm的粒子。所得乳剂可以注射也可以口服。
实施例10 MTT法进行体外细胞毒试验(具体涉及到葫芦素B月桂酸单脂)，试验中所采用瘤株分别为HepG2(肝癌瘤株)、MCF-7(乳腺癌瘤株)、Hep2(喉癌瘤株)、SKOV3(卵巢癌瘤株)、NCIH460(肺癌瘤株)具体试验结果以半数抑制浓度(IC50)体现。
结果如下
由上面数据可以看出，对于试本实验所采用瘤株中，葫芦素B月桂酸单脂的IC50值分别为0.6μM、2.6μM、11.1μM、0.3μM、0.5μM，而相对于同种瘤株葫芦素B的IC50值分别为6.4μM、74.9μM、66.9μM、1.5μM、42.4μM，均大于葫芦素B月桂酸单脂，因此可以得出以下结论葫芦素B单体衍生物与葫芦素B相比较具有更高的抑瘤率，由于葫芦素B与葫芦素E同为药用葫芦素的主要成分，结构相似，月桂酸仅为天然脂肪酸的一种，根据本发明技术背景中所详述的释药机理，进一步概括总结得出结论结构改造后的葫芦素单体(葫芦素B、E、Q、I)天然脂肪酸衍生物比葫芦素单体(葫芦素B、E、Q、I)具有更高的抑瘤率。
权利要求
1、一种葫芦素族单体天然脂肪酸单酯的衍生物，其特征在于所述的葫芦素族单体为葫芦素B、E、Q、I，该化合物是将葫芦素族中一种单体葫芦素B、E、Q、I结构上的-OH与天然饱和或不饱和脂肪酸通过形成酯键而成的，其结构通式如下
(1)葫芦素B天然脂肪酸单脂
当R2，R3为-OH时，R1为
当R1，R3为-OH时，R2为
当R1，R2为-OH时，R3为
(2)葫芦素E天然脂肪酸单脂
当R2，R3为-OH时，R1为
当R1，R3为-OH时，R2为
当R1，R2为-OH时，R3为
(3)葫芦素I天然脂肪酸单脂
当R2，R3，R4，为-OH时，R1为
当R1，R3，R4，为-OH时，R2为
当R1，R2，R4，为-OH时，R3为
当R1，R2，R3，为-OH时，R4为
(4)葫芦素Q天然脂肪酸单脂
当R2，R3，R4，为-OH时，R1为
当R1，R3，R4，为-OH时，R2为
当R1，R2，R4，为-OH时，R3为
当R1，R2，R3，为-OH时，R4为
2、根据权利要求1所述的葫芦素族单体天然脂肪酸单酯的衍生物，其特征在于所述的天然脂肪酸包括饱和天然脂肪酸和不饱和天然脂肪酸。
3、一种如权利要求1所述的葫芦素族单体天然脂肪酸单酯衍生物的制备方法，其特征在于将葫芦素族单体与天然饱和或不饱和脂肪酸类物质溶于有机溶媒中，在碱催化剂作用下，制得葫芦素单体。
4、根据权利要求3所述的葫芦素族单体天然脂肪酸单酯衍生物的制备方法，其特征在于其中所述的有机溶媒为氯仿，二氯甲烷，四氢呋喃，乙醚，乙酸乙酯，丙酮；所述的催化剂为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠和碳酸氢钾等无机碱和三乙胺、吡啶、4-二甲胺基吡啶等有机碱及脱水剂二环己基碳二亚胺；反应温度可在室温15-25℃、冰水浴下0℃、盐冰浴下-10--25℃、加热回流冷凝30℃、40℃、50℃条件下进行；反应环境可在避光，干燥，氮气或氩气惰性气体保护下的密闭干燥反应系统中进行。
5、一种权力要求1所述的葫芦素族单体脂肪酸单酯的衍生物的组合物，其特征在于所述的组合物为以葫芦素族单体脂肪酸单酯的衍生物为主要成分的脂质体、乳剂、软胶囊、自乳化软胶囊、片剂、颗粒剂、混悬剂、微球、微囊、纳米粒制剂。
6、根据权利要求5所述的葫芦素族单体脂肪酸单酯衍生物的组合物，其特征在于所述的脂质体为以含有效剂量的精制葫芦素族天然饱和或不饱和脂肪酸单酯作为药物，并含有药用辅料，药用辅料包括磷脂、抗氧剂、胆固醇及其衍生物，药物∶磷脂＝1∶10-1∶100。
7、根据权利要求6所述的葫芦素族单体脂肪酸单酯的衍生物的组合物，其特征在于所述的磷脂为大豆磷脂、蛋卵磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬酯酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰二乙醇胺、二棕榈酰磷脂酰丝氨酸、二棕榈酰磷脂酸盐和二棕榈酰甘油磷脂、二油酰磷脂酰胆碱和二油酰甘油磷脂类天然磷脂或合成磷脂中的一种或几种，用量为1-12％；所述的抗氧剂为惰性气体、EDTA及其盐类、α-生育酚、α-醋酸生育酚、α-硫辛酸、维生素C及其衍生物，维生素C棕榈酸酯中的一种或几种混合物。
8、一种如权利要求7所述的葫芦素族单体脂肪酸单酯的衍生物的组合物的制备方法，其特征在于所述的脂质体采用改良乙醇注入法，将药物和药用辅料用溶剂乙醇溶解，加热约10-30分钟，用注射器缓慢加入pH5.0-7.4的缓冲溶液，孵化20-40分钟；或薄膜分散法，将药物和药用辅料用溶剂乙醚、氯仿或二氯甲烷溶解，于40-55℃常压或减压蒸至形成干膜，加入pH5.0-7.4的缓冲溶液，孵化20-40分钟；或逆相蒸发法，将药物和药用辅料用溶剂乙醚和氯仿溶解后，加入体积比为1∶3-1∶6的pH5.0-7.4的缓冲溶液，短时超声形成均匀乳，挥去有机溶剂至凝胶状，加入pH5.0-7.4的缓冲溶液适量，孵化20-40分钟。
9、根据权利要求7所述的葫芦素族单体脂肪酸单酯的衍生物的组合物，其特征在于乳剂中的油为C6-C28的经过结构改造和水解后的植物油、甘油三酸酯，椰子油、橄榄油、大豆油、红花油、海豹油、辛葵酸甘油酯或
类植物油或动物油；或脂肪酸的衍生物，油酸乙酯、亚油酸甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯、亚油酸乙酯、油酸山梨醇酯、油酸甘油酯、椰子油C8/C10甘油单酯或双酯、椰子油C8/C10丙二醇双酯、椰子油C8/C10甘油三酯、椰子油C8/C10甘油三酯、纯化乙酰化的单甘油酯、纯化向日葵油单甘油酯等中的一种或几种混合物，用量为1～30％(w/v)；乳化剂包括磷脂0.5％～5％(w/v)、HS150.1％～5％(w/v)、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯0.1％～5％(w/v)、泊洛沙姆0.05％～5％(w/v)、吐温类0.1％～5％(w/v)、司盘类中的一种或几种混合物；口服乳剂还可以采用明胶、阿拉伯胶、西黄嗜胶、人血清白蛋白作为乳化剂；可以根据需要加入/或不加入助乳化剂，如油酸、辛酸、葵酸、月桂酸、棕榈酸、亚油酸、亚麻油酸、硬脂酸、二十二碳六烯酸、胆酸中的一种或几种混合物；还可以加入防腐剂，尼泊金酯类、苯甲酸类。
10、根据权利要求7所述的葫芦素族单体脂肪酸酯的衍生物的组合物，其特征在于所述的软胶囊剂或自乳化软胶囊剂，其溶剂可以是C6-C18的椰子油、玉米油、橄榄油、大豆油、红花油、海豹油、辛葵酸甘油酯或
类植物油或动物油、甘油三酸酯；或脂肪酸的衍生物；自乳化软胶囊剂中所采用的油为C8-C10的中链油，还含有乳化剂、助乳化剂；乳化剂包括磷脂、聚氧乙烯蓖麻油、HS15、维生素E聚乙二醇琥珀酸酯、DSPE-PEG、泊洛沙姆、吐温类、蔗糖脂肪酸酯类、椰子油C8/C10聚乙二醇甘油酯、杏仁油酸聚乙二醇甘油酯、聚氧乙烯(25)甘油三油酸酯、聚氧乙烯(20)山梨醇油酸酯、聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯类高HLB表面活性剂中的一种或几种混合物；助乳化剂为乙醇、丙二醇、聚乙二醇200-600、二甲基异山梨酯中的一种或几种混合物；还可以加入抗氧化剂，丁基羟基茴香醚(BHA)、二丁基羟基甲苯(BHT)、α-生育酚、α-醋酸生育酚、α-硫辛酸、维生素C棕榈酸酯中的一种或几种混合物。
全文摘要
本发明属于医药技术领域，提供了一类新的葫芦素族单体衍生物—葫芦素B、E、Q、I天然脂肪酸单脂，它是通过酰化或酯化反应将饱和/或不饱和的天然脂肪酸类物质通过形成酯键连接到葫芦素单体结构上制得的。本发明的抗癌药物组合物包含治疗有效量的葫芦素族单体衍生物和药学上可接受的载体。本发明中由于天然脂肪酸类物质能够作为体内能源物质被肿瘤细胞主动摄取，因此使连有天然脂肪结构的葫芦素单体(葫芦素B、E、Q、I)衍生物能够被肿瘤细胞摄取，并在体内酯酶的作用下酯键断裂而释药，从而实现药物的靶向性，使药物浓集于肿瘤细胞，并在正常组织分布大大减少，与葫芦素单体葫芦素B、E、Q、I相比，治疗指数增大而毒性却大大降低。
文档编号C07J9/00GK101538303SQ20071015916
公开日2009年9月23日 申请日期2007年12月25日 优先权日2007年12月25日
发明者邓意辉, 乐 李, 懿 卢, 莉 石 申请人:沈阳药科大学