一种高纯度白鹤灵芝素c的制备方法

文档序号:3511807阅读:328来源:国知局
专利名称:一种高纯度白鹤灵芝素c的制备方法
技术领域
本发明涉及一种高纯度白鹤灵芝素C的制备方法,尤其是涉及一种采用高速逆流色谱法制备高纯度白鹤灵芝素C的方法。
背景技术
白鹤灵芝素C (Rhinacanthin C)为萘醌类物质,黄色油状物,无明显熔点,分子式C25H3tlO5,分子量410. 51。现代药理研究表明其具有以下药理作用(1)细胞毒活性,对下述细胞株的 ED50 (微克 / 毫升)分别为 KB (6. 26), P388 (0. 26), A-549 (0. 35)、HT-29 (0.68)、HL-60 (0.68); (2)抗血小板聚集作用,本品100微克/毫升时100%抑制花生四烯酸(100 μ Μ)诱导的兔血小板聚集;75. 2%抑制胶原(10微克/毫升)诱导的兔血小板聚集;显著抑制人型和鼠型巨细胞病毒(CMV),ECm(微克/毫升)为0.02 (人型)和0.57 (鼠型),选择指数为28和4. 6。仏tm RhinacanthUS nasutus (L. ) Lindau,为爵床科白鹤灵芝属植物白鹤灵芝,多以干燥地上部分、枝叶入药。主产于广西、广东、云南等地深山,是苗疆秘传的珍贵药材,因其功效有如灵芝,又花白色,唇型,生在叶腋或枝顶,形成群展飞翔的白鹤,故名“白鹤灵芝”。其味甘,性温,具有润肺止咳、平喘祛痰、清热疏肝、利湿止痒、收敛止血等功效,用于治疗肺热燥咳、肺结核及受到风寒时所产生的咳嗽等症。现代临床研究显示,白鹤灵芝可治疗冠心病、高血压、糖尿病,还可对抗心绞痛,在改善心电图、血脂、改善甲皱微循环和眼底动脉硬化性改变等方面均有一定的疗效,且无明显副作用。目前对白鹤灵芝的研究主要集中在规范化种植(GAP)与质量控制技术方面,但对白鹤灵芝的有效成分和指标性成分方面的研究比较欠缺。经检索尚未见采用高速逆流色谱法纯化白鹤灵芝素C的方法。

发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺陷,提供一种高纯度白鹤灵芝素C的高效、 快速制备方法。本发明的目的是通过以下技术方案来实现的
取白鹤灵芝药材粉碎,加6-10倍80-90%甲醇超声提取2-3次,提取液回收试剂加硅藻土干燥,装柱,先用乙醇冲洗杂质,再加入至乙酸乙酯中回流提取,提取液浓缩后再用高速逆流色谱分离,根据图谱收集成分,浓缩干燥即得高纯度白鹤灵芝素C。所述高纯度白鹤灵芝素C的制备方法,其特征在于所述的高速逆流色谱分离的溶剂系统为石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水,混合比例为2-5:3-7:4-6:3,取上相上相做流动相,下相做固定相。本发明的积极效果在于采用高速逆流色谱法分离,是一种液液分配色谱,对分离的样品不产生死吸附,试剂用量少,而且可以回收再使用,单次制备量大,周期短,可连续制备。
下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施例。
具体实施例方式实施例1
将白鹤灵芝药材粉碎,取^ig,加10倍90%甲醇超声提取2次,每次1小时,提取液回收试剂加200g硅藻土拌勻,烘干,装柱,先用乙醇冲洗杂质至无黄酮成分,再将硅藻土倒入 500ml乙酸乙酯中回流提取2次,收集提取液减压浓缩,得浸膏。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、 水,按2:3:4:3在分液漏斗中混合,充分分层后,取下相注满高速逆流色谱螺旋管,转动主机,转速调节为700rpm,泵入上相做流动相,待动态平衡后,流速调节为2ml/min,用流动相溶解浸膏,由进样阀进样,根据图谱收集成分,回收试剂,浓缩干燥,得1. 4g白鹤灵芝素C, 经HPLC检测,含量95. 4%。实施例2:
将白鹤灵芝药材粉碎,取^ig,加6倍80%甲醇超声提取3次,每次1小时,提取液回收试剂加250g硅藻土拌勻,烘干,装柱,先用乙醇冲洗杂质至无黄酮成分,再将硅藻土倒入 500ml乙酸乙酯中回流提取2次,收集提取液减压浓缩,得浸膏。取乙酸乙酯、正丁醇、7jC,按 5:7:6:3在分液漏斗中混合,充分分层后,取下相注满高速逆流色谱螺旋管,转动主机,转速调节为900rpm,泵入上相做流动相,待动态平衡后,流速调节为2ml/min,同时用流动相溶解浸膏,由进样阀进样,根据图谱收集成分,回收试剂,浓缩干燥,得1. 6g白鹤灵芝素C,经 HPLC检测,含量98. 1%。
权利要求
1.一种高纯度白鹤灵芝素C的制备方法,其特征在于取白鹤灵芝药材粉碎,加6-10 倍80-90%甲醇超声提取2-3次,提取液回收试剂加硅藻土干燥,装柱,先用乙醇冲洗杂质, 再加入至乙酸乙酯中回流提取,提取液浓缩后再用高速逆流色谱分离,根据图谱收集成分, 浓缩干燥即得高纯度白鹤灵芝素C。
2.如权利要求1所述高纯度白鹤灵芝素C的制备方法,其特征在于所述的高速逆流色谱分离的溶剂系统为石油醚、乙酸乙酯、甲醇、水,混合比例为2-5:3-7:4-6:3,取上相上相做流动相,下相做固定相。
全文摘要
本发明公开了一种高纯度白鹤灵芝素C的制备方法。方法是取白鹤灵芝药材粉碎,加6-10倍80-90%甲醇超声提取2-3次,提取液回收试剂加硅藻土干燥,装柱,先用乙醇冲洗杂质,再加入至乙酸乙酯中回流提取,提取液浓缩后再用高速逆流色谱分离,根据图谱收集成分,真空干燥即得高纯度白鹤灵芝素C。采用本方法制备白鹤灵芝素C,效率高,周期短,收率高,产品纯度不低于95%。
文档编号C07D493/04GK102391277SQ20111030467
公开日2012年3月28日 申请日期2011年10月10日 优先权日2011年10月10日
发明者刘东锋, 吴艳波 申请人:南京泽朗医药科技有限公司
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