1-甲基-四氢-β-咔啉-3-甲酰RGD肽、其合成、纳米结构、抗血栓作用和应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了通式I代表的(1S,3S)-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β-咔啉-3-甲酰RGD肽(式中AA为Ser,Val或Phe),公开了它们的制备方法,公开了它们的纳米结构,公开了它们对凝血酶诱导的血小板聚集的高度选择性,公开了它们的强抗血栓活性以及它作为抗血栓剂的应用。
【专利说明】1-甲基-四氢-β -咔啉-3-甲酰RGD肽、其合成、纳米结构、抗血栓作用和应用
[0001]
【技术领域】
[0002]本发明涉及通式I代表的1-甲基-四氢-β -咔啉-3-甲酰RGD肽(式中AA为Ser, Val或Phe),涉及它们的制备方法，涉及它们的纳米结构，涉及它们对凝血酶诱导的血小板聚集的高度选择性，涉及它们的强抗血栓活性以及作为抗血栓剂的应用。本发明属于生物医药领域。
【权利要求】
1.通式I代表的(1S，3S)-1-甲基-1，2，3，4-四氢-β-咔啉-3-甲酰R⑶肽，特征在于咔啉的I位碳和3位碳都是S构型，肽链中的AA为Ser，Val或Phe。
2.制备权利要求1的(1S，3S)-1-甲基-1，2，3，4-四氢-β-咔啉-3-甲酰，特征在于咔啉的I位碳和3位碳都是S构型，肽链中的AA为Ser，Val或Phe，的方法，该方法由以下步骤构成: (1)在二环己基碳二亚胺(DCC)和N-羟基苯并三唑(HOBt)存在下采用液相法制备Boc-Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -OBzl, Boc-Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Val-OBzl和 Boc-Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Phe-OBzl;
(2)在氯化氢-乙酸乙酯溶液中将Boc-Arg(NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -OBzl, Boc-Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Val-OBzl 和 Boc-Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl) - Phe-OBzl 脱除Boc,生成 HCl *Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -OBzl, HCl *Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl)-Val-OBzl 和 HCl.Arg(NO2)-Gly-Asp (OBzl)- Phe-OBzl; (3)在稀硫酸中，室温下，L-Trp与乙醛反应12h直接生成(1S，3S)-1-甲基-1,2，3,4-四氢-β-咔啉-3-羧酸，并以无色固体的形态从反应液中沉淀析出； (4)将(1S，3S)-1-甲基-1，2，3，4-四氢-β -咔啉-3-羧酸的2位N用Boc保护生成(1S，3S)-1-甲基-2-Boc-l，2，3，4-四氢-β -咔啉-3-羧酸； (5)在DCC和HOBt存在下将(IS,3S)-1-甲基-2-Boc-l，2，3，4-四氢-β -咔啉-3-羧酸的 3-羧基与 HCl.Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -OBzl, HCl.Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Val-OBzl 或 HCl.Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl) - Phe-OBzl 偶联生成(IS, 3S)-1-甲基-2-Boc-l, 2，3，4-四氢-β -咔啉-3-甲酰-Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-OBzl, (IS, 3S)_1_ 甲基-2-Boc-l，2，3，4-四氢- β -咔啉-3-甲酰-Arg(NO2)-Gly-Asp (OBzl) -Val-OBzl, (IS, 3S)-1-甲基-2-Boc-l，2，3，4-四氢-β -咔啉-3-甲酰-Arg (NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Phe-OBzl; (6)在氯化氢-乙酸乙酯溶液中将(1S，3S)-1-甲基-2-Boc-l，2，3，4-四氢-β -咔啉-3-甲酰-Arg(NO2)-Gly-Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-OBzl, (1S，3S)-1-甲基-2-Boc-l, 2，3，4-四氢- β -咔啉-3-甲酰-Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl)-Val-OBzl 和(IS, 3S)-1-甲基-2-Boc-l, 2，3，4-四氢-β -咔啉-3-甲酰-Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl)-Phe-OBzl 脱除 Boc,生成(1S，3S)-1-甲基 _1，2，3，4-四氢-β -咔啉-3-甲酰-Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl)-Ser (Bzl)-OBzl, (IS, 3S)_1_ 甲基 _1，2，3，4-四氢-β -咔啉 _3_ 甲酰-Arg(NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Val-OBzl 和(IS, 3S)-1-甲基 _1，2，3，4-四氢-β -咔啉-3-甲酰-Arg(NO2) -Gly-Asp (OBzl) -Phe-OBzl; (7)在三氟乙酸中，在三氟甲磺酸存在下将(1S，3S)-1-甲基-1，2，3，4-四氢-β-咔啉-3-甲酰-Arg(NO2)-Gly- Asp (OBzl) -Ser (Bzl) -OBzl, (1S，3S)-1-甲基-1,2,3,4-四氢-β -咔啉-3-甲酰-Arg (NO2)-Gly-Asp (OBzl)-Val-OBzl 和(1S，3S)-1-甲基-1，2，3，4-四氢- β -咔啉-3-甲酰-Arg(NO2)-Gly-Asp(OBzI)-Phe-OBzI 脱保护基生成(1S，3S)-1-甲基-1,2，3，4-四氢-β-咔啉-3-甲酰-Arg-Gly-Asp-Ser, (1S，3S)-1-甲基-1，2，3，4-四氢-β -咔啉-3-甲酰-Arg-Gly-Asp-Val 和(IS, 3S)-1-甲基 _1，2，3，4-四氧-β -咔琳-3-甲酸-Arg-Gly-Asp-Phe。
3.权利要求1的(13，35)-1-甲基-1，2，3，4-四氢-0-咔啉-3-甲酰1?0肽，其咔啉的I位碳和3位碳都是S构型，其肽链中的AA为Ser，Val或Phe，在水溶液中生成的纳米球，特征在于在10_n 11时(15，35)-1-甲基-1，2，3，4-四氢-3-咔啉-3-甲酰-Arg-Gly-Asp-Ser 生成的纳米球的直径为 23 - 95 nm, (IS, 3S)_1_ 甲基-1, 2，3，4-四氢- β -咔啉-3-甲酰-Arg-Gly-Asp-Val生成的纳米球的直径为20 - 62 nm,(IS, 3S)-1-甲基-1，2，3，4-四氢-β -咔啉-3-甲酰-Arg-Gly-Asp-Phe生成的纳米球的直径为 50 - 82 nm。
4.权利要求1的(1S，3S)-1-甲基-1，2，3，4-四氢-β-咔啉-3-甲酰RGD肽，其咔啉的I位碳和3位碳都是S构型，其肽链中的AA为Ser，Val或Phe，的抗血小板聚集活性，特征在于高度选择性地抗凝血酶诱导的血小板聚集活性。
5.权利要求1的(1S，3S)-1-甲基-1，2，3，4-四氢-β-咔啉-3-甲酰RGD肽，其咔啉的I位碳和3位碳都是S构型，其肽链中的AA为Ser，Val或Phe，的抗血栓活性，特征在于有效剂量低达0.001 nmol/kg。
6.权利要求1的(1S，3S)-1-甲基-1，2，3，4-四氢-β-咔啉-3-甲酰RGD肽，其咔啉的I位碳和3位碳都是S构型，其肽链中的AA为Ser，Val或Phe，在制备抗血栓剂中的应用。
【文档编号】C07K7/06GK103539838SQ201210242877
【公开日】2014年1月29日 申请日期:2012年7月15日 优先权日:2012年7月15日
【发明者】彭师奇, 赵明, 彭莉 申请人:彭莉