专利名称：大花金鸡菊中查尔酮的提取方法及其新用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及化学与农业领域，具体来说是提供一种大花金鸡菊中查尔酮的提取方法及其用途。
背景技术：
大花金鸡菊((Sbreop1Si1S grandiflora Hogg.)又名剑叶波斯菊、狭叶金鸡菊和剑叶金鸡菊，是菊科金鸡菊属多年生宿根 草本植物，原产美洲，1938年作为观赏植物传入我国，是外来杂草之一。该草耐贫瘠，抗污染，繁殖力强，因此在我国许多地区大量种植，并逃逸为野生杂草，资源丰富。已有研究表明，该植物根茎叶的挥发油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、巨大芽孢杆菌等均具有的抑制作用(李希红，陈荣，纪付江.安徽农业科学，2009，37 (23) : 10996，10998.)，从该植物花中分离得到的KPY-78-菊黄色素被用于食品添加剂(李鸿英，陆长根，李秀华.植物学报.1981，23(6) :511-514.);而根、茎、叶三种器官的水浸提液能不同程度的抑制白菜pekinensis、$冗^ Y Daucus caroia、狗牙根dactylon、l股颖 Agros tis infirma、结缕草 Zoysia japonica、二月兰 Orychophragmus violaceus、石
Dianthus和鸡冠花cristata等植物的种子萌发及幼苗生长(曾建
军，杨丽英，孙敏·西南大学学报(自然科学版)，2009,31(6):88-91 ;郭荣群，赵宏，张柯，江征，杨振美，闻启.北方园艺，2010(4) :45-48;杜明利，高岩，张汝民，等.浙江农林大学学报，2011,28(1) :109-114.)。本发明人也发现大花金鸡菊的根、茎、叶、叶柄、花、萼片及种子粉末对生菜、反枝苋、黄瓜、苘麻、小麦和稗等受体植物幼苗的生长均具有很高的抑制活性(赵妹，罗小勇，仪铭，孟昭礼.安徽农业大学学报，2009,36(3) :369-372.)。在对大花金鸡菊花中有效成分的研究中，首次分离出2’，4’，4-三轻基-3’，3- 二甲氧基查尔酮(2〃，4’，4-Trihydroxy-3’，3-dimethoxychalcone),并首次发现其具有高除草活性，从而完成了本发明。尽管此前Calanasan等人已从膨蜞菊属植物Wedeliaasperrima中分离到该化合物(Calanasan CA,Macleod JK. Phytochemistry, 1998，47(6): 1093-1099)，但尚未见其生物活性的任何报道。而且，本发明中所述的提取分离方法，系采用活性追踪法一步步探索而成，它非常适合于大花金鸡菊中该物质的提取分离，提取分离的过程及方法不同于Calanasan等人的方法。
发明内容
本发明的目的之一在于从大花金鸡菊中分离出活性物质2’，4’，4_三羟基-3’，3-二甲氧基查尔酮。本发明的另外一个目的是提供所述化合物的提取方法。本发明的又一个目的是提供所述化合物的农药用途，更进一步的是提供该化合物的除草用途。
具体的，一种大花金鸡菊中查尔酮的提取方法，包括如下步骤
取大花金鸡菊植物干粉，用体积比90 - 95%乙醇浸泡提取2 — 5次，每次浸泡时间3 -7d，提取液合并后减压回收溶剂，得乙醇提取浸膏，将乙醇提取浸膏加入8 — 10倍重量蒸馏水混悬后，加入乙酸乙酯萃取3 — 5次，回收溶剂后得乙酸乙酯萃取物浸膏，取乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析，依次用体积比2:1和I: I的石油醚+氯仿，纯氯仿，100 :Γ1:5体积比的氯仿+甲醇以及纯甲醇进行梯度洗脱得到2’，4’，4-三羟基-3’，3- 二甲氧基查尔酮。优选的，植物干粉为大花金鸡菊植物花干粉。用浓度为95%乙醇提取3次，时间分别为3d、5d、7d，用乙酸乙酯萃取4次。
具体实施例方式本发明所述的化合物具有下列结构式
OH O
3 j n
HOOH
O、
CH3
该化合物是从大花金鸡菊的花根、茎、叶、叶柄、花、萼片及种子中分离出来的，优选是从大花金鸡菊的干花中提取。具体的，将植物大花金鸡菊干燥花的粗粉用90 - 95%乙醇提取，提取液减压回收溶剂，得乙醇提取浸膏；取浸膏加10倍量蒸馏水混悬后，加入乙酸乙酯萃取；回收溶剂后得乙酸乙酯萃取物；乙酸乙酯萃取物经硅胶柱层析，依次用石油醚+氯仿、纯氯仿、氯仿+甲醇及甲醇进行梯度洗脱得到本发明的活性物质。本发明所述化合物具有较强的抑制植物幼苗生长活性。具体来说本发明所分离的化合物对生菜、反枝苋、苘麻、小麦和稗等幼苗胚根和胚轴的生长具有很强的抑制作用，可用于直接开发植物源除草剂或作为先导化合物开发仿生除草剂。
通过实施例和实验例对本发明进行更详细的说明。实施例I化合物2’，4’，4-三羟基-3’，3_ 二甲氧基查尔酮的提取
大花金鸡菊干花粗粉5000g用95%乙醇浸泡提取3次，时间分别为3d、5d和7d。提取液合并后减压回收溶剂，得95%乙醇提取浸膏1140g。将95%乙醇提取浸膏1140g加入10倍量蒸馏水混悬后，加入乙酸乙酯萃取4次。回收溶剂后得乙酸乙酯萃取物浸膏172g。取乙酸乙酯萃取物40g经硅胶柱层析，依次用体积比2:1和I: I的石油醚+氯仿，纯氯仿，100: f 1:5体积比的氯仿+甲醇以及纯甲醇进行梯度洗脱得到2’，4’，4-三羟基-3’，3- 二甲氧基查尔酮，为橘黄色结晶。对上述分离的化合物2’，4’，4-三羟基-3’，3- 二甲氧基查尔酮的结构鉴定波谱数据见下表I。质谱测得的化合物分子量为317. O。表I化合物的1H和13C NMR数据(in DMS0)
权利要求
1.一种大花金鸡菊中查尔酮的提取方法，其特征在于包括如下步骤 取大花金鸡菊植物干粉，用体积比90 — 95%こ醇浸泡提取2 — 5次，每次时间3 — 7d，提取液合并后减压回收溶剂，得こ醇提取浸膏，将こ醇提取浸膏加入8 — 10倍重量蒸馏水混悬后，加入こ酸こ酯萃取3 — 5次，回收溶剂后得こ酸こ酯萃取物浸膏，取こ酸こ酯萃取物经硅胶柱层析，依次用体积比2:1和I: I的石油醚+氯仿，纯氯仿，100: f 1:5体积比的氯仿+甲醇以及纯甲醇进行梯度洗脱得到2’，4’，4-三羟基-3’，3- ニ甲氧基查尔酮。
2.如权利要求I所述的方法，其特征在于用浓度为95%こ醇提取3次，时间分别为3d、5d、7d，用こ酸こ酯萃取4次。
3.如权利要求I一 2任一所述的方法，其特征在于植物干粉为大花金鸡菊植物花干粉。
4.2’，4’，4-三羟基-3’，3- ニ甲氧基查尔酮的除草用途。
5.如权利要求4所述的用途，其特征在于所述的2’，4’，4-三羟基-3’，3-ニ甲氧基查尔酮是按权利要求I 一 3任一所述的方法提取的。
全文摘要
本发明涉及化学与农业领域，具体来说是提供一种大花金鸡菊中查尔酮的提取方法，包括取大花金鸡菊植物干粉，用乙醇、乙酸乙酯萃取，经硅胶柱色谱，依次用石油醚+氯仿、纯氯仿、氯仿+甲醇以及纯甲醇进行梯度洗脱得到2',4',4-三羟基-3',3-二甲氧基查尔酮。本发明进一步提供2',4',4-三羟基-3',3-二甲氧基查尔酮的除草新用途。
文档编号C07C49/84GK102766035SQ20121028365
公开日2012年11月7日 申请日期2012年8月10日 优先权日2012年8月10日
发明者罗小勇, 赵姝 申请人:青岛农业大学