查尔酮类化合物的抗肿瘤用图
【技术领域】
[0001] 本发明设及查尔酬类化合物的抗肿瘤用途。
【背景技术】
[0002] 肺癌是发病率和死亡率增长最快，对人群健康和生命威胁最大的恶性肿瘤之一。 在所有肺癌中，80 %W上为非小细胞肺癌。
[0003] 肺腺癌是非小细胞肺癌中主要的病理类型之一，较容易发生于女性及不抽烟者。 起源于支气管粘膜上皮，少数起源于大支气管的粘液腺。发病率比鱗癌和未分化癌低，发病 年龄较小，女性相对多见。多数腺癌起源于较小的支气管，为周围型肺癌。
[0004] 肺癌的病因至今尚不完全明确，吸烟、职业和环境接触、电离福射、既往肺部慢性 感染、遗传、大气污染等都被认为是发生肺癌的高危因素。
【发明内容】
[0005] 本发明提供了式（I)或式（II)所示查尔酬类化合物、或其顺式异构体、或其药 学上的盐在制备抗肿瘤药物中的用途：
[0006]
[0007] 其中，Ri~R12分别独立地选自氨、径基或甲氧基，且Ri。~R12不同时为甲氧基。
[0008] 优选地，在式（I)中，Ri选自氨，R2选自甲氧基，Rs选自氨，R4~Re分别独立地 选自氨、径基或甲氧基；在式（II)中，R,~Rg均选自甲氧基，Ri。~Ri2分别独立地选自氨、 径基或甲氧基，且Ri。~R12不同时为甲氧基。
[0009] 进一步优选地，在式（I)中，Ri选自氨，R2选自甲氧基，R3选自氨，R4选自氨、美圣 基或甲氧基，Rs选自径基，Re选自氨、径基或甲氧基；或者，Ri选自氨，R2选自甲氧基，Rs选 自氨，R4选自氨、径基或甲氧基，R5选自甲氧基，Re选自氨、径基或甲氧基。
[0010] 更进一步优选地，所述查尔酬类化合物为如下之一：
[0011]
[0012] 进一步地，所述抗肿瘤药物是治疗肺癌的药物；更进一步地，所述治疗肺癌的药物 是治疗非小细胞肺癌的药物；更进一步地，所述治疗非小细胞肺癌的药物是治疗肺腺癌的 药物。
[0013] 本发明还提供了一种药物组合物，它是W前述化合物、或其顺式异构体、或其药学 上可接受的盐为活性成分，加上药学上可接受的辅料制备而成的制剂。本发明还提供了前 述药物组合物在制备抗肿瘤药物中的用途。
[0014] 其中，所述抗肿瘤药物是治疗肺癌的药物；优选地，所述治疗肺癌的药物是治疗非 小细胞肺癌的药物；更优选地是治疗肺腺癌的药物。
[0015] 所述"前述化合物"包括式（I)或式（II)所示的查尔酬类化合物，也包括更具 体的化合物1-5中的任一种
[0016] 抗肿瘤活性试验证明，本发明的查尔酬类化合物，尤其是化合物1、2、3、4、5,能够 抑制肿瘤细胞增殖，尤其对肺癌，更具体的是非小细胞肺癌中的肺腺癌，疗效确切，具有良 好临床应用前景。
[0017] 显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离 本发明上述基本技术思想前提下，还可W做出其它多种形式的修改、替换或变更。
[0018]W下通过实施例形式的【具体实施方式】，对本发明的上述内容再作进一步的详细说 明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于W下的实例。凡基于本发明上述内容 所实现的技术均属于本发明的范围。
【具体实施方式】
[0019] 实施例1化合物1的合成、纯化、结构鉴定和药理活性测定
[0020] (1)实验材料： 阳02U ①试剂
[0022] 2' ,4'-二甲氧基苯乙酬（98%，100g，Alfa试剂公司）； 阳02；3] 4-径基苯甲醒（99%，25g，阿达玛斯试剂公司）；
[0024] 氨氧化钟（成都科龙化工试剂厂）；
[0025] 95 %乙醇（成都科龙化工试剂厂）；
[0026] 甲醇（成都科龙化工试剂厂）；
[0027]二氯甲烧（成都科龙化工试剂厂）；
[0028] 二甲基亚讽（DMSO)(成都科龙化工试剂厂）；
[0029] 二甲基亚讽（色谱级）（Sigma公司）；
[0030] 1640培养基、胎牛血清曲clone公司生产）；
[0031] 膜蛋白酶（Gibco公司）；
[0032] MTT(Amresco公司）；
[0033] 所用其它试剂均为分析纯。
[0034] ②实验仪器
[0035]HWCL-1恒溫磁力揽拌浴（郑州长城科工贸有限公司）；
[0036] WatersSynaptGzHDMS高分辨飞行时间质谱（美国Waters);
[0037] 化址er-AV-GOO核磁共振仪（瑞:t化址er);
[0038] BP211D十万分之一电子天平（瑞±Sartorius);
[0039] R-210旋转蒸发器（瑞±脚邸1);
[0040] DZG-6050型真空干燥箱（上海森信）；
[0041]酶标仪（Thermo3001，ThermoFisherScientific公司）；
[00创 电子天平（ESJ120-4型，沈阳龙腾电子称量仪器有限公司）；
[0043] 超净台（MCV-BieiFOO，日本SANYO公司）；
[0044] 显微镜（PrimoVert,AxioCamERc5s，ZEISS公司）；
[0045]C〇2培养箱（皿.CP-T，上海齐欣科学仪器有限公司）。 W46] ③细胞
[0047]肺癌细胞A549来源于美国ATCC公司。 |；0048] 似2 ' , 4 '-二甲氧基苯乙酬（3mmo；L)、4-径基苯甲醒（3mmo；L)、氨氧化钟 (15mmol)和20血95%乙醇，室溫揽拌她，加水泽灭，终止反应。将样品蒸干后分散于二氯 甲烧-水（1:1)中，用分液漏斗萃取3次，每次2〇1^，收集二氯甲烧层，浓缩。将样品上硅胶 柱色谱，W流动相二氯甲烧-甲醇（30 : 1)进行等度洗脱，结合薄层色谱对目标产物进行 追踪检测，合并含有目标产物的相同部分，回收溶剂，得到浓缩物。浓缩物再经制备薄层的 方法，W二氯甲烧：甲醇（20 : 1)为展开剂进行展开，刮板得到目标产物，采用二氯甲烧： 甲醇（3 : 1)洗脱，回收溶剂，得到化合物1(纯度99. 2%，产率：75%)。 W例 饼化合物的结构数据础NMR (600MHz，CDC!3)δ:7.73aH，d，J =9. OHz, H-6 ' )，7. 64 (IH, d, J = 16. 2Hz，H-3)，7. 47 ( 2H，d，J = 9.0Hz,H-2",6 ") ,7. 37 (IH, d, J= 16.2Hz,H-2),6.87(2H, d, J= 9. 0Hz，H-3"，5" )，6. 56(lH，dd，J = 9. 0,2. 4Hz，H-5' )，6. 50(lH，d，J = 2. 4Hz，H-3')，3. 89 (3H,s,OMe)，3. 87 (3H,s,OMe); (+)-ESIMS m/z 285.1[M+H]+，307.1[M+Na]\
[0050] (4)抗肿瘤活性试验
[0051] ①细胞接种
[0052] 用0.25%膜酶消化对数生长期的细胞。用含10%FBS的细胞培养基培养配成单 细胞悬液。采用细胞计数板计数，将状态良好的A549肿瘤细胞接种于96孔板，使细胞密度 为4X103个/mU每孔加入细胞悬液100 置于37°C，5%C〇2培养箱内培养2地。
[0053] ②药物处理
[0054] 每个样品从40μg/mL开始，用培养基梯度稀释样品，2倍稀释，设置5个药物浓度， 每个浓度做复孔测试。W浓度为40、20、10、5、2. 5μg/mL每孔加药100μ以每个浓度设3个 复孔，重复3次。阴性对照组为含有适量DMSO的培养基溶液，空白对照组为不含细胞的培 养基和溶媒。将96孔板放回培养箱，37°C作用72h。 阳〇5引③显色及ICs。的计算
[0056] 7化作用完毕后，避光条件下每孔加入MTT溶液巧g/L) 20μ以继续溫育培养地 后，弃掉上清液，每孔加入150μLDMS0,置于摇床上慢速振摇lOmin，使甲琐充分溶解后，用 酶标仪测量570nm波长处的0D值，按下列公式计算增殖抑制率。
[0057] 细胞抑制增值率％= [1-(0D给药组-0D空白组）/(00阴性组-0D空白组）]X100%
[005引不同浓度下的抑制率计算结果如表1所示：
[0059] 表1化合物1