专利名称：一种荧光素分子探针材料的制备方法与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及荧光传感检测技术中的分子探针合成及检测方法，尤其是一种具有荧光素母体结构的有机分子探针材料的制备和检测次氯酸/次氯酸根的方法。
背景技术：
由于传统工业和电子技术的快速发展，由其产生排放的各种污染离子和气体对环境和人类身体健康的危害越来越大，因而发展高选择性化学分子传感器对这些污染物的监控和检测尤为重要。荧光检测技术是使用分子荧光传感探针对这些污染物进行监控检测的一种高灵敏、快速响应方法。目前，荧光分析检测技术已广泛应用于环境监测、医药检测分析等领域。在过去几年中，分子荧光检测技术得到了快速发展，设计合成了用于环境监测和医药医学分析的大量分子荧光探针。次氯酸和次氯酸根是广泛存在的一种物质，在生命体系中，它们是细胞用来抵御病毒入侵的氧化剂；在日常生活中被广泛用于漂白和自来水的消毒剂。尽管该类物质存在广泛的用途，但他们对人类健康和环境也存在严重威胁。如果 在人体中存在过量的这类物质时，他们将通过氧化蛋白质、核酸而危害人体健康，导致心血管、神经衰退、动脉粥样硬化、关节炎和癌症等疾病。但是，人们对这类物质的生命代谢机制也还远未搞清楚。因此，发展用于高灵敏、高选择性检测痕量次氯酸和次氯酸根的探针对维护人类健康和环境保护是非常必要的。为探索次氯酸和次氯酸根的生物功能和对人体的负面效应，尽管经过人们不懈的努力，在过去几年中发展用于检测这类物质的荧光探针任然很少。只有少数几个探针对这类物质具有选择性检测作用。例如，Nagano等发现二氢荧光素和二氢罗丹明对这类物质具有识别功能，但和其它相关氧化剂有交叉响应，选择的专一性较差，而且探针的合成路线长，合成难度大。马会民研究员等发现N-苯酰基罗丹明B的肼衍生物可以选择性的检测次氯酸根，但探针的工作条件需要强碱性。因此，研究设计具有高选择性和高灵敏度检测次氯酸和次氯酸根这类物质的荧光探针也是非常必要的。
发明内容
本发明的目的在于针对上述存在问题，提供一种探针的制备方法简单易行，对次氯酸和次氯酸根这类物质检测的选择性高和灵敏度高的荧光探针的制备方法和检测方法。本发明的技术方案一种荧光素分子探针材料的制备方法，其步骤如下(I)、将反应物B和反应物C在溶剂无水乙醇中加热回流，然后蒸出乙醇，(2)、剩余物用石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂进行柱色谱分离得到探针材料，(3)、进一步用石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂重结晶即得到产品荧光素分子探针材料A。在上述步骤中反应物B结构式为
权利要求
1.一种荧光素分子探针材料的制备方法，其步骤如下 (1)、将反应物B和反应物C在溶剂无水乙醇中加热回流，然后蒸出乙醇， (2)、剩余物用石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂进行柱色谱分离得到探针材料， (3)、进一步用石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂重结晶即得到产品荧光素分子探针材料A； 在上述步骤中 反应物B结构式为
2.根据权利要求I所述的制备方法，所述的结构式中，要排除R1和R2同时为氢的结构式。
3.根据权利要求1、2所述的制备方法，在步骤(I)中 所述反应物的摩尔比B : C为1: 1 10 ;所述反应物B和C的总重量与溶剂无水乙醇的重量比为I : 30 100 ; 所述反应的加热温度为油浴温度100°C ;加热回流10 15小时，优选12小时。
4.根据权利要求1、2所述的制备方法，在步骤(2)中 所述剩余物进行探针材料柱层析分离纯化时需使用固体填料，所使用的固体填料为100-200目的硅胶；溶剂为石油醚和乙酸乙酯，石油醚和乙酸乙酯的体积比为5 3 I。
5.根据权利要求1、4所述的制备方法，在步骤(2)中所述的石油醚的沸点为60-90°C，所述的乙酸乙酯为分析纯。
6.根据权利要求1、2所述的制备方法，在步骤(3)中进一步重结晶探针所用溶剂为体积比为I : I的石油醚(沸点为60-90°C)和乙酸乙酯(分析纯)，探针和溶剂的重量比在 I : 30 50。
7.将权利要求1、2的方法制备的荧光素分子探针材料，用于对次氯酸和次氯酸根一类物质的检测的方法是将制备的分子探针材料配制成浓度为I X 10_2 5X 10_4摩尔/升的溶液，取适量的探针溶液加到检测对象中，使探针的浓度保持在1X10_5 1乂10_6摩尔/升，混合均匀之后静置45分钟，然后用480 505nm波长的光激化，测定溶液的发射光谱，根据标准曲线确定次氯酸和次氯酸根这类物质的含量。
全文摘要
本发明涉及荧光传感检测技术中的荧光素分子探针材料的制备方法及应用。其方法是将反应物B和反应物C在溶剂无水乙醇中加热回流，然后蒸出乙醇；剩余物用石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂进行柱色谱分离得到探针材料；进一步用石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂重结晶即得到产品。本成品可以用于对次氯酸和次氯酸根一类物质的检测。该类荧光素分子探针材料的核心为螺环内酰胺结构，在原始状态下是不发光的，本发明的探针材料选择性高、检测的灵敏度高，检测限可达到2×10-9摩尔/升的数量级；该类探针材料的制备方法简单易行、成本低；同时，由于这类荧光素分子探针材料具有一定的水溶性，因此可直接在水溶液中进行检测，且实用的pH值范围广，使其应用更加广泛。
文档编号C07D491/107GK102827176SQ20121033928
公开日2012年12月19日 申请日期2012年9月14日 优先权日2012年9月14日
发明者许文翰 申请人:天津市亚马逊科技发展有限公司