一种二氢噁唑类抗生素及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种二氢噁唑类抗生素，其化学分子式为C10H11NO3，其化学结构式如下式(I)所示：进一步地，本发明涉及制备该化合物的生物合成方法以及两种化学合成方法。进一步地，本发明还涉及该化合物抑制多种人畜病原细菌和农作物病原细菌的用途。该化合物是国内外未报道过的新化合物，具有全新的分子结构。其可以通过微生物发酵制备，也可以通过人工化学合成制备。
【专利说明】一种二氢噁唑类抗生素及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于抗生素领域，具体涉及一种抗生素及其制备方法。
技术背景
[0002]无论是医药工业还是农药工业都迫切需要筛选开发新型抗生素。日本的YukiInahashi 等人以及中国的 Weiming Zhu 等人分别从 Streptosporangium oxazolinicumK07-0460T和Nocardiopsis dassonvillei HR10-5 发酵产物中得到化合物(II) (R)_2_(邻羟基苯基)-4-羟甲基-4，5- 二氢噁唑，但是都不具有抗菌活性。2013年吴文君等人申请的国家发明专利“一种苯并氮氧杂卓类抗生素及其制造方法”(专利申请号201310028444.1)述及从雅加达链霉菌(Sereptomyces djakartensis)发酵产物中分离出一种抗生素2_轻甲基-3，4-二氢-1，4-苯并氮氧杂卓-5 (IH)酮(III);所述式(II)和式(III)化合物的
结构式如下:
[0003]
【权利要求】
1.一种二氢噁唑类抗生素，其特征在于:其化学分子式为CltlH11NO3，其化学结构式如下式⑴所示:
2.一种生物合成如权利要求1所述的二氢噁唑类抗生素的方法，其特征在于:所述方法包括如下步骤: 步骤一:发酵 (1)发酵菌种:发酵菌株是在中国山东半岛农药污染地区采集土样，在实验室分离培养获得，鉴定为雅加达链霉菌(Sereptomyces djakartensis);该菌株已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏日期为2012年11月13日，保藏登记号为CGMCCN0.6817 ； (2)斜面培养:采用淀粉酪素培养基于IXlO5帕下灭菌30min，接菌后28-32°C培养4-5d ;所述淀粉酪素培养基由如下组分组成:可溶性淀粉10.0g，磷酸氢二钾2.0g，硝酸钾2.0g,氯化钠2.0g,酪蛋白0.3g，7水硫酸镁0.05g,碳酸钙0.02g, 7水硫酸亚铁0.01g,琼脂20.0g,蒸馏水 1000ml，PH 值 7.2-7.4 ； (3)种子培养:将种子培养基分装于250ml三角瓶，每瓶20-100ml，于IX IO5帕下灭菌30min ;用无菌水将斜面上的孢子洗下制成孢子悬浮液，使其浓度为I X IO6-X IO7个/ml ；每瓶加0.5-2.0ml孢子悬浮液，置于转速为150-180r/min的摇床上，28_32°C培养24_36h ；所述种子培养基由如下组分组成:小米10_30g加蒸懼水1000ml煮沸15min后滤去米粒，加入葡萄糖15-30g，氯化钠2-5g，蛋白胨2-10g，碳酸钙0.2-0.8g，硫酸铵0.5-2.5g，PH值7.2-7.4 ； (4)液体发酵:将发酵培养基分装于250ml三角瓶，每瓶20-100ml，于IX IO5帕下灭菌30min ;接种步骤(3)的种子培养物，接种量10% (V/V)，置于转速为150_240r/min的摇床上，28-32°C培养4-6d ;所述发酵培养基为小米10-30g加蒸馏水1000ml煮沸15min后滤去米粒，加入葡萄糖15-30g，氯化钠2-5g，蛋白胨2-10g，碳酸钙0.5_2.5g，硫酸铵l_3g，PH值 7.2-7.4 ； 步骤二:抗生素的分离 (1)将步骤一制得的发酵液经100-200目筛网过滤后，用HH)大孔吸附树脂吸附，甲醇-水梯度洗脱； (2)将甲醇洗脱液浓缩后进行硅胶柱层析，以乙酸乙酯/甲醇(v/v)9: 1、8: 2、7: 3、6: 4和纯甲醇依次洗脱，收集以乙酸乙酯/甲醇(v/v)9: I的流分，浓缩后放置过夜，析出抗生素粗结晶； (3)将上述粗结晶用制备高效液相色谱纯化，得到式(I)所示的抗生素纯品。
3.一种化学合成如权利要求1所述的二氢噁唑类抗生素的方法，其特征在于:所述方法的化学反应式如下:
4.一种化学合成如权利要求1所述的二氢噁唑类抗生素的方法，其特征在于:所述方法的化学反应式如下:
5.根据权利要求1所述的二氢噁唑类抗生素用于抑制人畜病原细菌的用途，所述人畜病原细菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、粪肠球菌(E.faecalis)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)、猪链球菌(Swine streptococcal)、结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)、乳酸乳杆菌(Bacteriumlactis)、牛分枝杆菌(Mycobacterium boyis)、錯状芽抱杆菌(Bacillus cereus)、大肠埃氏菌(Escherichiacoil)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methici11 in-resistant Staphylococcus aureus，MRSA)。
6.根据权利要求5所述的用途，所述人畜病原细菌为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methici11 in-resistant Staphylococcus aureus，MRSA)。
7.根据权利要求1所述的二氢噁唑类抗生素用于抑制农作物病原细菌的用途，所述农作物病原细菌为白菜软腐病菌(Erwina carotovora)、稻白叶枯黄单胞杆菌(Xanthomanas oryzae pv.0ryzal(Ishiyama)Dye) Λ 棉角斑病菌(Xanthomonascampestris pv.malvacearum(E.F.Smith)Dowson) Λ 柑橘溃痕病菌(XanthomonasCampestris pv.citri)、柑橘黄梢病菌(Candidatus liberobacter asiaticus)、青枯假单胞杆菌(Pseudomonas solanacearum)、黄瓜角斑病病菌(Pseudomonas syringaepv.lachrymans)、马铃薯环腐病菌(Clavibactermichiganensissubsp.sepedonicus)、称猴桃溃痕病菌(Pseudomonas syringaePv.actinidiae)。
8.根据权利要求7所述的用途，所述农作物病原细菌为白菜软腐病菌(Erwinacarotovora)、水稻白叶枯病菌(Xanthomanas oryzaepv.0ryzal (Ishiyama) Dye)、称猴桃溃痕病菌(Pseudomonas syringae Pv.actinidiae)。
【文档编号】C07D263/14GK103923029SQ201410095161
【公开日】2014年7月16日 申请日期:2014年3月13日 优先权日:2014年3月13日
【发明者】吴文君, 张继文 申请人:吴文君, 张继文