专利名称：：从9a－氮杂大环内酯类衍生的新3,6－半缩酮类的制作方法
技术领域：
：本发明涉及从一类大环内酯抗菌素衍生的新化合物，特别是从9a-氮杂大环内酯(azalide)类衍生的新3，6-半缩酮类，它们与无机酸或有机酸形成的可药用酸加成盐，它们的制备方法，以及它们作为抗菌素或合成其它大环内酯抗菌素的中间体的用途。大环内酯抗菌素红霉素A被认为是治疗由革兰氏阳性菌或一些革兰氏阴性菌如Legionella，枝原体属，Chlamidia和卷旋杆菌属(Helicobacter)引起的呼吸系统和生殖系统感染的安全有效的药物已经有40多年了。口服给药后生物利用度发生显著变化，许多患者出现胃不适现象，以及在酸性介质中由于无活性的代谢无水红霉素的形成使活性丧失，上述是红霉素临床应用中的基本缺点。但是，通过C-9酮或羟基在C-6和／或C-12位的化学转变可以成功地抑制糖苷配基环的螺环化作用。这样，例如，通过C-9酮的肟化反应，然后进行Beckmann重排和还原反应，得到9-脱氧-9a-氮杂-9a-高红霉素A-第一个15员大环内酯抗菌素，其在糖苷配基环中带有9a-氨基，(Kobrehel，G．等人，US4，328，334；5／1982)。根据Eschweiler-Clark方法，通过9-胺的还原性甲基化反应，合成9-脱氧-9a-甲基-9a-氮杂-9a-高红霉素(阿齐霉素)-一种新型大环内酯抗菌素的原型，即氮杂大环内酯(Kobrehel，G．等人，BE892357；7／1982)。除具有包括革兰氏阴性菌在内的广谱抗菌性之外，阿齐霉素还具有长生物半衰期-抵达使用部位的特殊传输机理-和短治疗周期的特性。阿齐霉素很容易穿透并积累在人的吞噬细胞中，结果改善了对Legionella，Chlamidia和卷旋杆菌属的细胞内病原微生物的作用。另外，已知通过糖苷配基环C-6羟基的0-甲基化作用成功地抑制了红霉素AC-6／C-12的螺环化作用(Watanabe，Y．等人，US4，331，803；5／1982)。通过红霉素与苄氧羰基氯反应及随后对所得2’-0，3’-N-双(苄氧羰基)衍生物进行的甲基化反应，通过去掉保护基及3’-N-甲基化反应，除了形成6-0-甲基红霉素(克红霉素)外还形成了大量11-0-甲基红霉素和多取代的类似物(Morimoto，S．等人，《抗菌素杂志》(J．Antibiotics)，37187(1984))。关于红霉素A，克红霉素在酸性介质中更加稳定，而且对革兰氏阳性菌株表现出更好的体外活性(Kirst，H．A．等人，《抗菌剂和化疗剂》(AntimicrobialAgentandChemoter．)，1419(1989))。以类似的方式还可以合成一系列阿齐霉素的0-甲基衍生物(Kobrehel，G．等人，US5，250，518；10／1993)。虽然阿齐霉素的0-甲基化反应的主要产物11-0-甲基-阿齐霉素(实施例8)和6-0-甲基-阿齐霉素(实施例6)表现出显著的抗标准菌株活性，而且临床分离和药动学性质与阿齐霉素的相似，但是，由于0-甲基化反应的非选择性，大量获得产物表明还有其它技术问题存在。0-甲基衍生物结构的测定是建立在1H-1H和1H-13C2DNMR谱分析(300MHz)的基础上。然后，还要用远程NMR谱仪测定对已经被错误地归咎于阿齐霉素的C-6羟基上的取代作用而实际上是12-0-甲基-阿齐霉素问题。另外，已经发现，对4”-和11-位羟基使用适当保护基(尤其是甲硅烷基保护基如三甲基甲硅烷基)可以得到选择性0-甲基化反应，并且可以简化12-0-甲基阿齐霉素的制备(HR970051A；10／1997)。后来，Waddell，S．T．等人(《生物医药化学通讯》(Biorg．Med．Chem．Letters)，8549-555(1998))(与后来的专利申请无关)建立了C-12位羟基的0-甲基化反应。人们还知道，最近对14员大环内酯的研究使人们发现了一种新型大环内酯抗菌素，即酮内酯。已知的天然糖L-二脱氧甲基己糖即使在弱酸性介质也是不稳定的，而这些化合物在C-3位具有酮基(Agouridas，C．等人，EP596802A1，5／1994；LeMartret，O．，FR2697524A1，5／1994)。酮内酯在抵抗诱发耐生物体(引起抗药性)的MLS(大环内酯，林可酰胺(lincosamide)和链阳性菌素B)方面表现了很好的作用(Jamjian，C．，《抗生素化疗剂》(Antimicrob．AgentsChemother．)，41485(1997))。这个重要发现使几乎所有在C-11／C-12位被取代的大量克红霉素的3-酮衍生物都产生大量环状碳酸酯，氨基甲酸酯，以及最近出现的肼基甲酸酯。合成酮内酯的第一步是在形成相应的3-脱二脱氧甲基己糖基衍生物(3-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-0-甲基-α-L-核糖吡喃己糖基-氧)衍生物)条件下进行克红霉素水解，在除去2’-羟基保护之后(优选用氯化物或羧酸酐进行酰化)进行氧化反应和2’-位的脱保护反应。根据我们的知识，从9a-氮杂大环内酯抗菌素得到的C-11／C-12位取代的酮内酯迄今还没有文献论述。第一步，即9-脱氧-9a-氮杂-9a-高红霉素的3-脱二脱氧甲基己糖基衍生物与阿齐霉素的合成在US4，886，792，12／1989中有所描述。其通过将6-羟基跨环加合到新形成的C-3酮上来氧化3-脱二脱氧甲基己糖基-阿齐霉素及其11-0-甲基-和12-0-甲基-衍生物的C-3羟基，但其中没有描述由9a-氮杂大环内酯类得到了一系列至今还没有文献论述的双环和三环3，6-半缩酮类。阿齐霉素的3，6-半缩酮类及其0-甲基衍生物的合成反应包括制备相应的3-脱二脱氧甲基己糖基衍生物，通过选择性酰化反应对该碱性糖-D-脱氧糖胺的2’-羟基进行保护，C-3位羟基的氧化反应，2’-位的脱保护反应，及C-11和C-12羟基的环化反应。本发明的目的还包括阿齐霉素的3，6-半缩酮类及其0-甲基衍生物与有机酸和无机酸形成的可药用酸加成盐，制备方法和中间体，以及药物制剂和及应用方法。本发明涉及ⅰ)从9a-氮杂大环内酯类衍生的新3，6-半缩酮类，ⅱ)从9a-氮杂大环内酯类制备新3，6-半缩酮类的方法，ⅲ)从9a-氮杂大环内酯类衍生的新3，6-半缩酮类作为抗菌素或合成其它大环内酯抗菌素的中间体的用途。从9a-氮杂大环内酯类衍生的通式(Ⅰ)新3，6-半缩酮类及其与无机酸或有机酸形成的可药用加成盐，特征在于R1代表羟基，式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，其中R2代表氢或甲硅烷基，R3代表氢，或者与R6一起代表醚基，R4代表氢，(C1-C4)酰基或-COO-(CH2)n-Ar，其中n是1-7，及Ar代表未取代或取代的最多可达18个碳原子的芳基，R5代表氢，甲基或-COO-(CH2)n-Ar，其中n是1-7，及Ar代表未取代或取代的最多可达18个碳原子的芳基，R6代表氢，或者与R3一起代表醚基，R7代表氢，(C1-C12)烷基，甲硅烷基，或者与R8和C-11／C-12碳原子一起代表环状碳酸酯，R8代表氢，(C1-C12)烷基，甲硅烷基，或者与R7和C-11／C-12碳原子一起代表环状碳酸酯，制备步骤如下步骤1将通式(Ⅰ)的阿齐霉素，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2，R3，R4，R7和R8相同并都代表氢，R5是甲基及R6是羟基，与式(Ⅲ)的有机羧酰氯反应，-ClCOO-(CH2)n-Ar(Ⅲ)其中n是1-7，及Ar代表未取代或取代的最多可达18个碳原子的芳基，优选与苄氧羰基氯在碱，优选碳酸氢钠存在下，在对反应惰性的溶剂，优选苯或甲苯中反应，生成通式(Ⅰ)的2’-0，3’-N-双(苄氧羰基)-3’-N-脱甲基-阿齐霉素(Kobrehel，G．等人，US5，250，518；5／1993)，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2，R3，R7和R8相同并都代表氢，R4和R5相同并都代表苄氧羰基，及R6是羟基，然后在下列位置进行羟基的甲硅烷基化反应A／4”-和11-位与2-5等摩尔过量甲硅烷基化剂在有机惰性溶剂中在0-5℃反应5-8小时，生成新的通式(Ⅰ)4”-11-0-双(三甲基甲硅烷基)-2’-0，3’-N-双(苄氧羰基)-3’-N-脱甲基-阿齐霉素，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2和R7相同并都代表三甲基甲硅烷基，R3和R8相同并都代表氢，R4和R5相同并都代表苄氧羰基，及R6是羟基，或在B／4”-位与1．1-2等摩尔过量甲硅烷基化剂在有机惰性溶剂中在0-5℃反应1小时，生成新的通式(Ⅰ)4”-O-三甲基甲硅烷基-2’-0，3’-N-双(苄氧羰基)-3’-N-脱甲基-阿齐霉素，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2代表三甲基甲硅烷基，R3，R7和R8相同并都代表氢，R4和R5相同并都代表苄氧羰基，及R6是羟基。作为甲硅烷基化剂使用的有1，1，1，3，3，3-六甲基二甲硅氮烷，三甲基甲硅烷基氯，双(三甲基甲硅烷基)乙酰胺和能引入三甲基甲硅烷基的类似试剂，优选三甲基甲硅烷基氯和三甲基甲硅烷基咪唑的混合物。合适的溶剂包括吡啶，乙酸乙酯，N，N-二甲基甲酰胺，二氯甲烷等，优选吡啶。步骤2通过步骤1A／所得4”-11-0-双(三甲基甲硅烷基)-2’-0，3’-N-双(苄氧羰基)-3’-N-脱甲基-阿齐霉素，或步骤1B／所得4”-0-三甲基甲硅烷基-2’-0，3’-N-双(苄氧羰基)-3’-N-脱甲基-阿齐霉素分别与1．3-10摩尔相应的烷基化剂，优选甲基化剂，在1．1-8．5mol适当碱存在下，在-15℃至室温，优选0-5℃，在适当的对反应惰性的溶剂中进行以下反应A／选择性烷基化反应，优选C-12羟基的甲基化反应，生成新的通式(Ⅰ)4”-11-0-双(三甲基甲硅烷基)-2’-0，3’-N-双(苄氧羰基)-3’-N-脱甲基-12-0-甲基-阿齐霉素，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2和R7相同并都代表三甲基甲硅烷基，R3代表氢，R4和R5相同并都代表苄氧羰基，R6是羟基，及R8是甲基，或B／烷基化反应，优选C-11或C-12羟基的甲基化反应，生成新的通式(Ⅰ)4”-0-三甲基甲硅烷基-2’-0，3’-N-双(苄氧羰基)-3’-N-脱甲基-11-0-甲基-阿齐霉素，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2代表三甲基甲硅烷基，R3和R8相同并都代表氢，R4和R5相同并都代表苄氧羰基，R6是羟基，及R7是甲基，或通式(Ⅰ)4”-0-三甲基甲硅烷基-2’-0，3’-N-双(苄氧羰基)-3’-N-脱甲基-12-0-甲基-阿齐霉素，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2代表三甲基甲硅烷基，R3和R7相同并都代表氢，R4和R5相同并都代表苄氧羰基，R6是羟基，及R8是甲基的混合物。作为合适的烷基化剂使用的有(C1-C12)烷基卤化物，优选甲基碘，硫酸二甲酯，甲磺酸甲酯或对甲苯磺酸甲酯，更优选甲基碘。合适的碱包括碱金属氢化物(氢化锂，氢化钠或氢化钾)或碱金属甲基氨化物(氨化锂，氨化钠或氨化钾)，优选氢化钠。合适的对反应惰性的溶剂有二甲亚砜，N，N-二甲基甲酰胺，N，N-二甲基乙酰胺或六甲基磷酰三酰胺，优选N，N-二甲基甲酰胺，二甲亚砜，或它们与四氢呋喃的混合物。步骤3为了去除2’-和3’-位的保护基，根据Flynn，E．H．等人(《美国化学会志》(JournalofAmericanChemicalSociety)，773104(1950))所述方法，将步骤2A／所得4”-11-0-双(三甲基甲硅烷基)-2’-0，3’-N-双(苄氧羰基)-3’-N-脱甲基-12-0-甲基-阿齐霉素，或者步骤2B／所得4”-0-三甲基甲硅烷基-2’-0，3’-N-双(苄氧羰基)-3’-N-脱甲基-11-0-甲基-阿齐霉素和4”-0-三甲基甲硅烷基-2’-0，3’-N-双(苄氧羰基)-3’-N-脱甲基-12-0-甲基-阿齐霉素的混合物进行氢解反应，然后，采用常规方法，在低级醇，优选异丙醇中，在甲酸存在下在下列位置进行脱甲硅烷基化反应A／步骤2A／中的4”-和11-位反应，生成通式(Ⅰ)3’-N-脱甲基-12-0-甲基-阿齐霉素，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2，R3，R4，R5和R7相同并都代表氢，R6是羟基，及R8是甲基，或B／步骤2B／中的4”-位反应，生成通式(Ⅰ)3’-N-脱甲基-11-0-甲基-阿齐霉素，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2，R3，R4，R5和R8相同并都代表氢，R6是羟基，及R7是甲基，和3’-N-脱甲基-12-0-甲基-阿齐霉素，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2，R3，R4，R5和R8相同并都代表氢，R6是羟基，及R8是甲基，的混合物。氢解反应在低级醇，优选乙醇中，在含有催化剂如钯黑或活性炭的NaOAc／HOAc缓冲液(pH5)存在下，在1-20bar氢气压力和室温下进行。步骤4将步骤3A／所得3’-N-脱甲基-12-0-甲基-阿齐霉素，或者步骤3B／所得3’-N-脱甲基-11-0-甲基-阿齐霉素和3’-N-脱甲基-12-0-甲基-阿齐霉素的混合物用1-3当量甲醛(37％)在等量或两倍数量的甲酸(98-100％)和氢化催化剂或其它氢源存在下，在对反应惰性的溶剂如卤代烃，低级醇或低级酮，优选氯仿中，在反应混合物的回流温度下进行还原性3’-N-甲基化反应，得到在使用步骤3A／化合物的情况下通式(Ⅰ)12-0-甲基-阿齐霉素，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2，R3，R4和R7相同并都代表氢，R5和R8相同并都代表甲基，及R6是羟基，或在使用步骤3B／化合物的情况下通式(Ⅰ)11-0-甲基-阿齐霉素，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2，R3，R4和R8相同并都代表氢，R5和R7相同并都代表甲基，及R6是羟基，和12-0-甲基-阿齐霉素，其中R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7和R8与用步骤3A／所得化合物进行3’-N-甲基化反应的情况中定义相同的混合物。步骤5将步骤4所得通式(Ⅰ)阿齐霉素，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2，R3，R4，R7和R8相同并都代表氢，R5是甲基，及R6是羟基，或其11-0-甲基-和12-0-甲基-衍生物，与强酸，优选0．25-1．5N盐酸或二氯乙酸，在水和醇，优选甲醇，乙醇或异丙醇的混合物中，在室温下进行水解反应10-30小时，得到通式(Ⅰ)3-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-0-甲基-α-L-核糖吡喃己糖基-氧)-3-羟基(氧)-阿齐霉素，其中R1和R6相同并都代表羟基，R3，R4，R7和R8相同并都代表氢，及R5是甲基，或生成通式(Ⅰ)3-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-0-甲基-α-L-核糖吡喃己糖基-氧)-3-羟基(氧)-11-0-甲基-阿齐霉素，其中R1和R6相同并都代表羟基，R3，R4和R8相同并都代表氢，及R5和R7相并都代表甲基，或生成通式(Ⅰ)3-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-0-甲基-α-L-核糖吡喃己糖基-氧)-3-羟基(氧)-12-0-甲基-阿齐霉素，其中R1和R6相同并都代表羟基，R3，R4和R7相同并都代表氢，及R5和R8相同并都代表甲基。步骤6将步骤5所得通式(Ⅰ)3-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-0-甲基-α-L-核糖吡喃己糖基-氧)-3-羟基(氧)-阿齐霉素及其11-0-甲基-和12-0-甲基-衍生物进行2’-位羟基的选择性酰化反应。酰化反应是用最多可达4个碳原子的羧酸的氯化物或酸酐，优选乙酸酐，在无机碱或有机碱存在下，在对反应惰性的溶剂中，在0-30℃进行，生成通式(Ⅰ)3-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-0-甲基-α-L-核糖吡喃己糖基-氧)-3-羟基(氧)-阿齐霉素2’-0-乙酸酯，其中R1和R6相同并都代表羟基，R3，R7和R8相同并都代表氢，R4是乙酰基，及R5是甲基，或生成通式(Ⅰ)3-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-0-甲基-α-L-核糖吡喃己糖基-氧)-3-羟基(氧)-11-0-甲基-阿齐霉素2’-0-乙酸酯，其中R1和R6相同并都代表羟基，R3和R8相同并都代表氢，R4是乙酰基，及R5和R7相同并都代表甲基，或生成通式(Ⅰ)3-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-0-甲基-α-L-核糖吡喃己糖基-氧)-3-羟基(氧)-12-0-甲基-阿齐霉素2’-0-乙酸酯，其中R1和R6相同并都代表羟基，R3和R7相同并都代表氢，R4是乙酰基，及R5和R8相同并都代表甲基。可用的合适碱是碳酸氢钠，碳酸钠，碳酸钾，三乙胺，吡啶，三丁胺，优选碳酸氢钠。可用的合适的惰性溶剂是二氯甲烷，二氯乙烷，丙酮，吡啶，乙酸乙酯，四氢呋喃，优选二氯甲烷。步骤7根据改进的Moffat-Pfitzner方法[三氟乙酸吡啶的DMSO和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基-碳化二亚胺]，将步骤6所得通式(Ⅰ)3-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-0-甲基-α-L-核糖吡喃己糖基-氧)-3-羟基(氧)-阿齐霉素2’-0-乙酸酯及其11-0-甲基-和12-0-甲基-衍生物进行C-3位羟基的氧化反应，生成通式(Ⅰ)3-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-0-甲基-α-L-核糖吡喃己糖基-氧)-3-羟基(氧)-阿齐霉素3，6-半缩酮2’-0-乙酸酯，其中R1代表羟基，R3和R6一起代表醚基团，R4是乙酰基，R5是甲基，及R7和R8相同并都代表氢，或生成通式(Ⅰ)3-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-0-甲基-α-L-核糖吡喃己糖基-氧)-3-羟基(氧)-11-0-甲基-阿齐霉素3，6-半缩酮2’-0-乙酸酯，其中R1代表羟基，R3和R6一起代表醚基团，R4是乙酰基，R5和R7相同并都代表甲基，及R8是氢，或生成通式(Ⅰ)3-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-0-甲基-α-L-核糖吡喃己糖基-氧)-3-羟基(氧)-12-0-甲基-阿齐霉素3，6-半缩酮2’-0-乙酸酯，其中R1代表羟基，R3和R6一起代表醚基团，R4是乙酰基，R5和R8相同并都代表甲基，及R7是氢。步骤8将步骤7所得通式(Ⅰ)3-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-0-甲基-α-L-核糖吡喃己糖基-氧)-3-羟(氧)-阿齐霉素3，6-半缩酮2’-0-乙酸酯及其11-0-甲基-和12-0-甲基-衍生物在低级醇，优选甲醇中，在室温至溶剂回流温度进行溶剂分解反应，生成通式(Ⅰ)3-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-0-甲基-α-L-核糖吡喃己糖基-氧)-阿齐霉素3，6-半缩酮，其中R1代表羟基，R3和R6一起代表醚基团，R4，R7和R8相同并都代表氢，及R5是甲基，或生成通式(Ⅰ)3-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-0-甲基-α-L-核糖吡喃己糖基-氧)-11-0-甲基-阿齐霉素3，6-半缩酮，其中R1代表羟基，R3和R6一起代表醚基团，R4和R8相同并都代表氢，R5和R7相同并都代表甲基，或生成通式(Ⅰ)3-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-0-甲基-α-L-核糖吡喃己糖基-氧)-12-0-甲基-阿齐霉素3，6-半缩酮，其中R1代表羟基，R3和R6一起代表醚基团，R4和R7相同并都代表氢，R5和R8相同并都代表甲基。步骤9接着，任选将步骤8所得通式(Ⅰ)3-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-0-甲基-α-L-核糖吡喃己糖基-氧)-阿齐霉素3，6-半缩酮与碳酸1，2-亚乙酯在无机碱或有机碱，优选碳酸钾存在下，在对反应惰性的溶剂，优选乙酸乙酯中反应，生成通式(Ⅰ)3-脱(2，6-二脱氧-3-C-甲基-3-0-甲基-α-L-核糖吡喃己糖基-氧)-阿齐霉素3，6-半缩酮11，12环状碳酸酯，其中R1代表羟基，R3和R6一起代表醚基团，R4是氢，R5是甲基，及R7和R8与C-11和C-12碳原子一起代表环状碳酸酯。作为本发明另一目的的可药用加成盐可以通过通式(Ⅰ)新化合物与至少等摩尔的相应无机酸或有机酸在对反应惰性的溶剂中反应得到，所说无机酸和有机酸的实例有盐酸，氢碘酸，硫酸，磷酸，乙酸，丙酸，三氟乙酸，马来酸，柠檬酸，硬脂酸，琥珀酸，乙基琥珀酸，甲磺酸，苯磺酸，对甲苯磺酸，月桂基磺酸，以及类似的酸。如果这些加成盐在对反应惰性的溶剂中不溶解，则可以通过过滤，从非溶剂中沉淀或通过从溶剂中蒸发将其分离，最常用的是通过冻干。新的通式(Ⅰ)化合物及其与无机酸或有机酸形成的可药用加成盐在一系列标准微生物试验所表现的体外抗菌活性是根据NCCLS(临床实验室标准全国委员会)推荐的两倍稀释的常规方法在Mueller-Hinton培养基(Difco-Laboratories，Detroit，MI)中测定的。每种受试微生物被接种成最终接种物体积为5×105cfu／ml，并以厌氧方式在37℃培养18小时。液体培养基中的MIC被定义为抗菌素在微量容器中抑制可见生长的最低浓度。对比生物得自ATCC(TheAmericanTypeCultureCollection)。所有标准(物质)是用标准方法认定并被存放在-70℃。与阿齐霉素相比12-0-甲基-阿齐霉素对标准试验微生物和临床分离菌的结果示于表1和表2。通过测定以0．25-24小时的时间间隔给一组36只雄性鼠一次性口服20mg／kg剂量后12-0-甲基-阿齐霉素在血清中的浓度发现新的抗菌素很快被血清吸收。对(吸收)峰的分析结果表明存在(胆盐)肠肝循环。在0．5和1小时处浓度迅速下降，以后便重复性地增加。2小时后浓度达到最大(Cmax248．8ng／ml)。第二最大浓度是在4小时后达到。半衰期为5．2小时，整个AUC为1993．4hng／ml。表1与阿齐霉素相比12-0-甲基-阿齐霉素对标准菌株的体外抗菌活性<tablesid="table1"num="001"><table>MIC(mcg／ml)微生物阿齐霉素12-0-甲基-阿齐霉素金黄色葡萄球菌ATCC6538P金黄色葡萄球菌ATCC29213表皮葡萄球菌ATCC12228黄色微球菌ATCC10240藤黄微球菌ATCC9341粪链球菌ATCC8043枯草芽孢杆菌ATCC6633蜡状芽孢杆菌ATCC11778大肠埃希氏杆菌ATCC1053610．250．50．50．060．54110．250．250．30．120．030．2510．250．5</table></tables>表2与阿齐霉素相比12-0-甲基-阿齐霉素对一系列临床分离菌的体外抗菌活性<tablesid="table2"num="002"><table>微生物化合物MIC(μg／ml)(菌株编号)范围50％90％金黄色葡萄球菌(77)表皮葡萄球菌(20)肺炎链球菌(25)阿齐霉素12-O-甲基-阿齐霉素阿齐霉素12-0-甲基-阿齐霉素阿齐霉素12-0-甲基-阿齐霉素0．25-8140．12-20．2510．25-160．2580．12-80．2540．03-0．250．060．120．03-0．120．030．12</table></tables><tablesid="table3"num="003"><table>肠球菌属(Sp．)(35)流感嗜血杆菌(40)阿齐霉素12-0-甲基-阿齐霉素阿齐霉素12-0-甲基-阿齐霉素0．25-160．12-80．12-0．50．06-0．510．50．250．121680．50．25</table></tables>制备从9a-氮杂大环内酯类衍生的新的3，6-半缩酮类的方法用下列实施例加以说明，这些实施例不以任何方式限制本发明范围。制备例12’-0，3’-N-双(苄氧羰基)-3’-N-脱甲基-阿齐霉素A在阿齐霉素(17g，0．0227mol)的甲苯(170ml)溶液中加入NaHCO3(74．8g，0．890mol)，然后将反应混合物搅拌加热至回流温度(80-85℃)。搅拌的同时用1小时向反应悬浮液中滴加102ml50％苄氧羰基氯(104．04g，0．305mol)的甲苯。在同一温度搅拌反应混合物2小时，然后在室温放置过夜。过滤后用甲苯(85ml)漂洗沉淀物，然后用0．25NHCl(170ml)萃取甲苯溶液两次，1．5％NaCl水溶液(170ml)萃取两次。在甲苯中加水(340ml)(pH3．1)，用6NHCl将反应混合物的pH调至2．0。分离各相，在保持pH为2．0的情况下用水(340ml)萃取有机相三次。在合并的水萃取液中加CH2Cl2(125ml)，用NaOH水溶液(20％)将pH调至10。分离各相，水相再用CH2Cl2(125ml)萃取。合并的有机萃取液用K2CO3干燥，过滤并加压蒸发，得到16．5g粘稠油，任选在硅胶60柱(230-400目ASTM)上用低压色谱纯化。为此目的，将上述粗产物溶解于CH2Cl2(20ml)，并在0．5bar氮气下加到硅胶柱(50g)上。为了除去残余的氯甲酸苄酯及其分解产物，要将CH2Cl2(150ml)贯穿整个柱，用二氯甲烷／甲醇(9∶1，200ml)的溶剂系统洗脱，然后蒸发含有色谱相同的标题化合物的馏分，得到11．53gTLC纯的2’-0，3’-N-双(苄氧羰基)-N-脱甲基-阿齐霉素，其物理-化学常数如美国专利5，250，518(10／1993)所述。将产物溶解于乙醇(20ml)，加入pH5的NaOAc／HOAc缓冲液(0．17ml乙酸，0．263g乙酸钠，0．22ml乙醇和1ml水)和Pd／C10％(0．6g)。将反应混合物在5bar氢气反应釜中边搅拌边氢化5小时。滤除结晶，蒸发滤液至粘稠浆液。加入CH2Cl2(10ml)和水(15ml)，用2NHCl将混合物的pH调至4。分离各相，在用20％NaOH将水相pH调至9．5的基础上用CH2Cl2萃取(3×10ml)水相。合并的有机相用K2CO3干燥，过滤并蒸发。将所得沉淀溶解于异丙醇(10ml)，加入水(10ml)和几滴甲酸，然后在室温下搅拌30分钟。用pH9．5的乙酸异丙酯萃取，减压蒸发后得到0．43g具有下列物理-化学常数的标题产物IR(KBr)cm-13672，3496，2962，1727，1458，1375，1343，1280，1263，1118，1085，1048，1005，998。13CNMR(75MHz，CDCl3)δ177．4(C-1)，102．7(C-1′)，95．5(C-1″)，83．4(C-5)，79．7(C-12)，78．0(C-3)，76．6(C-11)，74．0(C-13)，73．9(C-6)，74．3(C-2′)，73．0(C-3″)，68．8(C-9)，65．7(C-5″)，60．1(C-3′)，61．2(C-10)，52．8(12-OCH3)，49．8(3″-OCH3)，45．5(C-2)，41．5(C-4)，33．1，3′-NCH3，36．8(9a-NCH3)，35．1(C-2″)，28．8(C-4′)，27．0(C-8)。EI-MSm/z748。将所得混合物溶解于乙醇(50ml)，加入pH5的NaOAc／HOAc缓冲液(0．51mlHOAc，0．789gNaOAc，0．66ml乙醇和3ml)和10％Pd／C(1．5g)，然后在5bar氢气的反应釜中搅拌8小时进行氢化。滤除催化剂，将滤液蒸发成粘稠的浆液。加水(50ml)和CHCl3(50ml)，通过pH4．0和pH9．5的梯度萃取分离产物。将合并的pH9．5的有机萃取液用K2CO3干燥，蒸发得到非晶状沉淀物。将沉淀物溶解于异丙醇(20ml)，加入水(20ml)和几滴甲酸，然后在室温下搅拌30分钟。用pH9．5的乙酸异丙酯萃取，硫酸钠干燥并减压蒸发。将所得产物溶解于CHCl3(50ml)，加入甲醛(37％，0．24ml)和甲酸(98-100％，0．22ml)。将反应混合物搅拌回流3小时，冷却到室温，倒入水(20ml)中，将pH调至4．0后分离各相，水相用CHCl3萃取两次以上。在水相中加入CHCl3，用2NNaOH将pH调至9．5。分离各相，水相用CHCl3萃取两次以上。将合并的pH9．5的有机萃取液用K2CO3干燥，蒸发得到1．25g沉淀物。将其在硅胶柱上进行色谱纯化，用二氯甲烷／甲醇／浓氨水(90∶9∶1)溶剂系统洗脱，得到0．40g色谱相同的11-0-甲基-阿齐霉素，其物理-化学常数在美国专利5，250，518(10／1993)中给出，和0．52g12-0-甲基-阿齐霉素，其物理-化学常数在实施例3中给出。权利要求1．通式(Ⅰ)化合物及其与无机酸或有机酸形成的可药用加成盐，特征在于R1分别代表羟基，式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，其中R2分别代表氢或甲硅烷基，R3分别代表氢，或者与R6一起代表醚基，R4分别代表氢，(C1-C4)酰基或-COO-(CH2)n-Ar，其中n是1-7，及Ar代表未取代或取代的最多可达18个碳原子的芳基，R5分别代表氢，甲基或-COO-(CH2)n-Ar，其中n是1-7，及Ar分别代表未取代或取代的最多可达18个碳原子的芳基，R6分别代表氢，或者与R3一起代表醚基，R7分别代表氢，(C1-C12)烷基，甲硅烷基，或者与R8和C-11／C-12碳原子一起代表环状碳酸酯，R8分别代表氢，(C1-C12)烷基，甲硅烷基，或者与R7和C-11／C-12碳原子一起代表环状碳酸酯。2．根据权利要求1的化合物，特征是R1代表L-二脱氧甲基己糖基，R2和R7相同并都代表三甲基甲硅烷基，R3和R8相同并都代表氢，R4和R5相同并都代表苄氧羰基，及R6代表羟基。3．根据权利要求1的化合物，特征是R1代表L-二脱氧甲基己糖基，R2代表三甲基甲硅烷基，R3，R7和R8相同并都代表氢，R4和R5相同并都代表苄氧羰基，及R6代表羟基。4．根据权利要求1的化合物，特征是R1代表L-二脱氧甲基己糖基，R2和R7相同并都代表三甲基甲硅烷基，R3代表氢，R4和R5相同并都代表苄氧羰基，R6代表羟基，及R8代表甲基。5．根据权利要求1的化合物，特征是R1代表L-二脱氧甲基己糖基，R2代表三甲基甲硅烷基，R3和R8相同并都代表氢，R4和R5相同并都代表苄氧羰基，R6代表羟基，及R7代表甲基。6．根据权利要求1的化合物，特征是R1代表L-二脱氧甲基己糖基，R2代表三甲基甲硅烷基，R3和R7相同并都代表氢，R4和R5相同并都代表苄氧羰基，R6代表羟基，及R8代表甲基。7．根据权利要求1的化合物，特征是R1代表L-二脱氧甲基己糖基，R2，R3，R4，R5和R7相同并都代表氢，R8代表甲基，及R6代表羟基。8．根据权利要求1的化合物，特征是R1代表L-二脱氧甲基己糖基，R2，R3，R4和R7相同并都代表氢，R5和R8相同并都代表甲基，及R6代表羟基。9．根据权利要求1的化合物，特征是R1和R6相同并都代表羟基，R3，R4和R8相同并都代表氢，及R5和R7相同并都代表甲基。10．根据权利要求1的化合物，特征是R1和R6相同并都代表羟基，R3，R4和R7相同并都代表氢，及R5和R8相同并都代表甲基。11．根据权利要求1的化合物，特征是R1和R6相同并都代表羟基，R3，R7和R8相同并都代表氢，R4代表乙酰基，及R5代表甲基。12．根据权利要求1的化合物，特征是R1和R6相同并都代表羟基，R3和R8相同并都代表氢，R4代表乙酰基，及R5和R7相同并都代表甲基。13．根据权利要求1的化合物，特征是R1和R6相同并都代表羟基，R3和R7相同并都代表氢，R4代表乙酰基，及R5和R8相同并都代表甲基。14．根据权利要求1的化合物，特征是R1代表羟基，R3与R6一起代表醚基，R4代表乙酰基，R5代表甲基，及R7和R8相同并都代表氢。15．根据权利要求1的化合物，特征是R1代表羟基，R3与R6一起代表醚基，R4代表乙酰基，R5和R7相同并都代表甲基，及R8代表氢。16．根据权利要求1的化合物，特征是R1代表羟基，R3与R6一起代表醚基，R4代表乙酰基，R5和R8相同并都代表甲基，及R7代表氢。17．根据权利要求1的化合物，特征是R1代表羟基，R3与R6一起代表醚基，R4，R7和R8相同并都代表氢，及R5代表甲基。18．根据权利要求1的化合物，特征是R1代表羟基，R3与R6一起代表醚基，R4和R8相同并都代表氢，及R5和R7相同并都代表甲基。19．根据权利要求1的化合物，特征是R1代表羟基，R3与R6一起代表醚基，R4和R7相同并都代表氢，及R5和R8相同并都代表甲基。20．根据权利要求1的化合物，特征是R1代表羟基，R3与R6一起代表醚基，R4代表氢，R5代表甲基。及R7和R8与C-11／C-12碳原子一起代表环状碳酸酯。21．通式(Ⅰ)化合物及其与无机酸或有机酸形成的可药用加成盐的制备方法，特中R1代表羟基，式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，其中R2分别代表氢或甲硅烷基，R3分别代表氢，或者与R6一起代表醚基，R4分别代表氢，(C1-C4)酰基或-COO-(CH2)n-Ar，其中n是1-7，及Ar分别代表未取代或取代的最多可达18个碳原子的芳基，R5分别代表氢，甲基或-COO-(CH2)n-Ar，其中n是1-7，及Ar分别代表未取代或取代的最多可达18个碳原子的芳基，R6分别代表氢，或者与R3一起代表醚基，R7分别代表氢，(C1-C12)烷基，甲硅烷基，或者与R8和C-11／C-12碳原子一起代表环状碳酸酯，R8分别代表氢，(C1-C12)烷基，甲硅烷基，或者与R7和C-11／C-12碳原子一起代表环状碳酸酯，特征在于(Ⅰ)将通式(Ⅰ)的阿齐霉素，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2，R3，R4，R7和R8相同并都代表氢，R5是甲基，及R6是羟基，与式(Ⅲ)的有机羧酰氯反应，-ClCOO-(CH2)n-Ar(Ⅲ)其中n是1-7，及Ar代表未取代或取代的最多可达18个碳原子的芳基，优选与苄氧羰基氯在碱，优选碳酸氢钠存在下，在对反应惰性的溶剂，优选苯或甲苯中反应，生成通式(Ⅰ)化合物，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2，R3，R7和R8相同并都代表氢，R4和R5相同并都代表苄氧羰基，及R6是羟基，然后在下列位置进行羟基的选择性甲硅烷基化反应A／4”-和11-位与2-5等摩尔过量甲硅烷基化剂，优选与三甲基甲硅烷基氯和三甲基甲硅烷基咪唑的混合物，在有机惰性溶剂如吡啶，乙酸乙酯，N，N-二甲基甲酰胺或二氯甲烷，优选吡啶中，在0-5℃反应5-8小时，生成通式(Ⅰ)化合物，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2和R7相同并都代表三甲基甲硅烷基，R3和R8相同并都代表氢，R4和R5相同并都代表苄氧羰基，及R6是羟基，或B／4”-位与1．1-2等摩尔过量甲硅烷基化剂，在有机惰性溶剂，优选吡啶中，在0-5℃反应1小时，生成通式(Ⅰ)化合物，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2代表三甲基甲硅烷基，R3，R7和R8相同并都代表氢，R4和R5相同并都代表苄氧羰基，及R6是羟基，然后，与1．3-10摩尔过量的相应的烷基化剂，优选甲基化剂，更优选甲基碘，在1．1-8．5mol适当的碱如碱金属氢化物，优选氢化钠存在下，在适当的对反应惰性的溶剂如二甲亚砜，四氢呋喃，N，N-二甲基甲酰胺或它们的混合物中，在-15℃至室温，优选在0-5℃，进行O-烷基化反应，生成A／通式(Ⅰ)化合物，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2和R7相同并都代表三甲基甲硅烷基，R3代表氢，R4和R5相同并都代表苄氧羰基，R6是羟基，及R8是甲基，或B／通式(Ⅰ)化合物，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2代表三甲基甲硅烷基，R3和R8相同并都代表氢，R4和R5相同并都代表苄氧羰基，R6是羟基，及R7是甲基，和通式(Ⅰ)化合物，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2代表三甲基甲硅烷基，R3和R7相同并都代表氢，R4和R5相同并都代表苄氧羰基，R6是羟基，及R8是甲基，的混合物，然后，在低级醇，优选乙醇中，在NaOAc／HOAc缓冲液(pH5)和催化剂存在下，在1-20bar氢气压下进行2’-和3’-位保护基的脱保护反应，分离后在低级醇，优选异丙醇中，在甲酸存在下，进行4”-和11-位的脱甲硅烷基化反应，生成A／通式(Ⅰ)化合物，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2，R3，R4，R5和R7相同并都代表氢，R6是羟基，及R8是甲基，或B／通式(Ⅰ)化合物，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2，R3，R4，R5和R8相同并都代表氢，R6是羟基，及R7是甲基，和通式(Ⅰ)化合物，其中R1，R2，R3，R4，R5，R7和R8与A／中脱保护反应所定义的相同，的混合物，然后，用1-3当量甲醛(37％)，在等量或两倍数量的甲酸(98-100％)和氢化催化剂或其它氢源存在下，在对反应惰性的溶剂，优选氯仿中，加热，优选在回流温度下，进行还原性3’-N-甲基化反应，得到A／通式(Ⅰ)化合物，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2，R3，R4和R7相同并都代表氢，R5和R8相同并都代表甲基，及R6是羟基，或B／通式(Ⅰ)化合物，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2，R3，R4和R8相同并都代表氢，R5和R7相同并都代表甲基，及R6是羟基，和通式(Ⅰ)化合物，其中R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7和R8与3’-N-甲基化反应的A／情况定义相同，的混合物，任选在硅胶柱上进行分离，得到色谱相同的通式(Ⅰ)化合物，其中R1代表式(Ⅱ)L-二脱氧甲基己糖基，R2，R3，R4和R8相同并都代表氢，R5和R7相同并都代表甲基，及R6是羟基(11-0-甲基-阿齐霉素)，和通式(Ⅰ)化合物，其中R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7和R8与3’-N-甲基化反应的A／情况定义相同(12-0-甲基-阿齐霉素)，或者(Ⅱ)任选将根据方法(Ⅰ)得到的阿齐霉素或其11-0-甲基-和12-0-甲基-衍生物用稀无机酸，优选用0．25N盐酸进行水解反应，得到通式(Ⅰ)化合物，其中R1和R6相同并都代表羟基，R3，R4，R7和R8相同并都代表氢，及R5是甲基，或通式(Ⅰ)化合物，其中R1和R6相同并都代表羟基，R3，R4和R8相同并都代表氢，及R5和R7相同并都代表甲基，或通式(Ⅰ)化合物，其中R1和R6相同并都代表羟基，R3，R4和R7相同并都代表氢，及R5和R8相同并都代表甲基，然后，用最多可达4个碳原子的羧酸的氯化物或酸酐，优选乙酸酐，在对反应惰性的有机溶剂，优选二氯甲烷中，进行2’-位羟基的选择性酰化反应，生成通式(Ⅰ)化合物，其中R1和R6相同并都代表羟基，R3，R7和R8相同并都代表氢，R4是乙酰基，及R5是甲基，或通式(Ⅰ)化合物，其中R1和R6相同并都代表羟基，R3和R8相同并都代表氢，R4是乙酰基，及R5和R7相同并都代表甲基，或通式(Ⅰ)化合物，其中R1和R6相同并都代表羟基，R3和R7相同并都代表氢，R4是乙酰基，及R5和R8相同并都代表甲基，然后，用Jones试剂或根据改进的Moffat-Pfitzner方法，优选用N，N-二甲氨基丙基-乙基-碳化二亚胺，在作为催化剂的二甲亚砜和三氟乙酸吡啶鎓存在下，在惰性有机溶剂，优选二氯甲烷中，在10℃至室温进行氧化反应，生成通式(Ⅰ)化合物，其中R1代表羟基，R3和R6一起代表醚基团，R4是乙酰基，R5是甲基，及R7和R8相同并都代表氢，或通式(Ⅰ)化合物，其中R1代表羟基，R3和R6一起代表醚基团，R4是乙酰基，R5和R7相同并都代表甲基，及R8是氢，或通式(Ⅰ)化合物，其中R1代表羟基，R3和R6一起代表醚基团，R4是乙酰基，R5和R8相同并都代表甲基，及R7是氢，然后，在低级醇，优选甲醇中，在室温下进行溶剂分解反应，完成2’-位的脱酰基化反应，生成通式(Ⅰ)化合物，其中R1代表羟基，R3和R6一起代表醚基团，R4，R7和R8相同并都代表氢，及R5是甲基，或通式(Ⅰ)化合物，其中R1代表羟基，R3和R6一起代表醚基团，R4和R8相同并都代表氢，R5和R7相同并都代表甲基，或通式(Ⅰ)化合物，其中R1代表羟基，R3和R6一起代表醚基团，R4和R7相同并都代表氢，R5和R8相同并都代表甲基，然后，任选将通式(Ⅰ)化合物与碳酸亚乙酯，在无机碱或有机碱，优选碳酸钾存在下，在对反应惰性的溶剂，优选乙酸乙酯中反应，生成通式(Ⅰ)化合物，其中R1代表羟基，R3和R6一起代表醚基团，R4是氢，R5是甲基，及R7和R8与C-11和C-12碳原子一起代表环状碳酸酯。22．用于治疗人和动物细菌感染的药物组合物，包括根据权利要求1的抗菌有效量的通式(Ⅰ)化合物或其可药用加成盐以及可药用载体。23．治疗人和动物细菌感染的方法，包括给人类和动物施用根据权利要求1的抗菌有效量的通式(Ⅰ)化合物或其与无机酸或有机酸形成的可药用加成盐以及可药用载体。全文摘要本发明涉及通式(Ⅰ)化合物,其中R文档编号C07H17/08GK1280585SQ98811624公开日2001年1月17日申请日期1998年10月13日优先权日1997年10月16日发明者G·克布雷赫尔,G·拉萨勒夫斯基,M·温科威克申请人:普利瓦药物工业公司