专利名称：一种制备紫菜多糖的方法
技术领域：
本发明涉及一种从海藻中制备有经济价值的物质的方法，特别是涉及一种制备紫菜多糖的方法。
背景技术：
紫菜多糖有多种生物学功能，目前，对其生物学活性方面正在展开大量的研究。发现紫菜多糖具有凝集素样作用，参与吞噬细胞的活化和生物防御作用；紫菜多糖的不同组份具有不同的作用，多糖PY3是一种免疫促进剂，而多糖PY2和PY4是一种免疫抑制剂，可用于临床免疫亢进的治疗；有免疫调节的作用。可降低高脂血症大鼠血清总胆固醇和甘油三酯的含量，并有预防高胆固醇引起的小鼠高胆固醇血症形成的作用，具有一定的降血脂功能。并且，具有抑制血栓形成的作用，不仅能延长纤维蛋白血栓形成时间及特异性血栓形成时间，还能使血栓长度、干质量和湿质量均出现明显降低，紫菜多糖可能对防治某些心血管病有重要意义。紫菜多糖不但具有以上作用，而且发现它具有抗肿瘤、抗病毒等方面的作用。曾有人发现紫菜多糖PY3与血癌细胞K562体外共同培养72小时，PY3浓度达160mg/L时，可明显抑制K562细胞的增殖；当培养96小时，PY3浓度为80mg/L时，显示出对K562细胞明显的抑制作用。但是，对于紫菜多糖的提取制备方法至今还没有人进行深入研究，只是采取了传统的多糖制备方法，没有针对性，使得进行系统化的药理筛选实验时紫菜多糖样品采集困难，造成不必要的人力、物力的浪费，为以后进一步研究、开发应用造成了一定的困难，利用传统提取多糖的方法用于紫菜多糖的提取中主要存在以下缺点，对去脂肪方法在其温度和时间上没有一定的标准，不好把握，在有机溶剂脱蛋白方法次数较多，有机溶剂用量大，且多糖的损失量较大，在制备多糖的方法直接用乙醇沉淀多糖，不进行脱色处理，使得多糖色素含量较高，影响其作为药物和保健品资源的使用，由于上述的原因，使得紫菜多糖的应用范围的进一步扩大受到阻碍。
发明内容
本发明的目的是要提供一种制备紫菜多糖的方法，它不但能有效地提高紫菜多糖的得率，降低色素含量，而且，还进一步扩大了紫菜多糖应用的范围。
为了达到上述的目的本发明的解决方案是本发明的一种制备紫菜多糖的方法，一、先取干净的紫菜，用打碎机打碎到3-5mm的颗粒，然后，化3小时，用索氏抽提法通过乙醇洄流去脂肪，乙醇可反复使用；二、按1∶50料液比加入水，使PH值为8，进行超声波破碎30min，接着先在温度为摄氏100度的恒温水浴锅内煮一次，取抽提液后再按1∶50料液比加入水继续再煮一次，取抽提液，后合并两次抽提液，在以转速为5000rpm的离心机上离心10min，去杂质，得抽提液，接着经旋转蒸发仪浓缩，浓缩到原体积的1/2；三、将浓缩液按5∶1加入氯仿与正丁醇的混合液中，氯仿与正丁醇之比例为3∶1，并在摇床以350rpm力度剧烈震荡30min，接着以转速为5000rpm的离心机上离心，10min后去沉淀，反复进行六次后取得上清液；四、在取得上清液后按固液比加入3.5％活性碳，调整pH至7.5，在温度为摄氏70度的水浴锅中脱色1小时，提取液再离心，离心机转速为5000rpm，30min后去活性碳，得上清液；五、取上清液由旋转蒸发仪浓缩到原体积的1/3，后加入4倍乙醇，以温度为摄氏4度，保存12小时，后离心分出多糖沉淀。
六、最后，将多糖沉淀用丙酮洗涤一次，后冷冻真空干燥，即得紫菜多糖。
由于本发明采用了一种创新的制备紫菜多糖的方法，因此，体现以下主要优点1、有机溶剂用量少，再去脂肪乙醇可以反复使用，脱蛋白次数少，大大减少了有机溶剂的用量；2、紫菜多糖的提取率高，达到了60％左右，与传统的17％相比，有了很大程度的提高，且最大程度保持了多糖分子活性；3、紫菜多糖的色素含量低，扩大了紫菜多糖的应用范围。
具体实施例方式下面将详细说明据依本发明提出的一种从紫菜中制备紫菜多糖的方法的细节。
本发明为一种制备紫菜多糖的方法，其实现步骤如下一、取10克来自江苏吕泗海区紫菜，洗净，在温度为摄氏70度环境下烘干，用打碎机打成3-5mm的颗粒状，再以索氏抽提法，进行3小时，通过乙醇洄流去脂肪；二、加入500ml蒸馏水，超声波破碎30min，接着在恒温水浴锅内以温度为摄氏100度的水中煮，后抽提液，再加入500ml蒸馏水煮，最后合并两次抽提液，接着离心10min，离心机转速为5000rpm，实现去杂质，所得抽提液经旋转蒸发仪浓缩，浓缩为原体积的1/2；三、浓缩液按5∶1加入氯仿与正丁醇的混合液中，氯仿与正丁醇之比例为3∶1，使用摇床，以350rpm力度剧烈震荡30min，再用离心机离心10min去沉淀，离心机转速为5000rpm，如此反复六次，取得上清液；四、取得上清液按固液比加入3.5％活性碳，调整pH为7.5，在温度为70度的水浴锅中脱色1小时，提取液离心30min去活性碳，得上清液，离心机转速为5000rpm；五、上清液再通过旋转蒸发仪浓缩，浓缩到原体积的1/3，后加入4倍乙醇并以温度为摄氏4度保存12小时，再以离心机转速为5000rpm离心，分出多糖沉淀；六、所得多糖沉淀用丙酮洗涤一次，冷冻真空干燥，得紫菜多糖。
权利要求
1.一种制备紫菜多糖的方法，其特征在于(1)、先取干净的紫菜，用打碎机打碎到3-5mm的颗粒，然后，用索氏抽提法，通过乙醇洄流去脂肪，进行3小时，乙醇可反复使用；(2)、按1∶50料液比加入水，在PH值为8的水中，使用超声波破碎30min，后在温度为摄氏100度的恒温水浴锅内，煮一次，提取抽提液，后再以1∶50料液比加入水，并在同样的条件下再煮一次，然后再提取抽提液，合并两次抽提液，以转速为5000rpm的离心机离心10min，去杂质，以得抽提液，接着经旋转蒸发仪浓缩为原体积的1/2；(3)、将浓缩液按5∶1加入氯仿与正丁醇的混合液中，氯仿与正丁醇之比例为3∶1，并在摇床以350rpm力度剧烈震荡30min，再以转速为5000rpm的离心机离心，10min后去沉淀，反复进行六次，取得上清液；(4)、在取得上清液中按固液比加入3.5％活性碳，调节pH为7.5，接着在温度为摄氏70度的水浴锅中脱色1小时，提取液再以5000rpm的的离心机离心，30min后去活性碳，得上清液；(5)、将上清液经旋转蒸发仪再浓缩到原体积的1/3，加入4倍乙醇，在温度为摄氏4度时，保存12小时，后离心分出多糖沉淀；(6)、最后，将多糖沉淀用丙酮洗涤一次，冷冻真空干燥，即得紫菜多糖。
2.根据权利要求1所述的一种制备紫菜多糖的方法，其特征在于在提取所得紫菜多糖中，去蛋白的方法比较温和，最大程度保持了紫菜多糖和活性，且紫菜多糖的最后得率为60％左右，色素去除率达到86％左右。
全文摘要
一种制备紫菜多糖的方法。现有的紫菜多糖的提取存在提取率低，色素含量高等问题。本发明的一种制备紫菜多糖的方法的主要特征是先取干净紫菜打碎，通过乙醇洄流去脂肪，接着在水料比为1∶50，pH值为8的水中，超声波破碎30min，再在温度为摄氏100度的恒温水浴锅内分别煮二次，合并二次提取液，接着离心去杂质，后浓缩为原体积的二分之一，浓缩液按5∶1加入有机溶液中，接着摇床以350rpm力度剧烈震荡30min，再以转速为5000rpm的离心机离心，10min后去沉淀，反复进行六次，取得上清液，将上清液经旋转蒸发仪再浓缩到原体积的1/3，加入4倍乙醇，在温度为摄氏4度时，保存12小时，后离心分出多糖沉淀，后用丙酮洗涤一次，冷冻真空干燥，即得紫菜多糖。
文档编号C08B37/00GK1872882SQ200510026279
公开日2006年12月6日 申请日期2005年5月30日 优先权日2005年5月30日
发明者何培民, 刘凤 申请人:上海水产大学