专利名称：一种提取双孢蘑菇多糖的方法
技术领域：
本发明涉及一种提取双孢蘑菇多糖的方法，属微生物化学大分子 化合物分离技术。
背景技术：
双孑包蘑蒜(Agaricus burnnescens peck),学名蘑兹，白蘑蒜或 洋菇，属真菌门、担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、蘑菇科；是一种食 药兼用的野生食用菌，具有高蛋白、低脂肪、氨基酸种类齐全的特点， 又有益脾、清心安神、助食、治痔的功效，还有调节人体新陈代谢， 增强人体体质的功效；双孢蘑菇中的糖类不仅是人体细胞的重要组份 及能源物质，而且还具有免疫、抗癌等多种生理功能。
中国专利申请号200810222270.1 />开了 "一种双孢蘑菇提取物 及其获得方法与应用"，它是将双孢蘑菇子实体与水按照1 : 3-5的体 积比混合匀浆后，于75-95。C, pH值为7-9的条件下提取1-6小时， 去除残渣，得到含有双孢蘑菇多糖的双孢蘑菇提取液。该方法提取双 孢蘑菇多糖的效率偏低，纯度不高。
发明内容
本发明的目的旨在提供一种提取双孢蘑菇多糖的方法，使双孢蘑 菇多糖提取效率和纯度均高，采用该方法既节能又环保。
为实现上述目的，本发明提取双孢蘑菇多糖的方法是双孢蘑菇 —打浆—调PH值—复合酶解—钝酶—微波处理—保温—过滤—离心 —减压浓缩—Sevage法去蛋白—醇沉—离心—膜过滤—树脂吸附— 解吸—真空浓缩—真空干燥—双孢蘑菇多糖；具体步骤如下
l.将双孢蘑菇破碎打浆成糊状，按双孢蘑菇比纯水为1 : 10的比 例配成浓液，在浓液中加入柠檬酸调节pH值至5. 5-5. 6;2. 在调节好pH值的浓液中加入纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶， 于45。C恒温条件下搅拌作用3小时，对浓液进行复合酶解，之后按 100。C瞬间钝酶处理；
3. 将复合酶解后的浓液置入微波仪中，进行3次间隙性;欽波处理；
4. 将微波处理后的液体置于55。C水浴中保温30分钟，用滤布挤 压过滤，再将滤渣用热蒸镏水洗涤后过滤，把两次过滤后的滤液合并；
5. 将滤液进行离心处理10分钟，把上清液置于600鹏Hg真空度 下减压浓缩至原体积的1/5;
6. 用Sevage法用氯仿戊醇=4: 1的比例混合后加入减压浓 缩后的物料中进行振摇，使物料中的蛋白质变性为不溶状态，然后用 离心法去除蛋白质；
7. 在去除蛋白质的物料中加入无水乙醇，使无水乙醇和物料混合 形成溶液，调至整个浓度含70°/。乙醇，在低温4。C下静置24小时，将 醇沉淀液进行离心分离IO分钟；
8. 控制物料在32-35。C范围内，操作压力为2. OMPa，选用分子膜 过滤，膜材料为截留分子量5万的超滤膜，得到粗制双孢蘑菇多糖；
9. 将已进行预处理的苯乙烯型树脂装入柱中，再将粗制的双孢蘑 菇多糖提取液上柱至接近饱和进行，吸附速度2BV/h;然后用无水乙 醇溶液进行解吸，洗脱速度lBV/h,得到解吸液；解吸液经过旋转蒸 发器真空浓缩至近干，最后放到6(TC真空干燥箱中干燥3小时，即得 到双孢蘑菇多糖。
本发明与现有技术相比具有双孢蘑菇多糖提取率高，提取纯度也 高的特点，工艺过程中无污染物排放，能源消耗低，工艺方法设计合 理。
具体实施例方式
称耳又双孢蘑菇500公斤，破碎打浆成糊状，用IO倍的纯水配成 浓液，再用柠檬酸调PH值至5. 5-5. 6;按每克双孢蘑菇添加纤维素酶 0. 2万U、半纤维素酶0. 1万U、果胶酶0. 4万U,于45。C恒温条件下 搅拌作用3小时，进行复合酶解，之后按10(TC瞬间钝酶处理；将复合酶解后的浓液置入微波仪中，进行3次间隙性微波处理，每次微波 处理时间为2秒，间歇时间为35秒，微波仪功率为500W;将微波处 理后的液体置于55。C水浴中保温30分钟，用滤布挤压过滤，滤渣用 热蒸馏水洗涤，合并滤液，将滤液进行离心分离10分钟，离心机的 转速为4800r/min，对巴离心分离后的上清液置于600mmHg真空度下减 压浓缩至原体积的1/5;用Sevage法，用氯仿戊醇=4: 1的比例混 合后加入物料中进行振摇，使物料中的蛋白质变性成不溶状态，然后 用离心法去除蛋白质；在去除蛋白质的物料中加入无水乙醇，使无水 乙醇和物料混合形成溶液，调至整个浓度含70%乙醇，在低温4。C下 静置24小时，将醇沉淀液进行离心分离10分钟，离心机的转速为 4800r/min;再控制物料在32-35。C范围内，操作压力为2. OMPa,选 用分子膜过滤，膜材料为截留分子量5万的超滤膜，得到粗制双孢蘑 菇多糖；将已进行预处理的苯乙烯型树脂装入柱中，将粗制的双孢蘑 菇多糖提取液上柱至接近饱和进行，吸附速度2BV/h,然后用无水乙 醇溶液进行解吸，洗脱速度lBV/h,得到解吸液，解吸液经过旋转蒸 发器真空浓缩至近干，最后放到60。C真空干燥箱中干燥3小时，即得 到双孢蘑菇多糖。
权利要求
1.一种提取双孢蘑菇多糖的方法，其特征在于(1)将双孢蘑菇破碎打浆成糊状，按双孢蘑菇比纯水为1∶10的比例配成浓液，在浓液中加入柠檬酸调节pH值至5.5-5.6；(2)在调节好pH值的浓液中加入纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶，于45℃恒温条件下搅拌作用3小时，对浓液进行复合酶解，之后按100℃瞬间钝酶处理；(3)将复合酶解后的浓液置入微波仪中，进行3次间隙性微波处理；(4)将微波处理后的液体置于55℃水浴中保温30分钟，用滤布挤压过滤，再将滤渣用热蒸馏水洗涤后过滤，把两次过滤后的滤液合并；(5)将滤液进行离心处理10分钟，把上清液置于600mmHg真空度下减压浓缩至原体积的1/5；(6)用Sevage法用氯仿∶戊醇＝4∶1的比例混合后加入减压浓缩后的物料中进行振摇，使物料中的蛋白质变性为不溶状态，然后用离心法去除蛋白质；(7)在去除蛋白质的物料中加入无水乙醇，使无水乙醇和物料混合形成溶液，调至整个浓度含70％乙醇，在低温4℃下静置24小时，将醇沉淀液进行离心分离10分钟；(8)控制物料在32-35℃范围内，操作压力为2.0MPa，选用分子膜过滤，膜材料为截留分子量5万的超滤膜，得到粗制双孢蘑菇多糖；(9)将已进行预处理的苯乙烯型树脂装入柱中，再将粗制的双孢蘑菇多糖提取液上柱至接近饱和进行，吸附速度2BV/h；然后用无水乙醇溶液进行解吸，洗脱速度1BV/h，得到解吸液；解吸液经过旋转蒸发器真空浓缩至近干，最后放到60℃真空干燥箱中干燥3小时，即得到双孢蘑菇多糖。
2. 根据权利要求1所述的提取双孢蘑菇多糖的方法，其特征在于按 每克双孢蘑菇添加纤维素酶0. 2万U、半纤维素酶0. 1万U、果胶酶,0. 4万U。
3.根据权利要求1所述的提取双孢蘑菇多糖的方法，其特征在于每 次微波处理时间为2秒，间歇时间为35秒，微波仪功率为500W。
全文摘要
本发明公开了一种提取双孢蘑菇多糖的方法，具体步骤如下双孢蘑菇→打浆→调pH值→复合酶解→钝酶→微波处理→保温→过滤→离心→减压浓缩→Sevage法去蛋白→醇沉→离心→膜过滤→树脂吸附→解吸→真空浓缩→真空干燥→双孢蘑菇多糖；本发明具有双孢蘑菇多糖提取率高，提取纯度也高的特点，工艺过程中无污染物排放，能源消耗低，工艺方法设计合理。
文档编号C08B37/00GK101613418SQ20091015117
公开日2009年12月30日 申请日期2009年7月22日 优先权日2009年7月22日
发明者林 柏 申请人:林 柏