专利名称：一种大黄多糖的提取纯化方法
技术领域：
本发明涉及一种以大黄为原料提取纯化大黄多糖的方法。
背景技术：
大黄可抑制基质金属蛋白酶，减少肾细胞外基质堆积，延缓肾小球硬化，治疗慢性肾功能衰竭。大黄多糖是从大黄中提取而得的一种水溶性多糖，是大黄重要功效物质之一，在慢性肾功能衰竭等疾病治疗方面具有广阔前景。因含色素等杂质，市面所售大黄多糖色泽较深。活性碳吸附法、过氧化氢等脱色除杂工艺方法或者除杂不彻底，或者脱色氧化过度影响多糖功效不具实用性
发明内容
本发明的目的在于提供一种能够提高大黄多糖提取物中大黄多糖纯度，有效脱去色素的方法。为了达到上述目的，本发明的技术方案为一种能够提高大黄多糖提取物中大黄多糖纯度，有效脱去色素的方法，其包括将经脱脂、乙醇溶液预处理的大黄原料加水进行水浴回流提取，然后将提取液浓缩，醇沉得大黄多糖粗提物，再用大孔吸附树脂脱色纯化。所述的加水进行水浴回流提取，所加的水的质量为经过预处理的大黄原料的4 8倍。所述的加水进行水浴回流提取的次数为2 4次，提取时间为每次I 5小时，每次提取完后将提取液趁热过滤。所述的预处理的大黄原料可由下列方法制得将大黄药材用石油醚￠0 90°C )按质量体积比为I : 4，在70 90°C恒温下水浴回流提取I 3小时，重复2 6次进行脱脂；将脱脂后的干燥物料用90% (V/V)乙醇，按质量体积比为I : 6，在70 90°C恒温下水浴回流提取I 2小时，重复2 4次，过滤，滤液弃之，减压干燥，挥干原料表面的溶剂。所述的将提取液浓缩，醇沉得大黄多糖粗提物包括下列步骤将提取液减压浓缩至原体积的1/6,冷却后加入8倍体积的无水乙醇,4 8°C静置过夜，以转速为3000 5000r/min离心20 40分钟，取沉淀即得大黄多糖粗取物。所述的用大孔树脂脱色纯化包括下列步骤将大黄多糖粗取物配制成4 8g/l的水溶液，以大黄多糖粗取物和HPD300大孔吸附树脂质量比按O. 05 I O. 2 I的比例混匀，置于往复振荡器上振摇3 6小时后过滤得多糖水溶液；再以HPD300大孔吸附树脂2 6倍干重的水冲洗大孔树脂，过滤。合并滤液和多糖水溶液，浓缩，减压干燥。本发明提供的大黄多糖提取方法是以经石油醚进行脱脂，乙醇溶液预处理的大黄原料用水提醇沉法来提取大黄多糖，并利用HPD300大孔吸附树脂将大黄多糖脱色纯化。该方法能够在不损害大黄多糖的结构和活性的前提下，除去大黄多糖中存在的大部分色素，提高大黄多糖的纯度。
具体实施例方式实施例一本发明提供的以大黄为原料提取纯化大黄多糖的方法可按照下列步骤顺序进行将除去杂质的大黄粉碎，用石油醚(60 90°C )按质量体积比为I : 4，在90°C恒温下水浴回流提取I小时，重复2次进行脱脂；将脱脂后的干燥物料用90% (V/V)乙醇，按质量体积比为I : 6，在90°C恒温下水浴回流提取I小时，重复3次，过滤，滤液弃之，减压干燥，挥干原料表面的溶剂得到经预处理的大黄原料；在上述经预处理的大黄原料中加入4倍质量的水，水浴回流提取4次，每次4小时并趁热过滤提取液；将提取液减压浓缩至原体积的1/6，冷却后加入8倍体积的无水乙醇，8°C静置过夜，以转速为5000r/min离心20分钟，取沉淀即得大黄多糖粗取物；将大黄多糖粗取物配制成8g/l的水溶液，以大黄多糖粗取物和即0300大孔吸附树脂质量比按0.05 I比例混匀，置于往复振荡器上振摇3小时后过滤得多糖水溶液；再以HPD300大孔吸附树脂2倍干重的水冲洗大孔树脂，过滤。合并滤液和多 糖水溶液，浓缩，减压干燥，得大黄多糖提取物。实施例二本发明提供的以大黄为原料提取纯化大黄多糖的方法可按照下列步骤顺序进行将除去杂质的大黄粉碎，用石油醚(60 90°C )按质量体积比为I : 4，在70°C恒温下水浴回流提取3小时，重复6次进行脱脂；将脱脂后的干燥物料用90% (V/V)乙醇，按质量体积比为I : 6，在70°C恒温下水浴回流提取I. 8小时，重复4次，过滤，滤液弃之，减压干燥，挥干原料表面的溶剂得到经预处理的大黄原料；在上述经预处理的大黄原料中加入8倍质量的水，水浴回流提取2次，每次5小时并趁热过滤提取液；将提取液减压浓缩至原体积的1/6，冷却后加入8倍体积的无水乙醇，4°C静置过夜，以转速为3000r/min离心40分钟，取沉淀即得大黄多糖粗取物；将大黄多糖粗取物配制成4g/l的水溶液，以大黄多糖粗取物和即0300大孔吸附树脂质量比按0.2 I比例混匀，置于往复振荡器上振摇6小时后过滤得多糖水溶液；再以HPD300大孔吸附树脂6倍干重的水冲洗大孔树脂，过滤。合并滤液和多糖水溶液，浓缩，减压干燥，得大黄多糖提取物。实施例三本发明提供的以大黄为原料提取纯化大黄多糖的方法可按照下列步骤顺序进行将除去杂质的大黄粉碎，用石油醚(60 90°C )按质量体积比为I : 4，在80°C恒温下水浴回流提取2小时，重复5次进行脱脂；将脱脂后的干燥物料用90% (V/V)乙醇，按质量体积比为I : 6，在75°C恒温下水浴回流提取2小时，重复3次，过滤，滤液弃之，减压干燥，挥干原料表面的溶剂得到经预处理的大黄原料；在上述经预处理的大黄原料中加入6倍质量的水，水浴回流提取4次，每次I小时并趁热过滤提取液；将提取液减压浓缩至原体积的1/6，冷却后加入8倍体积的无水乙醇，5°C静置过夜，以转速为4000r/min离心25分钟，取沉淀即得大黄多糖粗取物；将大黄多糖粗取物配制成6g/l的水溶液，以大黄多糖粗取物和即0300大孔吸附树脂质量比按0.08 I比例混匀，置于往复振荡器上振摇5小时后过滤得多糖水溶液；再以HPD300大孔吸附树脂5倍干重的水冲洗大孔树脂，过滤。合并滤液和多糖水溶液，浓缩，减压干燥，得大黄多糖提取物。实施例四
本发明提供的以大黄为原料提取纯化大黄多糖的方法可按照下列步骤顺序进行将除去杂质的大黄粉碎，用石油醚(60 90°C)按质量体积比为I : 4，在85°C恒温下水浴回流提取I. 5小时，重复3次进行脱脂；将脱脂后的干燥物料用90% (V/V)乙醇，按质量体积比为I : 6，在85°C恒温下水浴回流提取I. 5小时，重复2次，过滤，滤液弃之，减压干燥，挥干原料表面的溶剂得到经预处理的大黄原料；在上述经预处理的大黄原料中加入7倍质量的水，水浴回流提取3次，每次3小时并趁热过滤提取液；将提取液减压浓缩至原体积的1/6，冷却后加入8倍体积 的无水乙醇，6°C静置过夜，以转速为4000r/min离心30分钟，取沉淀即得大黄多糖粗取物；将大黄多糖粗取物配制成7g/l的水溶液，以大黄多糖粗取物和HPD300大孔吸附树脂质量比按O. I I比例混匀，置于往复振荡器上振摇4小时后过滤得多糖水溶液；再以HPD300大孔吸附树脂3倍干重的水冲洗大孔树脂，过滤。合并滤液和多糖水溶液，浓缩，减压干燥，得大黄多糖提取物。
权利要求
1.一种能够提高大黄多糖提取物中大黄多糖纯度，有效脱去色素的方法，其包括将经脱脂、乙醇溶液预处理的大黄原料加水进行水浴回流提取，然后将提取液浓缩，醇沉得大黄多糖粗提物，再用大孔吸附树脂脱色纯化。
2.如权利要求I所述的制备方法，其特征在于所述的加水进行水浴回流提取，所加的水质量为经过预处理的大黄原料的4 8倍。
3.如权利要求I所述的的制备方法，其特征在于所述的加水进行水浴回流提取的次数为2 4次，提取时间为每次I 5小时，每次提取完后将提取液趁热过滤。
4.如权利要求I所述的制备方法，其特征在于所述的预处理的大黄原料可由下列方法制得将大黄药材用石油醚(60 90°C )按质量体积比为I : 4，在70 90°C恒温下水浴回流提取I 3小时，重复2 6次进行脱脂；将脱脂后的干燥物料用90% (V/V)乙醇，按质量体积比为I : 6，在70 90°C恒温下水浴回流提取I 2小时，重复2 4次，过滤， 滤液弃之，减压干燥，挥干原料表面的溶剂。
5.如权利要求I所述的制备方法，其特征在于所述的将提取液浓缩，醇沉得大黄多糖粗提物包括下列步骤将提取液减压浓缩至原体积的1/6，冷却后加入8倍体积的无水乙醇，4 8°C静置过夜，以转速为3000 5000r/min离心20 40分钟，取沉淀即得大黄多糖粗取物。
6.如权利要求I所述的制备方法，其特征在于所述的用大孔树脂脱色纯化包括下列步骤将大黄多糖粗取物配制成4 8g/l的水溶液，以大黄多糖粗取物和HPD300大孔吸附树脂质量比按O. 05 I 0.2 I的比例混匀，置于往复振荡器上振摇3 6小时后过滤得多糖水溶液；再以HPD300大孔吸附树脂2 6倍干重的水冲洗大孔树脂，过滤。合并滤液和多糖水溶液，浓缩，减压干燥。
7.如权利要求I 6任一项所述的制备方法制得的大黄多糖提取物。
全文摘要
本发明公开了一种大黄多糖提取纯化方法，该制备方法包括将经脱脂、乙醇溶液预处理的大黄原料加水进行水浴回流提取，然后将提取液浓缩，醇沉得大黄多糖粗提物，再用大孔吸附树脂脱色纯化得大黄多糖提取物。本发明能够在不损害大黄多糖的结构和活性的前提下，除去大黄多糖中存在的大部分色素等杂质，提高大黄多糖的纯度。
文档编号C08B37/00GK102731669SQ20111009269
公开日2012年10月17日 申请日期2011年4月12日 优先权日2011年4月12日
发明者杨大玮, 谭智丽, 马麟 申请人:杨大玮, 谭智丽, 马麟