专利名称：降低三七多糖灰分含量的方法
技术领域：
:本发明属于生物产品提取去杂技术领域，具体地，涉及ー种降低三七多糖灰分的方法。
背景技术：
:三七是我国的著名中药材，除了直接作为中药材使用外，也是提取三七皂苷的原料来源，已形成大規模生产利用，以三七皂苷为原料生产的药品有三七皂苷片剂、胶囊、注射液、滴丸等，如血塞通、七立生、七生静等。提取三七皂苷后的三七原料还含有大量的三七多糖成分，三七多糖具有多种用途，可以用作保健品、药品、化妆品等，但三七多糖的生产目前还比较少，エ艺也比较简单，一般多采用水提醇沉的方法。关于三七多糖的应用文献和专利比较多，如崔秀明等对三七中三七多糖成分的含量变化进行了測定[中国药学杂志2002,37(11):818-820]，表明三七多糖含量与产地、采收时期有着密切的关系；王良贵等对三七提取液中皂甙与多糖的泡沫分离方法进行了研究[分析科学学报，2003,19(3):267-269];韦云川等提取三七皂苷后的三七残渣提取多糖进行了研究[文山师范高等专科学校学报，2006，19 (4):95-96];陈新霞等对三七多糖对小鼠免疫功能的影响进行了研究[江苏预防医学，2007，18(3):10-12];盛卸晃等采用阴离子树脂对三七多糖进行了分离纯化并对它们的理化性质进行了研究[中草药，2007，38 (7):987-989]；陈为等采用正交的方法对三七多糖水堤-醇沉エ艺进行了优化[吉林医药学院学报，2009，30 (I):15-17]，并对三七多糖成分、功能和应用进行了总结[2009，吉林医药学院学报，2009，30 (2):106-110]、翁艳英等采用内部沸腾法提取三七多糖进行了研究[时珍国医国药，2011，22 (60 =1435-1436] o但关于三七多糖生产エ艺的专利和文献比较少，且提取エ艺方法均比较简单，基本上没有考虑三七提取液中重金属和灰分的影响。中国专利申请号为200810233772.4， “含三七多糖化妆品的制备方法及用途”提供了ー种用水提取三七粗多糖的方法，但并没有考虑三七多糖含量和灰分；申请号为01108493.6 “三七多糖的提取分离方法”提供了一种三七多糖的提取方法，将提取三七皂苷后的废渣用水提取，然后用こ醇沉淀获得三七多糖，同样没有考虑三七中重金属和灰分、杂质的影响；申请号为201210058942.6 “ー种生理活型三七多糖的制备方法及其应用”提供了一种三七多糖的提取精制方法，取提取三七皂苷后的三七废渣用水提取、树脂吸附去杂，超滤后经活性炭脱色，干燥得三七多糖，但所得三七多糖灰分含量在12%以上，同样难以到药品、食品及化妆品原料的生产和应用要求，且提取液经树脂柱吸附去杂由于水提取液中含有大量的蛋白质及无机杂质和重金属，树脂柱再生和活化比较困难，超滤膜清洗也比较麻烦，很容易造成滤膜堵塞，活性炭可以吸附三七多糖，降低三七多糖的得率。上述现有技术提取的三七多糖含量一般都在20-30%之间，重金属灰分也同样高达20-30%，很难达到药品、保健品和化妆品的要求
发明内容
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本发明的目的在于针对现有技术存在的上述不足，提供一种降低三七多糖灰分含量，提高三七多糖得率和纯度的有效方法。采用本发明的方法，可使三七多糖灰分降低到1%以下；能极大地降低三七多糖灰分的含量，有利于降低灰分和重金属含量，提高产品的质量；能极大降低重金属等灰分的含量，防止离子交换树脂中毒，降低离子交换树脂的压力，提闻尚子交换树脂的效率。本发明的上述目的是通过下面的技术方案加以实现的:降低三七多糖灰分含量的方法，取三七提取皂苷后的残渣，加入3-20倍重量的水加热到60-100° C，提取3次，毎次30分钟至3小吋，合并提取液，冷却澄清，离心过滤，离心滤液30-70° C真空浓缩至3-10mL提取液/Ig原料或不浓缩直接搅拌加入体积1_10%的澄清剂，冷却放置澄清2-48小时，离心过滤，滤液直接加入阳离子交换树脂柱，并用水洗涤，直至洗脱液无多糖为止，洗脱液于30-70° C真空浓缩至1-1OmL提取液/Ig原料或不浓缩直接搅拌加入1-10倍体积量的70%-95%高浓度有机溶剂，将溶液的有机溶剂浓度控制在40%以上，冷却放置2-20小时，过滤，并用有机溶剂洗涤，30-80° C干燥，即得三七多糖灰分含量在1%以下的三七多糖。所述的降低三七多糖灰分含量的方法中，水为蒸馏水或去离子水。所述的降低三七多糖灰分含量的方法中，澄清剂为包括但不限于101澄清剂、KBT-YSC, KBT-GZC, ZTC1+1 澄清剂、壳聚糖、明胶、单宁、KBT-FJC, KBT-HJC, PVPP, HD003、SX-865、XM-118、NCA、KJ-1、DHG、BD、CTS、CZ-1、HD003、JH、KJ、NVP、PF-11、G409、科阳 1+1、汉威斯特、JA、GZB、卡拉胶、硼润土、药圣1+1、XYZ1+1、VA\VB、KOLORFINE、鱼胶、阳离子聚丙烯酰胺中的任意ー种或ニ种。所述的降低三七多糖灰分含量的方法中，离子交換树脂为包括但不限于DOOl大孔强酸性苯こ烯阳离子交换树脂、D113大孔弱酸性丙烯酸阳离子交换树脂、110/111弱酸性丙烯酸阳离子交换树脂、D151/152弱酸性大孔丙烯酸阳离子交换树脂、122弱酸性酚醛阳离子交换树脂、002SC强酸性苯こ烯阳离子交换树脂、JK008均孔强酸性苯こ烯阳离子交换树脂、001X8强酸性苯こ烯阳离子交换树脂、001X12强酸性苯こ烯阳离子交换树脂、724弱酸性丙烯酸系阳离子交换树脂、001X7(732)强酸性苯こ烯系阳离子交换树脂、001X4(734)强酸性苯こ烯系阳离子交换树脂中的任意ー种或ニ种。所述的降低三七多糖灰分含量的方法中，有机溶剂为包括但不限于酒精、甲醇、丙酮能与水混溶的溶剂任意I种或2-3种的混合溶剤。与现有技术相比，本发明的上述方法具有如下的优益性:1、使用本发明的降低三七多糖灰分含量的方法，使三七多糖灰分降低到1%以下；2、采用澄清剂与阳离子交换相结合的方法可以极大地降低三七多糖灰分的含量，有利于降低灰分和重金属含量，提高产品的质量；3、经过阳离子交换树脂前先利用澄清剂进行澄清，可以极大降低重金属等灰分的含量，防止离子交换树脂中毒，降低离子交换树脂的压力，提高离子交换树脂的效率。4、本发明由于采用了浓缩步骤，降低和节约有机溶剂和澄清剂的用量，故此降低了生产成本。
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图1是降低三七多糖灰分含量的方法的流程图。
具体实施方式
:下面用本发明的实施例子来进ー步说明本发明的实质性内容，但并不以此来限定本发明。实施例1:称取IOOg提取三七皂苷后干燥的三七残渣，加入IOOOmL蒸馏水浸泡6小时，加热到100° C提取2小吋，过滤，收集滤液，滤渣再加入700mL蒸馏水加热到100° C提取2小时，过滤，收集滤液与第一次提取滤液合并，滤渣再加入600mL蒸馏水加热到100° C提取2小时，过滤，收集滤液与前二次提取滤液合并，滤液冷却离心过滤得提取液，提取液加热至50° C减压真空浓缩至600mL，加热至60° C搅拌加入体积2%体积的配制好的ZTC澄清齐U，放置澄清12小吋，再离心过滤得离心澄清液，离心澄清液加入732型阳离子交换树脂柱上，并用水洗涤至无糖反应，收集水洗脱液离心过滤得去离子离心过滤液，去离子离心过滤液加热至60° C减压真空浓缩至200mL，冷却至室温搅拌加入500mL95%的こ醇溶液，放置沉淀6小吋，过滤，并用100mL95%的こ醇洗涤，滤液回收こ醇，过滤沉淀于50° C真空干燥，得三七多糖7g，高温灰化法測定灰分含量0.89%，硫酸-蒽酮法法測定多糖含量73.2%.
实施例2:称取提取三七皂苷后的三七残渣原料100g，用IOOOmL蒸馏水溶液浸泡12小时，加热到92° C提取2小时，2层纱布过滤，收集滤液，滤渣再加入IOOOmL同样加热至92° C提取1.5小时，纱布过滤，滤液并入第一次的提取液，滤渣再加入800mL蒸馏水加热至92° C提取I小时，纱布过滤，滤液并入前面的提取液，滤渣弃去。提取液放置冷却，离心过滤，得过滤提取液3000mL，加热至70° C，搅拌加入体积8%的101果汁澄清剂溶液，保温搅拌30min，自然冷却，放置澄清12小时，离心过滤，收集离心澄清液，加入734型阳离子交换树脂柱上，并用水洗涤至无糖反应，收集水洗脱液离心过滤得去离子离心过滤液，去离子离心过滤液加热至60° C减压真空浓缩至200mL，冷却至室温搅拌加入500mL95%的こ醇溶液，放置沉淀6小吋，过滤，并用100mL95%的こ醇洗涤，滤液回收こ醇，过滤沉淀于50° C真空干燥，得三七多糖7.3g，高温灰化法測定灰分含量0.78%，硫酸-蒽酮法法測定多糖含量 78.0%。实施例3:称取提取三七皂苷后的原料IOOg加入2000mL蒸馏水浸泡24小时，加热至92° C提取3小时，乘热2层纱布过滤，收集滤液，滤渣加入1500mL蒸馏水加热至92° C提取2小时，乘热2层纱布过滤，滤液与第一次提取液合并，滤渣再加入IOOOmL蒸馏水加热至92° C提取I小吋，2层纱布过滤，滤液与前面两次的提取液合井，滤渣弃去。提取液加热至60° C，减压至-0.08MPa收至500mL，加热至60° C，搅拌加入5g壳聚糖粉末，保温搅拌30分钟，放置冷却10小时，离心过滤，离心过滤澄清液加入DOOl阳离子树脂柱上，蒸馏水洗脱，收集洗脱溶液，减压回收水至200mL，搅拌加入400mL95%こ醇，放置沉淀12小吋，过滤，滤渣于60° C干燥得三七多糖6.Sg,高温灰化法測定灰分含量0.67%，硫酸-蒽酮法法測定多糖含量76.1%.
实施例4:
称取提取三七皂苷后的原料IOOOg加入IOOOOmL蒸馏水浸泡10小时，加热至90° C提取2小时，过滤，收集滤液，滤渣再加入6000mL蒸馏水加热至90° C提取1.5小吋，过滤，滤液与第一次提取液合井，滤渣再加入得5000mL蒸馏水加热至90° C提取I小时，过滤，滤液与前二次提取液合并，滤渣弃去。提取液冷却再离心过滤一次，离心过滤，滤液减压浓缩到6000mL，加热到60° C，搅拌加入体积5%的ZTC澄清剂溶液，保温搅拌30min，室温放置澄清24小时，离心过滤，离心过滤液加入732型阳离子交换树脂柱上，蒸馏水洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂至2000mL，搅拌加入4000mL95%的こ醇，放置沉淀6小吋，过滤，并用70%和95%的こ醇洗涤滤渣，滤渣于50° C真空干燥箱干燥，得三七多糖72.5g,高温灰化法測定灰分含量0.73%，硫酸-蒽酮法法測定多糖含量75.6%.
实施例5:称取提取三七皂苷后的原料IOOOg加入12000mL蒸馏水浸泡10小时，加热至80° C提取2小时，过滤，收集滤液，滤渣再加入8000mL蒸馏水加热至90° C提取I小时，过滤，滤液与第一次提取液合并，滤渣再加入得6000mL蒸馏水加热至90° C提取I小时，过滤，滤液与前二次提取液合并，滤渣弃去。提取液冷却再离心过滤一次，离心过滤，离心过滤液加热到60° C，搅拌加入体积量4%的ZTC澄清剂溶液，保温搅拌30min，室温放置澄清20小时，离心过滤，离心过滤液加入732型阳离子交换树脂柱上，蒸馏水洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂至2000mL，喷雾干燥得三七多糖79g，高温灰化法測定灰分含量0.79%，硫酸-蒽酮法法測定多糖含量 72.3%。
权利要求
1.低三七多糖灰分含量的方法，取三七提取皂苷后的残渣，加入3-20倍重量的水加热到60-100° C，提取3次，毎次30分钟至3小时，合并提取液，冷却澄清，离心过滤，离心滤液30-70° C真空浓缩至3-10mL提取液/Ig原料或不浓缩直接搅拌加入体积1_10%的澄清齐U，冷却放置澄清2-48小时，离心过滤，滤液直接加入阳离子交换树脂柱，并用水洗涤，直至洗脱液无多糖为止，洗脱液于30-70° C真空浓缩至1-1OmL提取液/Ig原料或不浓缩直接搅拌加入1-10倍体积量的70%-95%高浓度有机溶剂，将溶液的有机溶剂浓度控制在40%以上，冷却放置2-20小时，过滤，并用有机溶剂洗涤，30-80° C干燥。
2.按权利要求1所述的降低三七多糖灰分含量的方法，其特征在于所述水为蒸馏水或去离子水。
3.按权利要求1所述的降低三七多糖灰分含量的方法，其特征在于所述澄清剂为包括但不限于101澄清剂、KBT-YSC, KBT-GZC, ZTC1+1澄清剂、壳聚糖、明胶、单宁、KBT-FJC,KBT-HJC, PVPP、HD003、SX-865、XM-118, NCA、KJ-U DHG、BD、CTS、CZ-U HD003、JH、KJ、NVP, PF-1I, G409、科阳 1+1、汉威斯特、JA、GZB、卡拉胶、硼润土、药圣 1+1、XYZ1+1、VA\VB、KOLORFINE、鱼胶、阳离子聚丙烯酰胺中的任意ー种或ニ种。
4.按权利要求1所述的降低三七多糖灰分含量的方法，其特征在于所述离子交换树脂为包括但不限于DOOl大孔 强酸性苯こ烯阳离子交换树脂、D113大孔弱酸性丙烯酸阳离子交换树脂、110/111弱酸性丙烯酸阳离子交换树脂、D151/152弱酸性大孔丙烯酸阳离子交换树脂、122弱酸性酚醛阳离子交换树脂、002SC强酸性苯こ烯阳离子交换树脂、JK008均孔强酸性苯こ烯阳离子交换树脂、001X8强酸性苯こ烯阳离子交换树脂、001X12强酸性苯こ烯阳离子交换树脂、724弱酸性丙烯酸系阳离子交换树脂、001X7(732)强酸性苯こ烯系阳离子交换树脂、001X4(734)强酸性苯こ烯系阳离子交换树脂中的任意ー种或ニ种。
5.按权利要求1所述的降低三七多糖灰分含量的方法，其特征在于所述有机溶剂为包括但不限于酒精、甲醇、丙酮能与水混溶的溶剂任意I种或2-3种的混合溶剤。
全文摘要
一种降低三七多糖灰分含量，提高三七多糖得率和纯度的方法。该方法以三七为原料，经提取、澄清、去离子、沉淀，干燥得到低灰分的三七多糖，可以有效地将三七多糖的灰分降低到1%以下，得率提高到5%以上，含量提高到70%以上。该方法能极大地降低灰分和重金属含量，防止离子交换树脂中毒，降低离子交换树脂的压力，提高离子交换树脂的效率，提高产品的质量，为三七多糖的生产和应用提供有利保障。
文档编号C08B37/00GK103087211SQ201310016460
公开日2013年5月8日 申请日期2013年1月16日 优先权日2013年1月16日
发明者刘锡葵, 肖建青 申请人:中国科学院昆明植物研究所