本申请要求于2014年3月14日提交的印度专利申请第858/MUM/2014号的优先权，将其公开内容通过引用整体并入本文，如同在本文完全改写。
发明领域
本发明涉及(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸钠的制备方法。
发明背景
在数种抗菌化合物的合成中，化学命名为(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸钠的式(I)的化合物可被用作中间体，并且公开于PCT国际专利申请第PCT/IB2013/059264号。本发明公开了用于制备式(I)的化合物的方法。
发明概述
在一个总的方面，提供了式(I)的化合物的制备方法，
所述方法包括：
(a)使式(II)的化合物与三甲基碘化亚砜反应以获得式(III)的化合物；其中P1是H或胺保护基，以及P2是H或醇保护基；
(b)使式(III)的化合物与O-苄基羟胺盐酸盐反应以获得式(IV)的化合物；其中P1和P2如上定义；
(c)使式(IV)的化合物环化以获得式(V)的化合物；其中P1和P2如上定义；
(d)还原式(V)的化合物以获得式(VI)的化合物；其中P1和P2如上定义；
(e)将式(VI)的化合物转化为式(VII)的化合物；其中P2如上所述；
(f)使式(VII)的化合物环化以获得式(VIII)的化合物，任选地，随后进行非对映分离；其中P2如上所述；
(g)将式(VIII)的化合物脱保护以获得式(IX)的化合物；以及
(h)使式(IX)的化合物氧化，随后进行钠盐的形成以获得式(I)的化合物。
下面的说明书中陈述了本发明的一个或多个实施方案的细节。根据下述说明书包括权利要求书，本发明的其它特征、目标和优点将显而易见。
发明详述
现在将参考示例性实施方案，并且将在本文使用特定语言以对此进行描述。然而，应当理解，并非由此意图对本发明的范围进行限制。相关领域以及掌握该公开内容的技术人员所想到的对本文所描述的本发明的特征的改变和进一步修饰应被认为在本发明的范围内。必须注意的是，除非文中另有明确规定，否则在本说明书和所附的权利要求中使用的单数形式“一个/一种(a)”、“一个/一种(an)”和“所述(the)”包括复数指示物。说明书中引用的所有参考文献(包括专利、专利申请和文献)通过引用整体明确地并入本文。
在一个总的方面，提供了式(I)的化合物的制备方法，
所述方法包括：
(a)使式(II)的化合物与三甲基碘化亚砜反应以获得式(III)的化合物；其中P1是H或胺保护基，以及P2是H或醇保护基；
(b)使式(III)的化合物与O-苄基羟胺盐酸盐反应以获得式(IV)的化合物；其中P1和P2如上定义；
(c)使式(IV)的化合物环化以获得式(V)的化合物；其中P1和P2如上定义；
(d)还原式(V)的化合物以获得式(VI)的化合物；其中P1和P2如上定义；
(e)将式(VI)的化合物转化为式(VII)的化合物；其中P2如上所述；
(f)使式(VII)的化合物环化以获得式(VIII)的化合物，任选地，随后进行非对映分离；其中P2如上所述；
(g)将式(VIII)的化合物脱保护以获得式(IX)的化合物；以及
(h)使式(IX)的化合物氧化，随后进行钠盐的形成以获得式(I)的化合物。
在一些实施方案中，通过使用方案1所述的一般过程制备式(I)的化合物。通常，式(I)的化合物制备自双保护的吡咯烷-2-酮醇(II)，其中P1是氢或胺保护基，以及P2是氢或醇保护基。胺保护基的典型非限制性实例包括苄氧羰基、对甲基苄基羰基、叔丁氧羰基、9-芴甲氧羰基、乙酰基、苯甲酰基、苄基、氨基甲酸酯、对甲氧苄基、3,4-二甲氧苄基、对甲氧苯基、甲苯磺酰基等等。醇保护基的典型非限制性实例包括乙酰基、苯甲酰基、苄基、β-甲氧基乙氧基甲醚、二甲氧三苯甲基、甲氧基甲醚、二甲氧三苯甲基、对甲氧苄醚、甲基硫醚、新戊酰、吡喃阿霉素、四氢呋喃、三苯甲基、烷基硅醚、甲醚、乙氧乙醚等等。在一些实施方案中，从式(II)的化合物制备式(I)的化合物，其中P1是叔丁氧羰基，以及P2是叔丁基二甲基硅烷基。
使式(II)的化合物开环以获得式(III)的化合物。于约-20℃至40℃的温度，在合适的有机溶剂(如四氢呋喃、二氧己烷、二乙醚、二异丙醚或其混合物)中，使式(II)的化合物与产生自三甲基碘化亚砜和合适的碱(如氢化钠或叔丁醇钾)的阴离子反应以提供开环的式(III)的化合物。在一些实施方案中，于约-20℃至0℃的温度，在氢化钠和四氢呋喃的存在下，使式(II)的化合物与三甲基碘化亚砜反应以获得式(III)的化合物。
于约25℃至80℃的温度，式(III)的化合物通过与O-苄基羟胺盐酸盐在合适的有机溶剂如四氢呋喃、二氧己烷、二乙醚、二异丙醚、乙酸乙酯或其混合物中反应进行亚胺形成反应以提供氯亚胺中间体(IV)。在一些实施方案中，于约50℃至60℃的温度，在四氢呋喃的存在下，使式(III)的化合物与O-苄基羟胺盐酸盐反应以获得式(IV)的化合物。
于约-20℃至40℃的温度，在合适的碱如氢化钠、叔丁醇钾、正丁基锂等等的存在下，式(IV)的氯亚胺化合物在合适的有机溶剂如四氢呋喃、二氧己烷、二乙醚、二异丙醚、乙酸乙酯或其混合物中进行关环反应以提供取代的式(V)的哌啶化合物。在一些实施方案中，于约-10℃至0℃的温度，用在四氢呋喃中的叔丁醇钾处理式(IV)的化合物以获得式(V)的化合物。
于约0℃至40℃的温度，在合适的酸如乙酸或丙酸和合适的有机溶剂如二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、二氧己烷、乙酸乙酯或其混合物的存在下，通过合适的还原剂的作用还原式(V)的化合物以提供式(VI)的环胺化合物。还原剂的典型非限制性实例包括硼氢化钠、氰基硼氢钠、三乙酰氧基硼氢化钠、三丙酰氧基硼氢化钠、硼氢化锂等等。在一些实施方案中，于约25℃至35℃的温度，在乙酸和二氯甲烷的存在下，使式(V)的化合物与氰基硼氢钠反应以获得式(VI)的化合物。
于约0℃至40℃的温度，在合适的有机溶剂的存在下，通过合适的脱保护剂的作用移除(VI)的化合物的哌啶氮保护基以提供式(VII)的二元化合物。脱保护剂的典型非限制性实例包括无机酸如盐酸、三氟乙酸、氢溴酸或硫酸；路易斯酸如醚合三氟化硼复合体；碱如哌啶、氨或甲胺；硝酸铈(IV)铵；过渡金属催化剂上的氢源；等等。合适的溶剂的典型非限制性实例包括二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、二氧己烷、乙酸乙酯或其混合物。在一些实施方案中，于约25℃至35℃，在二氯甲烷的存在下，使式(VI)的化合物与醚合三氟化硼复合体反应以获得式(VII)的化合物。
于约-20℃至40℃的温度，在合适的碱和溶剂的存在下，使式(VII)的化合物与合适的环化剂反应以得到50：50非对映纯度的环化尿素中间体。环化剂的典型非限制性实例包括三光气、光气、羰二咪唑等等。合适的碱的典型非限制性实例包括二异丙基乙胺、三乙胺、吡啶等等。在一些实施方案中，于约-20℃至0℃的温度，在二异丙基乙胺和乙腈的存在下，使式(VII)的化合物与三光气反应以获得50：50非对映纯度的式(VIII)的化合物。通过使非对映混合物在合适的溶剂如正己烷、环己烷、庚烷、甲醇、乙醇、异丙醇、水或其混合物中结晶进行非对映分离以提供纯的(2S,5R)非对映体。在一些实施方案中，用正己烷使50：50非对映纯度的式(VIII)的化合物结晶以获得纯的式(VIII)的化合物的(2S,5R)非对映体。在一些实施方案中，式(I)的化合物制备自(2S,5R)-6-苄氧基-2-(叔丁基-二甲基硅烷基-氧甲基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环-[3.2.1]辛烷。
将式(VIII)的化合物中的醇保护基移除以获得式(IX)的化合物。在一些实施方案中，于约0℃至40℃的温度，在合适的溶剂的存在下，使式(VIII)的化合物与合适的脱保护试剂反应以提供式(IX)的醇化合物。脱保护剂的典型非限制性实例包括酸、碱、过渡金属催化剂上的氢源，氧化剂，还原剂，氟化物离子如氟化钠、四正丁基氟化铵、氟化氢-吡啶复合体、氟化氢-三乙胺复合体，三甲基碘硅烷等等。合适的溶剂的典型非限制性实例包括四氢呋喃、二氧己烷、氯仿、二异丙醚或其混合物。在一些实施方案中，于约25℃至35℃的温度，在四氢呋喃的存在下，使式(VIII)的化合物与四正丁基氟化铵反应以获得式(IX)的化合物。
将式(IX)的醇化合物氧化，然后使氧化的化合物进行钠盐的形成以获得式(I)的化合物。首先用戴斯-马丁氧化剂处理式(IX)的化合物以提供中间醛，于约0℃至50℃的温度，用在正丁基醇和水混合物中的环己烯、连二磷酸钠和亚氯酸钠混合物立即处理将其进一步氧化。随后使不进行任何分离的反应混合物进行钠盐的形成以获得式(I)的化合物。在一些实施方案中，通过用2-乙基己酸钠处理或与钠交换树脂接触实现钠盐的形成以获得(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]-辛烷-2-羧酸(I)的钠盐。
在一些实施方案中，使用方案1所描述的方法制备式(I)的化合物。
在一些实施方案中，使用方案1所描述的方法制备式(I)的化合物，其中P1是叔丁氧羰基，以及P2是叔丁基二甲基硅烷基。
在一些实施方案中，提供了式(IV)的化合物；其中P2是H或醇保护基。
在一些实施方案中，提供了式(VII)的化合物；其中P2是H或醇保护基。
在一些实施方案中，提供了式(VIII)的化合物；其中P2是H或醇保护基。
在一些实施方案中，提供了式(I)的化合物的制备方法，
所述方法包括：
(a)使式(II)的化合物与三甲基碘化亚砜反应以获得式(III)的化合物；其中P1是叔丁氧羰基，以及P2是叔丁基二甲基硅烷基；
(b)使式(III)的化合物与O-苄基羟胺盐酸盐反应以获得式(IV)的化合物；其中P1和P2如上定义；
(c)使式(IV)的化合物在叔丁醇钾的存在下环化以获得式(V)的化合物；其中P1和P2如上定义；
(d)在氰基硼氢钠的存在下还原式(V)的化合物以获得式(VI)的化合物；其中P1和P2如上定义；
(e)在醚合三氟化硼复合体的存在下将式(VI)的化合物脱保护以获得式(VII)的化合物；其中P2如上所述；
(f)在三光气的存在下使式(VII)的化合物环化以获得式(VIII)的化合物，任选地，随后进行非对映分离；其中P2如上所述；
(g)在四正丁基氟化铵的存在下将式(VIII)的化合物脱保护以获得式(IX)的化合物；以及
(h)使式(IX)的化合物氧化，随后进行钠盐的形成以获得式(I)的化合物。
在一些实施方案中，提供了式(VIII)的化合物，其中P2是叔丁基二甲基硅烷基，如通过HPLC所测定，其具有至少99％的非对映纯度。
在一些实施方案中，提供了用于制备式(I)的化合物的方法，如通过HPLC所测定，其具有至少97％的纯度。
在一些实施方案中，提供了式(I)的化合物，如通过HPLC所测定，其具有至少97％的纯度。
在一些实施方案中，提供了包含式(I)的化合物的药物组合物，如通过HPLC所测定的，所述式(I)的化合物具有至少约97％的纯度。在一些实施方案中，药物组合物还可包含一种或多种药学可接受的赋形剂。
对本领域技术人员而言显而易见的是，在不脱离本发明的范围和精神的情况下，可以对本文所公开的发明做出不同的替换和修饰。例如，本领域技术人员将承认，利用通用描述内的多种不同的化合物可以实行本发明。
实施例
下述实施例阐述了目前已知最好的本发明的实施方案。然而，应当理解，下述实施例仅示例或阐明本发明的原理的应用。在不脱离本发明的精神和范围的情况下，通过本领域技术人员可设计对组合物、方法和系统的多种改进和替代。所附的权利要求书旨在涵盖此类修饰和安排。因此，虽然上文已具体描述了本发明，但是下述实施例提供关于目前被认为是本发明最实用且优选的实施方案的进一步细节。
实施例1
(2S,5R)-6-(苄氧基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-2-羧酸钠的合成
步骤1：S-[1-[(叔丁基二甲基硅烷基)-氧甲基]-5-[二甲基(环氧)-λ-4-亚硫基]-4-氧代-戊基]-氨基甲酸叔丁酯(III)的制备：
于30℃温度，向三甲基碘化亚砜(180.36gm，0.819mol)在四氢呋喃(900ml)中的悬液加入一部分的氢化钠(32.89g，0.819mol，60％于矿物油中)。将反应混合物搅拌15分钟，然后于室温，在3小时的期间内逐滴添加二甲亚砜(1.125ml)，以提供白色悬液。将白色悬液加至于-13℃预冷的2-(叔丁基二甲基硅烷基-氧甲基)-5-氧代-吡咯烷-1-羧酸四丁酯(II)(225g,0.683mol，如按照J.Org Chem.；2011,76,5574和WO2009067600进行制备)在四氢呋喃(675ml)和三乙胺(123.48ml，0.887mol)混合物中的溶液，维持反应混合物温度低于-10℃。于-10℃，将得到的悬液搅拌另外1小时。通过于-10℃至10℃添加饱和的氯化铵水溶液(1.0L)小心地将反应混合物猝灭。通过添加乙酸乙酯(1.5L)萃取反应物。分层，并用乙酸乙酯(500ml×3)重新萃取水层。用饱和的碳酸氢钠水溶液(1.0L)、水(2.0L)、随后用饱和的氯化钠水溶液(1.0L)先后洗涤合并的有机层。将有机层在硫酸钠上干燥并在真空下蒸发以提供265g黄色油状块的S-[1-[(叔丁基二甲基硅烷基)-氧甲基]-5-[二甲基(环氧)-λ-4-亚硫基]-4-氧代-戊基]-氨基甲酸四丁酯(III)。
分析：
质量：422.3(M+1)；分子量：421.68以及分子式：C19H39NO5SSi；
1H NMR(CDCl3)：δ4.77(br d,1H),4.38(br s,1H),3.58(br s,3H),3.39(s,3H),3.38(s,3H),2.17-2.27(m,2H),1.73-1.82(m,2H),1.43(s,9H),0.88(s,9H),0.01(s,3H),0.04(s,3H)。
步骤2：S-[4-苄氧亚氨基-1-(叔丁基二甲基硅烷基-氧甲基)-5-氯-戊基]-氨基甲酸四丁酯(IV)的制备：
向S-[1-[(叔丁基二甲基硅烷基)-氧甲基]-5-[二甲基(环氧)-λ-4-亚硫基]-4-氧代-戊基]-氨基甲酸四丁酯(III)(440.0g，1.045mol)在四氢呋喃(6.6L)中的悬液加入O-苄氧胺盐酸盐(200.0g，1.254mol)。将反应混合物加热至50℃持续2.5小时。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，并浓缩滤液以提供剩余物。将剩余物溶于乙酸乙酯(5.0L)，并用饱和的碳酸氢钠水溶液(1.5L)、水(1.5L)和饱和的氯化钠水溶液(1.5L)依次洗涤。将有机层在硫酸钠上干燥。将溶剂在真空下干燥以得到463.0g油状块的S-[4-苄氧亚氨基-1-(叔丁基二甲基硅烷基-氧甲基)-5-氯-戊基]-氨基甲酸四丁酯(IV)。
分析：
质量：486.1(M+1)；分子量：485.4以及分子式：C24H41N2O4SiCl；
1H NMR(CDCl3)：δ7.26-7.36(m,5H),5.10(s,2H),4.66(br d,1H),3.58-4.27(m,2H),3.56-3.58(m,3H),2.40-2.57(m,2H),1.68-1.89(m,2H),1.44(s,9H),0.89(s,9H),0.02(s,3H),0.04(s,3H)。
步骤3：S-5-苄氧亚氨基-2-(叔丁基二甲基硅烷基-氧甲基)-哌啶-1-羧酸四丁酯(V)的制备：
通过将温度维持在-10℃，在30分钟的期间内向S-[4-苄氧亚氨基-1-(叔丁基二甲基硅烷基-氧甲基)-5-氯-戊基]-氨基甲酸四丁酯(IV)(463.0g 0.954mol)在四氢呋喃(6.9L)中的溶液加入一部分的叔丁醇钾(139.2g，1.241mol)。将得到的悬液搅拌另外的1.5小时，于-10℃至-5℃。通过添加饱和的氯化铵水溶液(2.0L)将反应混合物猝灭，于-5℃至10℃。将有机层分离并用乙酸乙酯(1.0L×2)萃取水层。将合并的有机层用饱和的氯化钠水溶液(2.0L)洗涤。将有机层在硫酸钠上干燥，然后在真空下干燥以得到394.0g黄色油状块的S-5-苄氧亚氨基-2-(叔丁基二甲基硅烷基-氧甲基)-哌啶-1-羧酸四丁酯(V)。
分析：
质量：449.4(M+1)，分子量：448.68以及分子式：C24H40N2O4Si；
1H NMR(CDCl3)：δ7.25-7.33(m,5H),5.04-5.14(m,2H),4.35(br s,1H),3.95(br s,1H),3.63-3.74(br d,2H),3.60-3.63(m,1H),2.70-2.77(m,1H),2.33-2.41(m,1H),1.79-1.95(m,2H),1.44(s,9H),0.88(s,9H),0.03(s,3H),0.04(s,3H)。
步骤4：(2S,5RS)-5-苄氧氨基-2-(叔丁基二甲基硅烷基-氧甲基)-哌啶-1-羧酸四丁酯(VI)的制备：
向S-5-苄氧亚氨基-2-(叔丁基二甲基硅烷基-氧甲基)-哌啶-1-羧酸四丁酯(V)(394.0g，0.879mol)在二氯甲烷(5.0L)和冰乙酸(788ml)中的溶液加入一部分的氰基硼氢钠(70.88g，1.14mol)。将得到的反应混合物于约25℃至30℃的温度搅拌2小时。通过添加碳酸氢钠(1.3kg)在水(5.0L)中的水溶液猝灭混合物。将有机层分离，并用二氯甲烷(2.0L)萃取水层。用水(2.0L)、饱和的氯化钠水溶液(2.0L)依次洗涤合并的有机层，并在硫酸钠上干燥。将溶剂在真空下干燥以提供剩余物。通过硅胶柱层析将剩余物纯化以得到208g浅黄色液状的(2S,5RS)-5-苄氧氨基-2-(叔丁基二甲基硅烷基-氧甲基)-哌啶-1-羧酸四丁酯(VI)。
分析：
质量：451.4(M+1)；分子量：450.70以及分子式：C24H42N2O4Si；
1H NMR(CDCl3):δ7.26-7.36(m,5H),4.90-5.50(br s,1H),4.70(dd,2H),4.09-4.25(m,2H),3.56-3.72(m,2H),2.55-3.14(m,2H),1.21-1.94(m,4H),1.45(s,9H),0.89(s,9H),0.05(s,6H)。
步骤5：(2S,5RS)-5-苄氧氨基-2-(叔丁基二甲基硅烷基-氧甲基)-哌啶(VII)的制备：
向S-5-苄氧氨基-2-(叔丁基二甲基硅烷基-氧甲基)-哌啶-1-羧酸四丁酯(VI)(208g，0.462mol)在二氯甲烷(3.0L)中的溶液加入一部分的三氟化硼二乙醚复合体(114.15ml，0.924mol)。将得到的反应混合物于约25℃至35℃的温度搅拌2小时。用饱和的碳酸氢钠水溶液(2.0L)将反应混合物猝灭。将有机层分离，并用二氯甲烷(1.5L×2)萃取水层。将合并的有机层用饱和的氯化钠水溶液(1.0L)洗涤并在硫酸钠上干燥。将溶剂在真空下干燥以得到159g微黄色糖浆的(2S,5RS)-5-苄氧氨基-2-(叔丁基二甲基硅烷基-氧甲基)-哌啶(VII)。
分析：
质量：351.3(M+1)；分子量：350.58以及分子式：C19H34N2O2Si。
步骤-6：(2S,5R)-6-苄氧基-2-(叔丁基-二甲基硅烷基-氧甲基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环-[3.2.1]辛烷(VIII)的制备：
部分1：(2S,5RS)-6-苄氧基-2-(叔丁基-二甲基硅烷基-氧甲基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环-[3.2.1]辛烷的制备：
于-15℃，在30分钟内，向(2S,5RS)-5-苄氧氨基-2-(叔丁基二甲基硅烷基-氧甲基)-哌啶(VII)(159.0g，0.454mol)在乙腈(2.38L)和二异丙基乙胺(316.5ml，1.81mol)混合物中的溶液搅拌下添加溶于乙腈(760ml)中的三光气(59.27gm，0.199mol)。将得到的反应混合物于-10℃搅拌另外的1小时。通过添加饱和的碳酸氢钠水溶液(2.0L)将反应混合物猝灭，-5℃至10℃。在真空下从反应混合物蒸发乙腈并向水相左侧添加二氯甲烷(2.5L)。将有机层分离并用二氯甲烷(1.5L×2)萃取水层。将合并的有机层依次用水(2.0L)、饱和的氯化钠水溶液(2.0L)洗涤并在硫酸钠上干燥。将溶剂在真空下干燥，并且将剩余物通过硅胶床以得到83.0g黄色油状的50：50比例的非对映混合物(2S，5RS)-6-苄氧基-2-(叔丁基-二甲基硅烷基-氧甲基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环-[3.2.1]辛烷。
部分-2：分离非对映体以制备(2S,5R)-6-苄氧基-2-(叔丁基-二甲基硅烷基-氧甲基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环-[3.2.1]辛烷：
将50：50比例的非对映体(2S,5RS)-6-苄氧基-2-(叔丁基-二甲基硅烷基-氧甲基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环-[3.2.1]辛烷的混合物(47.0gm，0.125mol)溶于正己烷(141ml)，并于约10℃至15℃的温度搅拌1小时。将沉淀的固体过滤并用正己烷(47ml)洗涤以提供12.0g白色透明材料的非对映纯(2S,5R)-6-苄氧基-2-(叔丁基-二甲基硅烷基-氧甲基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环-[3.2.1]辛烷(VIII)。
分析：
质量：377.3(M+1)；分子量：376.58以及分子式：C20H32N2O3Si；
1H NMR(CDCl3):δ7.33-7.44(m,5H),4.95(dd,2H),3.76-3.85(ddd,2H),3.37-3.40(m,1H),3.28-3.31(m,2H),2.89(brd,1H),1.90-2.02(m,2H),1.62-1.74(m,2H),1.56(s,9H),0.06(s,3H),0.05(s,3H)。
如通过HPLC所测定的非对映纯度：99.85％。
步骤-7：(2S,5R)-6-苄氧基-2-羟甲基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环-[3.2.1]辛烷(IX)的制备：
于室温，向(2S,5R)-6-苄氧基-2-(叔丁基-二甲基硅烷基-氧甲基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环-[3.2.1]辛烷(VIII)(12.0g，31.9mmol)在四氢呋喃(180ml)中的溶液加入四丁基氟化铵(38.0ml，38mmol，1M于四氢呋喃中)。将反应混合物搅拌2小时。用饱和的氯化铵水溶液(100ml)将其猝灭。将有机层分离，并用二氯甲烷(150ml×3)萃取水层。将合并的有机层用饱和的氯化钠水溶液(150ml)洗涤，在硫酸钠上干燥并在真空下蒸发以得到24.0g黄色液状的(2S,5R)-6-苄氧基-2-羟甲基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环-[3.2.1]辛烷(IX)。通过硅胶(60-120目)柱层析使用乙酸乙酯和己烷的混合物作为洗脱液纯化式(IX)的化合物。
分析：
质量：263.1(M+1)；分子量：262.31以及分子式：C14H18N2O3
1H NMR(CDCl3):δ7.34-7.42(m,5H),4.95(dd,2H),3.67-3.73(m,1H),3.53-3.60(m,2H),3.32-3.34(m,1H),2.88-3.01(m,2H),2.09(brs,1H),1.57-2.03(m,2H),1.53-1.57(m,1H),1.37-1.40(m,1H)。
步骤8：(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]-辛烷-2-羧酸(I)的钠盐的制备：
步骤I：
在无任何进一步纯化的情况下使用上文步骤8中获得的式(IX)的化合物。在15分钟内，向(2S,5R)-6-苄氧基-2-羟甲基)-7-氧代-1,6-二氮杂二环-[3.2.1]辛烷(IX)(24.0g，31.8mmol)(基于理论基础添加的量，即8.3g)在二氯甲烷(160ml)中的清澈溶液加入部分的戴斯-马丁试剂(24.1g，57.24mmol)。将得到的悬液于25℃搅拌2小时。通过添加制备自饱和碳酸氢钠水溶液(160ml)和72.0g硫代硫酸钠的溶液猝灭反应。将二乙醚(160ml)加至反应混合物，并且将其搅拌5-10分钟并通过硅藻土过滤。将来自滤液的双相层分离。用饱和的碳酸氢钠水溶液(160ml)，随后通过饱和的氯化钠水溶液(160ml)将有机层洗涤。将有机层在硫酸钠上干燥并于30℃蒸发至干燥以获得20.0g中间醛，将其立即用于下面的反应。
步骤II：
向如上获得的粗中间醛(20.0g，31.6mmol)(基于理论产率添加的量即8.2g)加入叔丁基醇(160ml)和环己烯(10.8ml，110.6mmol)。将反应混合物冷却至约10℃至15℃的温度。通过将温度维持在10℃至15℃之间，在30分钟的期间内，向该混合物添加制备自在水(82.0ml)中的连二磷酸钠(14.8g，94.8mmol)和亚氯酸钠(5.7g，63.2mmol)的清澈溶液。将反应混合物进一步搅拌1小时，并用饱和的氯化铵水溶液猝灭。使反应混合物于40℃真空下蒸发以移除叔丁基醇。将得到的混合物用二氯甲烷(3×150ml)萃取。分层。将合并的有机层用盐水溶液洗涤，在硫酸钠上干燥并在真空下蒸发至干燥以获得16.0g粗剩余物。向该剩余物添加丙酮(83ml)以提供清澈的溶液，并且向其逐滴添加2-乙基己酸钠(4.5g)在丙酮(24ml)中的溶液。将反应混合物于25℃至30℃搅拌15小时以提供悬液。向悬液添加二乙醚(215ml)并搅拌30分钟。将得到的固体在吸力下过滤，并用冷丙酮(83ml)，随后用二乙醚(83ml)洗涤湿饼。将固体于40℃真空下干燥以提供3.6g灰白有色的不吸湿的(2S,5R)-6-苄氧基-7-氧代-1,6-二氮杂二环[3.2.1]-辛烷-2-羧酸(I)的钠盐。
分析：
质量：275.2M-1(游离酸)；分子量：298以及分子式：C14H15N2O4.Na；
NMR(DMSO-d6):δ7.43-7.32(m,5H),4.88(q,2H),3.48(s,1H),3.21(d,1H),2.73(d,1H),2.04-2.09(m,1H),1.77-1.74(m,1H),1.65-1.72(m,1H),1.55-1.59(m,1H)；
如通过HPLC所测定的纯度：97.47％；
[α]D25：-42.34°(c 0.5，水)。