哺乳动物细胞内最重要的细胞传输系统之一是环磷酸鸟苷(cGMP)。其与从内皮释放的并传输激素和机械信号的一氧化氮(NO)一起形成NO/cGMP体系。鸟苷酸环化酶催化从三磷酸鸟苷 (GTP) 生物合成cGMP。目前已知的此家族的代表可以根据结构特征或根据配体类型而被归为两类：可以由利钠肽刺激的颗粒状鸟苷酸环化酶，以及可以有NO刺激的可溶性鸟苷酸环化酶。可溶性鸟苷酸环化酶由两个亚基组成并且很可能含有一个血红素/异源二聚体，作为调控中心的一部分。这对于活化机制而言至关重要。NO能够结合血红素的铁原子并因而显著提高酶活性。相反地，不含血红素的制备物无法被NO刺激。一氧化碳(CO)也能够结合血红素的中心铁原子，但CO的刺激比NO小得多。
通过形成cGMP，并由于磷酸二酯酶(PDE)、离子通道和蛋白激酶所带来的调控，鸟苷酸环化酶在各种生理过程中扮演着重要角色，特别是在平滑肌细胞的松弛和增殖中、在血小板聚集和血小板粘附中和在神经信号传导中，以及也在基于对上述过程的破坏的疾病中。在病理生理状态下，NO/cGMP体系可以被抑制，其可以导致，例如，高血压、血小板活化、细胞增殖增加、内皮功能障碍、动脉粥样硬化、心绞痛、心力衰竭、心肌梗塞、血栓、中风和性功能障碍。
由于预期的高效率和低水平的副作用，针对此类疾病而通过靶向生物体内cGMP信号通路的可能的NO依赖性治疗是一种很有前途的方法。
迄今为止，对于可溶性鸟苷酸环化酶的治疗性刺激而言，用途仅限于制造化合物如有机硝酸盐，其作用是基于NO。后者是通过生物转化形成的，并通过攻击血红素的中心铁原子而活化可溶性鸟苷酸环化酶。除副作用以外，耐受性的形成是这种治疗模式的关键缺陷之一。
几年前，描述了一些直接刺激可溶性鸟苷酸环化酶（即不会事先释放NO）的物质，例如3-(5'-羟甲基-2'-呋喃基)-1-苄基吲唑 [YC-1; Wu 等人, Blood 84 (1994), 4226; Mülsch 等人, Brit. J. Pharmacol.120 (1997), 681]。最近的可溶性鸟苷酸环化酶刺激因子当中包括BAY 41-2272、BAY 41-8543和Riociguat(BAY 63-2521)(参见，例如，Stasch J.-P. 等人, Nat. Rev. Drug Disc.2006; 5: 755-768; Stasch J.-P. 等人, ChemMedChem 2009; 4: 853-865.Stasch J.-P. 等人, Circulation 2011; 123: 2263-2273)。有趣的是，这些sGC刺激因子中的一些，例如YC-1或BAY 41-2272，除了直接刺激鸟苷酸环化酶之外也具有PDE 5-抑制作用。为了使cGMP通路最大化，在药理学上需要刺激cGMP的合成并同时抑制通过PDE 5的降解。这种双重原理在药理学上尤其有利(参见，例如，Oudout 等人, Eur.Urol.2011, 60, 1020-1026; Albersen 等人, J Sex Med.2013; 10, 1268-1277)。
当本发明的化合物根据B-2中的研究表现出对重组鸟苷酸环化酶报告细胞系的影响（最低有效浓度(MEC) ≤ 3 µM），并且根据B-3中的研究表现出对人磷酸二酯酶5(PDE 5)的抑制（IC50 < 100 nM）时，这种双重原理在本发明的上下文中得到应验。
磷酸二酯酶5(PDE 5)是这样的酶之一的名字，其裂解cGMP中的磷酯键，形成5'-一磷酸鸟苷(5´-GMP)。在人体内，磷酸二酯酶5存在于，例如，阴茎海绵体和肺动脉的平滑肌中。通过（用例如西地那非、伐地那非和他达拉非）抑制PDE 5而阻断cGMP降解导致松弛信号通路的信号增强并具体导致阴茎海绵体中的供血增加和肺部血管中的压力降低。其用于治疗勃起功能障碍和肺动脉高压。除了PDE 5，还存在专门裂解cGMP的磷酸二酯酶(Stasch J.-P. 等人Circulation 2011; 123, 2263-2273)。
WO 03/095451公开了氨基甲酸根取代的3-嘧啶基吡唑并吡啶作为可溶性鸟苷酸环化酶的刺激因子。WO 2010/065275和WO 2011/149921公开了取代的吡咯-和二氢吡啶并嘧啶作为sGC活化因子。WO 2012/004259描述了稠合的氨基嘧啶，而WO 2012/004258、WO 2012/143510、WO 2012/152629和WO 2013/030288描述了稠合的嘧啶和三嗪，作为sGC刺激因子。尤其是在EP 0 266 890-A1、WO 89/03833-A1、JP 01258674-A[cf. Chem.Abstr.112:178986]、WO 96/34866-A1、EP 1 277 754-A1、WO 2006/015737-A1、WO 2008/008539-A2、WO 2008/082490-A2、WO 2008/134553-A1、WO 2010/030538-A2、WO 2011/113606-A1和WO 2012/165399-A1中描述了可用于治疗疾病的各种咪唑并[1,2-a]吡啶衍生物。
本发明的目的是提供新型的物质，其作为可溶性鸟苷酸环化酶的刺激因子起作用，并且也用作可溶性鸟苷酸环化酶和磷酸二酯酶-5抑制剂 (双重原理)的刺激因子；相比于现有技术已知的化合物其具有相同的或提高的治疗特性，例如针对它们的体内特性，例如它们的药代动力学和药效动力学特性和/或它们的代谢特性和/或它们的计量-活性关系。
本发明提供了具有通式（I）的化合物
其中
A 表示 CH2、CD2或CH(CH3)，
R1 表示 (C4-C6)-烷基、(C3-C7)-环烷基或苯基，
其中(C4-C6)-烷基可被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟和三氟甲基，
其中(C3-C7)-环烷基可被1至4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、三氟甲基和(C1-C4)-烷基，
并且
其中苯基可被1至4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自卤素、氰基、单氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、(C1-C4)-烷基、(C3-C6)-环烷基、(C1-C4)-烷氧基、二氟甲氧基和三氟甲氧基，
R2 表示 氢、(C1-C4)-烷基、(C1-C4)-烷氧基-(C1-C4)-烷基、环丙基、单氟甲基、二氟甲基或三氟甲基，
R3 表示 氢，
R4 表示 氢、卤素、氰基、单氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、(C1-C4)-烷基、乙炔基、(C3-C7)-环烷基或(C1-C4)-烷氧基，
R5 表示 氢，
E 表示 氮或CR6，
其中
R6 表示 氢、氘、卤素、氰基、二氟甲基、三氟甲基、(C1-C6)-烷基、(C2-C6)-炔基、环丙基、环丁基、羟基、-OR7、-NR8R9、羟基羰基、(C1-C4)-烷氧基羰基、-C(=O)-NR10R11、5-或6-元杂芳基，
其中(C1-C6)-烷基可被1至3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、二氟甲基、三氟甲基、(C1-C4)-烷氧基、羟基、氨基、-N(C=O)R12、(C1-C4)-烷基磺酰氨基、(C3-C6)-环烷基磺酰氨基、环丙基和环丁基，
其中R12 表示 (C3-C7)-环烷基或(C1-C4)-烷基，
其中(C1-C4)-烷基可被三氟甲基或二氟甲基取代，
其中(C2-C6)-炔基可被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自二氟甲基、三氟甲基、羟基、氨基、环丙基和环丁基，
其中5-或6-元杂芳基可被1至3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、氯、(C1-C4)-烷基、羟基、氨基和环丙基，
其中R7 表示 (C1-C6)-烷基或5-元杂芳基，
其中(C1-C6)-烷基可被三氟甲基、(C1-C4)-烷氧基、羟基、环丙基或环丁基取代，
其中R8 表示 氢、(C1-C6)-烷基或(C3-C7)-环烷基，
其中(C3-C7)-环烷基可被1至3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自(C1-C4)-烷基、羟基、氨基、氟、三氟甲基和二氟甲基，
并且
其中(C1-C6)-烷基可被1至4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、(C1-C4)-烷基、(C3-C7)-环烷基、(C1-C4)-烷氧基、羟基、氨基、三氟甲基、二氟甲基、单氟甲基、5-至7-元氮杂-杂环基和苯基，
其中苯基可被1至3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自卤素、氰基、(C1-C4)-烷基和(C1-C4)-烷氧基，
其中5-至7-元氮杂-杂环基可被1至4个氟取代基取代，
并且
其中(C3-C7)-环烷基可被1至3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自卤素、(C1-C4)-烷基和羟基，
其中R9 表示 氢或(C1-C6)-烷基，
或者
R8和R9连同其所附接至的氮原子而形成3-至8-元杂环，
其中所述3-至8-元杂环可被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、(C1-C4)-烷基、羟基羰基、(C1-C4)-烷氧基羰基、羟基和氨基，
其中(C1-C4)-烷基可被羟基羰基、(C1-C4)-烷氧基羰基、羟基或氨基取代，
其中R10 表示 氢、(C1-C6)-烷基或(C3-C7)-环烷基，
其中(C3-C7)-环烷基可被1至3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自(C1-C6)-烷基、羟基、三氟甲基和二氟甲基，
并且
其中(C1-C6)-烷基可被1至4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自(C3-C7)-环烷基、(C1-C4)-烷氧基、羟基、氨基、三氟甲基和二氟甲基，
其中R11 表示 氢或(C1-C4)-烷基，
或者
R10和R11连同其所附接至的氮原子而形成3-至7-元杂环，
其中所述3-至7-元杂环可被1至3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、(C1-C4)-烷基、羟基和氨基，
其中(C1-C4)-烷基可被羟基取代，
L 表示 #1-CR13AR13B-(CR14AR14B)m-#2 基团，
其中
#1 表示附接至所述羰基的点，
#2 表示附接至所述嘧啶环或三嗪环的点，
m 表示数字0、1或2，
R13A 表示 氢、三氟甲基或(C1-C4)-烷基，
R13B 表示 氢、二氟甲基、三氟甲基、(C1-C4)-烷基或(C3-C7)-环烷基，
其中(C1-C6)-烷基可被1至3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、氰基、三氟甲基、(C3-C7)-环烷基、二氟甲氧基和三氟甲氧基，
或者
R13A和R13B连同其所附接至的碳原子而形成3-至6-元碳环，
R14A 表示 氢、氟、(C1-C4)-烷基或羟基，
R14B 表示 氢、氟、(C1-C4)-烷基或三氟甲基，
及其N-氧化物、盐、溶剂化物、所述N-氧化物的盐以及所述N-氧化物和盐的溶剂化物。
本发明的化合物是式(I)的化合物及其盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物，被式(I)所涵盖并具有在下文中提到的式的化合物及其盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物，以及被式(I)所涵盖并在下文中作为工作实施例提到的化合物及其盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物，如果所述被式(I)所涵盖并在下文中提到的化合物还不是盐、溶剂化物和所述盐的溶剂化物。
在本发明的上下文中优选的盐是本发明的化合物的生理学上可接受的盐。也涵盖了尽管其自身不适合药学应用，但是可以用于例如分离或纯化根据本发明的化合物的盐。
本发明的化合物的生理学上可接受的盐包括无机酸、羧酸和磺酸的酸加成盐，例如下列酸的盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、甲酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸、富马酸、马来酸和苯甲酸。
本发明的化合物的生理学上可接受的盐还包括常规碱的盐，例如且优选地，碱金属盐（例如钠盐和钾盐）、碱土金属盐（例如钙盐和镁盐）和铵盐，该铵盐衍生自氨或具有1至16个碳原子的有机胺，例如且优选地，乙胺、二乙胺、三乙胺、乙基二异丙胺、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二环己胺、二甲基氨基乙醇、普鲁卡因、二苄胺、N-甲基吗啉、精氨酸、赖氨酸、乙二胺和N-甲基哌啶。
在本发明的上下文中的溶剂化物被描述为本发明的化合物的这些形式：其以固态或液态通过与溶剂分子配位形成配合物。水合物是溶剂化物的一种特定形式，其中所述配位是与水进行。在本发明的上下文中优选的溶剂化物是水合物。
本发明的化合物可以，根据其结构，以不同的立体异构形式存在，即以构型异构体或抑或，如果合适，作为构象异构体（对映异构体和/或非对映异构体，包括那些阻转异构体的情况）存在。因此，本发明涵盖了对映异构体和非对映异构体及其各自的混合物。可以已知的方式从此类对映异构体和/或非对映异构体的混合物中分离出立体异构同质的成分；就此目的而言，优选使用色谱方法，尤其是在非手性或手性相上的HPLC色谱法。
如果根据本发明的化合物能够以互变异构形式存在，则本发明涵盖所有的互变异构形式。
本发明也涵盖了根据本发明的化合物的所有合适的同位素变体。根据本发明的化合物的同位素变体在这里理解为是指这样的化合物：其中在根据本发明的化合物内至少一个原子已经被替换为相同原子序数的另一原子，但是所述另一原子的原子质量不同于在自然界中通常存在或优势存在的原子质量。可以掺入根据本发明的化合物中的同位素的实例是：氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、溴和碘的同位素，诸如2H（氘）、3H（氚）、13C、14C、15N、17O、18O、32P、33P、33S、34S、35S、36S、18F、36Cl、82Br、123I、124I、129I和131I。根据本发明的化合物的特定同位素变体（特别是其中已经掺入一种或多种放射性同位素的那些）可能是有用的，例如，用于检查在体内的作用机理或活性化合物在体内的分布；由于比较而言容易的可制备性和可检测性，用3H-或14C-同位素标记的特殊化合物适用于该目的。另外，由于化合物的更大代谢稳定性，同位素（例如氘）的掺入可以导致一定的治疗益处，例如体内半衰期的延长或必需的活性剂量的降低；因此，根据本发明的化合物的这种改性也可以任选构成本发明的优选实施方式。通过本领域技术人员已知的方法，例如根据在下面进一步描述的方法和在工作实施例中描述的方法，通过使用各自的反应试剂和/或起始物质的相应的同位素改性，可以制备本发明的化合物的同位素变体。
另外，本发明也涵盖了根据本发明的化合物的前药。术语“前药”在本上下文中指代化合物可能其自身具有生物活性或可能其自身无生物活性但经过反应（例如代谢或水解）以在其体内驻留时间内得到根据本发明的化合物。
在本发明的上下文中，除非另外指明，否则取代基的定义如下：
烷基 在本发明的上下文中，是具有1至6个碳原子的直链或支链烷基基团。优选的实例包括：甲基、乙基、正丙基、异丙基、 正丁基、异丁基、1-甲基丙基、叔丁基、正戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、异戊基、正己基、1-甲基戊基、1-乙基丁基、2-甲基戊基、2-乙基丁基、3-甲基戊基、4-甲基戊基。
环烷基 在本发明的上下文中，是具有3至7个碳原子的单环饱和烷基基团。优选的实例包括：环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。
5-至7-元氮杂-杂环基 在本发明的上下文中，是具有总共5至7个成环原子的单环饱和杂环，其含有氮原子并可能另外含有另外的成环杂原子，所述成环杂原子选自N、O、S、SO和SO2，并通过成环氮原子附接。实例包括：吡咯烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、1,1-二氧硫代吗啉基、六氢氮杂卓基和六氢-1,4-二氮杂卓基。
烷氧基 在本发明的上下文中，是具有1至4个碳原子的直链或支链烷氧基基团。优选的实例包括：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、1-甲基丙氧基、正丁氧基、异丁氧基和叔丁氧基。
(C1-C4)-烷基磺酰氨基 在本发明的上下文中，是具有直链或支链烷基磺酰取代基的氨基，所述烷基磺酰基在烷基基团中含有1至4个碳原子并且通过磺酰基附接至氮原子。优选的实例包括：甲基磺酰氨基、乙基磺酰氨基、丙基磺酰氨基、正丁基磺酰氨基、异丁基磺酰氨基和叔丁基磺酰氨基。
(C3-C6)-环烷基磺酰氨基 在本发明的上下文中，是具有环烷基磺酰取代基的氨基，所述环烷基磺酰基在环烷环中含有3至6个碳原子并且通过磺酰基附接至氮原子。优选的实例包括：环丙基磺酰氨基、环丁基磺酰氨基、环戊基磺酰氨基、环己基磺酰氨基。
杂环基或杂环 在本发明的上下文中，是具有总共3至7个成环原子的单环或双环饱和或部分不饱和杂环，其含有一至三个成环杂原子，所述成环杂原子选自N、O和/或S，并通过成环氮原子附接。实例包括：氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、吡咯烷基、吡唑烷基、四氢呋喃基、硫代坊基、哌啶基、哌嗪基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基、氮杂环庚烷基、二氮杂环庚烷基、二氢吡咯基、四氢吡啶基、二氢噁嗪基、二氢吡嗪基或3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基。优选具有一或两个选自N、O和/或S的成环杂原子的饱和5-或6-元杂环。实例包括：氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、吡咯烷基、吡唑烷基、四氢呋喃基、哌啶基、哌嗪基、四氢吡喃基、吗啉基和硫代吗啉基。优选具有一或两个选自N、O和/或S的成环杂原子的饱和双环。实例包括：3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基。
杂芳基 在本发明的上下文中，是具有总共5至10个成环原子的单环或（任选地）双环芳香族杂环（杂芳族），其含有最多至三个相同或不同的成环杂原子，所述成环杂原子选自N、O和/或S，并通过成环碳原子或任选地通过成环氮原子附接。实例包括：呋喃基、吡咯基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基、异噻唑基、三唑基、噁二唑基、噻二唑基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、三嗪基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并三唑基、吲哚基、吲唑基、喹啉基、异喹啉基、萘啶基、喹唑啉基、喹噁啉基、酞嗪基、吡咯并[2,3-b]吡啶、吡唑[1,5-a]吡啶、吡唑[3,4-b]吡啶基。优选的实例包括：吡唑基、咪唑基、异噻唑基、吡啶基、吲哚基、吲唑基、喹啉基、异喹啉基、萘啶基、喹唑啉基、喹噁啉基、酞嗪基、吡咯并[2,3-b]吡啶、吡唑[1,5-a]吡啶、吡唑[3,4-b]吡啶基。
卤素 在本发明的上下文中，包括氟、氯、溴和碘。优选氯或氟。
氧代基 在本发明的上下文中，是通过双键键合至碳或硫原子的氧原子。
除非另外指明，否则当本发明的化合物中的基团被取代时，该基团可以是被单或多取代。在本发明的上下文中，所有的出现不止一次的基团均彼此独立地定义。优选被一、二或三个相同或不同的取代基取代。
在本发明的上下文中，优选式(I)的化合物，其中
A 表示 CH2，
R1 表示 苯基，
其中苯基可被1至4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、氯、氰基和甲基，
R2 表示 氢、甲基、乙基或环丙基，
R3 表示 氢，
R4 表示 氢、氟、氯、甲基或乙基，
R5 表示 氢，
E 表示 氮或CR6，
其中
R6 表示 氢、氯、碘、氰基、(C1-C6)-烷基、(C2-C6)-炔基、环丙基、羟基、-OR7、-NR8R9、羟基羰基、(C1-C4)-烷氧基羰基、-C(=O)-NR10R11或5-元杂芳基，
其中(C1-C6)-烷基可被1至3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、羟基、氨基、-N(C=O)R12、甲基磺酰氨基、环丙基和环丁基，
其中R12 表示 环丙基、环丁基、甲基或乙基，
其中(C2-C6)-炔基可被环丙基或环丁基取代，
其中5-元杂芳基可被氯、甲基、乙基或羟基取代，
其中R7 表示 (C1-C4)-烷基或吡唑基，
其中(C1-C4)-烷基可被三氟甲基、甲氧基、羟基或环丙基取代，
其中R8 表示 氢、(C1-C4)-烷基或(C3-C6)-环烷基，
其中(C3-C6)-环烷基可被1至4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自甲基、乙基或羟基，
并且
其中(C1-C4)-烷基可被1至4个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、(C1-C4)-烷基、(C3-C5)-环烷基、吡咯烷基、哌啶基、甲氧基、乙氧基、羟基、氨基、三氟甲基、二氟甲基、单氟甲基和苯基，
其中苯基可被1至3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、氯、氰基和甲氧基，
其中吡咯烷基和哌啶基可被氟双取代，
并且
其中(C3-C7)-环烷基可被羟基取代，
其中R9 表示 氢或甲基，
或者
R8和R9连同其所附接至的氮原子而形成4-至7-元杂环，
其中所述4-至7-元杂环可被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自(C1-C4)-烷基、羟基羰基、羟基和氨基，
其中(C1-C4)-烷基可被羟基羰基、羟基或氨基取代，
其中R10 表示 氢、(C1-C4)-烷基或(C3-C6)-环烷基，
其中(C3-C6)-环烷基可被1至3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自甲基、乙基或羟基，
以及
其中(C1-C4)-烷基可被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、羟基、氨基、三氟甲基和二氟甲基，
其中R11 表示 氢或甲基，
或
R10和R11连同其所附接至的氮原子而形成4-至6-元杂环，
其中所述4-至6-元杂环可被1至3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、甲基、乙基、羟基和氨基，
其中甲基和乙基可被羟基取代，
L 表示 #1-CR13AR13B-(CR14AR14B)m-#2 基团，
其中
#1 表示附接至所述羰基的点，
#2 表示附接至所述嘧啶环或三嗪环的点，
m 表示数字0，
R13A 表示 氢或甲基，
R13B 表示 氢、二氟甲基、三氟甲基或甲基，
或者
R13A和R13B连同其所附接至的碳原子而形成环丙基环，
及其N-氧化物、盐、溶剂化物、所述N-氧化物的盐以及所述N-氧化物和盐的溶剂化物。
在本发明的上下文中，特别优选式(I)的化合物，其中
A 表示 CH2，
R1 表示 下式的苯基，
其中
# 表示附接至A的点，
并且
R15 表示 氢或氟，
R16和R17 表示 氟，
R2 表示 甲基，
R3 表示 氢，
R4 表示 氢、氯或甲基，
R5 表示 氢，
E 表示 氮或CR6，
其中
R6 表示 氢、氯、乙炔基、-OR7、-NR8R9、-C(=O)-NR10R11、1H-吡唑-1-基或1,3-噻唑-5-基，
其中乙炔基被环丙基取代，
其中1H-吡唑-1-基和1,3-噻唑-5-基可被甲基、乙基或羟基取代，
其中R7 表示 甲基、乙基或1H-吡唑-4-基，
其中甲基可被环丙基取代，
其中乙基可被三氟甲基、甲氧基或羟基取代，
其中R8 表示 氢、乙基、丙基或(C4-C6)-环烷基，
其中(C4-C6)-环烷基可被1或2个甲基或羟基取代基取代，
并且
其中乙基和丙基可被1至3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、甲基、乙基、丙基、环丙基、甲氧基、羟基、氨基、三氟甲基、二氟甲基、单氟甲基和苯基，
其中苯基可被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、氯和甲氧基，
并且
其中(C4-C7)-环烷基可被羟基取代，
其中R9 表示 氢，
或者
R8和R9连同其所附接至的氮原子而形成哌啶基环、吡咯烷基环或3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基环，
其中所述哌啶基环和吡咯烷基环可被甲基取代，
其中甲基可被羟基羰基或羟基取代，
并且
其中所述3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基环可被氨基取代，
其中R10 表示 氢、甲基、乙基、正丙基或环丙基，
其中甲基、乙基和正丙基可被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、氨基和三氟甲基，
其中R11 表示 氢，
或者
R10和R11连同其所附接至的氮原子而形成吡咯烷基环、哌啶基环或哌嗪基环，
其中所述吡咯烷基环可被1至3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、甲基、羟基和氨基，
其中甲基可被羟基取代，
其中所述哌嗪基环可在其氮原子处被甲基取代，
L 表示 #1-CR13AR13B-#2基团，
其中
#1 表示附接至所述羰基的点，
#2 表示附接至所述嘧啶环或三嗪环的点，
R13A 表示 甲基，
R13B 表示 三氟甲基或甲基，
及其N-氧化物、盐、溶剂化物、所述N-氧化物的盐以及所述N-氧化物和盐的溶剂化物。
在本发明的上下文中，还优选式(I)的化合物，其中
R1 表示 下式的苯基，
其中
# 表示附接至A的点，
并且
R15 表示 氢或氟，
R16和R17 表示 氟，
及其N-氧化物、盐、溶剂化物、所述N-氧化物的盐以及所述N-氧化物和盐的溶剂化物。
在本发明的上下文中，还优选式(I)的化合物，其中
R1 表示 下式的苯基，
其中
# 表示附接至A的点，
并且
R15 表示 氢，
R16和R17 表示 氟，
及其N-氧化物、盐、溶剂化物、所述N-氧化物的盐以及所述N-氧化物和盐的溶剂化物。
在本发明的上下文中，还优选式(I)的化合物，其中
R1 表示 下式的苯基，
其中
# 表示附接至A的点，
并且
R15 表示 氟，
R16和R17 表示 氟，
及其N-氧化物、盐、溶剂化物、所述N-氧化物的盐以及所述N-氧化物和盐的溶剂化物。
在本发明的上下文中，还优选式(I)的化合物，
其中
R2 表示 甲基，
及其N-氧化物、盐、溶剂化物、所述N-氧化物的盐以及所述N-氧化物和盐的溶剂化物。
在本发明的上下文中，还优选式(I)的化合物，
其中
E 表示 氮，
及其N-氧化物、盐、溶剂化物、所述N-氧化物的盐以及所述N-氧化物和盐的溶剂化物。
在本发明的上下文中，还优选式(I)的化合物，
其中
E 表示 CR6，
其中
R6 表示 氢、氯、乙炔基、-OR7、-NR8R9、-C(=O)-NR10R11、1H-吡唑-1-基或1,3-噻唑-5-基，
其中乙炔基被环丙基取代，
其中1H-吡唑-1-基和1,3-噻唑-5-基可被甲基、乙基或羟基取代，
其中R7 表示 甲基、乙基或1H-吡唑-4-基，
其中甲基可被环丙基取代，
其中乙基可被三氟甲基、甲氧基或羟基取代，
其中R8 表示 氢、乙基、丙基或(C4-C6)-环烷基，
其中(C4-C6)-环烷基可被1或2个甲基或羟基取代基取代，
并且
其中乙基和丙基可被1至3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、甲基、乙基、环丙基、丙基、甲氧基、羟基、氨基、三氟甲基、二氟甲基、单氟甲基和苯基，
其中苯基可被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、氯和甲氧基，
并且
其中(C4-C7)-环烷基可被羟基取代，
其中R9 表示 氢，
或者
R8和R9连同其所附接至的氮原子而形成哌啶基环、吡咯烷基环或3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基环，
其中所述哌啶基环和吡咯烷基环可被甲基取代，
其中甲基可被羟基羰基或羟基取代，
并且
其中所述3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基环可被氨基取代，
其中R10 表示 氢、甲基、乙基、正丙基或环丙基，
其中甲基、乙基和正丙基可被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、氨基和三氟甲基，
其中R11 表示 氢，
或者
R10和R11连同其所附接至的氮原子而形成吡咯烷基环、哌啶基环或哌嗪基环，
其中所述吡咯烷基环可被1至3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、甲基、羟基和氨基，
其中甲基可被羟基取代，
其中所述哌嗪基环可在其氮原子处被甲基取代，
及其N-氧化物、盐、溶剂化物、所述N-氧化物的盐以及所述N-氧化物和盐的溶剂化物。
在本发明的上下文中，还特别优选式(I)的化合物，
其中
E 表示 CR6，
其中
R6 表示 -NR8R9或-C(=O)-NR10R11，
其中R8 表示 氢、乙基、丙基或(C4-C6)-环烷基，
其中(C4-C6)-环烷基可被1或2个甲基或羟基取代基取代，
并且
其中乙基和丙基可被1至3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、甲基、乙基、环丙基、丙基、甲氧基、羟基、氨基、三氟甲基、二氟甲基、单氟甲基和苯基，
其中苯基可被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、氯和甲氧基，
并且
其中(C4-C7)-环烷基可被羟基取代，
其中R9 表示 氢，
或
R8和R9连同其所附接至的氮原子而形成哌啶基环、吡咯烷基环或3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基环，
其中所述哌啶基环和吡咯烷基环可被甲基取代，
其中甲基可被羟基羰基或羟基取代，
并且
其中所述3-氮杂双环[3.1.0]己-3-基环可被氨基取代，
其中R10 表示 氢、甲基、乙基、正丙基或环丙基，
其中甲基、乙基和正丙基可被1或2个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、氨基和三氟甲基，
其中R11 表示 氢，
或
R10和R11连同其所附接至的氮原子而形成吡咯烷基环、哌啶基环或哌嗪基环，
其中所述吡咯烷基环可被1至3个取代基取代，所述取代基彼此独立地选自氟、甲基、羟基和氨基，
其中甲基可被羟基取代，
其中所述哌嗪基环可在其氮原子处被甲基取代，
及其N-氧化物、盐、溶剂化物、所述N-氧化物的盐以及所述N-氧化物和盐的溶剂化物。
在本发明的上下文中，还优选式(I)的化合物，其中
L 表示 #1-CR13AR13B-#2基团，
其中
#1 表示附接至所述羰基的点，
#2 表示附接至所述嘧啶环或三嗪环的点，
R13A 表示 甲基，
R13B 表示 三氟甲基或甲基，
及其N-氧化物、盐、溶剂化物、所述N-氧化物的盐以及所述N-氧化物和盐的溶剂化物。
在本发明的上下文中，还优选式(I)的化合物，其中
R4 表示 氢、氯或甲基，
及其N-氧化物、盐、溶剂化物、所述N-氧化物的盐以及所述N-氧化物和盐的溶剂化物。
在本发明的上下文中，还特别优选式(I)的化合物，其中
R4 表示 氯，
及其N-氧化物、盐、溶剂化物、所述N-氧化物的盐以及所述N-氧化物和盐的溶剂化物。
不考虑指明的基团的特定组合，在基团的特定组合或优选组合中所指明的个别基团的定义也根据需要由其它组合的基团定义所替换。
特别优选上述优选范围中的两个或更多个的组合。
本发明还提供了制备根据本发明的式(I)的化合物的方法，其特征在于：
式(II)的化合物
其中A、R1、R2、R3、R4和R5 各自具有以上给出的含义，并且
T1 表示 (C1-C4)-烷基或苄基，
在存在合适的碱或酸的情况下在惰性溶剂中反应以得到式(III)的羧酸
其中A、R1、R2、R3、R4和R5 各自具有以上给出的含义，
并且其随后在惰性溶剂中在酰胺偶合条件下与铵盐一起被转化成式(IV)的化合物
其中A、R1、R2、R3、R4和R5 各自具有以上给出的含义，并且其随后在惰性溶剂中与三氟乙酸酐反应以得到式(V)的化合物
其中A、R1、R2、R3、R4和R5 各自具有以上给出的含义，其随后在存在烷基铝试剂的情况下在惰性溶剂中被转化成式(VI)的脒
其中A、R1、R2、R3、R4和R5 各自具有以上给出的含义，
或者
式(V)的化合物在存在合适的碱的情况下在合适的溶剂中与羟胺一起被首先转化成式(VIa)的化合物
其中A、R1、R2、R3、R4和R5 各自具有以上给出的含义，其随后在存在钯催化剂（例如活性炭钯）的情况下在惰性溶剂（例如乙醇或乙酸乙酯）中通过氢解被转化成式(VI)的脒，
其在存在合适的碱的情况下在惰性溶剂中与式(VII)的化合物反应
以得到式(VIII)的化合物
其中A、R1、R2、R3、R4、R5和L 各自具有以上给出的含义，
所述氨基在惰性溶剂中与亚硝酸异戊酯和卤素等同物一起被转化成式(IX)的化合物
其中A、R1、R2、R3、R4、R5和L 各自具有以上给出的含义，并且
X 表示 氯、溴或碘，
并且其
[A] 随后任选地在存在合适的碱的情况下在惰性溶剂中与式(X)的化合物反应
其中R8和R9 具有以上给出的含义，
以得到式(I-A)的化合物
其中A、R1、R2、R3、R4、R5、R8、R9和L 各自具有以上给出的含义
或者
[B] 式(IX)的碘化物任选地在存在合适的碱和碘化铜(I)的情况下在惰性溶剂中与式(XI)的化合物反应
其中R7 具有以上给出的含义
以得到式(I-B)的化合物
其中A、R1、R2、R3、R4、R5、R7和L 各自具有以上给出的含义
或者
[C] 式(IX)的碘化物任选地在存在合适的碱的情况下在惰性溶剂中与氰化铜(I)反应以得到式(I-C)的化合物
其中A、R1、R2、R3、R4、R5和L 各自具有以上给出的含义，并且其在惰性溶剂中与合适的水性碱一起被转化成式(I-D)的化合物
其中A、R1、R2、R3、R4、R5和L 各自具有以上给出的含义，并且其随后在惰性溶剂中与合适的水性酸一起被转化成式(I-E)的酸
其中A、R1、R2、R3、R4、R5和L 各自具有以上给出的含义，并且其随后在惰性溶剂中在酰胺偶合条件下与式(XII)的胺一起
其中R10和R11 各自具有以上给出的含义，被转化成式(I-F)的化合物
其中A、R1、R2、R3、R4、R5、R10、R11和L 各自具有以上给出的含义，
并且所得式(I)的化合物任选地，任选地与适合的(i) 溶剂和/或 (ii) 酸或碱一起，被转化成其溶剂化物、盐和/或所述盐的溶剂化物。
式(I-A)、(I-B)、(I-C)、(I-D)、(I-E)和(I-F)的化合物构成式(I)的根据本发明的化合物的子集。
所述制备方法可以通过下列合成方案（方案1和2）举例说明：
方案1：
[a): 氢氧化锂、THF/甲醇/H2O, RT; b): EDCI、HOBT、NH4Cl、N,N-二异丙基乙胺、CH2Cl2，RT; c): 三氟乙酸酐、吡啶、THF, RT; d): NH4Cl、三甲基铝、甲苯, 回流]。
方案2：
[a): 叔丁醇钾、叔丁醇，回流; b): CH2I2、亚硝酸异戊酯、1,4-二氧六环, 85℃; c): NMP, 150℃]。
方案3：
[a): CuCN、DMSO, 150℃; b): NaOH、1,4-二氧六环, 80-90℃; 然后 RT, HCl; c): HCl, 80℃; d): T3P (丙烷膦酸酐)、N,N-二异丙基乙胺、DMF, RT]。
方案4：
[a): Cu2O、Cs2CO3、2-羟基苯甲醛肟、乙腈, 160℃; 微波; b): CuI、3,4,7,8-四甲基-1,10-邻菲罗啉、Cs2CO3、甲苯, 140℃]。
方案5：
[a): 亚硝酸钠、TFA/水, 0℃; b): CH2I2、亚硝酸异戊酯、1,4-二氧六环/水, 85℃; c): PPh3、DIAD (偶氮二羧酸二异丙酯)、THF, RT]。
用于三嗪取代的工作实施例的制备方法可以通过以下合成方案（方案3）举例说明：
方案6：
[a): 水合肼、NEt3、EtOH b): EtOH c): (i) POCl3; (ii) 浓NH3、乙腈]。
式(VII)、(X)、(XI)和(XII)的化合物是市售的、从文献中已知的或可以类似于文献中已知的方法制备。
用于方法步骤(III) → (IV)和(I-E) + (XII) → (I-F)的惰性溶剂是，例如，醚（如二乙醚、二氧六环、四氢呋喃、乙二醇二甲醚或二乙二醇二甲醚）、烃（如苯、甲苯、二甲苯、己烷、环己烷或矿物油馏分）、卤代烃（如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、1,2-二氯乙烷、三氯乙烯或氯苯）或其它溶剂（如丙酮、乙酸乙酯、乙腈、吡啶、二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺、N,N'-二甲基丙烯基脲(DMPU)或N-甲基吡咯烷酮(NMP)）。同样也可使用所述溶剂的混合物。优选二氯甲烷、四氢呋喃、二甲基甲酰胺或这些溶剂的混合物。
用于在方法步骤(III) → (IV)和(I-E) + (XII) → (I-F)中形成酰胺的合适的缩合剂是，例如，碳二亚胺（如N,N'-二乙基-、N,N'-二丙基-、N,N'-二异丙基-和N,N'-二环己基碳二亚胺(DCC)或N-(3-二甲氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)）、碳酰氯衍生物（如N,N'-羰二咪唑(CDI)）、1,2-噁唑鎓化合物（如2-乙基-5-苯基-1,2-噁唑鎓 3-硫酸盐或2-叔-丁基-5-甲基异噁唑鎓过氯酸盐）、酰胺化合物（如2-乙氧基-1-乙酯基-1,2-二氢喹啉或氯甲酸异丁酯、丙烷膦酸酐(T3P)、1-氯-N,N,2-三甲基丙-1-烯-1-胺、氰基膦酸二乙酯、双(2-氧代-3-噁唑烷基)磷酰氯、苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)六氟磷酸磷、 苯并三唑-1-基氧基三(吡咯)六氟磷酸磷(PyBOP)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯(TBTU)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HBTU)、2-(2-氧代-1-(2H)-吡啶基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸酯(TPTU)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)或O-(1H-6-氯代苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸酯(TCTU)，任选地与另外的助剂（如1-羟基苯并三唑(HOBt)或N-羟基琥珀酰亚胺(HOSu)还以及如碱土金属碳酸盐（例如碳酸钠或碳酸钾或碳酸氢钠或碳酸氢钾）或有机碱如三烷基胺（例如三乙胺、N-甲基吗啉、N-甲基哌啶或N,N-二异丙基乙胺））组合。优选使用TBTU与N-甲基吗啉组合、HATU与N,N-二异丙基乙胺或或1-氯-N,N,2-三甲基丙-1-烯-1-胺组合。
缩合(III) → (IV)和(I-E) + (XII) → (I-F)通常在-20℃至+100℃的温度范围内进行，优选在0℃至+60℃。转化可以在大气压、加压或减压下进行(例如0.5至5巴)。通常，反应在大气压下进行。
作为另外一种选择，式(III)或(I-E)的羧酸也可以首先被转化成对应的碳酰氯，并随后使后者与式(IV)的胺直接或在单独的转化中反应以得到本发明的化合物。从羧酸形成碳酰氯通过本领域技术人员已知的方法实现，例如通过用氯化亚砜、硫酰氯或草酰氯在存在合适的碱的情况下（例如在存在吡啶的情况下）处理，以及任选地加入二甲基甲酰胺，任选地在合适的惰性溶剂中。
式(II)的化合物中的酯基T1的水解由惯用方法通过在惰性溶剂中用酸或碱处理所述酯而实现，在后一种情况中所形成的盐首先通过用酸处理而被转化成游离羧酸。就叔-丁酯而言，酯水解优选用酸实现。就苄酯而言，酯水解优选通过用活性炭钯或雷尼镍氢解实现。
适用于此反应的惰性溶剂是水或酯水解惯用的有机溶剂。这些优选地包括醇（如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇或叔丁醇）或醚（如二乙醚、四氢呋喃、二氧六环或乙二醇二甲醚）或其它溶剂（如丙酮、二氯甲烷、二甲基甲酰胺或二甲基亚砜）。也可使用所述溶剂的混合物。就碱性酯水解而言，优选使用水与二氧六环、四氢呋喃、甲醇和/或乙醇的混合物。
适用于酯水解的碱是惯用的无机碱。这些优选地包括碱金属或碱土金属的氢氧化物（例如氢氧化钠、氢氧化锂、氢氧化钾或氢氧化钡）或碱金属或碱土金属的碳酸盐（如碳酸钠、碳酸钾或碳酸钙）。特别优选氢氧化钠或氢氧化锂。
适用于酯裂解的酸通常是硫酸、氯化氢/盐酸、溴化氢/氢溴酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、甲苯磺酸、甲磺酸或三氟甲磺酸或其混合物，任选地加入水。优选氯化氢或三氟乙酸（就叔丁酯而言）和盐酸（就甲酯而言）。
酯水解通常在0℃至+100℃的温度范围内进行，优选+0℃至+50℃。
这些转化可以在大气压、加压或减压下进行（例如0.5至5巴）。通常，反应各自在大气压下进行。
用于方法步骤(IV) → (V)的惰性溶剂是，例如，醚（如二乙醚、二氧六环、四氢呋喃、乙二醇二甲醚或二乙二醇二甲醚）、烃（如苯、甲苯、二甲苯、己烷、环己烷或矿物油馏分）或其它溶剂（如丙酮、乙酸乙酯、乙腈、吡啶、二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺、N,N'-二甲基丙烯基脲(DMPU)或N-甲基吡咯烷酮(NMP)）。同样也可使用所述溶剂的混合物。优选四氢呋喃。
反应(IV) → (V)通常在+20℃至+100℃的温度范围内进行，优选+20℃至+50℃，任选地在微波中。转化可以在大气压、加压或减压下进行（例如0.5至5巴的范围内）。通常，反应在大气压下进行。
用于方法步骤(V) → (VI)的惰性溶剂是烃（如苯、甲苯、二甲苯、己烷、环己烷或矿物油馏分）或其它溶剂（如乙腈、吡啶、二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺、N,N'-二甲基丙烯基脲(DMPU)或N-甲基吡咯烷酮(NMP)）。同样也可使用所述溶剂的混合物。优选甲苯。
反应(V) → (VI)通常在+20℃至+150℃的温度范围内进行，优选+80℃至+130℃，任选地在微波中。转化可以在大气压、加压或减压下进行（例如0.5至5巴的范围内）。通常，反应在大气压下进行。
用于方法步骤(VI) + (VII) → (VIII)的惰性溶剂是，例如，醇（如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇或叔丁醇）、醚（如二乙醚、二氧六环、四氢呋喃、乙二醇二甲醚或二乙二醇二甲醚）、烃（如苯、甲苯、二甲苯、己烷、环己烷或矿物油馏分）或其它溶剂（如二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)、N,N'-二甲基丙烯基脲(DMPU)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、吡啶、乙腈、环丁砜或水）。也可使用所述溶剂的混合物。优选叔丁醇。
适用于方法步骤(VI) + (VII) → (VIII)的碱是碱金属的氢氧化物（如例如氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾）、碱金属的碳酸盐（如碳酸锂、碳酸钠、碳酸钾或碳酸铯）、碱金属的碳酸氢盐（如碳酸氢钠或碳酸氢钾）、碱金属的醇盐（如甲醇钠或甲醇钾、乙醇钠或乙醇钾或叔丁醇钾）或有机胺（如三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(DBU)或1,5-二氮杂双环[4.3.0]壬-5-烯(DBN)）。优选叔丁醇钾。
反应(VI) + (VII) → (VIII)通常在+20℃至+150℃的温度范围内进行，优选+75℃至+100℃，任选地在微波中。转化可以在大气压、加压或减压下进行（例如0.5至5巴）。通常，反应在大气压下进行。
方法步骤(VIII) → (IX)在有或没有溶剂的情况下进行。合适的溶剂是在反应条件下呈惰性的所有有机溶剂。优选的溶剂是乙腈、1,4-二氧六环和二甲氧基乙烷。
反应(VIII) → (IX)通常在+20℃至+100℃的温度范围内进行，优选+50℃至+100℃，任选地在微波中。转化可以在大气压、加压或减压下进行（例如0.5至5巴的范围内）。通常，反应在大气压下进行。
适于反应(VIII) → (IX)的卤素源是，例如，二碘甲烷；碘化铯、碘和碘化铜(I)的混合物、溴化铜(II)、氯化铜(II)或碘化钾。
用于方法步骤(IX) + (X) → (I-A)和(IX) + (XI) → (I-B)和(IX) → (I-C)的惰性溶剂是，例如，醚（如二乙醚、二氧六环、四氢呋喃、乙二醇二甲醚或二乙二醇二甲醚）、烃（如苯、甲苯、二甲苯、己烷、环己烷或矿物油馏分）或其它溶剂（如二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)、N,N'-二甲基丙烯基脲(DMPU)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、吡啶、乙腈或环丁砜）。也可使用所述溶剂的混合物。优选DMSO或NMP。
反应(IX) + (X) → (I-A)和(IX) + (XI) → (I-B)和(IX) → (I-C)通常在+20℃至+180℃的温度范围内进行，优选+120℃至+180℃，任选地在微波中。转化可以在大气压、加压或减压下进行（例如0.5至5巴的范围内）。通常，反应在大气压下进行。
反应(IX) + (XI) → (I-B)在存在合适的铜催化剂（如例如碘化铜(I)）的情况下进行，加入3,4,7,8-四甲基-1,10-邻菲罗啉和合适的碱如例如碱土金属的碳酸盐（如碳酸锂、碳酸钠、碳酸钾、碳酸钙或碳酸铯，优选碳酸铯）。
适用于方法步骤(I-C) → (I-D)的碱是氢氧化钠/氢氧化钠水溶液、氢氧化钾、氢氧化锂、氢氧化钡或其混合物，在适当时加入水。优选使用氢氧化钠水溶液。
适用于反应(IC) → (I-D)的溶剂是水、THF、1,4-二氧六环、DMF或DMSO。也可使用所述溶剂的混合物。
转化(I-C) → (I-D)通常在+20℃至+100℃的温度范围内进行，优选在65℃至+100℃。转化可以在大气压、加压或减压下进行(例如0.5至5巴)。通常，反应在大气压下进行。
适用于方法步骤(I-D) → (I-E)的酸是氯化氢/盐酸、溴化氢/氢溴酸、硫酸、乙酸或其混合物，任选地加入水。优选使用盐酸。
适用于反应(I-D) → (I-E)的溶剂是水、THF、1,4-二氧六环、DMF或DMSO。也可使用所述溶剂的混合物。
转化(I-D) → (I-E)通常在+20℃至+100℃的温度范围内进行，优选在75℃至+100℃。转化可以在大气压、加压或减压下进行(例如0.5至5巴)。通常，反应在大气压下进行。
式(II)的化合物是文献中已知的或可以通过如下制备：使式(XIII)的化合物
其中R3、R4和R5具有以上给出的含义
在存在合适的碱的情况下在惰性溶剂中与式(XIV)的化合物反应
其中R1 具有以上给出的含义，并且
X1 表示氯、溴、碘、O-三氟甲磺酰基或O-甲磺酰基，
以得到式(XV)的化合物
其中R1、R3、R4和R5 各自具有以上给出的含义，
并随后使其在惰性溶剂中与式(XVI)的化合物反应
其中R2和T1 各自具有以上给出的含义。
所述方法通过以下方案（方案3）举例说明：
方案3：
[a): i) NaOMe、MeOH，RT; ii) DMSO，RT; b): EtOH，分子筛, 80℃]。
可以改变所示合成顺序，使得相应的反应步骤以不同顺序进行。此类改变的合成顺序的实例示于方案4中。
方案4：
[a): EtOH, 分子筛, 80℃; b): i) Cs2CO3、DMF, 50℃]。
用于方法步骤(XIII) + (XIV) → (XV)的惰性溶剂是，例如，卤代烃（如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、三氯乙烯或氯苯）、醚（如二乙醚、二氧六环、四氢呋喃、乙二醇二甲醚或二乙二醇二甲醚）、烃（如苯、甲苯、二甲苯、己烷、环己烷或矿物油馏分）或其它溶剂（如丙酮、甲基乙基酮、乙酸乙酯、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、N,N'-二甲基丙烯基脲(DMPU)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)或吡啶）。也可使用所述溶剂的混合物。优选使用二甲基甲酰胺或二甲基亚砜。
适用于方法步骤(XIII) + (XIV) → (XV)的碱是惯用的无机或有机碱。这些优选地包括碱金属的氢氧化物（例如氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾）、碱金属或碱土金属的碳酸盐（如碳酸锂、碳酸钠、碳酸钾、碳酸钙或碳酸铯，任选地加入碱金属碘化物（例如碘化钠或碘化钾））、碱金属的醇盐（如甲醇钠或甲醇钾、乙醇钠或乙醇钾或叔丁醇钠或叔丁醇钾）、碱金属的氢化物（如氢化钠或氢化钾）、酰胺（如氨基钠、双(三甲基硅基)氨基锂或双(三甲基硅基)氨基钾或二异丙基氨基锂）或有机胺（如三乙胺、N-甲基吗啉、N-甲基哌啶、N,N-二异丙基乙胺、吡啶、1,5-二氮杂双环[4.3.0]壬-5-烯(DBN)、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(DBU)或1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷(DABCO®)）。优选使用碳酸钾、碳酸铯或甲醇钠。
反应通常在0℃至+120℃的温度范围内进行，优选+20℃至+80℃，任选地在微波中。转化可以在大气压、加压或减压下进行（例如0.5至5巴）。
用于闭环以得到咪唑并[1,2-a]吡啶基础框架(XV) + (XVI) → (II)的惰性溶剂是惯用的有机溶剂。这些优选地包括醇（如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇或叔丁醇）或醚（如二乙醚、四氢呋喃、二氧六环或乙二醇二甲醚）或其它溶剂（如丙酮、二氯甲烷、二甲基甲酰胺或二甲基亚砜）。也可使用所述溶剂的混合物。优选使用乙醇。
闭环通常在+50℃至+150℃的温度范围内进行，优选+50℃至+100℃，任选地在微波中。
闭环(XV) + (XVI) → (II)任选地在存在脱水反应添加剂的情况下进行，例如在存在分子筛(孔径4Å)的情况下。反应(XV) + (XVI) → (II)使用过量的式(XVI)的试剂进行，例如用1至20当量的试剂(XVI)，其中此试剂可以一次性或分批次加入。
本发明的另外的化合物也可以任选地通过如下制备：从通过以上方法获得的具有式的化合物(I)出发，转化个别取代基（尤其是那些针对R6所列的）的官能团。这些转化通过本领域技术人员已知的惯用方法进行，并且包括：例如，反应如亲核和亲电取代、氧化、还原、氢化、过渡金属催化的偶合反应、消除、烷化、酰胺化、酯化、酯水解、醚化、醚水解、形成碳酰胺以及引入和移除临时保护基团。
根据本发明的化合物起到有效的可溶性鸟苷酸环化酶刺激因子和/或磷酸二酯酶5抑制剂的作用，具有有用的药理学性质并且可以被用于预防和治疗人类和动物的疾病。本发明的化合物提供了另外的治疗替代方案并因此拓展了药学领域。
本发明的化合物带来血管舒张和抑制血小板聚集，并导致血压下降和冠状血流上升。这些作用产生于可溶性鸟苷酸环化酶的直接刺激和细胞内的cGMP增加。此外，本发明的化合物增强了增加cGMP水平的物质（例如EDRF（内皮衍生舒张因子）、NO供体、原卟啉IX、花生四烯酸或苯基肼衍生物）的作用。
本发明的化合物适用于治疗和/或预防心脑血管的、肺部的、血栓栓塞的和纤维化的病症。
因此，本发明的化合物可以在药物中用于治疗和/预防心血管的病症，例如高血压、顽固性高血压、急性和慢性心脏衰竭、冠状心脏疾病、稳定型和不稳定型心绞痛、外周和心脏血管病症、心律失常、心房和心室心律失常和传导障碍，例如房室阻断程度I-III（AB阻断I-III）、室上性心动过速、心房颤动、心房扑动、心室颤动、心室扑动、室性心律失常、尖端扭转型室性心动过速（Torsade de pointes tachycardia）、心房和心室额外收缩、AV-交界性额外收缩、病态窦房结综合征、昏厥、AV-结折返性心动过速、Wolff-Parkinson-White综合征、急性冠脉综合征（ACS）、自身免疫性心肌病症（心包炎、心内膜炎、valvolitis、主动脉炎、心肌症）、休克（例如心源性休克、感染性休克和过敏性休克）、动脉瘤、拳击手型心肌病（心室早发性收缩（PVC）），用于治疗和/或预防血栓栓塞的病症和局部贫血，例如心肌缺血、心肌梗塞、中风、心脏肥大、短暂缺血性发作、先兆子痫、炎性心血管病症、冠状动脉和外周动脉的痉挛、水肿形成（例如肺水肿、脑水肿、肾水肿或心力衰竭引起的水肿）、末梢循环障碍、再灌注损伤、动脉和静脉血栓形成、微量白蛋白尿、心肌供血不足、血管内皮功能障碍，防止再狭窄，例如在溶栓治疗，经皮腔内血管成形术（PTA）、腔内冠状动脉成形术（PTCA）、心脏移植和搭桥手术后，以及微血管和大血管损伤（血管炎）、增加的纤维蛋白原的和低密度脂蛋白（LDL）的水平和增加的纤维蛋白溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）浓度，也可用于治疗和/或预防勃起功能障碍和女性性功能障碍。
在本发明的上下文中，术语“心力衰竭”涵盖了急性和慢性的心力衰竭表现形式，也包括特殊或相关的疾病形式，如急性代偿失调性心力衰竭、右心衰竭、左心衰竭、整体衰竭、缺血性心肌病、扩张型心肌病、肥厚型心肌病、特发性心肌病、先天性心脏缺损、心脏瓣膜缺损伴随的心力衰竭、二尖瓣狭窄、二尖瓣关闭不全、主动脉瓣狭窄、主动脉瓣关闭不全、三尖瓣狭窄、三尖瓣关闭不全、肺动脉瓣狭窄、肺动脉瓣关闭不全、组合性心脏瓣膜缺损、心肌炎症(心肌炎)、慢性心肌炎、急性心肌炎、病毒性心肌炎、糖尿病性心力衰竭、酒精中毒性心肌病、心脏贮积性疾病（kardiale Speichererkrankungen）、舒张性心力衰竭和收缩性心力衰竭、以及现有慢性心力衰竭的急性期(恶化性心力衰竭)。
另外，本发明的化合物还可以用于治疗和/或预防动脉硬化、脂类代谢紊乱、低脂蛋白血症、血脂异常、高甘油三酯血症、高脂血症、高胆固醇血症、无β脂蛋白血症、谷固醇血症、黄瘤病、丹吉尔病、肥胖症、脂肪过多症和复合高脂血症和代谢综合征。
本发明的化合物也可以用于治疗和/或预防原发性和继发性雷诺现象、微循环紊乱、跛行、周围和自主神经病、糖尿病性微血管病、糖尿病性视网膜病、四肢糖尿病性溃疡、坏疽、CREST-综合征、红斑病(Erythematose)、甲癣、风湿病，以及用于促进伤口愈合。本发明的化合物也适用于治疗肌肉萎缩症，如Becker-Kiener肌肉萎缩症（BMD）和Duchenne肌肉萎缩症（DMD）。
此外，本发明的化合物适合用于治疗泌尿学疾病，例如良性前列腺综合征(BPS)、良性前列腺增生(BPH)、良性前列腺肥大(BPE)、膀胱出口梗阻(BOO)、下泌尿道综合征(LUTS，包括猫尿路综合征(FUS))、泌尿生殖器系统的疾病，包括神经源性膀胱过度活动症(OAB)和(IC)、尿失禁(UI)例如混合型失禁、急迫性失禁、压力性失禁或充溢性失禁(MUI、UUI、SUI、OUI)、骨盆痛、男性和女性泌尿生殖器系统的器官的良性和恶性疾病。
此外，本发明的化合物适合用于治疗和/或预防肾疾病，特别是急性和慢性肾机能不全和急性和慢性肾衰竭。在本发明的上下文中，术语“肾机能不全”涵盖了肾机能不全的急性和慢性表现形式，以及潜在的或者相关的肾疾病，如肾灌注不足、透析时低血压、梗阻性尿路病、肾小球病、肾小球肾炎、急性肾小球肾炎、肾小球硬化症、小管间质性疾病、肾病诸如原发性和先天性肾病、肾炎、免疫学肾疾病例如肾移植排斥、免疫复合物诱发的肾病、毒性物质诱发的肾病、造影剂诱发的肾病、糖尿病性和非糖尿病性肾病、肾盂肾炎、肾囊肿、肾硬化、高血压性肾硬化和肾病综合征，所述疾病在诊断上例如可具有如下特征：异常减少的肌酸酐和/或水排泄，异常增高的尿、氮、钾和/或肌酸酐的血浓度、改变的肾酶活性，例如谷氨酰合成酶、改变的尿渗透性或尿量、增加的微白蛋白尿、大蛋白尿、肾小球和微动脉上的损伤、肾小管扩张、高磷酸酯酶血症和/或透析需要。本发明还涵盖了本发明的化合物用于治疗和/或预防肾机能不全后遗症的用途，例如肺水肿、心力衰竭、尿毒症、贫血、电解质紊乱(例如高钾血症、低钠血症)以及骨-和碳水化合物-代谢中的紊乱。
此外，本发明的化合物也适合用于治疗和/或预防哮喘疾病、肺动脉高血压(PAH)和其它形式的肺性高血压(PH)，包括与左心室疾病有关的肺性高血压、HIV、镰状细胞贫血、血栓栓塞(CTEPH)、结节病、COPD或肺纤维化、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、急性肺损伤(ALI)、α-1-抗胰蛋白酶缺乏(AATD)、肺纤维化、肺气肿(例如吸烟诱发的肺气肿)和囊性纤维化(CF)。此外，所述的化合物也可以用作支气管扩张剂。
本发明描述的化合物还为用于控制特征在于NO/cGMP系统紊乱的中枢神经系统疾病的活性物质。它们特别适合在认知缺损后用于改善知觉、注意力、学习能力或记忆力，所述认知缺损如特别是伴随着状况/疾病/综合征发生的那些，如轻度认知损害、伴随年老而来的学习-和记忆力减退、伴随年老而来的记忆丧失、血管性痴呆、颅脑创伤、中风、中风后痴呆、创伤后颅脑创伤、一般性注意集中障碍、儿童学习和记忆力问题方面的注意集中障碍、阿尔茨海默病、路易体痴呆、额叶退化痴呆包括皮克斯综合症、帕金森病、渐进性核麻痹、皮质基底节变性痴呆、肌萎缩性侧索硬化(ALS)、亨廷顿病、脱髓鞘、多发性硬化、丘脑退化、克-雅病痴呆、HIV痴呆、伴有痴呆的精神分裂或柯萨可夫精神病。它们也适合用于治疗和/或预防中枢神经系统的疾病如焦虑状态、紧张状态和抑郁状态、中枢神经系统造成的性功能障碍和睡眠紊乱，以及用于控制病理性进食障碍和奢侈食物和上瘾性药物的使用。
此外，本发明的化合物还适合用于控制脑灌注并且是用于防治偏头疼的非常有效的药剂。它们也适合用于预防和防治大脑梗死(大脑中风)后遗症如中风、大脑缺血和颅脑创伤。本发明的化合物同样可用于防治疼痛状态和耳鸣。
另外，本发明的化合物具有抗炎作用，并可作为抗炎剂用于治疗和/或预防脓毒症(SIRS)、多器官功能衰竭(MODS、MOF)、肾的炎性疾病、慢性肠炎症(IBD、克罗恩氏病、UC)、胰腺炎、腹膜炎、风湿样疾病、炎症性皮肤疾病和炎症性眼疾病。
此外，本发明的化合物还可以用于治疗和/或预防自身免疫疾病。
本发明的化合物还适合用于治疗和/或预防内脏器官例如肺、心、肾、骨髓并特别是肝的纤维化疾病，以及皮肤纤维化和眼的纤维化疾病。在本发明的上下文中，术语纤维化疾病特别包括下面的疾病：肝纤维化、肝硬化、肺纤维化、心内膜心肌纤维化、肾病、肾小球肾炎、间质性肾纤维化、糖尿病引起的纤维化损害、骨髓纤维化和类似的纤维化疾病、硬皮病、手指溃疡、硬斑病、瘢痕疙瘩、肥厚型疤痕(包括外科手术以后)、痣、糖尿病性视网膜病变、增殖性玻璃体视网膜病变和结缔组织疾病(例如结节病)。
本发明的化合物也适合用于防治手术后瘢痕形成，例如在青光眼手术后。
本发明的化合物还可以在美容上用于老化中的和角质化的皮肤。
此外，本发明的化合物适合用于治疗和/或预防肝炎、肿瘤、骨质疏松症、青光眼和胃肌轻瘫。
本发明还提供了根据本发明的化合物在治疗和/或预防疾病（尤其是以上提到的疾病）上的用途。
本发明还提供了根据本发明的化合物在生产用于治疗和/或预防疾病（尤其是以上提到的疾病）的药物上的用途。
本发明还提供了根据本发明的化合物在生产用于治疗和/或预防心力衰竭、心绞痛、高血压、肺动脉高压、缺血、血管疾病、肾机能不全、血栓栓塞性疾病、纤维化疾病和动脉硬化的药物上的用途。
本发明还涉及使用有效量的至少一种本发明的化合物治疗和/或预防疾病（尤其是以上提到的疾病）的方法。
本发明还涉及使用有效量的至少一种本发明的化合物治疗和/或预防或预防心力衰竭、心绞痛、高血压、肺动脉高血压、缺血、血管疾病、肾机能不全、血栓栓塞性疾病、纤维化疾病和动脉硬化的方法。
根据本发明的化合物可以单独使用，或者在需要时与其它活性物质联合使用。本发明还提供了包含至少一种本发明的化合物和一种或多种其它活性化合物的药物，其特别用于治疗和/或预防前述疾病。适用于组合的活性化合物的优选实例包括：
● 有机硝酸酯和NO-供体，例如硝普钠、硝化甘油、单硝酸异山梨酯、二硝酸异山梨酯、吗多明或SIN-1和吸入性NO；
● 抑制环磷酸鸟苷(cGMP)裂解的化合物，例如，磷酸二酯酶(PDE)1, 2和/或5抑制剂，特别是PDE 5抑制剂如西地那非, 伐地那非和他达拉非；
● 抗血栓形成的试剂，例如并优选选自血小板凝集抑制剂、抗凝血剂或致纤溶（profibrinolytischen）物质；
● 降低血压的活性化合物，例如并优选选自：钙拮抗剂、血管紧张素AII-拮抗剂、ACE-抑制剂、内皮素-拮抗剂、肾素抑制剂、α-受体-阻滞剂、β-受体-阻滞剂、盐皮质激素-受体-拮抗剂和利尿剂；和/或
● 改变脂类代谢的活性化合物，例如并优选自甲状腺受体-激动剂、胆固醇合成-抑制剂，优选的实例是HMG-CoA-还原酶-抑制剂或角鲨烯合成-抑制剂，ACAT-抑制剂、CETP-抑制剂、MTP-抑制剂、PPAR-α-、PPAR-γ-和/或PPAR-δ-激动剂、胆固醇-吸收抑制剂、脂肪酶-抑制剂、聚合的胆汁酸-吸附剂、胆汁酸-重吸收抑制剂和脂蛋白（a）-拮抗剂。
抗血栓形成剂优选指的是选自血小板凝集抑制剂、抗凝血剂或致纤溶物质的化合物。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与血小板聚集抑制剂联合施用，所述血小板聚集抑制剂例如且优选是阿司匹林、氯吡格雷、噻氯匹定或双嘧达莫。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与凝血酶抑制剂联合施用，所述凝血酶抑制剂例如且优选是希美加群、达比加群、美拉加群、比伐芦定或克赛。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与GPIIb/IIIa拮抗剂联合施用，所述GPIIb/IIIa拮抗剂例如且优选是替罗非班或阿昔单抗。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与因子Xa抑制剂联合施用，所述因子Xa抑制剂例如且优选是利伐沙班、DU-176b、阿派沙班、奥米沙班、非德沙班、雷扎沙班、磺达肝素、依达肝素、PMD-3112、YM-150、KFA-1982、EMD-503982、MCM-17、MLN-1021、DX 9065a、DPC 906、JTV 803、SSR-126512或SSR-128428。
在本发明的一个优选实施方式中，本发明的化合物与肝素或低分子量（LMW）肝素衍生物联合施用。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与维生素K拮抗剂联合施用，所述维生素K拮抗剂例如且优选是香豆素。
降低血压剂优选地理解为是指选自下述的化合物：钙拮抗剂、血管紧张素AII拮抗剂、ACE抑制剂、内皮缩血管肽拮抗剂、肾素抑制剂、α-受体-阻滞剂、β-受体-阻滞剂、盐皮质激素-受体拮抗剂和利尿剂。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与钙拮抗剂联合施用，所述钙拮抗剂例如且优选是硝苯地平、氨氯地平、维拉帕米或地尔硫卓。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与α-1-受体阻滞剂联合施用，所述α-1-受体阻滞剂例如且优选是哌唑嗪。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与β-受体-阻滞剂联合施用，所述β-受体-阻滞剂例如且优选是普萘洛尔、阿替洛尔、噻吗洛尔、吲哚洛尔、阿普洛尔、氧烯洛尔、喷布洛尔、布拉洛尔、美替洛尔、纳多洛尔、甲吲洛尔、卡拉洛尔、索他洛尔、美托洛尔、倍他洛尔、塞利洛尔、比索洛尔、卡替洛尔、艾司洛尔、拉贝洛尔、卡维地洛、阿达洛尔、兰地洛尔、奈必洛尔、依泮洛尔或布新洛尔。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与血管紧张素AII拮抗剂联合施用，所述血管紧张素AII拮抗剂例如且优选是氯沙坦、坎地沙坦、缬沙坦、替米沙坦或恩布沙坦。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与ACE-抑制剂联合施用，所述ACE-抑制剂例如且优选是依那普利、卡托普利、赖诺普利、雷米普利、地拉普利、福辛普利、喹那普利（Quinopril）、培哚普利或川多普利（Trandopril）。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与内皮素-拮抗剂联合施用，所述内皮素-拮抗剂例如且优选是波生坦、达卢生坦、安倍生坦或西他生坦（Sitaxsentan）。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与肾素-抑制剂联合施用，所述肾素-抑制剂例如且优选是阿利吉仑、SPP-600或SPP-800。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与盐皮质激素-受体-拮抗剂联合施用，所述盐皮质激素-受体-拮抗剂例如且优选是螺内酯或依普利酮。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与以下药剂联合施用：袢利尿剂，例如呋塞米、托拉塞米、布美他尼和吡咯他尼；保钾利尿剂例如阿米洛利和氨苯蝶啶；醛固酮拮抗剂，例如螺内酯、坎利酸钾和依普利酮；和噻嗪利尿剂，例如氢氯噻嗪、氯噻酮、希帕胺和吲达帕胺。
脂类代谢调节剂优选理解为是指选自下述的化合物：CETP-抑制剂、甲状腺受体-激动剂、胆固醇合成-抑制剂如HMG-CoA-还原酶-或角鲨烯合成-抑制剂、ACAT-抑制剂、MTP-抑制剂、PPAR-α-、PPAR-γ-和/或PPAR-δ-激动剂、胆固醇-吸收抑制剂、聚合的胆汁酸吸附剂、胆汁酸-重吸收抑制剂、脂肪酶-抑制剂和脂蛋白(a)-拮抗剂。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与CETP抑制剂联合施用，所述CETP抑制剂例如且优选是达塞曲匹、BAY 60-5521、安塞曲匹或CETP-疫苗(CETi-1)。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与甲状腺受体-激动剂联合施用，所述甲状腺受体-激动剂例如且优选是D-甲状腺素、3,5,3'-三碘甲状腺原氨酸(T3)、CGS 23425或阿昔替罗(CGS 26214)。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与选自他汀类的HMG-CoA-还原酶-抑制剂联合施用，所述HMG-CoA-还原酶-抑制剂例如且优选是洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、罗舒伐他汀或匹伐他汀。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与角鲨烯合成-抑制剂联合施用，所述角鲨烯合成-抑制剂例如且优选是BMS-188494或TAK-475。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与ACAT-抑制剂联合施用，所述ACAT-抑制剂例如且优选是阿伐麦布、甲亚油脂酰胺、帕替麦布、Eflucimibe或SMP-797。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与MTP-抑制剂联合施用，所述MTP-抑制剂例如且优选是英普他派（Implitapide）、BMS-201038、R-103757或JTT-130。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与PPAR-γ-激动剂联合施用，所述PPAR-γ-激动剂例如且优选是吡格列酮或罗格列酮。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与PPAR-δ-激动剂联合施用，所述PPAR-δ-激动剂例如且优选是GW-501516或BAY 68-5042。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与胆固醇-吸收抑制剂联合施用，所述胆固醇-吸收抑制剂例如且优选是依折麦布、替奎安或帕马苷。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与脂肪酶-抑制剂联合施用，所述脂肪酶-抑制剂例如且优选是奥利司他。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与聚合的胆汁酸吸附剂联合施用，所述吸附剂例如且优选是考来烯胺、考来替泊、Colesolvam、考来胶或Colestimide。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与胆汁酸-重吸收抑制剂联合施用，所述胆汁酸-重吸收抑制剂例如且优选是ASBT (= IBAT)-抑制剂，例如AZD-7806、S-8921、AK-105、BARI-1741、SC-435或SC-635。
在本发明的一个优选实施方案中，本发明的化合物与脂蛋白(a)-拮抗剂联合施用，所述脂蛋白(a)-拮抗剂例如且优选是吉卡宾（Gemcabene）钙(CI-1027)或烟酸。
本发明还涉及提供了包含至少一种根据本发明的化合物、通常连同一种或多种惰性、无毒、药学上适合的赋形剂的药物，及其用于上述目的的用途。
根据本发明的化合物可全身和/或局部作用。为此目的，它们可以以适合的方式施用，例如口服、肠胃外、经肺、经鼻、舌下、经舌、经颊、直肠、真皮、经皮、结膜、耳道或作为植入物或支架施用。
根据本发明的化合物可以适合这些施用途径的施用方式施用。
适于口服施用的施用形式是根据现有技术起作用的并且快速和/或以改变的方式释放本发明的化合物的那些，并且其含有结晶形式和/或无定形化形式和/或溶解形式的本发明的化合物，例如片剂（无包衣的或包衣的片剂，例如具有胃液抗性的或延迟溶解的或不溶性的包衣，所述包衣剂控制本发明的化合物的释放）、在口腔中快速崩解的片剂或膜/糯米纸、膜/冷冻干燥粉剂、胶囊剂（例如硬或软明胶胶囊剂）、糖衣药丸、颗粒、丸剂、散剂、乳剂、混悬液、气雾剂或溶液。
可以绕开吸收步骤（例如通过静脉内、动脉内、心内、椎管内或腰椎内途径）或包括吸收（例如肌肉内、皮下、皮内、经皮或腹膜内途径）而实现肠胃外施用。适合肠胃外施用的施用形式包括以溶液、混悬液、乳剂、冷冻干燥粉剂或无菌粉末形式的注射制剂和输注制剂。
就其它施用途径而言，合适的是，例如吸入药形式（尤其是粉末吸入器和喷雾器）、滴鼻剂、-溶液或-喷剂、用于舌、舌下或经颊施用的片剂、膜剂/淀粉纸剂或胶囊剂、栓剂、耳-或眼用制剂、阴道胶囊剂、水性混悬液（洗剂、振摇混合物）、亲脂混悬液、软膏剂、乳膏剂、透皮治疗体系（例如膏药）、乳状液、糊剂、泡沫、扑粉、植入物或支架。
优选口服或肠胃外施用，尤其是口服施用。
可以将根据本发明的化合物转化成所述的施用形式。这可以以本身已知的方式，通过与惰性的、无毒的、药学上合适的助剂相混合来实现。这些助剂包括载体（例如微晶纤维素、乳糖、甘露醇）、溶剂（例如液体聚乙二醇）、乳化剂和分散剂或润湿剂（例如十二烷基硫酸钠、聚氧山梨醇酐油酸酯）、粘合剂（例如聚乙烯吡咯烷酮）、合成的和天然的聚合物（例如白蛋白）、稳定剂（例如抗氧化剂例如抗坏血酸）、着色剂（例如无机颜料例如铁氧化物）以及口味-和/或气味矫正剂。
一般而言，已经证实有利的是，在肠胃外施用时施用约0.001-1 mg/kg、优选约0.01-0.5 mg/kg体重的量实现了有效的结果。在口服施用的情况下，所述剂量为约0.001-2 mg/kg、优选约0.001-1 mg/kg体重。
尽管如此，有时可能会需要偏离所述量，更确切地说取决于体重、施用途径、个体对活性物质的应答、制剂的类型和进行施用的时间或间隔。因而，在有些情况下，少于前述最少量可能足以应付，而在另一些情况下，必须超过所述上限。在施用更大量的情况下，可能值得推荐的是，将这些量分成在一天中多次的单独施用。
下面的工作实施例说明了本发明。本发明不限于所述实施例。
除非另有说明，在下述的实验和实施例中的百分比是重量百分比，份数是重量份数。液体/液体溶液的溶剂比、稀释比和浓度数据各基于体积计。
A. 实施例
缩写和首字母缩略词：
LC/MS和HPLC 方法:
方法1 (LC-MS):
仪器：Waters ACQUITY SQD UPLC 系统; 柱: Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 µ 50 x 1 mm; 流动相A: 1 l 水 + 0.25 ml 99% 强度甲酸, 流动相B: 1 l 乙腈 + 0.25 ml 99% 强度甲酸; 梯度: 0.0 min 90% A → 1.2 min 5% A → 2.0 min 5% A; 烘箱: 50℃; 流速: 0.40 ml/min; UV 检测: 210 – 400 nm。
方法2 (LC-MS):
仪器：Micromass Quattro Premier 配有 Waters UPLC Acquity; 柱: Thermo Hypersil GOLD 1.9 µ 50 mm x 1 mm; 流动相A: 1 l 水 + 0.5 ml 50% 强度甲酸, 流动相B: 1 l 乙腈 + 0.5 ml 50% 强度甲酸; 梯度: 0.0 min 90% A → 0.1 min 90% A → 1.5 min 10% A → 2.2 min 10% A; 流速: 0.33 ml/min; 烘箱: 50℃; UV 检测: 210 nm。
方法3 (LC-MS):
MS仪器类型: Waters Micromass Quattro Micro; HPLC仪器类型: Agilent 1100 系列; 柱: Thermo Hypersil GOLD 3 µ 20 mm x 4 mm; 流动相A: 1 l 水 + 0.5 ml 50% 强度甲酸, 流动相B: 1 l 乙腈 + 0.5 ml 50% 强度甲酸; 梯度: 0.0 min 100% A → 3.0 min 10% A → 4.0 min 10% A → 4.01 min 100% A (流速 2.5 ml/min) → 5.00 min 100% A; 烘箱: 50℃; 流速: 2 ml/min; UV 检测: 210 nm。
方法4 (LC-MS):
MS仪器: Waters SQD; HPLC仪器: Waters UPLC; 柱: Zorbax SB-Aq (Agilent), 50 mm x 2.1 mm, 1.8 µm; 流动相A: 水 + 0.025% 甲酸, 流动相B: 乙腈 (ULC) + 0.025% 甲酸; 梯度: 0.0 min 98% A - 0.9 min 25% A – 1.0 min 5% A - 1.4 min 5% A – 1.41 min 98% A – 1.5 min 98% A; 烘箱: 40℃; 流速: 0.600 ml/min; UV 检测: DAD; 210 nm。
方法5 (LC-MS):
MS仪器: Waters ZQ 2000; HPLC仪器: Agilent 1100, 2-柱系统, 自动取样机: HTC PAL; 柱: YMC-ODS-AQ, 50 mm x 4.6 mm, 3.0 µm; 流动相A: 水 + 0.1% 甲酸, 流动相B: 乙腈 + 0.1% 甲酸; 梯度: 0.0 min 100% A - 0.2 min 95% A - 1.8 min 25% A - 1.9 min 10% A - 2.0 min 5% A - 3.2 min 5% A - 3.21 min 100% A - 3.35 min 100% A; 烘箱: 40℃; 流速: 3.0 ml/min; UV 检测: 210 nm。
方法6 (制备型HPLC):
柱: Macherey-Nagel VP 50/21 Nucleosil 100-5 C18 Nautilus。流速: 25 ml/min。梯度: A = 乙腈, B = 水 + 0.1% 甲酸, 0 min 10% A ; 2.00 min 10% A ; 6.00 min 90% A ; 7.00 min 90% A ; 7.10 min 10% A ; 8 min 10% A; UV 检测: 220 nm。
方法7 (制备型HPLC):
柱: Phenomenex Gemini C18; 110A, AXIA, 5 µm, 21.2 X 50 mm 5 micron; 梯度: A = 水 + 0.1% 浓氨水, B = 乙腈, 0 min = 10% B, 2 min = 10% B, 6 min = 90% B, 7 min = 90% B, 7.1 min = 10% B, 8 min = 10% B, 流速 25 ml/min, UV 检测 220 nm。
方法8 (制备型HPLC):
柱: Axia Gemini 5 µ C18 110 A, 50 x 21.5 mm, P/NO: 00B-4435-P0-AX, S/NO: 35997-2, 梯度: A = 水 + 0.1% 浓氨水, B = 乙腈, 0 min = 30% B, 2 min = 30% B, 6 min = 100% B, 7 min = 100% B, 7.1 min = 30% B, 8 min = 30% B, 流速 25 ml/min, UV 检测 220 nm。
方法9 (制备型HPLC):
柱: Macherey-Nagel VP 50/21 Nucleosil 100-5 C18 Nautilus。流速: 25 ml/min。梯度: A = 水 + 0.1% 甲酸, B = 甲醇, 0 min = 30% B, 2 min = 30% B, 6 min = 100% B, 7 min = 100% B, 7.1 min = 30% B, 8 min = 30% B, 流速 25 ml/min, UV 检测 220 nm。
方法10 (制备型HPLC):
柱: Macherey-Nagel VP 50/21 Nucleosil 100-5 C18 Nautilus。流速: 25 ml/min。梯度: A = 水 + 0.1% 浓氨水, B = 甲醇, 0 min = 30% B, 2 min = 30% B, 6 min = 100% B, 7 min = 100% B, 7.1 min = 30% B, 8 min = 30% B, 流速 25 ml/min, UV 检测 220 nm。
方法11 (制备型HPLC):
MS仪器: Waters, HPLC仪器: Waters (柱 Waters X-Bridge C18, 18 mm x 50 mm, 5 µm, 流动相A: 水 + 0.05% 三乙胺, 流动相B: 乙腈 (ULC) + 0.05% 三乙胺, 梯度: 0.0 min 95%A – 0.15 min 95%A – 8.0 min 5%A – 9.0 min 5%A; 流速: 40 ml/min; UV 检测: DAD; 210 – 400 nm)。
或：
MS仪器: Waters, HPLC仪器: Waters (柱 Phenomenex Luna 5 µ C18(2) 100A, AXIA Tech.50 x 21.2 mm, 流动相A: 水 + 0.05% 甲酸, 流动相B: 乙腈 (ULC) + 0.05% 甲酸, 梯度: 0.0 min 95%A – 0.15 min 95%A – 8.0 min 5%A – 9.0 min 5%A; 流速: 40 ml/min; UV 检测: DAD; 210 – 400 nm)。
方法12 (LC-MS):
MS仪器: Waters SQD; HPLC仪器: Waters UPLC; 柱: Zorbax SB-Aq (Agilent), 50 mm x 2.1 mm, 1.8 µm; 流动相A: 水 + 0.025% 甲酸, 流动相B: 乙腈 (ULC) + 0.025% 甲酸; 梯度: 0.0 min 98%A - 0.9 min 25%A – 1.0 min 5%A - 1.4 min 5%A – 1.41 min 98%A – 1.5 min 98%A; 烘箱: 40℃; 流速: 0.600 ml/min; UV 检测: DAD; 210 nm。
方法13 (DCI-MS):
仪器：DSQ II; Thermo Fisher-Scientific; DCI 加 NH3, 流速: 1.1 ml/min; 源温度: 200℃; 电离能 70 eV; 将DCI丝加热至800℃; 质量范围80-900。
方法14 (GC-MS):
仪器：Micromass GCT, GC6890; 柱: Restek RTX-35, 15 m x 200 µm x 0.33 µm; 恒定氦流速: 0.88 ml/min; 烘箱: 70℃; 入口: 250℃; 梯度: 70℃, 30℃/min → 310℃ (保持3 min)。
方法15 (MS):
仪器：Waters ZQ; 电离型: ESI (+); 流动相: 乙腈/水。
方法16 (LCMS):
仪器：Waters ACQUITY SQD UPLC 系统; 柱: Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 µ 30 x 2 mm; 流动相A: 1 l 水 + 0.25 ml 99% 强度甲酸, 流动相B: 1 l 乙腈 + 0.25 ml 99% 强度甲酸; 梯度: 0.0 min 90% A → 1.2 min 5% A → 2.0 min 5% A 烘箱: 50℃; 流速: 0.60 ml/min; UV 检测: 208 – 400 nm。
方法17 (LC-MS):
仪器：Micromass Quattro Premier 配有 Waters UPLC Acquity; 柱: Thermo Hypersil GOLD 1.9 µ 50 x 1 mm; 流动相A: 1 l 水 + 0.5 ml 50% 强度甲酸, 流动相B: 1 l 乙腈 + 0.5 ml 50% 强度甲酸; 梯度: 0.0 min 97% A → 0.5 min 97% A → 3.2 min 5% A → 4.0 min 5% A 烘箱: 50℃; 流速: 0.3 ml/min; UV 检测: 210 nm。
方法18 (制备型HPLC):
Chromatorex C18 10 µ 250x20 mm 梯度: A = 水 + 0.5% 甲酸, B= 乙腈, 0 min = 5% B, 3 min = 5% B 预冲洗（不含物质）, 然后注射, 5 min = 5% B, 25 min = 30% B, 38 min = 30% B, 38.1 min = 95% B, 43 min = 95% B, 43.01 min = 5% B, 48.0 min = 5% B 流速 20 ml/min, 波长 210 nm。
方法19 (制备型HPLC):
Chromatorex C18 10 µ 250x20 mm 梯度: A = 水 + 0.5% 甲酸, B= 乙腈, 0 min = 5% B, 3 min = 5% B 预冲洗（不含物质）, 然后注射, 5 min = 5% B, 25 min = 50% B, 38 min = 50% B, 38.1 min = 95% B, 43 min = 95% B, 43.01 min = 5% B, 48.0 min = 5% B 流速 20 ml/min, 波长 210 nm。
方法20 (制备型HPLC):
XBridge Prep.C18 5 µ 50x19 mm 梯度: A = 水 + 0.5% 氢氧化铵, B= 乙腈, 0 min = 5% B, 3 min = 5% B 预冲洗（不含物质）, 然后注射, 5 min = 5% B, 25 min = 50% B, 38 min = 50% B, 38.1 min = 95% B, 43 min = 95% B, 43.01 min = 5% B, 48.0 min = 5% B 流速 15 ml/min, 波长 210 nm。
方法21 (制备型HPLC):
Chromatorex 10 µ 250x20 mm 梯度: A = 水, B = 乙腈, 0 min = 5% B, 3 min = 5% B 预冲洗（不含物质）, 然后注射, 5 min = 5% B, 25 min = 95% B, 38 min = 95% B, 38.1 min = 5% B, 40 min = 5% B, 流速 20 ml/min, 波长 210 nm。
方法22 (LC-MS):
MS仪器: Waters (Micromass) QM; HPLC仪器: Agilent 1100 系列; 柱: Agilent ZORBAX Extend-C18 3.0 x 50 mm 3.5 micron; 流动相A: 1 l 水 + 0.01 mol 碳酸铵, 流动相B: 1 l 乙腈; 梯度: 0.0 min 98% A → 0.2 min 98% A → 3.0 min 5% A→ 4.5 min 5% A; 烘箱: 40℃; 流速: 1.75 ml/min; UV 检测: 210 nm。
方法23 (LC-MS):
仪器：Agilent MS Quad 6150; HPLC: Agilent 1290; 柱: Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 µ 50 x 2.1 mm; 流动相A: 1 l 水 + 0.25 ml 99% 强度甲酸, 流动相B: 1 l 乙腈 + 0.25 ml 99% 强度甲酸; 梯度: 0.0 min 90% A → 0.3 min 90% A → 1.7 min 5% A → 3.0 min 5% A 烘箱: 50℃; 流速: 1.20 ml/min; UV 检测: 205 – 305 nm。
方法24 (LC-MS):
MS仪器类型: Waters Synapt G2S; UPLC仪器类型: Waters Acquity I-CLASS; 柱: Waters, HSST3, 2.1 x 50 mm, C18 1.8 µm; 流动相A: 1 l 水 + 0.01% 甲酸; 流动相B: 1 l 乙腈 + 0.01% 甲酸; 梯度: 0.0 min 10% B → 0.3 min 10% B → 1.7 min 95% B → 2.5 min 95% B; 烘箱: 50℃; 流速: 1.20 ml/min; UV 检测: 210 nm。
方法25 (FIA/MS, ES):
仪器：Waters ZQ 2000; 电喷雾电离; 流动相A: 1 l 水 + 0.25 ml 99% 强度甲酸, 流动相B: 1 l 乙腈 + 0.25 ml 99% 强度甲酸; 25% A, 75% B; 流速: 0.25 ml/min。
除非另有说明，在下述的实验和实施例中的百分比是重量百分比，份数是重量份数。液体/液体溶液的溶剂比、稀释比和浓度数据各基于体积计。
在下面的段落中报道的1H NMR谱中质子信号的多样性表示在各种情况下观测到的信号形式并且不考虑任何高阶信号现象。在所有的1H NMR谱数据中，化学偏移δ以ppm表示。
当本发明的化合物由上述方法通过制备型HPLC纯化（其中洗脱液含有添加剂，例如三氟乙酸、甲酸或氨）时，如果本发明的化合物含有足够碱性或酸性的官能度，则本发明的化合物可以盐的形式（例如以三氟乙酸盐、甲酸盐或铵盐的形式）获得。此类盐可以通过本领域技术人员已知的各种方法转化成对应的游离碱或酸。
在下面本发明的合成中间体和工作实施例中描述的咪唑吡啶可以在酸性条件下始终以盐的形式存在，甚至是以亚化学计量的量，这在1H NMR中并不明显并且在相应的IUPAC名称和结构式中没有任何具体规范及其注释。
就以下描述的本发明的合成中间体和工作实施例而言，任何以对应的碱或酸的盐的形式指明的化合物通常是通过相应的制备和/或纯化方法获得的准确化学计量组成未知的盐。除非更详细地指明，否则对名称和结构式的附加，如“盐酸盐”、“三氟乙酸盐”、“钠盐”或“x HCl”、“x CF3COOH”、“x Na+”不应当被理解成对于此类盐具有化学计量的意义，而是相对于其中提到的成盐组分仅具有描述性质。
如果合成中间体或工作实施例或其盐是通过所述制备和/或纯化方法以具有未知的化学计量组成（如果其具有确定类型）的溶剂化物（例如水合物）形式获得的，则这可以相应地适用。
起始化合物和中间体：
实施例1A
3-[(2,6-二氟苄基)氧基]吡啶-2-胺
在室温下，先将51 g 甲醇钠(953 mmol, 1.05 当量)置于1000 ml 甲醇中，加入100 g 2-氨基-3-羟基吡啶(908 mmol, 1 当量)并将混合物在室温下搅拌另一个15 min。在减压下浓缩反应混合物，将残留物吸收在2500 ml DMSO中并加入197 g 2,6-二氟苄基溴(953 mmol, 1.05 当量)。在室温下4 h后，将反应混合物倒入20 l的水中，将混合物再搅拌15 min并滤掉固体。用1 l 水和100 ml 异丙醇以及500 ml 石油醚洗涤固体并在高度真空下干燥。从而得到171 g 目标化合物(理论值的78%)。
实施例2A
8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
先将170 g 3-[(2,6-二氟苄基)氧基]吡啶-2-胺(实施例1A; 719 mmol, 1 当量)置于3800 ml 乙醇中，并加入151 g 分子筛3Å粉末 和623 g 2-氯乙酸乙酯(3.6 mol, 5 当量)。将反应混合物在回流下加热24 h并随后通过硅胶过滤并在减压下浓缩。将混合物在室温下保持48 h并滤掉形成的固体。然后将固体用少量异丙醇搅拌三次并随后滤掉，并用二乙醚洗涤。从而得到60.8 g (理论值的23%)目标化合物。将过滤步骤中合并的滤液浓缩并将残留物在硅胶上使用流动相环己烷/二乙醚进行色谱分离。从而得到另外46.5 g (理论值的18%; 总产率: 理论值的41%)目标化合物。
实施例3A
8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸
将107 g 8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯(实施例2A; 300 mmol, 1 当量)溶于2.8 l THF/甲醇(1:1)中，加入1.5 l 1 N 氢氧化锂水溶液(1.5 mol, 5 当量)并在室温下搅拌混合物16 h。在减压下移除有机溶剂并将所得水溶液在冰浴中使用1 N 盐酸水溶液调节至pH 3-4。滤掉所得固体，用水和异丙醇洗涤并在减压下干燥。从而得到92 g (理论值的95%)目标化合物。
实施例4A
5-氯-2-硝基吡啶-3-醇
用冰冷却的同时，将30 g 5-氯代吡啶-3-醇(232 mmol, 1 当量)溶于228 ml 浓硫酸中，在0℃缓慢加入24 ml 浓硝酸。将反应加热至室温、搅拌过夜并随后搅入冰/水混合物并再搅拌30 min。滤掉固体，用冷水洗涤并风干。从而得到33 g (理论值的82%)目标化合物，其无需进一步纯化即可用于下一步反应。
实施例5A
5-氯-3-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-硝基吡啶
先将33 g 5-氯-2-硝基吡啶-3-醇(实施例4A; 189 mmol, 1 当量)和61.6 g 碳酸铯(189 mmol, 1 当量)置于528 ml DMF中，加入40.4 g 2,6-二氟苄基溴(189 mmol, 1 当量)并将混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物搅入水/1N 盐酸水溶液。滤掉固体，用水洗涤并风干。从而得到54.9 g (理论值的97%)目标化合物。
实施例6A
5-氯-3-[(2,6-二氟苄基)氧基]吡啶-2-胺
先将59.7 g 5-氯-3-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-硝基吡啶(实施例5A; 199 mmol, 1 当量)置于600 ml 乙醇中，加入34.4 g 铁粉(616 mmol, 3.1 当量)并将混合物加热回流。缓慢滴入152 ml 浓盐酸，并使混合物再沸腾回流30 min。使反应混合物冷却并搅入冰/水混合物。将所得混合物用乙酸钠调节至pH 5。滤掉固体，用水洗涤并风干，并随后在减压下于50℃干燥。从而得到52.7 g (理论值的98%)目标化合物。
实施例7A
6-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
先将40 g 5-氯-3-[(2,6-二氟苄基)氧基]吡啶-2-胺(实施例6A; 147.8 mmol, 1 当量)置于800 ml 乙醇中，加入30 g 分子筛3Å粉末 和128 g 2-氯乙酸乙酯(739 mmol, 5 当量)并将混合物加热回流过夜。浓缩反应混合物，并将残留物吸收在乙酸乙酯中并过滤。将乙酸乙酯相用水洗涤，干燥，过滤并浓缩。从而得到44 g (理论值的78%)目标化合物。
实施例8A
6-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸
将44 g 6-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯(实施例7A; 115 mmol, 1 当量)溶于550 ml THF和700 ml 甲醇中，加入13.8 g 氢氧化锂(溶于150 ml 水中; 577 mmol, 5 当量)并将混合物在室温下搅拌过夜。加入1N 盐酸水溶液并将混合物在减压下浓缩。滤掉所得固体并用水洗涤。从而得到34 g 目标化合物(理论值的84%)。
实施例9A
6-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
先将7.0 g (19.85 mmol)来自实施例8A的 6-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸置于379 ml 二氯甲烷中，加入5.71 g (29.77 mmol) 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和4.02 g (29.77 mmol) 1-羟基-1H-苯并三唑水合物并将混合物在室温下搅拌10 min。随后，加入5.31 g (99.23 mmol) 氯化铵和24.20 ml (138.9 mmol) N,N-二异丙基乙胺并将混合物在室温下搅拌过夜。向反应混合物中加水，并滤掉存在的固体，然后与水一起在50℃搅拌30 min，再次过滤并用水洗涤。从而得到6.54 g (理论值的93%)目标化合物。
实施例10A
6-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-腈
先将6.43 g (18.29 mmol) 来自实施例9A的 6-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺置于82 ml THF中，并加入3.79 ml (46.82 mmol) 吡啶。然后在室温下，滴入6.61 ml (46.82 mmol) 三氟乙酸酐，并将反应混合物在室温下搅拌1 h。随后，将混合物加入水中并用乙酸乙酯萃取三次。将合并的有机相用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤一次、用1 N 盐酸水溶液洗涤一次并用氯化钠的饱和水溶液洗涤一次，用硫酸钠干燥并在旋转蒸发仪上浓缩。将残留物在减压下干燥过夜。从而得到6.09 g (理论值的90%; 纯度: 90%)目标化合物。
实施例11A
6-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲脒
使1.70 g (4.59 mmol; 纯度 90%) 来自实施例10A的 6-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-腈以类似于实施例22A的程序反应。从而得到1.79 g (理论值的62%；纯度约56%)目标化合物。
实施例12A
5-溴代-3-[(2,6-二氟苄基)氧基]吡啶-2-胺
将32.6 g 3-[(2,6-二氟苄基)氧基]吡啶-2-胺(实施例1A; 138 mmol, 1 当量)悬浮于552 ml 10% 强度硫酸水溶液中，并将混合物冷却至0℃。将8.5 ml 溴(165 mmol, 1.2 当量)溶于85 ml 乙酸中并随后，在90 min内，滴入用冰冷却的反应溶液中。在加入完毕后，将混合物在0℃再搅拌90 min并随后用600 ml 乙酸乙酯稀释，并分离掉水相。用乙酸乙酯萃取水相。合并有机相，用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤，干燥并浓缩。将残留物溶于二氯甲烷中并在硅胶上进行色谱分离(以石油醚/乙酸乙酯梯度作为流动相)。从而得到24 g (理论值的55%)目标化合物。
实施例13A
6-溴代-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
将16 g 分子筛3Å粉末和52.7 ml 2-氯乙酸乙酯(380.8 mmol, 5 当量)加入到含有24 g 5-溴代-3-[(2,6-二氟苄基)氧基]吡啶-2-胺(实施例12A; 76.2 mmol; 1 当量)的400 ml 乙醇中，并将混合物加热回流过夜。加入另外的8 g 分子筛并将混合物再加热回流24 h。将反应混合物在减压下浓缩，并将残留物吸收在二氯甲烷中并在硅胶上进行色谱分离(流动相:二氯甲烷/甲醇 20:1)。浓缩含有产物的级分并将残留物用100 ml 二乙醚搅拌30 min。然后滤掉固体，用少量二乙醚洗涤并干燥。从而得到15 g (理论值的45%)目标化合物。
实施例14A
8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
方法1:
将600 mg 6-溴代-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯(实施例13A; 1.4 mmol, 1 当量)和230 mg 1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁钯(II)二氯化物/二氯甲烷配合物(0.282 mmol, 20 mol%)溶于25 ml THF中，并加入0.88 ml (1.76 mmol, 1.2 当量) 2 M 甲基氯化锌的THF溶液。将反应混合物在微波中于100℃加热40 min，然后通过硅藻土（Celite）过滤并随后在减压下浓缩。将残留物色谱分离(Biotage Isolera Four)。从而得到225 mg (理论值的38%)目标化合物。
方法2:
将20.00 g (85.38 mmol) 来自实施例19A的 8-羟基-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯、19.44 g (93.91 mmol) 2,6-二氟苄基溴和61.20 g (187.83 mmol) 碳酸铯在1.18 l DMF中于60℃搅拌5 h。然后将反应混合物倒入6.4 l 10% 强度氯化钠水溶液中并随后用乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机相用854 ml 10% 强度氯化钠水溶液洗涤，干燥并浓缩，并使残留物于室温下在高度真空下干燥过夜。从而得到28.2 g (理论值的92%；纯度约90%)目标化合物。
实施例15A
8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸
将220 mg 8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯(实施例14A; 0.524 mmol, 1 当量)溶于7 ml THF/甲醇(1:1)中，加入2.6 ml 1 N 氢氧化锂水溶液(2.6 mmol, 5 当量)并在室温下搅拌混合物16 h。在减压下浓缩混合物并将残留物用1N 盐酸水溶液酸化并搅拌15 min。滤掉固体，用水洗涤并在减压下干燥。从而得到120 mg 目标化合物(理论值的60%)。
实施例16A
3-(苄氧基)-5-溴代吡啶-2-胺
目标化合物是文献中已知的并有描述：
1) Palmer, A.M. 等人J Med.Chem.2007, 50, 6240-6264。
2) ALTANA WO2005/58325
3) ALTANA WO2005/90358
4) Cui, J.T. 等人J Med.Chem.2011, 54, 6342-6363。
另外的制备方法：
先将200 g (1 mol) 2-氨基-3-苄氧基吡啶置于4 l 二氯甲烷中，并在0℃，在30 min内加入含有62 ml (1.2 mol) 溴的620 ml 二氯甲烷溶液。在加入完毕后，将反应溶液在0ºC搅拌60 min。然后将约4 l 碳酸氢钠的饱和水溶液加入混合物中。移除有机相并浓缩。通过硅胶柱色谱法(石油醚/乙酸乙酯 6:4)纯化残留物并浓缩产物级分。从而得到214 g (理论值的77%)目标化合物。
实施例17A
8-(苄氧基)-6-溴代-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
在氩气下，将200 g (0.72 mol) 来自实施例16A的 3-(苄氧基)-5-溴代吡啶-2-胺、 590 g (3.58 mol) 2-氯乙酸乙酯和436 g 3A分子筛悬浮于6 l 乙醇中，并将悬浮液搅拌回流72 h。将反应混合物通过硅胶过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(石油醚:乙酸乙酯 = 9:1，然后是6:4)纯化残留物并浓缩产物级分。从而得到221 g (理论值的79%)目标化合物。
实施例18A
8-(苄氧基)-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
在氩气下，将105 g (270 mmol) 来自实施例17A的 8-(苄氧基)-6-溴代-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯悬浮于4.2 l 1,4-二氧六环中，并相继加入135.4 g (539 mmol, 纯度 50%) 三甲基硼氧环烷、31.2 g (27 mmol) 四(三苯基膦)钯(0)和78.3 g (566 mmol) 碳酸钾，并将混合物在回流下搅拌8 h。冷却至室温，将反应混合物的沉淀物通过硅胶过滤移除，并浓缩滤液。将残留物溶于二氯甲烷中并通过硅胶色谱法(二氯甲烷:乙酸乙酯 = 9:1)纯化。从而得到74 g (理论值的84.6%)目标化合物。
实施例19A
8-羟基-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
先将74 g (228 mmol) 来自实施例18A的 8-(苄氧基)-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯置于1254 ml 二氯甲烷和251 ml 乙醇中，并在氩气下加入20.1 g 10% 活性炭钯(用水润湿, 50%)。将反应混合物在室温和大气压下氢化过夜。将反应混合物通过硅胶过滤并浓缩。将粗产物通过硅胶色谱法(二氯甲烷:甲醇 = 95:5)纯化。从而得到50.4 g (理论值的94%)目标化合物。
实施例20A
8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
在氩气下，先将5.0 g 8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸(实施例3A, 15.71 mmol, 1 当量)置于300 ml 二氯甲烷中，在室温下相继加入4.52 g 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(23.56 mmol, 1.5 当量)和3.61 g 1-羟基-1H-苯并三唑水合物(HOBT, 23.56 mmol, 1.5 当量)，并将混合物在室温下搅拌10 min。然后加入4.20 g 氯化铵(78.55 mmol, 5 当量)和19.15 ml N,N-二异丙基乙胺(109.96 mmol, 7 当量)，并将混合物在室温下搅拌过夜。然后将混合物在减压下浓缩，向残留物中加入二氯甲烷，并滤掉固体，用二氯甲烷充分洗涤并在减压下干燥过夜。从而得到5.38 g (理论值的108%)目标化合物，其无需纯化即可用于反应。
实施例21A
8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-腈
先将912 mg 8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺(实施例20A, 2.87 mmol, 1 当量)置于13 ml THF中，并加入0.6 ml 吡啶(7.36 mmol, 2.56 当量)。随后，在室温下，滴入1.04 ml (7.36 mmol, 2.56 当量) 三氟乙酸酐并将混合物在室温下搅拌过夜。随后，将反应混合物加入到水中并用乙酸乙酯萃取三次。将合并的有机相用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤一次、用1 N 盐酸水溶液洗涤一次并用氯化钠的饱和水溶液洗涤一次，用硫酸钠干燥并在旋转蒸发仪上浓缩。将残留物在减压下干燥过夜。从而得到787 mg (理论值的91%)目标化合物。
实施例22A
8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲脒
溶液A:
在氩气下，先将135 mg (2.53 mmol, 2.52 当量) 氯化铵置于3.9 ml 甲苯中，并将混合物冷却至0℃。在此温度下，加入1.26 ml 含有2 M 三甲基铝的甲苯(2.53 mmol, 2.52 当量)，并将溶液在室温下搅拌2 h。
在另一个烧瓶中，先将300 mg 8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-腈(实施例21A, 1.0 mmol, 1 当量)置于3.3 ml 甲苯中，在室温下加入2 ml 预先制备好的溶液并将混合物在110℃搅拌1 h。随后，向反应混合物中再加入两次溶液A直到所有的原料均被消耗。然后使混合物冷却，在室温下加入硅胶和二氯甲烷/甲醇的1:1混合物并在室温下搅拌混合物30 min。滤掉硅胶并用甲醇洗涤，并浓缩母液。将残留物在硅胶柱上(流动相: 纯二氯甲烷; 二氯甲烷: 甲醇 = 10:2)纯化。从而得到138 mg (理论值的43%)目标化合物。
实施例23A
8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-N-羟基-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲脒
将50.0 g (148.9 mmol) 来自实施例21A的 8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-腈悬浮于乙醇(1.5 l)中，加入51.75 g (744.6 mmol) 盐酸羟胺和103 ml (744.6 mmol) 三乙胺并将混合物在室温下搅拌过夜。然后浓缩混合物几乎至干燥，加入水(2.0 l)和乙醇(100 ml)并搅拌混合物1 h。形成固体，将其滤掉并用水洗涤。将此固体在高度真空下干燥过夜。从而得到38.5 g (理论值的68%；纯度 87%)目标化合物。
实施例24A
8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲脒乙酸盐
先将37.5 g (98.4 mmol, 纯度 87%)来自实施例23A的8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-N-羟基-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲脒置于乙酸(1.0 l)中，并加入11.14 ml (118.08 mmol) 乙酸酐。加入7.5 g 钯/碳(10%, 润湿的)，并将混合物在大气压下氢化16 h。然后将混合物通过硅藻土过滤并用乙醇洗涤。在浓缩后，向残留物中三次加入各500 ml 甲苯，并将混合物浓缩干燥。将残留物用200 ml 乙酸乙酯搅拌并过滤，并随后使残留物干燥。从而得到22.0 g (理论值的59%)目标化合物。
实施例25A
8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
先将7.0 g (21.07 mmol)来自实施例15A的 8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸置于403 ml 二氯甲烷中，加入6.06 g (31.60 mmol) 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和4.27 g (31.60 mmol) 1-羟基-1H-苯并三唑水合物并将混合物在室温下搅拌10 min。随后，加入5.63 g (105.32 mmol) 氯化铵和25.68 ml (147.5 mmol) N,N-二异丙基乙胺并将混合物在室温下搅拌过夜。向反应混合物中加水，并滤掉存在的固体，然后与水一起在50℃搅拌30 min，再次过滤并用水洗涤。从而得到4.59 g (理论值的65%)目标化合物。将合并的滤液级分(二氯甲烷/水)相分离。将二氯甲烷相用碳酸氢钠的饱和水溶液和氯化钠的饱和水溶液各洗涤一次。将有机相用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残留物用少量乙腈搅拌并过滤。从而得到另外的1.29 g (理论值的17%; 纯度: 93%)目标化合物。
实施例26A
8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-腈
先将5.70 g (17.20 mmol) 来自实施例25A的 8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺置于77 ml THF中，并加入3.56 ml (44.0 mmol) 吡啶。然后在室温下，滴入6.22 ml (44.0 mmol) 三氟乙酸酐，并将反应混合物在室温下搅拌3 h。然后将混合物加入水中并用乙酸乙酯萃取三次。将合并的有机相用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤一次、用1 N 盐酸水溶液洗涤一次并用氯化钠的饱和水溶液洗涤一次，用硫酸钠干燥并浓缩。将残留物在减压下干燥过夜。从而得到5.47 g (理论值的99%)目标化合物。
实施例27A
8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲脒
使5.47 g (17.46 mmol; 纯度 98%) 来自实施例26A的 8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-腈以类似于实施例22A的程序反应。从而得到1.28 g (理论值的22%)目标化合物。
实施例28A
3,3-二氰基-2,2-二甲基丙酸甲酯
在氩气下，先将1.82 g 60% 氢化钠(45.41 mmol, 1 当量)置于91 ml THF中，并在室温下缓慢加入3.0 g 丙二腈(45.41 mmol, 1 当量)。然后在室温下，加入5.9 ml α-溴代异丁酸甲酯(45.41 mmol, 1 当量) 并将混合物在室温下进一步搅拌过夜。加入另一个5.9 ml α-溴代异丁酸甲酯(45.41 mmol, 1 当量) 并将混合物在50℃进一步搅拌过夜。然后使混合物冷却，加入碳酸氢钠的饱和水溶液并将混合物用乙酸乙酯萃取三次。将合并的有机相用氯化钠的饱和溶液洗涤一次，用硫酸钠干燥并在旋转蒸发仪上浓缩。将残留物在硅胶柱上(流动相: 纯环己烷; 环己烷/乙酸乙酯 = 8:2)分离。从而得到6.47 g (理论值的86%)目标化合物。
实施例29A
rac-3-(3,4-二氟苯基)-3-(1,3-二氧代-1,3-二氢-2H-异吲哚-2-基)丙酸
1.步骤:
在氩气下，将697 g 3,4-二氟苯甲醛(4.76 mol, 1 当量)与495 g 丙二酸(4.76 mol, 1 当量)和733 g 乙酸铵(9.52 mol, 2 当量)在2788 ml 乙醇中一起搅拌回流20 h。然后将混合物冷却至室温并在室温下搅拌过夜。滤掉所形成的固体，用乙醇和二乙醚洗涤并在减压下干燥。获得590 g (理论值的62%) rac-3-氨基-3-(3,4-二氟苯基)丙酸。
rac-3-氨基-3-(3,4-二氟苯基)丙酸：
。
2.步骤:
将0.20 g (0.99 mmol) rac-3-氨基-3-(3,4-二氟苯基)丙酸和0.15 g (0.99 mmol) 邻苯二甲酸酐溶于0.8 ml DMF中并在135℃加热回流过夜。将反应溶液加入到约9 ml 水中。将所得悬浮液用乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机相用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过制备型HPLC(RP18 柱; 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA)纯化。从而得到0.2 g 目标化合物(理论值的61%)。
实施例30A
rac-[2-(3,4-二氟苯基)-2-(1,3-二氧代-1,3-二氢-2H-异吲哚-2-基)乙基]氨基甲酸叔丁酯
在氩气下，先将含5.0 g rac-3-(3,4-二氟苯基)-3-(1,3-二氧代-1,3-二氢-2H-异吲哚-2-基)丙酸(实施例29A, 15.09 mmol)和3.06 g 三乙胺(30.19 mmol)的溶液置于65 ml 甲苯中，加入4.36 g 的二苯基磷叠氮化物（diphenylphosphorus azidate） (15.85 mmol)并将混合物在室温下搅拌3.5 h。随后，加入65 ml 叔丁醇并将混合物在回流下搅拌过夜。冷却后，将反应溶液浓缩并通过快速色谱法(流动相: 石油醚/乙酸乙酯 2:1, 等梯度)纯化。从而得到3.1 g 目标化合物(理论值的45%)。
实施例31A
rac-[2-氨基-2-(3,4-二氟苯基)乙基]氨基甲酸叔丁酯
先将6.13 g rac-[2-(3,4-二氟苯基)-2-(1,3-二氧代-1,3-二氢-2H-异吲哚-2-基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(实施例30A, 纯度约 60%, 约 9.14 mmol)置于13.1 ml 40% 甲胺水溶液中，并将混合物在封闭容器中于60℃搅拌过夜。将反应混合物浓缩并将残留物通过硅胶色谱法(流动相: 二氯甲烷: 甲醇:二乙胺 30:1:0.1; 20:1:0.1)纯化。从而得到1.83 g 目标化合物(理论值的74%)。
实施例32A
ent-[2-氨基-2-(3,4-二氟苯基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(对映异构体A)
将100 mg rac-[2-氨基-2-(3,4-二氟苯基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(实施例31A)通过手性相分离为对映异构体[柱: Daicel Chiralpak AY-H, 5 µm, 250 x 20 mm, 流动相: 80% 异己烷、20% 乙醇 + 0.2% 二乙胺, 流速 15 ml/min; 30℃, 检测: 220 nm]。
产率：43 mg 对映异构体A (>99% ee)
Rt = 4.58 min [Daicel Chiralpak AY-H, 5 µm, 250 x 4.6 mm; 流动相: 80% 异己烷、20% 乙醇 + 0.2% 二乙胺, 流速 1.0 ml/min; 30℃；检测: 220 nm]。
实施例33A
ent-[2-氨基-2-(3,4-二氟苯基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(对映异构体B):
将100 mg rac-[2-氨基-2-(3,4-二氟苯基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(实施例31A)通过手性相分离为对映异构体[柱: Daicel Chiralpak AY-H, 5 µm, 250 x 20 mm, 流动相: 80% 异己烷、20% 乙醇 + 0.2% 二乙胺, 流速 15 ml/min; 30℃, 检测: 220 nm]。
产率：44 mg 对映异构体B (>99% ee)
Rt = 5.61 min [Daicel Chiralpak AY-H, 5 µm, 250 x 4.6 mm; 流动相: 80% 异己烷、20% 乙醇 + 0.2% 二乙胺, 流速 1.0 ml/min; 30℃；检测: 220 nm]。
实施例34A
ent-1-(3,4-二氟苯基)乙-1,2-二胺二盐酸盐(对映异构体A)
先将528 mg (1.94 mmol) ent-[2-氨基-2-(3,4-二氟苯基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(对映异构体A)(实施例32A)置于10 ml 二乙醚中，加入9.7 ml 盐酸(2 N 在二乙醚中)并将混合物在室温下搅拌2天。将反应混合物浓缩并在高度真空下干燥。从而得到475 mg (理论值的99%)目标化合物。
实施例35A
3,3-二氰基-2-(三氟甲基)丙烯酸甲酯
此化合物的合成在Journal of Fluorine Chemistry, 1991, vol. 51, # 3 pp. 323 – 334中有述。
实施例36A
2-(二氰基甲基)-3,3,3-三氟-2-甲基丙酸甲酯 (外消旋体)
将3.00 g (14.698 mmol) 来自实施例35A的 3,3-二氰基-2-(三氟甲基)丙烯酸甲酯溶于四氢呋喃(30 ml)中并将溶液冷却至0℃。然后滴入7.35 ml (22.047 mmol) 甲基氯化镁(3 M 在THF中)，使得温度不超过5℃。在加入完毕后，将混合物再搅拌10 min。然后向反应中加入1N 盐酸水溶液，并随后将混合物用乙酸乙酯萃取。使相分离并将水相用乙酸乙酯再萃取两次。将合并的有机相用氯化钠的饱和水溶液洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。随后将粗产物在硅胶上进行色谱分离(流动相: 环己烷，然后是环己烷:乙酸乙酯 9:1 (v:v))。浓缩得到3.24 g (理论值的63%)目标化合物。
实施例37A
(1-{[(2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]甲基}环丙基)氨基甲酸叔丁酯
先将100 mg (171 µmol) 来自实施例4的 4-氯-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮置于1.5 ml NMP中，加入128 mg (685 µmol) [1-(氨甲基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯和0.03 ml (171 µmol) N,N-二异丙基乙胺并将混合物在微波中于150℃搅拌5 h。然后加入另外的32 mg (171 µmol) [1-(氨甲基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯，并将混合物在微波中于150℃搅拌2 h。将反应溶液用乙腈/水/TFA稀释并通过制备型HPLC(RP18 柱, 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA)纯化。从而得到73 mg (理论值的59%，纯度 86%)目标化合物。
实施例38A
8-(苄氧基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯
将25 g 2-氨基-3-苄氧基吡啶(124.8 mmol, 1 当量)溶于781 ml 乙醇中，加入102.7 g 2-氯乙酸乙酯(624.2 mmol, 5 当量)和15 g 4Å分子筛并将混合物加热回流（浴温100℃）2 d。然后将混合物浓缩并在旋转蒸发仪上使用干冰冷却蒸馏出多余的2-氯乙酸乙酯。将残留物通过硅胶色谱法(流动相 环己烷: 乙酸乙酯 = 9:1, 4:1)纯化。从而得到20.81 g 目标化合物(理论值的54%)。
实施例39A
8-(苄氧基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸
将253 ml 2 N 氢氧化钠水溶液加入到含有15.7 g 来自实施例38A的 8-(苄氧基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸乙酯(50.59 mmol)的253 ml 1,4-二氧六环溶液中，并将混合物在室温下搅拌14 h。然后加入101 ml 6 N 盐酸水溶液。滤掉所形成的固体，用水和甲基叔丁基醚洗涤并在减压、40℃下干燥过夜。从而得到15.49 g(理论值的108%) 8-(苄氧基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸。
实施例40A
8-(苄氧基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺
在氩气下，先将52.5 g (16.22 mmol, 纯度 84%) 8-(苄氧基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酸(实施例39A)置于2 l 二氯甲烷中，在室温下相继加入44.92 g (234.3 mmol) 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和35.9 g (234.3 mmol) 1-羟基-1H-苯并三唑水合物并将混合物在室温下搅拌10 min。随后，加入41.78 g (781.1 mmol) 氯化铵和190.5 ml (1093.5 mmol) N,N-二异丙基乙胺并将混合物在室温下再搅拌3 d。分别加入4.49 g (23.43 mmol) 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐、3.59 g (23.43 mmol) 1-羟基-1H-苯并三唑水合物、4.18 g (78.1 mmol) 氯化铵和14.13 g (109.4 mmol) N,N-二异丙基乙胺并将混合物在室温下再次搅拌过夜。在反应时间结束后，向混合物中加入2 l 水并滤掉形成的沉淀物。将固体分别用500 ml 水和二氯甲烷洗涤两次并干燥。将有机相用水洗涤并浓缩。将残留物与固体混合并用叔丁基甲基醚搅拌。将产物用叔丁基甲基醚洗涤并在高度真空下干燥。从而得到40.80 g (理论值的93%)目标化合物。
实施例41A
8-(苄氧基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-腈
先将358 g (1.273 mol) 8-(苄氧基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲酰胺(实施例40A)置于5.65 l THF中，并加入263.5 ml (3.258 mol) 吡啶。然后在室温下，滴入460.1 ml (3.258 mmol) 三氟乙酸酐，并将反应混合物在室温下搅拌过夜。在反应时间结束后，将混合物加入到20 l 乙酸乙酯中并分别用2.69 l 1 N 盐酸水溶液、2.69 l 10% 强度碳酸氢钠水溶液和6.27 l 水各洗涤一次。滤掉不溶的固体并干燥。
将固体溶于22 l 乙酸乙酯中并再用6 l 水洗涤。将有机相干燥并浓缩。从而得到140 g (理论值的42%)目标化合物。
将第一相分离的有机相干燥，浓缩并在高度真空下干燥。将残留物溶于33 l 乙酸乙酯中并在室温下用20 l 10% 强度碳酸氢钠水溶液搅拌7 h。移除有机相，用10% 强度氯化钠水溶液洗涤，干燥并浓缩。将所得残留物在高度真空下干燥。从而得到另外的153 g (理论值的46%)目标化合物。
实施例42A
8-羟基-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-腈
先将68 g (258 mmol) 8-(苄氧基)-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-腈(实施例41A)置于1.7 l 二氯甲烷和425 ml 乙醇中，并在氩气下加入28 g 10% 活性炭钯(用水润湿, 50%)。将反应混合物在室温和标准压力下氢化8 h。加入另外的13.6 g 10% 活性炭钯(用水润湿, 50%)，并将混合物在室温下再氢化4 h。将在反应中沉淀的产物重新溶于20 l 二氯甲烷/甲醇(7/3)中并将混合物在室温下搅拌45 min。将反应混合物通过硅藻土过滤并浓缩。将所得晶体悬浮于叔丁基甲基醚中，抽吸过滤并在高度真空下干燥。从而得到38.5 g (理论值的86%)目标化合物。
实施例43A
2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-腈
先将4.90 g (28.28 mmol) 8-羟基-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-腈(实施例42A)和20.27 g 碳酸铯(62.22 mmol)置于390 ml DMF中，加入7 g (31.11 mmol) 2-(溴代甲基)-1,3,4-三氟苯并将混合物在60℃搅拌30 min。将反应混合物倒入水中并在室温下搅拌30 min。滤掉沉淀的固体，用水洗涤并在高度真空下干燥。从而得到8.8 g (理论值的98%)目标化合物。
实施例44A
N-羟基-2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲脒
将18.20 g (57.36 mmol) 来自实施例43A的 2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-腈悬浮于610 ml 乙醇中，并随后加入39.86 g (573.64 mmol) 盐酸羟胺。滴入79.96 ml (573.64 mmol) 三乙胺，并将混合物在室温下搅拌过夜。然后将混合物在旋转蒸发仪上于40-45℃浓缩至其三分之一的体积，加入水(250 ml)并将混合物再次浓缩至约250 ml。加入0.7 l 水。滤掉所得固体并用水洗涤。将固体以乙腈悬浮液(50 ml)的形式在减压下浓缩并在高度真空下干燥过夜。从而得到20.9 g (理论值的91%，纯度 87%)目标化合物。
实施例45A
2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲脒
将24.18 g (60.74 mmol) 来自实施例44A的 N-羟基-2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲脒溶于167 ml 乙酸中，加入6.59 ml (69.85 mmol) 乙酸酐并将混合物在室温下搅拌15 min。然后在剧烈搅拌下加入39.71 g (607.43 mmol) 锌末(< 10 µm)，并将混合物在室温下搅拌30 min。将反应混合物用170 ml 水稀释，导致大量泡沫。滤掉固体并用50 ml 水/乙酸(1/1)混合物洗涤两次。在冷却下，将滤液滴入733 ml 33% 强度氨水溶液中并在室温下搅拌30 min。滤掉所形成的固体，用水洗涤并在高度真空下干燥过夜。从而得到22.32 g (理论值的73%，纯度 66%)目标化合物。将滤液用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机相用氯化钠的饱和水溶液洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，在旋转蒸发仪上于40 - 45℃浓缩并在高度真空下干燥过夜。从而得到额外的1.72 g (理论值的7%; 纯度: 81%)目标化合物。
实施例46A
8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲亚胺酰肼
先将456 mg (1.44 mmol) 来自实施例22A的 8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲脒置于12 ml 乙醇中，并在0℃加入0.80 ml (5.77 mmol) 三乙胺和0.088 ml (1.44 mmol) 水合肼(80%)。将混合物先在0℃搅拌10 min并随后在室温下搅拌过夜。将反应混合物在旋转蒸发仪上于室温下浓缩。将残留物在高度真空下干燥。从而得到501 mg (理论值的105%)目标化合物。产物无需进一步纯化而被用于下一步骤。
实施例47A
2-(3-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5-羟基-1,2,4-三嗪-6-基)-2-甲基丙酸甲酯
先将0.291 g (1.55 mmol) 2,2-二甲基-3-氧代丁二酸二甲酯(在C. J. A. Daley 等人J. Am. Chem.Soc.2002, 124(14), 3680-3691中有述)置于7 ml 乙醇中并加热至回流。向其滴入含有0.341 g (1.03 mmol) 来自实施例46A的 8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲亚胺酰肼的15 ml 乙醇悬浮液。将混合物在回流下搅拌过夜。冷却后，浓缩混合物并向残留物中加入二乙醚。滤掉所形成的沉淀物，用二乙醚洗涤并在高度真空下干燥。从而得到0.407 g (理论值的45%; 纯度约 54%)目标化合物(粗)，其无需进一步纯化即可被用于后续步骤。
实施例48A
2-(5-氯-3-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-1,2,4-三嗪-6-基)-2-甲基丙酸甲酯
将6.0 ml 磷酰氯加入到450 mg (0.52 mmol; 纯度约 54%) 来自实施例47A的 2-(3-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5-羟基-1,2,4-三嗪-6-基)-2-甲基丙酸甲酯中，并将混合物在室温下搅拌过夜。然后将混合物在50℃搅拌7 h。此反应混合物无需进一步纯化即可被用于后续反应。
实施例49A
8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲亚胺酰肼
先将600 mg (1.82 mmol) 来自实施例27A的 8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲脒置于15 ml 乙醇中，并加入2.03 ml (14.53 mmol) 三乙胺和0.22 ml (3.63 mmol) 水合肼(80%)。将混合物在50℃搅拌过夜。将反应混合物在旋转蒸发仪上于室温下浓缩。将残留物在高度真空下干燥。从而得到581 mg (理论值的109%)目标化合物。产物无需进一步纯化而被用于下一步骤。
实施例50A
2-(3-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5-羟基-1,2,4-三嗪-6-基)-2-甲基丙酸甲酯
先将0.514 g (2.73 mmol) 2,2-二甲基-3-氧代丁二酸二甲酯(在C. J. A. Daley 等人J. Am. Chem.Soc.2002, 124(14), 3680-3691中有述)置于13 ml 乙醇中并加热至回流。向其滴入含有0.629 g (1.82 mmol) 来自实施例49A的 8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲亚胺酰肼的27 ml 乙醇悬浮液，并将混合物在回流下搅拌过夜。冷却后，浓缩混合物。将二乙醚加入残留物中，并将所形成的沉淀物在室温下搅拌30 min，过滤，用二乙醚洗涤并在高度真空下干燥。从而得到0.713 g (理论值的81%)目标化合物，其无需进一步纯化即可被用于下一步骤。
实施例51A
2-(5-氯-3-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-1,2,4-三嗪-6-基)-2-甲基丙酸甲酯
将8.5 ml 磷酰氯加入到658 mg (1.36 mmol) 来自实施例50A的 2-(3-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5-羟基-1,2,4-三嗪-6-基)-2-甲基丙酸甲酯中，并将混合物在室温下搅拌过夜。此反应混合物无需任何进一步纯化即可被用于后续反应。
实施例52A
2-氨基-3-氟-2-(氟甲基)丙腈
先将8.75 g (178.6 mmol) 氰化钠置于132 ml 2N 氨的甲醇溶液中。在室温下加入15.0 g (159.5 mmol) 1,3-二氟丙酮和9.55 g (178.6 mmol) 氯化铵。将悬浮液在70℃的油浴中搅拌2 h。向冷却后的反应混合物中加入300 ml 二乙醚，将混合物搅拌10 min并滤掉固体。将滤液在减压下(50℃, 70 毫巴)浓缩。从而得到19.2 g (理论值的100%)目标化合物。此产物无需进一步纯化即可转化。
实施例53A
(2-氰基-1,3-二氟丙-2-基)氨基甲酸苄酯
先将5.0 g (41.6 mmol) 来自实施例52A的 2-氨基-3-氟-2-(氟甲基)丙腈置于14.5 ml (83.3 mmol) N,N-二异丙基乙胺中。在室温下缓慢滴入10.65 g (62.5 mmol) 氯甲酸苄酯并将混合物在室温下搅拌三天。将反应混合物用25 ml 二氯甲烷稀释，并在0℃滴入含有12.9 g (124.9 mmol) N-(2-氨基乙基)乙-1,2-二胺的225 ml 二氯甲烷溶液，并将混合物搅拌10 min。然后在室温下滴入200 ml 氯化铵的饱和溶液。使相分离并将水相用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机相浓缩。随后将粗产物在硅胶上进行色谱分离(流动相: 环己烷:乙酸乙酯 梯度)。从而得到4.40 g (理论值的42%)目标化合物。
实施例54A
[3-氟-2-(氟甲基)丙-1,2-二基]双氨基甲酸苄基-叔丁酯
先在室温下将3.28 g (12.90 mmol) 来自实施例53A的 (2-氰基-1,3-二氟丙-2-基)氨基甲酸苄酯置于52 ml 无水乙醇中。在室温下分批加入2.44 g (64.5 mmol) 硼氢化钠，并将混合物在室温下搅拌2.5 h。然后在室温下缓慢滴入含有3.66 g (16.77 mmol) 二碳酸二叔丁酯的37 ml 无水乙醇溶液，并随后继续搅拌30 min。加入另外的281 mg (1.29 mmol) 二碳酸二叔丁酯，并将混合物搅拌15 min。将100 ml 氯化铵的饱和溶液加入到反应混合物中，并将混合物用约45 ml 1 N 盐酸水溶液调节至约pH 4。在减压下除去反应混合物中的乙醇，并随后加入水。滤掉所形成的固体，用水洗涤并在高度真空下干燥。从而得到3.37 g (理论值的73%)目标化合物。
实施例55A
[1-氨基-3-氟-2-(氟甲基)丙-2-基]氨基甲酸苄酯
将5 ml 二氯甲烷和2 ml 三氟乙酸加入到1.00 g (2.79 mmol) 来自实施例54A的 [3-氟-2-(氟甲基)丙-1,2-二基]双氨基甲酸苄基-叔丁酯中，并将混合物在室温下搅拌30 min。将反应混合物在减压下浓缩。向残留物中加入碳酸氢钠的饱和水溶液(pH 8-9)并将混合物用二氯甲烷萃取四次。将合并的有机相用氯化钠的饱和溶液洗涤一次，用硫酸钠干燥，在25℃浓缩并在高度真空下干燥。从而得到745 mg 目标化合物(理论值的103%)。此产物无需进一步纯化即可转化。
实施例56A
3-氟-2-(氟甲基)丙-1,2-二胺
先将89 mg (0.344 mmol) 来自实施例55A的 [1-氨基-3-氟-2-(氟甲基)丙-2-基]氨基甲酸苄基置于0.38 ml 1-甲基-2-吡咯烷酮中，并在氩气下加入22 mg 10% 活性炭钯。将反应混合物在室温和标准压力下氢化4 h。将反应混合物通过PTFE注射式过滤器(0.45 µm)过滤并随后用0.2 ml 1-甲基-2-吡咯烷酮洗涤过滤器。将合并的溶液直接用于下一反应。
实施例57A
rac-4-氨基-3,3-二氟吡咯烷酮-1-甲酸苄酯(外消旋体)
先将500 mg (1.77 mmol) 4-叠氮基-3,3-二氟吡咯烷酮-1-甲酸苄酯(WO 2011088045)置于1.25 ml THF和0.25 ml 水中。在冰浴冷却下，缓慢滴入8.9 ml 三甲基膦(1 M THF溶液)，并将混合物在室温下搅拌15 min。加入碳酸氢钠的饱和水溶液并在减压、30℃下除去反应混合物中的THF。将残留物用乙酸乙酯萃取三次。将合并的有机相用氯化钠的饱和溶液洗涤一次，用硫酸钠干燥并浓缩。将残留物在硅胶柱上(流动相: 纯环己烷; 环己烷/乙酸乙酯 梯度)分离。从而得到372 mg (理论值的82%)目标化合物。
实施例58A
rac-4,4-二氟吡咯烷-3-胺(外消旋体)
先将90 mg (0.35 mmol) 来自实施例57A的 4-氨基-3,3-二氟吡咯烷-1-甲酸苄酯置于0.39 ml 1-甲基-2-吡咯烷酮中，并在氩气下加入22 mg 10% 活性炭钯。将反应混合物在室温和标准压力下氢化2 h。将反应混合物通过PTFE注射式过滤器(0.45 µm)过滤并随后用0.2 ml 1-甲基-2-吡咯烷酮洗涤过滤器。将合并的溶液直接用于下一反应。
实施例59A
3-氮杂双环[3.1.0]己-1-胺二盐酸盐
合成形成目标化合物在：M. Gensini 等人, Eur.J. Org.Chem.2002, 2499-2507中有述。
实施例60A
rac-2-{[1,1-二氟亚丙-2-基]氨基}-2-苯乙醇(外消旋体)
在氩气下，先将8.0 g (85.05 mmol) 1,1-二氟丙酮置于90.6 ml 二氯甲烷中，并加入2 g 硫酸镁和2 g 4Å分子筛(粉末)。在加入12.02 g (87.60 mmol) rac-2-氨基-2-苯乙醇后，将混合物在回流下搅拌过夜。将混合物通过硅藻土（Celite）过滤，用二氯甲烷洗涤。将滤液浓缩并干燥。进行硅胶色谱法(流动相: 环己烷/乙酸乙酯 梯度)。从而得到9.6 g (理论值的53%)目标化合物。
实施例61A
3,3-二氟-2-[(2-羟基-1-苯乙基)氨基]-2-甲基丙腈(非对映异构体)
在氩气下，先将9.6 g (45.02 mmol) 来自实施例60A的 rac-2-{[1,1-二氟亚丙-2-基}-2-苯乙醇置于116 ml 乙醇中，加入14.01 ml (112.55 mmol) 三甲基硅氰并将混合物在回流下搅拌16 h。然后加入另外的10 ml (80.39 mmol) 三甲基硅氰，并将混合物在回流下再搅拌16 h。将反应溶液冷却至室温并浓缩，并三次加入各100 ml 甲苯并将混合物浓缩。通过制备型SFC进行纯化[乙基吡啶-SFC, 5 µm, 125 x 30 mm; 流动相: 二氧化碳/甲醇 梯度; 流速: 100 ml/min; 波长: 220 nm; 温度: 40℃]。从而得到6.97 g (理论值的64%)目标化合物。
实施例62A
2-[(3-氨基-1,1-二氟-2-甲基丙-2-基)氨基]-2-苯乙醇三氟乙酸盐(非对映异构体)
先将1.0 g (4.16 mmol) 来自实施例61A的 3,3-二氟-2-[(2-羟基-1-苯乙基)氨基]-2-甲基丙腈(非对映异构体)置于100 ml 叔丁基甲基醚中，将混合物冷却至0℃，加入197 mg (5.20 mmol) 氢化铝锂并将混合物在室温下搅拌16 h。随后，将混合物冷却至0℃，并先加入416 µl 水并随后加入416 µl 2 N 氢氧化钠水溶液和832 µl 水。将所得混合物通过硅藻土（Celite）过滤，用叔丁基甲基醚和少量甲醇洗涤。将滤液浓缩，向残留物中加入乙腈/水/TFA并将产物通过制备型HPLC纯化(RP18 柱, 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA)。从而得到866 mg (理论值的58%)目标化合物。
实施例63A
rac-3,3-二氟-2-甲基丙-1,2-二胺(外消旋体)
将82 mg (0.336 mmol) 来自实施例62A的 rac-2-[(3-氨基-1,1-二氟-2-甲基丙-2-基)氨基]-2-苯乙醇用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤并用甲基叔丁基醚萃取。将有机相合并，干燥并浓缩。然后先将游离胺置于0.33 ml 1-甲基-2-吡咯烷酮中，并在氩气下加入71 mg 10% 活性炭钯。将反应混合物在室温和标准压力下氢化过周末。将反应混合物通过PTFE注射式过滤器(0.45 µm)过滤。用0.2 ml 1-甲基-2-吡咯烷酮洗涤过滤器。将合并的溶液直接用于下一反应。
实施例64A
2-甲基-4-苯基-2-(三氟甲基)-1,3-噁唑烷(非对映异构体)
将45 g (328.0 mmol) rac-2-氨基-2-苯乙醇和8.24 g (32.8 mmol) 对甲苯磺酸吡啶鎓加入到含有55.13 g (492.0 mmol) 1,1,1-三氟丙酮的甲苯(1.35 l)中。将反应混合物在回流下在水分离器上加热16 h。将混合物冷却至0℃，并滤掉所形成的固体并在高度真空下干燥。从而得到68.6 g (理论值的77%，纯度 85%)目标化合物。
实施例65A
3,3,3-三氟-2-[(2-羟基-1-苯乙基)氨基]-2-甲基丙腈(非对映异构体)
在氩气下，先将52.8 g (228.3 mmol) 来自实施例64A的 2-甲基-4-苯基-2-(三氟甲基)-1,3-噁唑烷(非对映异构体)置于二氯甲烷(2 l)中并冷却至0℃。逐渐加入42.85 ml (342.5 mmol) 三甲基硅氰和42.1 ml (342.5 mmol) 三氟化硼-二乙醚配合物并将混合物在室温下搅拌16 h。随后，将反应溶液倒入1.5 l 碳酸氢钠的饱和溶液中。然后加入400 g 碳酸氢钠，并将溶液用浓的氢氧化钠水溶液调节至pH 10。将水溶液用500 ml 二氯甲烷萃取三次并将合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。从而得到56.8 g (理论值的96%，2种非对映异构体)目标化合物。
实施例66A
2-[(3-氨基-1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)氨基]-2-苯乙醇(非对映异构体)
先将31 g (120.0 mmol) 来自实施例65A的 3,3,3-三氟-2-[(2-羟基-1-苯乙基)氨基]-2-甲基丙腈置于叔丁基甲基醚(3.1 l)中并冷却至0℃，加入18.25 g (480.2 mmol) 氢化铝锂并将反应混合物在室温下搅拌16 h。随后，将混合物冷却至0℃，先用24 ml 水降温，然后与 24 ml 15% 氢氧化钾的水溶液和48 ml 水混合。将所得混合物通过硅胶过滤并用叔丁基甲基醚洗涤。将有机相分离，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。从而得到29.2 g (理论值的83%，纯度 89%)目标化合物。
实施例67A
{3,3,3-三氟-2-[(2-羟基-1-苯乙基)氨基]-2-甲基丙基}氨基甲酸叔丁酯(非对映异构体)
将29.1 ml (209.8 mmol) 三乙胺和23.98 g (109.9 mmol) 二碳酸二叔丁酯(溶于286 ml THF中)加入到含有26.2 g (99.9 mmol) 来自实施例66A的 2-[(3-氨基-1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)氨基]-2-苯乙醇(非对映异构体)的THF(500 ml)中。将反应混合物在室温下搅拌16 h。随后，将反应混合物浓缩并吸收在各500 ml 碳酸氢钠的饱和水溶液和乙酸乙酯中。使相分离并将有机相用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。从而得到39.80 g (理论值的110%)目标化合物，其无需进一步纯化即可被用于下一步骤。
实施例68A
rac-(2-氨基-3,3,3-三氟-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯
先在氩气下将39 g (107.6 mmol) 来自实施例67A的 {3,3,3-三氟-2-[(2-羟基-1-苯乙基)氨基]-2-甲基丙基}氨基甲酸叔丁酯置于乙醇(700 ml)中，并加入5.44 g (53.8 mmol) 氢氧化钯(II)(20%在活性炭上,水润湿, 约60%)。将反应混合物在标准压力下氢化16 h。然后将反应混合物通过硅胶过滤并浓缩。将残留物通过硅胶色谱法纯化(环己烷/乙酸乙酯 梯度: 9/1 至 6/4)。从而得到15.8 g (理论值的61%)目标化合物。
实施例69A
rac-3,3,3-三氟-2-甲基丙-1,2-二胺二盐酸盐
将含有15 g (61.9 mmol) 来自实施例68A的 rac-(2-氨基-3,3,3-三氟-2-甲基丙基)氨基甲酸叔丁酯的二氧六环(188 ml)与188 ml 4 M 氯化氢的二氧六环混合。将反应混合物在室温下搅拌16 h，然后浓缩并在氩气下保存。从而得到14.4 g (理论值的108%)目标化合物，其无需进一步纯化。
工作实施例
实施例1
4-氨基-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
在氩气下，先将135 mg 8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲脒(实施例22A, 0.42 mmol, 1 当量)置于8 ml 叔丁醇中，在室温下相继加入71.8 mg 叔丁醇钾(0.64 mmol, 1.5 当量)和含有85 mg 3,3-二氰基-2,2-二甲基丙酸甲酯(实施例28A, 0.51 mmol, 1.2 当量)的2 ml 叔丁醇并将混合物加热回流过夜。然后将混合物冷却，加入水并将混合物在室温下搅拌10 min。通过抽吸滤掉所形成的固体，用水洗涤并在减压下干燥过夜。从而得到117.6 mg (理论值的61%)目标化合物。
实施例2
2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-碘-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
在氩气下，将15.0 g (33.30 mmol) 来自实施例1的 4-氨基-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮与53.69 g (200.47 mmol) 二碘甲烷和23.48 g (200.47 mmol) 亚硝酸异戊酯在268 ml 无水1,4-二氧六环中于85℃一起搅拌过夜。加入15.34 g (57.28 mmol) 二碘甲烷和6.70 g (57.28 mmol) 亚硝酸异戊酯并将混合物在85℃搅拌过夜。加入另外的7.67 g (28.64 mmol) 二碘甲烷和3.35 g (28.64 mmol) 亚硝酸异戊酯并将混合物在85℃搅拌过夜。将反应溶液浓缩并将残留物溶于二氯甲烷中并通过硅胶色谱法(二氯甲烷；二氯甲烷/甲醇 = 75:1 至 30:1)纯化。从而得到9.07 g (理论值的48%)目标化合物。
实施例3
2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-碘-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮三氟乙酸盐
在氩气下，先将4.0 g (8.88 mmol) 来自实施例1的 4-氨基-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮与11.13 g (41.56 mmol) 二碘甲烷和4.87 g (41.56 mmol) 亚硝酸异戊酯一起置于73 ml 无水1,4-二氧六环中，并将混合物在85℃搅拌过夜。将反应溶液浓缩，溶于乙腈/水/TFA中并通过制备型HPLC(RP18 柱; 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA)纯化。从而得到2.45 g (理论值的38%；纯度约93%)目标化合物。
实施例4
4-氯-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
在氩气下，先将500 mg (1.11 mmol) 来自实施例1的 4-氨基-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮与746 mg (5.55 mmol) 氯化铜(II)和195 mg (1.67 mmol) 亚硝酸异戊酯一起置于20 ml 无水乙腈中，并将混合物在85℃搅拌5 h。加入2.22 ml 1 N 盐酸水溶液并随后将混合物用乙酸乙酯萃取三次。使相分离并将水相用乙酸乙酯再萃取两次。将合并的有机相用氯化钠的饱和水溶液洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残留物溶于乙腈/水/TFA中并通过制备型HPLC(RP18 柱; 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA)纯化。将产物级分浓缩，溶于二氯甲烷和少量甲醇中并用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤两次。将合并的有机相用二氯甲烷重新萃取两次。将合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。从而得到158 mg (理论值的30%)目标化合物。
实施例5
2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-羟基-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮三氟乙酸盐
将100 mg (0.21 mmol) 来自实施例1的 4-氨基-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮溶于0.84 ml TFA中。在0℃，加入0.09 ml (5.19 mmol) 水和21.5 mg (0.31 mmol) 亚硝酸钠并将溶液在0℃搅拌5 min。将反应混合物加入到3.5 ml 水中。滤掉所形成的沉淀物，用水洗涤并在高度真空下干燥。从而得到121 mg (理论值的99%)目标化合物。
实施例6
rac-4-氨基-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5-甲基-5-(三氟甲基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(外消旋体)
在氩气下，先将1.39 g (3.69 mmol) 8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲脒乙酸盐(实施例24A)置于47.5 ml 叔丁醇中，在室温下相继加入621 mg (5.53 mmol) 叔丁醇钾和含有974 mg (4.43 mmol) 2-(二氰基甲基)-3,3,3-三氟-2-甲基丙酸甲酯(实施例36A; 外消旋体)的16 ml 叔丁醇并将混合物加热回流过夜。然后将混合物冷却并浓缩。向残留物中加入水并将混合物在室温下搅拌10 min。将所形成的沉淀物过滤，用水洗涤并在减压下干燥过夜。从而得到1.6 g (理论值的77%; 纯度: 90%)目标化合物。
实施例7
rac-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-碘-5-甲基-5-(三氟甲基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮三氟乙酸盐(外消旋体)
在氩气下，先将1.50 g (2.68 mmol；纯度 90%) 来自实施例6的 rac-4-氨基-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5-甲基-5-(三氟甲基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(外消旋体)、3.58 g (13.38 mmol) 二碘甲烷和1.57 g (13.38 mmol) 亚硝酸异戊酯置于23.4 ml 无水1,4-二氧六环中，并将混合物在85℃搅拌过夜。将反应溶液浓缩，将残留物溶于乙腈/水/TFA中并通过制备型HPLC(RP18 柱; 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA)纯化。从而得到0.65 g (理论值的29%；纯度约86%)目标化合物。
实施例8
rac-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-羟基-5-甲基-5-(三氟甲基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮三氟乙酸盐
目标化合物以实施例7的制备中的副产物的形式形成。从而得到135 mg (理论值的8%)目标化合物。
实施例9
4-氨基-5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
在氩气下，先将7.31 g (15.52 mmol；纯度约71%) 2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲脒(实施例45A)置于300 ml 叔丁醇中，在室温下相继加入1.25 ml (21.86 mmol) 乙酸、3.68 g (32.79 mmol) 叔丁醇钾和含有4.36 g (26.23 mmol) 3,3-二氰基-2,2-二甲基丙酸甲酯(实施例28A)的10 ml 叔丁醇并将混合物在回流下加热过夜。然后将混合物冷却，并加入700 ml 水。滤掉所形成的沉淀物，用水洗涤并在减压下干燥过夜。为了移除残留的水，将固体用超声悬浮于乙腈中1 h，在旋转蒸发仪上浓缩并在高度真空下干燥过夜。从而得到6.20 g (理论值的79%; 纯度: 92%)目标化合物。
实施例10
4-碘-5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
在氩气下，先将6.00 g (12.81 mmol) 来自实施例9的 4-氨基-5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮与17.15 g (64.04 mmol) 二碘甲烷、7.50 g (64.04 mmol) 亚硝酸异戊酯和10 g 活性4Å分子筛(粉末 < 50 µm)置于120 ml 无水1,4-二氧六环中，并将混合物在85℃搅拌22 h。然后加入6.86 g (25.62 mmol) 二碘甲烷和3.00 g (25.62 mmol) 亚硝酸异戊酯并将混合物在85℃搅拌18 h。将混合物冷却并滤掉分子筛。将过滤残留物用二氧六环洗涤。将合并的滤液在旋转蒸发仪上浓缩并将粗产物通过硅胶色谱法(二氯甲烷; 环己烷; 环己烷/乙酸乙酯 梯度)纯化。从而得到4.51 g (理论值的56%，纯度 92%)目标化合物。
实施例11
4-羟基-5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
目标化合物以实施例10的制备中的副产物的形式形成。从而得到693 mg (理论值的12%，纯度 94%)目标化合物。
实施例12
4-[(2-氨基-2-甲基丙基)氨基]-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
先将70 mg (0.10 mmol) 来自实施例3的 2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-碘-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮三氟乙酸盐置于1.1 ml NMP中，加入46 mg (0.52 mmol) 2-甲基丙-1,2-二胺并将混合物在微波中于150℃搅拌2 h。然后加入另外的46 mg (0.52 mmol) 2-甲基丙-1,2-二胺，并将混合物在微波中于150℃搅拌1 h。将反应溶液用乙腈/水/TFA溶解并通过制备型HPLC(RP18 柱, 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% 甲酸)纯化。将产物级分浓缩，溶于二氯甲烷和少量甲醇中并用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤两次。将合并的水相用二氯甲烷重新萃取两次。将合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。从而得到38 mg (理论值的67%)目标化合物。
实施例13
rac-4-[(2-氨基-2-甲基戊基)氨基]-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(外消旋体)
先将50 mg (0.07 mmol) 来自实施例3的 2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-碘-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮三氟乙酸盐置于0.5 ml NMP中，加入66 mg (0.35 mmol) rac-2-甲基戊-1,2-二胺二盐酸盐(外消旋体)和0.15 ml (0.83 mmol) N,N-二异丙基乙胺并将混合物在微波中于150℃搅拌6 h。然后加入另外的40 mg (0.21 mmol) 2-甲基戊-1,2-二胺二盐酸盐和0.08 ml (0.42 mmol) N,N-二异丙基乙胺，并将混合物在微波中于150℃搅拌1.5 h。将反应溶液用乙腈/水/TFA稀释并通过制备型HPLC(RP18 柱, 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA)纯化。将产物级分浓缩，溶于二氯甲烷和少量甲醇中并用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤两次。将合并的水相用二氯甲烷重新萃取两次。将合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过厚层色谱法(流动相：二氯甲烷:甲醇 = 10:1)再次纯化。从而得到3 mg (理论值的7%)目标化合物。
实施例14
ent-4-{[2-氨基-2-(3,4-二氟苯基)乙基]氨基}-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
先将120 mg (0.18 mmol) 来自实施例3的 2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-碘-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮三氟乙酸盐置于1.8 ml NMP中，加入174 mg (0.71 mmol) 来自实施例34A的 ent-1-(3,4-二氟苯基)乙-1,2-二胺二盐酸盐(对映异构体A)和0.27 ml (1.56 mmol) N,N-二异丙基乙胺并将混合物在微波中于150℃搅拌6 h。将反应溶液用乙腈/水/TFA稀释并通过制备型HPLC(RP18 柱, 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA)纯化。将产物级分浓缩，溶于二氯甲烷和少量甲醇中并用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤两次。将合并的水相用二氯甲烷萃取两次。将合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过厚层色谱法(流动相：二氯甲烷:甲醇 = 20:1)再次纯化。从而得到19 mg (理论值的17%)目标化合物。
实施例15
2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-[(反-4-羟基环己基)氨基]-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
先将50 mg (0.07 mmol) 来自实施例3的 2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-碘-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮三氟乙酸盐置于0.6 ml NMP中，加入26 mg (0.22 mmol) 反-4-氨基环己醇和0.04 ml (0.22 mmol) N,N-二异丙基乙胺并将混合物在微波中于150℃搅拌3 h。将反应溶液用乙腈/水/甲酸稀释并通过制备型HPLC(RP18 柱, 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% 甲酸)纯化。将产物级分浓缩，溶于二氯甲烷和少量甲醇中并用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤两次。将合并的水相用二氯甲烷萃取两次。将合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。从而得到5 mg (理论值的12%)目标化合物。
实施例16
2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-[(2-羟基-2-甲基丙基)氨基]-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
先将200 mg (0.28 mmol) 来自实施例3的 2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-碘-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮三氟乙酸盐置于2.8 ml NMP中，加入123 mg (1.38 mmol) 1-氨基-2-甲基丙-2-醇并将混合物在微波中于150℃搅拌6 h。将反应溶液用乙腈/水/TFA溶解并通过制备型HPLC(RP18 柱, 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA)纯化。将产物级分浓缩，溶于二氯甲烷和少量甲醇中并用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤两次。将合并的水相用二氯甲烷重新萃取两次。将合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。从而得到89 mg (理论值的60%)目标化合物。
通过如下类似于实施例16的方式制备示于表1中的示例化合物：使来自实施例2的2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-碘-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮或来自实施例3的对应的三氟乙酸盐与合适的市售的或上述的胺(3 - 10 当量)在所述反应条件下于微波中反应(反应时间: 1 - 9 h; 温度: 150℃)。如果用的是所述胺的盐，则加入N,N-二异丙基乙胺(3 - 10 当量)。
示例性后处理反应混合物：
将反应混合物用水/TFA稀释并通过制备型HPLC(RP18 柱; 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA或0.05% 甲酸)纯化。另外地或可替换地，将粗产物通过厚层色谱法或硅胶色谱法(流动相: 二氯甲烷/甲醇)纯化。将含有产物的级分浓缩。
如果有必要，则将残留物吸收在二氯甲烷中并用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤。将水相用二氯甲烷萃取两次，并将合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤，浓缩并冻干。
表1：
实施例31
4-[(2-氨基-2-甲基丙基)氨基]-5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮甲酸盐
先将73 mg (0.126 mmol) 来自实施例10的 4-碘-5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮置于0.47 ml NMP中，加入56 mg (0.63 mmol) 2-甲基丙-1,2-二胺并将混合物在密闭容器中于130℃搅拌4.5 h。将反应混合物通过制备型HPLC(RP18 柱, 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.05% 甲酸)纯化。从而得到37 mg (理论值的51%)目标化合物。
通过如下类似于实施例31的方式制备示于表2中的示例化合物：使来自实施例10、实施例2或实施例3的对应的碘化物与合适的市售的或上述的胺或二胺(4 - 6 当量; 如果合适以盐酸盐的形式)和任选地加入1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(4 - 12 当量)在所述反应条件下于密闭容器中反应(反应时间: 1 - 5 h; 温度: 130℃)。
示例性后处理反应混合物：
将反应混合物稀释并通过制备型HPLC(RP18 柱; 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA或0.05% 甲酸)纯化。另外地或可替换地，将粗产物通过硅胶色谱法(流动相: 二氯甲烷/甲醇)纯化。
如果合适，将含有产物的级分浓缩，并将残留物吸收在二氯甲烷中并用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤。将水相用二氯甲烷萃取两次，并将合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤，浓缩并冻干。
表2：
1) 在反应中采用rac-rel-(1R,5S)-3-氮杂双环[3.1.0]己-1-胺二盐酸盐(4 当量)和1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯(8 当量)。
2) 使用替代形式的后处理: 将乙腈和水加入到反应混合物中。滤掉所形成的沉淀物，用少量乙腈和水洗涤并在高度真空下干燥。
实施例40
rac-4-[(2-氨基-3,3,3-三氟-2-甲基丙基)氨基]-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
制备游离胺：将160 mg (0.90 mmol) 来自实施例69A的 rac-3,3,3-三氟-2-甲基丙-1,2-二胺二盐酸盐溶于二氯甲烷/甲醇中并通过已用1 ml 二氯甲烷冲洗过的离子交换柱(StratoSpheres TM PL-HCO3 MP)。将柱用2 ml 二氯甲烷冲洗并将溶液(含有游离胺)浓缩。
先将70 mg (0.15 mmol) 来自实施例4的 4-氯-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮置于1.3 ml NMP中，加入rac-3,3,3-三氟-2-甲基丙-1,2-二胺(约115 mg; 0.82 mmol; 溶于0.3 ml NMP中)和0.15 ml (0.88 mmol) N,N-二异丙基乙胺并将混合物在微波中于150℃搅拌3 h。然后加入另外的81 mg (0.57 mmol) rac-3,3,3-三氟-2-甲基丙-1,2-二胺(如上所述制备)，并将混合物在微波中于150℃搅拌2 h。将反应溶液用乙腈/水/TFA稀释并通过制备型HPLC(RP18 柱, 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA)纯化。将产物级分浓缩，溶于二氯甲烷和少量甲醇中并用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤两次。将合并的水相用二氯甲烷萃取两次。将合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。从而得到31 mg (理论值的36%)目标化合物。
实施例41
rac-4-[(2-氨基-2-甲基丙基)氨基]-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5-甲基-5-(三氟甲基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
先将80 mg (0.09 mmol)(纯度 86%) 来自实施例7的 rac-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-碘-5-甲基-5-(三氟甲基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮三氟乙酸盐置于1 ml NMP中，加入49 µl (0.47 mmol) 1,2-二氨基-2-甲基丙烷并将混合物在微波中于150℃搅拌3 h。将反应溶液用乙腈/水/TFA溶解并通过制备型HPLC(RP18 柱, 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA)纯化。将产物级分浓缩，溶于二氯甲烷和少量甲醇中并用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤两次。将合并的水相用二氯甲烷萃取两次。将合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。从而得到33 mg (理论值的60%)目标化合物。
实施例42
4-{[(1-氨基环丙基)甲基]氨基}-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
将2 ml 含有2 M 盐酸水溶液的二乙醚加入到73 mg (0.1 mmol) (纯度 86%) 来自实施例37A的 (1-{[(2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]甲基}环丙基)氨基甲酸叔丁基酯的1 ml 二乙醚溶液中。将混合物在室温下再搅拌16 h。随后将混合物浓缩并在高度真空下干燥，并将残留物溶于乙腈/水中并通过制备型HPLC(RP18 柱, 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA)纯化。将产物级分浓缩，溶于二氯甲烷和少量甲醇中并用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤两次。将合并的水相用二氯甲烷萃取两次。将合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。从而得到17 mg (理论值的31%)目标化合物。
实施例43
2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-(4-羟基-1H-吡唑-1-基)-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
在氩气下，将176 mg (2.10 mmol) 1H-吡唑4-醇、114 mg (0.35 mmol) 碳酸铯、5 mg (0.04 mmol) 氧化铜(I)和19 mg (0.14 mmol) 2-羟基苯甲醛肟相继加入到100 mg (0.18 mmol) (纯度 86%) 来自实施例2的 2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-碘-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮的2 ml 乙腈溶液中。将反应混合物在微波中于160℃照射2 h。将混合物吸收在TFA/水中，通过Millipore过滤器过滤并通过制备型HPLC(RP18 柱, 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA)纯化。将含有产物的级分浓缩，溶于二氯甲烷和少量含有2 M 氨的甲醇中并通过厚层色谱法重新纯化(流动相: 二氯甲烷/甲醇 = 10:1)。从而得到5 mg (理论值的5%；纯度约95%)目标化合物。
实施例44
2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-4-(1H-吡唑-4-基氧基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
目标化合物在合成实施例43的目标化合物的过程中形成：
在氩气下，将176 mg (2.10 mmol) 1H-吡唑4-醇、114 mg (0.35 mmol) 碳酸铯、5 mg (0.04 mmol) 氧化铜(I)和19 mg (0.14 mmol) 2-羟基苯甲醛肟相继加入到100 mg (0.18 mmol) (纯度 86%) 来自实施例2的 2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-碘-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮的2 ml 乙腈溶液中。将反应混合物在微波中于160℃照射2 h。将混合物吸收在TFA/水中，通过Millipore过滤器过滤并通过制备型HPLC(RP18 柱, 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA)纯化。将含有产物的级分浓缩，溶于二氯甲烷和少量含有2 M 氨的甲醇中并通过厚层色谱法重新纯化(流动相: 二氯甲烷/甲醇 = 10/1)。从而得到15 mg (理论值的16%)目标化合物。
实施例45
ent-4-[(2-氨基-3-甲氧基-2-甲基丙基)氨基]-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(对映异构体A)
将531 mg rac-4-[(2-氨基-3-甲氧基-2-甲基丙基)氨基]-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(实施例21)在手性相上分离成对映异构体[柱: Daicel Chiralpak OD-H, 5 µm, 250 x 20 mm, 流动相: 50% 异己烷、50% 乙醇 + 0.2% 二乙胺, 流速 15 ml/min; 40℃, 检测: 220 nm]。
产率：283 mg 对映异构体A (99% 纯度, >99% ee)
Rt = 4.18 min [Daicel Chiralpak OD-H, 5 µm, 250 x 4.6 mm; 流动相: 50% 异己烷、50% 乙醇 + 0.2% 二乙胺, 流速 1.0 ml/min; 40℃；检测: 235 nm]。
实施例46
ent-4-[(2-氨基-3-甲氧基-2-甲基丙基)氨基]-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(对映异构体B)
将531 mg rac-4-[(2-氨基-3-甲氧基-2-甲基丙基)氨基]-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(实施例21)在手性相上分离成对映异构体[柱: Daicel Chiralpak OD-H, 5 µm, 250 x 20 mm, 流动相: 50% 异己烷、50% 乙醇 + 0.2% 二乙胺, 流速 15 ml/min; 40℃, 检测: 220 nm]。
产率：126 mg 对映异构体B (99% 纯度, >99% ee)
Rt = 7.15 min [Daicel Chiralpak OD-H, 5 µm, 250 x 4.6 mm; 流动相: 50% 异己烷、50% 乙醇 + 0.2% 二乙胺, 流速 1.0 ml/min; 40℃；检测: 235 nm]。
实施例47
2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-(2-羟基乙氧基)-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
先将100 mg (0.178 mmol) 来自实施例2的 2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-碘-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮与221 mg (3.56 mmol) 乙二醇混合，并加入8.4 mg (0.036 mmol) 3,4,7,8-四甲基-1,10-邻菲罗啉、3.4 mg (0.018 mmol) 碘化铜(I)和116 mg (0.356 mmol) 碳酸铯。然后将反应混合物悬浮于3 ml 甲苯中。将此悬浮液在微波中于140℃搅拌6 h。通过摇动，将悬浮液吸收在二氯甲烷/水中并萃取。将有机相浓缩。将残留物吸收在二氯甲烷/少量甲醇中并通过厚层色谱法纯化(流动相: 二氯甲烷/甲醇 = 30/1)。从而得到3.4 mg (理论值的4%，纯度 81%)目标化合物。
实施例48
2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-腈
将200 mg (0.36 mmol) 来自实施例2的 2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-碘-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮和35 mg (0.39 mmol) 氰化铜(I)溶于3.8 ml DMSO中，并将混合物在氩气下于150℃搅拌2 h。将反应混合物冷却，小心加入氯化铵的饱和水溶液/33% 强度氨水溶液(3/1)和乙酸乙酯并将混合物在室温下搅拌30 min。将混合物通过硅藻土（Celite）抽吸过滤，用乙酸乙酯洗涤，并将滤液的两个相分离。将有机相用氯化铵的饱和水溶液/33% 强度氨水溶液(3/1)洗涤三次并用氯化钠的饱和水溶液洗涤一次。然后将有机相用硫酸钠干燥，浓缩并在高度真空下干燥。将粗产物通过制备型HPLC(RP18 柱; 流动相: 甲醇/水 梯度 并加入0.1% TFA)纯化。将产物级分溶于二氯甲烷中并用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤两次。将合并的水相用二氯甲烷萃取一次。将合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤并通过旋转蒸发仪浓缩。从而得到100 mg (理论值的60%；纯度约95%)目标化合物。
实施例49
4-(氨基甲基)-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
将138 mg (0.28 mmol; 纯度约 95%) 来自实施例48的 2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-腈溶于26 ml 乙酸中，加入15 mg 钯/碳(10%)并将混合物在标准压力下氢化3.5 h。加入另外的15 mg 钯/碳(10%)后，将混合物在标准压力下再氢化45 min。将反应混合物通过Millipore过滤器过滤，将滤液浓缩并将残留物通过制备型HPLC(RP18 柱, 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA)纯化。将产物级分吸收在二氯甲烷中并用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤两次。将合并的水相用二氯甲烷萃取两次。将合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。从而得到98 mg (理论值的74%)目标化合物。
实施例50
2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲酰胺盐酸盐
先将1.50 g (2.9 mmol; 纯度约 90%) 来自实施例48的 2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-腈置于13.9 ml 1,4-二氧六环中，加入3.62 ml (7.24 mmol) 2 N 氢氧化钠水溶液并将混合物在90℃搅拌20 h。加入17.4 ml 1 N 盐酸水溶液并将反应混合物浓缩。将残留物用水搅拌，过滤并用水洗涤。将已经滤掉的固体在高度真空下干燥。从而得到1.02 g (理论值的74%)目标化合物。此产物无需进一步纯化即可转化。
实施例51
2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲酸
将17.3 ml 半浓盐酸、7.6 ml DMSO和7.64 ml 1,4-二氧六环加入到955 mg (1.85 mmol) 来自实施例50的 2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲酰胺盐酸盐中，并将混合物在85℃搅拌11 h。将反应溶液在旋转蒸发仪上浓缩。然后将混合物用水稀释并在室温下搅拌30 min。滤掉产生的固体并干燥。从而得到256 mg (理论值的26%；纯度约89%)目标化合物。将滤液用乙酸乙酯萃取三次。将水相浓缩至其初始体积的一半。从而得到固体沉淀物。滤掉沉淀物并干燥。从而得到323 mg (理论值的33%；纯度约91%)目标化合物。将滤液用二氯甲烷萃取五次。将合并的有机相浓缩。将残留物(含有DMSO的溶液)用乙腈/水稀释并分批通过制备型HPLC(RP18 柱; 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA)纯化。从而得到105 mg (理论值的11%；纯度约90%)目标化合物。总共得到684 mg (理论值的69%；纯度约90%)目标化合物。
实施例52
5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-腈
将1.0 g (1.73 mmol) 来自实施例10的 4-碘-5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮和170 mg (1.90 mmol) 氰化铜(I)溶于19 ml DMSO中，并将混合物在氩气下于150℃搅拌3 h。将反应混合物冷却，小心加入氯化铵的饱和水溶液/33% 强度氨水溶液(3/1)和乙酸乙酯并将混合物在室温下搅拌30 min。将混合物用硅藻土（Celite）搅拌，用乙酸乙酯洗涤，并将滤液的两个相分离。将有机相用氯化铵的饱和水溶液/33% 强度氨水溶液(3/1)洗涤三次。然后将有机相用硫酸钠干燥，在旋转蒸发仪上浓缩并在高度真空下干燥。将硅藻土（Celite）滤饼和硫酸钠残留物与甲醇/二氯甲烷(1/1)一起搅拌，过滤并通过旋转蒸发仪浓缩。将残留物用水洗涤并在高度真空下干燥。将目标化合物的所有级分合并(689 mg; 理论值的95%)并无需进一步纯化即可进一步反应。
实施例53
5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲酰胺
先将689 mg (1.44 mmol) 来自实施例52的 5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-腈置于7 ml 1,4-二氧六环中，加入1.8 ml (3.58 mmol) 2 N 氢氧化钠水溶液并将混合物在80℃搅拌过夜。加入3.6 ml 1 N 盐酸水溶液并将反应混合物浓缩。将残留物用水搅拌，过滤并用水洗涤。将已经滤掉的固体在高度真空下干燥。从而得到680 mg (理论值的95%)目标化合物。此产物无需进一步纯化即可转化。
实施例54
5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲酸
将11.9 ml 浓盐酸加入到680 mg (1.37 mmol) 来自实施例53的 5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲酰胺中，并将混合物在80℃搅拌14 h。将反应混合物用水稀释。滤掉沉淀的固体，用水洗涤并在高度真空下干燥。从而得到426 mg (理论值的54%，纯度约87%)目标化合物。此产物无需进一步纯化即可转化。
实施例55
N-环丙基-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲酰胺
在室温下将40 mg (0.076 mmol; 纯度约 90%) 来自实施例51的 2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-甲酸、8.7 mg (0.152 mmol) 环丙胺和40 µl (0.228 mmol) N,N-二异丙基乙胺溶于1 ml DMF中，并随后加入68 µl (0.114 mmol; 50% 在乙酸乙酯中) 的2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三亚膦 2,4,6-三氧化物(丙膦酸酐 = T3P)。将混合物在室温下搅拌2 h。将反应溶液浓缩，加入TFA/水/乙腈并将混合物通过制备型HPLC(RP18 柱, 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA)纯化。
将产物级分浓缩，然后吸收在二氯甲烷中并用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤两次。将合并的水相用二氯甲烷重新萃取两次。将合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤，浓缩并冻干。从而得到30 mg (理论值的75%)目标化合物。
通过如下类似于实施例55的方式制备示于表3中的示例化合物：使来自实施例51或实施例54的羧酸与合适的市售的或上述的胺(2 - 10 当量)、丙膦酸酐(1.5 - 4.5 当量)和N,N-二异丙基乙胺(3 - 5 当量)在所述反应条件下反应(反应时间: 1 - 48 h; 温度: 室温)。
示例性后处理反应混合物：
将反应混合物用水、TFA或甲酸稀释并通过制备型HPLC(RP18 柱; 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.1% TFA或0.05% 甲酸)纯化。另外地或可替换地，将粗产物通过厚层色谱法或硅胶色谱法(流动相: 二氯甲烷/甲醇)纯化。将含有产物的级分浓缩。
如果有必要，则将残留物吸收在二氯甲烷中并用碳酸氢钠的饱和水溶液洗涤。将水相用二氯甲烷萃取两次，并将合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤，浓缩并冻干。
表3：
1) 随后将产物通过制备型HPLC(RP18 柱; 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入1% TFA)再一次纯化。
实施例65
N-[(2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]吡啶-4-基)甲基]甲磺酰胺
在氩气下，先将30 mg (0.06 mmol) 来自实施例49的 4-(氨基甲基)-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮置于0.67 ml 二氯甲烷/DMF(1/1)中。在室温下加入18 mg (0.14 mmol) N,N-二异丙基乙胺并将混合物搅拌15 min。随后，在室温下加入8 mg (0.07 mmol) 甲磺酰氯并将混合物在室温下搅拌1 h。加入另外的2.3 mg (0.02 mmol) 甲磺酰氯并将混合物在室温下搅拌1 h。将反应溶液浓缩并将残留物吸收在二氯甲烷中并通过厚层色谱法(流动相: 二氯甲烷/甲醇 = 10/1)纯化。从而得到26 mg 目标化合物(理论值的72%)。
实施例66
N-[(2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]吡啶-4-基)甲基]环丙烷甲酰胺
先加入40 mg (0.08 mmol) 来自实施例49的 4-(氨基甲基)-2-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮。在0℃和氩气下，加入38 mg (0.30 mmol) N,N-二异丙基乙胺和含有10 mg (0.09 mmol) 环丙烷甲酰氯的3 ml 四氢呋喃溶液。将溶液在室温下搅拌1 h。将反应溶液浓缩并将残留物吸收在二氯甲烷/甲醇中并通过厚层色谱法(流动相: 二氯甲烷/甲醇 = 30/1)纯化。从而得到34 mg 目标化合物(理论值的70%，纯度 92%)。
实施例67
4-氨基-2-{6-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,5-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
在氩气下，先将50 mg (0.08 mmol; 纯度约 56%) 来自实施例11A的 6-氯-8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-甲脒加入0.9 ml 叔丁醇中，在室温下相继加入13.5 mg (0.12 mmol) 叔丁醇钾和16 mg (0.10 mmol) 来自实施例28A的 3,3-二氰基-2,2-二甲基丙酸甲酯并将混合物加热回流3 h。将反应混合物浓缩，向残留物中加水并将混合物在室温下搅拌20 min。滤掉固体，用水彻底洗涤并干燥。将粗产物溶于二氯甲烷/甲醇中并通过厚层色谱法(流动相: 二氯甲烷/含2M 氨的甲醇 10/1)纯化。从而得到9 mg (理论值的23%)目标化合物。
实施例68
3-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-7,7-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-e][1,2,4]三嗪-6-酮
将来自实施例48A的 2-(5-氯-3-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2-甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-1,2,4-三嗪-6-基)-2-甲基丙酸甲酯的反应溶液用60 ml 无水乙腈稀释并随后在0℃缓慢滴入到 60 ml 33% 强度氨水溶液中。将反应混合物在室温下搅拌过夜并随后在旋转蒸发仪上浓缩。向残留物中加入水和乙酸乙酯并使两相分离。用乙酸乙酯萃取水相两次。将合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将粗产物通过制备型HPLC(RP18 柱，流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.05% 甲酸)纯化。从而得到77 mg (理论值的34%，经过2个步骤)目标化合物。
实施例69
3-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-7,7-二甲基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-e][1,2,4]三嗪-6-酮
将来自实施例51A的 2-(5-氯-3-{8-[(2,6-二氟苄基)氧基]-2,6-二甲基咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-1,2,4-三嗪-6-基)-2-甲基丙酸甲酯的反应溶液用85 ml 无水乙腈稀释并随后在0℃缓慢滴入到 85 ml 33% 强度氨水溶液中。将反应混合物在室温下搅拌过夜并随后在旋转蒸发仪上浓缩。向残留物中加入水和乙酸乙酯并使两相分离。用乙酸乙酯萃取水相两次。将合并的有机相用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。向粗产物中加入乙腈。滤掉所形成的沉淀物，用少量乙腈洗涤并在高度真空下干燥。从而得到218 mg (理论值的35%，经过2个步骤)目标化合物。
实施例70
4-(环丙基乙炔基)-5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
在氩气气氛下，先将200 mg (0.345 mmol) 4-碘-5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(实施例10)和68 mg (1.036 mmol) 乙炔基环丙烷置于5.6 ml 无水THF中。加入105 mg (1.036 mmol) 二异丙胺、20 mg (0.104 mmol) 碘化铜(I)和49 mg (0.070 mmol) 二氯双(三苯基膦)钯(II)，并将混合物加热回流48 h。将反应混合物冷却，通过硅藻土（Celite）过滤，用THF洗涤并浓缩，并将残留物通过制备型HPLC(RP-C18, 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.05% 甲酸)纯化。从而得到83 mg 目标化合物(理论值的44%)。
实施例71
4-(2-环丙基乙基)-5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
将72 mg (0.14 mmol) 4-(环丙基乙炔基)-5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(实施例70)溶于14 ml 无水甲醇中。将溶液在配有10% 钯/碳盒的流动氢化反应器(H-Cube，来自Thales Nano, Budapest, 型号HC-2-SS)中于10巴的氢气压力下氢化。将反应混合物浓缩并将残留物通过制备型HPLC(RP-C18; 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.05% 甲酸)纯化。从而得到15 mg 目标化合物(理论值的20%)。
实施例72
5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-丙基-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
在氩气下，先将100 mg (0.173 mmol) 4-碘-5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(实施例10)置于2.2 ml 二氧六环中。然后加入3.7 mg (0.004 mmol) PdCl2(dppf) CH2Cl2，并滴入1.38 ml (0.69 mmol) 0.5 M 正丙基溴化锌的四氢呋喃溶液。然后将混合物在微波中于120℃加热7 h。将反应混合物冷却，过滤，用二氧六环洗涤并浓缩，并将残留物通过制备型HPLC(RP-C18, 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.05% 甲酸)纯化。将产物级分通过制备型厚层色谱法(流动相：二氯甲烷/甲醇 = 10/1)再次纯化。从而得到5.3 mg 目标化合物(理论值的5%；纯度 74%)。
实施例73
5,5-二甲基-4-(2-甲基-1,3-噻唑-5-基)-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
在氩气气氛下，将100 mg (0.173 mmol) 4-碘-5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(实施例10)悬浮于3.8 ml 二氧六环中，并加入117 mg (0.518 mmol) 2-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁唑环戊硼烷-2-基)-1,3-噻唑和1.38 ml (0.69 mmol) 0.5 M 碳酸钾水溶液。10 min后，加入44 mg (0.038 mmol) 四(三苯基膦)钯(0)并将混合物在140℃于微波中搅拌1 h。将反应混合物冷却，通过硅藻土（Celite）过滤，用二氧六环洗涤并浓缩，并将残留物通过制备型HPLC(RP-C18, 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.05% 甲酸)纯化。从而得到7 mg (理论值的7%)目标化合物。
实施例74
5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-(1H-吡唑-5-基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
在氩气气氛下，将100 mg (0.173 mmol) 4-碘-5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(实施例10)悬浮于3.8 ml 二氧六环中，并加入100 mg (0.518 mmol) 5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁唑环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑和1.38 ml (0.69 mmol) 0.5 M 碳酸钾水溶液。10 min后，加入44 mg (0.038 mmol) 四(三苯基膦)钯(0)并将混合物在140℃于微波中搅拌30 min。将反应混合物冷却，通过硅藻土（Celite）过滤，用二氧六环洗涤并浓缩，并将残留物通过制备型HPLC(RP-C18, 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.05% 甲酸)纯化。从而得到41 mg (理论值的46%)目标化合物。
实施例75
5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮甲酸盐
在标准压力和室温下，将含有100 mg (0.173 mmol) 4-碘-5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(实施例10)的DMF(4 ml)用19.6 mg 10% 强度钯/碳氢化2天。将混合物通过硅藻土（Celite）过滤，用DMF洗涤并浓缩，并将残留物通过制备型HPLC(RP-C18; 流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.05% 甲酸)纯化。从而得到19 mg (理论值的22%)目标化合物。
实施例76
4-(环丙基甲氧基)-5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
在氩气下，将100 mg (0.213 mmol) 4-羟基-5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(实施例11)、17 mg (0.23 mmol) 环丙基甲醇和60 mg (0.23 mmol) 三苯基膦悬浮于0.84 ml THF中，将混合物置于超声浴中10 min，然后加入49 mg (0.230 mmol) 偶氮二甲酸二异丙酯(DIAD)并将混合物在室温下搅拌过夜。加入另外的6 mg (0.08 mmol) 环丙基甲醇、20 mg (0.08 mmol) 三苯基膦和14 mg (0.07 mmol) 偶氮二甲酸二异丙酯，并将混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物通过制备型HPLC(RP-C18，流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.05% 甲酸)纯化。从而得到19 mg (理论值的17%)目标化合物。
实施例77
5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-4-(3,3,3-三氟丙氧基)-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮
在氩气下，将100 mg (0.213 mmol) 4-羟基-5,5-二甲基-2-{2-甲基-8-[(2,3,6-三氟苄基)氧基]咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基}-5,7-二氢-6H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-酮(实施例11)、26 mg (0.23 mmol) 3,3,3-三氟丙-1-醇和60 mg (0.23 mmol) 三苯基膦悬浮于0.84 ml THF中，将混合物在超声浴中混合10 min，然后加入49 mg (0.230 mmol) 偶氮二甲酸二异丙酯(DIAD)并将混合物在室温下搅拌过夜。加入另外的9 mg (0.08 mmol) 3,3,3-三氟丙-1-醇、20 mg (0.08 mmol) 三苯基膦和15 mg (0.07 mmol) 偶氮二甲酸二异丙酯，并将混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物通过制备型HPLC(RP-C18，流动相: 乙腈/水 梯度 并加入0.05% 甲酸)纯化。从而得到48 mg (理论值的40%)目标化合物。
B.评估药理功效
使用了下列缩写：
ATP 三磷酸腺苷
Brij35 聚氧乙烯(23)月桂醚
BSA 牛血清白蛋白
DTT 二硫苏糖醇
TEA 三乙醇胺。
本发明的化合物的药理作用可以在以下测定中证实：
B-1.体外血管舒张作用
根据本发明的化合物的舒张作用的测定在隔离的容器中进行，如JP Stasch 等人, Br J Pharmacol.2002; 135, 333-343中所述。将家兔通过击打颈部杀死并放血。将主动脉取出，不含有粘附的组织，并分割成宽1.5 mm的环，将其在预应力下单独地放置在37℃、通入了卡波金的Krebs-Henseleit溶液的5 ml器官浴中，所述溶液具有以下组成(均以mM计): 氯化钠: 119; 氯化钾: 4.8; 二水氯化钙: 1; 七水硫酸镁: 1.4; 磷酸二氢钾: 1.2; 碳酸氢钠: 25; 葡萄糖: 10。收缩力通过Statham UC2室来测定、放大并使用A/D转换器（DAS-1802 HC，Keithley Instruments Munich）数字化，并平行记录在线性记录器上。
为了获得收缩，向所述浴中以渐增的浓度累积地添加苯肾上腺素。在多个对照周期之后，以逐次增加的剂量在接下来的每个过程中添加待演技的物质，并且将收缩强度与在前一过程中所达到的收缩强度相比较。由此计算出将对照值水平减少50%所需要的浓度（IC50值）。标准施用体积为5 µl；在浴溶液中的DMSO含量相应为0.1％。
B-2.对重组鸟苷酸环化酶报告细胞系的影响
使用重组鸟苷酸环化酶报告细胞系确定根据本发明的化合物的细胞活性，如F. Wunder 等人, Anal.Biochem.339, 104-112 (2005)中所述。
本发明的化合物的具有代表性的MEC值(MEC = 最低有效浓度)示于下表1中(在一些情况下，以各确定值的平均值的形式)：
表1：
B-3.人类磷酸二酯酶 5 (PDE 5)的抑制
如下获得PDE 5制剂：将人类血小板制浆 (Microfluidizer®, 800 bar, 3次)，离心 (75 000 g, 60 min, 4℃)和将上清液在单Q10/10柱进行离子交换色谱法（线性氯化钠梯度，洗脱用氯化钠在缓冲液 (20 mM Hepes pH 7.2, 2 mM 氯化镁) 中的0.2-0.3 M溶液）。将具有PDE 5活性的级分合并（PDE 5制剂），并储存在-80℃下。
为了确定其对人类PDE 5的体外作用，将试验物质溶于100％ DMSO中，并系列地稀释。通常情况下，制备从200 μM到0.091 μM的稀释系列（1:3）（在试验中获得的最终浓度：4 μM至0.0018 μM）。在每种情况下，将2μl的经稀释的物质溶液预先加入到微量滴定板的孔中（Isoplate-96/200W；Perkin Elmer）。接着，加入50μl的上述PDE 5制剂的稀释液。选择PDE 5制剂的稀释液，使得在后来的培养期间小于70％的底物被转化（典型稀释：1: 100；稀释缓冲液：50 mM三羟甲基氨基甲烷/盐酸，pH为7.5，8.3 mM氯化镁，1.7 mM EDTA，0.2％ BSA）。将所述底物[8-3H]环鸟苷-3',5'-单磷酸酯 (1 µCi/µl; Perkin Elmer) 以1:2000使用测定缓冲液 (50 mM 三羟甲基氨基甲烷/盐酸 pH 7.5, 8.3 mM氯化镁, 1.7 mM EDTA) 稀释至0.0005 µCi/µl的浓度。通过添加50μl（0.025 µCi）的稀释底物，最终开始酶反应。将试验混合物在室温下培养60分钟和将所述反应通过加入25μl的悬浮液（在水中的18 mg/ml Yttrium Scintillation Proximity Beads (用于SPA测定的磷酸二酯酶珠, RPNQ 0150, Perkin Elmer)）而停止。将微量滴定板用薄膜密封，并在室温下放置60分钟。随后，在Microbeta Scintillation计数器 (Perkin Elmer)中测量所述板（每个孔30 s）。通过物质浓度相对于百分比的PDE 5抑制的曲线图确定IC50值。
本发明化合物的代表性IC50值显示在下表中（表2；在一些情况下，以各确定值的平均值的形式）：
表2：
B-4.给被麻醉的大鼠测量血压
将体重300-350 g的雄性Wistar大鼠用硫喷妥钠(100 mg/kg i.p.)麻醉。切开气管后，将导管引入股动脉以测量血压。待测物质以溶液形式通过灌胃口服或经股静脉静脉内注射施用(Stasch 等人Br. J. Pharmacol.2002; 135: 344-355)。
B-5.在清醒的自发高血压大鼠上无线电遥测血压测量
在下述清醒大鼠上的血压测量采用购自DATA SCIENCES INTERNATIONAL DSI, USA的遥测系统。
该系统由3个主要组件组成：
可植入的发射器(Physiotel®遥测发射机)
接收器(Physiotel®接收器)，其经由多路器(DSI Data Exchange Matrix)连接至
数据采集计算机。
该遥测系统会提供处于它们的普通生存空间中的清醒动物上的血压、心率和身体运动的连续获取。
动物材料
对体重＞200g的成年雌性自生性高血压大鼠(SHR Okamoto)进行研究。得自Okamoto Kyoto School of Medicine, 1963的SHR/NCrl由具有极大升高的血压的雄性Wistar Kyoto大鼠与具有稍微升高的血压的雌性大鼠杂交而成，并在F13递送至美国国立卫生研究院。
在发射器植入以后，将实验动物独自地圈养在3型Makrolon笼中。它们自由摄取标准饲料和水。
实验室中的日/夜节律通过室内照明在早上06:00点和在晚上19:00点进行变化。
植入发射器
将使用的TA11 PA - C40遥测发射机在第一次实验使用以前至少14天于无菌条件下手术植入实验动物中。以此方式配备仪器的动物可以在伤口愈合且植入物稳定后重复使用。
为了植入，将禁食的动物用戊巴比妥(Nembutal，Sanofi：50mg/kg腹腔注射)进行麻醉，并对腹部侧大面积剃毛和消毒。在沿着腹白线将腹腔切开以后，将所述系统的液体填充的测量导管以头盖方向插入分歧部以上的降主动脉，并用组织胶(VetBonDTM，3M)固定。将发射器外壳在腹膜内固定至腹壁肌肉，并进行伤口的分层闭合。
手术后施用抗菌素(Tardomyocel COMP，Bayer，1ml/kg皮下注射)以预防感染。
物质和溶液
除非另有描述，否则在每种情况下将待研究物质通过管饲口服给药至动物组(n＝6)。根据5ml/kg体重的给药体积，使用溶解在合适的溶剂混合物中或悬浮在0.5%的甲基纤维素中的测试物质。
将溶剂处理的动物组用作对照。
实验大纲
将本遥测测量装置配置给24个动物。按实验编号记录每个实验(V字母表试验，年月日)。
生活在所述装置中的每只带仪器的大鼠分配有单独的接收天线(1010接收器，DSI)。
植入的发射器可以从外部通过引入的磁力开关激活。它们在实验预先开动中转换到发射状态。发射的信号可以通过数据采集系统(用于Windows的DataquestTM A.R.T.，DSI)在线获得，并相应地进行处理。在每种情况下数据被存储到为此生成的带有实验编号的文件中。
在标准程序中，下面各项在每种情况下测量10-秒：
● 收缩压 (SBP)
● 舒张压 (DBP)
● 平均动脉压 (MAP)
● 心率 (HR)
● 活动 (ACT)。
在计算机控制下以5分钟的间隔反复进行测量值采集。作为绝对值获得的源数据，在图表中用当前测量的气压表压力(Ambient Pressure Reference Monitor; APR-1)进行校正，并存储为单独的数据。进一步的技术细节在制造公司(DSI)的文件中给出。
除非另有描述，在实验当天的9:00施用测试物质。施用之后，测量以上所述的参数24小时。
评价
实验结束以后，使用分析软件(DataquestTM A.R.T.Analysis)分选获得的个体数据。此处空白值被设为在施用前2小时的时间点，因此所选数据集合包括实验当天7:00到第二天9:00的时间段。
通过测定平均值(15分钟平均值)，将数据可预置时间进行平滑化（glaetten），并作为文本数据传送至存储介质。以此方式将预先分选并压缩的测量值传送至Excel模板中并制成表。将记录的数据按照试验天存储在带有实验编号的特定文件夹中。将结果和测试方案归档在文件夹中，按照编号以纸形式分类。
文献：
Klaus Witte, Kai Hu, Johanna Swiatek, Claudia Müssig, Georg Ertl和Björn Lemmer: Experimental heart failure in rats: effects on cardiovascular circadian rhythms and on myocardial β-adrenergic signaling.Cardiovasc Res 47 (2): 203-405, 2000; Kozo Okamoto: Spontaneous hypertension in rats.Int Rev Exp Pathol 7: 227- 270, 1969; Maarten van den Buuse: Circadian Rhythms of Blood Pressure, Heart Rate, and Locomotor Activity in Spontaneously Hypertensive Rats as Measured With Radio-Telemetry.Physiology & Behavior 55(4): 783-787, 1994。
B-6. 在对大鼠的长期实验中测定器官保护作用
本发明化合物的器官保护作用展示在治疗相关的“低一氧化氮（NO）/高肾素”大鼠高血压模型中。这项研究根据最近发表的文章进行 (Sharkovska Y 等人J Hypertension 2010; 28: 1666-1675)。其中同时用本发明的化合物或者媒介物经过数周治疗肾素转基因的大鼠（TGR（mRen2）27），对该大鼠通过饮用水给药NO合成酶抑制剂L-NAME。在治疗期间确定血液动力学和肾功能参数。在长期研究结束时，所述器官保护（肾、肺、心脏、主动脉）通过组织病理学研究、生物标志物、表达分析和心血管的血浆参数表示。
B-7.在低氧条件下对清醒的狗的的肺动脉压（PAP）的测量
对于下文描述的对清醒的狗的血压测量，例如采用来自DATA SCIENCES INTERNATIONAL DSI, USA的遥测系统。该系统由可植入的压力发射器、接收器和数据采集计算机组成。该遥测设备实现了对清醒的动物连续监测血压和心率。所使用的遥测发射器在第一次实验开始之前在无菌条件下手术植入到实验动物。以这种方式带有仪器的动物在伤口愈合和植入体稳定之后可以反复使用。这些测试对成年的雄性小猎犬（Beagle）进行。技术细节可以参见制造公司（DSI）的文件。
物质和溶液
将待测试的物质分别通过明胶胶囊口服或者在合适的溶剂混合物中的静脉注射施用给一组狗（n =3-6）。将媒介物处理的动物组用作对照。
实验大纲
对于低氧条件下的测量，将动物转移到一个低氧气氛（大约10%的氧含量）的室中。这通过使用可商购的低氧发生器（Hoehenbalance, Cologne, 德国）产生。在标准实验中，例如在施用所述物质之后1小时和5小时，将狗转移到低氧室中30分钟。在进入低氧室之前和之后约10分钟，以及在留在低氧室的过程中，通过遥测测量压力和心率。
评价
对于健康的狗，低氧条件下会迅速增加PAP。通过施用所述物质可以降低该增加。为了量化PAP增加以及心率和全身血压的差异，比较在低氧期间之前和过程中的通过测定平均值而平滑的数据。使用Prism软件（GraphPad, USA）对测量的参数的变化进行绘图。
B-8.确定在静脉内和口服施用以后的药代动力学参数
雄性CD-1小鼠、雄性Wistar大鼠和雌性小猎犬中确定根据本发明的化合物的药代动力学参数。在小鼠和大鼠的情况下的静脉内施用借助于物种特异性的血浆/DMSO制剂进行，且在狗的情况下，借助于水/PEG400/乙醇制剂。在所有物种中，基于水/PEG400/乙醇制剂，经由管饲法进行溶解的物质的口服施用。通过在物质施用之前将有机硅导管插入右颈外静脉中，简化从大鼠的抽血。所述操作在实验之前至少一天进行，用异氟烷镇痛和施用镇痛剂(阿托品/卡布洛芬(3/1) 0.1 ml皮下注射)。在包括物质施用以后至少24小时至最多72小时的终末时间点的时间窗内取血(通常超过10个时间点)。当取血时，将它收入肝素化的试管中。然后，通过离心得到血浆，并任选地在-20℃储存，直到进一步处理。
将内部标准品(其也可以是化学无关的物质)加入到本发明的化合物的样品、校准样品和定量物（qualifier）中，然后借助于过量的丙酮进行蛋白沉淀。加入与LC条件匹配的缓冲溶液，并随后涡旋，然后在1000 g离心。使用C18反相柱和可变的洗脱液混合物，通过LC-MS/MS分析上清液。通过来自特定选择性离子监测实验的提取离子色谱图的峰高或面积，对物质定量。
使用经验证的药代动力学计算程序，使用确定的血浆浓度/时间图来计算药代动力学参数诸如AUC、Cmax、t1/2 (终末半衰期)、F (生物利用度)、MRT (平均停留时间)和CL (清除率)。
由于在血浆中进行物质定量，必须确定所述物质的血液/血浆分布，以便能够相应地调节药代动力学参数。为此目的，将确定量的物质在摇滚滚动混合物中在目标物种的肝素化全血中温育20 min。在1000 g离心后，测量血浆浓度(借助于LC-MS/MS；参见上文)并通过计算C血液/C血浆的比例值加以确定。
B-9.代谢研究
为了确定本发明的化合物的代谢特性，将它们与得自不同动物物种(例如大鼠、狗)、以及具有人起源的重组人细胞色素P450 (CYP)酶、肝微粒体或原代新鲜肝细胞一起温育，以便得到和对比关于以下方面的信息：基本上完全的肝I期和II期代谢，和在代谢中涉及的酶。
将本发明的化合物以约0.1-10µM的浓度温育。为此目的，制备具有0.01-1 mM浓度的本发明的化合物在乙腈中的储备溶液，然后以1:100稀释度移液进温育混合物中。用和不用由1 mM NADP+、10 mM 6-磷酸葡萄糖和1单位的6-磷酸葡萄糖脱氢酶组成的NADPH产生系统，将肝微粒体和重组酶在37℃在50 mM磷酸钾缓冲液pH 7.4中温育。将原代肝细胞同样在37℃在Williams E培养基中悬浮温育。0 – 4 h的温育时间以后，用乙腈(终浓度约30%)停止温育混合物，并将蛋白在约15 000 x g离心出。将如此停止的样品直接分析或在-20℃储存直到分析。
借助于具有紫外和质谱法检测的高效液相色谱法(HPLC-UV-MS/MS)进行分析。为此目的，用合适的C18反相柱以及乙腈和10 mM甲酸铵水溶液或0.05%甲酸的可变洗脱液混合物，将温育样品的上清液色谱分离。与质谱法数据结合的UV色谱图用于代谢物的鉴别、结构阐明和定量估计，以及用于温育混合物中的根据本发明的化合物的定量代谢评估。
B-10.Caco-2 渗透性测试
测定测试物质的渗透性借助于Caco-2细胞系、用于胃肠屏障的渗透性预测的成熟的体外模型进行(Artursson, P.和Karlsson, J. (1991).Correlation between oral drug absorption in humans and apparent drug permeability coefficients in human intestinal epithelial (Caco-2) cells.Biochem.Biophys.175 (3), 880-885)。将Caco-2细胞(ACC No. 169, DSMZ, Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen, Braunschweig, Germany) 接种在含有添加物的24孔平板上并培养14至16天。对于渗透性研究，将测试物质溶于DMSO并用转运缓冲液(Hanks缓冲盐溶液, Gibco/Invitrogen, 含有19.9 mM 葡萄糖和9.8 mM HEPES)稀释至最终测试浓度。为了测定测试物质的肠腔侧到基底侧的渗透性(PappA-B)，将含有该测试物质的溶液施加到Caco-2细胞单层的肠腔侧，并将转运缓冲液施加到基底侧。为了测定测试物质的基底侧到肠腔侧的渗透性(PappB-A)，将含有该测试物质的溶液施加到Caco-2细胞单层的基底侧，并将转运缓冲液施加到肠腔侧。在实验开始时，从相应的供体隔室中取样，从而确保质量平衡。在37℃温育两小时后，从这两个隔室取样。借助于LC-MS/MS分析样品并计算表观渗透系数(Papp)。对于各细胞单层而言，测定黄色荧光素的渗透性以确保细胞层的完整性。在每次测试运行中，还测定了阿替洛尔(低渗透性标记物)和柳氮磺胺吡啶(主动排泄标记物)的渗透性作为质量控制。
B-11.hERG 钾电流测定
hERG(人类ether-a-go-go相关基因)钾电流对于人心肌动作电位的重新极化具有显著贡献(Scheel 等人, 2011)。通过药物抑制此电流在极少数情况下可以造成可能致命的心律失常，并因此在药物开发早期进行了研究。
此处所用的功能性hERG测定基于重组HEK293细胞系，该细胞系稳定表达KCNH2(HERG)基因(Zhou 等人, 1998)。这些细胞借助于“全细胞电压钳”技术(Hamill 等人, 1981)在自动化系统(Patchliner™; Nanion, Munich, Germany)中进行研究，该系统控制膜电压并在室温下测量hERG钾电流。PatchControlHT™ 软件(Nanion)控制Patchliner系统、数据捕获和数据分析。电压通过由PatchMasterPro™ 软件控制的2 EPC-10 quadro 放大器控制(二者均来自: HEKA Elektronik, Lambrecht, Germany)。具有适度电阻(~2 MΩ; Nanion)的NPC-16薄片充当电压钳实验的平面基板。
NPC-16薄片填充有细胞内和细胞外溶液(cf. Himmel, 2007)以及细胞悬浮液。形成千兆欧姆密封并建立起全细胞模式(包括若干自动化质量控制步骤)后，以-80 mV的保持电位夹住细胞膜。后续电压钳方案将指令电压改变至+20 mV (保持1000 ms)、 -120 mV (保持500 ms)并回到-80 mV 保持电位；每隔12秒重复此过程。在初始稳定期(约5-6分钟)后，将测试物质溶液通过移液器以渐增浓度(例如0.1、1和10 µmol/l)(暴露约5-6分钟/浓度)引入，后接若干个洗涤步骤。
通过将电位从+20 mV改变至-120 mV而产生的向内的“尾”电流的振幅用于对hERG钾电流进行定量，并以时间函数的形式描述(IgorPro™ Software)。在各种时间间隔终末的电流振幅（例如测试物质前的稳定期、第一/第二/第三测试物质浓度）用于建立浓度/作用曲线，从中计算测试物质的半最大抑制浓度IC50。
C.药物组合物的工作实施例
可以如下将本发明的化合物转化成药物制剂：
片剂:
组成：
100 mg本发明的化合物、50 mg乳糖(一水合物)、50 mg玉米淀粉(天然的)、10 mg聚乙烯吡咯烷酮(PVP 25)(BASF, Ludwigshafen, Germany)和2 mg硬脂酸镁。
片剂重量212 mg，直径8 mm，曲率半径12 mm。
生产：
使用5%的PVPs在水中的溶液(w/w)，将本发明的化合物、乳糖和淀粉的混合物造粒。干燥后将该颗粒与硬脂酸镁混合5分钟。用常规压片机压制该混合物(关于片剂的形式，参见上面)。用于压制的标准值使用15 kN的压力。
用于口服施用的悬浮液：
组成：
1000 mg本发明的化合物、1000 mg乙醇(96%)、400 mg Rhodigel®(黄原胶，得自FMC, Pennsylvania, USA)和99 g水。
10 ml口服悬浮液相当于100 mg本发明的化合物的单次剂量。
生产：
将Rhodigel悬浮于乙醇中；将本发明的化合物加入所述悬浮液中。在搅拌下，加入水。将所述混合物搅拌约6 h，直到Rhodigel溶胀结束。
用于口服施用的溶液：
组成：
500 mg本发明的化合物、2.5 g聚山梨酯和97 g聚乙二醇400。20 g口服溶液相当于100 mg本发明的化合物的单次剂量。
生产：
在搅拌下，将本发明的化合物悬浮于聚乙二醇和聚山梨酯的混合物中。搅拌过程持续至本发明的化合物已经完全溶解。
静脉内溶液：
以低于在生理上耐受的溶剂(例如等渗盐水溶液、5%葡萄糖溶液和/或30%PEG 400溶液)中的饱和溶解度的浓度，溶解本发明的化合物。将得到的溶液无菌过滤，并填充于无菌的且无热原的注射容器中。