本发明属于医药技术领域，具体涉及一种极易溶解且高分子杂质含量较低的盐酸头孢甲肟的制备方法。
背景技术：
盐酸头孢甲肟(Cefmenoxime Hydrochloride)，化学名为：(6R，7R)–7–[(Z)-2–(2-氨基-4-噻唑基)-2-甲氧亚氨基乙酰氨基]-3-[[(1-甲基-1H-四唑-5-基)-硫]甲基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4.2.0]辛-2-烯-2-甲酸盐酸盐(2:1)。其化学结构式如下：
盐酸头孢甲肟是由日本武田药品工业株式会社开发、生产的半合成广谱抗生素，1996年进入中国市场。
本品为第三代半合成的头孢菌素类广谱抗生素,通过抑制细菌细胞壁的生物合成而达到杀菌作用。本品对革兰阴性菌具有强抗菌作用是由于其具有良好的细胞外膜通透性，对β-内酰胺酶稳定,且对青霉素结合蛋白(PBPs)1A、1B和3的亲和力强,从而对细胞壁粘肽交联形成具有较强的阻碍作用。
体外试验表明,本品对革兰阳性菌和阴性菌均有作用。对革兰阳性菌的抗菌力，以化脓性链球菌和肺炎链球菌而论，作用强于头孢替胺(CTM)和头孢唑啉 (CEZ)。对消化球菌属、消化链球菌属显示有强抗菌力。对革兰阴性菌的抗菌力，以大肠杆菌和肺炎杆菌而论，稍强于CTM，远强于CEZ。对流感杆菌、变形杆菌属、粘质沙雷氏杆菌，枸橼酸杆菌属、肠道菌属的抗菌力比CTM强，远比CEZ强。另外对拟杆菌属也显示有强抗菌力。
本品适用于头孢甲肟敏感的链球菌属{肠球菌除外}、肺炎链球菌、消化球菌属、消化链球菌属、大肠杆菌、柠檬酸杆菌属、克雷白菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、变形菌属、流感嗜血杆菌、拟杆菌属等引起的感染，如：肺炎、支气管炎、肺脓肿、肾孟肾炎、膀胱炎、子宫内膜炎、胆囊炎、肝脓肿、腹膜炎等。
盐酸头孢甲肟溶解性差，在水及葡萄糖、氯化钠等溶液中微溶，制剂中加入了助溶剂碳酸钠，但溶解性仍然很差，临床应用中溶解困难，一般需要10-20分钟才能完全溶解。这就使得溶解过程中降解杂质增加，形成高分子杂质，增加临床上的过敏反应，严重者可引起休克、死亡，直接威胁患者的生命；且未完全溶解的微粒进入人体后，能够形成血栓，严重者可危及人的生命安全。
因此，制成快速溶解、质量稳定且高分子杂质(聚合物)含量低的盐酸头孢甲肟产品，保障临床用药的安全性和有效性，具有十分重要的意义。
技术实现要素：
基于上述原因，我们研究发现一种新的制备方法，该方法采用：取7-ACA，与AE活性酯混合，加入三乙胺，搅拌后，用盐酸调节pH至2.0-2.5，过滤，干燥，得到盐酸头孢甲肟粗品；盐酸头孢甲肟粗品加水后，常温加入L-谷氨酸，升温后加入二乙醇胺，降温后加入乙酸乙酯，获得一种新的盐酸头孢甲肟原料，该盐酸头孢甲肟具有更好的的稳定性，减少高分子杂质的生成。本发明方法得到的盐酸头孢甲肟中高分子杂质含量小于0.1％，5秒钟之内完全溶解。
本发明通过技术方案如下：
一种盐酸头孢甲肟原料的制备方法，采用7-ACT为原料，与AE活性酯进行反应，在盐酸调节下，生成盐酸头孢甲肟粗品；再在常温加入L-谷氨酸，升温后加入二乙醇胺，降温后加入乙酸乙酯，获得一种新的盐酸头孢甲肟原料。
其中7-ACT与AE活性酯的重量比为1：1.2。
其中盐酸调节pH至2.0-2.5。
其中盐酸头孢甲肟粗品的制备方法为：取7-氨基-3-[1-甲基-1H-四唑-5-硫甲基]-头孢-3-烯-4-羧酸(7-ACT)溶于二氯甲烷中，冰水浴冷却至5℃左右，加入AE活性酯，然后加入三乙胺，搅拌4小时，用水萃取两次，合并水相，加入活性炭，搅拌脱色30分钟，抽滤，用水洗涤碳饼，合并水相。滤液用10％盐酸调至pH2.5，析出白色固体，搅拌养晶3小时，过滤。用无水乙醇洗涤二遍，抽干。低于40℃减压干燥，至水分低于1.0％，得盐酸头孢甲肟粗品。
其中盐酸头孢甲肟原料的制备方法为：取盐酸头孢甲肟粗品，加注射用水，加入L-谷氨酸，升温至35℃-40℃，加入二乙醇胺，降温至5℃-10℃，加入乙酸乙酯，5℃-10℃静置8-12小时，乙酸乙酯层40℃减压干燥，得到盐酸头孢甲肟原料。
一种盐酸头孢甲肟原料的制备方法：
第一步：取7-氨基-3-[1-甲基-1H-四唑-5-硫甲基]-头孢-3-烯-4-羧酸(7-ACT)溶于二氯甲烷中，冰水浴冷却至5℃左右，加入AE活性酯，然后加入三乙胺，搅拌4小时，用水萃取两次，合并水相，加入活性炭，搅拌脱色30分钟，抽滤，用水洗涤碳饼，合并水相。滤液用10％盐酸调至pH2.5，析出白色固体，搅拌养晶3小时，过滤。用无水乙醇洗涤二遍，抽干。低于40℃减压干燥，至水分低于1.0％，得盐酸头孢甲肟粗品。其中7-ACT与AE活性酯的 重量比为1：1.2。
第二步：取盐酸头孢甲肟粗品，加注射用水，加入L-谷氨酸，升温至35℃-40℃，加入二乙醇胺，降温至5℃-10℃，加入乙酸乙酯，5℃-10℃静置8-12小时，乙酸乙酯层40℃减压干燥，得到盐酸头孢甲肟原料。
具体实施方式
实施例1：
取7-氨基-3-[1-甲基-1H-四唑-5-硫甲基]-头孢-3-烯-4-羧酸(7-ACT)100g，二氯甲烷1000ml，冰水浴冷却至5℃左右，加入AE活性酯120g，然后加入三乙胺100ml，继续搅拌4小时，用水500ml萃取两次，合并水相，加入10克活性炭，搅拌脱色30分钟，抽滤，用200ml水洗涤碳饼，合并水相。滤液用10％盐酸调至pH2.5，析出白色固体，搅拌养晶3小时，过滤。用500ml乙醇洗涤二遍，抽干。低于40度减压干燥10小时，至水分低于1.0％，得盐酸头孢甲肟粗品82.5克。
第二步：取盐酸头孢甲肟粗品50g，加注射用水200mL，加入L-谷氨酸5g，升温至38℃，加入二乙醇胺1g，降温至8℃，加入乙酸乙酯100mL，8℃静置10小时，乙酸乙酯层40℃减压干燥，得到盐酸头孢甲肟原料48.3g。色级为黄色3号，水分0.8％，纯度98.9％，高分子杂质0.07％。取1.0g盐酸头孢甲肟产品，加入10ml注射用水，5秒钟之内完全溶解。
实施例2：
取7-氨基-3-[1-甲基-1H-四唑-5-硫甲基]-头孢-3-烯-4-羧酸(7-ACT)100g，二氯甲烷1000ml，冰水浴冷却至5℃左右，加入AE活性酯120g，然后加入三乙胺100ml，继续搅拌4小时，用水500ml萃取两次，合并水相，加入10克活性炭，搅拌脱色30分钟，抽滤，用200ml水洗涤碳饼，合并水相。滤液用10％ 盐酸调至pH2.5，析出白色固体，搅拌养晶3小时，过滤。用500ml乙醇洗涤二遍，抽干。低于40度减压干燥，至水分低于1.0％，得盐酸头孢甲肟粗品83.2克。
第二步：取盐酸头孢甲肟粗品50g，加注射用水200mL，加入L-谷氨酸5g，升温至35℃，加入二乙醇胺1g，降温至5℃，加入乙酸乙酯100mL，5℃静置8小时，乙酸乙酯层40℃减压干燥，得到盐酸头孢甲肟原料48.0g。色级为黄色3号，水分0.75％，纯度99.1％，高分子杂质0.06％。取1.0g的盐酸头孢甲肟产品，加入10ml 0.9％氯化钠注射液，5秒钟之内完全溶解。
实施例3：
取7-氨基-3-[1-甲基-1H-四唑-5-硫甲基]-头孢-3-烯-4-羧酸(7-ACT)100g，二氯甲烷1000ml，冰水浴冷却至5℃左右，加入AE活性酯120g，然后加入三乙胺100ml，继续搅拌4小时，用水500ml萃取两次，合并水相，加入10g活性炭，搅拌脱色30分钟，抽滤，用200ml水洗涤碳饼，合并水相。滤液用10％盐酸调至pH2.5，析出白色固体，搅拌养晶3小时，过滤。用500ml乙醇洗涤二遍，抽干。低于40度减压干燥，至水分低于1.0％，得盐酸头孢甲肟粗品82.1克。
第二步：取盐酸头孢甲肟粗品50g，加注射用水200mL，加入L-谷氨酸5g，升温至38℃，加入二乙醇胺1g，降温至8℃，加入乙酸乙酯100mL，8℃静置10小时，乙酸乙酯层40℃减压干燥，得到盐酸头孢甲肟原料48.3g。色级为黄色3号，水分0.8％，纯度99.0％，高分子杂质0.06％。取1.0g，加入10ml 5％葡萄糖注射液，5秒钟之内完全溶解。
【含量测定】
照高效液相色谱法(中国药典2015年版二部附录V D)测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水-冰醋酸-乙腈(85:1.7:15)为流动相；检测波长为254nm。取盐酸头孢甲肟对照品10mg，加1mol/L氢氧化钠溶液0.5ml，放置30分钟，加1mol/L盐酸溶液0.5ml中和，加pH6.8磷酸盐缓冲液2ml使溶解，用流动相稀释制成每1ml中约含40μg的溶液，取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，头孢甲肟主峰的保留时间约为10分钟，与相邻分解产物峰(相对保留时间约为0.77)的分离度应不小于4.5。
测定法取本品约20mg，精密称定，加上述pH6.8磷酸盐缓冲液4ml使溶解，用流动相定量稀释制成每1ml中约含40μg的溶液，精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图；另取盐酸头孢甲肟对照品，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。
盐酸头孢甲肟高分子杂质(聚合物)检测方法为：
照分子排阻色谱法(中国药典2015版二部附录ⅤH)测定。
色谱条件与系统适用性试验用葡聚糖凝胶G-10(40～120μm)为填充剂；以pH7.0的0.1mol/L磷酸盐缓冲液[取磷酸氢二钠21.85g和磷酸二氢钠5.38g，加水1000ml溶解，调节pH值为7.0]为流动相A，流动相B为水，流速为每分钟1.0ml，检测波长为254nm。分别以流动相A、B为流动相，取0.3mg/ml蓝色葡聚糖2000溶液200μl，注入液相色谱仪，理论板数按蓝色葡聚糖2000峰计算均不低于700，拖尾因子均应小于2.0。在两种流动相蓝色葡聚糖2000峰保留时间的比值应在0.93～1.07之间，对照溶液主峰和供试品溶液中聚合物峰与相应色谱系统中蓝色葡聚糖2000峰保留时间的比值均应在0.93～1.07之间。称取供试品约0.08g置50ml量瓶中，用0.3mg/ml蓝色葡聚糖2000稀释至刻度，摇 匀，取200μl注入液相色谱仪，用流动相A进行测定，记录色谱图。高聚体的峰高与单体和高聚体之间的谷高比应大于2.0。另以流动相B为流动相，精密量取对照溶液200μl，连续进样5次，峰面积的相对标准偏差应不大于5.0％。
对照品溶液的制备取头孢甲肟对照品适量，精密称定，置50ml量瓶中，加流动相A5ml溶解后加流动相B稀释至刻度，摇匀；精密量取1ml，置50ml量瓶中，加流动相B制成每1ml中含15μg的溶液，摇匀。
测定法取供试品适量，加流动相A制成每1ml中约含头孢甲肟1.5mg的溶液，精密量取200μl注入液相色谱仪，以流动相A为流动相进行测定，记录色谱图；另精密量取对照品溶液200μl注入液相色谱仪，以流动相B为流动相，记录色谱图。按外标法以峰面积计算，含头孢甲肟聚合物以头孢甲肟计，不得过0.1％。
上述实施例获得的盐酸头孢甲肟原料均符合质量标准的其它检查项的要求。
我们对三批样品进行了加试稳定性试验，结果表明，产品质量稳定，极易溶解，说明了本发明的方法的重要意义。结果如下表：
表1 本发明方法得到的盐酸头孢甲肟稳定性